Name: measuring photophysiology of attached stage of colacium sp. by a cuvette-type fast repetition rate fluorometer
Uploaded: 2021-11-12T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring Photophysiology of Attached Stage of Colacium sp. by a Cuvette-Type Fast Repetition Rate Fluorometer at JoVE.com

Arbejdet blev støttet af Collaborative Research Fund fra Shiga Prefecture med titlen "Study on water quality and lake-bottom environment for the protection of the solidness of water environment" under det japanske tilskud til regional revitalisering og Environment Research and Technology Development Fund (nr. 5-1607) fra Miljøministeriet, Japan. https://www.kantei.go.jp/jp/singi/tiiki/tiikisaisei/souseikoufukin.html. Forfatterne vil gerne takke Enago (www.enago.jp) for den engelsksprogede anmeldelse.

1. Prøveudtagning
<ol><li>Saml søvand fra overfladen med en spand. For at målrette Colacium sp. fastgjort til S. mucronata (figur 1A-C) filter 0,5-10 L søvand ved hjælp af et 100 μm nylonnet net52. BEMÆRK: S. mucronata ofte tæt aggregeret i lavt, eutrofisk, mudret vand, såsom blandt reed (phragmites) områder.</li>
	<li>Opbevar de koncentrerede prøver i 500 ml plastflasker med 350 ml søvand. ...

Denne protokol viste for første gang, at fotofysiologi af Colacium sp. under det vedhæftede stadium i et naturligt miljø kan sammenlignes med dets planktoniske stadium i AF-6-medium. Derudover påvirkede tarmindholdet i udsultet S. mucronata ikke baseline og Chl-a fluorescens, når densiteten var ≤5 inds·ml-1 (figur 5 og figur 6). Disse resultater tyder på, at denne protokol kan måle fotofysiologi af Colacium</em...

Klorofylvariabel fluorescens er et nyttigt værktøj til måling af algefotosystem II (PSII) fotofysiologi. Alger reagerer på forskellige miljøbelastninger, såsom overskydende lys- og næringsstofmangel, ved at ændre deres PSII-fotofysiologi. Fluorometer med hurtig gentagelseshastighed (FRRf) er en almindelig metode til måling af PSII-fotofysiologi1,2 og estimering af primær produktivitet1,3,4, som muliggør overvågning af fytoplankton PSII-fotofysiologi samt primær produktivitet på tværs af brede rumlige og tidsmæssige skalaer5,6,7. FRRf kan samtidig måle PSII (σ PSII) absorptionstværsnit, reaktionscenter ([RCII]) koncentration, maksimal fotokemisk effektivitet (Fv/Fm), effektiv fotokemisk effektivitet (Fq′/Fm′) og ikke-fotokemisk slukning (NPQNSV) (tabel 1). Generelt defineres Fv/Fm og Fq′/Fm′ som PSII-aktivitet8, mens NPQNSV defineres som relativ varmeafledningen energi9.
Det er vigtigt, at enkeltomsætningsglimt (ST) af FRRf fuldt ud reducerer den primære quinonelektronacceptor, QA, men ikke plastoquinonpuljen. Omvendt kan multipel omsætning (MT) blink fra et pulsamplitudemodulationsfluorometer (PAM) reducere begge. ST-metoden har en klar fordel i forhold til MT-metoden, når den mulige oprindelse af NPQNSV identificeres ved samtidig at måle genvindingskinetik af Fv/ Fm, Fq′/Fm′, NPQNSV og σ PSII10. Til dato er flere typer FRRf-instrumenter, såsom nedsænket type, kuvette-type og flow-through-type, kommercielt tilgængelige. FRRf af nedsænkningstypen muliggør in situ-målinger i oceaner og søer, mens FRRf af kuvettetypen er velegnet til måling af små prøvevolumener. Gennemstrømningstypen bruges almindeligvis til kontinuerligt at måle fytoplanktons fotofysiologi i overfladevand.
I betragtning af udviklingen af PAM-fluorometre, herunder kuvettetypen, til en bred vifte af forsøgspersoner11 er PAM-fluorometre stadig mere almindelige end FRRF'er i algefotofysiologisk forskning12. For eksempel, selvom prøvekammerstrukturen og kuvettekapaciteten mellem disse værktøjer kun adskiller sig lidt, er KUVETTE-typen PAM blevet anvendt på fytoplanktoner13,14,15, bentiske mikroalger16,17,18, isalger19 og epizoiske alger20, mens KUVette-typen FRRf primært er blevet anvendt på fytoplanktoner21,22,23 og et begrænset antal isalgesamfund24,25. På grund af sin effektivitet er KUVETTE-TYPE FRRF lige så anvendelig på bentiske og epizoiske alger. Derfor vil udvidelsen af dens anvendelse give betydelig indsigt i PSII-fotofysiologi, især for mindre kendt epizoisk algefotofysiologi.
Epizoiske alger har fået lidt opmærksomhed, med få undersøgelser, der undersøger deres PSII-fotofysiologi20,26, sandsynligvis på grund af deres mindre roller i akvatiske fødebaner27,28. Epibionter, herunder epizoiske alger, kan imidlertid påvirke zooplanktonsamfundets dynamik positivt, såsom stigende reproduktions- og overlevelsesrater29,30, samt negative påvirkningsprocesser, såsom stigende synkehastighed29,31 og sårbarhed over for visuelle rovdyr32,33,34,35,36 . Derfor er det afgørende at udforske de miljømæssige og biologiske faktorer, der styrer epibiontdynamikken i zooplanktonsamfund.
Blandt epizoiske alger er Colacium Ehrenberg 1834 (Euglenophyta) en almindelig ferskvands-, algegruppe32,37,38,39 med forskellige livsstadier, herunder vedhæftet (figur 1A-D), ikke-bevægelig planktonisk (figur 1E,F) og bevægelige planktoniske stadier40,41 . Under det ikke-bevægelige planktoniske stadium lever celler som enkeltcelleplanktoner, aggregerede kolonier eller etlags arkkolonier, dækket af slimhinde42. I det vedhæftede stadium anvender Colacium sp. slimhinde udskilt fra den forreste ende af cellen37,39,41 til at binde sig til substratorganismer (basibionter), især mikrokrebsdyr41,43. Deres livscyklus indebærer også at løsrive sig fra det smeltede exoskelet eller døde basibiont og svømme med deres flagella for at finde en anden substratorganisme39. Både planktoniske og vedhæftede stadier kan øge deres befolkningsstørrelse ved mitose40. Selvom deres vedhæftede stadium antages at være et evolutionært træk til indsamling af ressourcer, såsom lys44 og sporstoffer41,45,46 eller som en spredningsstrategi27, er der kun få eksperimentelle beviser tilgængelige om disse aspekter37,41,44, og de vigtigste fastgørelsesmekanismer er stort set ukendte. Rosowski og Kugrens forventede f.eks., at Colacium opnår mangan (Mn) fra substrat copepods41, koncentreret i exoskelettet47.
Her beskriver vi, hvordan man måler PSII-fotofysiologi af planktonalger og den tilhørende anvendelsesmetode til målretning af vedhæftede alger (fastgørelse til zooplankton) med Colacium sp.-celler ved hjælp af kuvette-typen FRRf. Vi bruger Act2-systemet udstyret med tre lysemitterende dioder (LED'er), der giver flash excitation energi centreret ved 444 nm, 512 nm og 633 nm48. Her svarer 444 nm (blå) til absorptionstoppen af chrophyll a (Chl-a), mens 512 nm (grøn) og 633 nm (orange) svarer til absorptionstoppene af henholdsvis phycoerythrin og phycocyanin. Den fluorescerende signaldetekteringstop er 682 nm med 30 nm halv båndbredde. Da det er svært at finde det planktoniske stadium af Colacium sp. i naturlige miljøer, blev deres vedhæftede fase indsamlet til eksperimenterne. Blandt de talrige substratorganismer,Scapholeberis mucronata O.F. Müller 1776 (Branchiopoda, Daphniidae; Figur 1A, B, G) er en af de enkleste at håndtere på grund af deres langsomme svømmehastighed, store kropsstørrelse (400-650 μm) og unikke adfærd (hængende på hovedet på vandoverfladen). Derfor bruger denne protokol Colacium sp. fastgjort på S. mucronata som et casestudie af Colacium-basibiont-systemet. For at undgå fluorescens afledt af tarmindholdet blev S. mucronata sultet. Da en tidligere undersøgelse rapporterede, at fluorescenssignalet fra tarmindholdet (indtagne alger) viser et femdoblingsfald efter 40 min49, forventede vi, at 90 minutters sult ville være nok til at minimere muligheden for, at tarmindholdsfluorescens påvirker FRRf-målingen med minimale virkninger af eksperimentel stress til Colacium sp., såsom næringsstofmangel. Desuden blev denne protokol anvendt til at præcisere fastgørelsesmekanismen for Colacium sp. og bestemme, hvordan to metaller, calcium (Ca) og mangan (Mn) påvirker fotofysiologien af både planktoniske og vedhæftede trin. Calcium spiller nøgleroller i de fotosyntetiske veje50 på flere måder, og begge metaller er nødvendige for at konstruere de iltudviklende komplekser i PSII51. Da calcium og mangan er stærkt koncentreret i rygskjoldet af krebsdyr zooplankton47, antager vi, at Colacium sp. fotofysiologi kan reagere mere fremtrædende på Ca og Mn berigelse i planktonisk fase, hvis dette livsstadium opnår disse elementer fra S. mucronata under det vedhæftede stadium.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acrodisc syringe filter</td>
			<td>Pall Corporation, Ann Arbor, MI, USA</td>
			<td></td>
			<td>0.2 &#956;m pore size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Act2Run</td>
			<td>CTG Ltd., West Molesey, UK</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotin</td>
			<td>Wako</td>
			<td>023-08711</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2&#183;2H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>031-25031</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCO3</td>
			<td>Wako</td>
			<td>036-00382</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citric acid</td>
			<td>Wako</td>
			<td>036-05522</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CoCl2&#183;6H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>036-03682</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Concentrated Chlorella</td>
			<td>Recenttec, Tokyo, Japan</td>
			<td></td>
			<td>20 mg C&#183;mL&#8722;1 ; store at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FastOcean Act2</td>
			<td>CTG Ltd., West Molesey, UK</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fe-citrate</td>
			<td>Wako</td>
			<td>093-00952</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FeCl3&#183;6H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>091-00872</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HCLP-880PF</td>
			<td>Nippon Medical and Chemical Instruments 
			&#160;Co., Ltd., Osaka, Japan</td>
			<td></td>
			<td>With LED light bulbs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>K2HPO4</td>
			<td>Wako</td>
			<td>160-04292</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>Wako</td>
			<td>167-04241</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgSO4&#183;7H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>137-00402</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MnCl3&#183;4H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>139-00722</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2EDTA</td>
			<td>Wako</td>
			<td>343-01861</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2MoO4</td>
			<td>Wako</td>
			<td>196-02472</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaNO3</td>
			<td>Wako</td>
			<td>191-02542</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NH4NO3</td>
			<td>Wako</td>
			<td>015-03231</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plankton Counter</td>
			<td>Matsunami Glass, Osaka, Japan</td>
			<td>S6300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pylex test tube</td>
			<td>CTG Ltd., West Molesey, UK</td>
			<td></td>
			<td>With rim, 16 x 100 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vit. B1</td>
			<td>Wako</td>
			<td>203-00851</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vit. B12</td>
			<td>Wako</td>
			<td>226-00343</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vit. B6</td>
			<td>Wako</td>
			<td>165-05401</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZnSO4&#183;7H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>264-00402</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measuring photophysiology of attached stage of colacium sp. by a cuvette-type fast repetition rate fluorometer

Fluorometer med hurtig gentagelseshastighed (FRRf) er en gavnlig metode til måling af fotosystem II (PSII) fotofysiologi og primær produktivitet. Selvom FRRf kan måle PSII-absorptionstværsnit (σ PSII), maksimal fotokemisk effektivitet (Fv / Fm), effektiv fotokemisk effektivitet (Fq ′/Fm′) og ikke-fotokemisk slukning (NPQNSV) for forskellige eukaryote alger og cyanobakterier, har næsten alle FRRf-undersøgelser til dato fokuseret på fytoplankton. Her beskriver protokollen, hvordan man måler PSII-fotofysiologi af en epizoisk alge Colacium sp. Ehrenberg 1834 (Euglenophyta), i sin vedhæftede fase (knyttet til zooplankton), ved hjælp af kuvette-type FRRf. For det første estimerede vi virkningerne af substrat zooplankton (Scapholeberis mucronata O.F. Müller 1776, Cladocera, Daphniidae) på baseline fluorescens og σ PSII, Fv / Fm, Fq '/ Fm' og NPQNSV af planktonisk Colacium sp. For at validere denne metode registrerede vi fotofysiologiske målinger af vedhæftet Colacium sp. på S. mucronata og sammenlignede disse resultater med dets planktoniske stadium. Repræsentative resultater viste, hvordan protokollen kunne bestemme virkningerne af calcium (Ca) og mangan (Mn) på Colacium sp. fotofysiologi og identificere de forskellige virkninger af Mn-berigelse mellem vedhæftede og planktoniske stadier. Endelig diskuterer vi tilpasningsevnen af denne protokol til andre perifytiske alger.

Der var ingen signifikant effekt af baseline fluorescens (figur 5) eller Chl-a fluorescens (figur 6) af S. mucronata op til 5 personer (inds.) ml-1. Fv/Fm og NPQNSV blev dog signifikant påvirket, da S. mucronata var 7,5 inds·ml-1. Derfor valgte vi til måling af fotofysiologien af Colacium sp. under det vedhæftede stadium S. mucronata</em...

Watch this Scientific Journal Video about Measuring Photophysiology of Attached Stage of Colacium sp. by a Cuvette-Type Fast Repetition Rate Fluorometer at JoVE.com

Measuring Photophysiology of Attached Stage of Colacium sp. by a Cuvette-Type Fast Repetition Rate Fluorometer

Fluorometer med hurtig gentagelseshastighed (FRRf) er en gavnlig metode til måling af fotosystem II fotofysiologi og primær produktivitet. Her beskriver vi en protokol til måling af PSII-fotofysiologi af epizoisk alge, Colacium sp. på substrat zooplankton ved hjælp af kuvette-type FRRf.

Måling af fotofysiologi af vedhæftet fase af colacium sp. ved hjælp af et Cuvette-Type Fast Repetition Rate Fluorometer

Fast repetition rate fluorometer (FRRf) is a beneficial method for measuring photosystem II (PSII) photophysiology and primary productivity. Although FRRf ...

Denne protokol måler den fotosyntetiske aktivitet af vedhæftede alger, mens de stadig er knyttet til planktonet, ligesom i naturen. Den største fordel ved denne teknik er, at måling af fotofysiologi kan udføres i realtid uden prøvedistraktion. For at undersøge virkningerne af zooplankton individer på baseline fluorescens, forberede voksne scapholeberis mucronata fra kulturen uden nogen vedhæftede organismer.Sult nu individerne i FLW ved 20 grader Celsius i mindst 90 minutter for at undgå fluorescens fra tarmindholdet. Hæld 1,5 ml FWL i en kuvette. Hent det ønskede antal s.mucronata individer ved hjælp af en pipette under et optisk mikroskop ved 100 gange forstørrelse og overføre dem til kuvetten. Tilsæt FLW for at bringe prøvevolumenet op til 2 ml og lade det akklimatisere sig under svagt lys ved 20 grader Celsius er i 15 minutter før måling af fluorometeret med hurtig gentagelseshastighed. Klik derefter på handling for at køre"for at starte målingen og gentage målingerne mere end tre gange pr. Prøve.Læs F0-værdien fra det resulterende plot. Saml colaciumarter op med et smeltet rygskjold ved hjælp af en pipette under et optisk mikroskop ved 100 gange forstørrelse og vask dem med FLW. Aseptisk podes colaciumarter i AF-6-mediet i et 10 ml glasrør på en ren bænk.Oprethold kulturen ved en NC2-temperatur i et vækstkammer, og ryst glasrøret forsigtigt i hånden mindst en gang om dagen for at forhindre celleafvikling. For at undersøge virkningerne af zooplankton individer på klorofyl en fluorescens fra colacium arter, brug voksne s. mucronata uden nogen vedhæftede organismer.For at undgå fluorescens fra tarmindholdet skal du sulte individerne i FLW i mindst 90 minutter. Opsæt et kuvette-type fluorometer med hurtig gentagelseshastighed. Hæld nu en 1,5 ml underprøve af fordyrkte colaciumarter i en kuvette.Overfør derefter det ønskede antal s. mucronata individer til disse kuvetter og bring prøvevolumenet op til 2 ml med det filtrerede medium. Akklimatisere individerne under svagt lys ved 20 grader Celsius i 15 minutter, før du tager den hurtige gentagelseshastighed fluorometermåling.Klik på handling for at køre"for at starte målingen, gentag målingerne mere end tre gange pr. Prøve. Læs F0- og FM-værdierne fra det resulterende plot. For at korrigere baselinefluorescensen filtreres kulturmediet ved hjælp af et filter på 0,2 mikrometer hældestørrelse og måler fluorescensen.Træk F0 af basisprøven fra F0 og FM af colaciumarter, eller rediger blindprøvekorrektionsværdien i indstillingerne under fanen Indstillinger.Vask derefter s. mucronata ved hjælp af FLW. Overførsel s.mucronata i 100 ml FLW og opbevar dem under mørke forhold ved NC2-temperatur i 90 minutter for sult. Hæld 1,5 ml FLW i en kuvette. Overfør omkring ti s.mucronata individer med colacium arter i en kuvette og tilsæt FLW for at bringe prøven op til 2 ml. Akklimatisere individerne under svagt lys ved N2C-temperatur i 15 minutter og måle klorofyl en fluorescens, som nævnt i tekstmanuskriptet. For at opregne antallet af vedhæftede celler skal prøven fastgøres med 2% glutaraldehyd efter at have taget den hurtige gentagelseshastighedsfluorometermåling.Tag derefter billeder på flere brændvidder og positioner af s. mucronata under et lysmikroskop. Der var ingen signifikant effekt på baseline fluorescens eller klorofyl en fluorescens af s.mucronata op til 5 personer pr. Milliliter. Imidlertid blev maksimal fotokemisk effektivitet og ikke-fotokemisk slukning signifikant påvirket, når s. mucronata densitet var 7,5 individer pr. Milliliter.Sæsonvariationer i colaciumarternes fytofysiologi i tilknytningsfasen og planktonstadiet for den stationære fase i AF-6-mediet viste tilsvarende gennemsnitlig maksimal fotokemisk effektivitet og ikke-fotokemisk slukning. For det vedhæftede stadium af colaciumarter under mørke forhold var der ingen signifikant forskel i fotofysiologiske parametre, bortset fra at ikke-fotokemisk slukning var højere for mangan end calcium efter tre timer og ved en lav lysintensitet efter 21 timer. For planktonisk stadium var PS2-absorptionstværsnittet signifikant lavere i mangan end calciumbehandling efter tre timer.Effektiv fotokemisk effektivitet var signifikant højere, men ikke-fotokemisk slukning var lavere i manganbehandlingen end kontrol efter 21 timer. Under stigende lys havde mangan en tendens til at reducere PS2-absorptionstværsnittet efter tre timer, i ikke-fotokemisk slukning efter 21 timer, samtidig med at den effektive fotokemiske effektivitet øges efter tre timer. Calcium forbedrede lidt ikke-fotokemisk slukning under stigende lys.Det reducerede imidlertid den effektive fotokemiske effektivitet efter tre timer. Det vigtigste er effekten af substratorganismer. Hvis alger knyttet til forskellige arter eller materialer, kan effekten være anderledes.Ud over denne protokol er måling af kulstoffiksering eller iltproduktionshastigheder nyttige til at afklare calciumproduktivitetens reaktion på de eksperimentelle manipulationer. Denne protokol gør det muligt for os at præcisere, hvordan den fotosyntetiske aktivitet af vedhæftede alger reagerer på miljøændringer.

Research

JoVE Journal

Biology

Measuring Photophysiology of Attached Stage of Colacium sp. by a Cuvette-Type Fast Repetition Rate Fluorometer

Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos

This video illustrates the procedure for making primary neuronal cultures from midgastrula stage Drosophila embryos. The methods for collecting embryos ...

Chromatin Immunoprecipitation Assay for Tissue-specific Genes using Early-stage Mouse Embryos

Chromatin immunoprecipitation (ChIP) is a powerful tool to identify protein:chromatin interactions that occur in the context of living cells 1-3. This ...

Measuring Fast Calcium Fluxes in Cardiomyocytes

Måling Fast Calcium Flux i cardiomyocytter

Cardiomyocytes have multiple Ca2+ fluxes of varying duration that work together to optimize function 1,2. Changes in Ca2+ activity in response to ...

Improving the Success Rate of Protein Crystallization by Random Microseed Matrix Screening

Forbedring succesraten for proteinkrystallisation af Random Microseed Matrix Screening

Random microseed matrix screening  (rMMS) is a protein crystallization technique in which seed crystals are added  to random screens. By increasing the ...

Monitoring Functionality and Morphology of Vasculature Recruited by Factors Secreted by Fast-growing Tumor-generating Cells

Overvågning Funktionalitet og morfologi kar rekrutteres af Faktorer udskilt af Fast-voksende tumor-genererende celler

The subcutaneous matrigel plug assay in mice is a method of choice for the in vivo evaluation of pro- and anti-angiogenic factors. In this method, desired ...

One-channel Cell-attached Patch-clamp Recording

Én-kanals Cell-attached Patch-clamp optagelse

Ion channel proteins are universal devices for fast communication across biological membranes. The temporal signature of the ionic flux they generate ...

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional sporing af hæmatopoietisk stamcelletransplantation og stamcelle i Voksen Mouse calvarie knoglemarv

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Generation of Enterobacter sp. YSU Auxotrophs Using Transposon Mutagenesis

Generation of Enterobacter sp. YSU Auxotrophs Using Transposon Mutagenesis

Generation af<em&gt; Enterobacter</em&gt; Sp. YSU auxotrofer Brug Transposon Mutagenesis

Prototrophic bacteria grow on M-9 minimal salts medium supplemented with glucose (M-9 medium), which is used as a carbon and energy source. Auxotrophs can ...

Floral-Dip Transformation of Flax (Linum usitatissimum) to Generate Transgenic Progenies with a High Transformation Rate

Floral-Dip Transformation of Flax Linum usitatissimum to Generate Transgenic Progenies with a High Transformation Rate

Floral-Dip Transformation af hør (<em&gt; Linum usitatissimum</em&gt;) Til at generere transgene afkom med en høj Transformation Rate

Agrobacterium-mediated plant transformation via floral-dip is a widely used technique in the field of plant transformation and has been reported to be ...