Name: interphase fluorescence in situ hybridization of bone marrow smears of multiple myeloma
Uploaded: 2022-04-15T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Interphase Fluorescence in situ Hybridization of Bone Marrow Smears of Multiple Myeloma at JoVE.com

Bu proje WNLO 2018WNLOKF023 İnovasyon Fonu tarafından desteklenmiştir.

Bu çalışma, Helsinki Deklarasyonu'nun ilkelerine göre yürütülmüş ve Wuhan Üniversitesi Zhongnan Hastanesi Etik Komitesi (No. 2019065) tarafından onaylanmıştır. Örnekler, Wuhan Üniversitesi Zhongnan Hastanesi (Çin) Hematoloji Bölümü'ndeki bir MM hastasından toplandı.
1. BM yaymalarının hazırlanması
<ol><li>İlk 0,2 mL BM çözeltisini temiz bir tek kullanımlık cam kızağa yerleştirin.</li>
	<li>BM'yi hızla çıkararak BM yaymalarını keskin kuy...

<ol>
	<li>Sonneveld, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+multiple+myeloma+with+high-risk+cytogenetics:+a+consensus+of+the+International+Myeloma+Working+Group.">Treatment of multiple myeloma with high-risk cytogenetics: a consensus of the International Myeloma Working Group.</a> Blood. 127, 2955-2962 (2016).</li><li>Radbruch, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Competence+and+competition:+the+challenge+of+becoming+a+long-lived+plasma+cell.">Competence and competition: the challenge of becoming a long-lived plasma cell.</a> Nature Reviews Immunology. 6, 741-750 (2006).</li><li>Lai, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+cytogenetics+in+multiple+myeloma:+a+study+of+151+patients+including+117+patients+at+diagnosis.">Improved cytogenetics in multiple myeloma: a study of 151 patients including 117 patients at diagnosis.</a> Blood. 85 (9), 2490-2497 (1995).</li><li>Hallek, M., Bergsagel, P. L., Anderson, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+myeloma:+increasing+evidence+for+a+multistep+transformation+process.">Multiple myeloma: increasing evidence for a multistep transformation process.</a> Blood. 91, 3-21 (1998).</li><li>Munsh, N. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Consensus+recommendations+for+risk+stratification+in+multiple+myeloma:+report+of+the+International+Myeloma+Workshop+Consensus+Panel+2.">Consensus recommendations for risk stratification in multiple myeloma: report of the International Myeloma Workshop Consensus Panel 2.</a> Blood. 117, 4696-4700 (2011).</li><li>Gole, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=cIg-FISH+On+Patients+with+Multiple+Myeloma+-+A+Modified+and+Simple+Technique+Easily+Incorporated+Into+Routine+Clinical+Service.">cIg-FISH On Patients with Multiple Myeloma - A Modified and Simple Technique Easily Incorporated Into Routine Clinical Service.</a> Blood. 120, 4792-4792 (2012).</li><li>Lee, S. H., Erber, W., Porwit, A., Tomonaga, M., Peterson, L. I. C. S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematology,+ICSH+guidelines+for+the+standardization+of+bone+marrow+specimens+and+reports.">Hematology, ICSH guidelines for the standardization of bone marrow specimens and reports.</a> International Journal of Laboratory Hematology. 30, 349-364 (2008).</li><li>&#352;tifter, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combined+evaluation+of+bone+marrow+aspirate+and+biopsy+is+superior+in+the+prognosis+of+multiple+myeloma.">Combined evaluation of bone marrow aspirate and biopsy is superior in the prognosis of multiple myeloma.</a> Diagnostic Pathology. 5, 30 (2010).</li><li>Huegel, A., Coyle, L., McNeil, R., Smith, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+interphase+fluorescence+in+situ+hybridization+on+direct+hematological+bone+marrow+smears.">Evaluation of interphase fluorescence in situ hybridization on direct hematological bone marrow smears.</a> Pathology. 27, 86-90 (1995).</li><li>Jacobsson, B., Bernell, P., Arvidsson, I., Hast, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Classical+morphology,+esterase+cytochemistry,+and+interphase+cytogenetics+of+peripheral+blood+and+bone+marrow+smears.">Classical morphology, esterase cytochemistry, and interphase cytogenetics of peripheral blood and bone marrow smears.</a> The Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 44, 1303-1309 (1996).</li><li>Dunning, K., Safo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ultimate+Wright-Giemsa+stain:+60+years+in+the+making.">The ultimate Wright-Giemsa stain: 60 years in the making.</a> Biotechnic &amp; Histochemistry. 86, 69-75 (2011).</li><li>Woronzoff-Dashkoff, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+wright-giemsa+stain.+Secrets+revealed.">The wright-giemsa stain. Secrets revealed.</a> Clinics in Laboratory Medicine. 22, 15-23 (2002).</li><li>McPherson, R. A., Pincus, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Henry's+Clinical+diagnosis+and+Management+by+Laboratory+Methods+E-book.">Henry's Clinical diagnosis and Management by Laboratory Methods E-book.</a> Elsevier Health Sciences. , (2017).</li><li>Ross, F. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Report+from+the+European+Myeloma+Network+on+interphase+FISH+in+multiple+myeloma+and+related+disorders.">Report from the European Myeloma Network on interphase FISH in multiple myeloma and related disorders.</a> Haematologica. 97, 1272-1277 (2012).</li></ol>

MM'de genetik risk sınıflamasına FISH'in uygulanması esastır. FISH raporlarının kritik kısmı tüm çekirdekli hücreler değil, anti-CD138 manyetik boncuklarla sıralanarak veya sitoplazmik immünoglobulin hafif zincir κ veya λ ile işaretlenerek özel olarak saflaştırılan veya tanımlanan klonal PC'lerdir. PC sıralama veya cIg-FISH sonrası interfaze FISH, BM'deki PC'lerin nispeten daha düşük oranı nedeniyle MM tanısında anlamlı bulunmuştur. Bununla birlikte, bu yöntemlerin karmaşık süreçler,...

Multipl miyelom (MM), güçlü biyolojik heterojeniteye ve klinik etkinliğinde büyük bireysel farklılıklara sahip, sağkalım süreleri aylardan on yıllara kadar değişen malign bir plazma hücresi (PC) hastalığıdır. Sitogenetik özellikler MM'nin önemli prognostik göstergeleridir. Risk sınıflandırma sistemi ve genetik özelliklere dayalı bireyselleştirilmiş tedaviler, MM1 ile ilgili klinik araştırmalarda yoğun ilgi gören konular haline gelmiştir. Kemik iliğinin (BM) floresan in situ hibridizasyon (FISH) panelinde test edilen PC'lerin anormallikleri arasında del 13q14 (RB1), del 17p13 (TP53), t (4;14) (IGH / FGFR3), t (11;14) (IGH / MYEOV), t (14; 16) (IGH / MAF), t (14: 20) (IGH / MAFB), 1q21 (CKS1B) kazanç / amplifikasyon ve 1p (CDKN2C) delesyonu bulunur.
MM hastalarının ilk değerlendirmesine standart metafaz sitogenetiği dahil edilmelidir. Geleneksel G bantlı karyotipleme, tüm kromozom analizinin faydasını sunsa da, bu yöntemin düşük verimi birçok yanlış negatif sonuca yol açar2. Geleneksel olarak, PC'ler B lenfosit farklılaşmasının son aşama ürünleri oldukları için büyük ölçüde bölünemez olarak görülmüştür. Bu, bölünmüş görüntüler elde etmeyi zorlaştırır. Uzun süreli kültürlerle (6 gün) MM'de geliştirilmiş sitogenetik analiz ve kültürlerin sitokinlerle uyarılması, yeni tanı konmuş MM hastalarında sitogenetik anormallikleri tanımlamak için umut verici bir yöntem olabilir3. Bununla birlikte, kültür süresi 6 güne uzatıldığında bile, MM hastalarının %30-%50'sinde sitogenetik anormallikler doğru bir şekilde bildirilmiştir4. Ayrıca, MM, prognostik heterojenliğini yansıtan karmaşık sitogenetik anormalliklerle karakterizedir. Bununla birlikte, geleneksel kromozom bantlama teknolojisinin çözünürlüğü düşüktür, bu da MM'de kromozomal anormalliklerin kolayca tespit edilmesine yol açabilir.
İnterfaz FISH, tercihen CD138-pozitif manyetik boncuk bazlı PC sıralama veya sitoplazmik immünoglobulin hafif zincir κ / λ ile işaretlemeden sonra, MM5,6 analizinde vazgeçilmezdir. CD138 pozitif seçilmiş bir örnek, tümör hücrelerinin optimize edilmiş verimi için şiddetle tavsiye edilir. Bununla birlikte, sitogenetik anormalliklerin doğru kantitasyonu, PC sıralaması için en az 4 mL antikoagüle BM gerektirir. Ek olarak, CD138 immünomanyetik boncuk ayıklama ile FISH veya FISH testi (cIg-FISH) ile sitoplazmik κ / λ hafif zincirli immünoglobulin kombinasyonları çok sayıda deneysel maliyeti arttırır ve zaman alıcıdır.
Genellikle PK oranı ilk olarak boyalı BM yaymalarının veya BM biyopsi kesitlerinin morfolojik incelemesinden değerlendirilir7,8. Morfolojik testler için en yüksek kalitede BM örnekleri (ilk kemik iliği aspirat örnekleri) kullanılırken, FISH veya başka bir tespit için gönderilenler genellikle periferik kanla yüksek oranda seyreltme oranına sahip ikincil aspirat örnekleridir.
1990'lı yılların başlarında, birçok çalışma, BM yaymalarının güvenilir ve tekrarlanabilir bir yöntem olduğu kanıtlanmış olan interstisyel FISH muayeneleri için doğrudan kullanılabileceğini göstermiştir9. Periferik kan ve BM yaymalarının FISH ile kombine edilmiş hücre morfolojisi ve esteraz sitokimyasına dayanan zarif bir çalışma, granülositik ve lenfositik lösemili hastalarda kromozomal anormallikleri aydınlatmak için büyük klinik önemini doğrulamıştır10.
Burada, MM hastalarında interfaz FISH tespitinin başarısını artırmak için yeni bir yöntem sunuyoruz.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>automatic FISH machine</td>
			<td>Leica&#160; Corporation</td>
			<td>S500-24</td>
			<td>FINAL Assy Thermobrite 240V</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Abbott Molecular Inc.</td>
			<td>06J49-001</td>
			<td>DAPI Counterstain</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FISH Analysis Software</td>
			<td>IMSTAR&#160; Corporation</td>
			<td>IMSTAR</td>
			<td>FISH Analysis Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FISH Probe</td>
			<td>Abbott Molecular Inc.</td>
			<td>05N56-020</td>
			<td>Vysis Locus Specifc Identifer TP53 / CEP 17 FISH Probe Kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fixed volume pipette</td>
			<td>Eppendorf China Ltd.</td>
			<td>M33768H</td>
			<td>10&#160; microliter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence Microscope</td>
			<td>Olympus Corporation</td>
			<td>BX53</td>
			<td>Forward Fluorescence Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Karyotype Analysis Software</td>
			<td>IMSTAR&#160; Corporation</td>
			<td>IMSTAR</td>
			<td>Karyotype Analysis Software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light Microscope</td>
			<td>Olympus&#160; Corporation</td>
			<td>BX41</td>
			<td>Forward Light Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NP-40</td>
			<td>Abbott Molecular Inc.</td>
			<td>07J05-001</td>
			<td>NP-40</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic staining dyeing rack</td>
			<td>Guangzhou Kaixiu Trading Co., Ltd.</td>
			<td>RSJ-501</td>
			<td>&#160;24 slides</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plastic staining dyeing tank</td>
			<td>Guangzhou Kaixiu Trading Co., Ltd.</td>
			<td>RSJ-516</td>
			<td>&#160;24 slides</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubber Cement</td>
			<td>Marabu&#160;GmbH &#38; Co. KG</td>
			<td>FixoGum&#160;</td>
			<td>Rubber Cement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SSC</td>
			<td>Abbott Molecular Inc.</td>
			<td>02J10-032</td>
			<td>20&#215;SSC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bath</td>
			<td>Shanghai Boxun Medical Bio-Instrument Co., Ltd.</td>
			<td>DK-8D</td>
			<td>Multiple Temperature Water bath</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

interphase fluorescence in situ hybridization of bone marrow smears of multiple myeloma

Floresan in situ hibridizasyon (FISH) tespiti, en sık görülen hematolojik malignitelerden biri olan multipl miyelomda (MM) genetik risk sınıflamasında vazgeçilmez bir yöntemdir. MM'nin tanımlayıcı özelliği, kemik iliğinde biriken malign plazma hücreleridir. MM için FISH raporları, anti-CD138 manyetik boncuklarla sıralayarak veya sitoplazmik immünoglobulin hafif zincir κ veya λ ile işaretleyerek tüm çekirdekli hücrelerden ziyade saflaştırılmış veya tanımlanmış klonal plazma hücrelerine odaklanır. Kemik iliği interfaz çekirdekleri genellikle taze kemik iliği hücrelerinden elde edilir. Bununla birlikte, plazma hücresi örneklerinin tatmin edici bir şekilde zenginleştirilmesi, zor kemik iliği ekstraksiyonu veya kemik iliği kuru musluğu durumunda elde edilemeyen büyük miktarda taze heparin anti-pıhtılaşmış kemik iliği gerektirir. Bu yazıda, lekeli veya lekesiz kemik iliği yaymalarında FISH tespitinin başarısını artırmak için yeni bir yöntem oluşturduk. Kemik iliği yaymalarının elde edilmesi, antikoagüle kemik iliği örneklerinden daha kolaydır.

Yeni tanı konmuş bir MM hastasının ilk morfolojik değerlendirmesinde, BM yaymasındaki PC'lerin% 15'inin normal PC'lerden daha büyük miktarlarda sitoplazma ile birlikte daha büyük ve daha koyu çekirdeklere sahip olduğu bulunmuştur (Şekil 2A). İmmünofenotip tekniği ile tespit edilen ilk heparin anti-pıhtılaşmış BM tüpü, monoklonal anormal PC'lerin sadece% 2.3'ünü ortaya çıkardı. CD138 immünomanyetik boncuk sıralama, FISH veya cIg-FISH tekniği ile kombinasyon hal...

Watch this Scientific Journal Video about Interphase Fluorescence in situ Hybridization of Bone Marrow Smears of Multiple Myeloma at JoVE.com

Interphase Fluorescence in situ Hybridization of Bone Marrow Smears of Multiple Myeloma

Burada, multipl miyelom hastalarından alınan kemik iliği yaymalarında interfaz floresan in situ hibridizasyon tespitinin başarısını artırmak için bir protokol sunuyoruz.

İnfaz Floresan in situ Multipl Miyelomun Kemik İliği Yaymalarının Hibridizasyonu

Fluorescence in situ hybridization (FISH) detection is an indispensable method in genetic risk stratification in multiple myeloma (MM), which is one of ...

Multipl miyelomda genetik risk tabakalaşmasına FISH adı verilen Floresan In Situ Hibridizasyonun uygulanması esastır. FISH raporlarının kritik kısmı, tüm çekirdekli hücreler değil, anti-CD138 manyetik boncuklarla sıralanarak veya sitoplazmik kappa veya cIg FISH adı verilen FISH testi ile Lambda hafif zincirli immünoglobulin ile işaretlenerek spesifik olarak saflaştırılmış veya tanımlanmış klonal plazma hücreleridir. Plazma hücresi sıralamasından sonra interfaze FISH veya cIg FISH, kemik iliğindeki plazma hücrelerinin nispeten daha düşük oranı nedeniyle multipl miyelom tanısında önemli olduğu ortaya çıkmaktadır.Bununla birlikte, bu yöntemlerin karmaşık süreçler, yüksek numune talepleri ve yüksek deney maliyetleri gibi bazı eksiklikleri vardır. Plazma hücreleri hızlı bir şekilde kemik iliği yaymasına yerleştirilebilir. Buna dayanarak, multipl miyelom hücrelerinin tespiti için kemik iliği yayma FISH kullanıyoruz.Bu çalışma, Helsinki Deklarasyonu'nun ilkelerine göre yürütülmüş ve Wuhan Üniversitesi Zhongnan Hastanesi Etik Komitesi tarafından onaylanmıştır. Örnekler, Çin Wuhan Üniversitesi Zhongnan Hastanesi Hematoloji Bölümü'ndeki multipl miyelom hastasından toplandı. İlk 0.2 mililitre kemik iliği solüsyonunu temiz bir tek kullanımlık cam kızağa yerleştirin, kemik iliğini hızlı bir şekilde çıkararak kemik iliği lekelerini eşit kalınlığa ve keskin kuyruklara yayın, ardından doğal olarak kurutun.Kemik iliği filmlerini oda sıcaklığında yaklaşık 10 saniye boyunca bir mililitre Wright-Giemsa çözeltisi ile örtün. Slaytlara bir mililitre fosfat tamponu ekleyin, boya çözeltisinin kurumasını veya slaytlardan akmasını önlemek için özen gösterildi. Boya çözeltisini nazikçe karıştırın ve oda sıcaklığında 15 dakika bekletin.Slaytları temiz suyla durulayın ve oda sıcaklığında havada kurulayın. Kötü huylu plazma hücrelerini tespit etmek için ileri ışık mikroskobu kullanın, plazma hücreleri iyi dağılmış olmalıdır. Şimdi sahada gördüğümüz şey, oldukça dağılmış plazma hücreleridir.Bu tipik bir Binükleer nükleer plazma hücresidir. Plazma hücrelerinin rengini değiştirmek ve sabitlemek için hibridize alanı 10 dakika boyunca fiksatif çözelti ile örtün. Slaytı deiyonize suyla durulayın ve oda sıcaklığında havada kurutun.İki kez SSC tamponu içeren bir kavanozu bir su banyosunda 56 santigrat dereceye kadar önceden ısıtın. Hazırlanan kemik iliği yaymasını önceden ısıtılmış iki kez SSC tamponunda 10 dakika boyunca yıkayın, ardından oda sıcaklığında deiyonize suya batırın. Yaymayı bir dakika boyunca her biri% 70% 85 ve% 100 etanol gradyanında dehidre edin.Bulaşmayı 10 dakika boyunca havada kurutun. İlk önce hibridizasyon alanına kromozom 17 prob karışımının sentromerine TP53 ekleyin ve alttan hava kabarcıklarını gidermek için ince sivri cımbızlara hafifçe bastıran bir kapak kayması ile örtün. İyi bir sızdırmazlık sağlamak için kapak kaymasının her tarafını kauçuk çimento ile kapatın.Kauçuk çimentonun katılaşmasından sonra, kızak otomatik bir FISH makinesine yerleştirildi ve beş dakika boyunca 78 santigrat derecede denatürasyon yapıldı ve ardından gece boyunca 37 santigrat derecede hibridizasyon yapıldı. Slaytı FISH makinesinden alın. Kauçuk çimentoyu nazikçe çıkarmak için ince sivri uçlu cımbız kullanın.Kapak kaymasını yıkamak için slaytı oda sıcaklığında iki kez SSC'ye yaklaşık bir veya iki dakika batırın. Slaytı 68 santigrat derece ön ısıtma tamponunda iki dakika boyunca bir su banyosunda yıkayın. Slaytları iki kez SSC ile 37 santigrat derece su banyosunda bir dakika boyunca yıkayın.Hibridize alana 10 mikrolitre DAPI'de 10 dakika boyunca iyice kuruması için karanlıkta ayarlayın, bir kapak kayması ile örtün. Bir floresan mikroskobunda uygun bir filtre seti kullanarak hibridize edilmiş slaytı görüntüleyin, hücre çekirdeğinin floresan yoğunluğunu gözlemlemek için tek renkli mavi florofor optik filtre kullanın. Hücre çekirdeği görüntülerini bir DAPI filtre kümesi altında alın.CEP17 yeşil floresan ile etiketlendi. CEP17'nin yerini gözlemlemek için spektrum yeşil florofor optik filtre kullanın. CEP17 sinyal görüntüsünü yeşil filtre seti altında alın.TP53 geni turuncu floresan ile etiketlendi. TP53'ü gözlemlemek için spektrum turuncu florofor optik filtresini kullanın, setin altındaki TP53 sinyal görüntüsünü alın, bu üç görüntüyü bir bütün halinde birleştirin ve sayısal anormallikleri inceleyin. Normal bir fazlar arası hücrede, bir çift normal kromozomu gösteren mavi floresanlı bir çekirdeğin içinde iki turuncu ve iki yeşil sinyal gözlenir 17.Sonuçlar, multipl miyelom hastasında kemik iliğinin morfolojisini ve genetiğini gösterdi. Şekil A, kemik iliği yaymasındaki plazma hücrelerinin% 15'inin normalden daha büyük miktarda sitoplazma ile birlikte daha büyük, daha koyu ve nükleere sahip olduğunu göstermiştir. Şekil B, bir kemik iliği yaymasında çekirdekli bir plazma hücresi tarafından temsil edilen gri skala görüntüsünü göstermiştir.Şekil C, plazma hücresinin bir interfaz çekirdeğinde dört turuncu ve dört yeşil sinyal gösterdi ve bu da kromozom 17'nin dört kopyasının bir çekirdekte lokalize olduğunu düşündürdü. Şekil D, bu hastanın anormal kromozom karyogramının bir çekirdekte iki çift kromozom 17'yi doğruladığını göstermiştir. Kemik iliği yaymalarının elde edilmesi, antikoagülan kemik iliği örneklerinden çok daha kolaydır, çünkü antikoagüle kemik iliği elde etmek, çekirdeği elde etmek için karmaşık prosedürler gerektirir.Bu doğrultuda multipl miyelom hücrelerinin tespiti için kemik iliği yayma FISH için ikna edici bir yöntem oluşturduk.

Research

JoVE Journal

Medicine

Interphase Fluorescence in situ Hybridization of Bone Marrow Smears of Multiple Myeloma

Oral Biofilm Analysis of Palatal Expanders by Fluorescence In-Situ Hybridization and Confocal Laser Scanning Microscopy

Floresan In-Situ Hibridizasyon ve Konfokal Lazer Tarama Mikroskopi Palatal Genişleticilerden Oral Biyofilm Analizi

Confocal laser scanning microscopy (CLSM) of natural heterogeneous biofilm is today facilitated by a comprehensive range of staining techniques, one of ...

High Throughput Sequential ELISA for Validation of Biomarkers of Acute Graft-Versus-Host Disease

Akut Graft-Versus-Host Hastalığı Biyomarkörler onaylanması için Yüksek Verimli Sıralı ELISA

Unbiased discovery proteomics strategies have  the potential to identify large numbers of novel biomarkers that can improve  diagnostic and prognostic ...

Using Quantitative Real-time PCR to Determine Donor Cell Engraftment in a Competitive Murine Bone Marrow Transplantation Model

Rekabetçi bir mürin Kemik İliği Transplantasyon Modelinde Donör Hücre Aşı belirleme Kantitatif Gerçek-zamanlı PCR kullanarak

Murine bone marrow transplantation models provide an important tool in measuring hematopoietic stem cell (HSC) functions and determining genes/molecules ...

Pre-clinical Evaluation of Tyrosine Kinase Inhibitors for Treatment of Acute Leukemia

Akut lösemi tedavisi için Tirosin Kinaz İnhibitörleri klinik öncesi değerlendirilmesi

Receptor tyrosine kinases have been implicated in the development and progression of many cancers, including both leukemia and solid tumors, and are ...

Femoral Bone Marrow Aspiration in Live Mice

Canlı Farelerde Femoral Kemik İliği Aspirasyon

Serial sampling of the cellular composition of bone marrow (BM) is a routine procedure critical to clinical hematology. This protocol describes a detailed ...

Busulfan as a Myelosuppressive Agent for Generating Stable High-level Bone Marrow Chimerism in Mice

Farelerde Kararlı Yüksek seviyeli Kemik İliği Kimerizm Yaratma için miyelosupresif Ajan olarak Busulfan

Bone marrow transplantation (BMT) is often used to replace the bone marrow (BM) compartment of recipient mice with BM cells expressing a distinct ...

Establishment of a Human Multiple Myeloma Xenograft Model in the Chicken to Study Tumor Growth, Invasion and Angiogenesis

Chicken İnsan Multipl Miyelom Xenograftlarında Modeli Kurulması Tümör Büyüme, Invasion ve Anjiogenez Eğitim için

Multiple myeloma (MM), a malignant plasma cell disease, remains incurable and novel drugs are required to improve the prognosis of patients. Due to the ...

In Vivo Imaging and Tracking of Technetium-99m Labeled Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells in Equine Tendinopathy

In Vivo Imaging and Tracking of Technetium-99m Labeled Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells in Equine Tendinopathy

Atçılık tendinopatisinde Kemik İliği Mezenkimal Kök Hücreler Etiketli Teknesyum- 99m Vivo Görüntüleme ve Takip

Recent advances in the application of bone marrow mesenchymal stem cells (BMMSC) for the treatment of tendon and ligament injuries in the horse suggest ...

An Organotypic High Throughput System for Characterization of Drug Sensitivity of Primary Multiple Myeloma Cells

Primer Multipl Miyelom Hücrelerinin İlaç Duyarlılık Karakterizasyonu için bir Organotipik Yüksek Verimli Sistemi

In this work we describe a novel approach that combines ex vivo drug sensitivity assays and digital image analysis to estimate chemosensitivity and ...

Clinicopathological Analysis of miRNA Expression in Breast Cancer Tissues by Using miRNA In Situ Hybridization

Clinicopathological Analysis of miRNA Expression in Breast Cancer Tissues by Using miRNA In Situ Hybridization

miRNA kullanarak Meme Kanseri Dokularındaki miRNA İfade Klinikopatolojik Analizi<em&gt; In Situ</em&gt; Melezleme

In this article, we describe a detailed protocol for miRNA detection in breast cancer tissue using in situ hybridization with a digoxigenin-labelled LNA ...