Name: monitoring breast cancer growth and metastatic colony formation in mice using bioluminescence
Uploaded: 2021-11-05T13:00:00
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Y.D.S.研究室のメンバーの皆様に感謝いたします。エルサレムのハダサ医療センターのWohl Institute for Translational Medicineが、小動物イメージング施設を提供してくれたことに感謝します。この研究は、イスラエルがん 研究基金のリサーチキャリア開発賞 の支援を受けた。

全てのマウス実験は、ヘブライ大学施設動物管理・使用委員会承認プロトコールMD-21-16429-5の下で実施した。さらに、ヘブライ大学は、実験動物ケアの評価と認定のための協会(AAALAC)によって認定されています。
1. 細胞株のメンテナンス
注:ヒト乳癌細胞株(MCF-7、MDA-MB-468、およびMDA-MB-231)をこのプロトコールで使用した。
<ol><li>全ての乳癌細胞株をダ...

<ol>
	<li>Waks, A. G., Winer, E. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Breast+cancer+treatment:+A+review.">Breast cancer treatment: A review.</a> JAMA. 321 (3), 288-300 (2019).</li><li>Jin, X., Mu, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+breast+cancer+metastasis.">Targeting breast cancer metastasis.</a> Breast Cancer: Basic and Clinical Research. 9, 23-34 (2015).</li><li>Saha, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+bioluminescence+imaging+of+tumor+hypoxia+dynamics+of+breast+cancer+brain+metastasis+in+a+mouse+model.">In vivo bioluminescence imaging of tumor hypoxia dynamics of breast cancer brain metastasis in a mouse model.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (56), e3175 (2011).</li><li>Rashid, O. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Is+tail+vein+injection+a+relevant+breast+cancer+lung+metastasis+model.">Is tail vein injection a relevant breast cancer lung metastasis model.</a> Journal of Thoracic Disease. 5 (4), 385-392 (2013).</li><li>Fantozzi, A., Christofori, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+models+of+breast+cancer+metastasis.">Mouse models of breast cancer metastasis.</a> Breast Cancer Research. 8 (4), 212 (2006).</li><li>Kocat&#252;rk, B., Versteeg, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+injection+of+breast+cancer+cells+into+the+mammary+fat+pad+of+mice+to+study+tumor+growth.">Orthotopic injection of breast cancer cells into the mammary fat pad of mice to study tumor growth.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (96), e51967 (2015).</li><li>Baker, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+whole+picture.">The whole picture.</a> Nature. 463 (7283), 977-979 (2010).</li><li>Wang, Y., Tseng, J. -. C., Sun, Y., Beck, A. H., Kung, A. 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V., Liu, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+orthotopic+mouse+model+of+spontaneous+breast+cancer+metastasis.">An orthotopic mouse model of spontaneous breast cancer metastasis.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (114), (2016).</li><li>Morten, B. C., Scott, R. J., Avery-Kiejda, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+Three+Different+Methods+for+Determining+Cell+Proliferation+in+Breast+Cancer+Cell+Lines.">Comparison of Three Different Methods for Determining Cell Proliferation in Breast Cancer Cell Lines.</a> Journal of Visualized Experiments. (115), e54040 (2016).</li><li>Zimmerman, M., Hu, X., Liu, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+metastasis+and+CTL+adoptive+transfer+immunotherapy+mouse+model.">Experimental metastasis and CTL adoptive transfer immunotherapy mouse model.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (45), e2077 (2010).</li><li>Lv, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+transplantation+of+breast+tumors+as+preclinical+models+for+breast+cancer.">Orthotopic transplantation of breast tumors as preclinical models for breast cancer.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (159), e61173 (2020).</li><li>Cheng, R. Y. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studying+triple+negative+breast+cancer+using+orthotopic+breast+cancer+model.">Studying triple negative breast cancer using orthotopic breast cancer model.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (157), e60316 (2020).</li><li>Bajikar, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor-suppressor+inactivation+of+GDF11+occurs+by+precursor+sequestration+in+triple-negative+breast+cancer.">Tumor-suppressor inactivation of GDF11 occurs by precursor sequestration in triple-negative breast cancer.</a> Developmental Cell. 43 (4), 418-435 (2017).</li><li>Khatib, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+glutathione+peroxidase+8+(GPX8)/IL-6/STAT3+axis+is+essential+in+maintaining+an+aggressive+breast+cancer+phenotype.">The glutathione peroxidase 8 (GPX8)/IL-6/STAT3 axis is essential in maintaining an aggressive breast cancer phenotype.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 117 (35), 21420-21431 (2020).</li></ol>

動物ベースの実験は、癌研究7、8、9のために必須であり、そして実際に多くのプロトコルが開発されている3、6、10、11、12、13、14。しかし、これら...

乳がんは世界中で頻繁に発生するがんであり、米国では毎年約25万件の新規症例が診断されています1。その高い発生率にもかかわらず、抗がん剤の新しいセットは乳がん患者の転帰を有意に改善しました2。しかし、多くの患者が疾患の再発を経験し、患者の罹患率および死亡率の主な原因である重要な臓器2への転移性転移を経験するため、これらの治療は依然として不十分である。したがって、乳がん研究における主な課題の1つは、遠位転移の形成を調節する分子メカニズムを同定し、その発生を抑制する新しい手段を開発することである。
がん転移は、細胞が原発巣から剥離し、血液循環を介して隣接する組織に侵入する動的プロセスである。したがって、細胞が同様の転移性カスケードを受ける動物モデルは、このプロセス3、4を支配する機構の同定を容易にすることができる。さらに、これらの in vivo モデルは、乳癌治療剤5、6の開発に不可欠である。しかしながら、これらの同所性モデルは、効果が終了時にのみ決定されるため、実際の腫瘍増殖動態を示すことはできない。そこで、腫瘍の発生と転移性コロニー形成をリアルタイムで検出するルシフェラーゼベースのツールを確立しました。さらに、これらの細胞はGFPを発現し、転移性コロニーを検出する。このアプローチは比較的単純であり、侵襲的な処置を伴わない3。したがって、ルシフェラーゼと蛍光検出を組み合わせることは、乳がん治療薬および疾患管理の前臨床試験を進めるための有用な戦略である。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1.7 mL eppendorf tubes</td>
			<td>Lifegene</td>
			<td>LMCT1.7B-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 &#181;L tips</td>
			<td>Lifegene</td>
			<td>LRT10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1000 &#181;L tips</td>
			<td>Lifegene</td>
			<td>LRT1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 mL tubes</td>
			<td>Lifegene</td>
			<td>LTB15-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>200 &#181;L tips</td>
			<td>Lifegene</td>
			<td>LRT200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6 well cell culture plate</td>
			<td>COSTAR</td>
			<td>3516</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96 well Plates BLACK flat bottom</td>
			<td>Bar Naor</td>
			<td>BN30496</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automated Cell Counters</td>
			<td>Thermofisher</td>
			<td>A50298</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD FACSAria III sorter</td>
			<td>BD</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Microlance 3 Needles 27 G (3/4&#39;&#39;)</td>
			<td>BD</td>
			<td>302200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Plastipak Syringes 1 mL x 120</td>
			<td>BD</td>
			<td>303172</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning 100 mm x 20 mm Style Dish</td>
			<td>CORNING</td>
			<td>430167</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning 150 mm x 20 mm Style Dish</td>
			<td>CORNING</td>
			<td>430599</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Countess cell counting chamber slides</td>
			<td>Thermofisher</td>
			<td>C10228</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s modified Eagle&#39;s medium (DMEM), high glucose, no glutamine</td>
			<td>Biological Industries</td>
			<td>01-055-1A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eclipse 80i microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>eppendorf Centrifuge 5810 R</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>EP5820740000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td>Biological Industries</td>
			<td>04-127-1A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FUW GFP</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Gifted from Dr. Yossi Buganim&#39;s lab (Hebrew University of Jerusalem)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEK293T</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Gifted from Dr. Lior Nissim&#39;s lab (Hebrew University of Jerusalem)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane, USP Terrell</td>
			<td>Piramal</td>
			<td>NDC 66794-01-25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IVIS Spectrum In Vivo Imaging System</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>124262</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-Glutamine Solution</td>
			<td>Biological industries</td>
			<td>03-020-1A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Living Image Software</td>
			<td>PerkinElmer</td>
			<td></td>
			<td>bioluminescence measurement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MCF-7</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>ATCC HTB-22</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MDA-MB-231</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>ATCC HTB-26</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MDA-MB-468</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>ATCC HTB-132</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pasteur pipettes</td>
			<td>NORMAX</td>
			<td>2430-475</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Hylabs</td>
			<td>BP655/500D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pCMV-dR8.2-dvpr</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>#8455</td>
			<td>Provided by David M. Sabatini&#8217;s lab (Whitehead institute, Boston, USA)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pCMV-VSV-G</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>#8454</td>
			<td>Provided by David M. Sabatini&#8217;s lab (Whitehead institute, Boston, USA)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin Solution</td>
			<td>Biological Industries</td>
			<td>03-031-1B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish 90 mm (90x15)</td>
			<td>MINI PLAST</td>
			<td>820-090-01-017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettes 10ml</td>
			<td>Lifegene</td>
			<td>LG-GSP010010S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettes 25ml</td>
			<td>Lifegene</td>
			<td>LG-GSP010050S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettes 5ml</td>
			<td>Lifegene</td>
			<td>LG-GSP010005S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pLX304 Luciferase-V5 blast plasmid</td>
			<td>Addgene</td>
			<td>#98580</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polybrene</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>#107689</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prism 9</td>
			<td>GraphPad</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reagent Reservoirs</td>
			<td>Bar Naor</td>
			<td>BN20621STR200TC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SMZ18 Stereo microscopes</td>
			<td>Nikon</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride</td>
			<td>Bio-Lab</td>
			<td>190359400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe filters</td>
			<td>Lifegene</td>
			<td>LG-FPV403030S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan Blue 0.5% solution</td>
			<td>Biological industries</td>
			<td>03-102-1B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin EDTA Solution B (0.25%), EDTA (0.05%)</td>
			<td>Biological Industries</td>
			<td>03-052-1a</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum driven Filters</td>
			<td>SOFRA LIFE SCIENCE</td>
			<td>SPE-22-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Virusolve</td>
			<td></td>
			<td>disinfectant</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VivoGlo Luciferin, In Vivo Grade</td>
			<td>Promega</td>
			<td>P1043</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>X-tremeGENE HP DNA Transfection Reagent</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>#6366236001</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

monitoring breast cancer growth and metastatic colony formation in mice using bioluminescence

乳癌は、頻繁な不均一な悪性腫瘍であり、主に遠隔臓器転移による女性の死亡原因の第2位である。癌細胞が乳腺脂肪パッドに注入される広く使用されている同所性マウスモデルを含む、いくつかの動物モデルが作製されている。しかし、これらのモデルは、腫瘍増殖動態および転移性コロニー形成のモニタリングには役立たない。マウスのがん細胞をリアルタイムでモニタリングする最先端のツールは、腫瘍生物学の理解を大きく前進させるでしょう。 
ここでは、ルシフェラーゼおよび緑色蛍光タンパク質(GFP)を安定に発現する乳癌細胞株が樹立された。具体的には、この技術は、 インビトロで ルシフェラーゼ活性を測定することによって開始され、続いて非肥満糖尿病重症複合免疫不全(NOD-SCID)マウスの乳腺脂肪パッドへの癌細胞の移植によって開始される2つの逐次ステップを含む。注射後、腫瘍増殖および転移性コロニー形成の両方が、非侵襲的生物発光画像化システムによってリアルタイムでモニターされる。次いで、肺におけるGFP発現転移の定量を蛍光顕微鏡により調べ、観察された生物発光結果を検証する。ルシフェラーゼと蛍光ベースの検出ツールを組み合わせたこの洗練されたシステムは、乳がんの治療や疾患管理に使用できる大きな可能性を秘めた 、生体内で のがん転移を評価します。

GFPおよびルシフェラーゼベクターを発現する乳癌細胞株(MDA-MB-231、MCF-7、およびMDA-MB-468)を作製した。具体的には、これは逐次感染によって達成された。まず、乳癌細胞株を、蛍光GFPを発現するレンチウイルスベクターに感染させた。GFP陽性細胞(GFP+)を感染後2日目に選別し(図1A、B)、pLX304ルシフェラーゼ-V5ベクターに感染させた。次いで、ブラストサ...

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Monitoring Breast Cancer Growth and Metastatic Colony Formation in Mice using Bioluminescence

ここでは、種々の乳癌細胞株におけるルシフェラーゼおよび緑色蛍光タンパク質発現を伴う非侵襲的モニタリング法について説明する。このプロトコルは、マウスにおける腫瘍形成および転移性コロニー形成をリアルタイムでモニターする技術を提供する。

生物発光を用いたマウスにおける乳がん増殖および転移性コロニー形成のモニタリング

Breast cancer is a frequent heterogeneous malignancy and the second leading cause of mortality in women, mainly due to distant organ metastasis. Several ...

この洗練された非侵襲的なツールを使用すると、乳がんの治療と疾患管理に大きな可能性を秘めたマウスの腫瘍増殖動態と転移性コロニー形成をリアルタイムで監視できます。ルシフェラーゼと蛍光検出を組み合わせることは、乳がんの進行と疾患管理の前臨床試験を進めるのに役立つ戦略です。これは抗がん剤研究に適用することができます。このプロトコルは乳がんに限定されず、肺や膵臓などの他のがん腫にも適用できます。MCF-7、MDA-MB-468、およびMDA-MB-231 GFPおよびルシフェラーゼ陽性細胞を16センチメートルプレート中で別々に80%コンフルエントになるまで増殖させることから始めます。トリプシン処理により細胞を回収した後、各ウェルで増加した数の細胞を黒い96ウェルプレートに播種する。その後、すべてのウェルを100マイクロリットルのDMEMで満たし、摂氏37度、5%CO2インキュベーターで16〜24時間インキュベートします。PBS中のルシフェリン溶液を1ミリリットル当たり1.5ミリグラムの濃度で調製し、その溶液を摂氏マイナス20度で保存する。インキュベーション後、細胞をPBSで1回穏やかに洗浄してから、100マイクロリットルのルシフェリン溶液を各ウェルに加える。2分間待ってから、生物発光を用いて全ての乳癌細胞におけるルシフェラーゼ活性を測定した。マウスを注射する前に、500万個のMCF-7およびMDA-MB-468細胞を200マイクロリットルのPBSに、200万個のMDA-MB-231 GFPおよびルシフェラーゼ陽性細胞を100マイクロリットルのPBSに移した。麻酔をかけられたマウスを注射用に準備するには、円錐形を仰臥位で頭の上に置きます。次に、乳腺の上のマウスの腹部を綿棒を用いてエタノールで拭き取り、第4の乳腺を鉗子で持ち上げてから、脂肪パッドの下に27ゲージの針を挿入し、調製した細胞懸濁液100マイクロリットルをゆっくりと注入する。注射後、マウスをフードから取り出し、意識に戻るまで観察中の新しいケージに移します。生物発光検出の前に、左手で首を持ち、手を左に傾けて意識のあるマウスを拘束し、下半身を仰臥位に置いたマウスの顔を上向きにします。1ミリリットルのシリンジを用いて、100マイクロリットルの30ミリグラム/ミリリットルのルシフェリンをマウスの左下腹部象限に腹腔内に注入する。麻酔なしでマウスを7分間保持し、続いて腫瘍動態を測定する前に麻酔チャンバー内で3分間保持する。マウスがインキュベーションされている間に、ソフトウェアを開き、[初期化]ボタンをクリックしてイメージングシステムを初期化します。セットアップを自動露出に保ち、自動で露光時間を60秒にし、f / stop oneの開口部で媒体をビニングし、励起フィルタをブロックし、発光フィルタを開きます。初期化が終了したら、[イメージング ウィザード] と [生物発光] を選択し、[次へ]、[フィルターを開く] の順にクリックして、画像の被写体でマウスを選択します。フィールド ビューで、ステージ C を 10 cm で、被写体の高さを 1.50 cm で選択します。次に、「イメージ・セットアップ・ステージ」をクリックして C.ドアを閉じて「取得」ボタンをクリックする前に、マウスがステージ上に適切な仰臥位に置かれていることを確認してください。画面に画像が表示されるのを待ちます。もう一方のマウスについてもこの手順を繰り返します。肺転移を検出するには、原発巣の強い信号を厚紙の厚紙で覆い、肺の腹側だけをカメラに向かって露出させます。前述ののと同じパラメーターを使用してイメージをキャプチャします。乳癌細胞株を蛍光GFPを発現するレンチウイルスベクターに感染させ、FACソーティングに供した。GFP陽性細胞を感染後2日目に選別し、播種し、蛍光顕微鏡により可視化した。インビトロルシフェラーゼ活性を、ルシフェラーゼ活性レベルの細胞数依存的な増加で確認した。さらに、ルシフェラーゼ活性と細胞数との間に線形相関が見出された。乳癌細胞株を注入した後、マウスを2週間ごとに生物発光読み取りに供し、腫瘍増殖動態を決定した。腫瘍増殖動態は、MDA-MB-231細胞株の方が、攻撃性の低い細胞株MCF-7およびMDA-MB-468よりも速かった。発光活性を3つの細胞株について定量した。注射後6週間で、採取された腫瘍はGFP発現を維持していることが判明した。また、陽性の生物発光測定値は、マウス全体の肺からリアルタイムで得られた。肺を採取して陽性転移コロニーを確認し、転移コロニーをGFPおよび生物発光について観察した。注射手順を実行する際に注意することがより重要です。不適切な注射は、腫瘍の増殖速度または腫瘍の不在の偏差につながる可能性がある。GFP発現を検出することで、生体内および生体外で肺転移を調べることができます。また、免疫組織化学に基づく染色による肺の組織病理学の研究も可能です。この技術は、薬物有効性試験の効果などの新しい疑問を探求するのに有用であり得る。

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Utilizing Functional Genomics Screening to Identify Potentially Novel Drug Targets in Cancer Cell Spheroid Cultures

癌細胞スフェロイド培養における潜在的に新規薬剤標的を同定するためのスクリーニング機能ゲノミクスを利用

The identification of functional driver events in cancer is central to furthering our understanding of cancer biology and indispensable for the discovery ...

Labeling of Breast Cancer Patient-derived Xenografts with Traceable Reporters for Tumor Growth and Metastasis Studies

腫瘍の増殖と転移研究のためのトレーサブル記者との乳癌患者由来の異種移植片の標識

The use of preclinical models to study tumor biology and response to treatment is central to cancer research. Long-established human cell lines, and many ...

Ultrasonographic Evaluation of Breast Cancer-related Lymphedema

乳がん関連リンパ浮腫の超音波評価

Lymphedema is one of the most common complications after breast cancer surgery. There are many diagnostic tools for lymphedema, but no standard method yet ...

Practical Considerations in Studying Metastatic Lung Colonization in Osteosarcoma Using the Pulmonary Metastasis Assay

肺転移アッセイを用いた骨肉腫の肺転移を植民地化の勉強に実用的な考慮事項

The pulmonary metastasis assay (PuMA) is an ex vivo lung explant and closed cell culture system that permits researchers to study the biology of lung ...

Preclinical Assessment of the Bioactivity of the Anticancer Coumarin OT48 by Spheroids, Colony Formation Assays, and Zebrafish Xenografts

回転楕円体、コロニー形成アッセイとゼブラフィッシュ異種移植片による抗癌性クマリン OT48 の生物活性の臨床評価

In vitro and in vivo pre-clinical screening of novel therapeutic agents are an essential tool in cancer drug discovery. Although human cancer cell lines ...

Orthotopic Injection of Breast Cancer Cells into the Mice Mammary Fat Pad

マウス乳腺の脂肪パッドに乳癌細胞の同所性同種注入

A proper animal model is crucial for a better understanding of diseases. Animal models established by different methods (subcutaneous injections, ...

Performing Data Mining And Integrative Analysis Of Biomarker in Breast Cancer Using Multiple Publicly Accessible Databases

複数の公的にアクセス可能なデータベースを用いた乳癌におけるバイオマーカーのデータマイニングと統合的解析の実行

In recent years, emerging databases were designed to lower the barriers for approaching the intricate cancer genomic datasets, thereby, facilitating ...

In Vivo Inhibition of MicroRNA to Decrease Tumor Growth in Mice

マウスの腫瘍増殖を減少させるマイクロRNAの生体内阻害

MicroRNAs (miRNAs) are important regulators of gene expression through their ability to destabilize mRNA and inhibit translation of target mRNAs. An ...

Studying Triple Negative Breast Cancer Using Orthotopic Breast Cancer Model

交感性乳癌モデルを用いたトリプルネガティブ乳癌の研究

Triple-negative breast cancer (TNBC) is an aggressive breast cancer subtype with limited therapeutic options. When compared to patients with less ...

Combined Use of Tail Vein Metastasis Assays and Real-Time In Vivo Imaging to Quantify Breast Cancer Metastatic Colonization and Burden in the Lungs

尾静脈転移アッセイとリアルタイムインビボイメージングの併用による乳癌転移性コロニー形成と肺の負担の定量化

Metastasis is the main cause of cancer-related deaths and there are limited therapeutic options for patients with metastatic disease. The identification ...