Name: radiosynthesis of 1-(2-[18f]fluoroethyl)-l-tryptophan using a one-pot, two-step protocol
Uploaded: 2021-09-21T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Radiosynthesis of 1-2-[18F]Fluoroethyl-L-Tryptophan using a One-pot, Two-step Protocol at JoVE.com

Este trabalho foi apoiado pelo Centro de Diagnóstico & Pesquisa PET/MRI, e pelos Departamentos de Pesquisa Biomédica e Radiologia do Nemours/Alfred I. duPont Hospital for Children.

ATENÇÃO: O protocolo envolve materiais radioativos. Qualquer dose adicional de materiais radioativos poderia levar a um aumento proporcional na chance de efeitos adversos à saúde, como o câncer. Os pesquisadores devem seguir as práticas de dose "tão baixas quanto razoavelmente alcançáveis" (ALARA) para orientar o protocolo de radiosíntese com proteção adequada na célula quente ou no capô do chumbo. Minimizar o tempo de contato direto, usar um escudo de chumbo e manter a distância máxima para qualquer etap...

Triptofano é um aminoácido essencial para os humanos. Desempenha um papel importante na regulação do humor, função cognitiva e comportamento. Os derivados de triptofano radiolabeled, particularmente os derivados de 11C rotulados por carbono, têm sido extensivamente estudados devido ao seu papel único no mapeamento da síntese de serotonina38,39, detecção e classificação de tumores40, orientando a cirurgia de <sup cla...

Em humanos, o triptofano é um componente essencial da dieta diária. O triptofano é principalmente metabolizado através da via kynurenine (KP). O KP é catalisado por duas enzimas limitantes de taxa, indoleamina 2, 3-dioxygenase (IDO) e triptofano 2, 3-dioxygenase (TDO). Mais de 95% do triptofano é convertido em kynurenine e seus metabólitos a jusante, gerando, em última análise, dinucleotídeo de nicotinamida adenina, essencial para a transdução de energia celular. O KP é um regulador chave do sistema imunológico e um importante regulador de neuroplasticidade e efeitos neurotóxicos1,2. O metabolismo anormal do triptofano está implicado em vários distúrbios neurológicos, oncológicos, psiquiátricos e metabólicos; portanto, os análogos de triptofano radiolabeled têm sido amplamente utilizados na investigação clínica. Os dois radiotratores triptofanos clinicamente mais procurados clinicamente são 11C-α-metil-L-triptofano ([11C]AMT) e 11C-5-hidroxitryptophan (11C-5-HTP)3.
Na década de 1990, o 11C-5-HTP foi usado para visualizar tumores neuroendócrinos que secretam serotonina4 e para diagnosticar e monitorar a terapia de adenocarcinoma prostático-refratária metastática. Posteriormente, foi utilizado como ferramenta de imagem para a quantificação do sistema serotonérgico no pâncreas endócrino6. 11 C-5-HTP também tem sido um rastreador promissor para a detecção não invasiva de ilhotas viáveis no transplante de ilhotas intraportais e diabetes tipo 27,8. Nas últimas duas décadas, muitos aminoácidos radiolabelados avançaram para a investigação clínica9,10. Em particular, o análogo triptofano com rótulo carbono 11 [11C]AMT recebeu ampla atenção para o mapeamento da síntese de serotonina cerebral11,12,13,14 e para localização de focos epilépticos, tumores epieptogênicos, complexo de esclerose tuberosa, gliomas e câncer de mama15,16,17, 18,19,20 (21,22,23,24,25,26). [11C] A AMT também tem alta absorção em vários tumores de baixo e alto grau em crianças27. Além disso, a análise do rastreador cinético de [11C]AMT em indivíduos humanos tem sido usada para diferenciar e classificar vários tumores e diferenciar glioma da lesão tecidual induzida por radiação15. [11C] A imagem guiada pela AMT mostra benefícios clínicos significativos em distúrbios cerebrais3,25. No entanto, devido à curta meia-vida de carbono-11 (20 min) e aos procedimentos laboriosos de radiosíntese, o uso [11C]AMT é restrito aos poucos centros PET com um ciclotron no local e uma instalação de radioquímica.
A flúor-18 tem uma meia-vida favorável de 109,8 min, em comparação com a meia-vida de 20 min de carbono-11. Cada vez mais, os esforços têm sido focados no desenvolvimento de radiotracers com rótulo flúor-18 para o metabolismo triptofano3,28. Um total de 15 radiofatores triptofanos de flúor únicos-18 foram relatados em termos de radiolabeling, mecanismos de transporte, estabilidade in vitro e in vivo, biodistribução e absorção de tumores em xenoenxertos. No entanto, a rápida defluorinação in vivo foi observada para vários rastreadores, incluindo 4-, 5-, e 6-[18F]fluorotryptophan, impedindo a tradução clínica posterior29. 5-[18F]Fluoro-α-metiltrofano (5-[18F]FAMT) e 1-(2-[18F]fluoroethyl)-L-triptofano (L-[18F]FETrp, também conhecido como (S)-2-amino-3-(1-(2-[18F]fluoroetila)-1S-indol-3-yl)ácido propanoico, peso molecular 249,28 g/mole), são os dois radiotracers mais promissores com cinética viva em modelos animais e grande potencial para superar [11 C]AMT para avaliação de condições clínicas com metabolismo deptofano desregulado28. 5-[18F]FAMT mostrou alta absorção em xenoenxertos tumorais ido1 positivos de camundongos imunocomprometidos e é mais específico para a imagem do KP do que [11C]AMT28,30. No entanto, a estabilidade in vivo de 5-[18F]FAMT continua sendo uma preocupação potencial, uma vez que nenhum dado de defluorização in vivo foi relatado além de 30 min após a injeção do tracer30.
Um estudo pré-clínico em um modelo de camundongos de meduloblastoma geneticamente modificado mostrou que, quando comparado com a fluorodeoxyglucose 18F-fluorodeoxyglucose (18F-FDG), L-[18F]FETrp teve alto acúmulo em tumores cerebrais, defluorina in vivo insignificante e baixa absorção de fundo, demonstrando uma proporção de alvo-não-alvo superior31,32. Estudos de dosimetria de radiação em camundongos indicaram que o L-[18F]FETrp tinha uma exposição de dosimetria favorável aproximadamente 20% menor do que o rastreador PET 18F-FDG 18F-FDG33. De acordo com os achados de outros pesquisadores, os dados pré-clínicos do estudo fornecem evidências substanciais para apoiar a tradução clínica de L-[18F]FETrp para a investigação de metabolismo anormal de triptofanos em humanos com distúrbios cerebrais como epilepsia, neuro-oncologia, autismo e esclerose tuberosa28,31,32,33,34,35,36 . Uma comparação geral entre os três rastreadores mais amplamente investigados para o metabolismo do triptofano, 11C-5-HTP, [11C]AMT e L-[18F]FETrp, é mostrada na Tabela 1. Tanto o 11C-5-HTP quanto o AMT têm um curto meio-período e procedimentos de radiolabelação trabalhosos. Um protocolo para a radiosíntese de L-[18F]FETrp usando uma abordagem de um pote e duas etapas é descrito aqui. O protocolo apresenta o uso de uma pequena quantidade de precursor de radiolabeling, um pequeno volume de solventes de reação, baixo carregamento de K222 tóxico, e uma fase móvel ambientalmente benigna e injetável para purificação e fácil formulação.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>[18F]Fluoride in [18O]H2O</td>
			<td>PETNET Solutions Inc.</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4,7,13,16,21,24-hexaoxa-1,10-diazabicyclo[8.8.8]hexacosane</td>
			<td>ACROS</td>
			<td>291950010</td>
			<td>Kryptofix 222 or K222, 98%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetic acid</td>
			<td>ACROS</td>
			<td>222142500</td>
			<td>99.8%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>271004</td>
			<td>anhydrous, 99.8%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agilent 1260 HPLC system</td>
			<td>Agilent Technologies</td>
			<td>Agilent 1260</td>
			<td>Agilent 1260 series</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analytcial chiral HPLC column</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>12024AST</td>
			<td>Astec CHIROBIOTIC T, 25 cm &#215; 4.6 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbon dioxide, 60 LBS</td>
			<td>Airgas</td>
			<td>REFR744R200S</td>
			<td>99.99%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-FETrp standard reference</td>
			<td>Affinity Research Chemicals Inc</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Empty sterile vial</td>
			<td>Jubilant HollisterStier</td>
			<td>7515</td>
			<td>20 mm closure, 10 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Decon Labs</td>
			<td>2716</td>
			<td>200 proof, USP grade. &#8805;99.9%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fisherbrand 13 mm Syringe Filter, 0.22 &#181;m, PVDF, sterile</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>09-720-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrochloric acid</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>30721</td>
			<td>&#8805;37%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropanol</td>
			<td>Decon Labs</td>
			<td>8316</td>
			<td>70%, sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-[18F]FETrp radiolabeling precursor</td>
			<td>Affinity Research Chemicals Inc</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-FETrp standard reference</td>
			<td>Affinity Research Chemicals Inc</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light C8 cartridge</td>
			<td>Waters</td>
			<td>WAT036770</td>
			<td>Sep-Pak&#160; C8 plus light cartridge</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle, 20 G x 1</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>305175</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle, 20 G x 1 &#189;</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>305176</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle, 21 G x 2</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>305129</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral aluminum oxide</td>
			<td>Waters</td>
			<td>WAT023561</td>
			<td>Sep-Pak alumina N plus light</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon membrane (0.20 &#181;m )</td>
			<td>MilliPore</td>
			<td>GNWP04700</td>
			<td>47 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pall Acrodisc 25 mm syringe sterile filter</td>
			<td>Pall Corporation</td>
			<td>4907</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PETCHEM radiochemistry synthesis system</td>
			<td>PETCHEM Solutions Inc. Pinckney, MI</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Radiosynthesizer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pH strips 2.0 - 9.0</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1.09584.0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium carbonate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>367877</td>
			<td>99.995%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quaternary methylammonium light cartridge</td>
			<td>Waters</td>
			<td>186004051</td>
			<td>Sep-Pak QMA light</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Semi-preparative C18 HPLC column</td>
			<td>Phenomenex</td>
			<td>00D-4253-N0</td>
			<td>100 &#215; 10 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Semi-preparative chiral HPLC column</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>12034AST</td>
			<td>Astec CHIROBIOTIC T, 25 cm &#215; 10 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride injection 23.4%</td>
			<td>APP Pharmaceutical, LLC</td>
			<td>18730</td>
			<td>USP grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloridei injection 0.9%</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>NDC 0409-4888-10</td>
			<td>USP grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydroxide</td>
			<td>Honeywell</td>
			<td>306576</td>
			<td>99.99%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spinal needle, 20 G x 3 &#189;</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>405182</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile alcohol prep pads</td>
			<td>BioMed Resource Inc.</td>
			<td>PC661</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile empty vials, 2 mL</td>
			<td>Hollister Stier</td>
			<td>7505ZA</td>
			<td>13 mm closure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile empty vials, 30 mL</td>
			<td>Jubilant HollisterStier</td>
			<td>7520ZA</td>
			<td>20 mm closure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe PP/PE, 3 mL, Luer Lock</td>
			<td>Air-Tite</td>
			<td>4020-X00V0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe PP/PE, 5 mL, Luer Lock</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>309646</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe,&#160; PP/PE, 10 mL, NORM-JECT</td>
			<td>Air-Tite</td>
			<td>4100-000V0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, 1 mL, Luer Slip</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, 3 mL, Luer-Lock</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>309657</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra high purity argon</td>
			<td>Airgas</td>
			<td>AR UHP300</td>
			<td>99.999%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrapure water</td>
			<td>MilliporeSigma</td>
			<td>ZRQSVP300</td>
			<td>Direct-Q 3 tap to pure and ultrapure water purification system</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

radiosynthesis of 1-(2-[18f]fluoroethyl)-l-tryptophan using a one-pot, two-step protocol

A via kynurenine (KP) é uma rota primária para o metabolismo do triptofano. Evidências sugerem fortemente que os metabólitos do KP desempenham um papel vital na proliferação de tumores, epilepsia, doenças neurodegenerativas e doenças psiquiátricas devido aos seus efeitos imunodemografados, neuro modulatórios e neurotóxicos. O agente de tomografia de emissão de pósitrons mais utilizado (PET) para mapear o metabolismo triptofano, α-[11C]metil-L-triptofano ([11C]AMT), tem uma meia-vida curta de 20 minutos com procedimentos de radiosíntese trabalhosos. Um ciclotron no local é necessário para radiosintthesize [11C]AMT. Apenas um número limitado de centros produz [11C]AMT para estudos pré-clínicos e investigações clínicas. Assim, o desenvolvimento de um agente de imagem alternativo que tenha uma meia-vida mais longa, favorável à cinética in vivo , e é fácil de automatizar é urgentemente necessário. A utilidade e o valor de 1-(2-[18F]fluoroetil)-L-triptofano, um análogo triptofano de flúor-18, foi relatado em aplicações pré-clínicas em xenoenxertos derivados de linha celular, xenoenxertos derivados do paciente e modelos de tumor transgênicos.
Este artigo apresenta um protocolo para a radiosíntese de 1-(2-[18F]fluoroetil)-L-triptofano usando uma estratégia de um pote e duas etapas. Usando este protocolo, o radiotracer pode ser produzido em um rendimento radioquímico de 20 ± 5% (decadência corrigida no final da síntese, n > 20) de produção radioquímica, com pureza radioquímica e excesso enantiomerico de mais de 95%. O protocolo apresenta uma pequena quantidade precursora com no máximo 0,5 mL de solvente de reação em cada etapa, baixa carga de 4,7,13,16,21,24-hexaoxa-1,10-diazabicicclo[8.8.8]hexacosane (K222) e uma fase móvel ambientalmente benigna e injetável para purificação. O protocolo pode ser facilmente configurado para produzir 1-(2-[18F]fluoroetil)-L-triptofano para investigação clínica em um módulo comercialmente disponível.

O esquema de reação é mostrado na Figura 1. O radiolabeling inclui os seguintes dois passos: 1) a reação do precursor de radiolatos com [18F]fluoreto fornece o intermediário 18F, e 2) deproteção dos grupos tert-butyloxycarbonycarbonyl e tert-butil-protecting grupos no intermediário oferece o produto final L-[18F]FETrp. Ambas as etapas de reação continuam a 100 °C por 10 min.
Antes de receber [18F<...

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Radiosynthesis of 1-2-[18F]Fluoroethyl-L-Tryptophan using a One-pot, Two-step Protocol

Aqui, descrevemos a radiosíntese de 1-(2-[18F]Fluoroetil)-L-triptofano, um agente de tomografia de emissão de pósitrons para estudar o metabolismo triptofano, usando uma estratégia de dois passos em um sistema de síntese radioquímica com bons rendimentos radioquímicos, alto excesso enantiomemérico e alta confiabilidade.

Radiosíntese de 1-(2-[18F]Fluoroethyl)-L-Triptofano usando um Protocolo de Dois Passos de Um pote e Duas etapas

The kynurenine pathway (KP) is a primary route for tryptophan metabolism. Evidence strongly suggests that metabolites of the KP play a vital role in tumor ...

O objetivo geral deste protocolo é radiosintthesize um rastreador de triptofano radiolabeled F18 por uma abordagem de um pote e duas etapas. O radiotracer pode encontrar uma aplicação generalizada para o metabolismo de triptofano por imagem. A técnica utiliza o radioisótopo com uma meia-vida mais longa, menos precursor de reação e menos volume de reação, e uma fase ambientalmente benigna para purificação.O radiotracer pode ser usado para o diagnóstico de vários distúrbios que afetam o cérebro, incluindo, mas não se limitando à epilepsia, distúrbios neuropsiquiátricos e neuro-oncologia. Este método pode ser aplicado a outros módulos de radiolabeling disponíveis comercialmente. Uma vez que a solução de flúor F18 é recebida, comece por levantamento da caixa de chumbo na superfície, e a partir da distância de um metro, registre as taxas máximas de exposição à radiação.Depois de realizar um teste de limpeza para garantir que a caixa de transporte não esteja contaminada, registre a dose de flúor de F18 e o tempo. Transfira a solução de flúor F18 para o sistema de síntese de radioquímica. Conecte a linha de argônio com uma agulha curta e a linha de transferência de flúor F18 com uma agulha longa ao frasco de flúor F18.Então, feche a porta de vidro da célula quente e a porta de chumbo. Ligue a linha de alimentação de argônio clicando em Argon Supply. Aumente a pressão do argônio e ligue a linha de empurrar o flúor F18 para empurrar o aquoso flúor F18 através do cartucho de luz QMA.Uma vez que toda a radioatividade esteja presa no cartucho de luz QMA, e a leitura do detector de radioatividade seja constante, aumente a pressão do argônio e exploda argônio através do cartucho por mais cinco minutos para remover o excesso de água. Depois de desligar a linha de empurrar o flúor F18, diminua a pressão do argônio para zero e mude a válvula de duas posições de seis portas da posição de captura do flúor F18 para a posição de eluição. Abra o frasco de reação, ligue a posição MVP de entrada uma linha de argônio, e empurre a solução de carbonato K222 e potássio para a posição MVP de entrada um frasco através do cartucho de luz QMA para elute a radioatividade no frasco de reação.Mude a posição de eluição do flúor F18 para a posição de trapping. Clique no botão Heat para aquecer o reator a 110 graus Celsius, ligue a saída da linha de argon de posição MVP-quatro que se conecta ao reator e evapore o solvente na posição MVP de saída quatro frascos. Clique no botão Esfriar para esfriar o reator à temperatura ambiente com dióxido de carbono comprimido.Desligue a linha de varredura, mude a posição de MVP de entrada um para a posição dois e adicione o acetonitrilo anidro no frasco dois. Duas voltas na linha de varredura e aquecedor para azeotropicamente seco f18 flúor a 110 graus Celsius. Uma vez que o reator atinja a temperatura ambiente, desligue a linha de varredura, troque a posição de MVP de entrada dois para a posição três e adicione o precursor de rotulagem de radiolato no frasco três.Feche o reator e aqueça as misturas de reação a 100 graus Celsius por 10 minutos. Para evaporar o solvente de reação, uma vez que o reator esfrie, ligue a linha de varredura e evapore o solvente de reação a 100 graus Celsius. Uma vez que o reator esfrie, desligue a linha de varredura e mude a posição de MVP de entrada três para a posição quatro.Quando a mistura de acetonitrilo de ácido clorídrico for adicionada, aqueça a reação a 100 graus Celsius por 10 minutos para des protecionar os grupos de proteção tert-butyloxycarbonyl no precursor da rotulagem de radiolato. Para neutralizar a reação, quando o reator atingir a temperatura ambiente, troque a posição de MVP de entrada quatro para a posição cinco e adicione dois hidróxido de sódio molar à mistura de reação e desligue a entrada da linha de argônio MVP. Em seguida, comece a transferir a mistura de reação para o arquivo intermediário clicando no botão F no MVP de saída para alternar o MVP de saída da posição de ventilação quatro para a posição cinco, e, em seguida, clicando no botão F no MVP de entrada para mudar o MVP de entrada da posição cinco para a posição seis.Depois de ligar a linha de argon MVP de saída, empurre a mistura de reação através do óxido de alumínio neutro empilhado e cartuchos C8 para o frasco intermediário instalado antes do loop de amostra HPLC. Para enxaguar o reator, troque a posição de MVP de saída cinco para a posição seis, empurre a solução de enxágue no frasco de saída da posição MVP seis através do frasco de reação, cartuchos e o frasco intermediário, sucessivamente. Em seguida, comece a purificação da mistura alternando o laço HPLC da posição de injeção para a posição de carga e ligando a linha de argônio MVP de entrada.Quando a mistura estiver carregada no loop HPLC de cinco mililitros, troque o botão Carregar para Injetar, clique em Injetar HPLC para iniciar o cromatograma HPLC a uma taxa de fluxo de três mililitros por minuto e, em seguida, clique no botão HPLC Monitor para acessar o cromatógrafo HPLC em tempo real. Clique no botão 'Desvio' PARA desviar a fração HPLC de destino para a curta coluna C18 em aproximadamente 12 minutos. Depois que a radioatividade alvo for coletada na coluna C18, troque a válvula de desvio de duas posições de quatro portas para a posição de coleta de resíduos e lave a coluna quiral à taxa de quatro mililitros por minuto durante seis minutos para remover o menor enantiomer D F18 FETrp e outras impurezas ultravioletas.Clique no botão Diversion MVP para desviar a fase móvel HPLC de volta para a posição MVP de formulação um a três mililitros por minuto. Observe que a fase móvel passa pela coluna quiral e coluna C18 para purificar o FETrp L-F18 retido na coluna C18. Em aproximadamente 32 a 34 minutos, colete a fração alvo na formulação MVP posição dois frasco.Em seguida, empurre a formulação SOLUÇÃO DE MVP dois frascos através da linha de entrega e filtro estéril para o frasco de dose final. Ensaio a atividade e o volume da dose final após a remoção do filtro estéril. Lave o sistema com água ultra pura seguida de etanol a uma vazão de quatro mililitros por minuto por pelo menos 15 minutos por lavagem.Desligue a bomba HPLC e a caixa PLC, feche o programa, desligue a companhia aérea compactada, a linha de argônio, a linha de dióxido de carbono e a principal potência do módulo. Retire aproximadamente 0,1 mililitros da dose final em uma inserção de 0,2 mililitro de um frasco QC. Execute a amostra quente como o programa de sequência parcial é descrito no manuscrito do texto.Analise os dados do QC calculando as purezas químicas e radioquímicas em excesso téreo e atividade molar. Depois de determinar o valor do pH, libere a dose se todos os resultados dos testes passarem pelo intervalo aceitável. Os cromatogramas HPLC representativos para QC são mostrados.Os picos insignificantes entre o volume vazio em 10 minutos do programa foram detectados no cromatógrafo em branco. A referência padrão não radiolabeled L-fluoroethyl-triptofano mostrou a presença de um único isômero separado bem da referência padrão de sua contraparte D. A dose final do triptofano L-F18 mostrou alta pureza química e pureza radioquímica.Os testes de estabilidade do produto final na maior concentração de dose por até oito horas mostraram que o triptofano L-F18 foi estável em termos de pureza química, pureza radioquímica, excesso enantiomerico e valor de pH. As purezas químicas e radioquímicas superiores a 95% foram alcançadas por meio deste protocolo. Duas colunas são usadas para purificação de rastreadores.Lembre-se de mudar para a coluna C18 para remover as impurezas químicas. Podemos adaptar rapidamente este método à produção clínica do radiotracer triptofano de flúor-18.

Research

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