Name: a porcine heterotopic heart transplantation protocol for delivery of therapeutics to a cardiac allograft
Uploaded: 2022-02-14T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Porcine Heterotopic Heart Transplantation Protocol for Delivery of Therapeutics to a Cardiac Allograft at JoVE.com

우리는 듀크 대형 동물 외과 코어와 듀크 관류 서비스 (Duke Perfusion Services)가 이러한 과정에서 도움을 주신 것에 대해 감사드립니다. 또한 Paul Lezberg와 TransMedics, Inc.의 지원에 감사드립니다.

참고 : 두 마리의 암컷 유카탄 돼지가 선택되며, 하나는 심장 이식 기증자로 지정되고 다른 하나는 수령인으로 지정됩니다. 6-8 개월 된 돼지는 체중이 약 30kg이며 호환 가능한 혈액형을 갖는 것이 좋습니다. 프로토콜의 개요는 그림 1에 나와 있습니다. 돼지의 주거 및 치료 절차는 듀크 대학 의료 센터의 동물 관리 및 사용위원회의 지침에 따라 수행됩니다.
<p class="jove_title"...

<ol>
	<li>Virani, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+disease+and+stroke+statistics-2021+update:+A+report+from+the+American+Heart+Association.">Heart disease and stroke statistics-2021 update: A report from the American Heart Association.</a> Circulation. 143 (8), 254 (2021).</li><li>Stehlik, J., Kobashigawa, J., Hunt, S. A., Reichenspurner, H., Kirklin, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Honoring+50+years+of+clinical+heart+transplantation+in+circulation:+in-depth+state-of-the-art+review.">Honoring 50 years of clinical heart transplantation in circulation: in-depth state-of-the-art review.</a> Circulation. 137 (1), 71-87 (2018).</li><li>Kadner, A., Chen, R. H., Adams, D. 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K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+therapy+for+cardiovascular+disease:+advances+in+vector+development,+targeting,+and+delivery+for+clinical+translation.">Gene therapy for cardiovascular disease: advances in vector development, targeting, and delivery for clinical translation.</a> Cardiovascular Research. 108 (1), 4-20 (2015).</li><li>Kieserman, J. M., Myers, V. D., Dubey, P., Cheung, J. Y., Feldman, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+landscape+of+heart+failure+gene+therapy.">Current landscape of heart failure gene therapy.</a> Journal of the American Heart Association. 8 (10), 012239 (2019).</li><li>Perin, E. C., Perin, E. C., Miller, L. W., Taylor, D. A., Wilkerson, J. 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J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+therapy+for+the+treatment+of+heart+failure:+promise+postponed.">Gene therapy for the treatment of heart failure: promise postponed.</a> European Heart Journal. 37 (21), 1651-1658 (2016).</li><li>Ho, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+characterization+of+swine+leucocyte+antigen+class+I+genes+in+outbred+pig+populations.">Molecular characterization of swine leucocyte antigen class I genes in outbred pig populations.</a> Animal Genetics. 40 (4), 468-478 (2009).</li><li>Ho, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+characterization+of+swine+leucocyte+antigen+class+II+genes+in+outbred+pig+populations.">Molecular characterization of swine leucocyte antigen class II genes in outbred pig populations.</a> Animal Genetics. 41 (4), 428-432 (2010).</li></ol>

심장 이식에서 생체외 관류 동안 치료제의 전달은 동종이식편을 수정하고 잠재적으로 이식 결과를 개선시키는 전략을 제공한다. 여기에 제시된 프로토콜은 최첨단 normothermic ex vivo sanguinous perfusion 저장소를 통합하고 동종 이식편11,12,13에 대한 세포, 유전자 또는 면역 요법의 분리 된 전달을 테스트 할 수있는 유망한 잠재?...

심부전은 미국에서 약 6 백만 명의 성인에게 영향을 미치는 상태이며 2030 년까지 8 백만 명의 성인으로 증가 할 것으로 예상됩니다1. 심장 이식은 말기 심부전의 황금 표준 치료법입니다. 그러나 한계와 합병증이없는 것은 아닙니다. 이용 가능한 공여자 심장의 수, 원발성 이식편 기능 장애, 심장의 거부, 및 장기 면역 억제의 부작용2에 의해 제한된다. 이러한 한계는 동종 이식 실패를 경험할 수 있고 정상적인 기대 수명을 달성하기 위해 후속 재 이식이 필요한 젊은 수혜자에게 특히 중요합니다.
이러한 한계를 극복하기위한 이상적인 개입은 동종 이식편의 생존력을 향상시키고 "심장 보호"를 부여 할 수있는 수용자에게 이식하기 전에 전체 심장 동종 이식편을 치료제로 치료할 것입니다. 이러한 개입은 허혈성 모욕, 동종 이식편 거부, 심장 동종 이식편 혈관병증의 발생을 최소화하고 심지어 한계 동종 이식편을 복구하기 위해 예방적으로 주어질 것입니다. 이러한 유형의 중재를 개발하기위한 번역 연구는 심장 이식의 장기 감시를 허용하기 위해 심장 이식의 대규모 동물 모델을 필요로합니다. 복강내 위치에서의 돼지, 이질적 심장 이식 모델은 이러한 목적에 이상적인 것으로 입증되었다. 이 위치에서의 심장 이식은 새로운 치료법의 효과를 테스트하고 이식편 거부의 면역 병리학을 평가할 수있게합니다. 추가적으로, 헤테로토픽 모델은 수용자의 더 나은 전체 생존, 심폐 우회에 대한 요구가 없고, 수용자의 순환을 유지하기 위한 이식편의 요건이 없기 때문에 동위원소 모델에 비해 유리하다3.
유전자, 세포, 또는 면역요법과 같은 심장에 대한 치료적 개입의 효과적인 전달은 임상 적용에 대한 상당한 장벽이다4,5. 생체외 관류 장치에 의해 도입된 기술은 이식편이 지속적으로 관류될 수 있게 하여, 비작동하지만 대사적으로 활성인 상태(6,7,8,9)로 유지한다. 이것은 전신 전달10,11,12,13의 잠재적 인 부작용을 최소화하면서 고급 치료제로 전심을 치료할 수있는 독특한 기회를 제공합니다. 치료 전달을 위해 생체외 관류 장치를 활용하는 또 다른 이점은 이들이 전통적인 냉정전기 저장 방법을 사용하여 실현 가능하지 않은 장기간에 걸쳐 관상동맥 순환에 약물을 투여할 수 있다는 것이다. 이것은 이식편(14)에 대한 치료제의 보다 전세계적인 전달을 허용한다. 여기에 제시된 프로토콜을 사용하여, 우리는 아데노바이러스 벡터15를 사용하여 반딧불이 루시퍼라제 유전자를 전체 돼지 심장 이식편에 성공적으로 전달하였다. 이 프로토콜의 목적은 이식 전에 전체 심장 동종이식편에 대한 치료의 전달을 달성하기 위한 재현 가능하고 강력한 접근법을 제공하는 것이다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0 Looped Maxon suture</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>GMM-341L</td>
			<td>Used to close fascia of the laparotomy incision</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0 Silk ties</td>
			<td>Medtronic, Inc</td>
			<td>S346</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18 G Angiocath</td>
			<td>BD</td>
			<td>381144</td>
			<td>Used to de-air the left ventricle of the donor heart after implantation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 Fr LV vent</td>
			<td>Medtronic, Inc</td>
			<td>12002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-0 Silk sutures</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>SA11G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-0 Silk ties</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>SA65H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-0 Vicryl suture</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>J259H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24 Fr venous cannula</td>
			<td>Medtronic, Inc</td>
			<td>68124</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3-0 Prolene sutures</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>8522</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 Monocryl suture</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>Y469G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 Prolene sutures</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>8521</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal hair cutting clipper</td>
			<td>Wahl</td>
			<td>8786-452</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aortic clamp</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH6201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Army Navy retractor</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>SU3660</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ATF 40, Cell saver disposable set</td>
			<td>Fresenius Kabi</td>
			<td>9108494</td>
			<td>Cell saver device insert</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Balfour retractor</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>SU3042</td>
			<td>Used as an abdominal wall retractor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C.A.T.S cell saver</td>
			<td>Fresenius Kabi</td>
			<td>ES0019</td>
			<td>Cell saver device used to wash donor blood</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cardiac defibrillator</td>
			<td>Zoll</td>
			<td>M Series</td>
			<td>Cardiac defibrillator</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castro needle holder</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH8589</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CG4 iStat cartridges</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>03P85-25</td>
			<td>POC testing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CG8 iStat cartridges</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>03P88-25</td>
			<td>POC testing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DeBakey forceps</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH5902</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrocautery disposable pencil</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>E2450H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gerald forceps</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>NL1451</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemotherm 400CE Dual Reservoir Cooler/Heater</td>
			<td>Cincinnati Sub-Zero</td>
			<td>86022</td>
			<td>Heater cooler used to regulate perfusion temperature on the ex vivo perfusion device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>iSTAT 1</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>04P75-03</td>
			<td>POC testing device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kocher clamp</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>SU2790</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large clip applier</td>
			<td>Sklar</td>
			<td>50-4300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large clips</td>
			<td>Teleflex</td>
			<td>4200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large soft pledgets</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>8886867901</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium clip applier</td>
			<td>Sklar</td>
			<td>50-4335</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium clips</td>
			<td>Teleflex</td>
			<td>2200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum scissor</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH2006-001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>No. 10 scalpel blade</td>
			<td>Swann-Mortan</td>
			<td>301</td>
			<td>Used for skin incision</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>No. 11 scalpel blade</td>
			<td>Kiato Plus</td>
			<td>18111</td>
			<td>Used for vascular incision</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OCS device with base</td>
			<td>TransMedics, Inc.</td>
			<td></td>
			<td>Ex vivo perfusion device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OCS disposable</td>
			<td>TransMedics, Inc.</td>
			<td></td>
			<td>Ex vivo perfusion device insert with perfusion kits</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pacing cable</td>
			<td>Remington Medical</td>
			<td>FL-601-97</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pediatric cardioplegia catheter (4Fr)</td>
			<td>Medtronic, Inc</td>
			<td>10218</td>
			<td>Used to deliver cardioplegia to the donor aortic root</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pediatric Foley catheter</td>
			<td>Teleflex</td>
			<td>RSH170003080</td>
			<td>Placed pre-op to decompress the recipient&#39;s bladder</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potts scissors</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH13038</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pressure bag x2 (1,000 mL)</td>
			<td>Novaplus</td>
			<td>V4010H</td>
			<td>Used to deliver cardioplegia at a set pressure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Satinsky clamp</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH7305</td>
			<td>Vascular clamp used for creating anastomoses between donor heart and recipient vessels</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Felco</td>
			<td>FELCO 200A-50</td>
			<td>Used to perform sternotomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small hard pledgets</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>8886867701</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sternal retractor</td>
			<td>V. Mueller</td>
			<td>CH6950-007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temporary cardiac pacing wires</td>
			<td>Ethicon, Inc.</td>
			<td>TPW32</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temporary dual chamber pacemaker</td>
			<td>Medtronic, Inc</td>
			<td>5388</td>
			<td>Cardiac pacing device</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tourniquet kit</td>
			<td>Medtronic, Inc</td>
			<td>79005</td>
			<td>Rummel tourniquets</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Umbilical tape</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>8886861903</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vessel loops</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>31145686</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a porcine heterotopic heart transplantation protocol for delivery of therapeutics to a cardiac allograft

심장 이식은 말기 심부전의 황금 표준 치료법입니다. 그러나, 이용가능한 공여자 심장의 수 및 원발성 이식편 기능장애 및 이식편 거부와 같은 합병증에 의해 제한되는 채로 남아있다. 심장 이식에서 생체외 관류 장치의 최근 임상 사용은 기능을 향상시키고 해로운 수용자 반응을 피하기 위해 치료 적 개입으로 심장 동종 이식편을 치료할 수있는 독특한 기회를 제공합니다. 전체 동종이식편에 대한 치료적 전달을 위한 번역적, 대규모의 동물 모델을 확립하는 것은 심장 이식에서 새로운 치료 접근법을 시험하는 데 필수적이다. 복강 내 위치에서의 돼지, 이질적 심장 이식 모델은 이식편 거부의 새로운 개입 및 면역병리학의 효과를 평가하기 위한 우수한 모델로서 작용한다. 이 모델은 또한 이식편이 수용자의 순환을 유지할 필요가 없다는 점을 감안할 때 돼지에게 장기간 생존을 제공합니다. 이 프로토콜의 목적은 이식 전에 전체 심장 동종이식편에 대한 치료학의 생체외 전달을 달성하기 위한 재현 가능하고 강력한 접근법을 제공하고, 생체외 관류 심장의 생존 이종물질 이식을 수행하기 위한 기술적 세부사항을 제공하는 것이다.

이 그룹은 연구 설계에 따라 여기에 제시된 프로토콜 이후 5 일에서 35 일 사이에 9 마리의 돼지를 성공적으로 생존했습니다. 이 프로토콜을 시행 한 10 마리의 돼지 중 1 마리 만이 수술 합병증으로 조기에 사망하여 90 %의 생존율을 보였습니다. 도 2 에서 입증된 것은 돼지에서 복강내 위치에 이식된 이종이소 심장의 구성을 나타낸 도면이다. 동종 이식편의 해부학 부위를 결정...

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A Porcine Heterotopic Heart Transplantation Protocol for Delivery of Therapeutics to a Cardiac Allograft

우리는 돼지 이종성 심장 이식 모델에서 전체 심장 동종이식편에 치료제를 전달하기 위한 규범발열 ex vivo sanguinous perfusion system을 활용하기 위한 프로토콜을 제시한다.

심장 동종이식편에 치료제를 전달하기 위한 돼지 이질성 심장 이식 프로토콜

Cardiac transplantation is the gold standard treatment for end-stage heart failure. However, it remains limited by the number of available donor hearts ...

이 프로토콜은 심장 이식의 대형 동물 모델에서 치료제가 전체 심장 동종이식편에 효과적으로 투여될 수 있는 방법을 설명하는 최초의 프로토콜이다. 이 프로토콜의 가장 큰 장점은 연구자가 이식 후 장기간에 걸쳐 전체 심장 동종 이식편에 대한 치료의 효과를 테스트 할 수 있다는 것입니다. 이 기술은 심장 동종이식편 거부반응, 원발성 이식편 기능장애를 예방하고, 수술 후 면역억제의 필요성을 최소화하거나, 심장 동종이식편의 수명을 연장시키는 중재를 조사하는 데 사용될 수 있다.노출을 최적화하는 것은 이식 절차에서 가장 어려운 부분이며 여러 팀 구성원이 완료해야합니다. 마찬가지로, 경험있는 관류 학자들은 생체 외 관류를 조정하고 모니터링하기 위해 필요합니다. 시작하려면 돼지의 크기에 따라 제조소에서 xiphoid까지 10 개의 블레이드를 사용하여 20 ~ 30cm 길이의 절개를하십시오.전기 소작술을 사용하여 흉골에서 xiphoid로 주요 가슴을 나누고 흉골의 중간 선을 따라 나뉘어지도록주의하십시오. 일단 흉골까지 내려 가면 중간 선을 채점하고 무거운 가위로 나누어 xiphoid에서 흉골 절제술을 시작하십시오. 그런 다음 각 절단 후 흉골 절제술 두개골을 연장하십시오.손가락 스윕을 사용하여 흉골에서 심장을 무뚝뚝하게 분리하고 manubrium을 통해 흉골 절제술을 완료하십시오. 흉골 리트랙터를 사용하여 수술 현장 노출을 최적화한 후, 횡격막에서 대동맥까지 세로 심낭을 입력하고 실크 봉합사를 사용하여 심낭 요람을 만들어 전기 소작으로 흉선을 확인하고 제거합니다. 대동맥과 폐동맥 사이의 조직을 완전히 나누고 대동맥 아치와 상완 줄기의 위치를 시각화하여 대동맥 교차 클램프의 적절한 배치를 용이하게합니다.가위와 무딘 해부를 사용하여 우수한 베나 카바를 원주적으로 풀고 우수한 베나 카바 주위에 제로 크기의 두 개의 실크 봉합사를 묶습니다. 크기 4-0 폴리프로필렌 봉합사를 U-스티치 방식으로 오름차순 대동맥에 바르고 지갑 끈 방식으로 오른쪽 아트리움에 바릅니다. 이전에 배치 된 U-stitch로 확보 된 소아 대동맥 뿌리 캐뉼라를 삽입하십시오.그리고 캐뉼라를 방영 한 후 Rummel 지혈대로 제자리에 고정하십시오. 튜브가 del Nido 심흉막으로 플러시 된 후 대동맥 뿌리 캐뉼라를 심흉막 튜브에 연결하십시오. 이전에 배치 된 지갑 문자열 내에 오른쪽 동맥 절제술을 만듭니다.정맥 캐뉼라를 오른쪽 심방에 삽입하고 Rummel 지혈대로 고정하십시오. 정맥 캐뉼라를 세포 보호기 심장 절제술에 연결된 멸균 흡입 라인에 연결하고 약 1 ~ 1.3 리터의 혈액을 수집하십시오. 그런 다음 대동맥 크로스 클램프를 적용하여 클램프가 오름차순 대동맥을 완전히 막도록주의 깊게 확인하십시오.심장에 멸균 얼음 슬러시를 놓은 후, 열등하고 우수한 베나 카바를 azygos 정맥에 바로 근접하게 나눕니다. 아치 수준의 대동맥은 비지명 동맥과 분기의 주요 폐동맥에 원위 위치합니다. 폐정맥을 확인하고 라이게이트한 다음 가슴에서 심장을 제거하고 멸균 얼음이 있는 용기에 넣습니다.대동맥 커넥터의 배치를 위해 대동맥을 준비하려면 절단 가장자리 아래 5 밀리미터 깊이의 원위 대동맥 안쪽에 간단한 수평 매트리스 방식으로 4 개의 약속 된 크기의 4-0 폴리 프로필렌 봉합사를 놓은 다음 묶으십시오. 서약된 대동맥 봉합사를 들고 대동맥 커넥터를 대동맥에 삽입하고 대동맥 주위에 탯줄 테이프를 묶어 커넥터를 고정시킵니다. 크기 4-0 폴리프로필렌 지갑 끈을 주 폐동맥의 원위 절단 가장자리 주위에 놓습니다.폐동맥 캐뉼라를 삽입하고 지갑 끈의 끝을 묶어 캐뉼라를 고정시킵니다. 그런 다음 폐동맥 캐뉼라를 장치의 폐동맥 커넥터에 연결하고 넥타이로 고정하십시오. 준비된 이식편을 뒷 테이블에서 생체외 관류 장치로 가져 와서 대동맥 커넥터를 장치 장소에 연결하십시오.좌심실 통풍구는 묶이지 않은 폐정맥을 통해 좌심방으로 흘러 들어가고 승모판 밸브를 가로 질러 좌심실로 배출됩니다. 숫자 10 블레이드를 사용하여 20 ~ 30cm 길이의 피부 절개를 한 다음 전기 소작을 사용하여 근막까지 해부를 계속하십시오. 두 개의 Kocher 클램프로 근막과 복막을 들어 올린 후 Metzenbaum 가위를 사용하여 복강으로 조심스럽게 작은 절개를 만듭니다.전기 소작을 사용하여 절개의 전체 길이에 대한 복막 개구부를 연장하십시오. 기본 내장을 보호하기 위해 손가락을 아래에 놓습니다. Balfour 리트랙터를 배치하여 노출을 최적화하고 젖은 수건을 사용하여 작은 창자로 조심스럽게 후퇴하십시오.해부를 열등한 정맥 카바의 복부 대동맥으로 운반 한 다음 중간 및 대형 클립으로 림프원을 절개하십시오. 뒷 테이블에서 좌심실 심실 통풍구가 삽입 된 폐정맥 좌측 절제술이 과대 봉제 될 때, 대마초에 부착되어 조직을 분쇄했을 수있는 대동맥과 폐동맥의 원위 측면을 다듬습니다. 열등한 베나 카바에 Satinsky 클램프를 놓고 숫자 11 블레이드와 Pott의 가위를 사용하여 약 1.5 센티미터 크기의 세로 정맥 절제술을 만듭니다.폐동맥 이식편을 실행 크기 4-0 폴리프로필렌 봉합사를 사용하여 말단 투 사이드 방식으로 수용자의 infrarenal infrainor vena cava에 아나스토모스. 그런 다음 달리기 크기 4-0 폴리프로필렌 봉합사를 사용하여 수용자의 infrarenal 대동맥에 이식편을 종단 투 사이드 방식으로 해부학적으로 분석한다. 조심스럽게 심장을 오른쪽 복막 공간에 배치하여 해부학에 긴장과 혈관의 꼬임을 방지하십시오.그런 다음 작은 장을 교체하십시오. 루프 크기 제로 Maxon 봉합사로 근막을 절개의 양쪽 끝에서 시작하여 중간에 묶어서 장의 부상을 피하십시오. 달리기 방식으로 크기 2-0 Vicryl과 크기 4-0 Monocryl의 피부를 달리기 방식으로 깊은 진피 층을 닫으십시오.몇 가지 상이한 관류 파라미터가 획득되었다. 순환 유속은 폐동맥, 대동맥 및 관상동맥으로부터 측정되었다. 평균 압력, 수축기 압력, 이완기 압력을 포함하는 대동맥 압력이 또한 측정되었다.생체외 관류 동안, 심장 동종이식편의 심박수 및 온도를 또한 측정하였다. 관류 기간 동안, 혼합 정맥 산소 포화도 및 헤마토크릿 값을 퍼퓨세이트로부터 측정하였다. 계내 35일째에 복강내 이종토픽 심장의 생존능은 이 프로토콜을 이용한 성공적인 이식을 나타낸다.기억해야 할 가장 중요한 것은 해부학의 긴장과 꼬임에 대한 가능성을 최소화하는 동종 이식편을위한 부위를 선택하는 것입니다. 이 절차에 따라 연구자는 동종 이식편에 대한 면역 학적 반응에 대한 효과를 확인하고 동종 이식편에 대한 치료 효과의 수명을 결정하기 위해 여러 가지 유형의 치료제를 테스트 할 수 있습니다. 이 프로토콜을 개발 한 후, 우리 그룹은 바이러스 벡터를 사용하여 유전자 전달의 거부 및 효능의 병태 생리학에 대한 이해를 얻기 위해 급성 동종 사진 거부 모델뿐만 아니라 유전자 전달을위한 다양한 바이러스 벡터 비히클을 테스트 할 수있었습니다.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Modified Method for Heterotopic Mouse Heart Transplantion

이소성 마우스 심장 장기 이식에 대한 수정 방법

Mice are often used as heart transplant donors and recipients in studies of transplant immunology due to the wide range of transgenic mice and reagents ...

연구

의학

Murine Heterotopic Heart Transplant Technique

쥐 이소성 심장 이식 기술

It is now over forty years since this technique was first reported by Corry, Wynn and Russell. Although it took some years for other labs to become ...

Transplantation of Pulmonary Valve Using a Mouse Model of Heterotopic Heart Transplantation

이소성 심장 이식 마우스 모델을 사용하여 폐동맥 판막 이식

Tissue engineered heart valves, especially decellularized valves, are starting to gain momentum in clinical use of reconstructive surgery with mixed ...

Rat Heterotopic Abdominal Heart/Single-lung Transplantation in a Volume-loaded Configuration

쥐 이소성 복부 심장 / 볼륨로드 구성에서 단일 폐 이식

Herein, we describe a novel technique for heterotopic abdominal heart-lung transplantation (HAHLT) in rats. The configuration of the transplant graft ...

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

마우스의 이소성 자궁 심장 이식

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...

Heterotopic Renal Autotransplantation in a Porcine Model: A Step-by-Step Protocol

돼지 모델에서 이소성 신장자가 이식 : 단계별 프로토콜

Kidney transplantation is the treatment of choice for patients suffering from end-stage renal disease. It offers better life expectancy and higher quality ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

정형외 심장 이식의 전 임상 돼지 모델

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

A Simplified Model for Heterotopic Heart Valve Transplantation in Rodents

설치류의 이종 주제 심장 판막 이식을위한 단순화 된 모델

There is an urgent clinical need for heart valve replacements that can grow in children. Heart valve transplantation is proposed as a new type of ...

Left Lung Orthotopic Transplantation in a Juvenile Porcine Model for ESLP

ESLP를 위한 어린 돼지 모델에서의 좌측 폐 정형외과적 이식

Lung transplantation is the gold-standard treatment for end-stage lung disease, with over 4,600 lung transplantations performed worldwide annually. ...

A Modified Cuff Technique for Mouse Cervical Heterotopic Heart Transplantation Model

마우스 자궁경부 이종 심장 이식 모델을 위한 수정된 커프 기술

Cardiac allograft rejection limits the long-term survival of patients after heart transplantation. A mouse heart transplantation model is ideal for ...