Name: live imaging and quantification of viral infection in k18 hace2 transgenic mice using reporter-expressing recombinant sars-cov-2
Uploaded: 2021-11-05T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Live Imaging and Quantification of Viral Infection in K18 hACE2 Transgenic Mice Using Reporter-Expressing Recombinant SARS-CoV-2 at JoVE.com

私たちの研究所(テキサス生物医学研究所)のメンバーには、COVID-19パンデミックの間、私たちの施設を完全に運営し、安全に保つための努力に感謝したいと思います。また、制度バイオセーフティ委員会(IBC)とスペル(IACUC)が、時間効率の良い方法でプロトコルを見直してくれたことに感謝します。シナイ山のアイカーン医科大学のトーマス・モラン博士が、SARS-CoV交差反応性1C7C7ヌクレオカプシド(N)タンパク質モノクローナル抗体を提供してくれたことに感謝します。マルティネス・ソブリドの研究室におけるSARS-CoV-2の研究は現在、NIAID/NIH助成金RO1AI161363-01、RO1AI161175-01A1、およびR43AI165089-01によって支援されています。国防総省(DoD)はW81XWH2110095およびW81XWH2110103を付与します。精密治療のためのサンアントニオパートナーシップ;テキサス生物医学研究所フォーラム;サンアントニオのテキサス大学健康科学センター。サンアントニオ医療財団;NIAIDが資金提供するインフルエンザ研究・対応センター(CEIRR、契約番号75N93021C00014)であるインフルエンザ病因・伝播研究センター(CRIPT)による。

K18 hACE2トランスジェニックマウスを含むプロトコルは、テキサス生物医学研究所(TBRI)の施設バイオセーフティ委員会(IBC)および施設動物ケアおよび使用委員会(IACUC)によって承認された。すべての実験は、National Research Council40の実験動物の世話と使用のためのガイドの勧告に従います。マウスを操作するときは、適切な個人用保護具(PPE)が必要です。
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このプロトコールは、これらのrSARS-CoV-2発現レポーター遺伝子を使用して 、インビボでのウイルス感染を監視することの実現可能性を実証する。両方のレポーター発現組換えウイルスは、 インビボでSARS-CoV-2感染を研究するための優れたツールを提供する。記載された エクス ビボ(rSARS-CoV-2/Venus)および インビボ (rSARS-CoV-2/Nluc)イメージングシステムは、SARS-CoV-2感染?...

重症急性呼吸器症候群コロナウイルス2(SARS-CoV-2)は、コロナウイルス科1のベータコロナウイルス系統に属するエンベロープ、ポジティブセンス、一本鎖RNAウイルスです。このウイルスファミリーは、アルファ、ベータ、ガンマ、およびデルタコロナウイルス1に分けられます。アルファコロナウイルスとベータコロナウイルスは主に哺乳類に感染しますが、ガンマコロナウイルスとデルタコロナウイルスはほぼ独占的に鳥類に感染します2。現在までに、7つのコロナウイルス(CoV)が種の障壁を越え、ヒトコロナウイルス(HCoV)として出現しました:2つのα-CoV(HCoV-229EおよびHCoV-NL63)と5つのβ-CoV(HCoV-OC43、HCoV-HKU1、SARS-CoV、中東呼吸器症候群コロナウイルス[MERS-CoV]、およびSARS-CoV-2)3、4、5、6。SARS-CoV、MERS-CoV、およびSARS-CoV-2は高病原性であり、重度の下気道感染症を引き起こす7。SARS-CoV-2の出現に先立ち、CoVsによって引き起こされる2つの流行性アウトブレイクがありました:2002年から2003年にかけて、中国の広東省プロビデンスにおけるSARS-CoV、症例致死率(CFR)は約9.7%でした。2012年から現在までの中東のMERS-CoVは、CFRが約34%です7,8。SARS-CoV-2の全体的なCFRは3.4%〜49%で、基礎となる条件がより高いCFR 8,9に寄与しています。2019年12月に中国の武漢で発見されて以来、SARS-CoV-2は世界中で2億4,200万人以上のヒト感染と490万人以上の死亡の原因となっています7,10,11,12。特に、2020年後半以降、新しいSARS-CoV-2変異型(VoC)および関心のある変異型(VoI)は、感染および抗原性9,13、ならびにCOVID-19パンデミックの全体的な方向性を含むウイルス特性に影響を与えました。SARS-CoV-2感染症の治療のために、現在1つの米国(米国)しかありません。食品医薬品局(FDA)の治療用抗ウイルス薬(レムデシビル)および1種の緊急使用許可(EUA)薬(バリシチニブ、レムデシビルと組み合わせて投与される)14。また、6つの承認されたEUAモノクローナル抗体がある:REGEN-COV(カシリビマブおよびイムデビマブ、一緒に投与)、ソトロビマブ、トシリズマブ、およびバムラニビマブおよびエテセビマブを一緒に投与する15、16、17、18、19。現在、FDAが承認した予防ワクチンはファイザー・バイオNTechの1つしかなく、他の2つの予防ワクチン(モデルナとヤンセン)はEUAの承認を受けています20,21,22,23,24。しかし、制御不能な感染率とVoCとVoIの出現により、SARS-CoV-2は依然として人間の健康に脅威をもたらします。したがって、SARS-CoV-2感染と現在進行中のCOVID-19パンデミックを制御するための効率的な予防薬および治療法を特定するための新しいアプローチが緊急に必要とされています。
SARS-CoV-2を研究するには、感染細胞および/または感染の検証済み動物モデルにおけるウイルスの存在を特定するための面倒な技術および二次的アプローチが必要である。逆遺伝学の使用は、組換えウイルスの生成がウイルス感染の生物学における重要な質問に答えることを可能にした。例えば、リバースジェネティクス技術は、ウイルス感染、病因、および疾患のメカニズムを明らかにし、理解する手段を提供してきた。同様に、リバースジェネティクスのアプローチは、ウイルスの病因におけるそれらの寄与を理解するために、ウイルスタンパク質を欠く組換えウイルスを設計する道を開いた。さらに、ウイルス感染の治療のための予防的および/または治療的アプローチの同定を含む、in vitroおよびin vivo用途のためのレポーター遺伝子を発現する組換えウイルスを生成するために、リバースジェネティクス技術が使用されてきた。蛍光タンパク質および生物発光タンパク質は、その感度、安定性、および新技術の改善に基づく容易な検出のために、最も一般的に使用されるレポーター遺伝子である25,26。インビトロでは、蛍光タンパク質は感染細胞におけるウイルスの局在化のためのより良い選択肢として役立つことが示されているが、ルシフェラーゼは定量化研究にとってより便利である27、28、29。インビボでは、ルシフェラーゼは、全動物イメージングのための蛍光タンパク質よりも好ましいが、蛍光タンパク質は、感染細胞の同定またはエキソビボイメージング30、31、32のために好ましい。レポーター発現組換えウイルスの使用は、とりわけ、フラビウイルス、エンテロウイルス、アルファウイルス、レンチウイルス、アレナウイルス、およびインフルエンザウイルスを含む多くのファミリーにおけるウイルスの研究のための強力なツールとして役立ってきた28、33、34、35、36。
SARS-CoV-2を研究し、 生体内でのリアルタイムSARS-CoV-2感染を特徴付けるための二次的アプローチの必要性を克服するために、我々は、 大腸菌 において単一のコピーとして維持される前述の細菌人工染色体(BAC)ベースの逆遺伝学を使用して、生物発光(ナノルシフェラーゼ、Nluc)または蛍光(金星)タンパク質を発現する複製能を有する組換え(r)SARS-CoV-2を生成した。 細菌におけるその増殖中のウイルス配列の毒性を最小限に抑えるために37、38。特に、rSARS-CoV-2/NlucおよびrSARS-CoV-2/Venusは 、生体内でrSARS-CoV-2/WT様の病原性を示した。rSARS-CoV-2/Venusからの高レベルの金星発現により、 in vivo イメージングシステム(IVIS)を用いて、感染したK18 hACE2トランスジェニックマウスの肺におけるウイルス感染を検出することができました39。金星発現のレベルは、肺で検出されたウイルス力価とよく相関し、SARS-CoV-2感染の有効な代理として金星発現を使用することの実現可能性を実証した。rSARS-CoV-2/Nlucを用いて、我々はウイルス感染のダイナミクスをリアルタイムで追跡し、K18 hACE2トランスジェニックマウスにおける同じIVISアプローチを用いて 、インビボでの SARS-CoV-2感染を縦断的に評価することができた。

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			<td>0.5% Triton X-100</td>
			<td>J.T.Baker</td>
			<td>X198-07</td>
			<td>Store at room temperature (RT)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1% DEAE-Dextran</td>
			<td>MP Biomedicals</td>
			<td>195133</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10% Formalin solution, neutral buffered</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>HT501128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agar</td>
			<td>Oxoid</td>
			<td>LP0028</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24-well Cell Culture Plate</td>
			<td>Greiner Bio-one</td>
			<td>662160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5% Sodium bicarbonate</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>S-5761</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-well Cell Culture Plate</td>
			<td>Greiner Bio-one</td>
			<td>657160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96-well Cell Culture Plate</td>
			<td>Greiner Bio-one</td>
			<td>655-180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>African green monkey kidney epithelial cells (Vero E6)</td>
			<td>ATCC</td>
			<td>CRL-1586</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ami HT</td>
			<td>Spectral Instruments Imaging</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aura Imaging Software 3.2.0</td>
			<td>Spectral Instruments Imaging</td>
			<td></td>
			<td>Image analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin (BSA), 35%</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>A9647</td>
			<td>Store at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell culture grade water</td>
			<td>Corning</td>
			<td>25-055-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s modified Eagle&#8217;s medium (DMEM)</td>
			<td>Corning Cellgro</td>
			<td>15-013-CV</td>
			<td>Store at 4 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia gas machine</td>
			<td>Veterinary Anesthesia Systems, Inc.</td>
			<td>VAS 2001R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td>Seradigm</td>
			<td>1500-050</td>
			<td>Store at -20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Four- to six-week-old female K18-hACE2 transgenic mice</td>
			<td>The Jackson Laboratory</td>
			<td>34860</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graphpad Prism Version 9.1.0</td>
			<td>GraphPad</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>1001936040</td>
			<td>Store at RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MARS Data Analysis Software</td>
			<td>BMG LABTECH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MB10 tablets</td>
			<td>QUIP Laboratories</td>
			<td>MBTAB1.5</td>
			<td>Store at RT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nano-Glo Luciferase Assay Reagent</td>
			<td>Promega</td>
			<td>N1110</td>
			<td>This reagent is used to measure Nluc activity. Store at -20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nunc MicroWell 96-Well Microplates</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>269620</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nunc MicroWell 96-Well Microplates</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>269620</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin/L-Glutamine (PSG) 100x</td>
			<td>Corning</td>
			<td>30-009-CI</td>
			<td>Store at -20 &#176;C</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PHERAstar FSX</td>
			<td>BMG LABTECH</td>
			<td>PHERAstar FSX</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precelleys Evolution homogenizer</td>
			<td>Bertin Instruments</td>
			<td>P000062-PEVO0-A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Soft tissue homogenizing CK14 &#8211; 7 mL</td>
			<td>Bertin Instruments</td>
			<td>P000940-LYSK0-A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T75 EasYFlask</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>156499</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VECTASTAIN ABC-HRP Kit, Peroxidase</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>PK-4002</td>
			<td>ABC kit and DAB Peroxidase Substrate kit</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

live imaging and quantification of viral infection in k18 hace2 transgenic mice using reporter-expressing recombinant sars-cov-2

コロナウイルス病2019(COVID-19)のパンデミックは、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス2(SARS-CoV-2)によって引き起こされました。現在までに、SARS-CoV-2は世界中で2億4,200万人以上の感染と490万人以上の死亡の原因となっています。他のウイルスと同様に、SARS-CoV-2の研究には、感染細胞および/または動物モデルにおけるウイルスの存在を検出するための実験方法の使用が必要である。この制限を克服するために、我々は、生物発光(ナノルシフェラーゼ、Nluc)または蛍光(金星)タンパク質を発現する複製有能な組換え(r)SARS-CoV-2を作製した。これらのレポーター発現rSARS-CoV-2は、NlucおよびVenusレポーター遺伝子の発現に基づいて 、インビトロ および インビボでの ウイルス感染の追跡を可能にする。ここでの研究は、前述のK18ヒトアンジオテンシン変換酵素2(hACE2)トランスジェニックマウス感染モデルにおけるSARS-CoV-2感染を検出および追跡するためのrSARS-CoV-2/NlucおよびrSARS-CoV-2/Venusの使用を 、in vivo イメージングシステム(IVIS)を用いて説明する。このrSARS-CoV-2/NlucおよびrSARS-CoV-2/Venusは 、生体内でrSARS-CoV-2/WT様の病原性およびウイルス複製を示す。重要なことに、NlucとVenusの発現により、感染したマウスのインビボ およびエクスビボでのウイルス感染を直接追跡することができます。これらのrSARS-CoV-2/NlucおよびrSARS-CoV-2/Venusは、 生体内でSARS-CoV-2の生物学を研究し、ウイルス感染および関連するCOVID-19疾患を理解し、SARS-CoV-2感染と戦うための効果的な予防的および/または治療的治療法を特定するための優れた選択肢です。

K18 hACE2トランスジェニックマウスにおけるrSARS-CoV-2/Nluc感染(図1 および図2) 図1Aは、インビボでの感染を評価するために使用されるrSARS-CoV-2/WT(上)およびrSARS-CoV-2/Nluc(下)の概略図を示す。図1Bは、K18 hACE2トランスジェニックマウスにおけるrSARS-CoV-2/Nluc感染動態を評価するために適用された概略?...

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Live Imaging and Quantification of Viral Infection in K18 hACE2 Transgenic Mice Using Reporter-Expressing Recombinant SARS-CoV-2

このプロトコルは、インビボでSARS-CoV-2感染を研究するために必要な二次的アプローチの必要性を克服するために、K18 hACE2トランスジェニックマウスにおけるルシフェラーゼおよび蛍光発現組換え(r)SARS-CoV-2およびインビボイメージングシステム(IVIS)を用いたウイルス感染のダイナミクスを記述している。

レポーター発現組換えSARS-CoV-2を用いたK18 hACE2トランスジェニックマウスにおけるウイルス感染のライブイメージングと定量

The coronavirus disease 2019 (COVID-19) pandemic has been caused by severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2). To date, SARS-CoV-2 has ...

我々のプロトコールは、SARS-CoV-2感染のK18ヒトACE2トランスジェニックマウスモデルにおけるin vivoおよびex vivoライブイメージングウイルス検出およびウイルス追跡のための蛍光または発光発現組換えSARS-CoV-2の使用を記載した。この技術の主な利点は、K18ヒトACE2トランスジェニックマウスモデルにおけるSARS-CoV-2のin vivoおよびex vivo研究のためのウイルス検出および追跡の適用および実現可能性である。K18ヒトACE2トランスジェニックマウスモデルにおけるSARS-CoV-2のインビボイメージングの使用は、インビボでのSARS-CoV-2感染の治療のための治療薬を評価するための優れた選択肢を表す。レポーターSARS-CoV-2の実施は、病原性、ウイルス複製、およびインビボでの栄養症を評価するための優れた選択肢を表す。SARS-CoV-2を発現するルシフェラーゼを用いたin vivo研究では、生物発光シグナルを改善するために、マウスを剃毛し、基質注入後に迅速なイメージングを行うことが推奨される。in vivoイメージングシステム(IVIS)を開始し、パラメータを設定し、画像モードをクリックして生物発光をクリックしてからフィルターを開き、露光時間を自動に設定することで、生物発光モニタリングを開始します。次に、既に剃毛して麻酔したマウスを隔離チャンバから取り出し、25ゲージ針を用いて、PBSで1〜10希釈したルシフェラーゼ基質100マイクロリットルをマウスに後眼窩的に投与する。次に、マウスを隔離チャンバに戻し、低体温を防止するための発熱部品を備えたIVISマシンに隔離チャンバを移し、IVISイメージャのドアを閉じて、ソフトウェアプログラムで[取得]を選択してイメージングを初期化します。取得した生物発光画像を解析するには、ソフトウェアのROIまたは関心領域ツールを使用して、正確な信号を指定し、フラックスを測定します。イメージングソフトウェアを起動し、パラメータを設定します。画像モードを蛍光にクリックし、励起フィルターを500ナノメートル、発光フィルターを530ナノメートルに設定し、露光時間を自動に設定します。 壊死検査を行い、マウスから肺を切除します。切除した肺を2ミリリットルの1X PBSを含む6ウェルプレートに入れ、すすぎ洗いして余分な血液を除去します。70%エタノールを使用してサンプル間の手術器具を消毒し、清掃する。IVISマシンを初期化した後、肺を黒いシートの上に置き、組織を互いに分離する。次に、トレイをバイオセーフティキャビネット内の隔離チャンバ内に置き、隔離チャンバをIVISに移します。IVISイメージャのドアを閉じ、集録をクリックしてイメージングシステムを開始します。蛍光を分析するには、ROIツールを利用し、個々の肺の周囲にROIを描画します。各ROIを手動で測定し、与えられた平均放射効率値を使用して、偽感染マウスから差し引く。イメージングが完了したら、ドライアイス凍結用のクライオチューブに組織を入れて、後で処理するためにマイナス 80 °Cで保存します。組織ホモジネートから得られたスーパーネートを利用して、10倍の段階希釈を行い、各上清希釈液の1ミリリットルを3連でベロE6細胞のコンフルエント単層に感染させる。加湿された5%二酸化炭素インキュベーター内で37°Cで1時間ウイルスを吸着させます。完了したら、1ミリリットルの1X PBSで細胞を洗浄し、次いで、摂氏37度の加湿5%二酸化炭素インキュベーター内で、1%寒天を含む2ミリリットルの感染後培地中で細胞を72時間インキュベートする。インキュベーション後、プレートを10%中性緩衝ホルマリンで摂氏4度で24時間不活性化し、プレート全体が水没することを確認します。バイオセーフティレベル3からプレートを取り出し、室温で10分間、1ミリリットルの0.5%Triton X-100で細胞を3回洗浄する。次に、透過処理した細胞を1ミリリットルのウシ血清アルブミンまたはBSAおよびPBSで摂氏37度で1時間ブロックし、続いて2.5BSAで希釈したSARS-CoVヌクレオカプシドタンパク質交差反応性モノクローナル抗体1C7C7を1ミリリットルあたり1ミリリットルの37°Cで1時間インキュベートした。1ミリリットルの1X PBSで細胞を3回洗浄し、製造元の指示に従ってABCおよびジアミノベンゼン、またはDABペルオキシダーゼ基質キットを使用してプラークを発生させ、ウイルス力価を1ミリリットルあたりのプラーク形成単位として計算する。この研究では、生物発光性ナノルシフェラーゼ(Nluc)は容易に検出され、rSARS-CoV-2 Nlucに感染したマウスは観察されたが、rSARS-CoV-2野生型または偽感染マウスは感染しなかった。定量分析は、感染後の異なる日におけるNluc強度を示した。rSARS-CoV-2 Nlucに感染したマウスの肺表面上の肉眼病変は、rSARS-CoV-2野生型感染群の病変と同程度であった。さらに、ウイルス力価が検出され、rSARS-CoV-2 Nluc感染マウスは、感染後の異なる日にすべての臓器においてrSARS-CoV-2野生型に感染したものと同等であった。同時に、Nluc活性は、rSARS-CoV-2 Nluc感染マウスからの器官においてのみ検出された。偽感染マウスおよびウイルス感染マウスの別群を、体重および生存率の変化について12日間モニターした。rSARS-CoV-2 NlucおよびrSARS-CoV-2野生型に感染したマウスは、体重の最大25%を失い、感染後7〜8日間にウイルス感染に屈した。rSARS-CoV-2金星感染後、rSARS-CoV-2金星に感染したマウスからすべての肺で金星の発現が容易に検出されたが、rSARS-CoV-2野生型または偽感染型に感染したマウスでは検出されなかった。定量的分析により、金星強度は感染後2日目にピークに達し、感染過程および感染マウスの肺にわたって減少することが示された。肺表面の画像は、rSARS-CoV-2金星に感染したマウスの肉眼的病変を明らかにし、rSARS-CoV-2野生型感染マウスのそれと同程度であった。また、rSARS−CoV−2金星への感染は、全ての器官においてrSARS−CoV−2野生型に感染したマウスにおいて観察されたものと同等のウイルス力価をもたらした。rSARS-CoV-2金星およびrSARS-CoV-2野生型に感染したマウスは、体重の最大25%を失い、感染後9日目までにウイルス感染に屈し、生存しなかった。SARS-CoV-2を発現するレポーターの結果は、ウイルス感染の有効な代理であることを示している。したがって、これはSARS-CoV-2感染の治療のための対策の迅速な同定と評価につながる可能性があります。

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host

In vivo Imaging of Transgenic Leishmania Parasites in a Live Host

ライブホストのトランスジェニックリーシュマニア原虫のin vivoイメージング

Distinct species of Leishmania, a protozoan parasite of the family Trypanosomatidae, typically cause different human disease manifestations. The most ...

Production and Titering of Recombinant Adeno-associated Viral Vectors

組換えアデノ随伴ウイルスベクターの産生と力価測定

In recent years recombinant adeno-associated viral vectors (AAV) have become increasingly valuable for in vivo studies in animals, and are also currently ...

A Luciferase-fluorescent Reporter Influenza Virus for Live Imaging and Quantification of Viral Infection

ウイルス感染のライブイメージングと定量化のためのルシフェラーゼ蛍光レポーターインフルエンザウイルス

Influenza A viruses (IAVs) cause human respiratory disease that is associated with significant health and economic consequences. As with other viruses, ...

Visualization of SARS-CoV-2 using Immuno RNA-Fluorescence In Situ Hybridization

SITUハイブリダイゼーションにおける免疫RNA-蛍光を用いたSARS-CoV-2の可視化

This manuscript provides a protocol for in situ hybridization chain reaction (HCR) coupled with immunofluorescence to visualize severe acute respiratory ...

Detection of SARS-CoV-2 Neutralizing Antibodies using High-Throughput Fluorescent Imaging of Pseudovirus Infection

疑似ウイルス感染のハイスループット蛍光イメージングを用いたSARS-CoV-2中和抗体の検出

As the COVID-19 pandemic caused by severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (SARS-CoV-2) continues to evolve, it has become evident that the ...

A Rapid, Multiplex Dual Reporter IgG and IgM SARS-CoV-2 Neutralization Assay for a Multiplexed Bead-Based Flow Analysis System

多重化ビードベースの流れ分析システムのための高速多重デュアルレポーターIgGおよびIgM SARS-CoV-2中和アッセイ

The COVID-19 pandemic has underscored the need for rapid high-throughput methods for sensitive and specific serological detection of infection with novel ...

Detection of SARS-CoV-2 Receptor-Binding Domain Antibody using a HiBiT-Based Bioreporter

HiBiTベースバイオレポーターを用いたSARS-CoV-2受容体結合ドメイン抗体の検出

The emergence of the COVID-19 pandemic has increased the need for better serological detection methods to determine the epidemiologic impact of severe ...

Efficient SARS-CoV-2 Quantitative Reverse Transcriptase PCR Saliva Diagnostic Strategy utilizing Open-Source Pipetting Robots

オープンソースピペッティングロボットを活用した効率的なSARS-CoV-2定量逆転写酵素PCR唾液診断戦略

The emergence of the recent SARS-CoV-2 global health crisis introduced key challenges for epidemiological research and clinical testing. Characterized by ...

Quantifying Vaccine-Induced Neutralizing Antibodies in SARS-CoV-2 Variants

Application of Ha-CoV-2 Pseudovirus for Rapid Quantification of SARS-CoV-2 Variants and Neutralizing Antibodies

Author Spotlight: A Pseudotype Virus System for Assessing Omicron Subvariants and Neutralizing Antibodies in SARS-CoV-2 Research

The coronavirus disease 2019 pandemic (COVID-19) has highlighted the need for rapid assays to accurately measure the infectivity of emerging SARS-CoV-2 ...

Assessing Serum Neutralization Against SARS-CoV-2 with Pseudotyped Viruses

Pseudotyped Viruses As a Molecular Tool to Monitor Humoral Immune Responses Against SARS-CoV-2 Via Neutralization Assay

Studying Host-Virus Interactions with Pseudotyped Viruses (Video) | JoVE

中和アッセイを介してSARS-CoV-2に対する体液性免疫応答を監視するための分子ツールとしての偽型ウイルス

Pseudotyped viruses (PVs) are molecular tools that can be used to study host-virus interactions and to test the neutralizing ability of serum samples, in ...