Name: radiosynthesis of 1-(2-[18f]fluoroethyl)-l-tryptophan using a one-pot, two-step protocol
Uploaded: 2021-09-21T14:45:00
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이 연구는 진단 및 연구 PET / MRI 센터와 Nemours / Alfred I. duPont Hospital for Children의 생물 의학 연구 및 방사선학과에서 지원했습니다.

주의: 프로토콜에는 방사성 물질이 포함됩니다. 방사성 물질의 추가 복용량은 암과 같은 건강에 악영향을 미칠 가능성이 비례적으로 증가 할 수 있습니다. 연구원은 뜨거운 세포 또는 납 후드에서 적절한 보호와 함께 방사성 합성 프로토콜을 안내하기 위해 '합리적으로 달성 할 수있는만큼 낮은'(ALARA) 용량 관행을 따라야합니다. 직접 접촉 시간을 최소화하고, 리드 실드를 사용하며, 방사성 합성 ?...

트립토판은 인간에게 필수적인 아미노산입니다. 그것은 기분,인지 기능 및 행동의 조절에 중요한 역할을합니다. 방사성 표지된 트립토판 유도체, 특히 탄소-11-표지된 [11C]AMT는 세로토닌 합성38,39 매핑, 종양 검출 및 등급화40, 간질 수술 안내41,42, 당뇨병에서의 치료 반응 평가43에서의 독특한...

인간에서 트립토판은 매일식이 요법의 필수 구성 요소입니다. 트립토판은 주로 키누레닌 경로(KP)를 통해 대사된다. KP는 2개의 속도 제한 효소인 인돌아민 2, 3-디옥시게나제(IDO) 및 트립토판 2,3-디옥시게나제(TDO)에 의해 촉매된다. 트립토판의 95% 이상이 키뉴레닌과 그 하류 대사산물로 전환되어 궁극적으로 세포 에너지 전달에 필수적인 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오타이드를 생성합니다. KP는 면역 체계의 핵심 조절자이며 신경 가소성 및 신경 독성 효과의 중요한 조절자입니다1,2. 비정상적인 트립토판 신진 대사는 다양한 신경 학적, 종양학적, 정신과 적 및 대사 장애에 연루되어 있습니다. 따라서, 방사성 표지된 트립토판 유사체는 임상 조사에 광범위하게 사용되어 왔다. 가장 흔한 두 가지 임상적으로 조사된 트립토판 방사성 추적제는 11C-α-메틸-L-트립토판 ([11C]AMT) 및 11C-5-하이드록시트립토판 (11C-5-HTP)3이다.
1990년대에 11C-5-HTP는 세로토닌 분비 신경내분비 종양4을 시각화하고 전이성 호르몬 불응성 전립선 선암종5의 치료를 진단 및 모니터링하는 데 사용되었습니다. 나중에, 그것은 내분비 췌장에서 세로토닌성 시스템의 정량화를위한 이미징 도구로서 사용되었다6. 11 C-5-HTP는 또한 포털 내 췌도 이식 및 제 2 형 당뇨병에서 생존 가능한 섬의 비침습적 검출을위한 유망한 추적자였습니다7,8. 지난 20년 동안 많은 방사성 표지된 아미노산이 임상 조사로 진행되었습니다9,10. 특히, 탄소-11-표지된 트립토판 유사체[11C]AMT는 뇌 세로토닌 합성11,12,13,14을 매핑하고 간질 초점, 간질성 종양, 결핵 경화증 복합체, 신경교종 및 유방암15,16,17,18,19,20을 국소화하는 데 광범위한 주목을 받고 있다. ,21,22,23,24,25,26. [11C] AMT는 또한 소아27의 다양한 저등급 및 고등급 종양에서 높은 흡수율을 보입니다. 더욱이, 인간 피험자에서 [11C]AMT의 동역학적 추적자 분석은 다양한 종양을 분화 및 등급화하고 방사선 유발 조직 손상으로부터 신경교종을 분화시키는데 사용되어 왔다15. [11C] AMT 유도 영상은 뇌 질환에서 상당한 임상적 이점을 보여준다3,25. 그러나 탄소-11의 반감기(20분)가 짧고 방사성합성 절차가 힘들기 때문에 [11C]AMT 사용은 현장 사이클로트론과 방사선 화학 시설을 갖춘 소수의 PET 센터로 제한됩니다.
불소-18은 탄소-11의 20분 반감기와 비교하여 109.8분의 유리한 반감기를 갖는다. 점점 더 많은 노력이 트립토판 대사를 위한 불소-18-표지된 방사성 추적제의 개발에 집중되어 왔다3,28. 총 15개의 독특한 불소-18 방사성 표지된 트립토판 방사성추적기가 이종이식편에서의 방사성 표지, 수송 메커니즘, 시험관내 및 생체내 안정성, 생체분포 및 종양 흡수 측면에서 보고되었다. 그러나, 4-, 5-, 및 6-[18F]플루오로트립토판을 포함하는 몇몇 추적자에 대해 신속한 생체내 탈플루오르화가 관찰되었고, 이는 추가의 임상 번역을 배제하였다29. 5-[18F]플루오로-α-메틸트립토판 (5-[18F]FAMT) 및 1-(2-[18F]플루오로에틸)-L-트립토판 (L-[18F]FETrp, (S)-2-아미노-3-(1-(2-[18F]플루오로에틸)-1H-인돌-3-일)프로판산, 분자량 249.28 g / mole)은 동물 모델에서 유리한 생체 내 동역학과 능가 할 수있는 큰 잠재력을 가진 가장 유망한 두 가지 방사선 추적기입니다 [11 C]탈조절된 트립토판 대사를 통한 임상 상태의 평가를 위한 AMT28. 5-[18F]FAMT는 면역저하된 마우스의 IDO1 양성 종양 이종이식편에서 높은 흡수율을 나타냈으며, [11C]AMT28,30보다 KP를 영상화하는 데 더 특이적이다. 그러나, 5-[18F]FAMT의 생체내 안정성은 tracer30의 주입 후 30분을 넘어 보고된 생체내 탈불소화 데이터가 없기 때문에 잠재적인 관심사로 남아있다.
유전자 조작된 수질모세포종 마우스 모델의 전임상 연구에 따르면 18F-플루오로데옥시글루코스(18F-FDG)와 비교했을 때, L-[18F]FETrp는 뇌종양에서 높은 축적, 무시할 수 있는 생체내 탈불소화, 낮은 배경 흡수를 보이며, 우수한 표적 대 비표적 비율31,32를 입증하였다. 마우스에서의 방사선 선량측정 연구는 L-[18F]FETrp가 임상 18F-FDG PET tracer33보다 약 20% 더 낮은 유리한 선량계 노출을 가졌다는 것을 나타냈다. 다른 연구자의 연구 결과와 일치하여, 전임상 연구 데이터는 간질, 신경 종양학, 자폐증 및 결핵 경화증과 같은 뇌 장애를 가진 인간의 비정상적인 트립토판 대사 조사를 위해 L-[18F]FETrp의 임상 번역을 뒷받침하는 실질적인 증거를 제공합니다.28,31,32,33,34,35,36 . 트립토판 대사에 대해 가장 널리 조사된 세 가지 트레이서, 11C-5-HTP, [11C]AMT, 및 L-[18F]FETrp 사이의 전반적인 비교가 표 1에 제시되어 있다. 11C-5-HTP와 [11C]AMT 모두 반감기가 짧고 방사성 표지 절차가 번거롭다. 하나의 포트, 두 단계 접근법을 사용하는 L-[18F]FETrp의 방사성 합성을 위한 프로토콜이 여기에 기술되어 있다. 이 프로토콜은 소량의 방사성 표지 전구체, 소량의 반응 용매, 독성 K222의 낮은 로딩 및 정제 및 쉬운 제형을위한 환경 양성 및 주사 가능한 이동상의 사용을 특징으로합니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>[18F]Fluoride in [18O]H2O</td>
			<td>PETNET Solutions Inc.</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4,7,13,16,21,24-hexaoxa-1,10-diazabicyclo[8.8.8]hexacosane</td>
			<td>ACROS</td>
			<td>291950010</td>
			<td>Kryptofix 222 or K222, 98%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetic acid</td>
			<td>ACROS</td>
			<td>222142500</td>
			<td>99.8%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>271004</td>
			<td>anhydrous, 99.8%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agilent 1260 HPLC system</td>
			<td>Agilent Technologies</td>
			<td>Agilent 1260</td>
			<td>Agilent 1260 series</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analytcial chiral HPLC column</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>12024AST</td>
			<td>Astec CHIROBIOTIC T, 25 cm &#215; 4.6 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbon dioxide, 60 LBS</td>
			<td>Airgas</td>
			<td>REFR744R200S</td>
			<td>99.99%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-FETrp standard reference</td>
			<td>Affinity Research Chemicals Inc</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Empty sterile vial</td>
			<td>Jubilant HollisterStier</td>
			<td>7515</td>
			<td>20 mm closure, 10 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Decon Labs</td>
			<td>2716</td>
			<td>200 proof, USP grade. &#8805;99.9%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fisherbrand 13 mm Syringe Filter, 0.22 &#181;m, PVDF, sterile</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>09-720-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrochloric acid</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>30721</td>
			<td>&#8805;37%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropanol</td>
			<td>Decon Labs</td>
			<td>8316</td>
			<td>70%, sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-[18F]FETrp radiolabeling precursor</td>
			<td>Affinity Research Chemicals Inc</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-FETrp standard reference</td>
			<td>Affinity Research Chemicals Inc</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light C8 cartridge</td>
			<td>Waters</td>
			<td>WAT036770</td>
			<td>Sep-Pak&#160; C8 plus light cartridge</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle, 20 G x 1</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>305175</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle, 20 G x 1 &#189;</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>305176</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle, 21 G x 2</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>305129</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral aluminum oxide</td>
			<td>Waters</td>
			<td>WAT023561</td>
			<td>Sep-Pak alumina N plus light</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon membrane (0.20 &#181;m )</td>
			<td>MilliPore</td>
			<td>GNWP04700</td>
			<td>47 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pall Acrodisc 25 mm syringe sterile filter</td>
			<td>Pall Corporation</td>
			<td>4907</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PETCHEM radiochemistry synthesis system</td>
			<td>PETCHEM Solutions Inc. Pinckney, MI</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Radiosynthesizer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pH strips 2.0 - 9.0</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1.09584.0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium carbonate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>367877</td>
			<td>99.995%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quaternary methylammonium light cartridge</td>
			<td>Waters</td>
			<td>186004051</td>
			<td>Sep-Pak QMA light</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Semi-preparative C18 HPLC column</td>
			<td>Phenomenex</td>
			<td>00D-4253-N0</td>
			<td>100 &#215; 10 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Semi-preparative chiral HPLC column</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>12034AST</td>
			<td>Astec CHIROBIOTIC T, 25 cm &#215; 10 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride injection 23.4%</td>
			<td>APP Pharmaceutical, LLC</td>
			<td>18730</td>
			<td>USP grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloridei injection 0.9%</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>NDC 0409-4888-10</td>
			<td>USP grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydroxide</td>
			<td>Honeywell</td>
			<td>306576</td>
			<td>99.99%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spinal needle, 20 G x 3 &#189;</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>405182</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile alcohol prep pads</td>
			<td>BioMed Resource Inc.</td>
			<td>PC661</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile empty vials, 2 mL</td>
			<td>Hollister Stier</td>
			<td>7505ZA</td>
			<td>13 mm closure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile empty vials, 30 mL</td>
			<td>Jubilant HollisterStier</td>
			<td>7520ZA</td>
			<td>20 mm closure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe PP/PE, 3 mL, Luer Lock</td>
			<td>Air-Tite</td>
			<td>4020-X00V0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe PP/PE, 5 mL, Luer Lock</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>309646</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe,&#160; PP/PE, 10 mL, NORM-JECT</td>
			<td>Air-Tite</td>
			<td>4100-000V0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, 1 mL, Luer Slip</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, 3 mL, Luer-Lock</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>309657</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra high purity argon</td>
			<td>Airgas</td>
			<td>AR UHP300</td>
			<td>99.999%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrapure water</td>
			<td>MilliporeSigma</td>
			<td>ZRQSVP300</td>
			<td>Direct-Q 3 tap to pure and ultrapure water purification system</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

radiosynthesis of 1-(2-[18f]fluoroethyl)-l-tryptophan using a one-pot, two-step protocol

키누레닌 경로 (KP)는 트립토판 대사를위한 주요 경로입니다. 증거는 KP의 대사 산물이 면역 조절, 신경 조절 및 신경 독성 효과로 인해 종양 증식, 간질, 신경 퇴행성 질환 및 정신 질환에 중요한 역할을한다는 것을 강력하게 시사합니다. 트립토판 대사를 매핑하기 위해 가장 광범위하게 사용되는 양전자 방출 단층 촬영 (PET) 제제 인 α-[11C]methyl-L-tryptophan ([11C]AMT)은 힘든 방사 합성 절차로 20 분의 짧은 반감기를 가지고 있습니다. 현장 사이클로트론은 [11C]AMT를 방사성합성하는 데 필요합니다. 제한된 수의 센터 만이 전임상 연구 및 임상 조사를 위해 [11C] AMT를 생산합니다. 따라서, 더 긴 반감기를 가지며, 생체내 동역학에 유리하고, 자동화가 용이한 대체 영상화제의 개발이 절실히 요구된다. 불소-18-표지된 트립토판 유사체인 1-(2-[18F]플루오로에틸)-L-트립토판의 유용성 및 가치는 세포주 유래 이종이식편, 환자 유래 이종이식편 및 형질전환 종양 모델에서의 전임상 적용에서 보고되었다.
이 논문은 1-포트, 2-스텝 전략을 사용하여 1-(2-[18F]플루오로에틸)-L-트립토판의 방사성 합성을 위한 프로토콜을 제시한다. 이 프로토콜을 사용하여, 방사성 추적기는 20 ± 5 % (합성 끝에서 감쇠 보정, n > 20) 방사성 화학 수율로 생성 될 수 있으며 방사성 화학적 순도와 거울상 이성질체 초과 모두 95 % 이상입니다. 이 프로토콜은 각 단계에서 0.5 mL 이하의 반응 용매를 가진 작은 전구체 양, 잠재적으로 독성이 있는 4,7,13,16,21,24-헥사옥사-1,10-디아자비시클로[8.8.8]헥사코산(K222)의 낮은 로딩, 정제를 위한 환경 양성 및 주사 가능한 이동상을 특징으로 한다. 상기 프로토콜은 상용화된 모듈에서 임상 조사를 위해 1-(2-[18F]플루오로에틸)-L-트립토판을 생산하도록 용이하게 구성될 수 있다.

반응식은 도 1에 나타내었다. 방사성 표지는 다음의 두 단계를 포함한다: 1) 토실레이트 방사성 표지 전구체와 [18F]플루오라이드의 반응은 18F 표지된 중간체를 제공하고, 2) 중간체에서 tert-부틸옥시카르보닐 및 tert-부틸 보호기의 탈보호는 최종 생성물 L-[18F]FETrp를 제공한다. 두 반응 단계 모두 100°C에서 10분 동안 계속된다.
<p class="jove...

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Radiosynthesis of 1-2-[18F]Fluoroethyl-L-Tryptophan using a One-pot, Two-step Protocol

여기에서는 트립토판 대사를 연구하기위한 양전자 방출 단층 촬영 이미징 제 인 1-(2-[18F]Fluoroethyl)-L-트립토판의 방사 합성을 설명하며, 우수한 방사 화학적 수율, 높은 거울상 이성질체 과잉 및 높은 신뢰성을 갖춘 방사선 화학 합성 시스템에서 1 포트, 2 단계 전략을 사용합니다.

1-(2-[18F]플루오로에틸)-L-트립토판의 방사 합성 1-포트, 2단계 프로토콜 사용

The kynurenine pathway (KP) is a primary route for tryptophan metabolism. Evidence strongly suggests that metabolites of the KP play a vital role in tumor ...

이 프로토콜의 전반적인 목표는 한 포트, 두 단계 접근 방식으로 F18 방사성 표지 트립토판 추적기를 방사성 합성하는 것입니다. 방사성 추적기는 트립토판 대사를 이미징하기위한 광범위한 응용 프로그램을 찾을 수 있습니다. 이 기술은 반감기가 길고 반응 전구체가 적으며 반응 부피가 적고 정화를 위해 환경 적으로 양성 인 방사성 동위원소를 사용합니다.방사선 추적기는 간질, 신경 정신병 장애 및 신경 종양학을 포함하나 이에 한정되지 않는 뇌에 영향을 미치는 다양한 장애의 진단에 사용될 수 있다. 이 방법은 다른 상업적으로 이용가능한 방사성 표지 모듈에 적용될 수 있다. 일단 F18 불소 용액이 수신되면, 표면의 리드 박스를 측량하여 시작하여 1 미터의 거리에서 최대 방사선 피폭률을 기록하십시오.배송 상자가 오염되지 않았는지 확인하기 위해 닦아 테스트를 수행 한 후 F18 불소 복용량과 시간을 기록하십시오. F18 불소 용액을 방사선 화학 합성 시스템으로 옮깁니다. 아르곤 라인을 짧은 바늘로 연결하고 긴 바늘로 F18 불소 이송 라인을 F18 불소 바이알에 연결하십시오.그런 다음 핫 셀 유리 도어와 리드 도어를 닫으십시오. 아르곤 공급을 클릭하여 아르곤 공급 라인을 켭니다. 아르곤 압력을 높이고 F18 플루오라이드 푸시 라인을 켜서 QMA 라이트 카트리지를 통해 수성 F18 플루오라이드를 밀어냅니다.모든 방사능이 QMA 라이트 카트리지에 갇히고 방사능 검출기 판독이 안정되면 아르곤 압력을 증가시키고 카트리지를 통해 아르곤을 다섯 분 동안 불어 넣어 과도한 물을 제거하십시오. F18 불소 추진 라인을 끈 후 아르곤 압력을 0으로 낮추고 6포트 두 위치 밸브를 F18 불소 포획 위치에서 용출 위치로 전환합니다. 반응 바이알을 열고, 입력 MVP 위치 하나의 아르곤 라인을 켜고, 입력 MVP 위치 하나의 바이알에 K222 및 탄산칼륨 용액을 QMA 라이트 카트리지를 통해 하나의 바이알로 밀어 넣어 방사능을 반응 바이알로 용출시킨다.F18 불소 용출 위치를 트래핑 위치로 전환합니다. Heat 버튼을 클릭하여 반응기를 섭씨 110도에서 가열하고 반응기에 연결되는 출력 MVP 위치 네 아르곤 라인을 켜고 용매를 증발시켜 출력 MVP 위치 네 바이알로 만듭니다. 냉각(Cool) 버튼을 클릭하여 압축된 이산화탄소로 반응기를 실온으로 냉각시킵니다.스위핑 라인을 끄고 입력 MVP 위치 하나를 두 위치로 전환하고 바이알 두 개에 무수 아세토 니트릴을 추가하십시오. 스위핑 라인과 히터를 두 번 켜서 섭씨 110도에서 F18 불소를 공비로 건조시킵니다. 반응기가 실온에 도달하면 스위핑 라인을 끄고 입력 MVP 위치 두 개를 세 번째 위치로 전환한 다음 바이알 셋에 토실레이트 방사성 표지 전구체를 추가합니다.반응기를 닫고 반응 혼합물을 섭씨 100도에서 10분 동안 가열한다. 반응 용매를 증발시키려면 반응기가 냉각되면 스위핑 라인을 켜고 섭씨 100도에서 반응 용매를 증발시킵니다. 원자로가 냉각되면 스위핑 라인을 끄고 입력 MVP 위치 세 개를 네 위치로 전환합니다.염산 아세토니트릴 혼합물이 첨가되면, 반응을 섭씨 100도에서 10분 동안 가열하여 방사성 표지 전구체 내의 tert-부틸 및 tert-부틸옥시카르보닐 보호기를 탈보호한다. 반응을 중화시키기 위해, 반응기가 실온에 도달하면, 입력 MVP 위치 네 개를 다섯 위치로 전환하고 두 몰 수산화나트륨을 반응 혼합물에 첨가하고 입력 MVP 아르곤 라인을 끕니다. 다음으로, 출력 MVP의 F 버튼을 클릭하여 출력 MVP를 배출 위치 네 개에서 다섯 번째 위치로 전환한 다음 입력 MVP의 F 버튼을 클릭하여 입력 MVP를 다섯 위치에서 여섯 위치로 전환하여 반응 혼합물을 중간 파일로 전송하기 시작합니다.출력 MVP 아르곤 라인을 켠 후, 적층된 중성 산화알루미늄 및 C8 카트리지를 통해 반응 혼합물을 HPLC 샘플 루프 전에 설치된 중간 바이알로 밀어 넣습니다. 반응기를 헹구기 위해, 출력 MVP 위치 다섯 개를 여섯 위치로 전환하고, 반응 바이알, 카트리지 및 중간 바이알을 통해 출력 MVP 위치 여섯 개의 바이알에서 헹굼 용액을 연속적으로 밀어낸다. 다음으로, HPLC 루프를 주입 위치에서 부하 위치로 전환하고 입력 MVP 아르곤 라인을 켜서 혼합물의 정제를 시작하십시오.혼합물이 다섯 밀리리터 HPLC 루프에로드되면 로드 버튼을 주입으로 전환하고 HPLC 주입을 클릭하여 분당 세 밀리리터의 유속으로 HPLC 크로마토그램을 시작한 다음 HPLC 모니터 버튼을 클릭하여 실시간 HPLC 크로마토그램에 액세스합니다. 전환 MVP 버튼을 클릭하여 약 12분에 표적 HPLC 분획을 짧은 C18 컬럼으로 전환시킨다. 표적 방사능이 C18 컬럼에서 수집된 후, 네 포트 두 위치 전환 밸브를 폐기물 수집 위치로 전환하고, 6분 동안 분당 네 밀리리터의 속도로 키랄 컬럼을 플러시하여 마이너 D F18 FETrp 거울상이성질체 및 기타 자외선 불순물을 제거하였다.전환 MVP 버튼을 클릭하여 HPLC 이동상을 분당 세 밀리리터에서 하나씩 제형 MVP 위치로 되돌립니다. 이동상이 키랄 컬럼 및 C18 컬럼을 통과하여 C18 컬럼에 잔류된 L-F18 FETrp를 정제하는 것을 관찰한다. 대략 32 내지 34분에, 표적 분획을 제형 MVP 위치 두 바이알 내로 수집한다.그런 다음 MVP 제형을 두 바이알 용액을 전달 라인 및 멸균 필터를 통해 최종 용량 바이알 내로 밀어 넣습니다. 멸균 필터를 제거한 후 최종 투여량 활성 및 부피를 분석한다. 시스템을 초순수로 세척한 다음 세척 당 최소 15분 동안 분당 네 밀리리터의 유속으로 에탄올을 세척합니다.HPLC 펌프 및 PLC 상자를 끄고, 프로그램을 닫고, 압축 된 항공사, 아르곤 라인, 이산화탄소 라인 및 모듈의 주 전원을 종료하십시오. 최종 복용량의 약 0.1 밀리리터를 QC 바이알의 0.2 밀리리터 삽입물에 철회하십시오. 부분 시퀀스 프로그램이 텍스트 원고에 설명되는 대로 핫 샘플을 실행하십시오.거울상이성질체 과잉 값 및 몰 활성에서 화학적 및 방사화학적 순도를 계산함으로써 QC 데이터를 분석한다. pH 값을 결정한 후 모든 검사 결과가 허용 범위를 통과하면 용량을 해제하십시오. QC에 대한 대표적인 HPLC 크로마토그램이 도시되어 있다.프로그램의 10분에서 공극 부피 사이의 미미한 피크가 빈 크로마토그램에서 검출되었다. 방사성표지된 표준 참조 L-플루오로에틸-트리토판은 그의 D 대응물의 표준 기준으로부터 잘 분리된 단일 이성질체의 존재를 보여주었다. L-F18 트립토판의 최종 용량은 높은 화학적 순도와 방사화학적 순도를 보였다.최대 8 시간 동안 최고 용량 농도에서 최종 제품의 안정성 테스트는 L-F18 트립토판이 화학적 순도, 방사성 화학 순도, 거울상 이성질체 과잉 및 pH 값 측면에서 안정적이라는 것을 보여주었습니다. 95 % 이상의 화학 및 방사성 화학 순도는이 프로토콜을 사용하여 달성되었습니다. 두 개의 열이 추적기 정화에 사용됩니다.화학 불순물을 제거하기 위해 C18 컬럼으로 전환하는 것을 잊지 마십시오. 우리는이 방법을 불소 18 표지 트립토판 방사성 추적기의 임상 생산에 신속하게 적용 할 수 있습니다.

Research

JoVE Journal

Chemistry

Radiosynthesis of 1-(2-[18F]Fluoroethyl)-L-Tryptophan using a One-pot, Two-step Protocol

A Simple and Rapid Protocol for Measuring Neutral Lipids in Algal Cells Using Fluorescence

형광을 사용하여 조류 세포에서 중성 지질을 측정하기위한 간단하고 빠른 프로토콜

Algae are considered excellent candidates for renewable fuel sources due to their natural lipid storage capabilities. Robust monitoring of algal ...

연구

화학

The Bioconjugation and Radiosynthesis of 89Zr-DFO-labeled Antibodies

The Bioconjugation and Radiosynthesis of 89Zr-DFO-labeled Antibodies

바이오 콘쥬 게이션과의 Radiosynthesis<sup&gt; 89</sup&gt; ZR-DFO 표지 항체

The exceptional affinity, specificity, and selectivity of antibodies make them extraordinarily attractive vectors for tumor-targeted PET ...

A Protocol for the Production of Gliadin-cyanoacrylate Nanoparticles for Hydrophilic Coating

친수성 코팅 글 리아 딘 - 시아 노 아크릴 레이트 나노 입자의 생산을위한 프로토콜

This article presents a protocol for the production of protein-based nanoparticles that changes the hydrophobic surface to hydrophilic by a simple spray ...

A Protocol for Safe Lithiation Reactions Using Organolithium Reagents

유기 리튬 시약을 사용하여 안전 리튬 화의 반응을위한 프로토콜

Organolithium reagents are powerful tools in the synthetic chemist&#39;s toolbox. However, the extreme pyrophoric nature of the most reactive reagents ...

An Optimized Protocol for the Efficient Radiolabeling of Gold Nanoparticles by Using a 125I-labeled Azide Prosthetic Group

An Optimized Protocol for the Efficient Radiolabeling of Gold Nanoparticles by Using a 125I-labeled Azide Prosthetic Group

를 사용하여 금 나노 입자의 효율적인 방사성 표지를위한 최적화 된 프로토콜<sup&gt; (125)</sup&gt; I-표시 아 지드 보철 그룹

Here, we demonstrate a detailed protocol for the radiosynthesis of a 125I-labeled azide prosthetic group and its application to the efficient ...

A Protocol for Electrochemical Evaluations and State of Charge Diagnostics of a Symmetric Organic Redox Flow Battery

전기 평가 및 대칭 유기 산화 환원 흐름 배터리의 충전 진단의 상태에 대한 프로토콜

Redox flow batteries have been considered as one of the most promising stationary energy storage solutions for improving the reliability of the power grid ...

One-pot Microwave-assisted Conversion of Anomeric Nitrate-esters to Trichloroacetimidates

한 냄비 전자 렌지를 이용한 변환 Anomeric 질 산 에스테 르의 Trichloroacetimidates

The goal of the following procedure is to provide a demonstration of the one-pot conversion of a 2-azido-1-nitrate-ester to a trichloroacetimidate ...

The MPLEx Protocol for Multi-omic Analyses of Soil Samples

멀티-omic 토양 샘플의 분석을 위한 MPLEx 프로토콜

Mass spectrometry (MS)-based integrated metaproteomic, metabolomic, and lipidomic (multi-omic) studies are transforming our ability to understand and ...

Separation of Aldehydes and Reactive Ketones from Mixtures Using a Bisulfite Extraction Protocol

알 데히드 류와 Ketones 반응 황산 추출 프로토콜을 사용 하 여 혼합물에서 분리

The purification of organic compounds is an essential component of routine synthetic operations. The ability to remove contaminants into an aqueous layer ...

A Two-Step Protocol for Umpolung Functionalization of Ketones Via Enolonium Species

Enolonium 종 통해 Ketones의 Umpolung 기능화에 대 한 2 단계 프로토콜

&#945;-Functionalization of ketones via umpolung of enolates by hypervalent iodine reagents is an important concept in synthetic organic chemistry. ...