Name: injection of porcine adipose tissue-derived stroma cells via waterjet technology
Uploaded: 2021-11-23T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Injection of Porcine Adipose Tissue-Derived Stroma Cells via Waterjet Technology at JoVE.com

Vi takker vores medforfattere fra de originale publikationer for deres hjælp og støtte.

Svines fedtvævsprøverne blev opnået fra Institut for Eksperimentel Kirurgi ved universitetet i Tuebingen. Alle forsøg blev godkendt af de lokale dyrevelfærdsmyndigheder under dyreforsøgsnummer CU1/16.
1. Isolering af svines fedtvævsafledte stromalceller
<ol><li>Brug svinediposevæv leveret fra Institut for Eksperimentel Kirurgi i et 50 ml centrifugerør til laboratoriet.</li>
	<li>Overfør vævet til en steril petriskål under den sterile bænk og hak det med to skalp...

I den foreliggende undersøgelse demonstrerede og præsenterede vi en trinvis tilgang til WJ-celleleveringsprocedure og anvendte en efterfølger af kvantitative undersøgelser for at vurdere effekten af WJ-levering på cellulære egenskaber: cellulær levedygtighed og biomekaniske egenskaber (dvs. EM). Efter WJ-injektion var 85,9% af de høstede celler levedygtige. Med hensyn til WN-injektion bevarede 97,2% af cellerne deres levedygtighed efter injektion. WJ-tilgangen opfylder således et absolut krav til en klinisk impl...

Urininkontinens (UI) er en udbredt lidelse med en prævalens på 1,8 - 30,5% i europæiske populationer1 og er primært karakteriseret ved funktionsfejl i urinrørets lukkemuskel. Fra et klinisk perspektiv tilbydes kirurgisk behandling ofte til patienter, når konservative terapier eller fysioterapi ikke adresserer og lindrer de nye symptomer.
Celleterapi til potentiel regenerativ reparation af lukkemuskelkompleksets funktionsfejl er opstået som en avantgarde-tilgang til behandling af UI-patologi 2,3. Dets hovedmål er at erstatte, reparere og genoprette det beskadigede vævs biologiske funktionalitet. I dyremodeller for UI har stamcelletransplantation vist lovende resultater i urodynamiske resultater 2,4,5. Stamceller opstår som optimale cellulære kandidater, da de har evnen til at gennemgå selvfornyelse og multipotent differentiering, hvilket hjælper den berørte vævsregenerering6. På trods af det kommende regenerative potentiale er den praktiske anvendelse af celleterapi fortsat hæmmet, da minimalt invasiv levering af celler stadig står over for flere udfordringer med hensyn til injektionspræcision og dækning af målet. Selvom den nuværende tilgang, der anvendes til cellelevering, er injektion gennem et nålesprøjtesystem7, resulterer det normalt i et samlet underskud af levedygtige celler med rapporterede levedygtigheder så lave som 1% - 31% efter transplantation8. Derudover har cellelevering via nåleinjektion også vist sig at påvirke placeringen, retentionshastigheden samt fordelingen af transplanterede celler i det målrettede væv 9,10,11. En gennemførlig, ny tilgang, der overvinder ovennævnte begrænsning, er den nålefri cellelevering via vandstråleteknologi.
Waterjet (WJ) teknologi dukker op som en ny tilgang, der muliggør høj gennemstrømning levering af celler ved cystoskop under visuel kontrol i urinrøret sphincter12,13. WJ muliggør cellelevering ved forskellige tryk (E = effekter i bar) lige fra E5 til E8013. I den første fase påføres (vævsindtrængningsfase) isotonisk opløsning med højt tryk (dvs. E60 eller E80) for at løsne den ekstracellulære matrix, der omgiver vævet målrettet og åbne små sammenkoblede mikrolakuner. I anden fase (injektionsfasen) sænkes trykket inden for millisekunder (dvs. op til E10) for forsigtigt at levere cellerne ind i det målrettede væv. Efter denne totrinspåføring udsættes cellerne ikke for yderligere tryk mod vævet, når de skubbes ud, men flyder i en lavtryksstrøm ind i et væskefyldt hulrum13. I en ex vivo-modelindstilling, hvor stamceller blev injiceret via WJ i kadaverisk urinrørsvæv, kunne levedygtige celler efterfølgende aspireres og hentes fra vævet og udvides yderligere in vitro13. Selvom en undersøgelse fra 2020 af Weber et al. viste WJ's gennemførlighed og anvendelighed til at levere fodaftryksfrie kardiomyocytter i myokardiet14, skal man huske på, at WJ-teknologien stadig er i et prototypestadium.
Følgende protokol beskriver, hvordan man forbereder og mærker svineafledte stromalceller (pADSC), og hvordan man leverer dem til indfangningsvæske og kadavervæv via WJ-teknologi og Williams cystoskopi nåle (WN). Efter cellulær injektion vurderes den cellulære vitalitet og elasticitet via atomkraftmikroskopi (AFM). Via trinvise instruktioner giver protokollen en klar og kortfattet tilgang til at erhverve pålidelige data. Diskussionsafsnittet præsenterer og beskriver teknikkens store fordele, begrænsninger og fremtidsperspektiver. WJ-leveringen af celler såvel som de efterfølgende analyser efter oversættelse, der er rapporteret her, erstatter standardnålinjektionen og giver en solid celleleveringsramme til regenerativ heling af målvævet. I vores nylige undersøgelser fremlagde vi bevis for, at WJ leverede celler mere præcist og i det mindste med sammenlignelig levedygtighed sammenlignet med nåleinjektioner15,16.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>50 mL centrifuge tube</td>
			<td>Greiner BioOne</td>
			<td>227261</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL BD Luer-LokTM Syringe</td>
			<td>BD Plastik Inc</td>
			<td>n.a.</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 &#181;m cell sieve</td>
			<td>Greiner BioOne</td>
			<td>542000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 mL centrifuge tube</td>
			<td>Greiner BioOne</td>
			<td>188271</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>75 cm2 tissue culture flask</td>
			<td>Corning Incorporated</td>
			<td>353136</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AFM head</td>
			<td>(CellHesion 200) JPK</td>
			<td>JPK00518</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AFM processing software</td>
			<td>Bruker</td>
			<td>JPK00518</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AFM software</td>
			<td>Bruker</td>
			<td>JPK00518</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AFM system Cell Hesion 200</td>
			<td>Bruker</td>
			<td>JPK00518</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>All-In-One-Al cantilever</td>
			<td>Budget Sensors</td>
			<td>AIO-10</td>
			<td>tip A, Conatct Mode, Shape: Beam 
			Force Constant: 0.2 N/m (0.04 - 0.7 N/m) 
			Resonance Frequency: 15 kHz (10 - 20 kHz) 
			Length: 500 &#181;m (490 - 510 &#181;m) 
			Width: 30 &#181;m (35 - 45 &#181;m) 
			Thickness: 2.7 &#181;m (1.7 - 3.7 &#181;m)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amphotericin B solution</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A2942</td>
			<td>250 &#181;g/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atomic Force Microscope (AFM)</td>
			<td>CellHesion 200, JPK Instruments, Berlin, Germany</td>
			<td>JPK00518</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Microlance 3 18G</td>
			<td>BD</td>
			<td>304622</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bovine serum albumin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A10008-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cantilever</td>
			<td>&#160;All-In-One-AleTl, Budget Sensors, Sofia, Bulgaria</td>
			<td>AIO-TL-10</td>
			<td>tip A, k &#188; 0.2 N/m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C-chip disposable hemocytometer</td>
			<td>NanoEnTek</td>
			<td>631-1098</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>centrifuge: Rotina 420R</td>
			<td>Hettich Zentrifugen</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase, Type I, powder</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17100-017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s Modified Eagle&#8217;s Medium - low glucose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D5546</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Feather disposable scalpel (No. 10)</td>
			<td>Feather</td>
			<td>02.001.30.010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F7524</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES sodium salt solution (1 M)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H3662</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inverted phase contrast microscope (Integrated with AFM)</td>
			<td>AxioObserver D1, Carl Zeiss Microscopy, Jena, Germany</td>
			<td>L201306_03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>laboratory bags</td>
			<td>Brand</td>
			<td>759705</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leibovitz&#39;s L-15 medium without l-glutamine</td>
			<td>Merck</td>
			<td>F1315</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leibovitz&#39;s L-15 medium without L-glutamine</td>
			<td>(Merck KGaA, Darmstadt, Germany)</td>
			<td>F1315</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-glutamine</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>BE 17-605C1</td>
			<td>200 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LIVE/DEADTM Viability/Cytotoxicity Kit</td>
			<td>Invitrogen by Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>L3224</td>
			<td>Calcein AM and EthD-1 are used from this kit.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope software: Zen 2.6</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope: AxioVertA.1</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nelaton-Catheter female</td>
			<td>Bicakcilar</td>
			<td>19512051</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td>10000 U/ml Penicillin 
			10000 &#181;g/ml Streptomycin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish heater associated with AFM</td>
			<td>Bruker</td>
			<td>T-05-0117</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish heater associated with AFM</td>
			<td>JPK Instruments AG, Berlin, Germany</td>
			<td>T-05-0117</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline (PBS)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10010-015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Statistical Software: SPSS Statistics 22</td>
			<td>IBM</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Petri dish - CellStar</td>
			<td>Greiner BioOne</td>
			<td>664160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture dishes</td>
			<td>TPP AG</td>
			<td>TPP93040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture dishes</td>
			<td>TPP Techno Plastic Products AG, Trasadingen, Switzerland</td>
			<td>TPP93040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan Blue 0.4% 
			0.85% NaCl</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>17-942E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA solution</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T3924</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Waterjet: ERBEJET2 device</td>
			<td>Erbe Elektromedizin GmbH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Williams Cystoscopic Injection Needle</td>
			<td>Cook Medical</td>
			<td>G14220</td>
			<td>23G, 5.0 Fr, 35 cm</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

injection of porcine adipose tissue-derived stroma cells via waterjet technology

Urininkontinens (UI) er en meget udbredt tilstand karakteriseret ved manglen på urinrørets lukkemuskel. Regenerative medicingrene, især celleterapi, er nye tilgange til at forbedre og genoprette urinrørets lukkemuskelfunktion. Selvom injektion af aktive funktionelle celler rutinemæssigt udføres i kliniske omgivelser med nål og sprøjte, har disse tilgange betydelige ulemper og begrænsninger. I denne sammenhæng er nålefri vandstråleteknologi (WJ) en gennemførlig og innovativ metode, der kan injicere levedygtige celler ved visuel guidet cystoskopi i urinrørsfinkteren. I den foreliggende undersøgelse brugte vi WJ til at levere svinesvindvævsafledte stromalceller (pADSC'er) til kadaverisk urinrørsvæv og undersøgte efterfølgende effekten af WJ-levering på celleudbytte og levedygtighed. Vi vurderede også de biomekaniske egenskaber (dvs. elasticitet) ved hjælp af atomkraftmikroskopi (AFM) målinger. Vi viste, at WJ leverede pADSC'er blev signifikant reduceret i deres cellulære elasticitet. Levedygtigheden var signifikant lavere sammenlignet med kontroller, men er stadig over 80 %.

Efter cellelevering via de to tilgange var levedygtigheden af celler leveret gennem WN (97,2 ± 2%, n = 10, p<0,002) højere sammenlignet med injektioner fra WJ ved hjælp af E60-10-indstillingerne (85,9 ± 0,16%, n = 12) (figur 2). Biomekaniske vurderingsresultater viste, at: WN-injektioner af celler i indfangningsvæske viste ingen signifikant forskel med hensyn til det elastiske modul (EM; 0,992 kPa) sammenlignet med kontrollerne (1,176 kPa; Figur 3A), mens W...

Watch this Scientific Journal Video about Injection of Porcine Adipose Tissue-Derived Stroma Cells via Waterjet Technology at JoVE.com

Injection of Porcine Adipose Tissue-Derived Stroma Cells via Waterjet Technology

Vi præsenterer en metode til celleinjektion via nålefri vandstråleteknologi kombineret med en efterfølger af undersøgelser efter levering med hensyn til cellulær levedygtighed, proliferation og elasticitetsmålinger.

Injektion af svines fedtvævsafledte stromaceller via Waterjet-teknologi

Urinary incontinence (UI) is a highly prevalent condition characterized by the deficiency of the urethral sphincter muscle. Regenerative medicine ...

Waterjet-injektioner af aktive komponenter, såsom væsker, nanopartikler, mikropartikler, indkapslede lægemidler eller endda levende celler, kan anvendes meget mere præcist sammenlignet med nåleinjektioner i forskellige væv, der er målrettet. Minimalt invasive tilgange kræver præcis lokalisering af medicinen i forudbestemte lag af det målrettede væv ved at forudvælge injektionstryk. Vores nuværende fokus er celleterapi mod urininkontinens.Denne teknik er imidlertid allerede blevet udvidet til regenerering af inficeret muskelvæv efter alvorlige hjerteanfald. På nuværende tidspunkt kan teknikken kun anvendes af erfarne forskere eller autoriserede læger i prækliniske undersøgelser. Det er ikke beregnet til at blive brugt i rutinemæssige laboratorieprocedurer, da det er udviklet til fremtidige kliniske formål.Til at begynde med skal du placere urinrøret med forbindelsesblæren dissekeret fra en voksen kvindelig landrace gris på en svamp, der efterligner elasticiteten i den nedre bækkenbund. Brug derefter blæren til at bestemme urinrørets orientering. Dette er muligt på grund af lokaliseringen af urinlederen og de tre ledbånd, som fastgør blæren i mave- og bækkenhulen.Efter korrekt orientering af urinrøret skal du skære det åbent i længderetningen på den dorsale side ved hjælp af et kateter. Efter justering af celletætheden af svinediposevævsafledte stromalceller til 2,4 gange 10 til de sjette celler pr. Milliliter, mærke cellerne med en grøn fluorescerende membrangennemtrængelig levende celleplet, derefter aspirere cellesuspensionen med sprøjten og påfør Williams cytoskopiske injektionsnål. Dernæst skal du enten holde nålen kort over de to milliliter vækstmedier i et 15 ml centrifugeringsrør eller indsætte nålen i det åbne urinrørsvæv.I begge tilfælde injiceres manuelt 250 mikroliter af cellesuspensionen. Celler injiceret i det kadaveriske urinrør fra en injektionskuppel. Saml cellerne injiceret i medierne direkte ved centrifugering.For celler, der injiceres i det kadaveriske urinrør, aspirerer dem ud af injektionskuplen med en 18 gauge nål påført på en sprøjte. Overfør de aspirerede celler til et centrifugeringsrør og pellet dem ved centrifugering. Resuspend begge cellepiller i fire milliliter vækstmedier.For at bestemme celleudbytte og levedygtighed blandes 20 af cellesuspensionen grundigt med 20 mikroliter trypanblå. Fyld derefter 10 mikroliter af denne blanding i hvert kammer i hæmocytometeret. Under et mikroskop tæller cellerne i alle fire hjørnefirkanter.Tæl de ikke-plettede hvide celler som levedygtige celler og de blå farvede celler som døde celler, og beregn derefter celletallet pr. Milliliter. For injektioner via vandstrålen justeres densiteten af svines fedtvævsafledte stromalceller til seks gange 10 til sjette celler pr. Milliliter. Mærk dem som påvist tidligere, og fyld cellesuspensionen i doseringsenheden på den nålefri vandstråleanordning.Hold derefter enten injektionsdysen kort over de to milliliter vækstmedier i et 15 ml centrifugeringsrør eller kort over det åbne urinrørsvæv. I begge tilfælde injiceres 100 mikroliter af cellesuspensionen. Brug højt tryk til vævsindtrængning efterfulgt af en lavtryksfase til celleinjektioner.Celler injiceret i det kadaveriske urinrør danner en injektionskuppel. Saml celler injiceret i medierne direkte ved centrifugering. For celler, der injiceres i det kadaveriske urinrør, aspirerer dem ud af injektionskuplen.Overfør de aspirerede celler til et centrifugeringsrør, og pelleter dem ved hjælp af centrifugering som vist tidligere. Efter centrifugering skal du genbruge begge pellets i fire milliliter vækstmedier. Frø cellerne hentet efter injektioner i vævskulturskåle med en tæthed på fem gange 10 til de femte celler pr. Skål.Efter en tre timers inkubation ved 37 grader Celsius, og lige før AFM-målingen, skal vækstmediet udskiftes med tre milliliter Leibovitz' L-15-medier uden L-glutamin. For at måle elasticiteten af de enkelte celler skal du visuelt identificere en celle og fokusere på den. Placer derefter computermusen midt i cellen, og for at forbedre målepræcisionen skal du placere AFM-spidsen direkte over cellekernen.Fokuser derefter på udkragningen og flyt den på computermusen. Start derefter målingen med kør og mål mindst 50 celler. Sætpunktsparameteren opnået ved kalibrering af udkragningen anvendes, og en celle måles tre gange.Levedygtigheden af celler leveret gennem Williams-nålen var højere end injektioner fra vandstrålen ved hjælp af E60-10-indstillingerne. Biomekanisk vurdering af injektioner i indfangningsvæsken afslørede, at Williams nåleinjektioner ikke viste nogen signifikant forskel i det elastiske modul sammenlignet med kontroller, mens vandstråleinjektionerne signifikant reducerede det cellulære elastiske modul med 40 til 50%Tilsvarende i kadaveriske urinrørsvævsprøver gav Williams nåleinjektioner ingen signifikant forskel i cellulær elastisk moduli sammenlignet med kontroller. Der blev dog observeret en signifikant reduktion på 51 % efter vandstråleinjektioner.Man skal kun sørge for, at nåleinjektionerne ikke trænger helt ind i det væv, der forårsager skade. Med waterjet skal man kun placere enheden i den rigtige position i injektionsområdet, mens resten automatisk udføres af selve enheden. Da waterjet-enheden blev udviklet til at matche og passe ind i endoskopiske enheder, kan du bruge waterjet-applikationerne til ethvert sted i kroppen, som kan nås med disse cystoskopiske eller endoskopiske teknologier til at regenerere væv og udføre reparationsjobbet.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Transplantation of Induced Pluripotent Stem Cell-derived Mesoangioblast-like Myogenic Progenitors in Mouse Models of Muscle Regeneration

Transplantation af induceret pluripotente stamcelle-afledt Mesoangioblast-lignende Myogenic Stamfadere i Mouse Modeller af muskel regenerering

Patient-derived iPSCs could be an invaluable source of cells for future autologous cell therapy protocols. iPSC-derived myogenic stem/progenitor cells ...

Human Cartilage Tissue Fabrication Using Three-dimensional Inkjet Printing Technology

Menneskelige bruskvæv Fabrication Brug Tre-dimensionel Inkjet Printing Technology

Bioprinting, which is based on thermal inkjet printing, is one of the most attractive enabling technologies in the field of tissue engineering and ...

An Injectable and Drug-loaded Supramolecular Hydrogel for Local Catheter Injection into the Pig Heart

En injicerbar and Drug-loaded Supramolekylær Hydrogel for Local kateter injektion i Pig Heart

Regeneration of lost myocardium is an important goal for future therapies because of the increasing occurrence of chronic ischemic heart failure and the ...

Isolation of Murine Adipose Tissue-derived Microvascular Fragments as Vascularization Units for Tissue Engineering

Isolering af murine fedtvæv-afledte mikrovaskulær Fragmenter som Vaskularisering Enheder til Tissue Engineering

A functional microvascular network is of pivotal importance for the survival and integration of engineered tissue constructs. For this purpose, several ...

Generic Protocol for Optimization of Heterologous Protein Production Using Automated Microbioreactor Technology

Generisk protokol for optimering af heterolog Protein produktion ved hjælp af automatiserede Microbioreactor teknologi

A core business in industrial biotechnology using microbial production cell factories is the iterative process of strain engineering and optimization of ...

Microdissection of Primary Renal Tissue Segments and Incorporation with Novel Scaffold-free Construct Technology

Microdissection af primær Renal væv segmenter og iblandingen med romanen stillads-fri konstruktion teknologi

Kidney transplantation is now a mainstream therapy for end-stage renal disease. However, with approximately 96,000 people on the waiting list and only ...

Isolation and Decellularization of a Whole Porcine Pancreas

Isolation og Decellularization af en hele svin bugspytkirtel

Tissue engineering of the whole pancreas can improve current treatments for diabetes mellitus. The ultimate goal is to tissue engineer pancreas from an ...

High-resolution Imaging of Nuclear Dynamics in Live Cells under Uniaxial Tensile Strain

High-Resolution Imaging af nuklear dynamik i levende celler under Uniaxial træk stamme

Extracellular mechanical strain is known to elicit cell phenotypic responses and has physiological relevance in several tissue systems. To capture the ...

Encapsulated Cell Technology for the Delivery of Biologics to the Mouse Eye

Indkapslet celleteknologi til levering af biologi til museøjet

Many current therapeutics under development for diseases of the posterior pole of the eye are biologics. These drugs need to be administered frequently, ...

Pancreatic Tissue-Derived Extracellular Matrix Bioink for Printing 3D Cell-Laden Pancreatic Tissue Constructs

Pancreasvæv-afledte ekstracellulære matrix Bioink til udskrivning 3D celle-lastet pancreas væv konstruktioner

The transplantation of pancreatic islets is a promising treatment for patients who suffer from type 1 diabetes accompanied by hypoglycemia and secondary ...