Name: injection of porcine adipose tissue-derived stroma cells via waterjet technology
Uploaded: 2021-11-23T15:00:00
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हम मूल प्रकाशनों से हमारे सह-लेखकों को उनकी मदद और समर्थन के लिए धन्यवाद देते हैं।

पोर्सिनी वसा ऊतक के नमूने Tuebingen विश्वविद्यालय में प्रयोगात्मक सर्जरी के लिए संस्थान से प्राप्त किए गए थे। सभी प्रक्रियाओं को पशु प्रयोग संख्या CU1/16 के तहत स्थानीय पशु कल्याण अधिकारियों द्वारा अनुमोदित ?...

वर्तमान अध्ययन में, हमने डब्ल्यूजे सेल डिलीवरी प्रक्रिया के लिए एक चरण-दर-चरण दृष्टिकोण का प्रदर्शन किया और प्रस्तुत किया और सेलुलर विशेषताओं पर डब्ल्यूजे वितरण के प्रभाव का आकलन करने के लिए मात्रात?...

मूत्र असंयम (यूआई)यूरोपीय आबादी 1 में 1.8 - 30.5% की व्यापकता के साथ एक व्यापक विकार है और मुख्य रूप से मूत्रमार्ग स्फिंक्टर की खराबी की विशेषता है। नैदानिक परिप्रेक्ष्य से, सर्जिकल उपचार अक्सर रोगियों को पेश किया जाता है जब रूढ़िवादी उपचार या भौतिक चिकित्सा उभरते लक्षणों को संबोधित करने और कम करने में विफल रहती है।
स्फिंक्टर जटिल खराबी की संभावित पुनर्योजी मरम्मत के लिए सेल थेरेपी यूआई पैथोलॉजी 2,3 के उपचार के लिए एक अवंत-गार्डे दृष्टिकोण के रूप में उभर रही है। इसका मुख्य लक्ष्य क्षतिग्रस्त ऊतक की जैविक कार्यक्षमता को प्रतिस्थापित करना, मरम्मत करना और पुनर्स्थापित करना है। यूआई के लिए पशु मॉडल में, स्टेम सेल प्रत्यारोपण ने यूरोडायनामिक परिणामों में आशाजनक परिणाम दिखाएहैं 2,4,5। स्टेम कोशिकाएं इष्टतम सेलुलर उम्मीदवारों के रूप में उत्पन्न होती हैं क्योंकि उनके पास आत्म-नवीकरण और बहु-शक्तिशाली भेदभाव से गुजरने की क्षमता होती है, इस प्रकार, प्रभावित ऊतक पुनर्जनन 6 की सहायता करताहै। आगामी पुनर्योजी क्षमता के बावजूद, सेल थेरेपी का व्यावहारिक उपयोग बाधित रहता है क्योंकि कोशिकाओं के न्यूनतम इनवेसिव वितरण को अभी भी इंजेक्शन परिशुद्धता और लक्ष्य के कवरेज से संबंधित कई चुनौतियों का सामना करना पड़ता है। भले ही सेल डिलीवरी के लिए उपयोग किया जाने वाला वर्तमान दृष्टिकोण सुई-सिरिंज सिस्टम7 के माध्यम से इंजेक्शन है, लेकिन इसके परिणामस्वरूप आमतौर पर व्यवहार्य कोशिकाओं की समग्र कमी होती है, जिसमें 1% - 31% पोस्ट-ट्रांसप्लांटेशन8 के रूप में कम होने की रिपोर्ट की गई है। इसके अलावा, सुई इंजेक्शन के माध्यम से सेल वितरण को प्लेसमेंट, प्रतिधारण दर, साथ ही लक्षित ऊतक 9,10,11 में प्रत्यारोपित कोशिकाओं के वितरण को प्रभावित करने के लिए भी दिखाया गया है। एक व्यवहार्य, उपन्यास दृष्टिकोण जो उपर्युक्त सीमा को दूर करता है, वह पानी-जेट तकनीक के माध्यम से सुई-मुक्त सेल वितरण है।
वाटरजेट (डब्ल्यूजे) तकनीक एक नए दृष्टिकोण के रूप में उभर रही है जो मूत्रमार्ग स्फिंक्टर12,13 में दृश्य नियंत्रण के तहत सिस्टोस्कोप द्वारा कोशिकाओं के उच्च थ्रूपुट वितरण को सक्षम बनाती है। WJ E5 से E8013 तक के विभिन्न दबावों (E = बार में प्रभाव) पर सेल वितरण को सक्षम बनाता है। पहले चरण में, (ऊतक प्रवेश चरण) आइसोटोनिक समाधान को उच्च दबाव (यानी, E60 या E80) के साथ लागू किया जाता है ताकि लक्षित ऊतक के आसपास के बाह्य कोशिकीय मैट्रिक्स को ढीला किया जा सके और छोटे इंटरकनेक्टिंग माइक्रो-लैकुने को खोला जा सके। दूसरे चरण (इंजेक्शन चरण) में, दबाव को मिलीसेकंड (यानी, ई 10 तक) के भीतर कम किया जाता है ताकि कोशिकाओं को धीरे से लक्षित ऊतक में वितरित किया जा सके। इस दो चरण-चरण अनुप्रयोग के बाद, कोशिकाओं को बाहर निकाले जाने पर ऊतक के खिलाफ अतिरिक्त दबाव के अधीन नहीं किया जाता है, लेकिन एक तरल-भरे गुफाक्षेत्र13 में कम दबाव वाली धारा में तैर रहे हैं। एक पूर्व विवो मॉडल सेटिंग में जहां स्टेम कोशिकाओं को डब्ल्यूजे के माध्यम से कैडेवरिक मूत्रमार्ग ऊतक में इंजेक्ट किया गया था, व्यवहार्य कोशिकाओं को बाद में एस्पिरेटेड किया जा सकता है और ऊतक से पुनर्प्राप्त किया जा सकता है और विट्रो13 में आगे बढ़ाया जा सकता है। हालांकि वेबर एट अल द्वारा 2020 के एक अध्ययन ने मायोकार्डियम14 में पदचिह्न-मुक्त कार्डियोमायोसाइट्स वितरित करने के लिए डब्ल्यूजे की व्यवहार्यता और प्रयोज्यता का प्रदर्शन किया, लेकिन यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि डब्ल्यूजे तकनीक अभी भी एक प्रोटोटाइप चरण में है।
निम्नलिखित प्रोटोकॉल का वर्णन करता है कि पोर्सिनी वसा ऊतक-व्युत्पन्न स्ट्रोमल कोशिकाओं (पीएडीएससी) को कैसे तैयार और लेबल किया जाए और उन्हें डब्ल्यूजे प्रौद्योगिकी और विलियम्स सिस्टोस्कोपी सुइयों (डब्ल्यूएन) के माध्यम से तरल पदार्थ और कैडेवरिक ऊतक पर कब्जा करने में कैसे वितरित किया जाए। पोस्ट सेलुलर इंजेक्शन, परमाणु बल माइक्रोस्कोपी (एएफएम) के माध्यम से सेलुलर जीवन शक्ति और लोच का मूल्यांकन किया जाता है। चरण-दर-चरण निर्देशों के माध्यम से, प्रोटोकॉल विश्वसनीय डेटा प्राप्त करने के लिए एक स्पष्ट और संक्षिप्त दृष्टिकोण देता है। चर्चा अनुभाग प्रस्तुत करता है और तकनीक के प्रमुख लाभों, सीमाओं और भविष्य के दृष्टिकोण का वर्णन करता है। कोशिकाओं के WJ वितरण के रूप में के रूप में अच्छी तरह से sequela पोस्ट अनुवाद विश्लेषण यहाँ रिपोर्ट मानक सुई इंजेक्शन की जगह ले रहे हैं और लक्ष्य ऊतक के पुनर्योजी उपचार के लिए एक ठोस सेल वितरण रूपरेखा प्रदान करते हैं. हमारे हाल के अध्ययनों में हमने सबूत प्रदान किए कि डब्ल्यूजे ने सुई इंजेक्शन15,16 की तुलना में कोशिकाओं को अधिक सटीक रूप से और कम से कम तुलनीय व्यवहार्यता पर वितरित किया।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>50 mL centrifuge tube</td>
			<td>Greiner BioOne</td>
			<td>227261</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 mL BD Luer-LokTM Syringe</td>
			<td>BD Plastik Inc</td>
			<td>n.a.</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 &#181;m cell sieve</td>
			<td>Greiner BioOne</td>
			<td>542000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 mL centrifuge tube</td>
			<td>Greiner BioOne</td>
			<td>188271</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>75 cm2 tissue culture flask</td>
			<td>Corning Incorporated</td>
			<td>353136</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AFM head</td>
			<td>(CellHesion 200) JPK</td>
			<td>JPK00518</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AFM processing software</td>
			<td>Bruker</td>
			<td>JPK00518</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AFM software</td>
			<td>Bruker</td>
			<td>JPK00518</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AFM system Cell Hesion 200</td>
			<td>Bruker</td>
			<td>JPK00518</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>All-In-One-Al cantilever</td>
			<td>Budget Sensors</td>
			<td>AIO-10</td>
			<td>tip A, Conatct Mode, Shape: Beam 
			Force Constant: 0.2 N/m (0.04 - 0.7 N/m) 
			Resonance Frequency: 15 kHz (10 - 20 kHz) 
			Length: 500 &#181;m (490 - 510 &#181;m) 
			Width: 30 &#181;m (35 - 45 &#181;m) 
			Thickness: 2.7 &#181;m (1.7 - 3.7 &#181;m)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amphotericin B solution</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A2942</td>
			<td>250 &#181;g/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atomic Force Microscope (AFM)</td>
			<td>CellHesion 200, JPK Instruments, Berlin, Germany</td>
			<td>JPK00518</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Microlance 3 18G</td>
			<td>BD</td>
			<td>304622</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bovine serum albumin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>A10008-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cantilever</td>
			<td>&#160;All-In-One-AleTl, Budget Sensors, Sofia, Bulgaria</td>
			<td>AIO-TL-10</td>
			<td>tip A, k &#188; 0.2 N/m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>C-chip disposable hemocytometer</td>
			<td>NanoEnTek</td>
			<td>631-1098</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>centrifuge: Rotina 420R</td>
			<td>Hettich Zentrifugen</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Collagenase, Type I, powder</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>17100-017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#8217;s Modified Eagle&#8217;s Medium - low glucose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D5546</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Feather disposable scalpel (No. 10)</td>
			<td>Feather</td>
			<td>02.001.30.010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fetal bovine serum (FBS)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F7524</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES sodium salt solution (1 M)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H3662</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inverted phase contrast microscope (Integrated with AFM)</td>
			<td>AxioObserver D1, Carl Zeiss Microscopy, Jena, Germany</td>
			<td>L201306_03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>laboratory bags</td>
			<td>Brand</td>
			<td>759705</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leibovitz&#39;s L-15 medium without l-glutamine</td>
			<td>Merck</td>
			<td>F1315</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leibovitz&#39;s L-15 medium without L-glutamine</td>
			<td>(Merck KGaA, Darmstadt, Germany)</td>
			<td>F1315</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-glutamine</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>BE 17-605C1</td>
			<td>200 mM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LIVE/DEADTM Viability/Cytotoxicity Kit</td>
			<td>Invitrogen by Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>L3224</td>
			<td>Calcein AM and EthD-1 are used from this kit.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope software: Zen 2.6</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope: AxioVertA.1</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nelaton-Catheter female</td>
			<td>Bicakcilar</td>
			<td>19512051</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td>10000 U/ml Penicillin 
			10000 &#181;g/ml Streptomycin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish heater associated with AFM</td>
			<td>Bruker</td>
			<td>T-05-0117</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri dish heater associated with AFM</td>
			<td>JPK Instruments AG, Berlin, Germany</td>
			<td>T-05-0117</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline (PBS)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10010-015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Statistical Software: SPSS Statistics 22</td>
			<td>IBM</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile Petri dish - CellStar</td>
			<td>Greiner BioOne</td>
			<td>664160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture dishes</td>
			<td>TPP AG</td>
			<td>TPP93040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue culture dishes</td>
			<td>TPP Techno Plastic Products AG, Trasadingen, Switzerland</td>
			<td>TPP93040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan Blue 0.4% 
			0.85% NaCl</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>17-942E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA solution</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T3924</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Waterjet: ERBEJET2 device</td>
			<td>Erbe Elektromedizin GmbH</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Williams Cystoscopic Injection Needle</td>
			<td>Cook Medical</td>
			<td>G14220</td>
			<td>23G, 5.0 Fr, 35 cm</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

injection of porcine adipose tissue-derived stroma cells via waterjet technology

मूत्र असंयम (यूआई) एक अत्यधिक प्रचलित स्थिति है जो मूत्रमार्ग स्फिंक्टर मांसपेशी की कमी की विशेषता है। पुनर्योजी चिकित्सा शाखाएं, विशेष रूप से सेल थेरेपी, मूत्रमार्ग स्फिंक्टर फ़ंक्शन को बेहतर बनाने और पुनर्स्थापित करने के लिए उपन्यास दृष्टिकोण हैं। भले ही सक्रिय कार्यात्मक कोशिकाओं का इंजेक्शन नियमित रूप से सुई और सिरिंज द्वारा नैदानिक सेटिंग्स में किया जाता है, इन दृष्टिकोणों में महत्वपूर्ण नुकसान और सीमाएं हैं। इस संदर्भ में, सुई-मुक्त वाटरजेट (डब्ल्यूजे) तकनीक एक व्यवहार्य और अभिनव विधि है जो मूत्रमार्ग स्फिंक्टर में दृश्य निर्देशित सिस्टोस्कोपी द्वारा व्यवहार्य कोशिकाओं को इंजेक्ट कर सकती है। वर्तमान अध्ययन में, हमने पोर्सिनी वसा ऊतक-व्युत्पन्न स्ट्रोमल कोशिकाओं (पीएडीएससी) को कैडेवरिक यूरेथ्रल ऊतक में वितरित करने के लिए डब्ल्यूजे का उपयोग किया और बाद में सेल उपज और व्यवहार्यता पर डब्ल्यूजे वितरण के प्रभाव की जांच की। हमने परमाणु बल माइक्रोस्कोपी (एएफएम) माप द्वारा बायोमैकेनिकल विशेषताओं (यानी, लोच) का भी आकलन किया। हमने दिखाया कि डब्ल्यूजे वितरित pADSCs उनके सेलुलर लोच में काफी कम हो गए थे। नियंत्रण की तुलना में व्यवहार्यता काफी कम थी, लेकिन अभी भी 80% से ऊपर है।

दो दृष्टिकोणों के माध्यम से सेल वितरण के बाद, WN (97.2 ± 2%, n = 10, p<0.002) के माध्यम से वितरित कोशिकाओं की व्यवहार्यता अधिक थी जब WJ द्वारा E60-10 सेटिंग्स (85.9 ± 0.16%, n = 12) (चित्रा 2) का उपयोग करके इंजेक्शन की तुलना में। ?...

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Injection of Porcine Adipose Tissue-Derived Stroma Cells via Waterjet Technology

हम सेलुलर व्यवहार्यता, प्रसार, और लोच माप के संदर्भ में पोस्ट-डिलीवरी जांच की अगली कड़ी के साथ मिलकर सुई मुक्त वाटरजेट तकनीक के माध्यम से सेल इंजेक्शन की एक विधि प्रस्तुत करते हैं।

वाटरजेट प्रौद्योगिकी के माध्यम से पोर्सिनी वसा ऊतक-व्युत्पन्न स्ट्रोमा कोशिकाओं का इंजेक्शन

Urinary incontinence (UI) is a highly prevalent condition characterized by the deficiency of the urethral sphincter muscle. Regenerative medicine ...

सक्रिय घटकों के वाटरजेट इंजेक्शन, जैसे तरल पदार्थ, नैनोकणों, सूक्ष्म कणों, encapsulated दवाओं, या यहां तक कि जीवित कोशिकाओं को लक्षित विभिन्न ऊतकों में सुई इंजेक्शन की तुलना में बहुत अधिक सटीक रूप से लागू किया जा सकता है। न्यूनतम इनवेसिव दृष्टिकोण ों को इंजेक्शन के दबाव को पूर्व-चयन करके लक्षित ऊतक की पूर्व निर्धारित परतों में दवा के सटीक स्थानीयकरण की आवश्यकता होती है। हमारा वर्तमान फोकस मूत्र असंयम के लिए सेल थेरेपी है।हालांकि, इस तकनीक को पहले से ही गंभीर दिल के दौरे के बाद संक्रमित मांसपेशियों के ऊतकों के उत्थान तक बढ़ाया गया है। वर्तमान में, तकनीक को केवल पूर्व-नैदानिक अध्ययनों में अनुभवी शोधकर्ताओं या लाइसेंस प्राप्त चिकित्सकों द्वारा लागू किया जा सकता है। यह नियमित प्रयोगशाला प्रक्रियाओं में उपयोग करने का इरादा नहीं है क्योंकि यह भविष्य के नैदानिक उद्देश्यों के लिए विकसित किया गया है।शुरू करने के लिए, एक स्पंज पर एक वयस्क मादा लैंडरेस सुअर से विच्छेदित कनेक्टिंग मूत्राशय के साथ मूत्रमार्ग रखें जो निचले श्रोणि मंजिल की लोच की नकल करता है। फिर मूत्राशय का उपयोग करके, मूत्रमार्ग के अभिविन्यास का निर्धारण करें। यह मूत्रवाहिनी और तीन स्नायुबंधन के स्थानीयकरण के कारण संभव है, जो पेट और श्रोणि गुहा में मूत्राशय को ठीक करते हैं।मूत्रमार्ग को सही ढंग से उन्मुख करने के बाद, इसे कैथेटर की सहायता से पृष्ठीय पक्ष पर अनुदैर्ध्य रूप से खोलें। पोर्सिनी वसा ऊतक-व्युत्पन्न स्ट्रोमल कोशिकाओं के सेल घनत्व को समायोजित करने के बाद 2.4 गुना 10 प्रति मिलीलीटर छठी कोशिकाओं के लिए, कोशिकाओं को हरे रंग के फ्लोरोसेंट झिल्ली पारगम्य लाइव सेल दाग के साथ लेबल करें, फिर सिरिंज के साथ सेल निलंबन को एस्पिरेट करें और विलियम्स साइटोस्कोपिक इंजेक्शन सुई लागू करें। इसके बाद, या तो 15 मिलीलीटर सेंट्रीफ्यूजेशन ट्यूब में विकास मीडिया के दो मिलीलीटर के ऊपर सुई को तुरंत पकड़ें या खुले मूत्रमार्ग ऊतक में सुई डालें।दोनों मामलों में, मैन्युअल रूप से सेल निलंबन के 250 माइक्रोलीटर इंजेक्ट करें। एक इंजेक्शन गुंबद से कैडेवरिक मूत्रमार्ग में इंजेक्ट की गई कोशिकाएं। सेंट्रीफ्यूगेशन द्वारा सीधे मीडिया में इंजेक्ट की गई कोशिकाओं को इकट्ठा करें।कैडेवरिक मूत्रमार्ग में इंजेक्ट की गई कोशिकाओं के लिए, उन्हें एक सिरिंज पर लागू 18 गेज सुई के साथ इंजेक्शन गुंबद से बाहर निकालें। एस्पिरेटेड कोशिकाओं को एक सेंट्रीफ्यूजेशन ट्यूब में स्थानांतरित करें और उन्हें सेंट्रीफ्यूजेशन द्वारा गोली मारें। विकास मीडिया के चार मिलीलीटर में दोनों सेल छर्रों को फिर से निलंबित कर दिया।सेल उपज और व्यवहार्यता को निर्धारित करने के लिए, ट्राइपैन नीले रंग के 20 माइक्रोलीटर के साथ सेल निलंबन के 20 को अच्छी तरह से मिलाएं। फिर हेमोसाइटोमीटर के प्रत्येक कक्ष में इस मिश्रण के 10 माइक्रोलीटर भरें। माइक्रोस्कोप के तहत सभी चार कोने वर्गों में कोशिकाओं की गणना करें।व्यवहार्य कोशिकाओं के रूप में अनसनेटेड सफेद कोशिकाओं और मृत कोशिकाओं के रूप में नीले दाग वाली कोशिकाओं की गणना करें, फिर प्रति मिलीलीटर सेल संख्या की गणना करें। वाटरजेट के माध्यम से इंजेक्शन के लिए, पोर्सिनी वसा ऊतक-व्युत्पन्न स्ट्रोमल कोशिकाओं के घनत्व को छह बार 10 से छठी कोशिकाओं प्रति मिलीलीटर तक समायोजित करें। उन्हें लेबल के रूप में पहले प्रदर्शित किया और सुई मुक्त waterjet डिवाइस की खुराक इकाई में सेल निलंबन भरें.फिर या तो इंजेक्शन नोजल को 15 मिलीलीटर सेंट्रीफ्यूजेशन ट्यूब में विकास मीडिया के दो मिलीलीटर के ऊपर या खुले मूत्रमार्ग ऊतक के कुछ ही समय ऊपर रखें। दोनों मामलों में, सेल निलंबन के 100 माइक्रोलीटर इंजेक्ट करें। ऊतक प्रवेश के लिए उच्च दबाव का उपयोग करें, जिसके बाद सेल इंजेक्शन के लिए कम दबाव चरण होता है।कैडेवरिक मूत्रमार्ग में इंजेक्ट की गई कोशिकाएं एक इंजेक्शन गुंबद बनाती हैं। सेंट्रीफ्यूगेशन द्वारा सीधे मीडिया में इंजेक्ट की गई कोशिकाओं को इकट्ठा करें। कैडेवरिक मूत्रमार्ग में इंजेक्ट की गई कोशिकाओं के लिए, उन्हें इंजेक्शन गुंबद से बाहर निकालें।एस्पिरेटेड कोशिकाओं को एक सेंट्रीफ्यूजेशन ट्यूब में स्थानांतरित करें, और उन्हें सेंट्रीफ्यूजेशन का उपयोग करके गोली मारें जैसा कि पहले प्रदर्शित किया गया था। centrifugation के बाद, विकास मीडिया के चार milliliters में दोनों छर्रों resuspend. ऊतक संस्कृति व्यंजनों में इंजेक्शन के बाद प्राप्त कोशिकाओं को पांच गुना 10 से पांचवीं कोशिकाओं के प्रति डिश के घनत्व पर बीज दें।37 डिग्री सेल्सियस पर तीन घंटे के इनक्यूबेशन के बाद, और एएफएम माप से ठीक पहले, एल-ग्लूटामाइन के बिना लीबोविट्ज़ के एल -15 मीडिया के तीन मिलीलीटर के साथ विकास मीडिया को बदलें। व्यक्तिगत कोशिकाओं की लोच को मापने के लिए, नेत्रहीन रूप से एक सेल की पहचान करें और उस पर ध्यान केंद्रित करें। फिर कंप्यूटर माउस को सेल के बीच में रखें और माप परिशुद्धता में सुधार करने के लिए, एएफएम टिप को सीधे सेल नाभिक के ऊपर रखें।इसके बाद, कैंटिलीवर पर ध्यान केंद्रित करें और इसे कंप्यूटर माउस पर ले जाएं। फिर रन के साथ माप शुरू करें और कम से कम 50 कोशिकाओं को मापें। कैंटिलीवर के अंशांकन द्वारा प्राप्त सेट बिंदु पैरामीटर का उपयोग किया जाता है और एक सेल को तीन बार मापा जाता है।विलियम्स सुई के माध्यम से वितरित कोशिकाओं की व्यवहार्यता E60-10 सेटिंग्स का उपयोग करके वाटरजेट द्वारा इंजेक्शन की तुलना में अधिक थी। कैप्चर तरल पदार्थ में इंजेक्शन के बायोमैकेनिकल मूल्यांकन से पता चला कि विलियम्स सुई इंजेक्शन ने नियंत्रण की तुलना में लोचदार मोडुली में कोई महत्वपूर्ण अंतर प्रदर्शित नहीं किया, जबकि वाटरजेट इंजेक्शन ने सेलुलर लोचदार मोडुली को 40 से 50% तक काफी कम कर दिया इसी तरह, कैडेवरिक मूत्रमार्ग ऊतक के नमूनों में, विलियम्स सुई इंजेक्शन ने नियंत्रण की तुलना में सेलुलर लोचदार मोडुली में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं दिया। हालांकि, वाटरजेट इंजेक्शन के बाद 51% की महत्वपूर्ण कमी देखी गई थी।किसी को केवल यह सुनिश्चित करना होगा कि सुई इंजेक्शन पूरी तरह से ऊतक में प्रवेश नहीं करता है जो चोट पहुंचा रहा है। वाटरजेट के साथ, किसी को केवल इंजेक्शन क्षेत्र में डिवाइस को सही स्थिति में रखना होता है जबकि बाकी स्वचालित रूप से डिवाइस द्वारा ही किया जाता है। जैसा कि वाटरजेट डिवाइस को एंडोस्कोपिक उपकरणों में मिलान और फिट करने के लिए विकसित किया गया था, आप शरीर में किसी भी साइट के लिए वाटरजेट अनुप्रयोगों का उपयोग कर सकते हैं, जो ऊतकों को पुनर्जीवित करने और मरम्मत का काम करने के लिए इन सिस्टोस्कोपिक या एंडोस्कोपिक प्रौद्योगिकियों द्वारा पहुंचा जा सकता है।

Research

JoVE Journal

Bioengineering

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Patient-derived iPSCs could be an invaluable source of cells for future autologous cell therapy protocols. iPSC-derived myogenic stem/progenitor cells ...

Human Cartilage Tissue Fabrication Using Three-dimensional Inkjet Printing Technology

तीन आयामी Inkjet मुद्रण प्रौद्योगिकी का उपयोग मानव उपास्थि ऊतक निर्माण

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सुअर दिल में स्थानीय कैथेटर इंजेक्शन के लिए एक इंजेक्शन और दवा भरी हुई Supramolecular Hydrogel

Regeneration of lost myocardium is an important goal for future therapies because of the increasing occurrence of chronic ischemic heart failure and the ...

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A functional microvascular network is of pivotal importance for the survival and integration of engineered tissue constructs. For this purpose, several ...

Generic Protocol for Optimization of Heterologous Protein Production Using Automated Microbioreactor Technology

Heterologous प्रोटीन उत्पादन के अनुकूलन के लिए जेनेरिक प्रोटोकॉल स्वचालित Microbioreactor प्रौद्योगिकी का उपयोग

A core business in industrial biotechnology using microbial production cell factories is the iterative process of strain engineering and optimization of ...

Microdissection of Primary Renal Tissue Segments and Incorporation with Novel Scaffold-free Construct Technology

Microdissection प्राथमिक गुर्दे ऊतक क्षेत्रों और उपंयास पाड़ मुक्त निर्माण प्रौद्योगिकी के साथ शामिल होने के

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