Name: interphase fluorescence in situ hybridization of bone marrow smears of multiple myeloma
Uploaded: 2022-04-15T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Interphase Fluorescence in situ Hybridization of Bone Marrow Smears of Multiple Myeloma at JoVE.com

تم دعم هذا المشروع من قبل صندوق الابتكار التابع ل WNLO 2018WNLOKF023.

أجريت هذه الدراسة وفقا لمبادئ إعلان هلسنكي ووافقت عليها لجنة الأخلاقيات في مستشفى تشونغنان بجامعة ووهان (رقم 2019065). تم جمع العينات من مريض MM في قسم أمراض الدم ، مستشفى تشونغنان بجامعة ووهان (الصين).
1. إعداد مسحات BM
<ol><li>ضع أول 0.2 مل من محلول BM على شريحة زجاجية نظيفة يم...

<ol>
	<li>Sonneveld, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+multiple+myeloma+with+high-risk+cytogenetics:+a+consensus+of+the+International+Myeloma+Working+Group.">Treatment of multiple myeloma with high-risk cytogenetics: a consensus of the International Myeloma Working Group.</a> Blood. 127, 2955-2962 (2016).</li><li>Radbruch, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Competence+and+competition:+the+challenge+of+becoming+a+long-lived+plasma+cell.">Competence and competition: the challenge of becoming a long-lived plasma cell.</a> Nature Reviews Immunology. 6, 741-750 (2006).</li><li>Lai, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+cytogenetics+in+multiple+myeloma:+a+study+of+151+patients+including+117+patients+at+diagnosis.">Improved cytogenetics in multiple myeloma: a study of 151 patients including 117 patients at diagnosis.</a> Blood. 85 (9), 2490-2497 (1995).</li><li>Hallek, M., Bergsagel, P. L., Anderson, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+myeloma:+increasing+evidence+for+a+multistep+transformation+process.">Multiple myeloma: increasing evidence for a multistep transformation process.</a> Blood. 91, 3-21 (1998).</li><li>Munsh, N. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Consensus+recommendations+for+risk+stratification+in+multiple+myeloma:+report+of+the+International+Myeloma+Workshop+Consensus+Panel+2.">Consensus recommendations for risk stratification in multiple myeloma: report of the International Myeloma Workshop Consensus Panel 2.</a> Blood. 117, 4696-4700 (2011).</li><li>Gole, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=cIg-FISH+On+Patients+with+Multiple+Myeloma+-+A+Modified+and+Simple+Technique+Easily+Incorporated+Into+Routine+Clinical+Service.">cIg-FISH On Patients with Multiple Myeloma - A Modified and Simple Technique Easily Incorporated Into Routine Clinical Service.</a> Blood. 120, 4792-4792 (2012).</li><li>Lee, S. H., Erber, W., Porwit, A., Tomonaga, M., Peterson, L. I. C. S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematology,+ICSH+guidelines+for+the+standardization+of+bone+marrow+specimens+and+reports.">Hematology, ICSH guidelines for the standardization of bone marrow specimens and reports.</a> International Journal of Laboratory Hematology. 30, 349-364 (2008).</li><li>&#352;tifter, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combined+evaluation+of+bone+marrow+aspirate+and+biopsy+is+superior+in+the+prognosis+of+multiple+myeloma.">Combined evaluation of bone marrow aspirate and biopsy is superior in the prognosis of multiple myeloma.</a> Diagnostic Pathology. 5, 30 (2010).</li><li>Huegel, A., Coyle, L., McNeil, R., Smith, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+interphase+fluorescence+in+situ+hybridization+on+direct+hematological+bone+marrow+smears.">Evaluation of interphase fluorescence in situ hybridization on direct hematological bone marrow smears.</a> Pathology. 27, 86-90 (1995).</li><li>Jacobsson, B., Bernell, P., Arvidsson, I., Hast, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Classical+morphology,+esterase+cytochemistry,+and+interphase+cytogenetics+of+peripheral+blood+and+bone+marrow+smears.">Classical morphology, esterase cytochemistry, and interphase cytogenetics of peripheral blood and bone marrow smears.</a> The Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 44, 1303-1309 (1996).</li><li>Dunning, K., Safo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ultimate+Wright-Giemsa+stain:+60+years+in+the+making.">The ultimate Wright-Giemsa stain: 60 years in the making.</a> Biotechnic &amp; Histochemistry. 86, 69-75 (2011).</li><li>Woronzoff-Dashkoff, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+wright-giemsa+stain.+Secrets+revealed.">The wright-giemsa stain. Secrets revealed.</a> Clinics in Laboratory Medicine. 22, 15-23 (2002).</li><li>McPherson, R. A., Pincus, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Henry's+Clinical+diagnosis+and+Management+by+Laboratory+Methods+E-book.">Henry's Clinical diagnosis and Management by Laboratory Methods E-book.</a> Elsevier Health Sciences. , (2017).</li><li>Ross, F. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Report+from+the+European+Myeloma+Network+on+interphase+FISH+in+multiple+myeloma+and+related+disorders.">Report from the European Myeloma Network on interphase FISH in multiple myeloma and related disorders.</a> Haematologica. 97, 1272-1277 (2012).</li></ol>

ومن الضروري تطبيق FISH على التقسيم الطبقي للمخاطر الجينية في MM. الجزء الحاسم من تقارير FISH ليس كل الخلايا النواة ، ولكن أجهزة الكمبيوتر النسيلة التي تم تنقيتها أو تحديدها على وجه التحديد عن طريق الفرز باستخدام الخرز المغناطيسي المضاد ل CD138 أو وضع علامة باستخدام سلسلة ضوء الغلوبولين المناعي ا...

الورم النقوي المتعدد (MM) هو مرض خبيث في خلايا البلازما (PC) مع عدم تجانس بيولوجي قوي وفروق فردية كبيرة في الفعالية السريرية ، مع فترات بقاء تتراوح من أشهر إلى عقود. الخصائص الوراثية الخلوية هي مؤشرات تنبؤية مهمة ل MM. أصبح نظام التقسيم الطبقي للمخاطر والعلاجات الفردية القائمة على الخصائص الوراثية موضوعين ذوي اهتمام كبير في الأبحاث السريرية على MM1. تشمل انحرافات أجهزة الكمبيوتر التي تم اختبارها في لوحة التهجين الفلوري في الموقع (FISH) من نخاع العظم (BM) del 13q14 (RB1) و del 17p13 (TP53) و t(4;14) (IGH / FGFR3) و t (11;14) (IGH / MYEOV) و t (14;16) (IGH / MAF) و t (14:20) (IGH / MAFB) و 1q21 (CKS1B) الكسب / التضخيم و 1p (CDKN2C) الحذف.
يجب تضمين علم الوراثة الخلوية الطوري القياسي في التقييم الأولي لمرضى MM. على الرغم من أن النمط النووي التقليدي ذو النطاق G يوفر فائدة تحليل الكروموسوم الكامل، إلا أن انخفاض العائد لهذه الطريقة يؤدي إلى العديد من النتائج السلبية الخاطئة2. تقليديا ، كان ينظر إلى أجهزة الكمبيوتر الشخصية على أنها غير قادرة إلى حد كبير على الانقسام لأنها منتجات المرحلة النهائية من تمايز الخلايا الليمفاوية B. هذا يجعل من الصعب الحصول على صور مقسمة. قد يكون التحليل الوراثي الخلوي المحسن في MM مع الثقافات طويلة الأجل (6 أيام) وتحفيز الثقافات بواسطة السيتوكينات طريقة واعدة لتحديد التشوهات الوراثية الخلوية في مرضى MM الذين تم تشخيصهم حديثا3. حتى عندما تم إطالة وقت الزرع إلى 6 أيام ، ومع ذلك ، تم الإبلاغ عن تشوهات وراثية خلوية بدقة في 30٪ -50٪ من مرضى MM 4. علاوة على ذلك ، يتميز MM بانحرافات وراثية خلوية معقدة تعكس عدم تجانسه التنبؤي. ومع ذلك ، فإن دقة تقنية ربط الكروموسومات التقليدية منخفضة ، مما قد يؤدي بسهولة إلى عدم اكتشاف تشوهات الكروموسومات في MM.
لا غنى عن FISH Interphase ، ويفضل بعد فرز الكمبيوتر الشخصي القائم على الخرز المغناطيسي الإيجابي CD138 أو وضع علامة عليه باستخدام سلسلة ضوء الغلوبولين المناعي السيتوبلازمي κ / λ ، في تحليل MM5,6. يوصى بشدة باستخدام عينة مختارة إيجابية CD138 للحصول على العائد الأمثل للخلايا السرطانية. ومع ذلك ، فإن الكمية الدقيقة للانحرافات الجينية الخلوية تتطلب ما لا يقل عن 4 مل من BM المضاد للتخثر لفرز الكمبيوتر. بالإضافة إلى ذلك ، فإن مجموعات فرز الخرزة المناعية المغناطيسية CD138 مع FISH أو الغلوبولين المناعي لسلسلة الضوء κ / λ السيتوبلازمية مع اختبار FISH (cIg-FISH) تزيد من العديد من التكاليف التجريبية وتستغرق وقتا طويلا.
عادة ، يتم تقييم نسبة الكمبيوتر الشخصي أولا من الفحص المورفولوجي لمسحات BM الملطخة أو أقسام خزعة BM 7,8. تستخدم عينات BM ذات الجودة العالية (عينات شفط النخاع الأولى) للاختبار المورفولوجي ، في حين أن العينات المرسلة ل FISH أو الكشف الآخر غالبا ما تكون عينات الشفط الثانوية ذات نسب عالية من التخفيف بالدم المحيطي.
في وقت مبكر من 1990s ، أظهرت دراسات متعددة أن مسحات BM يمكن استخدامها مباشرة لفحوصات FISH الخلالية ، والتي أثبتت أنها طريقة موثوقة وقابلة للتكرار 9. أكدت دراسة أنيقة تستند إلى مورفولوجيا الخلايا والكيمياء الخلوية الإستراز جنبا إلى جنب مع FISH من الدم المحيطي ومسحات BM أهميتها السريرية الكبيرة لتوضيح تشوهات الكروموسومات في المرضى الذين يعانون من سرطان الدم المحبب واللمفاوي 10.
هنا ، نقدم طريقة جديدة لتحسين نجاح الكشف عن FISH بين المراحل في مرضى MM.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>automatic FISH machine</td>
			<td>Leica&#160; Corporation</td>
			<td>S500-24</td>
			<td>FINAL Assy Thermobrite 240V</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Abbott Molecular Inc.</td>
			<td>06J49-001</td>
			<td>DAPI Counterstain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FISH Analysis Software</td>
			<td>IMSTAR&#160; Corporation</td>
			<td>IMSTAR</td>
			<td>FISH Analysis Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FISH Probe</td>
			<td>Abbott Molecular Inc.</td>
			<td>05N56-020</td>
			<td>Vysis Locus Specifc Identifer TP53 / CEP 17 FISH Probe Kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fixed volume pipette</td>
			<td>Eppendorf China Ltd.</td>
			<td>M33768H</td>
			<td>10&#160; microliter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence Microscope</td>
			<td>Olympus Corporation</td>
			<td>BX53</td>
			<td>Forward Fluorescence Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Karyotype Analysis Software</td>
			<td>IMSTAR&#160; Corporation</td>
			<td>IMSTAR</td>
			<td>Karyotype Analysis Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light Microscope</td>
			<td>Olympus&#160; Corporation</td>
			<td>BX41</td>
			<td>Forward Light Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NP-40</td>
			<td>Abbott Molecular Inc.</td>
			<td>07J05-001</td>
			<td>NP-40</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic staining dyeing rack</td>
			<td>Guangzhou Kaixiu Trading Co., Ltd.</td>
			<td>RSJ-501</td>
			<td>&#160;24 slides</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic staining dyeing tank</td>
			<td>Guangzhou Kaixiu Trading Co., Ltd.</td>
			<td>RSJ-516</td>
			<td>&#160;24 slides</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubber Cement</td>
			<td>Marabu&#160;GmbH &#38; Co. KG</td>
			<td>FixoGum&#160;</td>
			<td>Rubber Cement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SSC</td>
			<td>Abbott Molecular Inc.</td>
			<td>02J10-032</td>
			<td>20&#215;SSC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bath</td>
			<td>Shanghai Boxun Medical Bio-Instrument Co., Ltd.</td>
			<td>DK-8D</td>
			<td>Multiple Temperature Water bath</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

interphase fluorescence in situ hybridization of bone marrow smears of multiple myeloma

يعد الكشف عن التهجين الفلوري في الموقع (FISH) طريقة لا غنى عنها في التقسيم الطبقي للمخاطر الجينية في الورم النقوي المتعدد (MM) ، وهو أحد أكثر الأورام الخبيثة الدموية شيوعا. السمة المميزة ل MM هي خلايا البلازما الخبيثة المتراكمة في نخاع العظام. تركز تقارير FISH ل MM بشكل أساسي على خلايا البلازما النسيلية النقية أو المحددة ، بدلا من جميع الخلايا النووية ، عن طريق الفرز باستخدام الخرز المغناطيسي المضاد ل CD138 أو وضع علامة باستخدام سلسلة ضوء الغلوبولين المناعي السيتوبلازمي κ أو λ. عادة ما يتم الحصول على نوى نخاع العظم بين الأطوار من خلايا نخاع العظم الطازجة. ومع ذلك ، فإن التخصيب المرضي لعينات خلايا البلازما يتطلب كميات كبيرة من نخاع العظم الطازج المضاد للتخثر الهيبارين ، والذي لا يمكن الحصول عليه في حالة استخراج نخاع العظم الصعب أو الصنبور الجاف لنخاع العظم. هنا ، نقوم بإنشاء طريقة جديدة لتحسين نجاح اكتشاف FISH على مسحات نخاع العظم الملطخة أو غير الملطخة. من الأسهل الحصول على مسحات نخاع العظم من عينات نخاع العظم المضادة للتخثر.

في التقييم المورفولوجي الأولي لمريض MM تم تشخيصه حديثا ، وجد أن 15٪ من أجهزة الكمبيوتر الشخصية في مسحة BM تحتوي على نوى أكبر وأكثر قتامة إلى جانب كميات أكبر من السيتوبلازم من أجهزة الكمبيوتر العادية (الشكل 2A). كشف الأنبوب الأول من BM المضاد للتخثر الهيبارين الذي تم اكتشافه بواس...

Watch this Scientific Journal Video about Interphase Fluorescence in situ Hybridization of Bone Marrow Smears of Multiple Myeloma at JoVE.com

Interphase Fluorescence in situ Hybridization of Bone Marrow Smears of Multiple Myeloma

هنا ، نقدم بروتوكولا لتحسين نجاح التألق بين المراحل في الكشف عن التهجين في الموقع على مسحات نخاع العظم من مرضى المايلوما المتعددة.

التألق بين الأطوار في الموقع تهجين مسحات نخاع العظم من المايلوما المتعددة

Fluorescence in situ hybridization (FISH) detection is an indispensable method in genetic risk stratification in multiple myeloma (MM), which is one of ...

إن تطبيق التهجين الفلوري في الموقع المسمى FISH على التقسيم الطبقي للمخاطر الوراثية في الورم النقوي المتعدد أمر ضروري. الجزء الحاسم من تقارير FISH ليس كل الخلايا النووية ، ولكن خلايا البلازما النسيلة التي تم تنقيتها أو تحديدها على وجه التحديد عن طريق الفرز باستخدام الخرز المغناطيسي المضاد ل CD138 أو وضع علامة باستخدام كابا السيتوبلازمية أو الغلوبولين المناعي لسلسلة لامدا الخفيفة مع اختبار FISH المسمى cIg FISH. تبين أن FISH بين الأطوار بعد فرز خلايا البلازما أو cIg FISH مهم في تشخيص الورم النقوي المتعدد ، بسبب نسبة أقل نسبيا من خلايا البلازما في نخاع العظام.ومع ذلك ، فإن هذه الأساليب لديها بعض أوجه القصور بما في ذلك العمليات المعقدة ، وارتفاع طلبات العينات وارتفاع التكاليف التجريبية. يمكن تحديد موقع خلايا البلازما بسرعة في مسحة نخاع العظم. بناء على ذلك ، نستخدم مسحة نخاع العظم FISH للكشف عن خلايا المايلوما المتعددة.أجريت هذه الدراسة وفقا لمبادئ إعلان هلسنكي ووافقت عليها لجنة الأخلاقيات في مستشفى تشونغنان بجامعة ووهان. تم جمع العينات من مريض المايلوما المتعددة في قسم أمراض الدم ، مستشفى تشونغنان بجامعة ووهان الصينية. ضع أول 0.2 ملليلتر من محلول نخاع العظم على شريحة زجاجية نظيفة يمكن التخلص منها ، وانشر مسحات نخاع العظم إلى سمك موحد وذيول حادة عن طريق إزالة نخاع العظم بسرعة ثم تجفيفه بشكل طبيعي.قم بتغطية أفلام نخاع العظم بملليلتر واحد من محلول رايت جيمسا لمدة 10 ثوان تقريبا في درجة حرارة الغرفة. أضف ملليلتر واحد من العازلة للفوسفات إلى الشرائح ، وكانت هناك حاجة إلى العناية لمنع محلول الصبغة من الجفاف أو التدفق من الشرائح. امزج محلول الصبغة بلطف واحتفظ به لمدة 15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة.شطف الشرائح بالماء النظيف وتجفيفها في الهواء في درجة حرارة الغرفة. استخدم المجهر الضوئي الأمامي للكشف عن خلايا البلازما الخبيثة ، يجب أن تكون خلايا البلازما مشتتة جيدا. الآن ما نراه في الميدان هو خلايا البلازما المنتشرة إلى حد ما.هذه خلية بلازما نووية ثنائية النواة نموذجية. قم بتغطية المنطقة الهجينة بمحلول مثبت لمدة 10 دقائق لتغيير لون خلايا البلازما وإصلاحها. شطف الشريحة بالماء منزوع الأيونات وجففها في الهواء في درجة حرارة الغرفة.سخني جرة تحتوي على مخزن مؤقت SSC مرتين إلى 56 درجة مئوية في حمام مائي. اغسل مسحة نخاع العظم المحضرة في المخزن المؤقت SSC المسخن مسبقا مرتين لمدة 10 دقائق متبوعا بالغمس في الماء منزوع الأيونات في درجة حرارة الغرفة. تجفيف اللطاخة في تدرج الإيثانول 70٪ 85٪ و 100٪ الإيثانول لكل دقيقة واحدة.جفف اللطاخة في الهواء لمدة 10 دقائق. أولا إضافة TP53 على سنترومير من خليط مسبار الكروموسوم 17 إلى منطقة التهجين وتغطيته بغطاء انزلاق اضغط بلطف على الملقط المدبب بدقة لإزالة فقاعات الهواء من الأسفل. قم بإغلاق جميع جوانب الغطاء بالأسمنت المطاطي لضمان ضيق جيد.بعد تصلب الأسمنت المطاطي ، تم وضع الشريحة على تمسخ آلة FISH التلقائي عند 78 درجة مئوية لمدة خمس دقائق تليها التهجين عند 37 درجة مئوية بين عشية وضحاها. التقط الشريحة من آلة FISH. استخدم ملاقط مدببة دقيقة لإزالة الأسمنت المطاطي بلطف.اغمر الشريحة مرتين SSC في درجة حرارة الغرفة لمدة دقيقة أو دقيقتين تقريبا لغسل الغطاء المنزلق. اغسل الشريحة في مخزن مؤقت للتسخين المسبق بمقدار 68 درجة مئوية في حمام مائي لمدة دقيقتين. اغسل الشرائح ب SSC مرتين في حمام مائي 37 درجة مئوية لمدة دقيقة واحدة.قم بإعداده مباشرة في الظلام ليجف جيدا لمدة 10 دقائق عند 10 ميكرولتر من DAPI إلى المنطقة الهجينة ، وقم بتغطيته بقسيمة غطاء. عرض الشريحة الهجينة باستخدام مرشح مناسب على مجهر التألق ، استخدم مرشح بصري فلوروفور أزرق أحادي اللون لمراقبة شدة التألق في نواة الخلية. التقط صورا لنواة الخلية ضمن مجموعة مرشحات DAPI.تم تصنيف CEP17 مع التألق الأخضر. استخدم مرشح بصري فلوروفوري أخضر الطيف لمراقبة موقع CEP17. التقط صورة إشارات CEP17 ضمن مجموعة المرشحات الخضراء.تم تصنيف جين TP53 مع التألق البرتقالي. استخدم مرشح بصري فلوروفور برتقالي الطيف لمراقبة TP53 ، والتقط صورة إشارات TP53 تحت المجموعة ، وادمج هذه الصور الثلاث في كامل وفحص التشوهات العددية. في خلية طبيعية بين الأطوار ، لوحظت إشارتان برتقاليتان و إشارتان خضراوان داخل نواة ذات تألق أزرق يشير إلى زوج واحد من الكروموسومات الطبيعية 17.أظهرت النتائج مورفولوجيا وعلم الوراثة لنخاع العظم في مريض المايلوما المتعددة. أظهر الشكل (أ) أن 15٪ من خلايا البلازما في مسحة نخاع العظم قد وجد أنها تحتوي على كميات أكبر وأكثر قتامة ونووية إلى جانب كميات كبيرة من السيتوبلازم أكثر من المعتاد. أظهر الشكل B صورة ذات مقياس رمادي لممثل بواسطة خلية بلازما نواة في مسحة نخاع العظم.أظهر الشكل C أربع إشارات برتقالية وأربع إشارات خضراء في نواة واحدة بين الأطوار لخلية البلازما مما يشير إلى أن أربع نسخ من الكروموسوم 17 كانت موضعية في نواة. ويبين الشكل دال أن كاريوجرام الكروموسوم غير الطبيعي لهذا المريض أكد وجود زوجين من الكروموسومات 17 في نواة واحدة. الحصول على مسحات نخاع العظم أسهل بكثير من عينات نخاع العظم المضادة للتخثر لأن الحصول على نخاع العظم المضاد للتخثر يتطلب إجراءات معقدة للحصول على النواة.وفقا لذلك ، أنشأنا طريقة مقنعة لمسحة نخاع العظم FISH للكشف عن خلايا المايلوما المتعددة.

Research

JoVE Journal

Medicine

Interphase Fluorescence in situ Hybridization of Bone Marrow Smears of Multiple Myeloma

Oral Biofilm Analysis of Palatal Expanders by Fluorescence In-Situ Hybridization and Confocal Laser Scanning Microscopy

عن طريق الفم من تحليل بيوفيلم المتوسعون حلقي بواسطة التهجين في الموضع الإسفار ومتحد البؤر المسح الضوئي ليزر مجهرية

Confocal laser scanning microscopy (CLSM) of natural heterogeneous biofilm is today facilitated by a comprehensive range of staining techniques, one of ...

High Throughput Sequential ELISA for Validation of Biomarkers of Acute Graft-Versus-Host Disease

عالية الإنتاجية ELISA متسلسل للتأكد من صحة العلامات الحيوية من الأمراض الطعم ضد المضيف الحاد

Unbiased discovery proteomics strategies have  the potential to identify large numbers of novel biomarkers that can improve  diagnostic and prognostic ...

Using Quantitative Real-time PCR to Determine Donor Cell Engraftment in a Competitive Murine Bone Marrow Transplantation Model

باستخدام الكمي في الوقت الحقيقي PCR لتحديد الجهات المانحة Engraftment خلية في التنافسية نموذج الفئران زرع نخاع العظم

Murine bone marrow transplantation models provide an important tool in measuring hematopoietic stem cell (HSC) functions and determining genes/molecules ...

Pre-clinical Evaluation of Tyrosine Kinase Inhibitors for Treatment of Acute Leukemia

تقييم ما قبل السريرية من التيروزين كيناز مثبطات لعلاج اللوكيميا الحادة

Receptor tyrosine kinases have been implicated in the development and progression of many cancers, including both leukemia and solid tumors, and are ...

Femoral Bone Marrow Aspiration in Live Mice

الفخذ نخاع العظم الطموح في الفئران لايف

Serial sampling of the cellular composition of bone marrow (BM) is a routine procedure critical to clinical hematology. This protocol describes a detailed ...

Busulfan as a Myelosuppressive Agent for Generating Stable High-level Bone Marrow Chimerism in Mice

بوسلفان باعتباره وكيل كابت النقي لتوليد مستقرة الرفيع المستوى نخاع العظم الخيمرية في الفئران

Bone marrow transplantation (BMT) is often used to replace the bone marrow (BM) compartment of recipient mice with BM cells expressing a distinct ...

Establishment of a Human Multiple Myeloma Xenograft Model in the Chicken to Study Tumor Growth, Invasion and Angiogenesis

إنشاء طعم أجنبي نموذج المايلوما المتعددة الإنسان في الدجاج لدراسة نمو الورم والغزو والأوعية الدموية

Multiple myeloma (MM), a malignant plasma cell disease, remains incurable and novel drugs are required to improve the prognosis of patients. Due to the ...

In Vivo Imaging and Tracking of Technetium-99m Labeled Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells in Equine Tendinopathy

In Vivo Imaging and Tracking of Technetium-99m Labeled Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells in Equine Tendinopathy

في فيفو التصوير وتتبع التكنيتيوم-99m إعتبر نخاع العظم الوسيطة الخلايا الجذعية في فرسي Tendinopathy

Recent advances in the application of bone marrow mesenchymal stem cells (BMMSC) for the treatment of tendon and ligament injuries in the horse suggest ...

An Organotypic High Throughput System for Characterization of Drug Sensitivity of Primary Multiple Myeloma Cells

نظام عضوي إنتاجية عالية لتوصيف الدواء حساسية خلايا المايلوما المتعددة الابتدائية

In this work we describe a novel approach that combines ex vivo drug sensitivity assays and digital image analysis to estimate chemosensitivity and ...

Clinicopathological Analysis of miRNA Expression in Breast Cancer Tissues by Using miRNA In Situ Hybridization

Clinicopathological Analysis of miRNA Expression in Breast Cancer Tissues by Using miRNA In Situ Hybridization

تحليل إكلينيكية من ميرنا التعبير في سرطان الثدي الأنسجة باستخدام ميرنا<em&gt; في الموقع</em&gt; التهجين

In this article, we describe a detailed protocol for miRNA detection in breast cancer tissue using in situ hybridization with a digoxigenin-labelled LNA ...