Name: interphase fluorescence in situ hybridization of bone marrow smears of multiple myeloma
Uploaded: 2022-04-15T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Interphase Fluorescence in situ Hybridization of Bone Marrow Smears of Multiple Myeloma at JoVE.com

Dette projekt blev støttet af innovationsfonden for WNLO 2018WNLOKF023.

Denne undersøgelse blev udført i overensstemmelse med principperne i Helsinki-erklæringen og godkendt af den etiske komité for Zhongnan Hospital ved Wuhan University (nr. 2019065). Prøverne blev indsamlet fra en MM-patient i Hæmatologisk Afdeling, Zhongnan Hospital ved Wuhan University (Kina).
1. Forberedelse af BM-udstrygningerne
<ol><li>Anbring de første 0,2 ml BM-opløsning på en ren engangsglasrutschebane.</li>
	<li>Spred BM-udstrygningerne til ensartet tykkelse ...

<ol>
	<li>Sonneveld, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+multiple+myeloma+with+high-risk+cytogenetics:+a+consensus+of+the+International+Myeloma+Working+Group.">Treatment of multiple myeloma with high-risk cytogenetics: a consensus of the International Myeloma Working Group.</a> Blood. 127, 2955-2962 (2016).</li><li>Radbruch, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Competence+and+competition:+the+challenge+of+becoming+a+long-lived+plasma+cell.">Competence and competition: the challenge of becoming a long-lived plasma cell.</a> Nature Reviews Immunology. 6, 741-750 (2006).</li><li>Lai, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+cytogenetics+in+multiple+myeloma:+a+study+of+151+patients+including+117+patients+at+diagnosis.">Improved cytogenetics in multiple myeloma: a study of 151 patients including 117 patients at diagnosis.</a> Blood. 85 (9), 2490-2497 (1995).</li><li>Hallek, M., Bergsagel, P. L., Anderson, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+myeloma:+increasing+evidence+for+a+multistep+transformation+process.">Multiple myeloma: increasing evidence for a multistep transformation process.</a> Blood. 91, 3-21 (1998).</li><li>Munsh, N. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Consensus+recommendations+for+risk+stratification+in+multiple+myeloma:+report+of+the+International+Myeloma+Workshop+Consensus+Panel+2.">Consensus recommendations for risk stratification in multiple myeloma: report of the International Myeloma Workshop Consensus Panel 2.</a> Blood. 117, 4696-4700 (2011).</li><li>Gole, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=cIg-FISH+On+Patients+with+Multiple+Myeloma+-+A+Modified+and+Simple+Technique+Easily+Incorporated+Into+Routine+Clinical+Service.">cIg-FISH On Patients with Multiple Myeloma - A Modified and Simple Technique Easily Incorporated Into Routine Clinical Service.</a> Blood. 120, 4792-4792 (2012).</li><li>Lee, S. H., Erber, W., Porwit, A., Tomonaga, M., Peterson, L. I. C. S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematology,+ICSH+guidelines+for+the+standardization+of+bone+marrow+specimens+and+reports.">Hematology, ICSH guidelines for the standardization of bone marrow specimens and reports.</a> International Journal of Laboratory Hematology. 30, 349-364 (2008).</li><li>&#352;tifter, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combined+evaluation+of+bone+marrow+aspirate+and+biopsy+is+superior+in+the+prognosis+of+multiple+myeloma.">Combined evaluation of bone marrow aspirate and biopsy is superior in the prognosis of multiple myeloma.</a> Diagnostic Pathology. 5, 30 (2010).</li><li>Huegel, A., Coyle, L., McNeil, R., Smith, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+interphase+fluorescence+in+situ+hybridization+on+direct+hematological+bone+marrow+smears.">Evaluation of interphase fluorescence in situ hybridization on direct hematological bone marrow smears.</a> Pathology. 27, 86-90 (1995).</li><li>Jacobsson, B., Bernell, P., Arvidsson, I., Hast, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Classical+morphology,+esterase+cytochemistry,+and+interphase+cytogenetics+of+peripheral+blood+and+bone+marrow+smears.">Classical morphology, esterase cytochemistry, and interphase cytogenetics of peripheral blood and bone marrow smears.</a> The Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 44, 1303-1309 (1996).</li><li>Dunning, K., Safo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ultimate+Wright-Giemsa+stain:+60+years+in+the+making.">The ultimate Wright-Giemsa stain: 60 years in the making.</a> Biotechnic &amp; Histochemistry. 86, 69-75 (2011).</li><li>Woronzoff-Dashkoff, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+wright-giemsa+stain.+Secrets+revealed.">The wright-giemsa stain. Secrets revealed.</a> Clinics in Laboratory Medicine. 22, 15-23 (2002).</li><li>McPherson, R. A., Pincus, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Henry's+Clinical+diagnosis+and+Management+by+Laboratory+Methods+E-book.">Henry's Clinical diagnosis and Management by Laboratory Methods E-book.</a> Elsevier Health Sciences. , (2017).</li><li>Ross, F. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Report+from+the+European+Myeloma+Network+on+interphase+FISH+in+multiple+myeloma+and+related+disorders.">Report from the European Myeloma Network on interphase FISH in multiple myeloma and related disorders.</a> Haematologica. 97, 1272-1277 (2012).</li></ol>

Anvendelsen af FISH til genetisk risikostratificering i MM er afgørende. Den kritiske del af FISH-rapporter er ikke alle nukleerede celler, men klonale pc'er, der specifikt er renset eller identificeret ved sortering med anti-CD138 magnetiske perler eller mærkning med cytoplasmatisk immunoglobulinlyskæde κ eller λ. Interfase FISH efter PC-sortering eller cIg-FISH viste sig at være signifikant ved diagnosen MM på grund af den relativt lavere andel af pc'er i BM. Disse metoder har dog nogle mangler, herunder komplek...

Myelomatose (MM) er en ondartet plasmacellesygdom (PC) med stærk biologisk heterogenitet og store individuelle forskelle i klinisk effekt med overlevelsesperioder fra måneder til årtier. Cytogenetiske egenskaber er vigtige prognostiske indikatorer for MM. Risikostratificeringssystemet og individualiserede behandlinger baseret på genetiske egenskaber er blevet emner af intens interesse for klinisk forskning på MM1. Afvigelserne af pc'er, der er testet i et fluorescens in situ-hybridiseringspanel (FISH) af knoglemarv (BM), omfatter del 13q14 (RB1), del 17p13 (TP53), t(4;14) (IGH/FGFR3), t(11;14) (IGH/MYEOV), t(14;16) (IGH/MAF), t(14:20) (IGH/MAFB), 1q21 (CKS1B) forstærkning/forstærkning og 1p (CDKN2C) deletion.
Standard metafasecytogenetik bør indgå i den indledende vurdering af MM-patienter. Selvom konventionel G-båndet karyotyping giver fordelen ved en helkromosomanalyse, fører det lave udbytte af denne metode til mange falske negative resultater2. Traditionelt er pc'er blevet betragtet som stort set ude af stand til at opdele, fordi de er slutstadiet af B-lymfocytdifferentiering. Dette gør det vanskeligt at få opdelte billeder. Forbedret cytogenetisk analyse i MM med langtidskulturer (6 dage) og stimulering af kulturer med cytokiner kan være en lovende metode til at identificere cytogenetiske abnormiteter hos nydiagnosticerede MM-patienter3. Selv når dyrkningstiden blev forlænget til 6 dage, blev cytogenetiske abnormiteter imidlertid nøjagtigt rapporteret hos 30%-50% af MM-patienterne4. Desuden er MM karakteriseret ved komplekse cytogenetiske aberrationer, der afspejler dets prognostiske heterogenitet. Opløsningen af traditionel kromosombåndsteknologi er imidlertid lav, hvilket let kan føre til manglende påvisning af kromosomale abnormiteter i MM.
Interfase FISH, helst efter CD138-positiv magnetisk perlebaseret PC-sortering eller mærkning med cytoplasmatisk immunoglobulinlyskæde κ/λ, er uundværlig i analysen af MM5,6. En CD138-positiv udvalgt prøve anbefales kraftigt til det optimerede udbytte af tumorceller. Imidlertid kræver nøjagtig kvantation af cytogenetiske aberrationer mindst 4 ml antikoaguleret BM til pc-sortering. Derudover øger kombinationerne af enten CD138 immunomagnetisk perlesortering med FISH eller cytoplasmatisk κ/λ lyskædeimmunglobulin med FISH-test (cIg-FISH) adskillige eksperimentelle omkostninger og er tidskrævende.
Normalt vurderes PC-forholdet først ud fra den morfologiske undersøgelse af farvede BM-udstrygninger eller BM-biopsiafsnit7,8. BM-prøver af højeste kvalitet (første marvsaspiratprøver) anvendes til morfologisk testning, mens de, der sendes til FISH eller anden påvisning, ofte er de sekundære aspireringsprøver med høje fortyndingsforhold med perifert blod.
Allerede i 1990'erne viste flere undersøgelser, at BM-udstrygninger kan anvendes direkte til interstitielle FISH-undersøgelser, hvilket har vist sig at være en pålidelig og repeterbar metode9. En elegant undersøgelse baseret på cellemorfologi og esterasecytokemi kombineret med FISH af perifert blod og BM-udstrygninger bekræftede dens store kliniske betydning for belysning af kromosomale abnormiteter hos patienter med granulocytisk og lymfatisk leukæmi10.
Heri leverer vi en ny metode til forbedring af succesen med interfase FISH-detektion hos MM-patienter.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>automatic FISH machine</td>
			<td>Leica&#160; Corporation</td>
			<td>S500-24</td>
			<td>FINAL Assy Thermobrite 240V</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Abbott Molecular Inc.</td>
			<td>06J49-001</td>
			<td>DAPI Counterstain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FISH Analysis Software</td>
			<td>IMSTAR&#160; Corporation</td>
			<td>IMSTAR</td>
			<td>FISH Analysis Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FISH Probe</td>
			<td>Abbott Molecular Inc.</td>
			<td>05N56-020</td>
			<td>Vysis Locus Specifc Identifer TP53 / CEP 17 FISH Probe Kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fixed volume pipette</td>
			<td>Eppendorf China Ltd.</td>
			<td>M33768H</td>
			<td>10&#160; microliter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence Microscope</td>
			<td>Olympus Corporation</td>
			<td>BX53</td>
			<td>Forward Fluorescence Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Karyotype Analysis Software</td>
			<td>IMSTAR&#160; Corporation</td>
			<td>IMSTAR</td>
			<td>Karyotype Analysis Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light Microscope</td>
			<td>Olympus&#160; Corporation</td>
			<td>BX41</td>
			<td>Forward Light Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NP-40</td>
			<td>Abbott Molecular Inc.</td>
			<td>07J05-001</td>
			<td>NP-40</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic staining dyeing rack</td>
			<td>Guangzhou Kaixiu Trading Co., Ltd.</td>
			<td>RSJ-501</td>
			<td>&#160;24 slides</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic staining dyeing tank</td>
			<td>Guangzhou Kaixiu Trading Co., Ltd.</td>
			<td>RSJ-516</td>
			<td>&#160;24 slides</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubber Cement</td>
			<td>Marabu&#160;GmbH &#38; Co. KG</td>
			<td>FixoGum&#160;</td>
			<td>Rubber Cement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SSC</td>
			<td>Abbott Molecular Inc.</td>
			<td>02J10-032</td>
			<td>20&#215;SSC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bath</td>
			<td>Shanghai Boxun Medical Bio-Instrument Co., Ltd.</td>
			<td>DK-8D</td>
			<td>Multiple Temperature Water bath</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

interphase fluorescence in situ hybridization of bone marrow smears of multiple myeloma

Fluorescens in situ hybridisering (FISH) detektion er en uundværlig metode i genetisk risikostratificering i multipelt myelom (MM), som er en af de mest almindelige hæmatologiske maligniteter. Den identificerende egenskab ved MM er akkumulerede maligne plasmaceller i knoglemarv. FISH-rapporter for MM fokuserer primært på oprensede eller identificerede klonale plasmaceller snarere end alle nukleerede celler ved at sortere med anti-CD138 magnetiske perler eller markere med cytoplasmatisk immunoglobulinlyskæde κ eller λ. Knoglemarvsinterfasekerner opnås normalt fra friske knoglemarvsceller. Tilfredsstillende berigelse af plasmacelleprøver kræver imidlertid store mængder frisk heparin antikoguleret knoglemarv, som ikke kan opnås i tilfælde af vanskelig knoglemarvsekstraktion eller en knoglemarvstørhane. Heri etablerer vi en ny metode til at forbedre succesen med FISH-detektion på farvede eller ufarvede knoglemarvsudtværinger. Knoglemarvsudstrygninger er lettere at opnå end antikoagulerede knoglemarvsprøver.

I den indledende morfologiske vurdering af en nydiagnosticeret MM-patient viste det sig, at 15% af pc'erne i en BM-udstrygning havde større og mørkere kerner sammen med større mængder cytoplasma end normale pc'er (figur 2A). Det første rør af heparin anti-koaguleret BM detekteret af immunophenotype teknikken afslørede kun 2,3% af de monoklonale afvigende pc'er. CD138 immunomagnetisk perlesortering i kombination med FISH eller cIg-FISH teknikken er afgørende for at opnå et nøjagtigt...

Watch this Scientific Journal Video about Interphase Fluorescence in situ Hybridization of Bone Marrow Smears of Multiple Myeloma at JoVE.com

Interphase Fluorescence in situ Hybridization of Bone Marrow Smears of Multiple Myeloma

Her præsenterer vi en protokol til forbedring af succesen med interfasefluorescens in situ-hybridiseringsdetektion på knoglemarvsudstrygninger fra myelomatosepatienter.

Interfase fluorescens in situ Hybridisering af knoglemarvsudstrygninger af myelomatose

Fluorescence in situ hybridization (FISH) detection is an indispensable method in genetic risk stratification in multiple myeloma (MM), which is one of ...

Anvendelsen af fluorescens in situ hybridisering kaldet FISH til genetisk risikostratificering i myelomatose er afgørende. Den kritiske del af FISH-rapporter er ikke alle nukleerede celler, men klonale plasmaceller specifikt oprenset eller identificeret ved sortering med anti-CD138 magnetiske perler eller mærkning med cytoplasmatisk kappa eller Lambda lyskædeimmunglobulin med FISH-test kaldet cIg FISH. Interfase FISH efter plasmacellesortering eller cIg FISH viser sig at være signifikant ved diagnosen myelomatose på grund af en relativt lavere andel af plasmaceller i knoglemarven.Disse metoder har dog nogle mangler, herunder komplekse processer, høje prøvekrav og høje eksperimentelle omkostninger. Plasmaceller kan hurtigt placeres i en knoglemarvsudtværing. Baseret på dette bruger vi knoglemarvsudtværing FISH til påvisning af myelomatoseceller.Denne undersøgelse blev udført i overensstemmelse med principperne i Helsinki-erklæringen og godkendt af den etiske komité for Zhongnan Hospital ved Wuhan Universitet. Prøverne blev indsamlet fra en myelomatosepatient på Hæmatologisk Afdeling, Zhongnan Hospital ved Wuhan University of China. Placer de første 0,2 ml knoglemarvsopløsning på et rent engangsglasglas, spred knoglemarvsudstrygningerne til ensartet tykkelse og skarpe haler ved hurtigt at fjerne knoglemarven og tør den derefter naturligt.Dæk knoglemarvsfilmene med en milliliter Wright-Giemsa-opløsning i ca. 10 sekunder ved stuetemperatur. Tilsæt en milliliter fosfatbuffer til diasene, det var nødvendigt med omhu for at forhindre, at farvestofopløsningen tørrer eller strømmer af diasene. Bland farvestofopløsningen forsigtigt og oprethold den i 15 minutter ved stuetemperatur.Skyl diasene med rent vand og tør det i luften ved stuetemperatur. Brug fremadrettet lysmikroskopi til at detektere maligne plasmaceller, plasmacellerne skal være godt spredt. Det, vi ser i feltet, er plasmacellerne, som er ret spredt.Dette er en typisk Binuclear nuklear plasmacelle. Dæk det hybridiserede område med fikseringsopløsning i 10 minutter for at misfarve og fiksere plasmaceller. Skyl glideren med deioniseret vand og tør det i luft ved stuetemperatur.Forvarm en krukke indeholdende to gange SSC-buffer til 56 grader Celsius i et vandbad. Vask den tilberedte knoglemarvsudstrygning i den forvarmede to gange SSC-buffer i 10 minutter efterfulgt af dypning i deioniseret vand ved stuetemperatur. Dehydrer udstrygningen i en ethanolgradient 70% 85% og 100% ethanol hver i et minut.Tør udtværingen i luft i 10 minutter. Tilsæt først TP53 på centromer af kromosom 17-sondeblanding til hybridiseringsområdet og dæk det med et dæksel, tryk forsigtigt på den fine spidse pincet for at fjerne luftbobler nedenunder. Forsegl alle sider af dækslet med gummicement for at sikre god tæthed.Efter størkning af gummicementen blev glideren anbragt på en automatisk FISH-maskine denaturering blev udført ved 78 grader Celsius i fem minutter efterfulgt af hybridisering ved 37 grader Celsius natten over. Tag rutsjebanen op fra FISH-maskinen. Brug en fin spids pincet til forsigtigt at fjerne gummicementen.Sænk rutsjebanen i to gange SSC ved stuetemperatur i ca. et eller to minutter for at vaske dækslet af. Vask glideren i 68 grader Celsius forvarmningsbuffer i et vandbad i to minutter. Vask rutsjebanerne med to gange SSC i et 37 grader Celsius vandbad i et minut.Sæt op lige i mørket for at tørre grundigt i 10 minutter ved 10 mikroliter DAPI til det hybridiserede område, dæk med en dæksel. Se hybridiseret dias ved hjælp af et passende filtersæt på et fluorescensmikroskop, brug monokromatisk blå fluorofor optisk filter til at observere fluorescensintensiteten af cellekernen. Tag cellekernebilleder under et DAPI-filtersæt.CEP17 blev mærket med grøn fluorescens. Brug spektrum grønt fluorofor optisk filter til at observere placeringen af CEP17. Tag CEP17-signalbilledet under grønt filtersæt.TP53-genet blev mærket med orange fluorescens. Brug spektrum orange fluorofor optisk filter til at observere TP53, tage TP53 signaler billede under sættet, flette disse tre billeder til en helhed og undersøge for numeriske abnormiteter. I en normal interfasecelle observeres to orange og to grønne signaler inde i en kerne med blå fluorescens, der indikerer et par normale kromosomer 17.Resultaterne viste morfologien og genetikken af knoglemarv hos en myelomatosepatient. Figur A viste, at 15% af plasmacellerne i en knoglemarvsudstrygning havde vist sig at have større og mørkere og nukleare sammen med store mængder cytoplasma end normalt. Figur B viste et gråskalabillede af repræsentativ af en nukleeret plasmacelle i en knoglemarvsudtværing.Figur C viste fire orange og fire grønne signaler i en interfasekerne af plasmacelle, hvilket tyder på, at fire kopier af kromosom 17 var lokaliseret i en kerne. Figur D viste, at denne patients unormale kromosomkaryogram bekræftede to par kromosomer 17 i en kerne. Knoglemarvsudstrygninger er meget lettere at opnå end antikoagulerende knoglemarvsprøver, fordi opnåelse af antikoaguleret knoglemarv kræver komplekse procedurer for at opnå kernen.Derfor etablerede vi en overbevisende metode til knoglemarvsudtværing FISH til påvisning af myelomatoseceller.

Research

JoVE Journal

Medicine

Interphase Fluorescence in situ Hybridization of Bone Marrow Smears of Multiple Myeloma

Oral Biofilm Analysis of Palatal Expanders by Fluorescence In-Situ Hybridization and Confocal Laser Scanning Microscopy

Confocal laser scanning microscopy (CLSM) of natural heterogeneous biofilm is today facilitated by a comprehensive range of staining techniques, one of ...

High Throughput Sequential ELISA for Validation of Biomarkers of Acute Graft-Versus-Host Disease

High Throughput Sekventiel ELISA for Validering af biomarkører for akut graft-versus-host-sygdom

Unbiased discovery proteomics strategies have  the potential to identify large numbers of novel biomarkers that can improve  diagnostic and prognostic ...

Using Quantitative Real-time PCR to Determine Donor Cell Engraftment in a Competitive Murine Bone Marrow Transplantation Model

Brug af kvantitativ real-time PCR til Bestem donorcelle indpodning i en konkurrencepræget murin knoglemarvstransplantation Model

Murine bone marrow transplantation models provide an important tool in measuring hematopoietic stem cell (HSC) functions and determining genes/molecules ...

Pre-clinical Evaluation of Tyrosine Kinase Inhibitors for Treatment of Acute Leukemia

Præklinisk evaluering af tyrosinkinasehæmmere for Behandling af akut leukæmi

Receptor tyrosine kinases have been implicated in the development and progression of many cancers, including both leukemia and solid tumors, and are ...

Femoral Bone Marrow Aspiration in Live Mice

Femoral knoglemarv Aspiration i levende mus

Serial sampling of the cellular composition of bone marrow (BM) is a routine procedure critical to clinical hematology. This protocol describes a detailed ...

Busulfan as a Myelosuppressive Agent for Generating Stable High-level Bone Marrow Chimerism in Mice

Busulfan som myelosuppressive Agent til at generere stabilt højt niveau knoglemarv Kimærisme i mus

Bone marrow transplantation (BMT) is often used to replace the bone marrow (BM) compartment of recipient mice with BM cells expressing a distinct ...

Establishment of a Human Multiple Myeloma Xenograft Model in the Chicken to Study Tumor Growth, Invasion and Angiogenesis

Etablering af en human myelomatose xenograftmodel i kylling til Studieinformationen tumorvækst, invasion og angiogenese

Multiple myeloma (MM), a malignant plasma cell disease, remains incurable and novel drugs are required to improve the prognosis of patients. Due to the ...

In Vivo Imaging and Tracking of Technetium-99m Labeled Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells in Equine Tendinopathy

In Vivo Imaging and Tracking of Technetium-99m Labeled Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells in Equine Tendinopathy

In vivo-billeddannelse og sporing af technetium-99m-mærkede Bone Marrow mesenchymale stamceller i Equine tendinopati

Recent advances in the application of bone marrow mesenchymal stem cells (BMMSC) for the treatment of tendon and ligament injuries in the horse suggest ...

An Organotypic High Throughput System for Characterization of Drug Sensitivity of Primary Multiple Myeloma Cells

En Organotypiske High Throughput System til karakterisering af Drug følsomhed Primære myelomatoseceller

In this work we describe a novel approach that combines ex vivo drug sensitivity assays and digital image analysis to estimate chemosensitivity and ...

Clinicopathological Analysis of miRNA Expression in Breast Cancer Tissues by Using miRNA In Situ Hybridization

Clinicopathological Analysis of miRNA Expression in Breast Cancer Tissues by Using miRNA In Situ Hybridization

Klinisk-patologisk analyse af miRNA Expression i Breast Cancer væv ved hjælp miRNA<em&gt; In Situ</em&gt; Hybridisering

In this article, we describe a detailed protocol for miRNA detection in breast cancer tissue using in situ hybridization with a digoxigenin-labelled LNA ...