Name: measuring photophysiology of attached stage of colacium sp. by a cuvette-type fast repetition rate fluorometer
Uploaded: 2021-11-12T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring Photophysiology of Attached Stage of Colacium sp. by a Cuvette-Type Fast Repetition Rate Fluorometer at JoVE.com

وحظي هذا العمل بدعم من صندوق البحوث التعاونية من محافظة شيغا المعنون "دراسة عن نوعية المياه وبيئة قاع البحيرة لحماية سلامة البيئة المائية" في إطار المنحة اليابانية للتنشيط الإقليمي وصندوق بحوث البيئة وتطوير التكنولوجيا (رقم 5-1607) التابع لوزارة البيئة في اليابان. https://www.kantei.go.jp/jp/singi/tiiki/tiikisaisei/souseikoufukin.html. يود المؤلفون أن يشكروا Enago (www.enago.jp) على مراجعة اللغة الإنجليزية.

1. أخذ العينات
<ol><li>جمع مياه البحيرة من السطح بواسطة دلو. لاستهداف Colacium sp. تعلق على S. mucronata (الشكل 1A-C) مرشح 0.5-10 لتر من مياه البحيرة باستخدام شبكة نايلون 100 ميكرومتر net52. ملاحظة: غالبا ما يتم تجميع S. mucronata بكثافة في المياه الضحلة وا...

أظهر هذا البروتوكول لأول مرة أن الفسيولوجيا الضوئية للكولاسيوم sp. خلال المرحلة المرفقة في بيئة طبيعية قابلة للمقارنة مع مرحلة العوالق في وسط AF-6. بالإضافة إلى ذلك، لم تؤثر محتويات الأمعاء من S. mucronata الجائعة على خط الأساس وفلورة Chl-a عندما كانت الكثافة ≤5 inds·mL−1 (<strong class="x...

يعد التألق المتغير الكلوروفيل أداة مفيدة لقياس الفيزيولوجيا الضوئية للنظام الضوئي للطحالب II (PSII). تستجيب الطحالب لمختلف الضغوط البيئية ، مثل الضوء الزائد ونقص المغذيات ، عن طريق تغيير الفيزيولوجيا الضوئية PSII. يعد مقياس فلورومتر معدل التكرار السريع (FRRf) طريقة شائعة لقياس الفيزيولوجيا الضوئية PSII 1,2 وتقدير الإنتاجية الأولية1,3,4 ، والتي تمكن من مراقبة الفيزيولوجيا الضوئية للعوالق النباتية PSII ، وكذلك الإنتاجية الأولية عبر المقاييس المكانية والزمانية الواسعة 5,6,7. يمكن ل FRRf قياس المقطع العرضي لامتصاص PSII (σ PSII) في وقت واحد ، وتركيز مركز التفاعل ([RCII]) ، والحد الأقصى للكفاءة الكيميائية الضوئية (Fv / Fm) ، والكفاءة الكيميائية الضوئية الفعالة (Fq ′ / Fm ′) ، والتبريد غير الكيميائي الضوئي (NPQNSV) (الجدول 1). بشكل عام، يتم تعريف Fv/Fm وFq′/Fm′ على أنهما نشاط PSII8، في حين يتم تعريف NPQNSV على أنه طاقة نسبية مبددة حراريا9.
الأهم من ذلك ، أن ومضات الدوران الفردي (ST) من FRRf تقلل تماما من مستقبل إلكترون الكينون الأساسي ، QA ، ولكن ليس تجمع البلاستوكينون. وعلى العكس من ذلك، فإن ومضات الدوران المتعدد (MT) من مقياس فلورومتر تعديل سعة النبض (PAM) يمكن أن تقلل من كليهما. تتمتع طريقة ST بميزة واضحة على طريقة MT عند تحديد الأصول المحتملة ل NPQNSV عن طريق قياس حركية الاسترداد في وقت واحد ل Fv / Fm و Fq ′ / Fm و NPQNSV و σ PSII10. وحتى الآن، هناك عدة أنواع من أدوات FRRf، مثل النوع الغاطس، ونوع الكوفيت، ونوع التدفق عبر الإنترنت، متاحة تجاريا. يتيح FRRf من النوع الغاطس قياسات في الموقع في المحيطات والبحيرات ، في حين أن FRRf من نوع cuvette مناسب لقياس أحجام العينات الصغيرة. يستخدم نوع التدفق بشكل شائع لقياس الفسيولوجيا الضوئية للعوالق النباتية في المياه السطحية باستمرار.
وبالنظر إلى تطور مقاييس الفلورومترات PAM، بما في ذلك نوع كوفيت، لمجموعة واسعة من الموضوعات11، لا تزال مقاييس الفلورومتر PAM أكثر شيوعا من FRRfs في أبحاث الفيزيولوجيا الضوئية للطحالب12. على سبيل المثال ، على الرغم من أن بنية غرفة العينة وسعة cuvette بين هذه الأدوات تختلف اختلافا طفيفا فقط ، فقد تم تطبيق PAM من نوع cuvette على العوالق النباتية13,14,15 ، والطحالب الدقيقة القاعية16,17,18 ، والطحالب الجليدية19 ، والطحالب epizoic 20 ، في حين تم تطبيق FRRf من نوع cuvette في المقام الأول على العوالق النباتية21,22,23 وعدد محدود من مجتمعات الطحالب الجليدية24,25. نظرا لفعاليته ، فإن FRRf من نوع cuvette ينطبق بنفس القدر على الطحالب القاعية و epizoic. لذلك ، فإن توسيع تطبيقه سيوفر نظرة ثاقبة كبيرة على الفيزيولوجيا الضوئية PSII ، خاصة بالنسبة للفسيولوجيا الضوئية للطحالب الفوقية الأقل شهرة.
لم تحظ الطحالب الإبيزوية باهتمام كبير ، مع القليل من الدراسات التي تدرس الفيزيولوجيا الضوئية PSII 20,26 ، على الأرجح بسبب أدوارها الثانوية في الشبكات الغذائية المائية27,28. ومع ذلك، يمكن أن تؤثر الإببيونتات، بما في ذلك الطحالب الفوقية، تأثيرا إيجابيا على ديناميكيات مجتمع العوالق الحيوانية، مثل زيادة معدلات التكاثر والبقاء على قيد الحياة29,30، فضلا عن التأثير سلبا على العمليات، مثل زيادة معدل الغرق29,31 والتعرض للحيوانات المفترسة البصرية32,33,34,35,36 . لذلك ، فإن استكشاف العوامل البيئية والبيولوجية التي تتحكم في ديناميكيات epibiont في مجتمعات العوالق الحيوانية أمر بالغ الأهمية.
من بين الطحالب الفوقية ، كولاسيوم إيرنبرغ 1834 (Euglenophyta) هي مجموعة طحالب شائعة في المياه العذبة32،37،38،39 مع مراحل حياة مختلفة ، بما في ذلك المرفقة (الشكل 1A-D) ، والعوالق غير المتحركة (الشكل 1E ، F) ، ومراحل العوالق المتحركة 40،41 . خلال مرحلة العوالق غير المتحركة ، تعيش الخلايا كعوالق أحادية الخلية ، أو مستعمرات مجمعة ، أو مستعمرات صفائح من طبقة واحدة ، مغطاة بالصمغ42. في المرحلة المرفقة ، يستخدم Colacium sp. الصمغ الذي يفرز من الطرف الأمامي للخلية37،39،41 للالتصاق بالكائنات الحية الركيزة (basibionts) ، وخاصة القشريات الدقيقة41،43. تتضمن دورة حياتها أيضا الانفصال عن الهيكل الخارجي المنصهر أو القاعدية الميتة والسباحة مع سوطاها للعثور على كائن حي آخر في الركيزة39. يمكن لكل من العوالق والمراحل المرفقة زيادة حجم سكانها عن طريق الانقسام الانقسامي40. على الرغم من افتراض أن المرحلة المرفقة بها هي سمة تطورية لجمع الموارد، مثل الضوء44 والعناصر النزرة41،45،46، أو كاستراتيجية تشتت27، إلا أنه لا يتوفر سوى القليل من الأدلة التجريبية حول هذه الجوانب37،41،44 وآليات التعلق الرئيسية غير معروفة إلى حد كبير. على سبيل المثال، توقع روسوسكي وكوغرينز أن يحصل الكولاسيوم على المنغنيز (Mn) من مجدافيات الأرجل الركيزة41، التي تتركز في الهيكل الخارجي47.
هنا ، نصف كيفية قياس الفسيولوجيا الضوئية PSII للطحالب العوالق وطريقة التطبيق ذات الصلة لاستهداف الطحالب المرفقة (المرتبطة بالعوالق الحيوانية) مع خلايا Colacium sp. باستخدام FRRf من نوع cuvette. نحن نستخدم نظام Act2 المجهز بثلاثة صمامات ثنائية باعثة للضوء (LEDs) توفر طاقة إثارة فلاش تتمحور حول 444 نانومتر و 512 نانومتر و 633 نانومتر 48. هنا ، يتوافق 444 نانومتر (أزرق) مع ذروة امتصاص chrophyll a (Chl-a ) ، في حين أن 512 نانومتر (أخضر) و 633 نانومتر (برتقالي) تتوافق مع قمم امتصاص phycoerythrin و phycocyanin ، على التوالي. تبلغ ذروة الكشف عن إشارة الفلورسنت 682 نانومتر مع عرض النطاق الترددي النصفي 30 نانومتر. نظرا لأنه من الصعب العثور على المرحلة العوالق من Colacium sp. في البيئات الطبيعية ، فقد تم جمع المرحلة المرفقة بها للتجارب. من بين العديد من الكائنات الحية الركيزة ، Scapholeberis mucronata O.F. Müller 1776 (Branchiopoda ، Daphniidae; الشكل 1A ، B ، G) هو واحد من أبسط الأشكال للتعامل معها بسبب سرعة السباحة البطيئة ، وحجم الجسم الكبير (400-650 ميكرومتر) ، والسلوك الفريد (معلقة رأسا على عقب على سطح الماء). لذلك ، يستخدم هذا البروتوكول Colacium sp. المرفق على S. mucronata كدراسة حالة لنظام Colacium-basibiont. لتجنب التألق المشتق من محتويات الأمعاء ، تم تجويع S. mucronata. كما ذكرت دراسة سابقة أن إشارة التألق من محتويات الأمعاء (الطحالب المبتلعة) تظهر انخفاضا بمقدار خمسة أضعاف بعد 40 دقيقة 49 ، توقعنا أن تكون المجاعة لمدة 90 دقيقة كافية لتقليل إمكانية تألق محتوى الأمعاء الذي يؤثر على قياس FRRf مع الحد الأدنى من تأثيرات الإجهاد التجريبي على Colacium sp. ، مثل نقص المغذيات. علاوة على ذلك ، تم تطبيق هذا البروتوكول لتوضيح آلية ربط Colacium sp. وتحديد كيفية تأثير معدنين ، الكالسيوم (Ca) والمنغنيز (Mn) على الفسيولوجيا الضوئية لكل من العوالق والمراحل المرفقة. يلعب الكالسيوم أدوارا رئيسية في مسارات التمثيل الضوئي50 بطرق متعددة ، وكلا المعدنين مطلوبان لبناء المجمعات المتطورة للأكسجين في PSII51. نظرا لأن الكالسيوم والمنغنيز يتركزان بشكل كبير في قشرة العوالق الحيوانية القشريات47 ، فإننا نفترض أن الكولاسيوم sp. الفسيولوجيا الضوئية قد تستجيب بشكل أكثر بروزا لتخصيب Ca و Mn خلال مرحلة العوالق إذا حصلت مرحلة الحياة هذه على هذه العناصر من S. mucronata خلال المرحلة المرفقة.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acrodisc syringe filter</td>
			<td>Pall Corporation, Ann Arbor, MI, USA</td>
			<td></td>
			<td>0.2 &#956;m pore size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Act2Run</td>
			<td>CTG Ltd., West Molesey, UK</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotin</td>
			<td>Wako</td>
			<td>023-08711</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2&#183;2H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>031-25031</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCO3</td>
			<td>Wako</td>
			<td>036-00382</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citric acid</td>
			<td>Wako</td>
			<td>036-05522</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CoCl2&#183;6H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>036-03682</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Concentrated Chlorella</td>
			<td>Recenttec, Tokyo, Japan</td>
			<td></td>
			<td>20 mg C&#183;mL&#8722;1 ; store at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FastOcean Act2</td>
			<td>CTG Ltd., West Molesey, UK</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fe-citrate</td>
			<td>Wako</td>
			<td>093-00952</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FeCl3&#183;6H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>091-00872</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HCLP-880PF</td>
			<td>Nippon Medical and Chemical Instruments 
			&#160;Co., Ltd., Osaka, Japan</td>
			<td></td>
			<td>With LED light bulbs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>K2HPO4</td>
			<td>Wako</td>
			<td>160-04292</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>Wako</td>
			<td>167-04241</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgSO4&#183;7H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>137-00402</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MnCl3&#183;4H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>139-00722</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2EDTA</td>
			<td>Wako</td>
			<td>343-01861</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2MoO4</td>
			<td>Wako</td>
			<td>196-02472</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaNO3</td>
			<td>Wako</td>
			<td>191-02542</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NH4NO3</td>
			<td>Wako</td>
			<td>015-03231</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plankton Counter</td>
			<td>Matsunami Glass, Osaka, Japan</td>
			<td>S6300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pylex test tube</td>
			<td>CTG Ltd., West Molesey, UK</td>
			<td></td>
			<td>With rim, 16 x 100 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vit. B1</td>
			<td>Wako</td>
			<td>203-00851</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vit. B12</td>
			<td>Wako</td>
			<td>226-00343</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vit. B6</td>
			<td>Wako</td>
			<td>165-05401</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZnSO4&#183;7H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>264-00402</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measuring photophysiology of attached stage of colacium sp. by a cuvette-type fast repetition rate fluorometer

يعد مقياس الفلورومتر بمعدل التكرار السريع (FRRf) طريقة مفيدة لقياس الفيزيولوجيا الضوئية للنظام الضوئي II (PSII) والإنتاجية الأولية. على الرغم من أن FRRf يمكنه قياس المقطع العرضي لامتصاص PSII (σ PSII) ، والحد الأقصى للكفاءة الكيميائية الضوئية (Fv / Fm) ، والكفاءة الكيميائية الضوئية الفعالة (Fq ′ / Fm′) ، والتبريد غير الكيميائي الضوئي (NPQNSV) لمختلف الطحالب حقيقية النواة والبكتيريا الزرقاء ، فقد ركزت جميع دراسات FRRf تقريبا حتى الآن على العوالق النباتية. هنا ، يصف البروتوكول كيفية قياس الفسيولوجيا الضوئية PSII للطحالب الفوقية Colacium sp. Ehrenberg 1834 (Euglenophyta) ، في مرحلته المرفقة (المرفقة بالعوالق الحيوانية) ، باستخدام FRRf من نوع cuvette. أولا ، قمنا بتقدير آثار العوالق الحيوانية الركيزة (Scapholeberis mucronata O.F. Müller 1776 ، Cladocera ، Daphniidae) على التألق الأساسي و σ PSII و Fv / Fm و Fq ′ / Fm و NPQNSV من العوالق Colacium sp. للتحقق من صحة هذه المنهجية ، سجلنا قياسات الفيزيولوجيا الضوئية للكولاسيوم sp. المرفق على S. mucronata وقارنا هذه النتائج مع مرحلة العوالق الخاصة به. أظهرت النتائج التمثيلية كيف يمكن للبروتوكول تحديد آثار الكالسيوم (Ca) والمنغنيز (Mn) على الكولاسيوم sp. الفيزيولوجيا الضوئية وتحديد الآثار المختلفة لتخصيب Mn بين المراحل المرفقة والعوالق . وأخيرا، نناقش قدرة هذا البروتوكول على التكيف مع الطحالب المحيطة الأخرى.

لم يكن هناك تأثير كبير للتألق الأساسي (الشكل 5) أو التألق Chl-a (الشكل 6) بواسطة S. mucronata حتى 5 أفراد (inds.) mL−1. ومع ذلك ، تأثرت Fv / Fm و NPQNSV بشكل كبير عندما كان S. mucronata 7.5 inds·mL−1. لذلك ، لقياس الفسيولوجيا الضوئي?...

Watch this Scientific Journal Video about Measuring Photophysiology of Attached Stage of Colacium sp. by a Cuvette-Type Fast Repetition Rate Fluorometer at JoVE.com

Measuring Photophysiology of Attached Stage of Colacium sp. by a Cuvette-Type Fast Repetition Rate Fluorometer

يعد مقياس الفلورومتر بمعدل التكرار السريع (FRRf) طريقة مفيدة لقياس الفيزيولوجيا الضوئية للنظام الضوئي II والإنتاجية الأولية. هنا نصف بروتوكولا لقياس الفسيولوجيا الضوئية PSII للطحالب الفوقية ، Colacium sp. على العوالق الحيوانية الركيزة باستخدام FRRf من نوع cuvette.

قياس الفيزيولوجيا الضوئية للمرحلة المرفقة من الكولاسيوم sp. بواسطة مقياس فلورومتر معدل التكرار السريع من نوع كوفيت

Fast repetition rate fluorometer (FRRf) is a beneficial method for measuring photosystem II (PSII) photophysiology and primary productivity. Although FRRf ...

يقيس هذا البروتوكول نشاط التمثيل الضوئي للطحالب المرفقة ، بينما لا تزال مرتبطة بالعوالق ، تماما كما هو الحال في الطبيعة. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكن قياس الفيزيولوجيا الضوئية في الوقت الفعلي دون تشتيت العينة. لدراسة آثار أفراد العوالق الحيوانية على التألق الأساسي ، قم بإعداد scapholeberis mucronata البالغ من الثقافة دون أي كائنات حية مرفقة.الآن تجويع الأفراد في FLW عند 20 درجة مئوية لمدة 90 دقيقة على الأقل لتجنب التألق من محتوى الأمعاء. صب 1.5 ملليلتر من FWL في كوفيت. التقط العدد المطلوب من s.الأفراد mucronata باستخدام ماصة تحت المجهر الضوئي في تكبير 100 مرة ونقلها إلى cuvette. أضف FLW لجعل حجم العينة يصل إلى 2 ملليلتر والسماح لها بالتأقلم تحت الإضاءة المنخفضة عند 20 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة قبل قياس مقياس الفلورومتر لمعدل التكرار السريع. ثم انقر فوق الفعل للتشغيل"لبدء القياس وتكرار القياسات أكثر من ثلاث مرات لكل عينة.اقرأ قيمة F0 من المخطط الناتج. التقط أنواع الكولاسيوم باستخدام كارابيس منصهر باستخدام ماصة تحت المجهر الضوئي عند تكبير 100 مرة واغسلها باستخدام FLW. قم بتلقيح أنواع الكولاسيوم بشكل معقم في وسط AF-6 في أنبوب زجاجي سعة 10 ملليلتر على مقعد نظيف.حافظ على الثقافة عند درجة حرارة NC2 في غرفة النمو ، وهز الأنبوب الزجاجي بلطف باليد مرة واحدة على الأقل يوميا لمنع استقرار الخلايا. لدراسة آثار أفراد العوالق الحيوانية على الكلوروفيل التألق من أنواع الكولاسيوم ، استخدم البالغين s. mucronata دون أي كائنات حية مرفقة.لتجنب التألق من محتويات الأمعاء ، تجويع الأفراد في FLW لمدة 90 دقيقة على الأقل. قم بإعداد مقياس فلورومتر معدل تكرار سريع من نوع cuvette. الآن صب 1.5 ملليلتر من عينة فرعية من أنواع الكولاسيوم قبل استزراعها في كوفيت.ثم انقل العدد المطلوب من أفراد s. mucronata إلى هذه الكوفيت واجعل حجم العينة يصل إلى 2 ملليلتر مع الوسط الذي تمت تصفيته. تأقلم الأفراد تحت الإضاءة المنخفضة عند 20 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة قبل أخذ قياس الفلورومتر بمعدل التكرار السريع.انقر فوق الفعل للتشغيل"لبدء القياس ، وتكرار القياسات أكثر من ثلاث مرات لكل عينة. اقرأ قيم F0 وFM من المخطط الناتج. لتصحيح التألق الأساسي، قم بتصفية وسط الاستزراع باستخدام مرشح بحجم 0.2 ميكرومتر وقياس التألق.اطرح F0 من عينة خط الأساس من F0 و FM لأنواع الكولاسيوم أو عدل قيمة التصحيح الفارغة في الإعدادات في علامة تبويب الخيارات.ثم يغسل s. mucronata باستخدام FLW. نقل ق.mucronata في 100 ملليلتر من FLW والاحتفاظ بها تحت ظروف مظلمة في درجة حرارة NC2 لمدة 90 دقيقة للمجاعة. صب 1.5 ملليلتر من FLW في كوفيت. نقل حوالي عشرة ثوان.الأفراد mucronata مع أنواع colacium في cuvette وإضافة FLW لجلب عينة تصل إلى 2 ملليلتر. تأقلم الأفراد تحت الإضاءة المنخفضة في درجة حرارة N2C لمدة 15 دقيقة وقياس الكلوروفيل التألق ، كما هو مذكور في مخطوطة النص. لتعداد عدد الخلايا المرفقة ، قم بإصلاح العينة بنسبة 2٪ glutaraldehyde بعد أخذ قياس الفلورومتر السريع لمعدل التكرار.ثم التقط صورا على عدة أعماق بؤرية ومواقع s. mucronata تحت المجهر الضوئي. لم يكن هناك تأثير كبير على التألق الأساسي أو الكلوروفيل التألق بواسطة s.mucronata ما يصل إلى 5 أفراد لكل ملليلتر. ومع ذلك ، تأثرت الكفاءة الكيميائية الضوئية القصوى والتبريد غير الكيميائي الضوئي بشكل كبير عندما كانت كثافة s. mucronata 7.5 فرد لكل ملليلتر.أظهر التباين الموسمي في الفيزيولوجيا النباتية لأنواع الكولاسيوم خلال مرحلة التعلق ومرحلة العوالق للمرحلة الثابتة في وسط AF-6 متوسطا مماثلا للكفاءة الكيميائية الضوئية القصوى والتبريد غير الكيميائي الضوئي. بالنسبة للمرحلة المرفقة من أنواع الكولاسيوم في ظل الظروف المظلمة ، لم يكن هناك فرق كبير في المعلمات الفسيولوجية الضوئية ، باستثناء أن التبريد غير الكيميائي الضوئي أعلى بالنسبة للمنغنيز من الكالسيوم بعد ثلاث ساعات ، وبكثافة إضاءة منخفضة عند 21 ساعة. بالنسبة لمرحلة العوالق ، كان المقطع العرضي لامتصاص PS2 أقل بكثير في المنغنيز من علاج الكالسيوم في ثلاث ساعات.كانت الكفاءة الكيميائية الضوئية الفعالة أعلى بكثير ، لكن التبريد غير الكيميائي الضوئي كان أقل في معالجة المنغنيز من التحكم في 21 ساعة. تحت الضوء المتزايد ، يميل المنغنيز إلى تقليل المقطع العرضي لامتصاص PS2 في ثلاث ساعات ، في التبريد غير الكيميائي الضوئي في 21 ساعة ، مع زيادة الكفاءة الكيميائية الضوئية الفعالة في ثلاث ساعات. الكالسيوم تحسن قليلا التبريد غير الكيميائي الضوئي تحت زيادة الضوء.ومع ذلك ، فقد قلل من الكفاءة الكيميائية الضوئية الفعالة في ثلاث ساعات. الشيء الأكثر أهمية هو تأثير الكائنات الحية الركيزة. إذا كانت الطحالب مرتبطة بأنواع أو مواد مختلفة ، فقد يكون التأثير مختلفا.بالإضافة إلى هذا البروتوكول ، يعد قياس تثبيت الكربون أو معدلات إنتاج الأكسجين مفيدا لتوضيح استجابة إنتاجية الكالسيوم للتلاعبات التجريبية. يمكننا هذا البروتوكول من توضيح كيفية استجابة نشاط التمثيل الضوئي للطحالب المرفقة للتغيرات البيئية.

Research

JoVE Journal

Biology

Measuring Photophysiology of Attached Stage of Colacium sp. by a Cuvette-Type Fast Repetition Rate Fluorometer

Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos

التحضير للثقافات متعلق بالخلايا العصبية من أجنة ذبابة الفاكهة المرحلة Midgastrula

This video illustrates the procedure for making primary neuronal cultures from midgastrula stage Drosophila embryos. The methods for collecting embryos ...

Chromatin Immunoprecipitation Assay for Tissue-specific Genes using Early-stage Mouse Embryos

مناعي لونين الفحص الجينات الأنسجة الخاصة باستخدام أجنة فئران في مرحلة مبكرة

Chromatin immunoprecipitation (ChIP) is a powerful tool to identify protein:chromatin interactions that occur in the context of living cells 1-3. This ...

Measuring Fast Calcium Fluxes in Cardiomyocytes

قياس الكالسيوم السريع في تدفقاتها العضلية

Cardiomyocytes have multiple Ca2+ fluxes of varying duration that work together to optimize function 1,2. Changes in Ca2+ activity in response to ...

Improving the Success Rate of Protein Crystallization by Random Microseed Matrix Screening

تحسين نسبة نجاح تبلور البروتين بواسطة عشوائية Microseed ماتريكس فحص

Random microseed matrix screening  (rMMS) is a protein crystallization technique in which seed crystals are added  to random screens. By increasing the ...

Monitoring Functionality and Morphology of Vasculature Recruited by Factors Secreted by Fast-growing Tumor-generating Cells

مراقبة وظائف والصرف من الأوعية الدموية تجنيده من قبل العوامل التي يفرزها الخلايا المولدة للورم النمو السريع

The subcutaneous matrigel plug assay in mice is a method of choice for the in vivo evaluation of pro- and anti-angiogenic factors. In this method, desired ...

One-channel Cell-attached Patch-clamp Recording

قناة واحدة الخلية المرفقة تسجيل التصحيح، المشبك

Ion channel proteins are universal devices for fast communication across biological membranes. The temporal signature of the ionic flux they generate ...

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

في فيفو تتبع 4 الأبعاد للالجذعية المكونة للدم والسلف الكبار في خلايا الفأر قبي نخاع العظم

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Generation of Enterobacter sp. YSU Auxotrophs Using Transposon Mutagenesis

Generation of Enterobacter sp. YSU Auxotrophs Using Transposon Mutagenesis

جيل من<em&gt; الأمعائية</em&gt; س. YSU Auxotrophs عن طريق الطفرات ينقول

Prototrophic bacteria grow on M-9 minimal salts medium supplemented with glucose (M-9 medium), which is used as a carbon and energy source. Auxotrophs can ...

Floral-Dip Transformation of Flax (Linum usitatissimum) to Generate Transgenic Progenies with a High Transformation Rate

Floral-Dip Transformation of Flax Linum usitatissimum to Generate Transgenic Progenies with a High Transformation Rate

الأزهار وتراجع التحول من الكتان (<em&gt; LINUM usitatissimum</em&gt;) لتوليد المعدلة وراثيا السلالات مع معدل التحويل عالية

Agrobacterium-mediated plant transformation via floral-dip is a widely used technique in the field of plant transformation and has been reported to be ...