Name: a porcine heterotopic heart transplantation protocol for delivery of therapeutics to a cardiac allograft
Uploaded: 2022-02-14T14:30:00
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हम इन प्रक्रियाओं के दौरान उनकी सहायता के लिए ड्यूक लार्ज एनिमल सर्जिकल कोर और ड्यूक परफ्यूजन सर्विसेज को धन्यवाद देना चाहते हैं। हम समर्थन के लिए पॉल लेज़बर्ग और ट्रांसमेडिक्स, इंक को भी धन्यवाद देना चाहते हैं।

नोट: दो मादा युकाटन सूअरों का चयन किया जाता है, जिसमें से एक को कार्डियक ग्राफ्ट दाता और दूसरे को प्राप्तकर्ता के रूप में नामित किया जाता है। 6-8 महीने की आयु के सूअर, जिनका वजन लगभग 30 किलोग्राम है, और संगत र?...

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	<li>Virani, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+disease+and+stroke+statistics-2021+update:+A+report+from+the+American+Heart+Association.">Heart disease and stroke statistics-2021 update: A report from the American Heart Association.</a> Circulation. 143 (8), 254 (2021).</li><li>Stehlik, J., Kobashigawa, J., Hunt, S. A., Reichenspurner, H., Kirklin, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Honoring+50+years+of+clinical+heart+transplantation+in+circulation:+in-depth+state-of-the-art+review.">Honoring 50 years of clinical heart transplantation in circulation: in-depth state-of-the-art review.</a> Circulation. 137 (1), 71-87 (2018).</li><li>Kadner, A., Chen, R. H., Adams, D. 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कार्डियक प्रत्यारोपण में पूर्व विवो छिड़काव के दौरान चिकित्सीय की डिलीवरी एलोग्राफ्ट को संशोधित करने और संभावित रूप से प्रत्यारोपण परिणामों में सुधार करने के लिए एक रणनीति प्रदान करती है। यहां ?...

दिल की विफलता एक ऐसी स्थिति है जो संयुक्त राज्य अमेरिका में अनुमानित 6 मिलियन वयस्कों को प्रभावित करती है और वर्ष 2030तक 8 मिलियन वयस्कों तक बढ़ने का अनुमान है। कार्डियक प्रत्यारोपण अंतिम चरण दिल की विफलता के लिए स्वर्ण मानक उपचार है। हालांकि, यह अपनी सीमाओं और जटिलताओं के बिना नहीं है। यह उपलब्ध दाता दिलों की संख्या, प्राथमिक ग्राफ्ट शिथिलता, हृदय की अस्वीकृति और दीर्घकालिक इम्यूनोसप्रेशन के दुष्प्रभावों से सीमित रहताहै 2. ये सीमाएं युवा प्राप्तकर्ताओं में विशेष रूप से महत्वपूर्ण हैं जो एलोग्राफ्ट विफलता का अनुभव कर सकते हैं और सामान्य जीवन प्रत्याशा प्राप्त करने के लिए बाद में पुन: प्रत्यारोपण की आवश्यकता होती है।
इन सीमाओं को दूर करने के लिए एक आदर्श हस्तक्षेप प्राप्तकर्ता में आरोपण से पहले चिकित्सीय के साथ पूरे कार्डियक एलोग्राफ्ट का इलाज करेगा जो एलोग्राफ्ट की व्यवहार्यता में सुधार कर सकता है और "कार्डियोप्रोटेक्शन" प्रदान कर सकता है। इस तरह के हस्तक्षेप को इस्केमिक अपमान, एलोग्राफ्ट अस्वीकृति, कार्डियक एलोग्राफ्ट वास्कुलोपैथी की घटनाओं को कम करने और यहां तक कि सीमांत एलोग्राफ्ट की मरम्मत के लिए रोगनिरोधी रूप से दिया जाएगा। इस प्रकार के हस्तक्षेपों को विकसित करने के लिए ट्रांसलेशनल अध्ययन के लिए कार्डियक ग्राफ्ट की दीर्घकालिक निगरानी की अनुमति देने के लिए कार्डियक प्रत्यारोपण के एक बड़े-पशु मॉडल की आवश्यकता होती है। इंट्राबॉडॉमिनल स्थिति में पोर्सिन, हेटरोटोपिक हृदय प्रत्यारोपण मॉडल इस उद्देश्य के लिए आदर्श साबित हुआ है। इस स्थिति में हृदय प्रत्यारोपण उपन्यास उपचारों के प्रभावों का परीक्षण करने और ग्राफ्ट अस्वीकृति के इम्यूनोपैथोलॉजी का आकलन करने की अनुमति देता है। इसके अतिरिक्त, हेटरोटोपिक मॉडल प्राप्तकर्ता के बेहतर समग्र अस्तित्व के कारण ऑर्थोटोपिक मॉडल पर फायदेमंद है, कार्डियोपल्मोनरी बाईपास की कोई आवश्यकता नहीं है, और प्राप्तकर्ता के परिसंचरण को बनाए रखने के लिए ग्राफ्ट की कोई आवश्यकता नहीं है3.
हृदय के लिए चिकित्सीय हस्तक्षेप का प्रभावी वितरण, जैसे कि जीन, सेल, या इम्यूनो-थेरेपी, नैदानिक अनुप्रयोग 4,5 के लिए एक महत्वपूर्ण बाधा है। पूर्व विवो छिड़काव उपकरणों द्वारा पेश की गई तकनीक ग्राफ्ट को लगातार सुगंधित करने की अनुमति देती है, उन्हें गैर-कामकाजी लेकिन चयापचय रूप से सक्रिय अवस्था 6,7,8,9 में बनाए रखती है। यह प्रणालीगत वितरण10,11,12,13 के संभावित दुष्प्रभावों को कम करते हुए उन्नत चिकित्सीय के साथ पूरे दिल का इलाज करने का एक अनूठा अवसर प्रदान करता है। चिकित्सीय वितरण के लिए पूर्व विवो छिड़काव उपकरणों का उपयोग करने का एक और लाभ यह है कि वे विस्तारित अवधि में कोरोनरी परिसंचरण के लिए दवाओं के प्रशासन की अनुमति देते हैं जो पारंपरिक शीत स्थैतिक भंडारण विधियों का उपयोग करके संभव नहीं हैं। यह ग्राफ्ट14 के लिए चिकित्सीय के अधिक वैश्विक वितरण की अनुमति देता है। यहां प्रस्तुत प्रोटोकॉल का उपयोग करते हुए, हमने एडेनोवायरल वैक्टर15 का उपयोग करके पूरे पोर्सिन कार्डियक ग्राफ्ट में जुगनू ल्यूसिफेरेज़ जीन को सफलतापूर्वक वितरित किया। इस प्रोटोकॉल का उद्देश्य प्रत्यारोपण से पहले पूरे कार्डियक एलोग्राफ्ट के लिए चिकित्सीय के वितरण को प्राप्त करने के लिए एक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य और मजबूत दृष्टिकोण प्रदान करना है।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0 Looped Maxon suture</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>GMM-341L</td>
			<td>Used to close fascia of the laparotomy incision</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0 Silk ties</td>
			<td>Medtronic, Inc</td>
			<td>S346</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18 G Angiocath</td>
			<td>BD</td>
			<td>381144</td>
			<td>Used to de-air the left ventricle of the donor heart after implantation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 Fr LV vent</td>
			<td>Medtronic, Inc</td>
			<td>12002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-0 Silk sutures</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>SA11G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-0 Silk ties</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>SA65H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-0 Vicryl suture</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>J259H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 Fr venous cannula</td>
			<td>Medtronic, Inc</td>
			<td>68124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-0 Prolene sutures</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>8522</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 Monocryl suture</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>Y469G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 Prolene sutures</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>8521</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal hair cutting clipper</td>
			<td>Wahl</td>
			<td>8786-452</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aortic clamp</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH6201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Army Navy retractor</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>SU3660</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ATF 40, Cell saver disposable set</td>
			<td>Fresenius Kabi</td>
			<td>9108494</td>
			<td>Cell saver device insert</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Balfour retractor</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>SU3042</td>
			<td>Used as an abdominal wall retractor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C.A.T.S cell saver</td>
			<td>Fresenius Kabi</td>
			<td>ES0019</td>
			<td>Cell saver device used to wash donor blood</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cardiac defibrillator</td>
			<td>Zoll</td>
			<td>M Series</td>
			<td>Cardiac defibrillator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castro needle holder</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH8589</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CG4 iStat cartridges</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>03P85-25</td>
			<td>POC testing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CG8 iStat cartridges</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>03P88-25</td>
			<td>POC testing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DeBakey forceps</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH5902</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrocautery disposable pencil</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>E2450H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gerald forceps</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>NL1451</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemotherm 400CE Dual Reservoir Cooler/Heater</td>
			<td>Cincinnati Sub-Zero</td>
			<td>86022</td>
			<td>Heater cooler used to regulate perfusion temperature on the ex vivo perfusion device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iSTAT 1</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>04P75-03</td>
			<td>POC testing device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kocher clamp</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>SU2790</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large clip applier</td>
			<td>Sklar</td>
			<td>50-4300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large clips</td>
			<td>Teleflex</td>
			<td>4200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large soft pledgets</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>8886867901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium clip applier</td>
			<td>Sklar</td>
			<td>50-4335</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium clips</td>
			<td>Teleflex</td>
			<td>2200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum scissor</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH2006-001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>No. 10 scalpel blade</td>
			<td>Swann-Mortan</td>
			<td>301</td>
			<td>Used for skin incision</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>No. 11 scalpel blade</td>
			<td>Kiato Plus</td>
			<td>18111</td>
			<td>Used for vascular incision</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OCS device with base</td>
			<td>TransMedics, Inc.</td>
			<td></td>
			<td>Ex vivo perfusion device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OCS disposable</td>
			<td>TransMedics, Inc.</td>
			<td></td>
			<td>Ex vivo perfusion device insert with perfusion kits</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pacing cable</td>
			<td>Remington Medical</td>
			<td>FL-601-97</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pediatric cardioplegia catheter (4Fr)</td>
			<td>Medtronic, Inc</td>
			<td>10218</td>
			<td>Used to deliver cardioplegia to the donor aortic root</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pediatric Foley catheter</td>
			<td>Teleflex</td>
			<td>RSH170003080</td>
			<td>Placed pre-op to decompress the recipient&#39;s bladder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potts scissors</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH13038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pressure bag x2 (1,000 mL)</td>
			<td>Novaplus</td>
			<td>V4010H</td>
			<td>Used to deliver cardioplegia at a set pressure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Satinsky clamp</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH7305</td>
			<td>Vascular clamp used for creating anastomoses between donor heart and recipient vessels</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Felco</td>
			<td>FELCO 200A-50</td>
			<td>Used to perform sternotomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small hard pledgets</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>8886867701</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sternal retractor</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH6950-007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temporary cardiac pacing wires</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>TPW32</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temporary dual chamber pacemaker</td>
			<td>Medtronic, Inc</td>
			<td>5388</td>
			<td>Cardiac pacing device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tourniquet kit</td>
			<td>Medtronic, Inc</td>
			<td>79005</td>
			<td>Rummel tourniquets</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Umbilical tape</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>8886861903</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vessel loops</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>31145686</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a porcine heterotopic heart transplantation protocol for delivery of therapeutics to a cardiac allograft

कार्डियक प्रत्यारोपण अंत-चरण दिल की विफलता के लिए स्वर्ण मानक उपचार है। हालांकि, यह उपलब्ध दाता दिलों की संख्या और प्राथमिक ग्राफ्ट शिथिलता और ग्राफ्ट अस्वीकृति जैसी जटिलताओं से सीमित रहता है। कार्डियक प्रत्यारोपण में एक पूर्व विवो छिड़काव डिवाइस का हालिया नैदानिक उपयोग कार्य में सुधार और हानिकारक प्राप्तकर्ता प्रतिक्रियाओं से बचने के लिए चिकित्सीय हस्तक्षेप के साथ कार्डियक एलोग्राफ्ट के इलाज के लिए एक अनूठा अवसर पेश करता है। कार्डियक प्रत्यारोपण में उपन्यास चिकित्सीय दृष्टिकोण के परीक्षण के लिए पूरे एलोग्राफ्ट के लिए चिकित्सीय वितरण के लिए एक अनुवादक, बड़े-पशु मॉडल की स्थापना आवश्यक है। इंट्राबॉडॉमिनल स्थिति में पोर्सिन, हेटरोटोपिक हृदय प्रत्यारोपण मॉडल उपन्यास हस्तक्षेप के प्रभावों और ग्राफ्ट अस्वीकृति के इम्यूनोपैथोलॉजी का आकलन करने के लिए एक उत्कृष्ट मॉडल के रूप में कार्य करता है। यह मॉडल सुअर के लिए दीर्घकालिक अस्तित्व प्रदान करता है, यह देखते हुए कि प्राप्तकर्ता के परिसंचरण को बनाए रखने के लिए ग्राफ्ट की आवश्यकता नहीं है। इस प्रोटोकॉल का उद्देश्य प्रत्यारोपण से पहले पूरे कार्डियक एलोग्राफ्ट के लिए चिकित्सीय के पूर्व विवो वितरण को प्राप्त करने के लिए एक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य और मजबूत दृष्टिकोण प्रदान करना है और पूर्व विवो सुगंधित हृदय के अस्तित्व हेटरोटोपिक प्रत्यारोपण करने के लिए तकनीकी विवरण प्रदान करना है।

यह समूह अध्ययन डिजाइन के आधार पर यहां प्रस्तुत प्रोटोकॉल के बाद 5 से 35 दिनों के बीच 9 सूअरों से सफलतापूर्वक बच गया है। इस प्रोटोकॉल से गुजरने वाले 10 सूअरों में से केवल 1 शल्य चिकित्सा जटिलताओं से समय से पहल...

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A Porcine Heterotopic Heart Transplantation Protocol for Delivery of Therapeutics to a Cardiac Allograft

हम एक पोर्सिन हेटेरोटोपिक हृदय प्रत्यारोपण मॉडल में एक संपूर्ण कार्डियक एलोग्राफ्ट को चिकित्सीय के वितरण के लिए एक नॉर्मथर्मिक एक्स विवो सैंगुइनस छिड़काव प्रणाली का उपयोग करने के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं।

कार्डियक एलोग्राफ्ट को चिकित्सीय के वितरण के लिए एक पोर्सिन हेटरोटोपिक हृदय प्रत्यारोपण प्रोटोकॉल

Cardiac transplantation is the gold standard treatment for end-stage heart failure. However, it remains limited by the number of available donor hearts ...

यह प्रोटोकॉल यह वर्णन करने वाला पहला है कि कार्डियक प्रत्यारोपण के बड़े पशु मॉडल में पूरे कार्डियक एलोग्राफ्ट को चिकित्सीय रूप से कैसे प्रशासित किया जा सकता है। इस प्रोटोकॉल का मुख्य लाभ यह है कि यह जांचकर्ताओं को प्रत्यारोपण के बाद समय की विस्तारित अवधि में पूरे कार्डियक एलोग्राफ्ट पर चिकित्सीय के प्रभावों का परीक्षण करने की अनुमति देता है। इस तकनीक का उपयोग उन हस्तक्षेपों की जांच करने के लिए किया जा सकता है जो कार्डियक एलोग्राफ्ट अस्वीकृति, प्राथमिक ग्राफ्ट शिथिलता को रोकते हैं, पश्चात इम्यूनोसप्रेशन की आवश्यकता को कम करते हैं या कार्डियक एलोग्राफ्ट के जीवनकाल का विस्तार करते हैं।एक्सपोज़र को अनुकूलित करना प्रत्यारोपण प्रक्रिया का सबसे चुनौतीपूर्ण हिस्सा है और इसे पूरा करने के लिए कई टीम के सदस्यों की आवश्यकता होती है। इसी तरह, अनुभवी छिड़काववादियों को पूर्व विवो छिड़काव के समन्वय और निगरानी की आवश्यकता होती है। शुरू करने के लिए, सुअर के आकार के आधार पर, मैनुब्रियम से एक्सिफोइड तक संख्या 10 ब्लेड का उपयोग करके 20 से 30 सेंटीमीटर लंबा चीरा बनाएं।उरोस्थि की मध्य रेखा के साथ विभाजित करने के लिए सावधान रहने के कारण उरोस्थि से ज़िफोइड तक पेक्टोरलिस को विभाजित करने के लिए इलेक्ट्रोकॉटरी का उपयोग करें। एक बार उरोस्थि के नीचे, मिडलाइन स्कोर करें और भारी कैंची के साथ विभाजित करके एक्सिफोइड से स्टर्नोटॉमी शुरू करें। फिर प्रत्येक कट के बाद स्टर्नोटॉमी सेफलाड का विस्तार करें।उंगली के स्वीप का उपयोग करके उरोस्थि से दिल को स्पष्ट रूप से अलग करें और मैनुब्रियम के माध्यम से उरोस्थि को पूरा करें। एक स्टर्नल रिट्रैक्टर का उपयोग करके सर्जिकल फील्ड एक्सपोजर को अनुकूलित करने के बाद, डायाफ्राम से महाधमनी तक पेरिकार्डियम अनुदैर्ध्य रूप से प्रवेश करके और रेशम टांके का उपयोग करके पेरिकार्डियल पालना बनाकर इलेक्ट्रोकॉटरी के साथ थाइमस की पहचान करें और हटा दें। महाधमनी और फुफ्फुसीय धमनी के बीच ऊतक को पूरी तरह से विभाजित करें और महाधमनी क्रॉस क्लैंप के उचित प्लेसमेंट की सुविधा के लिए महाधमनी आर्क और ब्रैचीसेफेलिक ट्रंक के स्थान की कल्पना करें।कैंची और कुंद विच्छेदन का उपयोग करके, परिधीय रूप से बेहतर वेना कावा को मुक्त करें और बेहतर वेना कावा के चारों ओर शून्य आकार के दो रेशम टांके बांधें। यू-सिलाई तरीके से आरोही महाधमनी के लिए आकार 4-0 पॉलीप्रोपाइलीन सिवनी लागू करें और पर्स-स्ट्रिंग तरीके से दाएं आलिंद पर लागू करें। पहले रखे गए यू-सिलाई द्वारा सुरक्षित एक बाल चिकित्सा महाधमनी रूट प्रवेशनी डालें।और फिर प्रवेशनी को डी-एयर करने के बाद, एक रुमेल टूर्निकेट के साथ जगह में सुरक्षित। ट्यूबिंग डेल नीडो कार्डियोप्लेजिया के साथ फ्लश होने के बाद महाधमनी रूट प्रवेशनी को कार्डियोप्लेजिया ट्यूबिंग से कनेक्ट करें। पहले रखे गए पर्स-स्ट्रिंग के भीतर एक सही एट्रियोटॉमी बनाएं।दाहिने आलिंद में एक शिरापरक प्रवेशनी डालें और एक रुमेल टूर्निकेट के साथ सुरक्षित करें। शिरापरक प्रवेशनी को सेल सेवर कार्डियोटॉमी से जुड़ी बाँझ चूषण रेखा से कनेक्ट करें और लगभग 1 से 1.3 लीटर रक्त एकत्र करें। फिर महाधमनी क्रॉस क्लैंप लागू करें, ध्यान से सुनिश्चित करें कि क्लैंप पूरी तरह से आरोही महाधमनी को रोकता है।दिल पर बाँझ बर्फ कीचड़ रखने के बाद, अवर और बेहतर वेना कावा को अज़ीगोस नस के समीप विभाजित करें। मेहराब के स्तर पर महाधमनी सिर्फ निर्दोष धमनी और द्विभाजन पर मुख्य फुफ्फुसीय धमनी के लिए बाहर है। फुफ्फुसीय नसों को पहचानें और लिगेट करें, फिर छाती से दिल को हटा दें और इसे बाँझ बर्फ के साथ एक कंटेनर में रखें।महाधमनी कनेक्टर के प्लेसमेंट के लिए महाधमनी तैयार करने के लिए, कट किनारे के नीचे पांच मिलीमीटर की गहराई पर डिस्टल महाधमनी के अंदर एक साधारण क्षैतिज गद्दे फैशन में चार गिरवी आकार 4-0 पॉलीप्रोपाइलीन टांके रखें, और फिर उन्हें बांध दें। प्रतिज्ञा किए गए महाधमनी टांके को पकड़ते समय, महाधमनी कनेक्टर को महाधमनी में डालें और कनेक्टर को सुरक्षित करने के लिए महाधमनी के चारों ओर एक गर्भनाल टेप बांधें। मुख्य फुफ्फुसीय धमनी के डिस्टल कट किनारे के चारों ओर एक आकार 4-0 पॉलीप्रोपाइलीन पर्स-स्ट्रिंग रखें।फुफ्फुसीय धमनी प्रवेशनी डालें और प्रवेशनी को सुरक्षित करने के लिए पर्स-स्ट्रिंग के सिरों को बांधें। फिर डिवाइस पर फुफ्फुसीय धमनी कनेक्टर के लिए फुफ्फुसीय धमनी प्रवेशनी से कनेक्ट करें और इसे टाई के साथ सुरक्षित करें। तैयार ग्राफ्ट को पीछे की मेज से पूर्व विवो छिड़काव डिवाइस पर ले जाएं और महाधमनी कनेक्टर को डिवाइस स्थान से कनेक्ट करें।बाएं वेंट्रिकल वेंट बाएं आलिंद में और बाएं वेंट्रिकल में माइट्रल वाल्व के पार अनटाइड फुफ्फुसीय नस के माध्यम से निकलते हैं। संख्या 10 ब्लेड का उपयोग करके, 20 से 30 सेंटीमीटर लंबी त्वचा चीरा बनाएं और फिर इलेक्ट्रोकॉटरी का उपयोग करके प्रावरणी तक विच्छेदन जारी रखें। दो कोचर क्लैंप के साथ प्रावरणी और पेरिटोनियम को उठाने के बाद, ध्यान से मेटज़ेनबाम कैंची का उपयोग करके पेरिटोनियल गुहा में एक छोटा चीरा बनाएं।इलेक्ट्रोकॉटरी का उपयोग करके चीरा की पूरी लंबाई के लिए पेरिटोनियल उद्घाटन का विस्तार करें। अंतर्निहित विसरा की रक्षा के लिए नीचे एक उंगली रखना। एक्सपोजर को अनुकूलित करने के लिए एक बालफोर रिट्रैक्टर रखें और गीले तौलिया का उपयोग करके छोटे आंत्र को वापस ले लें।अवर वेना कावा में पेट की महाधमनी तक विच्छेदन ले जाएं, फिर मध्यम और बड़े क्लिप के साथ लसीका को लिगेट करें। पीछे की मेज पर, जब फुफ्फुसीय शिरा ने एट्रियोटॉमी छोड़ दिया जहां बाएं वेंट्रिकल वेंट्रिकल वेंट डाला गया था, महाधमनी और फुफ्फुसीय धमनी के डिस्टल पहलू को ट्रिम करें जहां प्रवेशनी से लगाव ऊतक को कुचल सकता है। अवर वेना कावा पर एक सैटिंस्की क्लैंप रखें और नंबर 11 ब्लेड और पॉट की कैंची का उपयोग करके लगभग 1.5 सेंटीमीटर मापने वाला एक अनुदैर्ध्य वेनोटॉमी बनाएं।एक रनिंग आकार 4-0 पॉलीप्रोपाइलीन सिवनी का उपयोग करके एंड-टू-साइड फैशन में प्राप्तकर्ता के इन्फ्रारेनल अवर वेना कावा के लिए फुफ्फुसीय धमनी ग्राफ्ट को एनास्टोमोस करें। फिर एक रनिंग आकार 4-0 पॉलीप्रोपाइलीन सिवनी का उपयोग करके एंड-टू-साइड फैशन में प्राप्तकर्ता के इन्फ्रारेनल महाधमनी में महाधमनी ग्राफ्ट को एनास्टोमोस करें। ध्यान से दिल को सही रेट्रोपरिटोनियल स्पेस में रखें, एनास्टोमोसिस और जहाजों के किंकिंग पर तनाव को रोकें।फिर छोटी आंत को बदलें। चीरा के दोनों सिरों से शुरू होने वाले और बीच में बांधने से शुरू होने वाले फैशन में लूप आकार शून्य मैक्सन सिवनी के साथ प्रावरणी को बंद करें, आंत्र को किसी भी चोट से बचें। एक चलने वाले फैशन में आकार 2-0 विक्रिल के साथ गहरी त्वचीय परत और एक चलने वाले फैशन में आकार 4-0 मोनोक्राइल के साथ त्वचा को बंद करें।कई अलग-अलग छिड़काव मापदंडों का अधिग्रहण किया गया था। फुफ्फुसीय धमनी, महाधमनी और कोरोनरी धमनियों से संचार प्रवाह दर को मापा गया था। औसत दबाव, सिस्टोलिक दबाव, डायस्टोलिक दबाव सहित महाधमनी दबाव को भी मापा गया था।पूर्व विवो छिड़काव के दौरान, हृदय गति और कार्डियक एलोग्राफ्ट का तापमान भी मापा गया था। छिड़काव अवधि के दौरान, मिश्रित शिरापरक ऑक्सीजन संतृप्ति और हेमटोक्रिट मूल्यों को इत्र से मापा गया था। सीटू 35 दिनों में इंट्राबडोमिनल हेटरोटोपिक दिल की व्यवहार्यता इस प्रोटोकॉल का उपयोग करके सफल प्रत्यारोपण का संकेत देती है।याद रखने वाली सबसे महत्वपूर्ण बात यह है कि एलोग्राफ्ट के लिए एक साइट का चयन करना है जो एनास्टोमोस के तनाव और किंकिंग की क्षमता को कम करता है। इस प्रक्रिया का पालन करके, अन्वेषक एलोग्राफ्ट के खिलाफ इम्यूनोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं पर उनके प्रभावों को निर्धारित करने के लिए कई अलग-अलग प्रकार के चिकित्सीय का परीक्षण करने में सक्षम होगा, साथ ही एलोग्राफ्ट पर चिकित्सीय प्रभाव की दीर्घायु निर्धारित करेगा। इस प्रोटोकॉल को विकसित करने के बाद, हमारा समूह जीन डिलीवरी के लिए विभिन्न वायरल वेक्टर वाहनों का परीक्षण करने में सक्षम है, साथ ही वायरल वैक्टर का उपयोग करके जीन डिलीवरी की अस्वीकृति और प्रभावकारिता के पैथोफिजियोलॉजी की समझ हासिल करने के लिए तीव्र एलोग्राफ अस्वीकृति के लिए एक मॉडल भी है।

Research

JoVE Journal

Medicine

A Modified Method for Heterotopic Mouse Heart Transplantion

Heterotopic माउस दिल Transplantion के लिए एक संशोधित विधि

Mice are often used as heart transplant donors and recipients in studies of transplant immunology due to the wide range of transgenic mice and reagents ...

Murine Heterotopic Heart Transplant Technique

Murine Heterotopic हृदय प्रत्यारोपण तकनीक

It is now over forty years since this technique was first reported by Corry, Wynn and Russell. Although it took some years for other labs to become ...

Transplantation of Pulmonary Valve Using a Mouse Model of Heterotopic Heart Transplantation

Heterotopic हृदय प्रत्यारोपण के एक माउस मॉडल का उपयोग पल्मोनरी वाल्व के प्रत्यारोपण

Tissue engineered heart valves, especially decellularized valves, are starting to gain momentum in clinical use of reconstructive surgery with mixed ...

Rat Heterotopic Abdominal Heart/Single-lung Transplantation in a Volume-loaded Configuration

चूहा Heterotopic पेट दिल / एक मात्रा से भरी हुई विन्यास में एकल फेफड़ों प्रत्यारोपण

Herein, we describe a novel technique for heterotopic abdominal heart-lung transplantation (HAHLT) in rats. The configuration of the transplant graft ...

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

चूहे में Heterotopic सरवाइकल हृदय प्रत्यारोपण

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...

Heterotopic Renal Autotransplantation in a Porcine Model: A Step-by-Step Protocol

एक सुअर मॉडल में Heterotopic गुर्दे स्वप्रतिरोपण: एक कदम दर कदम प्रोटोकॉल

Kidney transplantation is the treatment of choice for patients suffering from end-stage renal disease. It offers better life expectancy and higher quality ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

ऑर्थोटोपिक हार्ट ट्रांसप्लांटेशन का एक प्री-क्लिनिक पोर्सीन मॉडल

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

A Simplified Model for Heterotopic Heart Valve Transplantation in Rodents

कृन्तकों में हेटरोटोपिक हृदय वाल्व प्रत्यारोपण के लिए एक सरलीकृत मॉडल

There is an urgent clinical need for heart valve replacements that can grow in children. Heart valve transplantation is proposed as a new type of ...

Left Lung Orthotopic Transplantation in a Juvenile Porcine Model for ESLP

ईएसएलपी के लिए एक किशोर पोर्सिन मॉडल में बाएं फेफड़े ऑर्थोटोपिक प्रत्यारोपण

Lung transplantation is the gold-standard treatment for end-stage lung disease, with over 4,600 lung transplantations performed worldwide annually. ...

A Modified Cuff Technique for Mouse Cervical Heterotopic Heart Transplantation Model

माउस सर्वाइकल हेटेरोटोपिक हार्ट ट्रांसप्लांटेशन मॉडल के लिए एक संशोधित कफ तकनीक

Cardiac allograft rejection limits the long-term survival of patients after heart transplantation. A mouse heart transplantation model is ideal for ...