Name: endovascular perforation model for subarachnoid hemorrhage combined with magnetic resonance imaging (mri)
Uploaded: 2021-12-16T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging MRI at JoVE.com

SL נתמכה על ידי מועצת המלגות הסינית. KT נתמך על ידי מלגת BIH-MD של המכון לבריאות בברלין וקרן זוננפלד. RX נתמך על ידי תוכנית המדענים הקלינאים BIH-Charité, הממומנת על ידי ארגון הצדקה -Universitätsmedizin ברלין והמכון לבריאות של ברלין. אנו מכירים בתמיכה של קרן המחקר הגרמנית (DFG) וקרן הפרסום בגישה פתוחה של צדקה - אוניברסיטת ברלין.

הניסויים בוצעו בהתאם להנחיות ולתקנות שנקבעו על ידי Landesamt fuer Gesundheit und Soziales (LaGeSo), ברלין, גרמניה (G0063/18). במחקר זה נעשה שימוש בעכברים זכרי C57Bl/6J (בני 8-12 שבועות) במשקל של 25 ± 0.286 גרם (ממוצע ± s.e.m.).
1. הכנת בעלי חיים
<ol><li>לגרום להרדמה על ידי הזרקת קטמין (70 מ"ג/ק"ג) וקסילזין (16 מ"ג/ק"?...

<ol>
	<li>Macdonald, R. L., Schweizer, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+subarachnoid+haemorrhage.">Spontaneous subarachnoid haemorrhage.</a> The Lancet. 389 (10069), 655-666 (2017).</li><li>van Gijn, J., Kerr, R. S., Rinkel, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subarachnoid+haemorrhage.">Subarachnoid haemorrhage.</a> The Lancet. 369 (9558), 306-318 (2007).</li><li>Abraham, M. K., Chang, W. -. T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subarachnoid+hemorrhage.">Subarachnoid hemorrhage.</a> Emergency Medicine Clinics of North America. 34 (4), 901-916 (2016).</li><li>Schertz, M., Mehdaoui, H., Hamlat, A., Piotin, M., Banydeen, R., Mejdoubi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+and+mortality+of+spontaneous+subarachnoid+hemorrhage+in+martinique.">Incidence and mortality of spontaneous subarachnoid hemorrhage in martinique.</a> PLOS ONE. 11 (5), 0155945 (2016).</li><li>Okazaki, T., Kuroda, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage:+intensive+care+for+improving+neurological+outcome.">Aneurysmal subarachnoid hemorrhage: intensive care for improving neurological outcome.</a> Journal of Intensive Care. 6 (1), 28 (2018).</li><li>Kilbourn, K. J., Levy, S., Staff, I., Kureshi, I., McCullough, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+characteristics+and+outcomes+of+neurogenic+stress+cadiomyopathy+in+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage.">Clinical characteristics and outcomes of neurogenic stress cadiomyopathy in aneurysmal subarachnoid hemorrhage.</a> Clinical Neurology and Neurosurgery. 115 (7), 909-914 (2013).</li><li>de Oliveira Manoel, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+critical+care+management+of+spontaneous+intracranial+hemorrhage:+a+contemporary+review.">The critical care management of spontaneous intracranial hemorrhage: a contemporary review.</a> Critical Care. 20 (1), 272 (2016).</li><li>Schneider, U. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglia+inflict+delayed+brain+injury+after+subarachnoid+hemorrhage.">Microglia inflict delayed brain injury after subarachnoid hemorrhage.</a> Acta Neuropathologica. 130 (2), 215-231 (2015).</li><li>Delgado, T. J., Brismar, J., Svendgaard, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subarachnoid+haemorrhage+in+the+rat:+angiography+and+fluorescence+microscopy+of+the+major+cerebral+arteries.">Subarachnoid haemorrhage in the rat: angiography and fluorescence microscopy of the major cerebral arteries.</a> Stroke. 16 (4), 595-602 (1985).</li><li>Piepgras, A., Thome&#769;, C., Schmiedek, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+an+anterior+circulation+rat+subarachnoid+hemorrhage+model.">Characterization of an anterior circulation rat subarachnoid hemorrhage model.</a> Stroke. 26 (12), 2347-2352 (1995).</li><li>Suzuki, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heme+oxygenase-1+gene+induction+as+an+intrinsic+regulation+against+delayed+cerebral+vasospasm+in+rats.">Heme oxygenase-1 gene induction as an intrinsic regulation against delayed cerebral vasospasm in rats.</a> Journal of Clinical Investigation. 104 (1), 59-66 (1999).</li><li>Dudhani, R. V., Kyle, M., Dedeo, C., Riordan, M., Deshaies, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Low+mortality+rat+model+to+assess+delayed+cerebral+vasospasm+after+experimental+subarachnoid+hemorrhage.">A Low mortality rat model to assess delayed cerebral vasospasm after experimental subarachnoid hemorrhage.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (71), e4157 (2013).</li><li>Iuliano, B. A., Pluta, R. M., Jung, C., Oldfield, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction+in+a+primate+model+of+cerebral+vasospasm.">Endothelial dysfunction in a primate model of cerebral vasospasm.</a> Journal of Neurosurgery. 100 (2), 287-294 (2004).</li><li>Barry, K. J., Gogjian, M. A., Stein, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+animal+model+for+investigation+of+subarachnoid+hemorrhage+and+cerebral+vasospasm.">Small animal model for investigation of subarachnoid hemorrhage and cerebral vasospasm.</a> Stroke. 10 (5), 538-541 (1979).</li><li>Bederson, J. B., Germano, I. M., Guarino, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortical+blood+flow+and+cerebral+perfusion+pressure+in+a+new+noncraniotomy+model+of+subarachnoid+hemorrhage+in+the+rat.">Cortical blood flow and cerebral perfusion pressure in a new noncraniotomy model of subarachnoid hemorrhage in the rat.</a> Stroke. 26 (6), 1086-1092 (1995).</li><li>Veelken, J. A., Laing, R. J. C., Jakubowski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Sheffield+model+of+subarachnoid+hemorrhage+in+rats.">The Sheffield model of subarachnoid hemorrhage in rats.</a> Stroke. 26 (7), 1279-1284 (1995).</li><li>Sugawara, T., Ayer, R., Jadhav, V., Zhang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+grading+system+evaluating+bleeding+scale+in+filament+perforation+subarachnoid+hemorrhage+rat+model.">A new grading system evaluating bleeding scale in filament perforation subarachnoid hemorrhage rat model.</a> Journal of Neuroscience Methods. 167 (2), 327-334 (2008).</li><li>Egashira, Y., Shishido, H., Hua, Y., Keep, R. F., Xi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+grading+system+based+on+magnetic+resonance+imaging+in+a+mouse+model+of+subarachnoid+hemorrhage.">New grading system based on magnetic resonance imaging in a mouse model of subarachnoid hemorrhage.</a> Stroke. 46 (2), 582-584 (2015).</li><li>Mutoh, T., Mutoh, T., Sasaki, K., Nakamura, K., Taki, Y., Ishikawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Value+of+three-dimensional+maximum+intensity+projection+display+to+assist+in+magnetic+resonance+imaging+(MRI)-based+grading+in+a+mouse+model+of+subarachnoid+hemorrhage.">Value of three-dimensional maximum intensity projection display to assist in magnetic resonance imaging (MRI)-based grading in a mouse model of subarachnoid hemorrhage.</a> Medical Science Monitor. 22, 2050-2055 (2016).</li><li>Kothari, R. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ABCs+of+measuring+intracerebral+hemorrhage+volumes.">The ABCs of measuring intracerebral hemorrhage volumes.</a> Stroke. 27 (8), 1304-1305 (1996).</li><li>Leclerc, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+pathophysiology+in+humans+and+rodent+models+of+subarachnoid+hemorrhage.">A comparison of pathophysiology in humans and rodent models of subarachnoid hemorrhage.</a> Frontiers in Molecular Neuroscience. 11, 71 (2018).</li><li>Titova, E., Ostrowski, R. P., Zhang, J. H., Tang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+models+of+subarachnoid+hemorrhage+for+studies+of+cerebral+vasospasm.">Experimental models of subarachnoid hemorrhage for studies of cerebral vasospasm.</a> Neurological Research. 31 (6), 568-581 (2009).</li><li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+review+of+in+vivo+animal+models+of+subarachnoid+hemorrhage:+Species,+standard+parameters,+and+outcomes.">Systematic review of in vivo animal models of subarachnoid hemorrhage: Species, standard parameters, and outcomes.</a> Translational Stroke Research. 10 (3), 250-258 (2019).</li><li>Marbacher, S., Fandino, J., Kitchen, N. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standard+intracranial+in+vivo+animal+models+of+delayed+cerebral+vasospasm.">Standard intracranial in vivo animal models of delayed cerebral vasospasm.</a> British Journal of Neurosurgery. 24 (4), 415-434 (2010).</li><li>Thompson, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+cerebral+aneurysm+models.">In vivo cerebral aneurysm models.</a> Neurosurgical Focus. 47 (1), 1-8 (2019).</li><li>Frontera, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prediction+of+symptomatic+vasospasm+after+subarachnoid+hemorrhage:+The+modified+fisher+scale.">Prediction of symptomatic vasospasm after subarachnoid hemorrhage: The modified fisher scale.</a> Neurosurgery. 59 (1), 21-26 (2006).</li><li>Fisher, C. M., Kistler, J. P., Davis, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relation+of+cerebral+vasospasm+to+subarachnoid+hemorrhage+visualized+by+computerized+tomographic+scanning.">Relation of cerebral vasospasm to subarachnoid hemorrhage visualized by computerized tomographic scanning.</a> Neurosurgery. 6 (1), 1-9 (1980).</li><li>Wilson, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+and+quantitative+method+to+predict+symptomatic+vasospasm+after+subarachnoid+hemorrhage+based+on+computed+tomography:+Beyond+the+fisher+scale.">A simple and quantitative method to predict symptomatic vasospasm after subarachnoid hemorrhage based on computed tomography: Beyond the fisher scale.</a> Neurosurgery. 71 (4), 869-875 (2012).</li><li>Sch&#252;ller, K., B&#252;hler, D., Plesnila, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+subarachnoid+hemorrhage.">A murine model of subarachnoid hemorrhage.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (81), e50845 (2013).</li></ol>

לסיכום, מודל עכבר SAH סטנדרטי המושרה על ידי פעולת ניקוב נימה אנדווסקולרית מוצג עם פלישה קלה, זמן ניתוח קצר ושיעורי תמותה מקובלים. MRI מתבצע 24 שעות לאחר הניתוח כדי להבטיח את אתר הדימום הנכון ואת ההדרה של פתולוגיות תוך גולגולתיות רלוונטיות אחרות. יתר על כן, סיווגנו ציוני דימום שונים של SAH ומדדנו ...

דימום תת-גולגולתי (SAH) נגרם על ידי קרע של מפרצת תוך גולגולתית ומהווה מצב חירום מסכן חיים, הקשור לתחלואה ותמותה משמעותיות, המהוות כ-5% מהשבץ 1,2. חולי SAH סובלים מכאבי ראש קשים, תפקוד נוירולוגי לקוי והפרעה הדרגתית לתודעה3. כ-30% מחולי ה-SAH מתים במהלך 30 הימים הראשונים לאחר אירוע הדימום הראשוני4. מבחינה קלינית, 50% מהמטופלים חווים פגיעה מוחית מאוחרת (DBI) לאחר פגיעה מוחית מוקדמת. DBI מאופיין באיסכמיה מוחית מושהית ובליקויים נוירולוגיים מושהים. מחקרים עדכניים הראו כי ההשפעות הסינרגטיות של מספר גורמים שונים מובילות לאובדן התפקוד הנוירולוגי, כולל הרס מחסום הדם-מוח, התכווצות של עורקים קטנים, תפקוד לקוי של מיקרו-סירקולציה ופקקת 5,6.
היבט ייחודי אחד של SAH הוא שהפתוגנזה מקורה במיקום חוץ-פרנצ'ימלי, אך לאחר מכן מובילה למפלים מזיקים בתוך הפרנכימה: הפתולוגיה מתחילה בהצטברות הדם במרחב התת-קרקעי, ומפעילה שפע של השפעות תוך-פרנצ'ימליות, כגון דלקת עצבית, אפופטוזיס של תאי עצב ואנדותל, דה-פולריזציה של התפשטות קליפת המוח והיווצרות בצקת מוח7, 8.
המחקר הקליני מוגבל על ידי מספר גורמים, מה שהופך את המודל החי למרכיב קריטי בחיקוי עקבי ומדויק של השינויים הפתומכניסטיים של המחלה. הוצעו פרוטוקולים שונים של מודל SAH, למשל, הזרקת דם אוטולוגית לתוך הציסטרנה מגנה (ACM). כמו כן, שיטה שונה עם הזרקה כפולה של דם אוטולוגי לתוך cisterna magna ו בור כיאסם אופטי (APC) בהתאמה 9,10. בעוד שהזרקת דם אוטולוגית היא דרך פשוטה לדמות את התהליך הפתולוגי של vasospasm ותגובות דלקתיות לאחר דימום תת-עכבישי, העלייה הבאה של לחץ תוך גולגולתי (ICP) היא איטית יחסית, ואין שינויים ראויים לציון בחדירות של מחסום הדם-מוח נגרמים11,12. שיטה אחרת, מיקום הדם הפריארטריאלי, המשמשת בדרך כלל במודלים גדולים של SAH (למשל, קופים וכלבים), כוללת הצבת דם אוטולוגי נוגד קרישה או מוצרי דם דומים סביב כלי הדם. את שינויי הקוטר של העורק ניתן לראות עם מיקרוסקופ, המשמש אינדיקטור עבור vasospasm המוח לאחר SAH13.
Barry et al. תיארו לראשונה מודל ניקוב אנדווסקולרי בשנת 1979 שבו עורק הבזילרי נחשף לאחר הסרת הגולגולת; לאחר מכן מנקבים את העורק במיקרו-אלקטרוניקה של טונגסטן, תוך שימוש בטכניקה סטריאוטקטית מיקרוסקופית14. בשנת 1995, בדרסון וולקן שינו את מודל Zea-Longa של איסכמיה מוחית והקימו את הניקוב האנדווסקולרי, אשר שופר ברציפות מאז15,16. שיטה זו מבוססת על העובדה כי עכברים ובני אדם חולקים רשת כלי דם תוך גולגולתית דומה, המכונה המעגל של ויליס.
להערכה לאחר הניתוח ולציון של SAH במודל העכבר, הוצעו גישות שונות. Sugawara et al. פיתחו סולם דירוג שנמצא בשימוש נרחב מאז 200817. שיטה זו מעריכה את חומרת ה-SAH בהתבסס על שינויים מורפולוגיים. עם זאת, עבור שיטה זו, יש לבחון את המורפולוגיה של רקמת המוח של העכבר תחת ראייה ישירה, ולכן יש להקריב את העכבר לצורך הערכה. יתר על כן, נקבעו מספר שיטות לקביעת חומרת SAH in vivo. הגישות נעות בין ניקוד נוירולוגי פשוט לניטור של לחץ תוך גולגולתי (ICP) ועד טכניקות הדמיה רדיולוגיות שונות. יתר על כן, דירוג MRI הוכח ככלי חדש ולא פולשני לדירוג חומרת SAH, בקורלציה לציון נוירולוגי18,19.
כאן מוצג פרוטוקול למודל SAH הנגרם על ידי ניקוב אנדווסקולרי, בשילוב עם MRI לאחר הניתוח. בניסיון להקים מערכת שתחפצן את כמות הדימום בסביבת in vivo , פיתחנו גם מערכת לדירוג SAH וכימות של נפח הדם הכולל בהתבסס על MRI משוקלל T2 ברזולוציה גבוהה של 7.0 T. גישה זו מבטיחה אינדוקציה נכונה של SAH והדרה של פתולוגיות אחרות כגון שבץ, הידרוצפלוס, או דימום תוך-מוחי (ICH) וסיבוכים.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Eye cream</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>815529836</td>
			<td>Bepanthen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Images analysis software</td>
			<td>ImageJ</td>
			<td></td>
			<td>Bundled with Java 1.8.0_172</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ligation suture (5-0)</td>
			<td>SMI</td>
			<td></td>
			<td>Silk black USP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light source for microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>CL 6000 LED</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>CP-pharma</td>
			<td>797-037</td>
			<td>100 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MRI</td>
			<td>Bruker</td>
			<td>Pharmascan 70/16</td>
			<td>&#160;7 Tesla</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MRI images acquired software</td>
			<td>Bruker</td>
			<td></td>
			<td>Bruker Paravision 5.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paracetamol (40 mg/mL)</td>
			<td>bene Arzneimittel</td>
			<td>4993736</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolene filament (5-0)</td>
			<td>Erhicon</td>
			<td>EH7255</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Razor</td>
			<td>Wella</td>
			<td>HS61</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical instrument (Fine Scissors)</td>
			<td>FST</td>
			<td>14060-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical instrument (forceps#1)</td>
			<td>AESCULAP</td>
			<td>FM001R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical instrument (forceps#2)</td>
			<td>AESCULAP</td>
			<td>FD2855R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical instrument (forceps#3)</td>
			<td>Hammacher</td>
			<td>HCS 082-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical instrument (Needle holder)</td>
			<td>FST</td>
			<td>91201-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical instrument (Vannas Spring Scissors)</td>
			<td>FST</td>
			<td>15000-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Stemi 2000 C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ventilation monitoring</td>
			<td>Stony Brook</td>
			<td></td>
			<td>Small Animal Monitoring &#38; Gating System</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wounding suture(4-0)</td>
			<td>Erhicon</td>
			<td>CB84D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylavet</td>
			<td>CP-pharma</td>
			<td>797-062</td>
			<td>20 mg/mL</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

endovascular perforation model for subarachnoid hemorrhage combined with magnetic resonance imaging (mri)

מודל הניקוב האנדווסקולרי לחיקוי דימום תת-גולגולתי (SAH) הוא מודל נפוץ - עם זאת, הטכניקה עלולה לגרום לשיעור תמותה גבוה, כמו גם לנפח בלתי נשלט של SAH וסיבוכים תוך גולגולתיים אחרים כגון שבץ או דימום תוך גולגולתי. בפרוטוקול זה מוצג מודל עכבר SAH סטנדרטי, המושרה על ידי ניקוב נימה אנדווסקולרית, בשילוב עם הדמיית תהודה מגנטית (MRI) 24 שעות לאחר הניתוח כדי להבטיח את אתר הדימום הנכון ולא לכלול פתולוגיות תוך גולגולתיות רלוונטיות אחרות. בקצרה, עכברי C57BL/6J מורדמים בזריקת קטמין/קסילאזין תוך-צפקית (משקל גוף של 70 מ"ג/16 מ"ג/ק"ג) ומונחים בתנוחת שכיבה. לאחר חתך הצוואר האמצעי, עורק הצוואר המשותף (CCA) והביפורקציה של הצוואר נחשפים, ותפר פוליפרופילן מונופילמנטי 5-0 שאינו נספג מוחדר באופן מדרדר לתוך עורק הצוואר החיצוני (ECA) ומתקדם לתוך עורק הצוואר המשותף. לאחר מכן, החוט הוא invagined לתוך העורק הצווארי הפנימי (ICA) ונדחף קדימה כדי לנקב את עורק המוח הקדמי (ACA). לאחר ההחלמה מניתוח, עכברים עוברים MRI 7.0 T 24 שעות מאוחר יותר. ניתן לכמת את נפח הדימום ולדרג אותו באמצעות MRI לאחר הניתוח, מה שמאפשר לקבוצת SAH ניסיונית חזקה עם אפשרות לבצע ניתוחים נוספים של תת-קבוצות בהתבסס על כמות הדם.

התמותה לצורך מחקר זה, 92 עכברי C57Bl/6J זכרים בגילאי 8-12 שבועות עברו ניתוח SAH; באלה ראינו שיעור תמותה כולל של 11.9% (n = 12). התמותה התרחשה אך ורק בתוך 6-24 השעות הראשונות לאחר הניתוח, מה שמרמז על תמותה פריאופרטיבית כמו גם על דימום SAH עצמו כגורמים התורמים הסבירים ביותר.
ציון ד...

Watch this Scientific Journal Video about Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging MRI at JoVE.com

Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging MRI

כאן אנו מציגים מודל עכבר SAH סטנדרטי, המושרה על ידי ניקוב נימה אנדווסקולרית, בשילוב עם הדמיית תהודה מגנטית (MRI) 24 שעות לאחר הניתוח כדי להבטיח את אתר הדימום הנכון ולא לכלול פתולוגיות תוך גולגולתיות רלוונטיות אחרות.

מודל ניקוב אנדווסקולרי לדימום תת-עכבישי בשילוב עם דימום תהודה מגנטית (MRI)

The endovascular filament perforation model to mimic subarachnoid hemorrhage (SAH) is a commonly used model - however, the technique can cause a high ...

מודל הניקוב האנדווסקולרי בשילוב עם MRI לאחר הניתוח מאפשר אימות של דימום והדרה של פתולוגיות בין-גולגולתיות אחרות. אחד היתרונות של גישה זו הוא האפשרות לכמת את נפח הדימום לניתוח תת-קבוצות נוסף. התחילו בגילוח שיער הצוואר של העכבר.החל משחה עיניים במהלך ההליך. יש לחטא את העור עם 70% אתנול ואחריו בטאדין או כלורהקסידין ולמרוח 1% לידוקאין. מקם את העכבר במצב שכיבה כאשר ראשו ופלג גופו העליון פונים כלפי מעלה.ייצבו את העכבר באופן דורסני על ידי שימוש בנייר דבק בארבע הגפיים. למתוח את עור הצוואר ולהרים אותו. פתחו את עור הצוואר מהסנטר ועד לקצה העליון של עצם השד והפרידו את בלוטות הרוק מרקמת החיבור הסמוכה.חשוף את נדן עורק הצוואר הנפוץ על ידי הפרדת השרירים לאורך צד אחד של קנה הנשימה. חושפים את השדה הכירורגי עם ספוגית גזה סטרילית או סטרילית ומנתקים את עורק הצוואר ומשאירים 8-0 חופשי תפר משי מבלי לקשור אותו, להבטיח לא לפגוע בעצב vagal. נתחו את הקצה הדיסטלי של ה-ECA וליקטו את כלי השיט פעמיים בתנוחה דיסטלית.בנקודת האמצע של מקטע החוטים הקשורים פעמיים מפרקים את ה-ECA ויוצרים גדם כלי. השאירו תפר משי סביב ה-ICA מבלי לסגור אותו. ארגנו מראש קשירת קשירת קשירה אחת עבור החוטים סביב גדם ה-ECA.אין לסגור אותו עד להכנסת נימה מוצלחת. סגור את ה- ICA וה- CCA באופן זמני באמצעות תפר או מיקרו קליפ. באמצעות מספריים מיקרו-וסקולריים, בצע חתך ב- ECA והכנס 5-0 לחלופין 4-O Prolene נימה, וקדם אותו ל- CCA.סגור את הליגטורה ב- ECA תוך ניתוק ה- micro clip ב- ICA וב- CCA. משכו לאחור את החוט בעדינות והתאימו את גדם ה-ECA לכיוון הגולגולת תוך כדי החדרת החוט דרך הביפורקציה לתוך ה-ICA. מקם את קצה החוט בזווית של כ-30 מעלות לקו האמצע של קנה הנשימה במישור האופקי ודחף אותו לתוך ICA.בביפורקציה ACA-MCA נצפתה התנגדות. הזיזו את החוט קדימה עד שלושה מילימטרים ונקבו את ה-ACA הנכון. משוך במהירות את החוט לגדם ECA ומאפשר זרימת דם בחלל התת-עכבישי.מקם את החוט במצב זה למשך 10 שניות. למשוך את החוט. ניתן לסגור את ה- CCA באופן זמני מראש כדי למנוע איבוד דם מוגזם ולאחר מכן למשוך את החוט.ליגייט את ה-ECA באמצעות תפרים שנקבעו מראש ולפתוח מחדש את ה-CCA אם סגרתם אותו בעבר. נוכחות של רעידות שרירים, מיוזה איפסילטרלית, גזים לנשימה, שינוי בקצב הלב ובריחת שתן יכולים להיות עדות לניתוח מוצלח. יש לוודא שאין דליפת דימום ולחטא את העור.לתפור את הפצע. הניחו את העכבר בקופסה תרמית והמתינו עד שלבעל החיים תהיה מספיק תודעה כדי שתהיה לו טבילה בחוזקה. כדי להקל על הכאב, לתת 1.2 מיליגרם לכל מיליליטר של אקמול.באמצעות סורק מכרסמים על תהודת ראש עכבר לבצע MRI לאחר 24 שעות של ניתוח, להניח את העכבר על שמיכת מים מחוממת במחזור ב 37 מעלות צלזיוס. ראשית, בצע סריקת ייחוס מהירה תוך רכישת שלוש חבילות פרוסה אורתוגונליות. לאחר מכן השתמש ברצף הד ספין טורבו טורבו משוקלל T2 ברזולוציה גבוהה להדמיה.העבר את הנתונים לפורמט התמונה DICOM והשתמש בתוכנת Imagej לדירוג SAH ונפח של קרישי דם. כדי להבטיח את אתר הדימום הנכון ולא לכלול פתולוגיות תוך גולגולתיות אחרות, סריקות MRI בוצעו 24 שעות לאחר הניתוח. ציון הדימום של SAH כומת על סמך סריקות MRI משוקללות T2.בקרב העכברים שנבדקו, 14% מבעלי החיים סווגו כדרגה אפסית מדממת ללא ראיות רדיולוגיות ל-SAH או לדימום. רוב בעלי החיים הראו ציוני דימום בין 1 ל-3, ו-10% הראו דימום בדרגה ד' שהוגדרה כ-SAH לאורך השבץ ו/או ICH. נפח הדימום הכולל של כל דרגת SAH, בהתבסס על עובי SAH, כומת אשר מסייע לקבוע את אזור הדימום.נפח הדימום המחושב בהתבסס על עובי ה-SAH הצירי הראה הבדלים משמעותיים בתת-הקבוצות המתאימות להם בדרגה 1 עד 3. לאורך כל הניתוח, ניתוח יסודי של רקמת החיבור שמסביב הוא חיוני למיקום נכון של התפרים. ודאו שאורך גדם ה-ECA מספיק כדי שיהיה לכם נוח מרחב עבודה לקשירת, החתך וההחדרה של החוט.לעולם אל תדחוף את החוט קדימה כשאתה מרגיש התנגדות לפני הביפורקציה של MCA-ACA כדי למנוע ניקוב מוקדם של כלי השיט.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging (MRI)

Multiple-mouse Neuroanatomical Magnetic Resonance Imaging

מרובה עכבר Neuroanatomical תהודה מגנטית

The field of mouse phenotyping with magnetic resonance imaging (MRI) is rapidly growing, motivated by the need for improved tools for characterizing and ...

High-resolution Functional Magnetic Resonance Imaging Methods for Human Midbrain

ברזולוציה גבוהה תהודה מגנטית פונקציונלית שיטות המוח התיכון האדם

Functional MRI (fMRI) is a widely used tool for non-invasively measuring correlates of human brain activity. However, its use has mostly been focused upon ...

The Use of Magnetic Resonance Spectroscopy as a Tool for the Measurement of Bi-hemispheric Transcranial Electric Stimulation Effects on Primary Motor Cortex Metabolism

השימוש בספקטרוסקופיה בתהודה מגנטית ככלי למדידה של השפעות דו חצי מוח Transcranial חשמלי גירוי על יסודי Motor Cortex מטבוליזם

Transcranial direct current stimulation (tDCS) is a neuromodulation technique that has been increasingly used over the past decade in the treatment of ...

High-resolution In Vivo Manual Segmentation Protocol for Human Hippocampal Subfields Using 3T Magnetic Resonance Imaging

High-resolution In Vivo Manual Segmentation Protocol for Human Hippocampal Subfields Using 3T Magnetic Resonance Imaging

ברזולוציה גבוהה<em&gt; In vivo</em&gt; פרוטוקול פילוח ידני לאדם בהיפוקמפוס תת תחומים באמצעות הדמיה בתהודה מגנטית 3T

The human hippocampus has been broadly studied in the context of memory and normal brain function and its role in different neuropsychiatric disorders has ...

High-resolution Structural Magnetic Resonance Imaging of the Human Subcortex In Vivo and Postmortem

High-resolution Structural Magnetic Resonance Imaging of the Human Subcortex In Vivo and Postmortem

הדמיית תהודה מגנטית מבנית ברזולוציה גבוהה של תת-הקליפה&quot; האדם<I&gt; In vivo</I&gt; ולאחר המוות

The focus of this study was to test the resolution limits of structural MRI of a postmortem brain compared to living human brains. The resolution of ...

A Magnetic Resonance Imaging Protocol for Stroke Onset Time Estimation in Permanent Cerebral Ischemia

עבור קו תחילת זמן להערכת ב קבע קליפתית פרוטוקול הדמיית תהודה מגנטית

MRI provides a sensitive and specific imaging tool to detect acute ischemic stroke by means of a reduced diffusion coefficient of brain water. In a rat ...

A Volumetric Method for Quantification of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

שיטה הנפחי עבור כימות Vasospasm המוחית במודל מאתר של דימום תת-עכבישי

Subarachnoid hemorrhage (SAH) is a subtype of hemorrhagic stroke. Cerebral vasospasm that occurs in the aftermath of the bleeding is an important factor ...

Double Direct Injection of Blood into the Cisterna Magna as a Model of Subarachnoid Hemorrhage

הזרקת דם ישירה כפולה לתוך מגנה צ'יסטרנה כודל של דימום Subarachnoid

Among strokes, subarachnoid hemorrhage (SAH) consecutive to the rupture of a cerebral arterial aneurysm represents 5-9% but is responsible for about 30% ...

Analysis of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage with High Frequency Transcranial Duplex Ultrasound

ניתוח של Vasospasm מוחי במודל מורין של דימום subarachnoid עם אולטרסאונד דופלקס Transcranial בתדר גבוה

Cerebral vasospasm that occurs in the weeks after subarachnoid hemorrhage, a type of hemorrhagic stroke, contributes to delayed cerebral ischemia. A ...

Whole-Brain Single-Cell Imaging and Analysis of Intact Neonatal Mouse Brains Using MRI, Tissue Clearing, and Light-Sheet Microscopy

הדמיה וניתוח של כל המוח החד-תאי של מוחות עכברים שלמים של ילודים באמצעות MRI, ניקוי רקמות ומיקרוסקופיה של יריעות אור

Tissue clearing followed by light-sheet microscopy (LSFM) enables cellular-resolution imaging of intact brain structure, allowing quantitative analysis of ...