Name: radiosynthesis of 1-(2-[18f]fluoroethyl)-l-tryptophan using a one-pot, two-step protocol
Uploaded: 2021-09-21T14:45:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Radiosynthesis of 1-2-[18F]Fluoroethyl-L-Tryptophan using a One-pot, Two-step Protocol at JoVE.com

Bu çalışma Tanı ve Araştırma PET/MRI Merkezi ve Nemours/Alfred I. duPont Çocuk Hastanesi Biyomedikal Araştırma ve Radyoloji Bölümleri tarafından desteklenmiştir.

DİKKAT: Protokol radyoaktif maddeler içermektedir. Herhangi bir ek radyoaktif madde dozu, kanser gibi olumsuz sağlık etkileri olasılığında orantılı bir artışa yol açabilir. Araştırmacılar, radyosentez protokolünü sıcak hücrede veya kurşun davlumbazda yeterli koruma ile yönlendirmek için 'makul derecede ulaşılabilir kadar düşük' (ALARA) doz uygulamalarını takip etmelidir. Doğrudan temas süresini en aza indirmek, bir kurşun kalkan kullanmak ve radyosentez işleminde herhangi bir radyasyona ...

Triptofan, insanlar için gerekli bir amino asittir. Ruh halinin, bilişsel işlevin ve davranışın düzenlenmesinde önemli bir rol oynar. Radyoaktif etiketli triptofan türevleri, özellikle karbon-11 etiketli [11C] AMT, serotonin sentezinin haritalandırılmasında38,39, tümörlerin saptanmasında ve derecelendirilmesinde40, epilepsi cerrahisine rehberlik etmede41,42 ve diyabette tedavi yanıtının değerlendirilmesinde b...

İnsanlarda, triptofan günlük diyetin önemli bir bileşenidir. Triptofan öncelikle kinürenin yolu (KP) yoluyla metabolize edilir. KP, iki hız sınırlayıcı enzim, indoleamin 2, 3-dioksijenaz (IDO) ve triptofan 2, 3-dioksijenaz (TDO) tarafından katalize edilir. Triptofanın% 95'inden fazlası kinürenine ve aşağı akış metabolitlerine dönüştürülür ve sonuçta hücresel enerji iletimi için gerekli olan nikotinamid adenin dinükleotid üretir. KP, bağışıklık sisteminin önemli bir düzenleyicisi ve nöroplastisite ve nörotoksik etkilerin önemli bir düzenleyicisidir1,2. Anormal triptofan metabolizması çeşitli nörolojik, onkolojik, psikiyatrik ve metabolik bozukluklarda rol oynar; Bu nedenle, radyoaktif işaretli triptofan analogları klinik araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Klinik olarak en sık araştırılan iki triptofan radyotraceri 11C-α-metil-L-triptofan ([11C]AMT) ve 11C-5-hidroksitriptofan (11C-5-HTP)3'tür.
1990'lı yıllarda, serotonin salgılayan nöroendokrin tümörleri4 görselleştirmek ve metastatik hormona dirençli prostat adenokarsinomunun tedavisini teşhis etmek ve izlemek için 11C-5-HTP kullanılmıştır5. Daha sonra endokrin pankreastaki serotonerjik sistemin nicelleştirilmesinde görüntüleme aracı olarak kullanılmıştır6. 11 adet C-5-HTP ayrıca intraportal adacık transplantasyonunda ve tip 2 diyabette canlı adacıkların noninvaziv tespiti için umut verici bir izleyici olmuştur7,8. Son yirmi yılda, birçok radyoaktif etiketli amino asit klinik araştırmalara ilerlemiştir9,10. Özellikle, karbon-11 etiketli triptofan analoğu [11C]AMT, beyin serotonin sentezini11,12,13,14 haritalamak ve epileptik odakları, epileptojenik tümörleri, yumrulu skleroz kompleksini, gliomları ve meme kanserlerini lokalize etmek için büyük ilgi görmüştür15,16,17,18,19,20 ,21,22,23,24,25,26. [11C] AMT ayrıca çocuklarda çeşitli düşük ve yüksek dereceli tümörlerde yüksek alıma sahiptir27. Ayrıca, insan deneklerde [11C] AMT'nin kinetik izleyici analizi, çeşitli tümörleri ayırt etmek ve derecelendirmek ve gliomu radyasyona bağlı doku hasarından ayırt etmek için kullanılmıştır15. [11C] AMT eşliğinde görüntüleme, beyin hastalıklarında önemli klinik faydalar göstermektedir3,25. Bununla birlikte, karbon-11'in (20 dakika) kısa yarı ömrü ve zahmetli radyosentez prosedürleri nedeniyle, [11C] AMT kullanımı, yerinde bir siklotron ve bir radyokimya tesisi olan birkaç PET merkezi ile sınırlıdır.
Flor-18, karbon-11'in 20 dakikalık yarı ömrüne kıyasla, 109.8 dakikalık uygun bir yarı ömre sahiptir. Çabalar giderek artan bir şekilde, triptofan metabolizması için flor-18 etiketli radyotracerlerin geliştirilmesine odaklanmıştır3,28. Ksenogreftlerde radyoetiketleme, taşıma mekanizmaları, in vitro ve in vivo stabilite, biyodağılım ve tümör alımı açısından toplam 15 benzersiz flor-18 radyoişaretli triptofan radyotracer bildirilmiştir. Bununla birlikte, 4-, 5- ve 6-[18F] florotriptofan dahil olmak üzere çeşitli izleyiciler için hızlı in vivo deflorinasyon gözlendi ve bu da daha fazla klinik translasyonu engelledi29. 5-[18F]Floro-α-metiltriptofan (5-[18F]FAMT) ve 1-(2-[18F]floroetil)-L-triptofan (L-[18F]FETrp, (S)-2-amino-3-(1-(2-[18F]floroetil)-1H-indol-3-yl)propanoik asit, moleküler ağırlık 249.28 g / mol), hayvan modellerinde in vivo kinetiği uygun ve aşmak için büyük potansiyele sahip en umut verici iki radyotracerdir [11] C]Düzensiz triptofan metabolizması olan klinik durumların değerlendirilmesi için AMT28. 5-[18F]FAMT, bağışıklık sistemi baskılanmış farelerin IDO1-pozitif tümör ksenogreftlerinde yüksek alım gösterdi ve KP'yi görüntülemede [11C] AMT28,30'dan daha spesifiktir. Bununla birlikte, 5-[18F] FAMT'nin in vivo stabilitesi, tracer30'un enjeksiyonundan sonraki 30 dakikadan sonra in vivo deflorinasyon verisi bildirilmediği için potansiyel bir endişe kaynağı olmaya devam etmektedir.
Genetiği değiştirilmiş bir medulloblastom fare modelinde yapılan klinik öncesi bir çalışma, 18F-florodeoksiglukoz (18F-FDG) ILE KARŞıLAŞTıRıLDıĞıNDA, L-[18F]FETrp'nin beyin tümörlerinde yüksek birikime sahip olduğunu, ihmal edilebilir in vivo deflorinasyona ve düşük arka plan alımına sahip olduğunu ve üstün bir hedef-hedef dışı oran gösterdiğini göstermiştir31,32. Farelerde yapılan radyasyon dozimetrisi çalışmaları, L-[18F]FETrp'nin klinik 18F-FDG PET tracer33'ten yaklaşık% 20 daha düşük bir olumlu dozimetri maruziyetine sahip olduğunu göstermiştir. Diğer araştırmacıların bulgularıyla uyumlu olarak, klinik öncesi çalışma verileri, epilepsi, nöro-onkoloji, otizm ve yumrulu skleroz gibi beyin bozuklukları olan insanlarda anormal triptofan metabolizmasının araştırılması için L-[18F]FETrp'nin klinik çevirisini desteklemek için önemli kanıtlar sunmaktadır28,31,32,33,34,35,36 . Triptofan metabolizması için en çok araştırılan üç izleyici, 11C-5-HTP, [11C] AMT ve L-[18F] FETrp arasındaki genel bir karşılaştırma Tablo 1'de gösterilmiştir. Hem 11C-5-HTP hem de [11C] AMT'nin kısa bir yarı ömrü ve zahmetli radyoetiketleme prosedürleri vardır. L-[18F]FETrp'nin radyosentezi için tek kaplı, iki adımlı bir yaklaşım kullanarak bir protokol burada açıklanmaktadır. Protokol, az miktarda radyoetiketleme öncüsü, az miktarda reaksiyon çözücüsü, düşük miktarda toksik K222 yüklenmesi ve saflaştırma ve kolay formülasyon için çevresel açıdan iyi huylu ve enjekte edilebilir bir mobil fazın kullanılmasını içerir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>[18F]Fluoride in [18O]H2O</td>
			<td>PETNET Solutions Inc.</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4,7,13,16,21,24-hexaoxa-1,10-diazabicyclo[8.8.8]hexacosane</td>
			<td>ACROS</td>
			<td>291950010</td>
			<td>Kryptofix 222 or K222, 98%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetic acid</td>
			<td>ACROS</td>
			<td>222142500</td>
			<td>99.8%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acetonitrile</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>271004</td>
			<td>anhydrous, 99.8%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agilent 1260 HPLC system</td>
			<td>Agilent Technologies</td>
			<td>Agilent 1260</td>
			<td>Agilent 1260 series</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Analytcial chiral HPLC column</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>12024AST</td>
			<td>Astec CHIROBIOTIC T, 25 cm &#215; 4.6 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carbon dioxide, 60 LBS</td>
			<td>Airgas</td>
			<td>REFR744R200S</td>
			<td>99.99%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-FETrp standard reference</td>
			<td>Affinity Research Chemicals Inc</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Empty sterile vial</td>
			<td>Jubilant HollisterStier</td>
			<td>7515</td>
			<td>20 mm closure, 10 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Decon Labs</td>
			<td>2716</td>
			<td>200 proof, USP grade. &#8805;99.9%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fisherbrand 13 mm Syringe Filter, 0.22 &#181;m, PVDF, sterile</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>09-720-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrochloric acid</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>30721</td>
			<td>&#8805;37%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isopropanol</td>
			<td>Decon Labs</td>
			<td>8316</td>
			<td>70%, sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-[18F]FETrp radiolabeling precursor</td>
			<td>Affinity Research Chemicals Inc</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-FETrp standard reference</td>
			<td>Affinity Research Chemicals Inc</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light C8 cartridge</td>
			<td>Waters</td>
			<td>WAT036770</td>
			<td>Sep-Pak&#160; C8 plus light cartridge</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle, 20 G x 1</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>305175</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle, 20 G x 1 &#189;</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>305176</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle, 21 G x 2</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>305129</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neutral aluminum oxide</td>
			<td>Waters</td>
			<td>WAT023561</td>
			<td>Sep-Pak alumina N plus light</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon membrane (0.20 &#181;m )</td>
			<td>MilliPore</td>
			<td>GNWP04700</td>
			<td>47 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pall Acrodisc 25 mm syringe sterile filter</td>
			<td>Pall Corporation</td>
			<td>4907</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PETCHEM radiochemistry synthesis system</td>
			<td>PETCHEM Solutions Inc. Pinckney, MI</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Radiosynthesizer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pH strips 2.0 - 9.0</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1.09584.0001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium carbonate</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>367877</td>
			<td>99.995%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quaternary methylammonium light cartridge</td>
			<td>Waters</td>
			<td>186004051</td>
			<td>Sep-Pak QMA light</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Semi-preparative C18 HPLC column</td>
			<td>Phenomenex</td>
			<td>00D-4253-N0</td>
			<td>100 &#215; 10 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Semi-preparative chiral HPLC column</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>12034AST</td>
			<td>Astec CHIROBIOTIC T, 25 cm &#215; 10 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloride injection 23.4%</td>
			<td>APP Pharmaceutical, LLC</td>
			<td>18730</td>
			<td>USP grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium chloridei injection 0.9%</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>NDC 0409-4888-10</td>
			<td>USP grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium hydroxide</td>
			<td>Honeywell</td>
			<td>306576</td>
			<td>99.99%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spinal needle, 20 G x 3 &#189;</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>405182</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile alcohol prep pads</td>
			<td>BioMed Resource Inc.</td>
			<td>PC661</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile empty vials, 2 mL</td>
			<td>Hollister Stier</td>
			<td>7505ZA</td>
			<td>13 mm closure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile empty vials, 30 mL</td>
			<td>Jubilant HollisterStier</td>
			<td>7520ZA</td>
			<td>20 mm closure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe PP/PE, 3 mL, Luer Lock</td>
			<td>Air-Tite</td>
			<td>4020-X00V0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe PP/PE, 5 mL, Luer Lock</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>309646</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe,&#160; PP/PE, 10 mL, NORM-JECT</td>
			<td>Air-Tite</td>
			<td>4100-000V0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, 1 mL, Luer Slip</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe, 3 mL, Luer-Lock</td>
			<td>Becton-Dickinson &#38; Co.</td>
			<td>309657</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra high purity argon</td>
			<td>Airgas</td>
			<td>AR UHP300</td>
			<td>99.999%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrapure water</td>
			<td>MilliporeSigma</td>
			<td>ZRQSVP300</td>
			<td>Direct-Q 3 tap to pure and ultrapure water purification system</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

radiosynthesis of 1-(2-[18f]fluoroethyl)-l-tryptophan using a one-pot, two-step protocol

Kinürenin yolu (KP), triptofan metabolizması için birincil yoldur. Kanıtlar, KP'nin metabolitlerinin, immün modülatör, nöro-modülatör ve nörotoksik etkileri nedeniyle tümör proliferasyonu, epilepsi, nörodejeneratif hastalıklar ve psikiyatrik hastalıklarda hayati bir rol oynadığını güçlü bir şekilde göstermektedir. Triptofan metabolizmasını haritalamak için en yaygın kullanılan pozitron emisyon tomografisi (PET) ajanı olan α-[11C]metil-L-triptofan ([11C]AMT), zahmetli radyosentez prosedürleri ile 20 dakikalık kısa bir yarı ömre sahiptir. [11C]AMT'yi radyosentezlemek için yerinde bir siklotron gereklidir. Sadece sınırlı sayıda merkez, klinik öncesi çalışmalar ve klinik araştırmalar için [11C] AMT üretmektedir. Bu nedenle, daha uzun bir yarı ömre sahip, in vivo kinetik açıdan elverişli ve otomatikleştirilmesi kolay alternatif bir görüntüleme ajanının geliştirilmesine acilen ihtiyaç vardır. Flor-18 etiketli triptofan analoğu olan 1-(2-[18F]floroetil)-L-triptofanın yararlılığı ve değeri, hücre hattı kaynaklı ksenogreftlerde, hasta kaynaklı ksenogreftlerde ve transgenik tümör modellerinde klinik öncesi uygulamalarda bildirilmiştir.
Bu yazıda 1-(2-[18F]floroetil)-L-triptofanın radyosentezi için tek kaplı, iki aşamalı bir strateji kullanılarak bir protokol sunulmaktadır. Bu protokolü kullanarak, radyotracer% 20 ± 5 (sentez sonunda düzeltilen bozunma, n > 20) radyokimyasal verimde, hem radyokimyasal saflık hem de% 95'in üzerinde enantiyomerik fazlalık ile üretilebilir. Protokol, her adımda 0,5 mL'den fazla olmayan reaksiyon çözücüsü içeren küçük bir öncü miktara, potansiyel olarak toksik 4,7,13,16,21,24-hekzaoksa-1,10-diazabiklo [8.8.8] hekzakozan (K222) düşük yüklemesine ve saflaştırma için çevresel olarak iyi huylu ve enjekte edilebilir bir mobil faza sahiptir. Protokol, ticari olarak temin edilebilen bir modülde klinik araştırma için 1-(2-[18F] floroetil)-L-triptofan üretmek üzere kolayca yapılandırılabilir.

Reaksiyon şeması Şekil 1'de gösterilmiştir. Radyoetiketleme aşağıdaki iki adımı içerir: 1) tosilat radyoetiketleme öncüsünün [18F] florür ile reaksiyonu 18F etiketli ara maddeyi sağlar ve 2) ara üründeki tert-bütiloksikarbonil ve tert-bütil-koruma gruplarının korunması, nihai ürün L-[18F] FETrp'yi sağlar. Her iki reaksiyon adımı da 10 dakika boyunca 100 °C'de devam eder.
Ticari satıc...

Watch this Scientific Journal Video about Radiosynthesis of 1-2-[18F]Fluoroethyl-L-Tryptophan using a One-pot, Two-step Protocol at JoVE.com

Radiosynthesis of 1-2-[18F]Fluoroethyl-L-Tryptophan using a One-pot, Two-step Protocol

Burada, triptofan metabolizmasını incelemek için bir pozitron emisyon tomografisi görüntüleme ajanı olan 1-(2-[18F]Floroetil)-L-triptofanın radyosentezini, iyi radyokimyasal verimlere, yüksek enantiyomerik fazlalığa ve yüksek güvenilirliğe sahip bir radyokimya sentez sisteminde tek kaplı, iki aşamalı bir strateji kullanarak açıklıyoruz.

1-(2-[18F]Floroetil)-L-Triptofanın Tek Kaplı, İki Adımlı Protokol Kullanılarak Radyosentezi

The kynurenine pathway (KP) is a primary route for tryptophan metabolism. Evidence strongly suggests that metabolites of the KP play a vital role in tumor ...

Bu protokolün genel amacı, F18 radyoetiketli triptofan izleyiciyi tek kaplı, iki adımlı bir yaklaşımla radyosentezlemektir. Radyotracer, triptofan metabolizmasını görüntülemek için yaygın bir uygulama alanı bulabilir. Teknik, radyoizotopu daha uzun bir yarı ömür, daha az reaksiyon öncüsü ve daha az reaksiyon hacmi ve saflaştırma için çevresel açıdan iyi huylu bir faz ile kullanır.Radyotracer, epilepsi, nöropsikiyatrik bozukluklar ve nöro-onkoloji dahil ancak bunlarla sınırlı olmamak üzere beyni etkileyen çeşitli bozuklukların teşhisi için kullanılabilir. Bu yöntem, piyasada satılan diğer radyoetiketleme modüllerine uygulanabilir. F18 florür çözeltisi alındıktan sonra, yüzeydeki kurşun kutusunu inceleyerek başlayın ve bir metre mesafeden maksimum radyasyona maruz kalma oranlarını kaydedin.Nakliye kutusunun kirlenmediğinden emin olmak için bir silme testi yaptıktan sonra, F18 florür dozunu ve süresini kaydedin. F18 florür çözeltisini radyokimya sentez sistemine aktarın. Argon hattını kısa bir iğneyle ve F18 florür transfer hattını uzun bir iğneyle F18 florür şişesine bağlayın.Ardından, sıcak hücreli cam kapıyı ve kurşun kapıyı kapatın. Argon Supply'a tıklayarak argon besleme hattını açın. Argon basıncını artırın ve sulu F18 florürü QMA ışık kartuşundan itmek için F18 florür itme hattını açın.Tüm radyoaktivite QMA ışık kartuşunda sıkışıp kaldıktan ve radyoaktivite dedektörü okuması sabit kaldıktan sonra, argon basıncını artırın ve fazla suyu gidermek için argonu kartuştan beş dakika daha üfleyin. F18 florür itme hattını kapattıktan sonra, argon basıncını sıfıra düşürün ve altı portlu iki konumlu valfi F18 florür yakalama konumundan elüsyon konumuna getirin. Reaksiyon şişesini açın, giriş MVP pozisyonunu bir argon hattını açın ve radyoaktiviteyi reaksiyon şişesine atmak için K222 ve potasyum karbonat çözeltisini QMA ışık kartuşundan bir şişe giriş MVP pozisyonuna itin.F18 florür elüsyon pozisyonunu yakalama pozisyonuna getirin. Reaktörü 110 santigrat derecede ısıtmak için Isı düğmesine tıklayın, reaktöre bağlanan çıkış MVP pozisyon-dört argon hattını açın ve çözücüyü çıkış MVP pozisyonu dört şişesine buharlaştırın. Reaktörü sıkıştırılmış karbondioksit ile oda sıcaklığına soğutmak için Serin düğmesine tıklayın.Süpürme hattını kapatın, giriş MVP konumunu bir pozisyona iki konuma değiştirin ve susuz asetonitril'i iki şişeye ekleyin. F18 florürü 110 santigrat derecede azeotropik olarak kurutmak için süpürme hattını ve ısıtıcıyı iki kez açın. Reaktör oda sıcaklığına ulaştığında, süpürme hattını kapatın, giriş MVP pozisyonunu ikinci konuma getirin ve toksilat radyoetiketleme öncüsünü şişe üçe ekleyin.Reaktörü kapatın ve reaksiyon karışımlarını 10 dakika boyunca 100 santigrat derecede ısıtın. Reaksiyon çözücüsünü buharlaştırmak için, reaktör soğuduktan sonra, süpürme hattını açın ve reaksiyon çözücüsünü 100 santigrat derecede buharlaştırın. Reaktör soğuduktan sonra, süpürme hattını kapatın ve giriş MVP pozisyonunu üçüncüye çevirin.Hidroklorik asit asetonitril karışımı eklendiğinde, radyoetiketleme öncüllerindeki tert-bütil ve tert-bütiloksikarbonil koruma gruplarının korumasını gidermek için reaksiyonu 100 santigrat derecede 10 dakika ısıtın. Reaksiyonu nötralize etmek için, reaktör oda sıcaklığına ulaştığında, giriş MVP pozisyonunu dördüncü pozisyona beş konumuna getirin ve reaksiyon karışımına iki molar sodyum hidroksit ekleyin ve giriş MVP argon hattını kapatın. Ardından, çıkış MVP'sini havalandırma konumundan beşinci konuma geçirmek için çıkış MVP'sindeki F düğmesine tıklayarak ve ardından giriş MVP'sini beşinci konumdan altıncı konuma geçirmek için giriş MVP'sindeki F düğmesine tıklayarak reaksiyon karışımını ara dosyaya aktarmaya başlayın.Çıkış MVP argon hattını açtıktan sonra, reaksiyon karışımını istiflenmiş nötr alüminyum oksit ve C8 kartuşlarından HPLC numune döngüsünden önce takılan ara şişeye itin. Reaktörü durulamak için, çıkış MVP pozisyonunu beşten altıncı pozisyona değiştirin, çıkış MVP pozisyonu altıdaki durulama çözeltisini reaksiyon şişesinden, kartuşlardan ve ara şişeden art arda itin. Daha sonra, HPLC döngüsünü enjeksiyon konumundan yük konumuna geçirerek ve giriş MVP argon hattını açarak karışımın saflaştırılmasına başlayın.Karışım beş mililitrelik HPLC döngüsüne yüklendiğinde, Yükle düğmesini Enjekte Et olarak değiştirin, HPLC kromatogramını dakikada üç mililitrelik bir akış hızında başlatmak için HPLC Enjekte Et'i tıklatın ve ardından gerçek zamanlı HPLC kromatogramına erişmek için HPLC İzleyici düğmesini tıklatın. Hedef HPLC kesirini yaklaşık 12 dakika içinde kısa C18 sütununa yönlendirmek için Saptırma MVP düğmesini tıklatın. Hedef radyoaktivite C18 sütununda toplandıktan sonra, dört portlu iki konumlu saptırma vanasını atık toplama konumuna getirin ve küçük D F18 FETrp enantiyomerini ve diğer ultraviyole safsızlıklarını gidermek için kiral kolonu altı dakika boyunca dakikada dört mililitre oranında yıkayın.HPLC mobil fazını dakikada üç mililitrede bir formülasyon MVP konumuna geri yönlendirmek için Saptırma MVP düğmesine tıklayın. Mobil fazın, C18 sütununda tutulan L-F18 FETrp'yi saflaştırmak için kiral kolondan ve C18 sütunundan geçtiğini gözlemleyin. Yaklaşık 32 ila 34 dakikada, hedef fraksiyonu formülasyon MVP pozisyonu iki şişeye toplayın.Ardından, MVP pozisyon iki şişe çözeltisini dağıtım hattından ve steril filtreden son doz şişesine itin. Steril filtreyi çıkardıktan sonra son doz aktivitesini ve hacmini test edin. Sistemi ultra saf su ve ardından yıkama başına en az 15 dakika boyunca dakikada dört mililitre akış hızında etanol ile yıkayın.HPLC pompasını ve PLC kutusunu kapatın, programı kapatın, sıkıştırılmış havayolunu, argon hattını, karbondioksit hattını ve modülün ana gücünü kapatın. Son dozun yaklaşık 0,1 mililitresini QC şişesinin 0,2 mililitrelik bir ucuna çekin. Kısmi sıra programı metin makalesinde açıklandığı için sıcak örneği çalıştırın.Enantiyomerik aşırı değer ve molar aktivitedeki kimyasal ve radyokimyasal saflıkları hesaplayarak QC verilerini analiz edin. pH değerini belirledikten sonra, tüm test sonuçları kabul edilebilir aralığı geçerse dozu bırakın. QC için temsili HPLC kromatogramları gösterilmiştir.Programın 10 dakikasında boşluk hacmi arasındaki önemsiz pikler boş kromatogramda tespit edildi. Radyo-etiketli olmayan standart referans L-floroetil-tripofan, D muadilinin standart referansından iyi ayrılmış tek bir izomerin varlığını gösterdi. L-F18 triptofanın son dozu yüksek kimyasal saflık ve radyokimyasal saflık gösterdi.Nihai ürünün sekiz saate kadar en yüksek doz konsantrasyonunda stabilite testi, L-F18 triptofanın kimyasal saflık, radyokimyasal saflık, enantiyomerik fazlalık ve pH değeri açısından kararlı olduğunu göstermiştir. %95'ten büyük kimyasal ve radyokimyasal saflıklar bu protokol kullanılarak elde edilmiştir. İzleyici saflaştırma için iki sütun kullanılır.Kimyasal safsızlıkları gidermek için C18 sütununa geçmeyi unutmayın. Bu yöntemi, flor-18 etiketli triptofan radyotracer'in klinik üretimine hızlı bir şekilde uyarlayabiliriz.

Research

JoVE Journal

Chemistry

Radiosynthesis of 1-(2-[18F]Fluoroethyl)-L-Tryptophan using a One-pot, Two-step Protocol

A Simple and Rapid Protocol for Measuring Neutral Lipids in Algal Cells Using Fluorescence

Floresan kullanma Alg hücrelerinde nötral Lipidler Ölçüm Basit ve Hızlı Protokolü

Algae are considered excellent candidates for renewable fuel sources due to their natural lipid storage capabilities. Robust monitoring of algal ...

The Bioconjugation and Radiosynthesis of 89Zr-DFO-labeled Antibodies

The Bioconjugation and Radiosynthesis of 89Zr-DFO-labeled Antibodies

Bioconjugation ve radiosynthesis<sup&gt; 89</sup&gt;, Zr-DFO-etiketli antikorlar

The exceptional affinity, specificity, and selectivity of antibodies make them extraordinarily attractive vectors for tumor-targeted PET ...

A Protocol for the Production of Gliadin-cyanoacrylate Nanoparticles for Hydrophilic Coating

Hidrofilik Kaplama için Gliadin-siyanoakrilat Nanopartiküller Üretimi için Protokol

This article presents a protocol for the production of protein-based nanoparticles that changes the hydrophobic surface to hydrophilic by a simple spray ...

A Protocol for Safe Lithiation Reactions Using Organolithium Reagents

Organolityum Reaktifleri kullanarak Güvenli litiasyon Reaksiyonlar için Protokol

Organolithium reagents are powerful tools in the synthetic chemist&#39;s toolbox. However, the extreme pyrophoric nature of the most reactive reagents ...

An Optimized Protocol for the Efficient Radiolabeling of Gold Nanoparticles by Using a 125I-labeled Azide Prosthetic Group

An Optimized Protocol for the Efficient Radiolabeling of Gold Nanoparticles by Using a 125I-labeled Azide Prosthetic Group

Bir Kullanarak Altın Nanopartiküller Verimli Radyoaktif bir Optimize Protokolü<sup&gt; 125</sup&gt; I-etiketli Azid Protez Grubu

Here, we demonstrate a detailed protocol for the radiosynthesis of a 125I-labeled azide prosthetic group and its application to the efficient ...

A Protocol for Electrochemical Evaluations and State of Charge Diagnostics of a Symmetric Organic Redox Flow Battery

Elektrokimyasal Değerlendirmeleri ve Simetrik Organik Redoks Akış Pil Şarj Diagnostics Devlet için Protokol

Redox flow batteries have been considered as one of the most promising stationary energy storage solutions for improving the reliability of the power grid ...

One-pot Microwave-assisted Conversion of Anomeric Nitrate-esters to Trichloroacetimidates

One-pot mikrodalga destekli dönüşüm anomerik nitrat-esterleri Trichloroacetimidates

The goal of the following procedure is to provide a demonstration of the one-pot conversion of a 2-azido-1-nitrate-ester to a trichloroacetimidate ...

The MPLEx Protocol for Multi-omic Analyses of Soil Samples

Toprak örnekleri Multi-omic analizleri için karmaşık iletişim kuralı

Mass spectrometry (MS)-based integrated metaproteomic, metabolomic, and lipidomic (multi-omic) studies are transforming our ability to understand and ...

Separation of Aldehydes and Reactive Ketones from Mixtures Using a Bisulfite Extraction Protocol

Aldehitler ve ketonlar reaktif ayrılması Bisülfit ayıklama protokolü kullanılarak karışımları

The purification of organic compounds is an essential component of routine synthetic operations. The ability to remove contaminants into an aqueous layer ...

A Two-Step Protocol for Umpolung Functionalization of Ketones Via Enolonium Species

Ketonlar ile Enolonium türler Umpolung Functionalization için bir iki adım iletişim kuralı

&#945;-Functionalization of ketones via umpolung of enolates by hypervalent iodine reagents is an important concept in synthetic organic chemistry. ...