Name: measuring photophysiology of attached stage of colacium sp. by a cuvette-type fast repetition rate fluorometer
Uploaded: 2021-11-12T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring Photophysiology of Attached Stage of Colacium sp. by a Cuvette-Type Fast Repetition Rate Fluorometer at JoVE.com

O trabalho foi apoiado pelo Fundo de Pesquisa Colaborativa da Prefeitura de Shiga intitulado "Estudo sobre a qualidade da água e meio ambiente no fundo do lago para a proteção da solidez do ambiente hídrico" sob a Concessão Japonesa de Revitalização Regional e o Fundo de Pesquisa e Desenvolvimento De Tecnologia ambiental (nº 5-1607) do Ministério do Meio Ambiente, Japão. https://www.kantei.go.jp/jp/singi/tiiki/tiikisaisei/souseikoufukin.html. Os autores gostariam de agradecer a Enago (www.enago.jp) pela revisão da língua inglesa.

1. Amostragem
<ol><li>Recolher água do lago da superfície por um balde. Para atingir Colacium sp. anexado ao filtro S. mucronata (Figura 1A-C) 0,5-10 L de água do lago usando uma rede de malha de nylon de 100 μm52. NOTA: S. mucronata muitas vezes agregado densamente em águas rasas, eutróficas, lamacentas, como entre as áreas de reed (phragmites).</li>
	<li>Armazene as amostras concentradas em gar...

Este protocolo demonstrou pela primeira vez que a fotofisiologia de Colacium sp. durante a fase anexa em um ambiente natural é comparável à sua etapa planctônica no meio AF-6. Além disso, o conteúdo intestinal da esfomeada S. mucronata não afetou a linha de base e a fluorescência chl-a quando a densidade foi ≤5 inds·mL−1 (Figura 5 e Figura 6). Esses resultados sugerem que este protocolo pode medir a fotofisiolog...

A fluorescência variável de clorofila é uma ferramenta útil para medir a fotofilosiologia alcanela II (PSII). As algas respondem a diversos estresses ambientais, como excesso de luz e deficiência de nutrientes, alterando sua fotofisiologia PSII. Fluorometer de taxa de repetição rápida (FRRf) é um método comum para medir a fotofisiologia PSII1,2 e estimar a produtividade primária1,3,4, o que permite monitorar a fotofisiologia fitoplâncton PSII, bem como a produtividade primária em larga escala espacial e temporal5,6,7. A FRRf pode medir simultaneamente a seção transversal de absorção do PSII (σ PSII), concentração do centro de reação ([RCII]), eficiência fotoquímica máxima (Fv/Fm), eficiência fotoquímica eficaz (Fq'/Fm′) e saciamento não fotoquímico (NPQNSV) (Tabela 1). Em geral, Fv/Fm e Fq'/Fm′ são definidos como atividade PSII8, enquanto NPQNSV é definido como energia relativa dissipada pelo calor9.
É importante ressaltar que os flashes de rotatividade única (ST) de FRRf reduzem totalmente o principal aceitador de elétrons de quinone, QA, mas não a piscina de plastoquinona. Por outro lado, vários flashes de rotatividade (MT) a partir de um fluorômetro de modulação de amplitude de pulso (PAM) podem reduzir ambos. O método ST tem uma clara vantagem sobre o método MT ao identificar as possíveis origens do NPQNSV, medindo simultaneamente cinéticas de recuperação de Fv/Fm, Fq'/Fm′, NPQNSV e σ PSII10. Até o momento, vários tipos de instrumentos FRRf, como tipo submersível, tipo cuvette e fluxo através do tipo, estão disponíveis comercialmente. O FRRf do tipo submersível permite medições in situ em oceanos e lagos, enquanto o FRRf do tipo cuvette é adequado para medir pequenos volumes de amostra. O tipo de fluxo é comumente usado para medir continuamente a fotofisiologia do fitoplâncton em águas superficiais.
Dado o desenvolvimento de fluorômetros PAM, incluindo o tipo cuvette, para uma ampla gama de indivíduos11, fluorômetros PAM ainda são mais comuns do que FRRfs em pesquisa de fotofisiologia alga ágala12. Por exemplo, embora a estrutura da câmara de amostra e a capacidade de cuvette entre essas ferramentas só diferem ligeiramente, o PAM tipo cuvette foi aplicado aos fitoplânctons13,14,15, microalgas benthic16,17,18, algas de gelo19 e algas epizoicas20, enquanto a FRRf tipo cuvette foi aplicada principalmente aos fitoplânctons21,22,23 e um número limitado de comunidades algas de gelo24,25. Dada a sua eficácia, a FRRf do tipo cuvette é igualmente aplicável às algas benthic e epizoicas. Portanto, a expansão de sua aplicação fornecerá uma visão considerável da fotofisiologia psii, particularmente para fotofisiologia de algas epizoicas menos conhecidas.
As algas epizoicas têm recebido pouca atenção, com poucos estudos examinando sua fotofisiologia PSII20,26, provavelmente devido a seus papéis menores em teias de alimentos aquáticos27,28. No entanto, epibiontes, incluindo algas epizoicas, podem influenciar positivamente a dinâmica da comunidade zooplâncton, como o aumento das taxas de reprodução e sobrevivência29,30, bem como processos de impacto negativo, como o aumento da taxa de afundamento29,31 e a vulnerabilidade aos predadores visuais32,33,34,35,36 . Por isso, é fundamental explorar os fatores ambientais e biológicos que controlam a dinâmica dos epibiontes nas comunidades zooplânctons.
Entre as algas epizoicas, Colacium Ehrenberg 1834 (Euglenophyta) é um grupo comum, de água doce, alga32,37,38,39 com várias fases de vida, incluindo anexado (Figura 1A-D), planktônico não motile (Figura 1E,F) e estágios plantônicos motile40,41 . Durante o estágio plantônico não motil, as células vivem como plânctons unicelulares, colônias agregadas, ou colônias de folhas de uma camada, cobertas por mucilage42. No estágio anexo, Colacium sp. utiliza mucilagem excretada da extremidade anterior da célula37,39,41 para anexar a organismos substratos (basibionts), particularmente microcrustaceanos41,43. Seu ciclo de vida também envolve se separar do exoesqueleto derretido ou basibiont morto e nadar com sua flagela para encontrar outro organismo substrato39. Ambos os estágios planctônicos e anexados podem aumentar seu tamanho populacional por mitose40. Embora seu estágio anexado seja considerado um traço evolutivo para a coleta de recursos, como a luz44 e os elementos de rastreamento41,45,46, ou como estratégia de dispersão27, poucas evidências experimentais estão disponíveis sobre esses aspectos37,41,44 e os mecanismos-chave de apego são amplamente desconhecidos. Por exemplo, Rosowski e Kugrens esperavam que Colacium obtenha manganês (Mn) de copepods substratos41, concentrados no exoesqueleto47.
Aqui, descrevemos como medir a fotofisiologia PSII das algas planctônicas e o método de aplicação relacionado para segmentação de algas anexadas (anexando ao zooplâncton) com células colacium sp. usando a FRRf tipo cuvette. Utilizamos o sistema Act2 equipado com três diodos emissores de luz (LEDs) que fornecem energia de excitação flash centrada em 444 nm, 512 nm e 633 nm48. Aqui, 444 nm (azul) corresponde ao pico de absorção de cromofila a (Chl-a), enquanto 512 nm (verde) e 633 nm (laranja) correspondem aos picos de absorção de ficoerthrina e ficocyanina, respectivamente. O pico de detecção de sinal fluorescente é de 682 nm com largura de banda de 30 nm. Como é difícil encontrar a etapa planctônica do Colacium sp. em ambientes naturais, seu estágio anexo foi coletado para os experimentos. Entre os numerosos organismos substratos, Scapholeberis mucronata O.F. Müller 1776 (Branchiopoda, Daphniidae; Figura 1A,B,G) é uma das mais simples de manusear devido à sua velocidade de natação lenta, grande tamanho do corpo (400-650 μm) e comportamento único (pendurado de cabeça para baixo na superfície da água). Portanto, este protocolo utiliza o Colacium sp. anexado em S. mucronata como um estudo de caso do sistema Colacium-basibiont. Para evitar fluorescência derivada do conteúdo intestinal, S. mucronata estava faminta. Como um estudo anterior relatou que o sinal de fluorescência do conteúdo intestinal (algas ingeridas) apresenta uma redução de cinco vezes após 40 min49, esperávamos que 90 min de fome fossem suficientes para minimizar a possibilidade de fluorescência do conteúdo intestinal afetando a medição da FRRf com efeitos mínimos de estresse experimental para Colacium sp., como deficiência de nutrientes. Além disso, este protocolo foi aplicado para esclarecer o mecanismo de anexação do Colacium sp. e determinar como dois metais, cálcio (Ca) e manganês (Mn) afetam a fotofisiologia tanto de estágios planctônicos quanto anexados. O cálcio desempenha papéis-chave nas vias fotossintéticas50 de várias maneiras, e ambos os metais são necessários para construir os complexos em evolução de oxigênio do PSII51. Como o cálcio e o manganês são altamente concentrados na carapaça do zooplâncton 47, temos a hipótese de que a fotofisiologia de Colacium sp. pode responder com mais destaque ao enriquecimento de Ca e Mn durante a fase planctônica se esta fase de vida obter esses elementos de S. mucronata durante a fase anexada.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acrodisc syringe filter</td>
			<td>Pall Corporation, Ann Arbor, MI, USA</td>
			<td></td>
			<td>0.2 &#956;m pore size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Act2Run</td>
			<td>CTG Ltd., West Molesey, UK</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotin</td>
			<td>Wako</td>
			<td>023-08711</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2&#183;2H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>031-25031</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCO3</td>
			<td>Wako</td>
			<td>036-00382</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citric acid</td>
			<td>Wako</td>
			<td>036-05522</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CoCl2&#183;6H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>036-03682</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Concentrated Chlorella</td>
			<td>Recenttec, Tokyo, Japan</td>
			<td></td>
			<td>20 mg C&#183;mL&#8722;1 ; store at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FastOcean Act2</td>
			<td>CTG Ltd., West Molesey, UK</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fe-citrate</td>
			<td>Wako</td>
			<td>093-00952</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FeCl3&#183;6H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>091-00872</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HCLP-880PF</td>
			<td>Nippon Medical and Chemical Instruments 
			&#160;Co., Ltd., Osaka, Japan</td>
			<td></td>
			<td>With LED light bulbs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>K2HPO4</td>
			<td>Wako</td>
			<td>160-04292</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>Wako</td>
			<td>167-04241</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgSO4&#183;7H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>137-00402</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MnCl3&#183;4H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>139-00722</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2EDTA</td>
			<td>Wako</td>
			<td>343-01861</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2MoO4</td>
			<td>Wako</td>
			<td>196-02472</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaNO3</td>
			<td>Wako</td>
			<td>191-02542</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NH4NO3</td>
			<td>Wako</td>
			<td>015-03231</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plankton Counter</td>
			<td>Matsunami Glass, Osaka, Japan</td>
			<td>S6300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pylex test tube</td>
			<td>CTG Ltd., West Molesey, UK</td>
			<td></td>
			<td>With rim, 16 x 100 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vit. B1</td>
			<td>Wako</td>
			<td>203-00851</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vit. B12</td>
			<td>Wako</td>
			<td>226-00343</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vit. B6</td>
			<td>Wako</td>
			<td>165-05401</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZnSO4&#183;7H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>264-00402</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measuring photophysiology of attached stage of colacium sp. by a cuvette-type fast repetition rate fluorometer

Fluorometer de taxa de repetição rápida (FRRf) é um método benéfico para medir fotosiologia II (PSII) e produtividade primária. Embora a FRRf possa medir a seção transversal de absorção do PSII (σ PSII), eficiência fotoquímica máxima (Fv/Fm), eficiência fotoquímica eficaz (Fq′/Fm′) e saciamento não fotoquímico (NPQNSV) para várias algas eucarióticas e cianobactérias, quase todos os estudos frrf até o momento se concentraram em fitoplâncton. Aqui, o protocolo descreve como medir a fotofisiologia psii de uma alga epizoica Colacium sp. Ehrenberg 1834 (Euglenophyta), em seu estágio anexo (ligado ao zooplâncton), usando FRRf tipo cuvette. Primeiro, estimamos os efeitos do zooplâncton substrato (Scapholeberis mucronata O.F. Müller 1776, Cladocera, Daphniidae) na fluorescência da linha de base e σ PSII, Fv/Fm, Fq′/Fm′, e NPQNSV de Colacium planctônico sp. Para validar essa metodologia, foram registradas medições fotofisiologia do Colacium sp. anexado em S. mucronata e comparamos esses resultados com sua fase planctônica. Resultados representativos mostraram como o protocolo poderia determinar os efeitos do cálcio (Ca) e manganês (Mn) na fotofisiologia de Colacium sp. e identificar os diversos efeitos do enriquecimento de Mn entre estágios ligados e plantônicos. Finalmente, discutimos a adaptabilidade deste protocolo a outras algas perifitárias.

Não houve efeito significativo da fluorescência da linha de base (Figura 5) ou flauscência chl-a (Figura 6) por S. mucronata até 5 indivíduos (inds.) mL−1. No entanto, Fv/Fm e NPQNSV foram significativamente afetados quando a mucronata de S. foi de 7,5 inds·mL−1. Portanto, para medir a fotofisiologia de Colacium sp. durante a fase anexa...

Watch this Scientific Journal Video about Measuring Photophysiology of Attached Stage of Colacium sp. by a Cuvette-Type Fast Repetition Rate Fluorometer at JoVE.com

Measuring Photophysiology of Attached Stage of Colacium sp. by a Cuvette-Type Fast Repetition Rate Fluorometer

Fluorometer de taxa de repetição rápida (FRRf) é um método benéfico para medir fotofilosiologia fotossiológica II e produtividade primária. Aqui descrevemos um protocolo para medir a fotofisiologia PSII de algas epizoicas, Colacium sp. em zooplâncton substrato usando FRRf tipo cuvette.

Medindo fotofisiologia do estágio anexado de Colacium sp. por um fluorômetro de taxa de repetição rápida do tipo cuvette

Fast repetition rate fluorometer (FRRf) is a beneficial method for measuring photosystem II (PSII) photophysiology and primary productivity. Although FRRf ...

Este protocolo mede a atividade fotossintética das algas anexadas, enquanto elas ainda estão ligadas ao plâncton, assim como na natureza. A principal vantagem dessa técnica é que a medição da fotofisiologia pode ser feita em tempo real sem distração amostral. Para examinar os efeitos dos indivíduos zooplânctons na fluorescência da linha de base, prepare a mucronata de scapholeberis adultos da cultura sem organismos ligados.Agora esfuje os indivíduos na FLW a 20 graus Celsius por pelo menos 90 minutos para evitar a fluorescência do conteúdo intestinal. Despeje 1,5 mililitros de FWL em uma cuvette. Pegue o número desejado de s.indivíduos de mucronata usando uma pipeta sob um microscópio óptico a 100 vezes a ampliação e transferi-los para a cuvette. Adicione FLW para trazer o volume amostral até 2 mililitros e permitir que ele se aclimata sob luz baixa a 20 graus Celsius é por 15 minutos antes da medição rápida da taxa de repetição do fluorômetro. Em seguida, clique em agir para executar"para iniciar a medição e repetir as medidas mais de três vezes por amostra.Leia o valor de F0 da trama resultante. Pegue espécies de colacium com uma carapaça derretida usando uma pipeta sob um microscópio óptico a 100 vezes a ampliação e lave-as com FLW. Asepticamente inoculado espécies de colacium no meio AF-6 em um tubo de vidro de 10 mililitros em um banco limpo.Mantenha a cultura a uma temperatura NC2 em uma câmara de crescimento, sacudindo o tubo de vidro suavemente à mão pelo menos uma vez por dia para evitar a liquidação celular. Para examinar os efeitos dos indivíduos zooplânctons na clorofila uma fluorescência de espécies colacium, use s. mucronata adulta sem qualquer organismo anexado.Para evitar fluorescência do conteúdo intestinal, esflaça os indivíduos na FLW por pelo menos 90 minutos. Configure um fluorômetro de taxa de repetição rápida do tipo cuvette. Agora despeje uma amostra de 1,5 mililitros de subfícida de espécies de colacium pré-cultivadas em uma cuvette.Em seguida, transfira o número desejado de indivíduos de s. mucronata para essas cuvetas e leve o volume amostral até 2 mililitros com o meio filtrado. Aclimes os indivíduos sob luz baixa a 20 graus Celsius por 15 minutos antes de tomar a medição rápida da taxa de repetição do fluorômetro.Clique em agir para executar"para iniciar a medição, repetindo as medidas mais de três vezes por amostra. Leia os valores F0 e FM do enredo resultante. Para corrigir a fluorescência da linha de base, filtre o meio de cultura usando um filtro do tamanho de um derramamento de 0,2 micrômetro e meça a fluorescência.Subtraia F0 da amostra de linha de base de F0 e FM de espécies de colacium ou modifica o valor de correção em branco nas configurações na guia de opções. Isola indivíduos de mucronata com espécies de colacium usando uma pipeta sob um microscópio óptico.Em seguida, lave a mucronata usando FLW. Transferência s.mucronata em 100 mililitros de FLW e mantê-los sob condições escuras à temperatura NC2 por 90 minutos para a fome. Despeje 1,5 mililitros de FLW em uma cuvette. Transfira em torno de dez s.mucronata indivíduos com espécies de colacium em uma cuvette e adicionar FLW para trazer a amostra até 2 mililitros. Aclimam os indivíduos sob baixa luz à temperatura de N2C por 15 minutos e medem a fluorescência da clorofila, como mencionado no manuscrito do texto. Para enumerar o número de células anexadas, fixe a amostra com 2% de glutaraldeído após tomar a medição do fluorômetro da taxa de repetição rápida.Em seguida, tire fotos em várias profundidades focais e posições de s. mucronata sob um microscópio leve. Não houve efeito significativo na fluorescência da linha de base ou clorofila uma fluorescência por s.mucronata até 5 indivíduos por mililitro. No entanto, a eficiência fotoquímica máxima e a sacieciação não fotoquímica foram significativamente afetadas quando a densidade de mucronata foi de 7,5 indivíduos por mililitro.A variação sazonal na fitofisiologia das espécies de colacium durante a fase de apego e a etapa planctônica para a fase estacionária no meio AF-6 mostrou eficiência fotoquímica média semelhante e saciedade não fotoquímica. Para o estágio anexado das espécies de colacium em condições escuras, não houve diferença significativa nos parâmetros fotofísicos, exceto a extinção não fotoquímica sendo maior para manganês do que o cálcio após três horas, e em baixa intensidade de luz às 21 horas. Para a fase planctônica, a seção transversal de absorção do PS2 foi significativamente menor no manganês do que no tratamento de cálcio em três horas.A eficiência fotoquímica eficaz foi significativamente maior, mas a saciedação não fotoquímica foi menor no tratamento de manganês do que o controle em 21 horas. Sob luz crescente, o manganês tende a diminuir a absorção do PS2 em três horas, em saciedos não fotoquímicos em 21 horas, enquanto aumentava a eficiência fotoquímica eficaz em três horas. O cálcio melhorou ligeiramente a extinção não fotoquímica sob luz crescente.No entanto, diminuiu a eficiência fotoquímica efetiva em três horas. O mais importante é o efeito de organismos substratos. Se as algas forem ligadas a diferentes espécies ou materiais, o efeito pode ser diferente.Além deste protocolo, a medição das taxas de fixação de carbono ou de produção de oxigênio são úteis para esclarecer a resposta da produtividade do cálcio às manipulações experimentais. Este protocolo nos permite esclarecer como a atividade fotossintética das algas anexadas responde às mudanças ambientais.

Research

JoVE Journal

Biology

Measuring Photophysiology of Attached Stage of Colacium sp. by a Cuvette-Type Fast Repetition Rate Fluorometer

Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos

Preparação de culturas de neurônios a partir de embriões Midgastrula Stage Drosophila

This video illustrates the procedure for making primary neuronal cultures from midgastrula stage Drosophila embryos. The methods for collecting embryos ...

Biologia

Chromatin Immunoprecipitation Assay for Tissue-specific Genes using Early-stage Mouse Embryos

Ensaio para imunoprecipitação da cromatina Genes Tissue-específicos usando embriões em início de carreira do rato

Chromatin immunoprecipitation (ChIP) is a powerful tool to identify protein:chromatin interactions that occur in the context of living cells 1-3. This ...

Measuring Fast Calcium Fluxes in Cardiomyocytes

Fluxos de medição de cálcio rápido no Cardiomyocytes

Cardiomyocytes have multiple Ca2+ fluxes of varying duration that work together to optimize function 1,2. Changes in Ca2+ activity in response to ...

Improving the Success Rate of Protein Crystallization by Random Microseed Matrix Screening

Melhorar a taxa de sucesso de cristalização de proteínas pela Random Microseed Matrix Screening

Random microseed matrix screening  (rMMS) is a protein crystallization technique in which seed crystals are added  to random screens. By increasing the ...

Monitoring Functionality and Morphology of Vasculature Recruited by Factors Secreted by Fast-growing Tumor-generating Cells

Monitoramento Funcionalidade e Morfologia da vasculatura Recrutado por fatores secretados por geradores de Células Tumorais de crescimento rápido

The subcutaneous matrigel plug assay in mice is a method of choice for the in vivo evaluation of pro- and anti-angiogenic factors. In this method, desired ...

One-channel Cell-attached Patch-clamp Recording

Um canal de gravação de patch-clamp anexado-Cell

Ion channel proteins are universal devices for fast communication across biological membranes. The temporal signature of the ionic flux they generate ...

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo Rastreamento 4-Dimensional de tronco hematopoéticas e células progenitoras em adultos mouse na calota craniana de Medula Óssea

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Generation of Enterobacter sp. YSU Auxotrophs Using Transposon Mutagenesis

Generation of Enterobacter sp. YSU Auxotrophs Using Transposon Mutagenesis

Geração de<em&gt; Enterobacter</em&gt; Sp. YSU auxotrofos Usando Transposon Mutagênese

Prototrophic bacteria grow on M-9 minimal salts medium supplemented with glucose (M-9 medium), which is used as a carbon and energy source. Auxotrophs can ...

Floral-Dip Transformation of Flax (Linum usitatissimum) to Generate Transgenic Progenies with a High Transformation Rate

Floral-Dip Transformation of Flax Linum usitatissimum to Generate Transgenic Progenies with a High Transformation Rate

Floral-Dip Transformação de linho (<em&gt; Linum usitatissimum</em&gt;) Para gerar Transgênicos Progênies com uma alta taxa de Transformação

Agrobacterium-mediated plant transformation via floral-dip is a widely used technique in the field of plant transformation and has been reported to be ...