Name: measuring photophysiology of attached stage of colacium sp. by a cuvette-type fast repetition rate fluorometer
Uploaded: 2021-11-12T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring Photophysiology of Attached Stage of Colacium sp. by a Cuvette-Type Fast Repetition Rate Fluorometer at JoVE.com

Het werk werd ondersteund door het Collaborative Research Fund van de prefectuur Shiga getiteld "Study on water quality and lake-bottom environment for the protection of the soundness of water environment" onder de Japanse grant for regional revitalization and the Environment Research and Technology Development Fund (No. 5-1607) van het ministerie van Milieu, Japan. https://www.kantei.go.jp/jp/singi/tiiki/tiikisaisei/souseikoufukin.html. De auteurs willen Enago (www.enago.jp) bedanken voor de Engelstalige review.

1. Steekproeven
<ol><li>Verzamel meerwater van het oppervlak door een emmer. Om Colacium sp. bevestigd aan S. mucronata (figuur 1A-C) te richten, filter 0,5-10 L meerwater met behulp van een nylon gaasnet van 100 μm52. OPMERKING: S. mucronata vaak dicht aggregeren in ondiep, eutroof, modderig water, zoals tussen riet (phragmites) gebieden.</li>
	<li>Bewaar de geconcentreerde monsters in plastic flessen...

Dit protocol toonde voor het eerst aan dat de fotofysiologie van Colacium sp. tijdens de bijgevoegde fase in een natuurlijke omgeving vergelijkbaar is met de planktonische fase in AF-6 medium. Bovendien had de darminhoud van uitgehongerde S. mucronata geen invloed op baseline en Chl-a fluorescentie wanneer de dichtheid ≤5 inds·mL−1 was (figuur 5 en figuur 6). Deze resultaten suggereren dat dit protocol de fotofysiologie...

Chlorofyl variabele fluorescentie is een nuttig hulpmiddel voor het meten van algen fotosysteem II (PSII) fotofysiologie. Algen reageren op verschillende omgevingsstressen, zoals overtollig licht en tekort aan voedingsstoffen, door hun PSII-fotofysiologie te veranderen. Snelle herhalingssnelheid fluorometer (FRRf) is een veelgebruikte methode voor het meten van PSII-fotofysiologie1,2 en het schatten van de primaire productiviteit1,3,4, waarmee fytoplankton PSII-fotofysiologie kan worden gemonitord, evenals de primaire productiviteit op brede ruimtelijke en temporele schalen5,6,7. FRRf kan tegelijkertijd psii (σ PSII) absorptiedoorsnede, reactiecentrum ([RCII]) concentratie, maximale fotochemische efficiëntie (Fv /Fm), effectieve fotochemische efficiëntie (Fq ′ / Fm ′) en niet-fotochemische blussen (NPQNSV) meten (tabel 1). Over het algemeen worden Fv/Fm en Fq′/Fm′ gedefinieerd als PSII-activiteit8, terwijl NPQNSV wordt gedefinieerd als relatieve warmte-afgevoerde energie9.
Belangrijk is dat single turnover (ST) flitsen van FRRf de primaire chinonelektronacceptor, QA, volledig verminderen, maar niet de plastochinonpool. Omgekeerd kunnen meervoudige omzet (MT) flitsen van een pulsamplitudemodulatie (PAM) fluorometer beide verminderen. De ST-methode heeft een duidelijk voordeel ten opzichte van de MT-methode bij het identificeren van de mogelijke oorsprong van NPQNSV door gelijktijdig de herstelkinetiek van Fv/Fm, Fq′/Fm′, NPQNSV en σ PSII10 te meten. Tot op heden zijn verschillende soorten FRRf-instrumenten, zoals submersible-type, cuvette-type en flow-through-type, commercieel verkrijgbaar. Het submersible-type FRRf maakt in situ metingen in oceanen en meren mogelijk, terwijl de cuvette-type FRRf geschikt is voor het meten van kleine monstervolumes. Het doorstroomtype wordt vaak gebruikt om continu de fotofysiologie van fytoplankton in oppervlaktewateren te meten.
Gezien de ontwikkeling van PAM-fluorometers, inclusief het cuvette-type, voor een breed scala aan onderwerpen11, komen PAM-fluormeters nog steeds vaker voor dan FRRfs in algenfotofysiologisch onderzoek12. Hoewel de structuur van de monsterkamer en de cuvettecapaciteit tussen deze gereedschappen slechts enigszins verschillen, is het cuvette-type PAM bijvoorbeeld toegepast op fytoplankton13,14,15, benthische microalgen16,17,18, ijsalgen19 en epizoïsche algen20, terwijl de cuvette-type FRRf voornamelijk is toegepast op fytoplankton21,22,23 en een beperkt aantal ijsalgengemeenschappen24,25. Gezien de effectiviteit is cuvette-type FRRf evenzeer van toepassing op benthische als epizoïsche algen. Daarom zal het uitbreiden van de toepassing ervan veel inzicht geven in psii-fotofysiologie, met name voor minder bekende epizoïsche algenfotofysiologie.
Epizoïsche algen hebben weinig aandacht gekregen, met weinig studies die hun PSII-fotofysiologie onderzoeken20,26, hoogstwaarschijnlijk vanwege hun kleine rol in aquatische voedselwebben27,28. Epibionten, waaronder epizoïsche algen, kunnen echter een positieve invloed hebben op de dynamiek van de zoöplanktongemeenschap, zoals toenemende reproductie- en overlevingskansen29,30, evenals een negatieve invloed op processen, zoals een toenemende zinksnelheid29,31 en kwetsbaarheid voor visuele roofdieren32,33,34,35,36 . Daarom is het onderzoeken van de omgevings- en biologische factoren die de epibiontdynamiek in zoöplanktongemeenschappen beheersen, cruciaal.
Onder epizoïsche algen is Colacium Ehrenberg 1834 (Euglenophyta) een veel voorkomende zoetwater-, algengroep32,37,38,39 met verschillende levensfasen, waaronder gehecht (figuur 1A-D), niet-beweeglijke planktonische (figuur 1E, F) en beweeglijke planktonstadia40,41 . Tijdens het niet-beweeglijke planktonische stadium leven cellen als eencellig plankton, geaggregeerde kolonies of eenlaagse plaatkolonies, bedekt met slijm42. In het aangehechte stadium gebruikt Colacium sp. slijm dat wordt uitgescheiden uit het voorste uiteinde van de cel37,39,41 om zich te hechten aan substraatorganismen (basibionten), met name microschaaldieren41,43. Hun levenscyclus omvat ook het losmaken van het vermolmde exoskelet of dode basibiont en zwemmen met hun flagella om een ander substraatorganisme te vinden39. Zowel planktonische als aangehechte stadia kunnen hun populatiegrootte vergroten door mitose40. Hoewel hun bijgevoegde stadium wordt verondersteld een evolutionaire eigenschap te zijn voor het verzamelen van bronnen, zoals licht44 en sporenelementen41,45,46, of als een dispersiestrategie27, is er weinig experimenteel bewijs beschikbaar over deze aspecten37,41,44 en de belangrijkste hechtingsmechanismen zijn grotendeels onbekend. Rosowski en Kugrens verwachtten bijvoorbeeld dat Colacium mangaan (Mn) verkrijgt uit substraat roeipootkreeftjes41, geconcentreerd in het exoskelet47.
Hier beschrijven we hoe psii-fotofysiologie van planktonalgen en de bijbehorende toepassingsmethode voor het richten op aangehechte algen (hechting aan zoöplankton) met Colacium sp. cellen met behulp van de cuvette-type FRRf. We gebruiken het Act2-systeem uitgerust met drie light-emitting diodes (LED's) die zorgen voor flitsexcitatie-energie gecentreerd op 444 nm, 512 nm en 633 nm48. Hier komt 444 nm (blauw) overeen met de absorptiepiek van chrophyll a (Chl-a), terwijl 512 nm (groen) en 633 nm (oranje) overeenkomen met de absorptiepieken van respectievelijk fycoerythrin en phycocyanine. De fluorescentiesignaaldetectiepiek is 682 nm met 30 nm halve bandbreedte. Omdat het moeilijk is om het planktonische stadium van Colacium sp. in natuurlijke omgevingen te vinden, werd hun bijgevoegde stadium verzameld voor de experimenten. Onder de talrijke substraatorganismen,Scapholeberis mucronata O.F. Müller 1776 (Branchiopoda, Daphniidae; Figuur 1A, B, G) is een van de eenvoudigste om te hanteren vanwege hun langzame zwemsnelheid, grote lichaamsgrootte (400-650 μm) en uniek gedrag (ondersteboven hangen aan het wateroppervlak). Daarom gebruikt dit protocol Colacium sp. bevestigd op S. mucronata als een casestudy van het Colacium-basibiont-systeem. Om fluorescentie afgeleid van de darminhoud te voorkomen, werd S. mucronata uitgehongerd. Aangezien een eerdere studie meldde dat het fluorescentiesignaal van darminhoud (ingenomen algen) een vijfvoudige afname vertoont na 40 min49, verwachtten we dat 90 minuten uithongering voldoende zou zijn om de mogelijkheid van darminhoudfluorescentie die de FRRf-meting beïnvloedt te minimaliseren met minimale effecten van experimentele stress op Colacium sp., zoals tekort aan voedingsstoffen. Bovendien werd dit protocol toegepast om het hechtingsmechanisme van Colacium sp. te verduidelijken en te bepalen hoe twee metalen, calcium (Ca) en mangaan (Mn) de fotofysiologie van zowel planktonische als gehechte stadia beïnvloeden. Calcium speelt op meerdere manieren een sleutelrol in de fotosynthetische routes50, en beide metalen zijn nodig om de zuurstof-evoluerende complexen van de PSII51 te construeren. Aangezien calcium en mangaan sterk geconcentreerd zijn in het schild van schaaldier zoöplankton47, veronderstellen we dat Colacium sp. fotofysiologie prominenter zou kunnen reageren op Ca- en Mn-verrijking tijdens de planktonische fase als deze levensfase deze elementen van S. mucronata verkrijgt tijdens de bijgevoegde fase.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acrodisc syringe filter</td>
			<td>Pall Corporation, Ann Arbor, MI, USA</td>
			<td></td>
			<td>0.2 &#956;m pore size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Act2Run</td>
			<td>CTG Ltd., West Molesey, UK</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotin</td>
			<td>Wako</td>
			<td>023-08711</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2&#183;2H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>031-25031</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCO3</td>
			<td>Wako</td>
			<td>036-00382</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citric acid</td>
			<td>Wako</td>
			<td>036-05522</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CoCl2&#183;6H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>036-03682</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Concentrated Chlorella</td>
			<td>Recenttec, Tokyo, Japan</td>
			<td></td>
			<td>20 mg C&#183;mL&#8722;1 ; store at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FastOcean Act2</td>
			<td>CTG Ltd., West Molesey, UK</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fe-citrate</td>
			<td>Wako</td>
			<td>093-00952</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FeCl3&#183;6H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>091-00872</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HCLP-880PF</td>
			<td>Nippon Medical and Chemical Instruments 
			&#160;Co., Ltd., Osaka, Japan</td>
			<td></td>
			<td>With LED light bulbs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>K2HPO4</td>
			<td>Wako</td>
			<td>160-04292</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>Wako</td>
			<td>167-04241</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgSO4&#183;7H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>137-00402</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MnCl3&#183;4H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>139-00722</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2EDTA</td>
			<td>Wako</td>
			<td>343-01861</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2MoO4</td>
			<td>Wako</td>
			<td>196-02472</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaNO3</td>
			<td>Wako</td>
			<td>191-02542</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NH4NO3</td>
			<td>Wako</td>
			<td>015-03231</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plankton Counter</td>
			<td>Matsunami Glass, Osaka, Japan</td>
			<td>S6300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pylex test tube</td>
			<td>CTG Ltd., West Molesey, UK</td>
			<td></td>
			<td>With rim, 16 x 100 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vit. B1</td>
			<td>Wako</td>
			<td>203-00851</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vit. B12</td>
			<td>Wako</td>
			<td>226-00343</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vit. B6</td>
			<td>Wako</td>
			<td>165-05401</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZnSO4&#183;7H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>264-00402</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measuring photophysiology of attached stage of colacium sp. by a cuvette-type fast repetition rate fluorometer

Snelle herhalingssnelheid fluorometer (FRRf) is een nuttige methode voor het meten van fotosysteem II (PSII) fotofysiologie en primaire productiviteit. Hoewel FRRf psii-absorptiedoorsnede (σ PSII), maximale fotochemische efficiëntie (Fv / Fm), effectieve fotochemische efficiëntie (Fq ′ / Fm ′) en niet-fotochemische blussen (NPQNSV) voor verschillende eukaryote algen en cyanobacteriën kan meten, hebben bijna alle FRRf-studies tot nu toe zich gericht op fytoplankton. Hier beschrijft het protocol hoe psii-fotofysiologie van een epizoïsche alg Colacium sp. Ehrenberg 1834 (Euglenophyta), in zijn bijgevoegde fase (bevestigd aan zoöplankton), met behulp van cuvette-type FRRf. Eerst schatten we de effecten van substraat zoöplankton (Scapholeberis mucronata O.F. Müller 1776, Cladocera, Daphniidae) op baseline fluorescentie en σ PSII, Fv/Fm, Fq′/Fm′en NPQNSV van planktonic Colacium sp. Om deze methodologie te valideren, registreerden we fotofysiologische metingen van attached Colacium sp. op S. mucronata en vergeleken deze resultaten met het planktonstadium. Representatieve resultaten toonden aan hoe het protocol de effecten van calcium (Ca) en mangaan (Mn) op colacium sp. fotofysiologie kon bepalen en de verschillende effecten van Mn-verrijking tussen gehechte en planktonstadia kon identificeren. Tot slot bespreken we het aanpassingsvermogen van dit protocol aan andere perifytische algen.

Er was geen significant effect van baseline fluorescentie (figuur 5) of Chl-a fluorescentie (figuur 6) door S. mucronata tot 5 individuen (inds.) ml−1. Fv/Fm en NPQNSV werden echter significant beïnvloed wanneer S. mucronata 7,5 inds·mL−1 was. Daarom hebben we voor het meten van de fotofysiologie van Colacium sp. tijdens de bijgevoegde fas...

Watch this Scientific Journal Video about Measuring Photophysiology of Attached Stage of Colacium sp. by a Cuvette-Type Fast Repetition Rate Fluorometer at JoVE.com

Measuring Photophysiology of Attached Stage of Colacium sp. by a Cuvette-Type Fast Repetition Rate Fluorometer

Snelle herhalingssnelheid fluorometer (FRRf) is een nuttige methode voor het meten van fotosysteem II fotofysiologie en primaire productiviteit. Hier beschrijven we een protocol om PSII-fotofysiologie van epizoïsche alg, Colacium sp. op substraat zoöplankton te meten met behulp van cuvette-type FRRf.

Het meten van fotofysiologie van attached stage van Colacium sp. door een Cuvette-Type Fast Repetition Rate Fluorometer

Fast repetition rate fluorometer (FRRf) is a beneficial method for measuring photosystem II (PSII) photophysiology and primary productivity. Although FRRf ...

Dit protocol meet de fotosynthetische activiteit van aangehechte algen, terwijl ze zich nog hechten aan het plankton, net als in de natuur. Het grote voordeel van deze techniek is dat de meting van fotofysiologie in real-time kan worden gedaan zonder afleiding van het monster. Om de effecten van zoöplankton individuen op baseline fluorescentie te onderzoeken, bereid volwassen scapholeberis mucronata uit de cultuur zonder enige aangehechte organismen.Honger nu de individuen in FLW uit bij 20 graden Celsius gedurende ten minste 90 minuten om fluorescentie van het darmgehalte te voorkomen. Giet 1,5 milliliter FWL in een cuvette. Pak het gewenste aantal s op.mucronata-individuen met behulp van een pipet onder een optische microscoop bij 100-voudige vergroting en breng ze over in het cuvet. Voeg FLW toe om het monstervolume tot 2 milliliter te brengen en laat het acclimatiseren bij weinig licht bij 20 graden Celsius gedurende 15 minuten vóór de snelle herhalingssnelheid fluorometermeting. Klik vervolgens op act to run om de meting te starten en herhaal de metingen meer dan drie keer per monster.Lees de F0-waarde van de resulterende plot. Pak colaciumsoorten op met een vermolten carapax met behulp van een pipet onder een optische microscoop bij 100 keer vergroting en was ze met FLW. Aseptisch ent colaciumsoorten in het AF-6 medium in een glazen buis van 10 milliliter op een schone bank.Houd de cultuur op een NC2-temperatuur in een groeikamer en schud de glazen buis minstens één keer per dag voorzichtig met de hand om celafzetting te voorkomen. Om de effecten van zoöplankton individuen op chlorofyl een fluorescentie van colacium soorten te onderzoeken, gebruik volwassen s. mucronata zonder enige gehechte organismen.Om fluorescentie van de darminhoud te voorkomen, verhongert u de personen in FLW gedurende ten minste 90 minuten. Stel een cuvette-type snelle herhalingssnelheid fluorometer in. Giet nu een submonster van 1,5 milliliter van voorgekweekte colaciumsoorten in een cuvette.Breng vervolgens het gewenste aantal s. mucronata-individuen over in deze cuvetten en breng het monstervolume met het gefilterde medium tot 2 milliliter. Acclimatiseer de personen bij weinig licht bij 20 graden Celsius gedurende 15 minuten voordat de snelle herhalingssnelheid fluorometermeting wordt uitgevoerd.Klik op act to run om de meting te starten en herhaal de metingen meer dan drie keer per monster. Lees de F0- en FM-waarden van de resulterende plot. Om de basisfluorescentie te corrigeren, filtert u het kweekmedium met behulp van een filter van 0,2 micrometer gietformaat en meet u de fluorescentie.Trek F0 van het basismonster af van F0 en FM van colaciumsoorten of wijzig de blancocorrectiewaarde in de instellingen op het tabblad Opties. Isoleer s. mucronata-individuen met colaciumsoorten met behulp van een pipet onder een optische microscoop.Was vervolgens s. mucronata met FLW. Overdracht s.mucronata in 100 milliliter FLW en bewaar ze onder donkere omstandigheden op NC2-temperatuur gedurende 90 minuten voor uithongering. Giet 1,5 milliliter FLW in een cuvette. Transfer rond tien s.mucronata individuen met colacium soorten in een cuvette en voeg FLW toe om het monster tot 2 milliliter te brengen. Acclimatiseer de individuen onder weinig licht bij N2C-temperatuur gedurende 15 minuten en meet chlorofyl een fluorescentie, zoals vermeld in het teksthandschrift. Om het aantal aangesloten cellen te inventariseren, fixeert u het monster met 2% glutaaraldehyde na het nemen van de snelle herhalingssnelheid fluorometermeting.Maak vervolgens foto's op verschillende scherptedieptes en posities van s. mucronata onder een lichtmicroscoop. Er was geen significant effect op baseline fluorescentie of chlorofyl een fluorescentie door s.mucronata tot 5 personen per milliliter. De maximale fotochemische efficiëntie en niet-fotochemische blussen werden echter significant beïnvloed wanneer de s. mucronatadichtheid 7,5 personen per milliliter was.Seizoensvariatie in de fytofysiologie van colaciumsoorten tijdens de aanhechtingsfase en de planktonische fase voor de stationaire fase in het AF-6-medium vertoonden vergelijkbare gemiddelde maximale fotochemische efficiëntie en niet-fotochemische blussen. Voor het bijgevoegde stadium van colaciumsoorten onder donkere omstandigheden was er geen significant verschil in fotofysiologische parameters, behalve dat niet-fotochemische blussen hoger was voor mangaan dan calcium na drie uur, en bij een lage lichtintensiteit na 21 uur. Voor het planktonische stadium was de ps2-absorptiedoorsnede significant lager in het mangaan dan calciumbehandeling na drie uur.Effectieve fotochemische efficiëntie was significant hoger, maar niet-fotochemische blussen was lager in de mangaanbehandeling dan controle na 21 uur. Onder toenemend licht had mangaan de neiging om de PS2-absorptiedoorsnede na drie uur te verminderen, in niet-fotochemische doven na 21 uur, terwijl de effectieve fotochemische efficiëntie na drie uur werd verhoogd. Calcium verbeterde lichtjes niet-fotochemische doven onder toenemend licht.Het verminderde echter de effectieve fotochemische efficiëntie na drie uur. Het belangrijkste is het effect van substraatorganismen. Als algen zich hechten aan verschillende soorten of materialen, kan het effect anders zijn.Naast dit protocol is het meten van koolstoffixatie- of zuurstofproductiesnelheden nuttig om de reactie van de calciumproductiviteit op de experimentele manipulaties te verduidelijken. Dit protocol stelt ons in staat om duidelijk te maken hoe de fotosynthetische activiteit van aangehechte algen reageert op veranderingen in het milieu.

Research

JoVE Journal

Biology

Measuring Photophysiology of Attached Stage of Colacium sp. by a Cuvette-Type Fast Repetition Rate Fluorometer

Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos

De voorbereiding van Neuronale Culturen van Midgastrula Stage Drosophila embryo&#39;s

This video illustrates the procedure for making primary neuronal cultures from midgastrula stage Drosophila embryos. The methods for collecting embryos ...

Chromatin Immunoprecipitation Assay for Tissue-specific Genes using Early-stage Mouse Embryos

Chromatine immunoprecipitatie assay for Tissue-specifieke genen met behulp van een vroeg stadium muizenembryo&#39;s

Chromatin immunoprecipitation (ChIP) is a powerful tool to identify protein:chromatin interactions that occur in the context of living cells 1-3. This ...

Measuring Fast Calcium Fluxes in Cardiomyocytes

Het meten van Fast Calcium stromen in cardiomyocyten

Cardiomyocytes have multiple Ca2+ fluxes of varying duration that work together to optimize function 1,2. Changes in Ca2+ activity in response to ...

Improving the Success Rate of Protein Crystallization by Random Microseed Matrix Screening

Het verbeteren van de slaagkans van eiwitkristallisatie door Random Microseed Matrix Screening

Random microseed matrix screening  (rMMS) is a protein crystallization technique in which seed crystals are added  to random screens. By increasing the ...

Monitoring Functionality and Morphology of Vasculature Recruited by Factors Secreted by Fast-growing Tumor-generating Cells

Monitoring Functionaliteit en morfologie van vaatstelsel aangeworven door gesekreteerd door Snelgroeiende Tumor genererende cellen

The subcutaneous matrigel plug assay in mice is a method of choice for the in vivo evaluation of pro- and anti-angiogenic factors. In this method, desired ...

One-channel Cell-attached Patch-clamp Recording

Eenkanaals-Cell bevestigd Patch-clamp-opname

Ion channel proteins are universal devices for fast communication across biological membranes. The temporal signature of the ionic flux they generate ...

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-dimensionale Tracking van hematopoietische stamcellen en progenitorcellen in volwassen muis calvarial Bone Marrow

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Generation of Enterobacter sp. YSU Auxotrophs Using Transposon Mutagenesis

Generation of Enterobacter sp. YSU Auxotrophs Using Transposon Mutagenesis

Generatie<em&gt; Enterobacter</em&gt; Sp. YSU auxotrofen behulp Transposon Mutagenesis

Prototrophic bacteria grow on M-9 minimal salts medium supplemented with glucose (M-9 medium), which is used as a carbon and energy source. Auxotrophs can ...

Floral-Dip Transformation of Flax (Linum usitatissimum) to Generate Transgenic Progenies with a High Transformation Rate

Floral-Dip Transformation of Flax Linum usitatissimum to Generate Transgenic Progenies with a High Transformation Rate

Bloemen-Dip Transformatie van vlas (<em&gt; Linum usitatissimum</em&gt;) Om Transgene progenies Genereer met een High Transformation Rate

Agrobacterium-mediated plant transformation via floral-dip is a widely used technique in the field of plant transformation and has been reported to be ...