Name: endovascular perforation model for subarachnoid hemorrhage combined with magnetic resonance imaging (mri)
Uploaded: 2021-12-16T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging MRI at JoVE.com

تم دعم SL من قبل مجلس المنح الدراسية الصيني. تم دعم KT من خلال منحة BIH-MD من معهد برلين للصحة و Sonnenfeld-Stiftung. يتم دعم RX من قبل برنامج BIH-Charité Clinician Scientist Program ، بتمويل من Charité - Universitätsmedizin Berlin ومعهد برلين للصحة. نحن نقدر الدعم المقدم من مؤسسة الأبحاث الألمانية (DFG) وصندوق النشر المفتوح الوصول التابع ل Charité - Universitätsmedizin Berlin.

أجريت التجارب وفقا للمبادئ التوجيهية واللوائح التي وضعتها Landesamt fuer Gesundheit und Soziales (LaGeSo) ، برلين ، ألمانيا (G0063/18). في هذه الدراسة ، تم استخدام الفئران C57Bl / 6J الذكور (8-12 أسابيع) بوزن 25 ± 0.286 جم (متوسط ± s.e.m).
1. إعداد الحيوان
<ol><li>الحث على التخدير عن طريق حقن الكيتامين (70 ملغم ...

<ol>
	<li>Macdonald, R. L., Schweizer, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+subarachnoid+haemorrhage.">Spontaneous subarachnoid haemorrhage.</a> The Lancet. 389 (10069), 655-666 (2017).</li><li>van Gijn, J., Kerr, R. S., Rinkel, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subarachnoid+haemorrhage.">Subarachnoid haemorrhage.</a> The Lancet. 369 (9558), 306-318 (2007).</li><li>Abraham, M. K., Chang, W. -. T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subarachnoid+hemorrhage.">Subarachnoid hemorrhage.</a> Emergency Medicine Clinics of North America. 34 (4), 901-916 (2016).</li><li>Schertz, M., Mehdaoui, H., Hamlat, A., Piotin, M., Banydeen, R., Mejdoubi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+and+mortality+of+spontaneous+subarachnoid+hemorrhage+in+martinique.">Incidence and mortality of spontaneous subarachnoid hemorrhage in martinique.</a> PLOS ONE. 11 (5), 0155945 (2016).</li><li>Okazaki, T., Kuroda, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage:+intensive+care+for+improving+neurological+outcome.">Aneurysmal subarachnoid hemorrhage: intensive care for improving neurological outcome.</a> Journal of Intensive Care. 6 (1), 28 (2018).</li><li>Kilbourn, K. J., Levy, S., Staff, I., Kureshi, I., McCullough, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+characteristics+and+outcomes+of+neurogenic+stress+cadiomyopathy+in+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage.">Clinical characteristics and outcomes of neurogenic stress cadiomyopathy in aneurysmal subarachnoid hemorrhage.</a> Clinical Neurology and Neurosurgery. 115 (7), 909-914 (2013).</li><li>de Oliveira Manoel, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+critical+care+management+of+spontaneous+intracranial+hemorrhage:+a+contemporary+review.">The critical care management of spontaneous intracranial hemorrhage: a contemporary review.</a> Critical Care. 20 (1), 272 (2016).</li><li>Schneider, U. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglia+inflict+delayed+brain+injury+after+subarachnoid+hemorrhage.">Microglia inflict delayed brain injury after subarachnoid hemorrhage.</a> Acta Neuropathologica. 130 (2), 215-231 (2015).</li><li>Delgado, T. J., Brismar, J., Svendgaard, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subarachnoid+haemorrhage+in+the+rat:+angiography+and+fluorescence+microscopy+of+the+major+cerebral+arteries.">Subarachnoid haemorrhage in the rat: angiography and fluorescence microscopy of the major cerebral arteries.</a> Stroke. 16 (4), 595-602 (1985).</li><li>Piepgras, A., Thome&#769;, C., Schmiedek, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+an+anterior+circulation+rat+subarachnoid+hemorrhage+model.">Characterization of an anterior circulation rat subarachnoid hemorrhage model.</a> Stroke. 26 (12), 2347-2352 (1995).</li><li>Suzuki, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heme+oxygenase-1+gene+induction+as+an+intrinsic+regulation+against+delayed+cerebral+vasospasm+in+rats.">Heme oxygenase-1 gene induction as an intrinsic regulation against delayed cerebral vasospasm in rats.</a> Journal of Clinical Investigation. 104 (1), 59-66 (1999).</li><li>Dudhani, R. V., Kyle, M., Dedeo, C., Riordan, M., Deshaies, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Low+mortality+rat+model+to+assess+delayed+cerebral+vasospasm+after+experimental+subarachnoid+hemorrhage.">A Low mortality rat model to assess delayed cerebral vasospasm after experimental subarachnoid hemorrhage.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (71), e4157 (2013).</li><li>Iuliano, B. A., Pluta, R. M., Jung, C., Oldfield, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction+in+a+primate+model+of+cerebral+vasospasm.">Endothelial dysfunction in a primate model of cerebral vasospasm.</a> Journal of Neurosurgery. 100 (2), 287-294 (2004).</li><li>Barry, K. J., Gogjian, M. A., Stein, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+animal+model+for+investigation+of+subarachnoid+hemorrhage+and+cerebral+vasospasm.">Small animal model for investigation of subarachnoid hemorrhage and cerebral vasospasm.</a> Stroke. 10 (5), 538-541 (1979).</li><li>Bederson, J. B., Germano, I. M., Guarino, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortical+blood+flow+and+cerebral+perfusion+pressure+in+a+new+noncraniotomy+model+of+subarachnoid+hemorrhage+in+the+rat.">Cortical blood flow and cerebral perfusion pressure in a new noncraniotomy model of subarachnoid hemorrhage in the rat.</a> Stroke. 26 (6), 1086-1092 (1995).</li><li>Veelken, J. A., Laing, R. J. C., Jakubowski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Sheffield+model+of+subarachnoid+hemorrhage+in+rats.">The Sheffield model of subarachnoid hemorrhage in rats.</a> Stroke. 26 (7), 1279-1284 (1995).</li><li>Sugawara, T., Ayer, R., Jadhav, V., Zhang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+grading+system+evaluating+bleeding+scale+in+filament+perforation+subarachnoid+hemorrhage+rat+model.">A new grading system evaluating bleeding scale in filament perforation subarachnoid hemorrhage rat model.</a> Journal of Neuroscience Methods. 167 (2), 327-334 (2008).</li><li>Egashira, Y., Shishido, H., Hua, Y., Keep, R. F., Xi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+grading+system+based+on+magnetic+resonance+imaging+in+a+mouse+model+of+subarachnoid+hemorrhage.">New grading system based on magnetic resonance imaging in a mouse model of subarachnoid hemorrhage.</a> Stroke. 46 (2), 582-584 (2015).</li><li>Mutoh, T., Mutoh, T., Sasaki, K., Nakamura, K., Taki, Y., Ishikawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Value+of+three-dimensional+maximum+intensity+projection+display+to+assist+in+magnetic+resonance+imaging+(MRI)-based+grading+in+a+mouse+model+of+subarachnoid+hemorrhage.">Value of three-dimensional maximum intensity projection display to assist in magnetic resonance imaging (MRI)-based grading in a mouse model of subarachnoid hemorrhage.</a> Medical Science Monitor. 22, 2050-2055 (2016).</li><li>Kothari, R. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ABCs+of+measuring+intracerebral+hemorrhage+volumes.">The ABCs of measuring intracerebral hemorrhage volumes.</a> Stroke. 27 (8), 1304-1305 (1996).</li><li>Leclerc, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+pathophysiology+in+humans+and+rodent+models+of+subarachnoid+hemorrhage.">A comparison of pathophysiology in humans and rodent models of subarachnoid hemorrhage.</a> Frontiers in Molecular Neuroscience. 11, 71 (2018).</li><li>Titova, E., Ostrowski, R. P., Zhang, J. H., Tang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+models+of+subarachnoid+hemorrhage+for+studies+of+cerebral+vasospasm.">Experimental models of subarachnoid hemorrhage for studies of cerebral vasospasm.</a> Neurological Research. 31 (6), 568-581 (2009).</li><li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+review+of+in+vivo+animal+models+of+subarachnoid+hemorrhage:+Species,+standard+parameters,+and+outcomes.">Systematic review of in vivo animal models of subarachnoid hemorrhage: Species, standard parameters, and outcomes.</a> Translational Stroke Research. 10 (3), 250-258 (2019).</li><li>Marbacher, S., Fandino, J., Kitchen, N. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standard+intracranial+in+vivo+animal+models+of+delayed+cerebral+vasospasm.">Standard intracranial in vivo animal models of delayed cerebral vasospasm.</a> British Journal of Neurosurgery. 24 (4), 415-434 (2010).</li><li>Thompson, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+cerebral+aneurysm+models.">In vivo cerebral aneurysm models.</a> Neurosurgical Focus. 47 (1), 1-8 (2019).</li><li>Frontera, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prediction+of+symptomatic+vasospasm+after+subarachnoid+hemorrhage:+The+modified+fisher+scale.">Prediction of symptomatic vasospasm after subarachnoid hemorrhage: The modified fisher scale.</a> Neurosurgery. 59 (1), 21-26 (2006).</li><li>Fisher, C. M., Kistler, J. P., Davis, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relation+of+cerebral+vasospasm+to+subarachnoid+hemorrhage+visualized+by+computerized+tomographic+scanning.">Relation of cerebral vasospasm to subarachnoid hemorrhage visualized by computerized tomographic scanning.</a> Neurosurgery. 6 (1), 1-9 (1980).</li><li>Wilson, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+and+quantitative+method+to+predict+symptomatic+vasospasm+after+subarachnoid+hemorrhage+based+on+computed+tomography:+Beyond+the+fisher+scale.">A simple and quantitative method to predict symptomatic vasospasm after subarachnoid hemorrhage based on computed tomography: Beyond the fisher scale.</a> Neurosurgery. 71 (4), 869-875 (2012).</li><li>Sch&#252;ller, K., B&#252;hler, D., Plesnila, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+subarachnoid+hemorrhage.">A murine model of subarachnoid hemorrhage.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (81), e50845 (2013).</li></ol>

باختصار ، يتم تقديم نموذج فأر SAH موحد ناجم عن عملية ثقب خيوط الأوعية الدموية مع غزو طفيف ، ووقت تشغيل قصير ، ومعدلات وفيات مقبولة. يتم إجراء التصوير بالرنين المغناطيسي على مدار 24 ساعة بعد العملية الجراحية لضمان موقع النزيف الصحيح واستبعاد الأمراض الأخرى ذات الصلة داخل الجمجمة. علاوة على ذل...

يحدث النزيف تحت العنكبوتية (SAH) بسبب تمزق تمدد الأوعية الدموية داخل الجمجمة ويشكل حالة طوارئ تهدد الحياة ، مرتبطة بأمراض ووفيات كبيرة ، وهو ما يمثل حوالي 5٪ من السكتات الدماغية 1,2. مرضى SAH الذين يعانون من صداع شديد ، وخلل وظيفي عصبي ، واضطراب تدريجي في الوعي3. يموت حوالي 30٪ من مرضى SAH خلال أول 30 يوما بعد حدث النزيف الأولي4. سريريا ، يعاني 50٪ من المرضى من إصابات الدماغ المتأخرة (DBI) بعد إصابة الدماغ المبكرة. يتميز DBI بنقص التروية الدماغية المتأخر والعجز العصبي المتأخر. أظهرت الدراسات الحالية أن الآثار التآزرية للعديد من العوامل المختلفة تؤدي إلى فقدان الوظيفة العصبية ، بما في ذلك تدمير الحاجز الدموي الدماغي ، وتقلص الشرايين الصغيرة ، وخلل الدورة الدموية الدقيقة ، وتجلط الدم 5,6.
أحد الجوانب الفريدة ل SAH هو أن الإمراض ينشأ من موقع خارج المتني ولكنه يؤدي بعد ذلك إلى شلالات ضارة داخل الحمة: يبدأ علم الأمراض بتراكم الدم في الفضاء تحت العنكبوتية ، مما يؤدي إلى العديد من التأثيرات داخل الأروقيات ، مثل الالتهاب العصبي ، موت الخلايا المبرمج العصبي والبطاني ، إزالة الاستقطاب القشري الانتشار ، وتشكيل وذمة الدماغ7 ، 8.
البحث السريري محدود بعدة عوامل ، مما يجعل النموذج الحيواني عنصرا حاسما في محاكاة التغيرات الباثومية للمرض باستمرار ودقة. تم اقتراح بروتوكولات نموذج SAH مختلفة ، على سبيل المثال ، حقن الدم الذاتي في الصهريج الضخم (ACM). أيضا ، طريقة معدلة مع حقن مزدوج من الدم الذاتي في صهريجنا ماجنا وصهريج chiasm البصري (APC) على التوالي 9,10. في حين أن حقن الدم الذاتي هو وسيلة بسيطة لمحاكاة العملية المرضية للتشنج الوعائي والتفاعلات الالتهابية بعد النزيف تحت العنكبوتية ، فإن الارتفاع التالي للضغط داخل الجمجمة (ICP) بطيء نسبيا ، ولا يتم تحفيز أي تغييرات جديرة بالملاحظة في نفاذية الحاجز الدموي الدماغي11,12. طريقة أخرى ، وضع الدم حول الشرايين ، وعادة ما تستخدم في نماذج SAH الكبيرة (على سبيل المثال ، القرود والكلاب) ، تتضمن وضع دم ذاتي مضاد للتخثر أو منتجات دم مماثلة حول الوعاء. يمكن ملاحظة تغيرات قطر الشريان باستخدام المجهر ، ليكون بمثابة مؤشر على التشنج الوعائي الدماغي بعد SAH13.
وصف باري وآخرون لأول مرة نموذج ثقب داخل الأوعية الدموية في عام 1979 حيث يتعرض الشريان القاعدي بعد إزالة الجمجمة. ثم يتم ثقب الشريان بأقطاب التنغستن الدقيقة ، باستخدام تقنية مجسمة مجهرية14. في عام 1995 ، قام بيدرسون وفيلكين بتعديل نموذج Zea-Longa لنقص التروية الدماغية وأنشأا ثقب الأوعية الدموية الداخلية ، والذي تم تحسينه باستمرار منذ15,16. تعتمد هذه الطريقة على حقيقة أن الفئران والبشر يشتركون في شبكة وعائية مماثلة داخل الجمجمة ، والمعروفة باسم دائرة ويليس.
لتقييم ما بعد الجراحة وتصنيف SAH في نموذج الماوس ، تم اقتراح نهج مختلفة. طور سوغاوارا وآخرون مقياس تصنيف تم استخدامه على نطاق واسع منذ عام 200817. تقوم هذه الطريقة بتقييم شدة SAH بناء على التغيرات المورفولوجية. ومع ذلك ، بالنسبة لهذه الطريقة ، يجب فحص مورفولوجيا أنسجة دماغ الفأر تحت الرؤية المباشرة ، وبالتالي ، يجب التضحية بالفأر للتقييم. علاوة على ذلك ، تم إنشاء عدة طرق لتحديد شدة SAH في الجسم الحي. تتراوح الأساليب من التسجيل العصبي البسيط إلى مراقبة الضغط داخل الجمجمة (ICP) إلى تقنيات التصوير الإشعاعي المختلفة. علاوة على ذلك ، تم عرض تصنيف التصوير بالرنين المغناطيسي كأداة جديدة غير جراحية لتقدير شدة SAH ، المرتبطة بالنتيجة العصبية18,19.
هنا ، يتم تقديم بروتوكول لنموذج SAH الناجم عن ثقب الأوعية الدموية ، جنبا إلى جنب مع التصوير بالرنين المغناطيسي بعد العملية الجراحية. في محاولة لإنشاء نظام لتجسيد كمية النزيف في بيئة في الجسم الحي ، قمنا أيضا بتطوير نظام لتصنيف SAH وتحديد حجم الدم الكلي بناء على التصوير بالرنين المغناطيسي عالي الدقة T2 عالي الدقة 7.0 T. يضمن هذا النهج الحث الصحيح ل SAH واستبعاد الأمراض الأخرى مثل السكتة الدماغية أو استسقاء الرأس أو النزيف داخل المخ (ICH) والمضاعفات.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Eye cream</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>815529836</td>
			<td>Bepanthen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Images analysis software</td>
			<td>ImageJ</td>
			<td></td>
			<td>Bundled with Java 1.8.0_172</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ligation suture (5-0)</td>
			<td>SMI</td>
			<td></td>
			<td>Silk black USP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light source for microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>CL 6000 LED</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>CP-pharma</td>
			<td>797-037</td>
			<td>100 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MRI</td>
			<td>Bruker</td>
			<td>Pharmascan 70/16</td>
			<td>&#160;7 Tesla</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MRI images acquired software</td>
			<td>Bruker</td>
			<td></td>
			<td>Bruker Paravision 5.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paracetamol (40 mg/mL)</td>
			<td>bene Arzneimittel</td>
			<td>4993736</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolene filament (5-0)</td>
			<td>Erhicon</td>
			<td>EH7255</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Razor</td>
			<td>Wella</td>
			<td>HS61</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical instrument (Fine Scissors)</td>
			<td>FST</td>
			<td>14060-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical instrument (forceps#1)</td>
			<td>AESCULAP</td>
			<td>FM001R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical instrument (forceps#2)</td>
			<td>AESCULAP</td>
			<td>FD2855R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical instrument (forceps#3)</td>
			<td>Hammacher</td>
			<td>HCS 082-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical instrument (Needle holder)</td>
			<td>FST</td>
			<td>91201-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical instrument (Vannas Spring Scissors)</td>
			<td>FST</td>
			<td>15000-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Stemi 2000 C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ventilation monitoring</td>
			<td>Stony Brook</td>
			<td></td>
			<td>Small Animal Monitoring &#38; Gating System</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wounding suture(4-0)</td>
			<td>Erhicon</td>
			<td>CB84D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylavet</td>
			<td>CP-pharma</td>
			<td>797-062</td>
			<td>20 mg/mL</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

endovascular perforation model for subarachnoid hemorrhage combined with magnetic resonance imaging (mri)

نموذج ثقب الخيوط داخل الأوعية الدموية لتقليد النزيف تحت العنكبوتية (SAH) هو نموذج شائع الاستخدام - ومع ذلك ، يمكن أن تسبب هذه التقنية معدل وفيات مرتفعا بالإضافة إلى حجم لا يمكن السيطرة عليه من SAH والمضاعفات الأخرى داخل الجمجمة مثل السكتة الدماغية أو النزيف داخل الجمجمة. في هذا البروتوكول ، يتم تقديم نموذج فأر SAH موحد ، مستحث عن ثقب خيوط داخل الأوعية الدموية ، جنبا إلى جنب مع التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI) بعد 24 ساعة من العملية لضمان موقع النزيف الصحيح واستبعاد الأمراض الأخرى ذات الصلة داخل الجمجمة. باختصار ، يتم تخدير الفئران C57BL / 6J بحقن الكيتامين / الزيلازين داخل الصفاق (70 ملغ / 16 ملغ / كغ من وزن الجسم) ووضعها في وضع ضعيف. بعد شق الرقبة في خط الوسط ، يتم الكشف عن الشريان السباتي المشترك (CCA) والتشعب السباتي ، ويتم إدخال خياطة البولي بروبيلين أحادية الخيوط غير القابلة للامتصاص 5-0 بطريقة رجعية في الشريان السباتي الخارجي (ECA) والتقدم إلى الشريان السباتي المشترك. بعد ذلك ، يتم غزو الخيوط في الشريان السباتي الداخلي (ICA) ودفعها إلى الأمام لثقب الشريان الدماغي الأمامي (ACA). بعد الشفاء من الجراحة ، تخضع الفئران للتصوير بالرنين المغناطيسي 7.0 T بعد 24 ساعة. يمكن تحديد حجم النزيف وتصنيفه عن طريق التصوير بالرنين المغناطيسي بعد العملية الجراحية ، مما يتيح مجموعة SAH تجريبية قوية مع خيار إجراء المزيد من تحليلات المجموعة الفرعية بناء على كمية الدم.

وفيات بالنسبة لهذه الدراسة ، خضع ما مجموعه 92 من ذكور الفئران C57Bl / 6J الذين تتراوح أعمارهم بين 8-12 أسبوعا لعملية SAH. في هذه ، لاحظنا معدل وفيات إجمالي قدره 11.9 ٪ (n = 12). حدثت الوفيات حصريا خلال أول 6-24 ساعة بعد الجراحة ، مما يشير إلى الوفيات المحيطة بالجراحة وكذلك نزيف SAH نفسه كعوامل مساه?...

Watch this Scientific Journal Video about Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging MRI at JoVE.com

Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging MRI

نقدم هنا نموذجا موحدا للفأر SAH ، الناجم عن ثقب خيوط الأوعية الدموية ، جنبا إلى جنب مع التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI) بعد 24 ساعة من العملية لضمان موقع النزيف الصحيح واستبعاد الأمراض الأخرى ذات الصلة داخل الجمجمة.

نموذج ثقب الأوعية الدموية الداخلية للنزيف تحت العنكبوتية جنبا إلى جنب مع التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI)

The endovascular filament perforation model to mimic subarachnoid hemorrhage (SAH) is a commonly used model - however, the technique can cause a high ...

يسمح نموذج الثقب داخل الأوعية الدموية جنبا إلى جنب مع التصوير بالرنين المغناطيسي بعد العملية الجراحية بالتحقق من النزيف واستبعاد الأمراض الأخرى بين الجمجمة. واحدة من مزايا هذا النهج هو خيار تحديد حجم النزيف لمزيد من تحليل المجموعة الفرعية. ابدأ بحلق شعر عنق الماوس.ضع مرهم العيون أثناء العملية. قم بتعقيم البشرة بنسبة 70٪ من الإيثانول يليه بيتادين أو الكلورهيكسيدين وتطبيق 1٪ يدوكائين. ضع الماوس في وضع ضعيف مع مواجهة رأسه وجذعه في اتجاه تصاعدي.قم بتثبيت الماوس ظهريا باستخدام شريط على الأطراف الأربعة. تمتد جلد الرقبة ورفعها. اكشف جلد الرقبة من الذقن إلى الحافة العليا لعظم الثدي وافصل الغدد اللعابية عن النسيج الضام المجاور.كشف غمد الشريان السباتي الشائع عن طريق فصل العضلات على طول جانب واحد من القصبة الهوائية. كشف المجال الجراحي باستخدام مسحة شاش معقمة أو معقمة وفصل الشريان السباتي وترك 8-0 مجانا خياطة الحرير دون ربطه ، وضمان عدم إتلاف العصب المبهم. تشريح الطرف البعيد من ECA وربط الأوعية مرتين في وضع بعيد.في منتصف جزء الخيوط المربوط مرتين ، ينفصل عن ECA ويخلق جذع سفينة. اترك خيطا حريريا حول ICA دون إغلاقه. رتب مسبقا ربطة واحدة للخيوط حول جذع ECA.لا تغلقه حتى يتم إدخال خيوط ناجحة. أغلق ICA و CCA مؤقتا باستخدام خياطة أو مشبك صغير. باستخدام مقص الأوعية الدموية الدقيقة ، قم بعمل شق في ECA وأدخل خيوط برولين 5-0 بدلا من 4-O ، وقم بتطويرها إلى CCA.أغلق الرباط على ECA أثناء فصل المشبك الصغير على ICA و CCA. اسحب الخيوط بلطف واضبط جذع ECA في اتجاه الجمجمة أثناء غزو الخيوط من خلال التشعب إلى ICA. ضع طرف الخيط بشكل إنسي بزاوية 30 درجة تقريبا إلى خط الوسط القصبي في مستوى أفقي وادفعه داخل ICA.في تشعب ACA-MCA ، لوحظت المقاومة. حرك الخيط إلى الأمام حتى ثلاثة ملليمترات وثقب ACA الأيمن. اسحب الخيوط بسرعة إلى جذع ECA مما يسمح بتدفق الدم في الفضاء تحت العنكبوتية.ضع الخيط في هذا الموضع لمدة 10 ثوان. سحب الخيوط. يمكن إغلاق CCA مؤقتا مسبقا لتجنب فقدان الدم المفرط ثم سحب الخيوط.قم بتحريك ECA باستخدام خيوط مرتبة مسبقا وأعد فتح CCA إذا كنت قد أغلقته من قبل. يمكن أن يكون وجود هزات العضلات ، والانقسام العضلي الجانبي ، واللهاث من أجل التنفس ، وتغير إيقاع القلب وسلس البول دليلا على نجاح الجراحة. تأكد من عدم وجود تسرب للنزيف وتطهير الجلد.خياطة الجرح. ضع الماوس في صندوق حراري وانتظر حتى يكون لدى الحيوان وعي كاف للحصول على استلقاء قصي. لتخفيف الألم ، قم بإدارة 1.2 ملليغرام لكل ملليلتر من الباراسيتامول.باستخدام ماسح ضوئي للقوارض على مرنان رأس الماوس ، قم بإجراء التصوير بالرنين المغناطيسي بعد 24 ساعة من الجراحة ، ضع الماوس على بطانية مياه ساخنة متداولة عند 37 درجة مئوية. أولا، قم بإجراء فحص مرجعي سريع للحصول على ثلاث حزم شرائح متعامدة. ثم استخدم تسلسل صدى الدوران التوربيني 2D عالي الدقة T2 للتصوير.انقل البيانات إلى تنسيق صورة DICOM واستخدم برنامج Imagej لتصنيف SAH وقياس حجم جلطات الدم. لضمان موقع النزيف الصحيح واستبعاد الأمراض الأخرى داخل الجمجمة ، تم إجراء فحوصات التصوير بالرنين المغناطيسي بعد 24 ساعة من العملية الجراحية. تم تحديد درجة نزيف SAH كميا بناء على فحوصات التصوير بالرنين المغناطيسي المرجحة T2.من بين الفئران التي تم فحصها ، تم تصنيف 14٪ من الحيوانات على أنها تنزف من الدرجة صفر دون دليل إشعاعي على SAH أو النزيف. أظهرت غالبية الحيوانات درجات نزيف تتراوح بين واحد إلى ثلاثة ، وأظهر 10٪ نزيف الصف الرابع الذي تم تعريفه SAH على طول السكتة الدماغية و / أو ICH. تم تحديد حجم النزيف الكلي لكل درجة SAH ، بناء على سمك SAH ، مما يساعد على تحديد منطقة النزيف.أظهر حجم النزيف المحسوب على أساس سمك SAH المحوري اختلافات كبيرة في المجموعات الفرعية المقابلة لها من الصف الأول إلى الثالث. طوال الجراحة بأكملها ، يعد التشريح الشامل للأنسجة المتصلة المحيطة أمرا بالغ الأهمية لتحديد المواقع الصحيحة للغرز. تأكد من أن طول جذع ECA كاف بحيث يكون لديك مساحة عمل مريحة لربط الخيوط وشقها وإدخالها.لا تدفع الخيوط أبدا إلى الأمام عندما تشعر بالمقاومة قبل تشعب MCA-ACA لمنع ثقب الأوعية قبل الأوان.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging (MRI)

Multiple-mouse Neuroanatomical Magnetic Resonance Imaging

متعددة الماوس تشريحي عصبي التصوير بالرنين المغناطيسي

The field of mouse phenotyping with magnetic resonance imaging (MRI) is rapidly growing, motivated by the need for improved tools for characterizing and ...

High-resolution Functional Magnetic Resonance Imaging Methods for Human Midbrain

عالية الدقة التصوير بالرنين المغناطيسي الوظيفي للطرق الدماغ المتوسط ​​الإنسان

Functional MRI (fMRI) is a widely used tool for non-invasively measuring correlates of human brain activity. However, its use has mostly been focused upon ...

The Use of Magnetic Resonance Spectroscopy as a Tool for the Measurement of Bi-hemispheric Transcranial Electric Stimulation Effects on Primary Motor Cortex Metabolism

استخدام التحليل الطيفي بالرنين المغناطيسي كأداة لقياس ثنائي نصف الكرة الغربي عبر الجمجمة التحفيز الكهربائي التأثيرات على الابتدائية موتور اللحاء الأيض

Transcranial direct current stimulation (tDCS) is a neuromodulation technique that has been increasingly used over the past decade in the treatment of ...

High-resolution In Vivo Manual Segmentation Protocol for Human Hippocampal Subfields Using 3T Magnetic Resonance Imaging

High-resolution In Vivo Manual Segmentation Protocol for Human Hippocampal Subfields Using 3T Magnetic Resonance Imaging

عالية الدقة<em&gt; في فيفو</em&gt; دليل بروتوكول تجزئة للالإنسان الحصين الحقول الفرعية عن طريق التصوير بالرنين المغناطيسي 3T

The human hippocampus has been broadly studied in the context of memory and normal brain function and its role in different neuropsychiatric disorders has ...

High-resolution Structural Magnetic Resonance Imaging of the Human Subcortex In Vivo and Postmortem

High-resolution Structural Magnetic Resonance Imaging of the Human Subcortex In Vivo and Postmortem

عالية الدقة الهيكلي التصوير بالرنين المغناطيسي من تحت القشرة الإنسان<I&gt; في فيفو</I&gt; وتشريح الجثث

The focus of this study was to test the resolution limits of structural MRI of a postmortem brain compared to living human brains. The resolution of ...

A Magnetic Resonance Imaging Protocol for Stroke Onset Time Estimation in Permanent Cerebral Ischemia

بروتوكول تصوير بالرنين المغناطيسي لتقدير الوقت بداية السكتة الدماغية الاسكيمية الدماغي الدائمة

MRI provides a sensitive and specific imaging tool to detect acute ischemic stroke by means of a reduced diffusion coefficient of brain water. In a rat ...

A Volumetric Method for Quantification of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

أسلوب حجمي للتحديد الكمي للمخ بالتشنج في نموذج موريني نزيف تحت العنكبوتية

Subarachnoid hemorrhage (SAH) is a subtype of hemorrhagic stroke. Cerebral vasospasm that occurs in the aftermath of the bleeding is an important factor ...

Double Direct Injection of Blood into the Cisterna Magna as a Model of Subarachnoid Hemorrhage

مزدوجة الحقن المباشر للدم في ماغنا سيستيرنا كنموذج للنزف تحت العنكبوتية

Among strokes, subarachnoid hemorrhage (SAH) consecutive to the rupture of a cerebral arterial aneurysm represents 5-9% but is responsible for about 30% ...

Analysis of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage with High Frequency Transcranial Duplex Ultrasound

تحليل فاسوسباسم الدماغي في نموذج مورين من نزيف تحت العنكبوتية مع الموجات فوق الصوتية المزدوجة عبر الجمجمة عالية التردد

Cerebral vasospasm that occurs in the weeks after subarachnoid hemorrhage, a type of hemorrhagic stroke, contributes to delayed cerebral ischemia. A ...

Whole-Brain Single-Cell Imaging and Analysis of Intact Neonatal Mouse Brains Using MRI, Tissue Clearing, and Light-Sheet Microscopy

تصوير خلية واحدة للدماغ بالكامل وتحليل أدمغة الفئران حديثي الولادة السليمة باستخدام التصوير بالرنين المغناطيسي ومسح الأنسجة والفحص المجهري للورقة الضوئية

Tissue clearing followed by light-sheet microscopy (LSFM) enables cellular-resolution imaging of intact brain structure, allowing quantitative analysis of ...