Name: measuring photophysiology of attached stage of colacium sp. by a cuvette-type fast repetition rate fluorometer
Uploaded: 2021-11-12T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Measuring Photophysiology of Attached Stage of Colacium sp. by a Cuvette-Type Fast Repetition Rate Fluorometer at JoVE.com

La labor contó con el apoyo del Fondo de Investigación Colaborativa de la Prefectura de Shiga titulado "Estudio sobre la calidad del agua y el medio ambiente del fondo de los lagos para la protección de la solidez del medio ambiente acuático" en el marco de la Subvención Japonesa para la Revitalización Regional y el Fondo de Investigación y Desarrollo Tecnológico del Medio Ambiente (Nº 5-1607) del Ministerio de Medio Ambiente del Japón. https://www.kantei.go.jp/jp/singi/tiiki/tiikisaisei/souseikoufukin.html. Los autores desean agradecer a Enago (www.enago.jp) por la revisión en inglés.

1. Muestreo
<ol><li>Recoge el agua del lago de la superficie con un cubo. Para apuntar a Colacium sp. unido a S. mucronata (Figura 1A-C) filtra 0.5-10 L de agua de lago utilizando una red de malla de nylon de 100 μm52. NOTA: S. mucronata a menudo se agrega densamente en aguas poco profundas, eutróficas y fangosas, como entre las áreas de juncos (fragmitas).</li>
	<li>Almacene las muestras concentrada...

Este protocolo demostró por primera vez que la fotofisiología de Colacium sp. durante la etapa adjunta en un entorno natural es comparable a su etapa planctónica en medio AF-6. Además, el contenido intestinal de S. mucronata hambrienta no afectó la fluorescencia basal y Chl-a cuando la densidad fue ≤5 inds·mL−1 (Figura 5 y Figura 6). Estos resultados sugieren que este protocolo puede medir la fotofisiología de <em...

La fluorescencia variable de clorofila es una herramienta útil para medir la fotofisiología del fotosistema de algas II (PSII). Las algas responden a diversas tensiones ambientales, como el exceso de luz y la deficiencia de nutrientes, alterando su fotofisiología PSII. El fluorómetro de tasa de repetición rápida (FRRf) es un método común para medir la fotofisiología psiI1,2 y estimar la productividad primaria1,3,4, que permite monitorear la fotofisiología psiI del fitoplancton, así como la productividad primaria en amplias escalas espaciales y temporales5,6,7. FRRf puede medir simultáneamente la sección transversal de absorción de PSII (σ PSII), la concentración del centro de reacción ([RCII]), la eficiencia fotoquímica máxima (Fv / Fm), la eficiencia fotoquímica efectiva (Fq ′ / Fm ′) y el enfriamiento no fotoquímico (NPQNSV) (Tabla 1). En general, Fv/Fm y Fq′/Fm′ se definen como actividad PSII8, mientras que NPQNSV se define como energía relativa disipada por calor9.
Es importante destacar que los destellos de rotación única (ST) de FRRf reducen completamente el aceptor primario de electrones de quinona, QA, pero no el grupo de plastoquinona. Por el contrario, los destellos de rotación múltiple (MT) de un fluorómetro de modulación de amplitud de pulso (PAM) pueden reducir ambos. El método ST tiene una clara ventaja sobre el método MT al identificar los posibles orígenes de NPQNSV al medir simultáneamente la cinética de recuperación de Fv / Fm, Fq ′ / Fm ′, NPQNSV y σ PSII10. Hasta la fecha, varios tipos de instrumentos FRRf, como el tipo sumergible, el tipo cuvette y el tipo de flujo a través, están disponibles comercialmente. El FRRf de tipo sumergible permite mediciones in situ en océanos y lagos, mientras que el FRRf de tipo cubeta es adecuado para medir pequeños volúmenes de muestra. El tipo de flujo a través se usa comúnmente para medir continuamente la fotofisiología del fitoplancton en aguas superficiales.
Dado el desarrollo de fluorómetros PAM, incluido el tipo cubeta, para una amplia gama de sujetos11, los fluorómetros PAM siguen siendo más comunes que los FRRf en la investigación de fotofisiología de algas12. Por ejemplo, aunque la estructura de la cámara de muestreo y la capacidad de la cubeta entre estas herramientas solo difieren ligeramente, el PAM tipo cubeta se ha aplicado a fitoplancton13,14,15, microalgas bentónicas16,17,18, algas de hielo19 y algas epizoicas20, mientras que el FRRf de tipo cubeta se ha aplicado principalmente a fitoplancton21,22,23 y un número limitado de comunidades de algas de hielo24,25. Dada su eficacia, el FRRf de tipo cubeta es igualmente aplicable a las algas bentónicas y epizoicas. Por lo tanto, la expansión de su aplicación proporcionará una visión considerable de la fotofisiología PSII, particularmente para la fotofisiología de algas epizoicas menos conocida.
Las algas epizoicas han recibido poca atención, con pocos estudios que examinen su fotofisiología PSII20,26, muy probablemente debido a sus funciones menores en las redes tróficas acuáticas27,28. Sin embargo, los epibiontes, incluidas las algas epizoicas, pueden influir positivamente en la dinámica de la comunidad de zooplancton, como el aumento de las tasas de reproducción y supervivencia29,30, así como impactar negativamente en procesos, como el aumento de la tasa de hundimiento29,31 y la vulnerabilidad a los depredadores visuales32,33,34,35,36 . Por lo tanto, explorar los factores ambientales y biológicos que controlan la dinámica de los epibiontes en las comunidades de zooplancton es crucial.
Entre las algas epizoicas, Colacium Ehrenberg 1834 (Euglenophyta) es un grupo de algas comunes, de agua dulce32,37,38,39 con varias etapas de vida, incluyendo etapas planctónicas adjuntas (Figura 1A-D), planctónicas no móviles (Figura 1E, F) y planctónicas móviles40,41 . Durante la etapa planctónica no móvil, las células viven como plancton unicelular, colonias agregadas o colonias de láminas de una capa, cubiertas por mucílago42. En la etapa de unión, Colacium sp. utiliza mucílago excretado desde el extremo anterior de la célula37,39,41 para adherirse a organismos sustratos (basibionts), particularmente microcrustáceos41,43. Su ciclo de vida también implica desprenderse del exoesqueleto muda o basibionte muerto y nadar con sus flagelos para encontrar otro organismo sustrato39. Tanto la etapa planctónica como la unida pueden aumentar el tamaño de su población en mitosis40. Aunque se presume que su etapa adjunta es un rasgo evolutivo para la recolección de recursos, como la luz44 y los oligoelementos41,45,46, o como una estrategia de dispersión27, se dispone de poca evidencia experimental sobre estos aspectos37,41,44 y los mecanismos clave de unión son en gran parte desconocidos. Por ejemplo, Rosowski y Kugrens esperaban que Colacium obtuviera manganeso (Mn) a partir de copépodos de sustrato41, concentrados en el exoesqueleto47.
Aquí, describimos cómo medir la fotofisiología PSII de algas planctónicas y el método de aplicación relacionado para apuntar a algas adheridas (uniéndose al zooplancton) con células de Colacium sp. utilizando el FRRf de tipo cubeta. Utilizamos el sistema Act2 equipado con tres diodos emisores de luz (LED) que proporcionan energía de excitación de flash centrada en 444 nm, 512 nm y 633 nm48. Aquí, 444 nm (azul) corresponde al pico de absorción de la cromalina a (Chl-a), mientras que 512 nm (verde) y 633 nm (naranja) corresponden a los picos de absorción de ficoeritrina y ficocianina, respectivamente. El pico de detección de señal fluorescente es de 682 nm con medio ancho de banda de 30 nm. Dado que es difícil encontrar la etapa planctónica de Colacium sp. en ambientes naturales, su etapa adjunta se recolectó para los experimentos. Entre los numerosos organismos sustratos, Scapholeberis mucronata O.F. Müller 1776 (Branchiopoda, Daphniidae; Figura 1A, B, G) es una de las más simples de manejar debido a su lenta velocidad de natación, gran tamaño corporal (400-650 μm) y comportamiento único (colgando boca abajo en la superficie del agua). Por lo tanto, este protocolo utiliza Colacium sp. unido en S. mucronata como un estudio de caso del sistema Colacium-basibiont. Para evitar la fluorescencia derivada del contenido intestinal, S. mucronata se murió de hambre. Como un estudio anterior informó que la señal de fluorescencia del contenido intestinal (algas ingeridas) muestra una disminución de cinco veces después de 40 min49, esperábamos que la inanición de 90 min fuera suficiente para minimizar la posibilidad de que la fluorescencia del contenido intestinal afectara la medición de FRRf con efectos mínimos de estrés experimental para Colacium sp., como la deficiencia de nutrientes. Además, este protocolo se aplicó para aclarar el mecanismo de unión de Colacium sp. y determinar cómo dos metales, el calcio (Ca) y el manganeso (Mn) afectan la fotofisiología de las etapas planctónica y adjunta. El calcio juega un papel clave en las vías fotosintéticas50 de múltiples maneras, y ambos metales son necesarios para construir los complejos de evolución de oxígeno de la PSII51. Como el calcio y el manganeso están altamente concentrados en el caparazón del zooplancton de crustáceos47, planteamos la hipótesis de que la fotofisiología de Colacium sp. podría responder más prominentemente al enriquecimiento de Ca y Mn durante la etapa planctónica si esta etapa de la vida obtiene estos elementos de S. mucronata durante la etapa adjunta.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acrodisc syringe filter</td>
			<td>Pall Corporation, Ann Arbor, MI, USA</td>
			<td></td>
			<td>0.2 &#956;m pore size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Act2Run</td>
			<td>CTG Ltd., West Molesey, UK</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biotin</td>
			<td>Wako</td>
			<td>023-08711</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCl2&#183;2H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>031-25031</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CaCO3</td>
			<td>Wako</td>
			<td>036-00382</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Citric acid</td>
			<td>Wako</td>
			<td>036-05522</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CoCl2&#183;6H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>036-03682</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Concentrated Chlorella</td>
			<td>Recenttec, Tokyo, Japan</td>
			<td></td>
			<td>20 mg C&#183;mL&#8722;1 ; store at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FastOcean Act2</td>
			<td>CTG Ltd., West Molesey, UK</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fe-citrate</td>
			<td>Wako</td>
			<td>093-00952</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FeCl3&#183;6H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>091-00872</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HCLP-880PF</td>
			<td>Nippon Medical and Chemical Instruments 
			&#160;Co., Ltd., Osaka, Japan</td>
			<td></td>
			<td>With LED light bulbs</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>K2HPO4</td>
			<td>Wako</td>
			<td>160-04292</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>KH2PO4</td>
			<td>Wako</td>
			<td>167-04241</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MgSO4&#183;7H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>137-00402</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MnCl3&#183;4H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>139-00722</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2EDTA</td>
			<td>Wako</td>
			<td>343-01861</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Na2MoO4</td>
			<td>Wako</td>
			<td>196-02472</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaNO3</td>
			<td>Wako</td>
			<td>191-02542</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NH4NO3</td>
			<td>Wako</td>
			<td>015-03231</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plankton Counter</td>
			<td>Matsunami Glass, Osaka, Japan</td>
			<td>S6300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pylex test tube</td>
			<td>CTG Ltd., West Molesey, UK</td>
			<td></td>
			<td>With rim, 16 x 100 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vit. B1</td>
			<td>Wako</td>
			<td>203-00851</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vit. B12</td>
			<td>Wako</td>
			<td>226-00343</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vit. B6</td>
			<td>Wako</td>
			<td>165-05401</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZnSO4&#183;7H2O</td>
			<td>Wako</td>
			<td>264-00402</td>
			<td>AF-6 medium</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

measuring photophysiology of attached stage of colacium sp. by a cuvette-type fast repetition rate fluorometer

El fluorómetro de tasa de repetición rápida (FRRf) es un método beneficioso para medir la fotofisiología del fotosistema II (PSII) y la productividad primaria. Aunque FRRf puede medir la sección transversal de absorción de PSII (σ PSII), la máxima eficiencia fotoquímica (Fv / Fm), la eficiencia fotoquímica efectiva (Fq ′ / Fm ′) y el enfriamiento no fotoquímico (NPQNSV) para varias algas eucariotas y cianobacterias, casi todos los estudios de FRRf hasta la fecha se han centrado en el fitoplancton. Aquí, el protocolo describe cómo medir la fotofisiología PSII de un alga epizoica Colacium sp. Ehrenberg 1834 (Euglenophyta), en su etapa adjunta (unida al zooplancton), utilizando FRRf de tipo cubeta. En primer lugar, estimamos los efectos del zooplancton de sustrato (Scapholeberis mucronata O.F. Müller 1776, Cladocera, Daphniidae) sobre la fluorescencia basal y la σ PSII, Fv/Fm, Fq′/Fm′, y NPQNSV del planctónico Colacium sp. Para validar esta metodología, se registraron las mediciones fotofisiología de Colacium sp. adherido en S. mucronata y se compararon estos resultados con su etapa planctónica. Los resultados representativos mostraron cómo el protocolo podría determinar los efectos del calcio (Ca) y el manganeso (Mn) en la fotofisiología de Colacium sp. e identificar los diversos efectos del enriquecimiento de Mangan entre las etapas adjuntas y planctónicas. Finalmente, discutimos la adaptabilidad de este protocolo a otras algas perifíticas.

No hubo efecto significativo de la fluorescencia basal (Figura 5) o de la fluorescencia Chl-a (Figura 6) por S. mucronata hasta 5 individuos (inds.) mL−1. Sin embargo, Fv/Fm y NPQNSV se vieron significativamente afectados cuando S. mucronata fue de 7,5 inds·mL−1. Por lo tanto, para medir la fotofisiología de Colacium sp. durante la etapa ad...

Watch this Scientific Journal Video about Measuring Photophysiology of Attached Stage of Colacium sp. by a Cuvette-Type Fast Repetition Rate Fluorometer at JoVE.com

Measuring Photophysiology of Attached Stage of Colacium sp. by a Cuvette-Type Fast Repetition Rate Fluorometer

El fluorómetro de tasa de repetición rápida (FRRf) es un método beneficioso para medir la fotofisiología del fotosistema II y la productividad primaria. Aquí describimos un protocolo para medir la fotofisiología PSII del alga epizoica, Colacium sp. sobre sustrato zooplancton utilizando FRRf tipo cubeta.

Medición de la fotofisiología de la etapa adjunta de Colacium sp. por un fluorómetro de tasa de repetición rápida tipo Cuvette

Fast repetition rate fluorometer (FRRf) is a beneficial method for measuring photosystem II (PSII) photophysiology and primary productivity. Although FRRf ...

Este protocolo mide la actividad fotosintética de las algas adheridas, mientras que todavía se adhieren al plancton, al igual que en la naturaleza. La principal ventaja de esta técnica es que la medición de la fotofisiología se puede hacer en tiempo real sin distracción de la muestra. Para examinar los efectos de los individuos de zooplancton sobre la fluorescencia basal, prepare scapholeberis mucronata adulto del cultivo sin ningún organismo adherido.Ahora priva a los individuos en FLW a 20 grados Celsius durante al menos 90 minutos para evitar la fluorescencia del contenido intestinal. Vierta 1.5 mililitros de FWL en una cubeta. Recoja el número deseado de s.individuos mucronata usando una pipeta bajo un microscopio óptico a un aumento de 100 veces y los transfieren a la cubeta. Agregue FLW para llevar el volumen de la muestra hasta 2 mililitros y permita que se aclimate con poca luz a 20 grados Celsius durante 15 minutos antes de la medición del fluorómetro de tasa de repetición rápida. Luego haga clic en actuar para ejecutar"para iniciar la medición y repetir las mediciones más de tres veces por muestra.Lea el valor F0 de la gráfica resultante. Recoja las especies de colacium con un caparazón muda usando una pipeta bajo un microscopio óptico a un aumento de 100 veces y lávelas con FLW. Inocular asépticamente especies de colacio en el medio AF-6 en un tubo de vidrio de 10 mililitros en un banco limpio.Mantenga el cultivo a una temperatura NC2 en una cámara de crecimiento, agitando el tubo de vidrio suavemente a mano al menos una vez al día para evitar el asentamiento celular. Para examinar los efectos de los individuos de zooplancton sobre la clorofila y la fluorescencia de las especies de colacium, use s. mucronata adulta sin ningún organismo adherido.Para evitar la fluorescencia del contenido intestinal, muera de hambre a las personas en la PDA durante al menos 90 minutos. Configure un fluorómetro de tasa de repetición rápida tipo cubeta. Ahora vierta una muestra de 1,5 mililitros de submuestra de especies de colacium precultivadas en una cubeta.Luego transfiera el número deseado de individuos s. mucronata a estas cubetas y lleve el volumen de muestra hasta 2 mililitros con el medio filtrado. Aclimata a los individuos bajo poca luz a 20 grados Celsius durante 15 minutos antes de tomar la medición del fluorómetro de tasa de repetición rápida.Haga clic en actuar para ejecutar"para iniciar la medición, repitiendo las mediciones más de tres veces por muestra. Lea los valores F0 y FM de la gráfica resultante. Para corregir la fluorescencia basal, filtre el medio de cultivo con un filtro de 0,2 micrómetros del tamaño de un vertido y mida la fluorescencia.Reste F0 de la muestra basal de F0 y FM de especies de colacium o modifique el valor de corrección en blanco en la configuración de la pestaña de opciones. Aísle a los individuos de s. mucronata con especies de colacium usando una pipeta bajo un microscopio óptico.Luego lave s. mucronata usando FLW. Transferencia s.mucronata en 100 mililitros de PDA y manténgalos en condiciones oscuras a temperatura NC2 durante 90 minutos por inanición. Vierta 1,5 mililitros de FLW en una cubeta. Traslado alrededor de diez s.individuos mucronata con especies de colacium en una cubeta y agregar FLW para llevar la muestra hasta 2 mililitros. Aclimatar a los individuos bajo poca luz a temperatura N2C durante 15 minutos y medir la clorofila y la fluorescencia, como se menciona en el manuscrito de texto. Para enumerar el número de células adheridas, fije la muestra con glutaraldehído al 2% después de tomar la medición del fluorómetro de tasa de repetición rápida.Luego tome fotografías a varias profundidades focales y posiciones de s. mucronata bajo un microscopio de luz. No hubo un efecto significativo sobre la fluorescencia basal o la clorofila a fluorescencia por s.mucronata hasta 5 individuos por mililitro. Sin embargo, la máxima eficiencia fotoquímica y el enfriamiento no fotoquímico se vieron significativamente afectados cuando la densidad de s. mucronata fue de 7,5 individuos por mililitro.La variación estacional en la fitofisiología de las especies de colacium durante la etapa de unión y la etapa planctónica para la fase estacionaria en el medio AF-6 mostró una eficiencia fotoquímica máxima media similar y un enfriamiento no fotoquímico. Para la etapa adjunta de las especies de colacium en condiciones oscuras, no hubo diferencias significativas en los parámetros fotofisiológicos, excepto que el enfriamiento no fotoquímico fue mayor para el manganeso que para el calcio después de tres horas, y a una intensidad de luz baja a las 21 horas. Para la etapa planctónica, la sección transversal de absorción de PS2 fue significativamente menor en el tratamiento con manganeso que en el tratamiento con calcio a las tres horas.La eficiencia fotoquímica efectiva fue significativamente mayor, pero el enfriamiento no fotoquímico fue menor en el tratamiento con manganeso que en el control a las 21 horas. Bajo el aumento de la luz, el manganeso tendió a disminuir la sección transversal de absorción de PS2 a las tres horas, en el enfriamiento no fotoquímico a las 21 horas, al tiempo que aumentaba la eficiencia fotoquímica efectiva a las tres horas. El calcio mejoró ligeramente el enfriamiento no fotoquímico bajo una luz creciente.Sin embargo, disminuyó la eficiencia fotoquímica efectiva a las tres horas. Lo más importante es el efecto de los organismos de sustrato. Si las algas se adhieren a diferentes especies o materiales, el efecto puede ser diferente.Además de este protocolo, la medición de la fijación de carbono o las tasas de producción de oxígeno son útiles para aclarar la respuesta de la productividad del calcio a las manipulaciones experimentales. Este protocolo nos permite aclarar cómo la actividad fotosintética de las algas adheridas responde a los cambios ambientales.

Research

JoVE Journal

Biology

Measuring Photophysiology of Attached Stage of Colacium sp. by a Cuvette-Type Fast Repetition Rate Fluorometer

Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos

Preparación de cultivos neuronales a partir de embriones de Drosophila Midgastrula Etapa

This video illustrates the procedure for making primary neuronal cultures from midgastrula stage Drosophila embryos. The methods for collecting embryos ...

Investigación

Biología

Chromatin Immunoprecipitation Assay for Tissue-specific Genes using Early-stage Mouse Embryos

Ensayo de inmunoprecipitación de la cromatina de los genes específicos de tejido utilizando etapa temprana de embriones de ratón

Chromatin immunoprecipitation (ChIP) is a powerful tool to identify protein:chromatin interactions that occur in the context of living cells 1-3. This ...

Measuring Fast Calcium Fluxes in Cardiomyocytes

La medición de flujos rápidos de calcio en los cardiomiocitos

Cardiomyocytes have multiple Ca2+ fluxes of varying duration that work together to optimize function 1,2. Changes in Ca2+ activity in response to ...

Improving the Success Rate of Protein Crystallization by Random Microseed Matrix Screening

La mejora de la tasa de éxito de cristalización de proteínas por Random Matrix Microseed Screening

Random microseed matrix screening  (rMMS) is a protein crystallization technique in which seed crystals are added  to random screens. By increasing the ...

Monitoring Functionality and Morphology of Vasculature Recruited by Factors Secreted by Fast-growing Tumor-generating Cells

Monitoreo Funcionalidad y Morfología de Vasculatura Reclutado por factores secretados por las células tumorales generadoras de crecimiento rápido

The subcutaneous matrigel plug assay in mice is a method of choice for the in vivo evaluation of pro- and anti-angiogenic factors. In this method, desired ...

One-channel Cell-attached Patch-clamp Recording

Un canal celular conectado a Patch-clamp grabación

Ion channel proteins are universal devices for fast communication across biological membranes. The temporal signature of the ionic flux they generate ...

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

In Vivo 4-Dimensional Tracking of Hematopoietic Stem and Progenitor Cells in Adult Mouse Calvarial Bone Marrow

En Vivo Tracking 4-Dimensional de madre hematopoyéticas y células progenitoras en ratones adultos de calota de Médula Ósea

Through a delicate balance between quiescence and proliferation, self renewal and production of differentiated progeny, hematopoietic stem cells (HSCs) ...

Generation of Enterobacter sp. YSU Auxotrophs Using Transposon Mutagenesis

Generation of Enterobacter sp. YSU Auxotrophs Using Transposon Mutagenesis

Generación de<em&gt; Enterobacter</em&gt; Sp. YSU auxótrofos Usando transposón mutagénesis

Prototrophic bacteria grow on M-9 minimal salts medium supplemented with glucose (M-9 medium), which is used as a carbon and energy source. Auxotrophs can ...

Floral-Dip Transformation of Flax (Linum usitatissimum) to Generate Transgenic Progenies with a High Transformation Rate

Floral-Dip Transformation of Flax Linum usitatissimum to Generate Transgenic Progenies with a High Transformation Rate

Floral-Dip transformación de lino (<em&gt; Linum usitatissimum</em&gt;) Para generar transgénicos progenies con una alta tasa de Transformación

Agrobacterium-mediated plant transformation via floral-dip is a widely used technique in the field of plant transformation and has been reported to be ...