Name: a porcine heterotopic heart transplantation protocol for delivery of therapeutics to a cardiac allograft
Uploaded: 2022-02-14T14:30:00
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Vorremmo ringraziare Duke Large Animal Surgical Core e Duke Perfusion Services per la loro assistenza durante queste procedure. Vorremmo anche ringraziare Paul Lezberg e TransMedics, Inc. per il supporto.

NOTA: Vengono selezionate due femmine di suini dello Yucatan, con uno designato come donatore di innesto cardiaco e l'altro come ricevente. Si raccomandano suini di età compresa tra 6 e 8 mesi, di peso di circa 30 kg e con gruppi sanguigni compatibili. La panoramica del protocollo è illustrata nella Figura 1. L'alloggiamento e le procedure di trattamento per i suini vengono eseguiti in conformità con le linee guida del Comitato per la cura e l'uso degli animali del Duke University Medical...

<ol>
	<li>Virani, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+disease+and+stroke+statistics-2021+update:+A+report+from+the+American+Heart+Association.">Heart disease and stroke statistics-2021 update: A report from the American Heart Association.</a> Circulation. 143 (8), 254 (2021).</li><li>Stehlik, J., Kobashigawa, J., Hunt, S. A., Reichenspurner, H., Kirklin, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Honoring+50+years+of+clinical+heart+transplantation+in+circulation:+in-depth+state-of-the-art+review.">Honoring 50 years of clinical heart transplantation in circulation: in-depth state-of-the-art review.</a> Circulation. 137 (1), 71-87 (2018).</li><li>Kadner, A., Chen, R. H., Adams, D. 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S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+characterization+of+swine+leucocyte+antigen+class+II+genes+in+outbred+pig+populations.">Molecular characterization of swine leucocyte antigen class II genes in outbred pig populations.</a> Animal Genetics. 41 (4), 428-432 (2010).</li></ol>

La somministrazione di terapie durante la perfusione ex vivo nel trapianto cardiaco offre una strategia per modificare l'allotrapianto e potenzialmente migliorare i risultati del trapianto. Il protocollo qui presentato incorpora lo stoccaggio di perfusione sanguigna normotermica ex vivo all'avanguardia e offre un potenziale promettente per testare la consegna isolata di cellule, geni o immunoterapie all'allotrapianto 11,12,13.<sup cla...

L'insufficienza cardiaca è una condizione che colpisce circa 6 milioni di adulti negli Stati Uniti e si prevede che aumenterà a 8 milioni di adulti entro l'anno 20301. Il trapianto cardiaco è il trattamento gold standard per l'insufficienza cardiaca allo stadio terminale. Tuttavia, non è privo di limiti e complicazioni. Rimane limitato dal numero di cuori donatori disponibili, dalla disfunzione primaria dell'innesto, dal rigetto del cuore e dagli effetti collaterali dell'immunosoppressione a lungo termine2. Queste limitazioni sono particolarmente importanti nei giovani riceventi che possono sperimentare il fallimento dell'allotrapianto e richiedono un successivo ripropianto per raggiungere la normale aspettativa di vita.
Un intervento ideale per superare queste limitazioni tratterebbe interi alloinnesti cardiaci con terapie prima dell'impianto nel ricevente che possono migliorare la vitalità dell'alloinnesto e conferire "cardioprotezione". Tali interventi sarebbero somministrati in modo profilattico per ridurre al minimo l'incidenza di insulti ischemici, rigetto dell'allotrapianto, vasculopatia dell'allotrapianto cardiaco e persino riparare alloinnesti marginali. Gli studi traslazionali per lo sviluppo di questi tipi di interventi richiedono un modello animale di trapianto cardiaco di grandi dimensioni per consentire la sorveglianza a lungo termine dell'innesto cardiaco. Il modello di trapianto di cuore sucino ed eterotopico in posizione intraaddominale si è dimostrato ideale per questo scopo. Il trapianto di cuore in questa posizione consente di testare gli effetti di nuove terapie e valutare l'immunopatologia del rigetto del trapianto. Inoltre, il modello eterotopico è vantaggioso rispetto al modello ortotopico a causa della migliore sopravvivenza globale del ricevente, nessun requisito per il bypass cardiopolmonare e nessun requisito dell'innesto per mantenere la circolazione del ricevente3.
L'erogazione efficace di interventi terapeutici al cuore, come la terapia genica, cellulare o immuno-terapeutica, è una barriera significativa all'applicazione clinica 4,5. La tecnologia introdotta dai dispositivi di perfusione ex vivo consente di perfusare continuamente gli innesti, mantenendoli in uno stato non funzionante ma metabolicamente attivo 6,7,8,9. Ciò offre un'opportunità unica per trattare un intero cuore con terapie avanzate riducendo al minimo i potenziali effetti collaterali del parto sistemico 10,11,12,13. Un altro vantaggio dell'utilizzo di dispositivi di perfusione ex vivo per la somministrazione terapeutica è che consentono la somministrazione di farmaci alla circolazione coronarica per periodi prolungati che non sono fattibili utilizzando i tradizionali metodi di conservazione statica a freddo. Ciò consente una consegna più globale delle terapie all'innesto14. Utilizzando il protocollo qui presentato, abbiamo consegnato con successo il gene della lucciola luciferasi a un intero innesto cardiaco suino utilizzando vettori adenovirali15. Lo scopo di questo protocollo è quello di fornire un approccio riproducibile e robusto per ottenere la consegna di un impianto terapeutico all'intero allotrapianto cardiaco prima del trapianto.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0 Looped Maxon suture</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>GMM-341L</td>
			<td>Used to close fascia of the laparotomy incision</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0 Silk ties</td>
			<td>Medtronic, Inc</td>
			<td>S346</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18 G Angiocath</td>
			<td>BD</td>
			<td>381144</td>
			<td>Used to de-air the left ventricle of the donor heart after implantation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 Fr LV vent</td>
			<td>Medtronic, Inc</td>
			<td>12002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-0 Silk sutures</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>SA11G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-0 Silk ties</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>SA65H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-0 Vicryl suture</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>J259H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 Fr venous cannula</td>
			<td>Medtronic, Inc</td>
			<td>68124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-0 Prolene sutures</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>8522</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 Monocryl suture</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>Y469G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 Prolene sutures</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>8521</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal hair cutting clipper</td>
			<td>Wahl</td>
			<td>8786-452</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aortic clamp</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH6201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Army Navy retractor</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>SU3660</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ATF 40, Cell saver disposable set</td>
			<td>Fresenius Kabi</td>
			<td>9108494</td>
			<td>Cell saver device insert</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Balfour retractor</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>SU3042</td>
			<td>Used as an abdominal wall retractor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C.A.T.S cell saver</td>
			<td>Fresenius Kabi</td>
			<td>ES0019</td>
			<td>Cell saver device used to wash donor blood</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cardiac defibrillator</td>
			<td>Zoll</td>
			<td>M Series</td>
			<td>Cardiac defibrillator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castro needle holder</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH8589</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CG4 iStat cartridges</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>03P85-25</td>
			<td>POC testing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CG8 iStat cartridges</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>03P88-25</td>
			<td>POC testing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DeBakey forceps</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH5902</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrocautery disposable pencil</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>E2450H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gerald forceps</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>NL1451</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemotherm 400CE Dual Reservoir Cooler/Heater</td>
			<td>Cincinnati Sub-Zero</td>
			<td>86022</td>
			<td>Heater cooler used to regulate perfusion temperature on the ex vivo perfusion device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iSTAT 1</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>04P75-03</td>
			<td>POC testing device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kocher clamp</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>SU2790</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large clip applier</td>
			<td>Sklar</td>
			<td>50-4300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large clips</td>
			<td>Teleflex</td>
			<td>4200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large soft pledgets</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>8886867901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium clip applier</td>
			<td>Sklar</td>
			<td>50-4335</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium clips</td>
			<td>Teleflex</td>
			<td>2200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum scissor</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH2006-001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>No. 10 scalpel blade</td>
			<td>Swann-Mortan</td>
			<td>301</td>
			<td>Used for skin incision</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>No. 11 scalpel blade</td>
			<td>Kiato Plus</td>
			<td>18111</td>
			<td>Used for vascular incision</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OCS device with base</td>
			<td>TransMedics, Inc.</td>
			<td></td>
			<td>Ex vivo perfusion device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OCS disposable</td>
			<td>TransMedics, Inc.</td>
			<td></td>
			<td>Ex vivo perfusion device insert with perfusion kits</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pacing cable</td>
			<td>Remington Medical</td>
			<td>FL-601-97</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pediatric cardioplegia catheter (4Fr)</td>
			<td>Medtronic, Inc</td>
			<td>10218</td>
			<td>Used to deliver cardioplegia to the donor aortic root</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pediatric Foley catheter</td>
			<td>Teleflex</td>
			<td>RSH170003080</td>
			<td>Placed pre-op to decompress the recipient&#39;s bladder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potts scissors</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH13038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pressure bag x2 (1,000 mL)</td>
			<td>Novaplus</td>
			<td>V4010H</td>
			<td>Used to deliver cardioplegia at a set pressure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Satinsky clamp</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH7305</td>
			<td>Vascular clamp used for creating anastomoses between donor heart and recipient vessels</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Felco</td>
			<td>FELCO 200A-50</td>
			<td>Used to perform sternotomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small hard pledgets</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>8886867701</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sternal retractor</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH6950-007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temporary cardiac pacing wires</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>TPW32</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temporary dual chamber pacemaker</td>
			<td>Medtronic, Inc</td>
			<td>5388</td>
			<td>Cardiac pacing device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tourniquet kit</td>
			<td>Medtronic, Inc</td>
			<td>79005</td>
			<td>Rummel tourniquets</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Umbilical tape</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>8886861903</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vessel loops</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>31145686</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a porcine heterotopic heart transplantation protocol for delivery of therapeutics to a cardiac allograft

Il trapianto cardiaco è il trattamento gold standard per l'insufficienza cardiaca allo stadio terminale. Tuttavia, rimane limitato dal numero di cuori donatori disponibili e complicazioni come la disfunzione primaria dell'innesto e il rigetto dell'innesto. Il recente uso clinico di un dispositivo di perfusione ex vivo nel trapianto cardiaco introduce un'opportunità unica per il trattamento di alloinnesti cardiaci con interventi terapeutici per migliorare la funzione ed evitare risposte deleterie del ricevente. Stabilire un modello traslazionale di grandi animali per la somministrazione terapeutica all'intero allotrapianto è essenziale per testare nuovi approcci terapeutici nel trapianto cardiaco. Il modello di trapianto di cuore sucino ed eterotopico in posizione intraaddominale funge da modello eccellente per valutare gli effetti di nuovi interventi e l'immunopatologia del rigetto del trapianto. Questo modello offre inoltre una sopravvivenza a lungo termine per il maiale, dato che l'innesto non è necessario per mantenere la circolazione del ricevente. Lo scopo di questo protocollo è quello di fornire un approccio riproducibile e robusto per ottenere la consegna ex vivo di un allotrapianto terapeutico all'intero allotrapianto cardiaco prima del trapianto e fornire dettagli tecnici per eseguire un trapianto eterotopico di sopravvivenza del cuore perfuso ex vivo .

Questo gruppo è sopravvissuto con successo a 9 maiali tra 5 e 35 giorni dopo il protocollo presentato qui, a seconda del disegno dello studio. Su 10 suini che hanno subito questo protocollo, solo 1 è morto prematuramente per complicazioni chirurgiche, producendo un tasso di sopravvivenza del 90%. Dimostrato nella Figura 2 è un diagramma della configurazione di un cuore eterotopico trapiantato in posizione intraaddominale in un maiale. Quando si determina il sito per l'anastomosi dell'allo...

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A Porcine Heterotopic Heart Transplantation Protocol for Delivery of Therapeutics to a Cardiac Allograft

Presentiamo un protocollo per l'utilizzo di un sistema di perfusione sanguigna normotermica ex vivo per la somministrazione di terapie a un intero allotrapianto cardiaco in un modello di trapianto di cuore eterotopico suino.

Un protocollo di trapianto di cuore eterotopico suino per la somministrazione di terapie a un allotrapianto cardiaco

Cardiac transplantation is the gold standard treatment for end-stage heart failure. However, it remains limited by the number of available donor hearts ...

Questo protocollo è il primo a descrivere come le terapie possono essere efficacemente somministrate a un intero allotrapianto cardiaco nel grande modello animale di trapianto cardiaco. Il vantaggio principale di questo protocollo è che consente ai ricercatori di testare gli effetti di una terapia su un intero allotrapianto cardiaco per lunghi periodi di tempo dopo il trapianto. Questa tecnica può essere utilizzata per studiare interventi che prevengono il rigetto dell'allotrapianto cardiaco, la disfunzione primaria dell'innesto, riducono al minimo la necessità di immunosoppressione postoperatoria o prolungano la durata di un allotrapianto cardiaco.L'ottimizzazione dell'esposizione è la parte più impegnativa della procedura di trapianto e richiede il completamento di più membri del team. Allo stesso modo, sono necessari perfusionisti esperti per coordinare e monitorare la perfusione ex vivo. Per iniziare, fai un'incisione lunga da 20 a 30 centimetri usando la lama numero 10 dal manubrio fino allo xifoide, a seconda delle dimensioni del maiale.Utilizzare l'elettrocauterizzazione per dividere il pettorale maggiore dallo sterno allo xifoide facendo attenzione a dividere lungo la linea mediana dello sterno. Una volta scesi allo sterno, segna la linea mediana e inizia la sternotomia dallo xifoide dividendolo con forbici pesanti. Quindi estendere la sternotomia cefalade dopo ogni taglio.Separare senza mezzi termini il cuore dallo sterno usando le spazzate delle dita e completare la sternotomia attraverso il manubrio. Dopo aver ottimizzato l'esposizione al campo chirurgico utilizzando un divaricatore sternale, identificare e rimuovere il timo con elettrocauterizzazione inserendo longitudinalmente il pericardio dal diaframma all'aorta e creando una culla pericardica utilizzando suture di seta. Dividere completamente il tessuto tra l'aorta e l'arteria polmonare e visualizzare la posizione dell'arco aortico e del tronco brachicefalo per facilitare il corretto posizionamento del morsetto incrociato aortico.Usando le forbici e la dissezione smussata, liberare circonferenzialmente la vena cava superiore e legare due suture di seta di taglia zero attorno alla vena cava superiore. Applicare la sutura in polipropilene taglia 4-0 all'aorta ascendente in modo A U e all'atrio destro in modo a cordone di borsa. Inserire una cannula della radice aortica pediatrica fissata dal punto U precedentemente posizionato.E poi dopo aver de-airato la cannula, fissare in posizione con un laccio emostatico Rummel. Collegare la cannula della radice aortica al tubo cardioplegico dopo che il tubo è stato lavato con cardioplegia del Nido. Create un'atriotomia destra all'interno della stringa di borsa posizionata in precedenza.Inserire una cannula venosa nell'atrio destro e fissarla con un laccio emostatico Rummel. Collegare la cannula venosa a una linea di aspirazione sterile collegata alla cardiotomia del risparmiatore cellulare e raccogliere circa 1-1,3 litri di sangue. Quindi applicare il morsetto a croce aortica, assicurandosi attentamente che il morsetto occluda completamente l'aorta ascendente.Dopo aver posizionato la granita di ghiaccio sterile sul cuore, dividere la vena cava inferiore e superiore appena prossimale alla vena azygos. L'aorta a livello dell'arco appena distale all'arteria innominata e l'arteria polmonare principale alla biforcazione. Identificare e ligare le vene polmonari, quindi rimuovere il cuore dal torace e metterlo in un contenitore con ghiaccio sterile.Per preparare l'aorta per il posizionamento del connettore aortico, posizionare quattro suture in polipropilene 4-0 di dimensioni impegnate in un semplice materasso orizzontale attorno all'interno dell'aorta distale a una profondità di cinque millimetri sotto il bordo tagliato, quindi legarle. Mentre si sollevano le suture aortiche impegnate, inserire il connettore aortico nell'aorta e legare un nastro ombelicale attorno all'aorta per fissare il connettore. Posizionare una stringa di borsa in polipropilene di dimensioni 4-0 attorno al bordo tagliato distale dell'arteria polmonare principale.Inserire la cannula dell'arteria polmonare e legare le estremità del cordoncino per fissare la cannula. Quindi collegare alla cannula dell'arteria polmonare al connettore dell'arteria polmonare sul dispositivo e fissarlo con la cravatta. Portare l'innesto preparato dal tavolo posteriore al dispositivo di perfusione ex vivo e collegare il connettore aortico al posto del dispositivo.Lo sfiato del ventricolo sinistro drena attraverso la vena polmonare slegata nell'atrio sinistro e attraverso la valvola mitrale nel ventricolo sinistro. Usando la lama numero 10, fai un'incisione cutanea lunga da 20 a 30 centimetri e poi continua la dissezione fino alla fascia usando l'elettrocauterizzazione. Dopo aver sollevato la fascia e il peritoneo con due morsetti Kocher, fare con attenzione una piccola incisione nella cavità peritoneale usando le forbici Metzenbaum.Estendere l'apertura peritoneale per l'intera lunghezza dell'incisione utilizzando l'elettrocauterizzazione. Posizionare un dito sotto per proteggere i visceri sottostanti. Posizionare un divaricatore Balfour per ottimizzare l'esposizione e ritrarre l'intestino tenue cranicamente usando un asciugamano bagnato.Portare la dissezione fino all'aorta addominale nella vena cava inferiore, quindi ligare i linfatici con clip medie e grandi. Sul tavolo posteriore, quando l'atriotomia sinistra della vena polmonare in cui era stata inserita la bocca del ventricolo ventricolo sinistro è sovraspesata, tagliare l'aspetto distale dell'aorta e dell'arteria polmonare in cui l'attaccamento alle cannule potrebbe aver schiacciato il tessuto. Posizionare un morsetto Satinsky sulla vena cava inferiore e creare una venotomia longitudinale di circa 1,5 centimetri utilizzando la lama numero 11 e le forbici di Pott.Anastomosi l'innesto dell'arteria polmonare alla vena cava inferiore infrarenale del ricevente in modo end-to-side utilizzando una sutura in polipropilene di dimensioni correnti 4-0. Quindi anastomosizzare l'innesto di aorta nell'aorta infrarenale del ricevente in modo end-to-side utilizzando una sutura in polipropilene di dimensioni correnti 4-0. Posizionare con attenzione il cuore nello spazio retroperitoneale destro, prevenendo la tensione sull'anastomosi e l'attorcigliamento dei vasi.Quindi sostituire l'intestino tenue. Chiudere la fascia con loop dimensione zero sutura Maxon in modo lineare partendo da entrambe le estremità dell'incisione e legando nel mezzo, evitando qualsiasi lesione all'intestino. Chiudere lo strato dermico profondo con la taglia 2-0 Vicryl in modo lineare e la pelle con la taglia 4-0 Monocryl in modo da corsa.Sono stati acquisiti diversi parametri di perfusione. Le portate circolatorie sono state misurate dall'arteria polmonare, dall'aorta e dalle arterie coronarie. Sono state misurate anche la pressione aortica, compresa la pressione media, la pressione sistolica, la pressione diastolica.Durante la perfusione ex vivo, sono state misurate anche la frequenza cardiaca e la temperatura dell'allotrapianto cardiaco. Durante il periodo di perfusione, la saturazione mista di ossigeno venoso e i valori di ematocrito sono stati misurati dal perfusato. La vitalità del cuore eterotopico intrabdominale in situ 35 giorni indica il successo del trapianto utilizzando questo protocollo.La cosa più importante da ricordare è selezionare un sito per l'allotrapianto che riduca al minimo il potenziale di tensione e attorcigliamento delle anastomosi. Seguendo questa procedura, lo sperimentatore sarà in grado di testare diversi tipi di terapie per determinare i loro effetti sulle risposte immunologiche contro l'allotrapianto, nonché determinare la longevità di un effetto terapeutico sull'alloinnesto. Dopo aver sviluppato questo protocollo, il nostro gruppo è stato in grado di testare diversi veicoli vettoriali virali per la consegna genica, nonché un modello per il rigetto acuto dell'allografo per acquisire una comprensione della fisiopatologia del rigetto e dell'efficacia della consegna genica utilizzando vettori virali.

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