Name: isolation of primary patient-specific aortic smooth muscle cells and semiquantitative real-time contraction measurements in vitro
Uploaded: 2022-02-15T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Isolation of Primary Patient-specific Aortic Smooth Muscle Cells and Semiquantitative Real-time Contraction Measurements In Vitro at JoVE.com

우리는 Tara van Merrienboer, Albert van Wijk, Jolanda van der Velden, Jan D. Blankensteijn, Lan Tran, Peter L. Hordijk, PAREL-AAA 팀 및 암스테르담 UMC, Zaans Medisch Centrum 및 Dijklander 병원의 모든 혈관 외과 의사가이 연구에 대한 자료와 지원을 제공 한 것에 대해 감사하게 생각합니다.

참고 : 대동맥 생검은 암스테르담 대학 의료 센터, VU 대학 의료 센터, 암스테르담, Zaans Medisch Centrum, Zaandam 및 Dijklander 병원, Hoorn, 네덜란드에서 열린 동맥류 수리 중에 얻어졌습니다. 대조군 대동맥 조직은 신장 이식을 위해 수확된 신장 동맥에 부착된 대동맥의 조각으로부터 수득되었다. 18 세 이상의 환자 만 포함되었으며 모든 환자는 연구에 참여하기 위해 정보에 입각 한 동의를했습니다. 모든 ?...

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	<li>Milewicz, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+basis+of+thoracic+aortic+aneurysms+and+dissections:+focus+on+smooth+muscle+cell+contractile+dysfunction.">Genetic basis of thoracic aortic aneurysms and dissections: focus on smooth muscle cell contractile dysfunction.</a> Annual Review of Genomics and Human Genetics. 9, 283-302 (2008).</li><li>Milewicz, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+smooth+muscle+cell+force+generation+as+a+driver+of+thoracic+aortic+aneurysms+and+dissections.">Altered smooth muscle cell force generation as a driver of thoracic aortic aneurysms and dissections.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 37 (1), 26-34 (2017).</li><li>Groeneveld, M. 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L., Minnear, F. L., Heimark, R. L., Vincent, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rearrangement+of+adherens+junctions+by+transforming+growth+factor-&#946;1:+role+of+contraction.">Rearrangement of adherens junctions by transforming growth factor-&#946;1: role of contraction.</a> American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology. 276 (4), 582-595 (1999).</li><li>Hu, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+between+ECIS+and+LAPS+for+establishing+a+cardiomyocyte-based+biosensor.">Comparison between ECIS and LAPS for establishing a cardiomyocyte-based biosensor.</a> Sensors and Actuators B: Chemical. 185, 238-244 (2013).</li><li>Peters, M. F., Lamore, S. D., Guo, L., Scott, C. W., Kolaja, K. 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K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transdifferentiation+of+human+dermal+fibroblasts+to+smooth+muscle-like+cells+to+study+the+effect+of+MYH11+and+ACTA2+mutations+in+aortic+aneurysms.">Transdifferentiation of human dermal fibroblasts to smooth muscle-like cells to study the effect of MYH11 and ACTA2 mutations in aortic aneurysms.</a> Human Mutation. 38 (4), 439-450 (2017).</li></ol>

이 논문은 임피던스 및 표면 점유의 변화를 기반으로 시험관 내에서 SMC 수축을 측정하는 방법을 제시합니다. 먼저, 환자 특이적 일차 인간 SMC 및 피부 섬유아세포의 단리, 배양 및 확장이 설명되고, 이어서 수축 측정에 이를 사용하는 방법이 설명된다. 
연구의 한계는 explant 프로토콜을 통해 세포를 얻는 것과 관련이 있습니다. 생검에서 증식하는 세포는 생체 내에서<...

평활근 세포 (SMCs)는 대동맥의 가장 두꺼운 층인 대동맥 내측 층에서 우세한 세포 유형이다. 벽 내에서, 그들은 방사상 지향적이며 다른 기능들 중에서도 혈관 수축 및 혈관 확장에 관여합니다1. SMC 수축 기계는 세포외 매트릭스(2)와의 기능적 링크를 통해 대동맥에서의 힘의 전달에 관여한다. 평활근 미오신 중쇄 (MYH11) 및 평활근 액틴 (ACTA2)과 같은 SMC 수축 장치의 단백질을 암호화하는 유전자의 돌연변이는 가족 흉부 대동맥류의 경우와 관련이 있으며, 대동맥의 구조적 및 기능적 완전성을 유지하는 데 SMC 수축의 관련성을 강조합니다 1,2 . 또한, TGFβ 신호전달 경로의 돌연변이는 대동맥류와도 관련이 있으며, 대동맥류에서의 병태생리학에서의 그 효과는 피부 섬유아세포3에서도 연구될 수 있다.
시험관 내에서 SMC 수축의 높은 처리량 측정은 도전적입니다. SMC 수축성은 인간에서 생체 내에서 측정 될 수 없기 때문에 인간 세포에 대한 시험관 내 분석은 실현 가능한 대안을 제시합니다. 더욱이, 동물 모델에서의 복부 대동맥류(AAA) 발달은 예를 들어, 엘라스타제 관류에 의해 화학적으로 유도되거나, 또는 특정 돌연변이에 의해 유발된다. 따라서 동물 데이터는 흡연, 연령 및 / 또는 죽상 동맥 경화증과 같은 다각적 인 원인을 가진 인간의 AAA 발달과 비교할 수 없습니다. 시험관내 SMC 수축성은 지금까지 주로 견인력 현미경4,5, Fura-2 형광 세포내 칼슘 플럭스6의 정량화 및 콜라겐 주름 분석7에 의해 측정되었다. 견인력 현미경 검사는 단일 세포에 의해 생성 된 힘에 대한 귀중한 숫자 통찰력을 제공하지만 복잡한 수학적 데이터 처리 및 한 번에 하나의 세포 분석으로 인해 높은 처리량 스크리닝에는 적합하지 않으므로 기증자 당 대표적인 세포 수를 측정하는 데 매우 많은 시간이 소요됩니다. Fura-2 염료 및 콜라겐 주름 분석은 수축의 피상적 인 결정을 허용하고 정확한 수치 출력을 제공하지 않으므로 환자 별 차이를 구별하는 데 적합하지 않습니다. 복부 대동맥류 환자의 대동맥류로부터 유래된 세포에서 손상된 SMC 수축은 시험관내8에서 SMC 수축을 측정하기 위한 새로운 방법을 최적화함으로써 처음으로 입증되었다. 이는 전기 셀-기판 임피던스 감지(ECIS) 방법을 용도 변경함으로써 수행되었다. ECIS는 상처 치유 및 이동 분석(12,13,14)에서 SMC 성장 및 거동과 같은 부착성 세포 거동 및 수축 9,10,11의 정량화를 위한 실시간 중간 처리량 분석법이다. 정확한 방법은 프로토콜 섹션에 설명되어 있습니다. 이러한 최적화된 방식으로, ECIS는 또한 유사한 크기 및 형태학으로 인해 섬유아세포 수축을 연구하는데 사용될 수 있다.
이 논문의 목적은 ECIS8을 사용하여 시험관 내에서 SMC 수축을 측정하고 대조군과 환자 SMC 간의 수축을 비교하는 방법에 대한 단계적 설명을 제공하는 것입니다. 첫째, 대조군 및 환자 대동맥 생검으로부터 일차 SMCs의 분리 및 배양이 설명되며, 이는 수축 측정에 사용될 수 있다. 둘째, 수축 측정 및 분석, SMC 마커 발현의 검증이 설명된다. 또한,이 논문은 동일한 방법론을 사용하여 수축을 측정 할 수있는 환자 특정 진피 섬유 아세포의 분리 방법을 설명합니다. 이들 세포는 대동맥류 또는 다른 심혈관 병리(15)에 초점을 맞춘 환자 특이적 연구 또는 동맥류 수술 전에 수축 측정을 허용하는 전분화 프로토콜을 이용한 예후 연구(16)에 사용될 수 있다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>96-well Array</td>
			<td>Applied Biophysics</td>
			<td>96W10idf PET</td>
			<td>Array used to measure contraction in the ECIS setup</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Custodiol</td>
			<td>Dr. Franz H&#246;hler Chemie GmbH</td>
			<td>RVG 12801</td>
			<td>Solution used to transfer tissue in from surgery room to laboratorium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>472301</td>
			<td>Solution used to dilute ionomycin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>26140079</td>
			<td>Addition to cell culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ham&#39;s F-10 Nutrient Mix</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11550043</td>
			<td>Medium used to culture skin fibroblasts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human Vascular Smooth Muscle Cell Basal Medium (formerly &#39;&#39;Medium 231&#39;&#39;)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>M231500</td>
			<td>Medium used to culture smooth muscle cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Invitrogen countess II</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>AMQAX1000</td>
			<td>Automated cell counter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ionomycin calcium salt from Streptomyces conglobatus</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>I0634-1MG</td>
			<td>Compound used for contraction stimulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl 0.9%</td>
			<td>Fresenius Kabi</td>
			<td>B230561</td>
			<td>Solution used to transfer tissue in from surgery room to laboratorium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140122</td>
			<td>Antibiotics used for cell culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phospathe buffered saline</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10010023</td>
			<td>Used to wash cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quick-RNA Miniprep Kit</td>
			<td>Zymo Research</td>
			<td>R1055</td>
			<td>Kit used for RNA isolation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Smooth Muscle Growth Supplement (SMGS)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>S00725</td>
			<td>Supplement which is added to smooth muscle cell culture medium</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SuperScript VILO cDNA Synthesis Kit</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>11754250</td>
			<td>Kit used for cDNA synthesis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SYBR Green PCR Master Mix</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>4309155</td>
			<td>Reagent for qPCR</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15400-054</td>
			<td>Used to trypsinize cells</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZTheta</td>
			<td>Applied Biophysics</td>
			<td>ZTheta</td>
			<td>ECIS instrument used for contraction measurements</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

isolation of primary patient-specific aortic smooth muscle cells and semiquantitative real-time contraction measurements in vitro

평활근 세포 (SMCs)는 대동맥 매질에서 우세한 세포 유형이다. 그들의 수축 기계는 대동맥에서 힘의 전달에 중요하며 혈관 수축과 혈관 확장을 조절합니다. SMC 수축 장치 단백질을 코딩하는 유전자의 돌연변이는 대동맥류, 예컨대 흉부 대동맥류와 관련이 있다. 시험관 내에서 SMC 수축을 측정하는 것은 특히 환자 물질 스크리닝에 필수적인 높은 처리량 방식으로 도전적입니다. 현재 사용 가능한 방법은 이러한 목적에 적합하지 않습니다. 이 논문은 전기 셀 기판 임피던스 감지 (ECIS)에 기반한 새로운 방법을 제시합니다. 먼저, 대동맥류의 연구를 위해 대동맥류 연구를 위해 환자 특이적 인간 원발성 SMCs를 대동맥류 생검 및 환자 특이적 인간 원발성 진피 섬유아세포로부터 분리하기 위한 explant 프로토콜이 기술된다. 다음으로, 이들 세포의 수축 반응을 측정하기 위한 새로운 수축 방법에 대한 상세한 설명이 주어지며, 상이한 집단을 비교하기 위한 후속 분석 및 제안을 포함한다. 이 방법은 번역 (심혈관) 연구 및 환자 및 약물 스크리닝 연구의 맥락에서 부착성 세포의 수축을 연구하는데 사용될 수 있다.

이 방법의 재현성을 테스트하기 위해 이 방법은 먼저 제어 SMC만 사용하여 검증되었습니다. 실험간 측정 재현성을 결정하기 위해, 포함된 모든 대조군 및 환자 세포주에 대한 두 개의 독립적인 측정값을 Bland-Altman 플롯으로 플롯팅하였다(도 3B). 플롯은 이 방법이 하나의 이상치 세포주를 제외하고는 신뢰 구간 밖의 가변성을 나타내지 않는다는 것을 입증하였다. 또한, 이러한 ...

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Isolation of Primary Patient-specific Aortic Smooth Muscle Cells and Semiquantitative Real-time Contraction Measurements In Vitro

이 논문은 원발성, 환자 특이적 인간 대동맥 평활근 세포 및 진피 섬유아세포의 분리 및 배양을 위한 explant 배양 기반 방법을 기술한다. 또한, 세포 수축 및 후속 분석을 측정하기위한 새로운 방법이 제시되며, 이는 이들 세포의 환자 별 차이를 연구하는 데 사용될 수 있습니다.

일차 환자 특이적 대동맥 평활근 세포 및 체외에서 반정량적 실시간 수축 측정의 분리

Smooth muscle cells (SMCs) are the predominant cell type in the aortic media. Their contractile machinery is important for the transmission of force in ...

이 방법을 통해 연구원은 여러 환자 세포주의 세포 수축을 동시에 연구 할 수 있습니다. 그것은 우리가 질병을 더 빠르고 효율적으로 연구 할 수있게 해줍니다. 이 기술을 통해 실시간으로 세포 수축을 정량화 할 수 있습니다.한 시간 안에 수십 개의 세포의 수축 값을 얻을 수 있습니다. 우리는 대동맥류 환자 그룹에서 근육 세포 수축이 감소한다는 것을 처음으로 시연했습니다. 이는 의학적 치료를 위한 새로운 바이오마커 또는 표적일 수 있다.두 쌍의 외과 용 포셉과 메스를 70 % 에탄올에 담그고 건조시켜 멸균하십시오. 그런 다음 조직 해부가 수행 될 페트리 접시에 SMC 배지 두 밀리리터를 피펫하십시오. 다음 피펫 2.5 밀리리터의 SMC 배지를 두 개의 T-25 플라스크에 넣습니다.작은 양의 매체가 전체 표면을 덮을 수 있도록 플라스크를 소용돌이 치십시오. 육안으로 생검을 검사하고, 내막 측에 죽상 경화성 플라크가 존재하고 모험적인 쪽에 칙칙한 결합 조직이 존재하여 세 개의 대동맥 층을 식별하여 층을 구별합니다. SMC를 배지에서 분리하려면 먼저 내막 플라크가있는 조직을 위쪽으로 올려 다른 두 층을 제거한 다음 분홍색의 균일 한 내측 층이 보일 때까지 두 번째 포셉으로 조직을 아래로 밀면서 포셉으로 조직에서 당겨서 고체 플라크를 제거하십시오.이제 조직을 뒤집고 모험 층을 당겨서 동일한 절차를 반복하고,이 레이어가 미디어에서 쉽게 분리되지 않도록하기 위해 필요한만큼 많은 시도에서 보이는 모든 부분을 제거해야합니다. 미디어 층이 분리되면 포셉으로 미디어를 아래로 누르고 메스를 사용하여 조직을 한 방향으로 절단하여 손상을 최소화하기 위해 깨끗한 단방향 절단을 만들어 조직을 큐브로 자릅니다. 포셉을 사용하여 T-25 플랙의 상부 분기에 10-20개의 이들 조직 조각을 배치한다.앞서 기술한 바와 같이 두 쌍의 외과 포셉과 메스를 멸균한 후, 조직 해부가 수행될 페트리 접시에 두 밀리리터의 섬유아세포 배지를 피펫팅한다. 그런 다음 2.5 밀리리터의 섬유 아세포 배지를 두 개의 T-25 플라스크에 피펫하고 플라스크를 소용돌이 치며 작은 양의 배지가 전체 표면을 덮습니다. 눈에 보이는 머리카락이있는 표피를 인식 할 수있는 피부 표면으로 표피를 확인하기 위해 생검을 육안으로 검사 한 다음 반대쪽에서 노란색과 칙칙한 피하 지방을 찾으십시오.표피와 피하 지방 사이의 층은 생존 가능한 섬유 아세포의 원천 인 진피입니다. 진피에서 섬유아세포를 분리하려면 진피 쪽에 조직을 배치하여 다른 두 층을 제거하여 세 층 모두를 볼 수 있도록 합니다. 그런 다음 포셉으로 조직을 잡고 조직을 손상시키지 않고 하나의 깨끗한 선으로 전체 표피를 잘라냅니다.이제 조직을 뒤집고 피하 지방과의 경계와 평행한 진피 내에서 절단하여 동일한 절차를 반복하십시오. 진피가 분리되면 조직을 큐브로 자르고 포셉으로 조직을 누르고 메스를 사용하여 조직을 한 방향으로 자릅니다. 그런 다음 포셉을 사용하여 T-25 플라스크의 상부 분기에 10 내지 20개의 이들 조직 조각을 배치한다.자동화된 세포 계수기를 사용하여 세포를 계수하고, 젤라틴 코팅된 ECIS 플레이트 내의 200 마이크로리터의 SMC 배지에서 웰 당 30, 000 세포의 시딩 밀도로 삼중으로 SMCs를 시드한다. SMCs가 있는 플레이트를 ECIS의 96-웰 홀더에 넣고 세포 배양 인큐베이터에 넣는다. ECIS Applied BioPhysics 소프트웨어를 두 번 클릭하여 프로그램을 열고 설정 버튼을 누릅니다.모든 전극이 오른쪽 구성이라고 표시된 왼쪽 하단 패널의 홀더와 접촉했는지 확인합니다. 전극이 제대로 연결되지 않은 경우 측정을 시작하기 전에 홀더의 플레이트를 조정하십시오. 이제 배열 유형을 클릭하여 동일한 패널에서 플레이트 유형을 선택하십시오.다음으로, 두 마이크로 리터 및 150 마이크로 리터 부피로 설정된 두 개의 피펫을 준비하십시오. 자극을 시작하기 전에 소프트웨어에서 Mark를 누르고 주석을 달으십시오. 세포를 자극하려면 뚜껑을 제거하고 인큐베이터 내부의 멸균 표면에 놓습니다.그런 다음 이오노마이신 작업 용액의 두 마이크로리터를 가능한 한 빨리 각 웰로 피펫팅하여 SMC 수축을 유도한다. 일단 모든 세포가 자극되면, 두 번째 피펫을 사용하여 웰에 배지를 혼합한다. 실험간 측정 재현성을 결정하기 위해, 포함된 모든 대조군 및 환자 세포주에 대한 두 개의 독립적인 측정값을 Bland-Altman 플롯으로 플롯팅하여, 이 방법이 하나의 이상치 세포주를 제외하고는 신뢰 구간 밖의 가변성을 나타내지 않았음을 입증하였다.동일한 실험으로 시딩되고 동시에 자극 된 두 개의 웰은 실질적으로 동일한 계약 반응 곡선을 보였다. 표시된 반응이 이오노마이신 자극으로 인해 삼투압 스트레스가 아닌 수축인지 여부를 검증하기 위해, 자극 후 배지를 교체하고 세포의 거동을 기록하였으며, 이는 자극된 세포가 다시 전극 위로 퍼지기 시작했음을 보여주었다. 건강하고 확장되지 않은 대동맥류에서 유래된 SMCs의 수축 반응은 복부 대동맥류 환자로부터의 52%의 중간 반응과 비교하여 61%의 중간 반응을 보였다.대조군의 평균 수축 반응은 정상 값보다 수축 값이 낮은 네 명의 환자를 확인하기 위해 사용되었다. 웨스턴 블롯 분석 및 후속 정량화는 세포가 SMC 마커를 발현한다는 것을 확인하였다. SMC의 증식 능력을 결정하기 위해, Ki67에 대해 qPCR을 수행하였다.Ki67 발현은 모든 세포에서 검출가능했지만, 수축성 출력과 상관관계가 없었다. 수축을 위해 세포를 자극 할 때, 동시에 너무 많은 우물을 피펫하지 말고 가능한 한 빨리 피펫을 시도했는지 기억하십시오. 이 절차에는 몇 가지 연습이 필요할 수 있습니다.이 방법을 사용하여 우리는 수축에 따라 환자를 나누고 정상 수축을 낮추어 이러한 환자와 흡연과 같은 임상 적 특성과의 연관성을 조사 할 수있었습니다.

Research

JoVE Journal

Biology

Isolation of Primary Patient-specific Aortic Smooth Muscle Cells and Semiquantitative Real-time Contraction Measurements In Vitro

Isolation of Human Umbilical Arterial Smooth Muscle Cells (HUASMC)

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인간의 탯줄 아티 평활근 세포 절연 (HUASMC)

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연구

생물학

Isolation and Primary Culture of Rat Hepatic Cells

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Protein-protein interactions are pivotal to most, if not all, physiological processes, and  understanding the nature of such interactions is a central ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

분리 및 마우스 대동맥 내피 세포의 차 문화

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

Isolation of Murine Coronary Vascular Smooth Muscle Cells

쥐 관상 동맥 혈관 평활근 세포의 분리

While the isolation and culture of vascular smooth muscle cells (VSMCs) from large vessels is well established, we sought to isolate and culture VSMCs ...

Murine Aortic Crush Injury: An Efficient In Vivo Model of Smooth Muscle Cell Proliferation and Endothelial Function

Murine Aortic Crush Injury: An Efficient In Vivo Model of Smooth Muscle Cell Proliferation and Endothelial Function

소뇌 대동맥 파열 상해 : 효율적<em&gt; In Vivo</em&gt; 평활근 세포 증식과 내피 기능 모델

Arterial reconstruction, whether angioplasty or bypass surgery, involves iatrogenic trauma causing endothelial disruption and vascular smooth muscle cell ...

Isolation and Culture of Primary Aortic Endothelial Cells from Miniature Pigs

소형 돼지에서 1 차 대동맥 내피 세포의 격리 및 배양

Xenotransplantation is a promising way to resolve the shortage of human organs for patients with end-stage organ failure, and the pig is considered as a ...

Measuring Proliferation of Vascular Smooth Muscle Cells Using Click Chemistry

클릭 화학을 사용하여 혈관 평활근 세포의 증식 측정

The ability of a cell to proliferate is integral to the normal function of most cells, and dysregulation of proliferation is at the heart of many disease ...

Isolation of Mouse Interstitial Valve Cells to Study the Calcification of the Aortic Valve In Vitro

Isolation of Mouse Interstitial Valve Cells to Study the Calcification of the Aortic Valve In Vitro

시험관 내 대동맥 판막의 석회화를 연구하기 위해 마우스 간막판 세포의 격리

The calcification of aortic valve cells is the hallmark of aortic stenosis and is associated with valve cusp fibrosis. Valve interstitial cells (VICs) ...