Name: transverse fracture of the mouse femur with stabilizing pin
Uploaded: 2021-12-29T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Transverse Fracture of the Mouse Femur with Stabilizing Pin at JoVE.com

Wir danken Dr. Vicki Rosen für die finanzielle Unterstützung und Begleitung des Projekts. Wir möchten uns auch bei den Veterinär- und IACUC-Mitarbeitern der Harvard School of Medicine für die Beratung in Bezug auf die Steriltechnik, das Wohlergehen der Tiere und die Materialien, die zur Entwicklung dieses Protokolls verwendet wurden, bedanken.

Alle beschriebenen Tierversuche wurden vom Institutional Animal Care and Use Committee der Harvard Medical Area genehmigt. In diesem Protokoll wurden 12 Wochen alte C57BL/6J-Mäuse (Männchen und Weibchen) verwendet. C57BL/6J männliche und weibliche Mäuse erreichen eine maximale Knochenmasse im Alter von etwa 12 Wochen mit Oberschenkelknochen, die breit genug sind, um einen stabilisierenden Stift unterzubringen, was sie zu einer geeigneten Belastung für dieses Protokoll15 macht.
<p class="j...

<ol>
	<li>Black, D. M., Rosen, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postmenopausal+osteoporosis.">Postmenopausal osteoporosis.</a> The New England Journal of Medicine. 374, 2096-2097 (2016).</li><li>Curtis, E. M., Moon, R. J., Harvey, N. C., Cooper, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+fragility+fracture+and+approaches+to+osteoporosis+risk+assessment+worldwide.">The impact of fragility fracture and approaches to osteoporosis risk assessment worldwide.</a> Bone. 104, 29-38 (2017).</li><li>Laurent, M. R., Dedeyne, L., Dupont, J., Mellaerts, B., Dejaeger, M., Gielen, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+bone+loss+and+sarcopenia+in+men.">Age-related bone loss and sarcopenia in men.</a> Maturitas. 122, 51-56 (2019).</li><li>NOF - Just for men. National Osteoporosis Foundation Available from: <a target="_blank" href="https://cdn.nof.org/wp-content/uploads/2015/12/Osteoporosis-Fast-Facts.pdf">https://cdn.nof.org/wp-content/uploads/2015/12/Osteoporosis-Fast-Facts.pdf</a> (2019)</li><li>Williams, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Economic+burden+of+osteoporotic+fractures+in+US+managed+care+enrollees.">Economic burden of osteoporotic fractures in US managed care enrollees.</a> The American Journal of Managed Care. 26, 142-149 (2020).</li><li>Sheen, J. R., Garla, V. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fracture+healing+overview.">Fracture healing overview.</a> StatPearls. , (2021).</li><li>Holmes, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Closing+the+gap.">Closing the gap.</a> Nature. 550, 194-195 (2017).</li><li>Duchamp de Lageneste, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Periosteum+contains+skeletal+stem+cells+with+high+bone+regenerative+potential+controlled+by+Periostin.">Periosteum contains skeletal stem cells with high bone regenerative potential controlled by Periostin.</a> Nature Communications. 9, 773 (2018).</li><li>Bahney, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+biology+of+fracture+healing.">Cellular biology of fracture healing.</a> Journal of Orthopaedic Research. 37, 35-50 (2019).</li><li>Li, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fracture+repair+requires+TrkA+signaling+by+skeletal+sensory+nerves.">Fracture repair requires TrkA signaling by skeletal sensory nerves.</a> Journal of Clinical Investigation. 129, 5137-5150 (2019).</li><li>Colnot, C., Thompson, Z., Miclau, T., Werb, Z., Helms, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+fracture+repair+in+the+absence+of+MMP9.">Altered fracture repair in the absence of MMP9.</a> Development. 130, 4123-4133 (2003).</li><li>Bonnarens, F., Einhorn, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+a+standard+closed+fracture+in+laboratory+animal+bone.">Production of a standard closed fracture in laboratory animal bone.</a> Journal of Orthopaedic Research. 2, 97-101 (1984).</li><li>Hu, K., Olsen, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoblast-derived+VEGF+regulates+osteoblast+differentiation+and+bone+formation+during+bone+repair.">Osteoblast-derived VEGF regulates osteoblast differentiation and bone formation during bone repair.</a> Journal of Clinical Investigation. 126, 509-526 (2016).</li><li>Collier, C. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+a+reproducible+model+of+fracture+healing+in+mice+using+an+open+femoral+osteotomy.">Characterization of a reproducible model of fracture healing in mice using an open femoral osteotomy.</a> Bone Reports. 12, 100250 (2020).</li><li>Glatt, V., Canalis, E., Stadmeyer, L., Bouxsein, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-related+changes+in+trabecular+architecture+differ+in+female+and+male+C57BL/6J+mice.">Age-related changes in trabecular architecture differ in female and male C57BL/6J mice.</a> Journal of Bone and Mineral Research. 22, 1197-1207 (2007).</li><li>Garcia, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+technique+for+internal+fixation+of+femoral+fractures+in+mice:+impact+of+stability+on+fracture+healing.">A new technique for internal fixation of femoral fractures in mice: impact of stability on fracture healing.</a> Journal of Biomechanics. 41, 1689-1696 (2008).</li><li>Holstein, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+the+establishment+of+defined+mouse+models+for+the+study+of+fracture+healing+and+bone+regeneration.">Advances in the establishment of defined mouse models for the study of fracture healing and bone regeneration.</a> Journal of Orthopaedic Trauma. 23, 31-38 (2009).</li><li>Garcia, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+animal+models+of+delayed+bone+healing+and+non-union+formation:+a+comprehensive+review.">Rodent animal models of delayed bone healing and non-union formation: a comprehensive review.</a> European Cells &amp; Materials. 26 (1-12), 12-14 (2013).</li><li>Histing, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+analysis+of+rotational+stiffness+of+different+osteosynthesis+techniques+in+mouse+femur+fracture.">Ex vivo analysis of rotational stiffness of different osteosynthesis techniques in mouse femur fracture.</a> Journal of Orthopaedic Research. 27, 1152-1156 (2009).</li><li>Williams, J. N., Li, Y., Valiya Kambrath, A., Sankar, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Generation+of+closed+femoral+fractures+in+mice:+A+model+to+study+bone+healing.">The Generation of closed femoral fractures in mice: A model to study bone healing.</a> Journal of Visualized Experiments. (138), e58122 (2018).</li><li>Haffner-Luntzer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+mouse+model+to+study+fracture+healing+of+the+proximal+femur.">A novel mouse model to study fracture healing of the proximal femur.</a> Journal of Orthopaedic Research. 38, 2131-2138 (2020).</li></ol>

Das in diesem Protokoll beschriebene Verletzungsmodell umfasst alle vier signifikanten Schritte, die während der Heilung spontaner Frakturen beobachtet wurden, einschließlich (1) entzündungsfördernder Reaktion mit der Bildung des Hämatoms, (2) Rekrutierung von Skelettvorläufern aus dem Periost zur Bildung des weichen Kallus, (3) Mineralisierung des Kallus durch Osteoblasten und (4) Umbau des Knochens durch Osteoklasten.
Der in diesem Manuskript beschriebene chirurgische Eingriff ist für...

Frakturen, Brüche in der Kontinuität der Knochenoberfläche, treten in allen Segmenten der Bevölkerung auf. Sie werden bei Menschen, die aufgrund von Alterung oder Krankheit zerbrechliche Knochen haben, schwer, und die Gesundheitskosten von Fragilitätsfrakturen werden in 5 Jahren voraussichtlich 25 Milliarden US-Dollar übersteigen 1,2,3,4,5. Das Verständnis der biologischen Mechanismen, die an der Frakturreparatur beteiligt sind, wäre ein Ausgangspunkt für die Entwicklung neuer Therapien, die darauf abzielen, den Heilungsprozess zu verbessern. Frühere Forschungen haben gezeigt, dass bei einer Fraktur vier signifikante Schritte auftreten, die es dem Knochen ermöglichen, zu heilen: (1) Bildung des Hämatoms; (2) Bildung eines fibroknorpeligen Kallus; (3) Mineralisierung des weichen Kallus zur Bildung von Knochen; und (4) Umbau des verheilten Knochens 6,7. Viele biologische Prozesse werden aktiviert, um die Fraktur erfolgreich zu heilen. Zunächst wird unmittelbar nach einer Fraktur eine akute entzündungsfördernde Reaktion eingeleitet 6,7. Dann wird das Periost aktiviert und dehnt sich aus, und periostale Zellen differenzieren sich in Chondrozyten, um einen Knorpelkallus zu bilden, der wächst, um die Lücke zu füllen, die die gestörten Knochensegmente hinterlassen 6,7,8,9. Nerven- und Gefäßzellen dringen in den neu gebildeten Kallus ein, um zusätzliche Zellen und Signalmoleküle bereitzustellen, die zur Erleichterung der Reparaturbenötigt werden 6,7,8,9,10. Periostatale Zellen tragen nicht nur zur Bildung von Kallusen bei, sondern differenzieren sich auch zu Osteoblasten, die gewebten Knochen im überbrückenden Kallus ablegen. Schließlich bauen Osteoklasten den neu gebildeten Knochen um, um zu seiner ursprünglichen Form und lamellären Strukturzurückzukehren 7,8,9,10,11. Viele Gruppen entwickelten Mausmodelle zur Frakturreparatur. Eines der früheren und am häufigsten verwendeten Frakturmodelle bei Mäusen ist der Einhorn-Ansatz, bei dem ein Gewicht ab einer bestimmten Höhe12 auf das Bein fällt. Die mangelnde Kontrolle über den Winkel und die Kraft, die angewendet wird, um die Fraktur zu induzieren, erzeugt eine große Variabilität in der Lage und Größe der Knochendiskontinuität. Anschließend führt dies zu Variationen in der beobachteten spezifischen Frakturheilungsreaktion. Andere beliebte Ansätze sind chirurgische Eingriffe zur Erzeugung eines tibialen monokortikalen Defekts oder Stressfrakturen, Verfahren, die vergleichsweise mildere Heilungsreaktionen induzieren10,13. Die Variabilität in diesen Modellen ist in erster Linie auf die Person zurückzuführen, die das Verfahren durchführt14.
Hier ermöglicht ein detailliertes Maus-Femurverletzungsmodell die Kontrolle über den Bruch, um eine reproduzierbare Verletzung zu ermöglichen und eine quantitative und qualitative Bewertung der Femurfrakturreparatur zu ermöglichen. Insbesondere wird ein vollständiger Durchbruch in den Oberschenkelknochen erwachsener Mäuse eingeführt und stabilisiert die Frakturenden, um die Rolle der körperlichen Belastung bei der Knochenheilung zu berücksichtigen. Die Methoden zur Gewebeentnahme und Bildgebung der verschiedenen Schritte des Heilungsprozesses mittels Histologie und Mikrocomputertomographie (MikroCT) werden ebenfalls ausführlich erläutert.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>23 G x 1 TW IM (0.6 mm x 2 5mm) needle</td>
			<td>BD precision</td>
			<td>305193</td>
			<td>Use as guide needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27 G x 1 &#188; (0.4 mm x 30 mm)</td>
			<td>BD precision</td>
			<td>305136</td>
			<td>Use as stabilizing pin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>9 mm wound autoclip applier/remover/clips kit</td>
			<td>Braintree Scientific, INC</td>
			<td>ACS-KIT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcian Blue 8 GX</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>10350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ammonium hydroxide</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>AX1303</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Circular blade X926.7 THIN-FLEX</td>
			<td>Abrasive technologies</td>
			<td>CELBTFSG633</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DREMEL 7700-1/15, 7.2 V Rotary Tool Kit</td>
			<td>Dremel</td>
			<td>7700 1/15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eosin Y</td>
			<td>ThermoScientific</td>
			<td>7111</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine curved dissecting forceps</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82027-406</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxulin Gill 2</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>GHS216</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hydrochloric acid</td>
			<td>Millipore Sigma</td>
			<td>HX0603-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>07-893-1389</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgical kit</td>
			<td>VWR</td>
			<td>95042-540</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Orange G</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>1625</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phloxine B</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>P4030</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone-Iodine Swabs</td>
			<td>PDI</td>
			<td>S23125</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SCANCO Medical &#181;CT35</td>
			<td>Scanco</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slow-release buprenorphine</td>
			<td>Zoopharm</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

transverse fracture of the mouse femur with stabilizing pin

Die Frakturreparatur ist eine wesentliche Funktion des Skeletts, die in vitro nicht zuverlässig modelliert werden kann. Ein Mausverletzungsmodell ist ein effizienter Ansatz, um zu testen, ob ein Gen, ein Genprodukt oder ein Medikament die Knochenreparatur beeinflusst, da murine Knochen die während der menschlichen Frakturheilung beobachteten Stadien rekapitulieren. Wenn eine Maus oder ein Mensch einen Knochen bricht, wird eine Entzündungsreaktion ausgelöst, und das Periost, eine Stammzellnische, die den Knochen selbst umgibt, wird aktiviert und expandiert. Zellen, die sich im Periost befinden, differenzieren sich dann zu einem vaskularisierten weichen Kallus. Der Übergang vom weichen Kallus zu einem harten Kallus erfolgt, wenn sich die rekrutierten Skelettvorläuferzellen in mineralisierende Zellen differenzieren und die Überbrückung der gebrochenen Enden zur Knochenvereinigung führt. Der mineralisierte Kallus wird dann umgebaut, um die ursprüngliche Form und Struktur des geheilten Knochens wiederherzustellen. Die Frakturheilung wurde an Mäusen mit verschiedenen Verletzungsmodellen untersucht. Dennoch ist der beste Weg, diesen gesamten biologischen Prozess zu rekapitulieren, den Querschnitt eines langen Knochens zu durchbrechen, der beide Kortexe umfasst. Dieses Protokoll beschreibt, wie eine stabilisierte, transversale Femurfraktur sicher durchgeführt werden kann, um die Heilung bei erwachsenen Mäusen zu beurteilen. Ein chirurgisches Protokoll mit detaillierten Ernte- und Bildgebungstechniken zur Charakterisierung der verschiedenen Stadien der Frakturheilung wird ebenfalls bereitgestellt.

Bei C57BL/6J-Mäusen schließt eine erfolgreiche Operation die zuvor erwähnten Heilungsschritte mit wenig bis gar keiner lokalen Entzündungsreaktion oder periostalen Beteiligung am scheinoperierten kontralateralen Femur ab. Ein Hämatom wird einige Stunden nach der Operation gebildet, und das Periost wird aktiviert, um Skelettvorläufer für die Chondrogenese zu rekrutieren. Verschiedene Zellpopulationen, wie z.B. Prx1+ mesenchymale Vorläufer, können während des Reparaturprozesses mit handelsüblichen flu...

Watch this Scientific Journal Video about Transverse Fracture of the Mouse Femur with Stabilizing Pin at JoVE.com

Transverse Fracture of the Mouse Femur with Stabilizing Pin

Dieses Protokoll beschreibt eine Methode, um Frakturen an erwachsenen Mäusen durchzuführen und den Heilungsprozess zu überwachen.

Querbruch des Mausfemurs mit stabilisierendem Stift

Fracture repair is an essential function of the skeleton that cannot be reliably modeled in vitro. A mouse injury model is an efficient approach to test ...

Dieses Protokoll beschreibt eine zuverlässige Technik zur Durchführung und Untersuchung von Femurfrakturen an erwachsenen Mäusen. Diese Technik ist einfach, schnell und erfordert minimale Werkzeuge, die ausgeführt werden müssen. Es ermöglicht die Charakterisierung verschiedener Stadien der Frakturheilung.Einzelpersonen können zunächst Schwierigkeiten haben, die Frakturenden richtig auszurichten und konsistente Frakturen zwischen Mäusen zu erzeugen. Wenn Sie genau auf die Stelle der Fraktur, das Einführen des Stiftes und den Verschluss der Wunde achten, wird der Erfolg dieser Operation verbessert. Bereiten Sie das Tier zunächst vor, indem Sie subkutan 0,05 Milligramm pro Kilogramm Buprenorphin injizieren.Rasieren Sie mit einem elektrischen Trimmer ein Quadrat von zwei mal zwei Zentimetern auf beiden Oberschenkeln, das der Position des Femurs entspricht. Sterilisieren Sie eine rasierte Stelle mit Jod und spülen Sie sie mit 70% iger Ethanollösung ab. Machen Sie einen fünf Millimeter großen Schnitt und legen Sie die darunter liegende Faszie frei.Legen Sie den Muskel frei, der den Femur bedeckt, indem Sie die Faszie schneiden. Trennen Sie den Muskel vom Femur, ohne das Gewebe zu beschädigen, lösen Sie dann den Muskel vom Knochen und sichern Sie den Femur, um einen Schnitt zu machen. Machen Sie einen Querschnitt in der Mitte des Femurschaftes.Führen Sie eine Führungsnadel durch den distalen Abschnitt der Markhöhle ein und drücken Sie den Faden über das Kniegelenk. Entfernen Sie dann die Führungsnadel und führen Sie ein ähnliches Verfahren vom proximalen Ende durch. Lassen Sie die Nadel im proximalen Ende, wobei ihre Spitze über der Haut hervorgetreten ist.Führen Sie einen stabilisierenden Stift in die Spitze der Führungsnadel ein, drücken Sie ihn so, dass er beim Herausziehen der Führungsnadel in die proximale Höhle gelangt, und verwerfen Sie dann die Führungsnadel. Richten Sie das distale Ende mit dem proximalen Ende aus, so dass das Faden beim Verlassen des Kniegelenks durch die distale Markhöhle geführt wird. Ziehen Sie die Spitze des Stiftes mit einer chirurgischen Klemme, so dass die proximalen und distalen Abschnitte zusammengezogen werden.Falten Sie dann die Enden des chirurgischen Stiftes in Richtung der Frakturstelle, um die Frakturenden neu auszurichten. Mit Drahtschneidern entfernen Sie den Kunststoff von der Basis der Nadel. Drehen Sie die Enden des Stiftes, um innere Gewebeverletzungen zu vermeiden.Ersetzen Sie schließlich die Muskeln auf dem Femur und schließen Sie die Wundöffnung, indem Sie die Haut zusammen mit Clips zusammenkneifen. Führen Sie ein ähnliches Verfahren ohne die Oberschenkelfraktur am anderen Bein durch und schließen Sie die Wunde. Nach der erfolgreichen Operation zeigte die fluoreszierende Bildgebung verschiedene Messent-Kinal-Vorläufer, wie Prx1-positive periostale Zellen, die während des Femurfrakturreparaturprozesses gefunden wurden.Die alkalische blaue Färbung des gebrochenen Femurs zeigte die Bildung eines weichen Kallus. Weiterhin wurde auch der Prozentsatz der Kallus- oder Knorpelbildung bestimmt. Durch den Einsatz von Micro-CT etwa 28 Tage nach der Fraktur wurde der Mineralisierungsprozess zusammen mit der Kalluslücke und der Frakturlücke nachgewiesen.Es wurde auch beobachtet, dass, wenn die Bruchenden nicht richtig ausgerichtet oder mit einem Stift gesichert waren, es an einer Hornhautbildung auf allen oder einer Seite des Bruchendes mangelte. Denken Sie bei diesem Eingriff daran, die beiden Enden des gebrochenen Femurs sorgfältig auszurichten und mit dem Stift zu stabilisieren, um eine ordnungsgemäße Heilung zu gewährleisten. Nach der Operation kann Femora für die Bildgebung und molekulare Analyse gesammelt werden.

Research

JoVE Journal

Biology

Preparation of Single-Cell Suspensions from Mouse Spleen with the gentleMACS Dissociator

Erstellung von Einzel-Zellsuspensionen aus Maus-Milz mit dem gentleMACS Dissociator

Single-cell suspensions are a prerequisite for experiments in cell separation, cell analysis and cell culture.  To avoid tedious and often painful manual ...

Forschung

Biologie

Transverse Aortic Constriction in Mice

Quer Aorten-Verengung in Mäuse

Transverse aortic constriction (TAC) in the mouse is a commonly used experimental model for pressure overload-induced cardiac hypertrophy and heart ...

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In-vivo-Imaging und therapeutische Behandlungen in einem orthotopen Mausmodell des Eierstockkrebs

Human cancer and response to therapy is better represented in orthotopic animal models.  This paper describes the development of an orthotopic mouse model ...

Characterization of the Isolated, Ventilated, and Instrumented Mouse Lung Perfused with Pulsatile Flow

Charakterisierung der isolierten, ventilierten und Instrumented Maus Lung mit pulsatilen Fluss perfundierten

The isolated, ventilated and instrumented mouse lung preparation allows steady and pulsatile pulmonary vascular pressure-flow relationships to be measured ...

Generation of Mice Derived from Induced Pluripotent Stem Cells

Generation der Mäuse aus induzierten pluripotenten Stammzellen

The production of induced pluripotent stem cells (iPSCs) from somatic cells provides a means to create valuable tools for basic research and may also ...

Fundamental Technical Elements of Freeze-fracture/Freeze-etch in Biological Electron Microscopy

Technische Grundlagen Elemente der Gefrierbruch-/ Gefrier Etch in Biological Elektronenmikroskopie

Freeze-fracture/freeze-etch describes a process whereby specimens, typically biological or nanomaterial in nature, are frozen, fractured, and replicated ...

Phenotyping Mouse Pulmonary Function In Vivo with the Lung Diffusing Capacity

Phenotyping Mouse Pulmonary Function In Vivo with the Lung Diffusing Capacity

Phänotypisierung Maus Lungenfunktion<em&gt; In-vivo-</em&gt; Mit der Lungendiffusionskapazität

The mouse is now the primary animal used to model a variety of lung diseases. To study the mechanisms that underlie such pathologies, phenotypic methods ...

Trans-inner Cell Mass Injection of Embryonic Stem Cells Leads to Higher Chimerism Rates

Trans-innere Zelle Masse Injektion von embryonalen Stammzellen führt zu höheren Chimerism Raten

In an effort to increase efficiency in the creation of genetically modified mice via ES Cell methodologies, we present an adaptation to the current ...

Application of Passive Head Motion to Generate Defined Accelerations at the Heads of Rodents

Anwendung der passiven Kopfbewegung zur Erzeugung definierter Beschleunigungen an den Köpfen von Nagetieren

Exercise is widely recognized as effective for various diseases and physical disorders, including those related to brain dysfunction. However, molecular ...

Isolation of Conditionally Immortalized Mouse Glomerular Endothelial Cells with Fluorescent Mitochondria

Isolierung von bedingt immortalisierten glomerulären Maus-Endothelzellen mit fluoreszierenden Mitochondrien

Glomerular endothelial cell (GEC) dysfunction can initiate and contribute to glomerular filtration barrier breakdown. Increased mitochondrial oxidative ...