Name: radiosynthesis of 1-(2-[18f]fluoroethyl)-l-tryptophan using a one-pot, two-step protocol
Uploaded: 2021-09-21T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Radiosynthesis of 1-2-[18F]Fluoroethyl-L-Tryptophan using a One-pot, Two-step Protocol at JoVE.com

Detta arbete stöddes av Diagnostic & Research PET / MRI Center och av avdelningarna för biomedicinsk forskning och radiologi vid Nemours / Alfred I. duPont Hospital for Children.

VARNING: Protokollet involverar radioaktiva ämnen. Varje ytterligare dos av radioaktiva ämnen kan leda till en proportionell ökning av risken för negativa hälsoeffekter som cancer. Forskare måste följa dospraxis "så lågt som rimligen uppnås" (ALARA) för att styra radiosyntesprotokollet med adekvat skydd i den heta cellen eller blyhuven. Att minimera direktkontakttiden, använda en blysköld och hålla maximalt avstånd för alla strålningsexponeringssteg i radiosyntesprocessen är viktigt. Använd ett stråln...

Tryptofan är en essentiell aminosyra för människor. Det spelar en viktig roll i regleringen av humör, kognitiv funktion och beteende. Radioaktivt märkta tryptofanderivat, särskilt kol-11-märkta [11C]AMT, har studerats i stor utsträckning på grund av deras unika roll i kartläggningen av serotoninsyntesen38,39, upptäckt och gradering av tumörer40, styrning av epilepsikirurgi41,42<sup ...

Hos människor är tryptofan en viktig del av den dagliga kosten. Tryptofan metaboliseras främst via kynureninvägen (KP). KP katalyseras av två hastighetsbegränsande enzymer, indolamin 2, 3-dioxygenas (IDO) och tryptofan 2, 3-dioxygenas (TDO). Mer än 95% av tryptofan omvandlas till kynurenin och dess nedströms metaboliter, vilket i slutändan genererar nikotinamidadenindinukleotid, vilket är viktigt för cellulär energitransduktion. KP är en viktig regulator för immunsystemet och en viktig regulator för neuroplasticitet och neurotoxiska effekter1,2. Onormal tryptofanmetabolism är inblandad i olika neurologiska, onkologiska, psykiatriska och metaboliska störningar; Därför har radioaktivt märkta tryptofananaloger använts i stor utsträckning i kliniska undersökningar. De två vanligaste kliniskt undersökta tryptofanradiotracers är 11C-α-metyl-L-tryptofan ([11C]AMT) och 11C-5-hydroxytryptofan (11C-5-HTP)3.
På 1990-talet, 11C-5-HTP användes för att visualisera serotonin-utsöndrande neuroendokrina tumörer4 och för att diagnostisera och övervaka behandling av metastaserande hormon-eldfasta prostata adenokarcinom5. Senare användes det som ett avbildningsverktyg för kvantifiering av det serotonerga systemet i den endokrina bukspottkörteln6. 11 C-5-HTP har också varit en lovande spårare för icke-invasiv detektion av livskraftiga öar i intraportal ötransplantation och typ 2-diabetes7,8. Under de senaste två decennierna har många radioaktivt märkta aminosyror avancerat till klinisk undersökning9,10. I synnerhet har den kol-11-märkta tryptofananalogen [11C] AMT fått omfattande uppmärksamhet för kartläggning av serotoninsyntesen i hjärnan11,12,13,14 och för lokalisering av epileptiska foci, epileptogena tumörer, tuberös skleroskomplex, gliom och bröstcancer15,16,17,18,19,20 ,21,22,23,24,25,26. [11C] AMT har också högt upptag i olika låg- och höggradiga tumörer hos barn27. Vidare har kinetisk spårämnesanalys av [11C]AMT hos försökspersoner använts för att differentiera och gradera olika tumörer och skilja gliom från strålningsinducerad vävnadsskada15. [11C] AMT-guidad avbildning visar signifikanta kliniska fördelar vid hjärnsjukdomar3,25. På grund av den korta halveringstiden för kol-11 (20 min) och de mödosamma radiosyntesprocedurerna är [11C] AMT-användningen begränsad till de få PET-centra med en cyklotron på plats och en radiokemianläggning.
Fluor-18 har en gynnsam halveringstid på 109,8 min, jämfört med halveringstiden på 20 min för kol-11. I allt högre grad har insatserna varit inriktade på utveckling av fluor-18-märkta radiotracers för tryptofanmetabolism3,28. Totalt 15 unika fluor-18 radiomärkta tryptofanradiotracers har rapporterats när det gäller radiomärkning, transportmekanismer, in vitro- och in vivo-stabilitet, biodistribution och tumörupptag i xenotransplantat. Snabb in vivo-defluorinering observerades dock för flera spårämnen, inklusive 4-, 5- och 6-[18F]fluorotryptofan, vilket förhindrade ytterligare klinisk translation29. 5-[18F]Fluor-α-metyltryptofan (5-[18F]FAMT) och 1-(2-[18F]fluoroetyl)-L-tryptofan (L-[18F]FETrp, även känd som (S)-2-amino-3-(1-(2-[18F]fluoroetyl)-1H-indol-3-yl)propansyra, molekylvikt 249,28 g/mol), är de två mest lovande radiotracers med gynnsam in vivo-kinetik i djurmodeller och stor potential att överträffa [11 C]AMT för utvärdering av kliniska tillstånd med avreglerad tryptofanmetabolism28. 5-[18F]FAMT visade högt upptag i IDO1-positiva tumörenotransplantat hos immunsupprimerade möss och är mer specifikt för avbildning av KP än [11C]AMT28,30. In vivo-stabiliteten hos 5-[18F]FAMT är dock fortfarande ett potentiellt problem eftersom inga in vivo-defluorineringsdata har rapporterats efter 30 minuter efter injektionen av tracer30.
En preklinisk studie i en genetiskt konstruerad medulloblastommusmodell visade att jämfört med 18F-fluorodeoxiglukos (18F-FDG) hade L-[18F]FETrp hög ackumulering i hjärntumörer, försumbar in vivo-defluorination och lågt bakgrundsupptag, vilket visade ett överlägset mål-till-icke-målförhållande31,32. Strålningsdisimetristudier på möss indikerade att L-[18F]FETrp hade en cirka 20% lägre gynnsam dosimetriexponering än den kliniska 18F-FDG PET-spåraren33. I överensstämmelse med andra forskares resultat ger prekliniska studiedata betydande bevis för att stödja den kliniska översättningen av L-[18F]FETrp för undersökning av onormal tryptofanmetabolism hos människor med hjärnsjukdomar som epilepsi, neuro-onkologi, autism och tuberös skleros28,31,32,33,34,35,36 . En övergripande jämförelse mellan de tre mest undersökta spårämnena för tryptofanmetabolism, 11C-5-HTP, [11C]AMT, och L-[18F]FETrp, visas i tabell 1. Både 11C-5-HTP och [11C]AMT har en kort halveringstid och mödosamma radiomärkningsförfaranden. Ett protokoll för radiosyntes av L-[18F]FETrp med hjälp av en enpott, tvåstegsmetod beskrivs här. Protokollet innehåller användning av en liten mängd radiomärkningsprekursorer, en liten volym reaktionslösningsmedel, låg belastning av giftiga K222 och en miljömässigt godartad och injicerbar mobil fas för rening och enkel formulering.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>[18F]Fluoride in [18O]H2O</td>
			<td>PETNET Solutions Inc.</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4,7,13,16,21,24-hexaoxa-1,10-diazabicyclo[8.8.8]hexacosane</td>
			<td>ACROS</td>
			<td>291950010</td>
			<td>Kryptofix 222 or K222, 98%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetic acid</td>
			<td>ACROS</td>
			<td>222142500</td>
			<td>99.8%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>271004</td>
			<td>anhydrous, 99.8%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agilent 1260 HPLC system</td>
			<td>Agilent Technologies</td>
			<td>Agilent 1260</td>
			<td>Agilent 1260 series</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analytcial chiral HPLC column</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>12024AST</td>
			<td>Astec CHIROBIOTIC T, 25 cm &#215; 4.6 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbon dioxide, 60 LBS</td>
			<td>Airgas</td>
			<td>REFR744R200S</td>
			<td>99.99%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-FETrp standard reference</td>
			<td>Affinity Research Chemicals Inc</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Empty sterile vial</td>
			<td>Jubilant HollisterStier</td>
			<td>7515</td>
			<td>20 mm closure, 10 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Decon Labs</td>
			<td>2716</td>
			<td>200 proof, USP grade. &#8805;99.9%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fisherbrand 13 mm Syringe Filter, 0.22 &#181;m, PVDF, sterile</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>09-720-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrochloric acid</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>30721</td>
			<td>&#8805;37%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropanol</td>
			<td>Decon Labs</td>
			<td>8316</td>
			<td>70%, sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-[18F]FETrp radiolabeling precursor</td>
			<td>Affinity Research Chemicals Inc</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-FETrp standard reference</td>
			<td>Affinity Research Chemicals Inc</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light C8 cartridge</td>
			<td>Waters</td>
			<td>WAT036770</td>
			<td>Sep-Pak&#160; C8 plus light cartridge</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle, 20 G x 1</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>305175</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle, 20 G x 1 &#189;</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>305176</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle, 21 G x 2</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>305129</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral aluminum oxide</td>
			<td>Waters</td>
			<td>WAT023561</td>
			<td>Sep-Pak alumina N plus light</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon membrane (0.20 &#181;m )</td>
			<td>MilliPore</td>
			<td>GNWP04700</td>
			<td>47 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pall Acrodisc 25 mm syringe sterile filter</td>
			<td>Pall Corporation</td>
			<td>4907</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PETCHEM radiochemistry synthesis system</td>
			<td>PETCHEM Solutions Inc. Pinckney, MI</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Radiosynthesizer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pH strips 2.0 - 9.0</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1.09584.0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium carbonate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>367877</td>
			<td>99.995%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quaternary methylammonium light cartridge</td>
			<td>Waters</td>
			<td>186004051</td>
			<td>Sep-Pak QMA light</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Semi-preparative C18 HPLC column</td>
			<td>Phenomenex</td>
			<td>00D-4253-N0</td>
			<td>100 &#215; 10 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Semi-preparative chiral HPLC column</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>12034AST</td>
			<td>Astec CHIROBIOTIC T, 25 cm &#215; 10 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride injection 23.4%</td>
			<td>APP Pharmaceutical, LLC</td>
			<td>18730</td>
			<td>USP grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloridei injection 0.9%</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>NDC 0409-4888-10</td>
			<td>USP grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydroxide</td>
			<td>Honeywell</td>
			<td>306576</td>
			<td>99.99%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spinal needle, 20 G x 3 &#189;</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>405182</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile alcohol prep pads</td>
			<td>BioMed Resource Inc.</td>
			<td>PC661</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile empty vials, 2 mL</td>
			<td>Hollister Stier</td>
			<td>7505ZA</td>
			<td>13 mm closure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile empty vials, 30 mL</td>
			<td>Jubilant HollisterStier</td>
			<td>7520ZA</td>
			<td>20 mm closure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe PP/PE, 3 mL, Luer Lock</td>
			<td>Air-Tite</td>
			<td>4020-X00V0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe PP/PE, 5 mL, Luer Lock</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>309646</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe,&#160; PP/PE, 10 mL, NORM-JECT</td>
			<td>Air-Tite</td>
			<td>4100-000V0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, 1 mL, Luer Slip</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, 3 mL, Luer-Lock</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>309657</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra high purity argon</td>
			<td>Airgas</td>
			<td>AR UHP300</td>
			<td>99.999%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrapure water</td>
			<td>MilliporeSigma</td>
			<td>ZRQSVP300</td>
			<td>Direct-Q 3 tap to pure and ultrapure water purification system</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

radiosynthesis of 1-(2-[18f]fluoroethyl)-l-tryptophan using a one-pot, two-step protocol

Kynureninvägen (KP) är en primär väg för tryptofanmetabolism. Bevis tyder starkt på att metaboliter av KP spelar en viktig roll i tumörproliferation, epilepsi, neurodegenerativa sjukdomar och psykiatriska sjukdomar på grund av deras immunmodulerande, neuromodulerande och neurotoxiska effekter. Det mest använda positronemissionstomografimedlet (PET) för kartläggning av tryptofanmetabolism, α-[11C]metyl-L-tryptofan ([11C]AMT), har en kort halveringstid på 20 minuter med mödosamma radiosyntesprocedurer. En cyklotron på plats krävs för att radiosyntetisera [11C]AMT. Endast ett begränsat antal centra producerar [11C] AMT för prekliniska studier och kliniska prövningar. Därför är utvecklingen av ett alternativt bildbehandlingsmedel som har en längre halveringstid, gynnsam in vivo-kinetik och är lätt att automatisera brådskande. Nyttan och värdet av 1-(2-[18F]fluoretyl)-L-tryptofan, en fluor-18-märkt tryptofananalog, har rapporterats i prekliniska tillämpningar i cellinje-härledda xenotransplantat, patient-härledda xenotransplantat och transgena tumörmodeller.
Detta dokument presenterar ett protokoll för radiosyntesen av 1-(2-[18F]fluoroetyl)-L-tryptofan med hjälp av en en-pot, tvåstegsstrategi. Med hjälp av detta protokoll kan radiotracern framställas i ett 20 ± 5% (sönderfall korrigerat i slutet av syntesen, n > 20) radiokemiskt utbyte, med både radiokemisk renhet och enantiomeriskt överskott på över 95%. Protokollet har en liten prekursormängd med högst 0,5 ml reaktionslösningsmedel i varje steg, låg belastning av potentiellt giftigt 4,7,13,16,21,24-hexaoxa-1,10-diazabicyclo[8.8.8]hexacosane (K222) och en miljömässigt godartad och injicerbar mobil fas för rening. Protokollet kan enkelt konfigureras för att producera 1-(2-[18F]fluoretyl)-L-tryptofan för klinisk undersökning i en kommersiellt tillgänglig modul.

Reaktionsschemat visas i figur 1. Radiomärkningen innefattar följande två steg: 1) reaktion av tosylatradiomärkningsprekursorn med [18F]fluor ger den 18F-märkta mellanprodukten, och 2) avskydd av tert-butyloxikarbonyl- och tert-butylskyddande grupper i mellanprodukten ger slutprodukten L-[18F]FETrp. Båda reaktionsstegen fortsätter vid 100 °C i 10 minuter.
Innan du tar emot [18F]fluor från den k...

Watch this Scientific Journal Video about Radiosynthesis of 1-2-[18F]Fluoroethyl-L-Tryptophan using a One-pot, Two-step Protocol at JoVE.com

Radiosynthesis of 1-2-[18F]Fluoroethyl-L-Tryptophan using a One-pot, Two-step Protocol

Här beskriver vi radiosyntesen av 1-(2-[18F]Fluoroetyl)-L-tryptofan, ett positronemissionstomografiavbildningsmedel för att studera tryptofanmetabolism, med hjälp av en en-pot, tvåstegsstrategi i ett radiokemiskt syntessystem med goda radiokemiska utbyten, högt enantiomeriskt överskott och hög tillförlitlighet.

Radiosyntes av 1-(2-[18F]Fluoroetyl)-L-tryptofan med hjälp av en en-pot, Tvåstegsprotokoll

The kynurenine pathway (KP) is a primary route for tryptophan metabolism. Evidence strongly suggests that metabolites of the KP play a vital role in tumor ...

Det övergripande målet med detta protokoll är att radiosyntetisera en F18-radiomärkt tryptofanspårare med en en-pot, tvåstegsmetod. Radiotracer kan hitta utbredd tillämpning för avbildning tryptofan metabolism. Tekniken använder radioisotopen med en längre halveringstid, mindre reaktionsprekursor och mindre reaktionsvolym och en miljömässigt godartad fas för rening.Radiotracer kan användas för diagnos av olika störningar som påverkar hjärnan, inklusive men inte begränsat till epilepsi, neuropsykiatriska störningar och neuro-onkologi. Denna metod kan tillämpas på andra kommersiellt tillgängliga radiomärkningsmoduler. När F18-fluorlösningen har tagits emot, börja med att undersöka blyboxen på ytan och från ett meters avstånd registrera de maximala strålningsexponeringshastigheterna.Efter att ha utfört ett torkningstest för att säkerställa att fraktlådan inte är förorenad, registrera F18-fluoridensen och tiden. Överför F18-fluorlösningen till radiokemisyntessystemet. Anslut argonlinjen med en kort nål och F18-fluoröverföringsledningen med en lång nål till F18-fluorflaskan.Stäng sedan den heta cellglasdörren och blydörren. Slå på argonförsörjningsledningen genom att klicka på Argon Supply. Öka argontrycket och slå på F18-fluorets trycklinje för att trycka den vattenhaltiga F18-fluoriden genom QMA-ljuspatronen.När all radioaktivitet har fastnat i QMA-ljuspatronen och radioaktivitetsdetektorns avläsning är stadig, öka argontrycket och blås argon genom patronen i ytterligare fem minuter för att avlägsna överflödigt vatten. Efter att ha stängt av F18-fluorets trycklinje, minska argontrycket till noll och växla tvålägesventilen med sex portar från F18-fluorfällningsläget till elueringsläget. Öppna reaktionsflaskan, slå på ingångs-MVP-positionen en argonlinje och tryck in K222- och kaliumkarbonatlösningen i ingångs-MVP-positionen en injektionsflaska genom QMA-ljuspatronen för att eluera radioaktiviteten i reaktionsflaskan.Växla F18-fluorelueringsläget till fångstläget. Klicka på Värme-knappen för att värma reaktorn vid 110 grader Celsius, slå på den utgående MVP-positionen-fyra argonlinjen som ansluts till reaktorn och avdunsta lösningsmedlet till utgångs-MVP-positionen fyra injektionsflaska. Klicka på knappen Kyl för att kyla ner reaktorn till rumstemperatur med komprimerad koldioxid.Stäng av sveplinjen, byt ingångs-MVP-position ett till läge två och tillsätt den vattenfria acetonitrilen i injektionsflaskan två. Två slår på sveplinan och värmaren för att azeotropiskt torka F18-fluor vid 110 grader Celsius. När reaktorn når rumstemperatur stänger du av svepledningen, växlar ingångs-MVP-positionen två till läge tre och lägger till tosylatradiomärkningsprekursorn i injektionsflaskan tre.Stäng reaktorn och värm reaktionsblandningarna vid 100 grader Celsius i 10 minuter. För att avdunsta reaktionslösningsmedlet, när reaktorn svalnar, slå på svepledningen och avdunsta reaktionslösningsmedlet vid 100 grader Celsius. När reaktorn har svalnat, stäng av sveplinjen och byt ingångs-MVP-position tre till position fyra.När saltsyraacetonitrilblandningen tillsätts, värm reaktionen vid 100 grader Celsius i 10 minuter för att skydda tert-butyl- och tert-butylkarbonylskyddsgrupperna i radiomärkningsprekursorn. För att neutralisera reaktionen, när reaktorn når rumstemperatur, växla ingångs-MVP-positionen fyra till position fem och tillsätt två molära natriumhydroxid till reaktionsblandningen och stäng av den ingående MVP-argonlinjen. Börja sedan överföra reaktionsblandningen till mellanfilen genom att klicka på F-knappen i utgångs-MVP för att växla utgångs-MVP från ventilationspositionen fyra till position fem och sedan genom att klicka på F-knappen i ingångs-MVP för att växla ingångs-MVP från position fem till position sex.När du har slagit på MVP-argonlinjen trycker du reaktionsblandningen genom de staplade neutrala aluminiumoxid- och C8-patronerna till den mellanliggande injektionsflaskan som är installerad före HPLC-provslingan. För sköljning av reaktorn, växla utgångs-MVP-positionen fem till läge sex, tryck sköljlösningen i flaskan med utgångs MVP-position sex genom reaktionsflaskan, patronerna och mellanflaskan successivt. Börja sedan rening av blandningen genom att växla HPLC-slingan från injektionsläge till lastläge och slå på ingångs-MVP-argonlinjen.När blandningen laddas till HPLC-slingan på fem milliliter växlar du knappen Belastning till Injicera, klickar på Injicera HPLC för att starta HPLC-kromatogrammet med en flödeshastighet på tre milliliter per minut och klickar sedan på HPLC Monitor-knappen för att komma åt HPLC-kromatogrammet i realtid. Klicka på knappen Avledning MVP för att avleda HPLC-målfraktionen till den korta C18-kolumnen på cirka 12 minuter. När målradioaktiviteten har samlats in i C18-kolonnen, byt den fyrportiga tvåläges avledningsventilen till avfallsuppsamlingsläget och spola kiralkolonnen med en hastighet av fyra milliliter per minut i sex minuter för att avlägsna den mindre D F18 FETrp-enantiomeren och andra ultravioletta föroreningar.Klicka på knappen Avledning MVP för att avleda HPLC-mobilfasen tillbaka till formuleringen MVP-position ett vid tre milliliter per minut. Observera att den mobila fasen passerar genom kiralkolonnen och C18-kolonnen för att rena L-F18 FETrp som behålls i C18-kolonnen. Vid cirka 32 till 34 minuter samlar du målfraktionen i formuleringen MVP position två injektionsflaska.Tryck sedan formuleringen MVP-position två injektionsflaska genom leveranslinjen och sterilt filter i den slutliga dosen injektionsflaskan. Analysera den slutliga dosaktiviteten och volymen efter avlägsnande av sterilfiltret. Spola systemet med ultrarent vatten följt av etanol med en flödeshastighet på fyra milliliter per minut i minst 15 minuter per tvätt.Stäng av HPLC-pumpen och PLC-boxen, stäng av programmet, stäng av det komprimerade flygbolaget, argonlinjen, koldioxidlinjen och modulens huvudeffekt. Dra ut cirka 0,1 ml av den slutliga dosen i en 0,2-milliliter insats av en QC-injektionsflaska. Kör det heta exemplet som det partiella sekvensprogrammet beskrivs i textmanuskriptet.Analysera QC-data genom att beräkna kemiska och radiokemiska renheter i enantiomeriskt överskottsvärde och molär aktivitet. Efter att ha bestämt pH-värdet, släpp dosen om alla testresultat passerar det acceptabla intervallet. De representativa HPLC-kromatogrammen för QC visas.De obetydliga topparna mellan tomrumsvolymen på 10 minuter av programmet detekterades i det tomma kromatogrammet. Den icke-radiomärkta standardreferensen L-fluoretyl-trytophan visade närvaron av en enda isomer separerad väl från standardreferensen för dess D-motsvarighet. Den slutliga dosen av L-F18 tryptofan visade hög kemisk renhet och radiokemisk renhet.Stabilitetstestningen av slutprodukten vid den högsta doskoncentrationen i upp till åtta timmar visade att L-F18 tryptofan var stabilt när det gäller kemisk renhet, radiokemisk renhet, enantiomeriskt överskott och pH-värde. De kemiska och radiokemiska renheterna större än 95% uppnåddes med hjälp av detta protokoll. Två kolumner används för spårrening.Kom ihåg att byta till C18-kolonnen för att ta bort de kemiska föroreningarna. Vi kan snabbt anpassa denna metod till klinisk produktion av den fluor-18-märkta tryptofanradiotracern.

Research

JoVE Journal

Chemistry

Radiosynthesis of 1-(2-[18F]Fluoroethyl)-L-Tryptophan using a One-pot, Two-step Protocol

A Simple and Rapid Protocol for Measuring Neutral Lipids in Algal Cells Using Fluorescence

En enkel och snabb protokoll för mätning av neutrala lipider i algceller Använda Fluorescens

Algae are considered excellent candidates for renewable fuel sources due to their natural lipid storage capabilities. Robust monitoring of algal ...

The Bioconjugation and Radiosynthesis of 89Zr-DFO-labeled Antibodies

The Bioconjugation and Radiosynthesis of 89Zr-DFO-labeled Antibodies

Den biokonjugering och radiosynthesis av<sup&gt; 89</sup&gt; Zr-DFO-märkta antikroppar

The exceptional affinity, specificity, and selectivity of antibodies make them extraordinarily attractive vectors for tumor-targeted PET ...

A Protocol for the Production of Gliadin-cyanoacrylate Nanoparticles for Hydrophilic Coating

Ett protokoll för produktion av Gliadin-cyanoakrylat Nanopartiklar för hydrofil beläggning

This article presents a protocol for the production of protein-based nanoparticles that changes the hydrophobic surface to hydrophilic by a simple spray ...

A Protocol for Safe Lithiation Reactions Using Organolithium Reagents

Ett protokoll för säker litiering Reaktioner Använda litiumorganisk Reagens

Organolithium reagents are powerful tools in the synthetic chemist&#39;s toolbox. However, the extreme pyrophoric nature of the most reactive reagents ...

An Optimized Protocol for the Efficient Radiolabeling of Gold Nanoparticles by Using a 125I-labeled Azide Prosthetic Group

An Optimized Protocol for the Efficient Radiolabeling of Gold Nanoparticles by Using a 125I-labeled Azide Prosthetic Group

En optimerat protokoll för effektiv Radiomärkning av guld nanopartiklar med hjälp av en<sup&gt; 125</sup&gt; I-märkt Azid prostetisk grupp

Here, we demonstrate a detailed protocol for the radiosynthesis of a 125I-labeled azide prosthetic group and its application to the efficient ...

A Protocol for Electrochemical Evaluations and State of Charge Diagnostics of a Symmetric Organic Redox Flow Battery

Ett protokoll för Elektro Utvärderingar och laddningstillstånd Diagnostik av en Symmetrisk Organic Redox Flow Batteri

Redox flow batteries have been considered as one of the most promising stationary energy storage solutions for improving the reliability of the power grid ...

One-pot Microwave-assisted Conversion of Anomeric Nitrate-esters to Trichloroacetimidates

One-pot mikrovågsugn-assisterad konvertering av anomera nitrat-estrar till Trichloroacetimidates

The goal of the following procedure is to provide a demonstration of the one-pot conversion of a 2-azido-1-nitrate-ester to a trichloroacetimidate ...

The MPLEx Protocol for Multi-omic Analyses of Soil Samples

MPLEx protokollet för Multi-miska analyser av jordprover

Mass spectrometry (MS)-based integrated metaproteomic, metabolomic, and lipidomic (multi-omic) studies are transforming our ability to understand and ...

Separation of Aldehydes and Reactive Ketones from Mixtures Using a Bisulfite Extraction Protocol

Separation av aldehyder och reaktiva ketoner från blandningar med ett Bisulfite extraktion protokoll

The purification of organic compounds is an essential component of routine synthetic operations. The ability to remove contaminants into an aqueous layer ...

A Two-Step Protocol for Umpolung Functionalization of Ketones Via Enolonium Species

Ett två-stegs protokoll för Umpolung funktionalisering av ketoner Via Enolonium arter

&#945;-Functionalization of ketones via umpolung of enolates by hypervalent iodine reagents is an important concept in synthetic organic chemistry. ...