Name: endovascular perforation model for subarachnoid hemorrhage combined with magnetic resonance imaging (mri)
Uploaded: 2021-12-16T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging MRI at JoVE.com

SL은 중국 장학금위원회의 지원을 받았다. KT는 베를린보건원과 소넨펠트-스티프퉁의 BIH-MD 장학금의 지원을 받았다. RX는 BIH-Charité Clinician Scientist Program의 지원을 받으며, Charité -Universitätsmedizin Berlin과 Berlin Institute of Health가 자금을 지원합니다. 우리는 독일 연구 재단 (DFG)과 Charité - Universitätsmedizin Berlin의 Open Access Publication Fund의 지원을 인정합니다.

실험은 Landesamt fuer Gesundheit und Soziales (LaGeSo), Berlin, Germany (G0063/18)에 의해 규정된 지침 및 규정에 따라 수행되었다. 본 연구에서, 체중이 25 ± 0.286 g (평균 ± s.e.m.)인 C57Bl/6J 수컷 (8-12주령) 마우스를 사용하였다.
1. 동물 준비
<ol><li>케타민 (70 mg / kg)과 자일라진 (16 mg / kg)을 복강 내로 주사하여 마취를 유도하십시오. 정상 체온을 유지하여 깊은 마취의 빠른 유도에 기?...

<ol>
	<li>Macdonald, R. L., Schweizer, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+subarachnoid+haemorrhage.">Spontaneous subarachnoid haemorrhage.</a> The Lancet. 389 (10069), 655-666 (2017).</li><li>van Gijn, J., Kerr, R. S., Rinkel, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subarachnoid+haemorrhage.">Subarachnoid haemorrhage.</a> The Lancet. 369 (9558), 306-318 (2007).</li><li>Abraham, M. K., Chang, W. -. T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subarachnoid+hemorrhage.">Subarachnoid hemorrhage.</a> Emergency Medicine Clinics of North America. 34 (4), 901-916 (2016).</li><li>Schertz, M., Mehdaoui, H., Hamlat, A., Piotin, M., Banydeen, R., Mejdoubi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+and+mortality+of+spontaneous+subarachnoid+hemorrhage+in+martinique.">Incidence and mortality of spontaneous subarachnoid hemorrhage in martinique.</a> PLOS ONE. 11 (5), 0155945 (2016).</li><li>Okazaki, T., Kuroda, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage:+intensive+care+for+improving+neurological+outcome.">Aneurysmal subarachnoid hemorrhage: intensive care for improving neurological outcome.</a> Journal of Intensive Care. 6 (1), 28 (2018).</li><li>Kilbourn, K. J., Levy, S., Staff, I., Kureshi, I., McCullough, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+characteristics+and+outcomes+of+neurogenic+stress+cadiomyopathy+in+aneurysmal+subarachnoid+hemorrhage.">Clinical characteristics and outcomes of neurogenic stress cadiomyopathy in aneurysmal subarachnoid hemorrhage.</a> Clinical Neurology and Neurosurgery. 115 (7), 909-914 (2013).</li><li>de Oliveira Manoel, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+critical+care+management+of+spontaneous+intracranial+hemorrhage:+a+contemporary+review.">The critical care management of spontaneous intracranial hemorrhage: a contemporary review.</a> Critical Care. 20 (1), 272 (2016).</li><li>Schneider, U. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microglia+inflict+delayed+brain+injury+after+subarachnoid+hemorrhage.">Microglia inflict delayed brain injury after subarachnoid hemorrhage.</a> Acta Neuropathologica. 130 (2), 215-231 (2015).</li><li>Delgado, T. J., Brismar, J., Svendgaard, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subarachnoid+haemorrhage+in+the+rat:+angiography+and+fluorescence+microscopy+of+the+major+cerebral+arteries.">Subarachnoid haemorrhage in the rat: angiography and fluorescence microscopy of the major cerebral arteries.</a> Stroke. 16 (4), 595-602 (1985).</li><li>Piepgras, A., Thome&#769;, C., Schmiedek, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+an+anterior+circulation+rat+subarachnoid+hemorrhage+model.">Characterization of an anterior circulation rat subarachnoid hemorrhage model.</a> Stroke. 26 (12), 2347-2352 (1995).</li><li>Suzuki, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heme+oxygenase-1+gene+induction+as+an+intrinsic+regulation+against+delayed+cerebral+vasospasm+in+rats.">Heme oxygenase-1 gene induction as an intrinsic regulation against delayed cerebral vasospasm in rats.</a> Journal of Clinical Investigation. 104 (1), 59-66 (1999).</li><li>Dudhani, R. V., Kyle, M., Dedeo, C., Riordan, M., Deshaies, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Low+mortality+rat+model+to+assess+delayed+cerebral+vasospasm+after+experimental+subarachnoid+hemorrhage.">A Low mortality rat model to assess delayed cerebral vasospasm after experimental subarachnoid hemorrhage.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (71), e4157 (2013).</li><li>Iuliano, B. A., Pluta, R. M., Jung, C., Oldfield, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction+in+a+primate+model+of+cerebral+vasospasm.">Endothelial dysfunction in a primate model of cerebral vasospasm.</a> Journal of Neurosurgery. 100 (2), 287-294 (2004).</li><li>Barry, K. J., Gogjian, M. A., Stein, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+animal+model+for+investigation+of+subarachnoid+hemorrhage+and+cerebral+vasospasm.">Small animal model for investigation of subarachnoid hemorrhage and cerebral vasospasm.</a> Stroke. 10 (5), 538-541 (1979).</li><li>Bederson, J. B., Germano, I. M., Guarino, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortical+blood+flow+and+cerebral+perfusion+pressure+in+a+new+noncraniotomy+model+of+subarachnoid+hemorrhage+in+the+rat.">Cortical blood flow and cerebral perfusion pressure in a new noncraniotomy model of subarachnoid hemorrhage in the rat.</a> Stroke. 26 (6), 1086-1092 (1995).</li><li>Veelken, J. A., Laing, R. J. C., Jakubowski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Sheffield+model+of+subarachnoid+hemorrhage+in+rats.">The Sheffield model of subarachnoid hemorrhage in rats.</a> Stroke. 26 (7), 1279-1284 (1995).</li><li>Sugawara, T., Ayer, R., Jadhav, V., Zhang, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+grading+system+evaluating+bleeding+scale+in+filament+perforation+subarachnoid+hemorrhage+rat+model.">A new grading system evaluating bleeding scale in filament perforation subarachnoid hemorrhage rat model.</a> Journal of Neuroscience Methods. 167 (2), 327-334 (2008).</li><li>Egashira, Y., Shishido, H., Hua, Y., Keep, R. F., Xi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+grading+system+based+on+magnetic+resonance+imaging+in+a+mouse+model+of+subarachnoid+hemorrhage.">New grading system based on magnetic resonance imaging in a mouse model of subarachnoid hemorrhage.</a> Stroke. 46 (2), 582-584 (2015).</li><li>Mutoh, T., Mutoh, T., Sasaki, K., Nakamura, K., Taki, Y., Ishikawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Value+of+three-dimensional+maximum+intensity+projection+display+to+assist+in+magnetic+resonance+imaging+(MRI)-based+grading+in+a+mouse+model+of+subarachnoid+hemorrhage.">Value of three-dimensional maximum intensity projection display to assist in magnetic resonance imaging (MRI)-based grading in a mouse model of subarachnoid hemorrhage.</a> Medical Science Monitor. 22, 2050-2055 (2016).</li><li>Kothari, R. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+ABCs+of+measuring+intracerebral+hemorrhage+volumes.">The ABCs of measuring intracerebral hemorrhage volumes.</a> Stroke. 27 (8), 1304-1305 (1996).</li><li>Leclerc, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+pathophysiology+in+humans+and+rodent+models+of+subarachnoid+hemorrhage.">A comparison of pathophysiology in humans and rodent models of subarachnoid hemorrhage.</a> Frontiers in Molecular Neuroscience. 11, 71 (2018).</li><li>Titova, E., Ostrowski, R. P., Zhang, J. H., Tang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+models+of+subarachnoid+hemorrhage+for+studies+of+cerebral+vasospasm.">Experimental models of subarachnoid hemorrhage for studies of cerebral vasospasm.</a> Neurological Research. 31 (6), 568-581 (2009).</li><li>Marbacher, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+review+of+in+vivo+animal+models+of+subarachnoid+hemorrhage:+Species,+standard+parameters,+and+outcomes.">Systematic review of in vivo animal models of subarachnoid hemorrhage: Species, standard parameters, and outcomes.</a> Translational Stroke Research. 10 (3), 250-258 (2019).</li><li>Marbacher, S., Fandino, J., Kitchen, N. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standard+intracranial+in+vivo+animal+models+of+delayed+cerebral+vasospasm.">Standard intracranial in vivo animal models of delayed cerebral vasospasm.</a> British Journal of Neurosurgery. 24 (4), 415-434 (2010).</li><li>Thompson, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+cerebral+aneurysm+models.">In vivo cerebral aneurysm models.</a> Neurosurgical Focus. 47 (1), 1-8 (2019).</li><li>Frontera, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prediction+of+symptomatic+vasospasm+after+subarachnoid+hemorrhage:+The+modified+fisher+scale.">Prediction of symptomatic vasospasm after subarachnoid hemorrhage: The modified fisher scale.</a> Neurosurgery. 59 (1), 21-26 (2006).</li><li>Fisher, C. M., Kistler, J. P., Davis, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relation+of+cerebral+vasospasm+to+subarachnoid+hemorrhage+visualized+by+computerized+tomographic+scanning.">Relation of cerebral vasospasm to subarachnoid hemorrhage visualized by computerized tomographic scanning.</a> Neurosurgery. 6 (1), 1-9 (1980).</li><li>Wilson, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+and+quantitative+method+to+predict+symptomatic+vasospasm+after+subarachnoid+hemorrhage+based+on+computed+tomography:+Beyond+the+fisher+scale.">A simple and quantitative method to predict symptomatic vasospasm after subarachnoid hemorrhage based on computed tomography: Beyond the fisher scale.</a> Neurosurgery. 71 (4), 869-875 (2012).</li><li>Sch&#252;ller, K., B&#252;hler, D., Plesnila, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+subarachnoid+hemorrhage.">A murine model of subarachnoid hemorrhage.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (81), e50845 (2013).</li></ol>

요약하면, 혈관 내 필라멘트 천공 조작에 의해 유도된 표준화된 SAH 마우스 모델은 경미한 침윤, 짧은 수술 시간, 및 허용가능한 사망률로 제시된다. MRI는 올바른 출혈 부위와 다른 관련 두개내 병리를 배제하기 위해 수술 후 24 시간 동안 수행됩니다. 또한, 우리는 다른 SAH 출혈 등급을 분류하고 출혈량을 측정하여 출혈 등급에 따라 추가 하위 그룹 분석을 가능하게했습니다.
마...

Subarachnoid 출혈 (SAH)은 두개내 동맥류의 파열로 인해 발생하며 뇌졸중 1,2의 약 5 %를 차지하는 상당한 이환률 및 사망률과 관련하여 생명을 위협하는 응급 상황을 초래합니다. SAH 환자는 심한 두통, 신경 학적 기능 장애 및 의식의 진행성 장애를 가지고 있습니다3. SAH 환자의 약 30 %가 초기 출혈 사건4 후 처음 30 일 이내에 사망합니다. 임상적으로, 환자의 50 %는 초기 뇌 손상 후 지연 뇌 손상 (DBI)을 경험합니다. DBI는 지연된 뇌 허혈 및 지연된 신경학적 결핍을 특징으로 한다. 현재의 연구에 따르면 여러 가지 요인의 상승 효과는 혈액 - 뇌 장벽의 파괴, 작은 동맥의 수축, 미세 순환 기능 장애 및 혈전증 5,6을 포함한 신경 기능의 상실로 이어진다는것을 보여주었습니다.
SAH의 한 가지 독특한 측면은 병인이 실질 외 위치에서 유래하지만 실질 내부의 해로운 캐스케이드로 이어진다는 것입니다 : 병리학은 지주막하 공간에 혈액이 축적되어 신경 염증, 신경 및 내피 세포 아폽토시스, 피질 확산 탈분극 및 뇌 부종 형성과 같은 많은 사각 부근 효과를 유발합니다7, 8.
임상 연구는 여러 가지 요인에 의해 제한되며, 동물 모델은 질병의 pathomechanistic 변화를 일관되고 정확하게 모방하는 데 중요한 요소입니다. 상이한 SAH 모델 프로토콜, 예를 들어, 시스테르나 마그나(ACM)로의 자가 혈액 주입이 제안되었다. 또한, 시스테르나 마그나 및 시신경 치아즘 수조(APC)에 자가 혈액을 각각 9,10개로 이중 주사하는 변형된 방법이다. 자가 혈액 주입은 지주막하 출혈 후 혈관 경련 및 염증 반응의 병리학 적 과정을 시뮬레이션하는 간단한 방법이지만, 두개내 압력 (ICP)의 다음과 같은 상승은 상대적으로 느리고 혈액 뇌 장벽의 투과성에 주목할만한 변화는 유도되지 않습니다11,12. 또 다른 방법은, 큰 SAH 모델(예를 들어, 원숭이 및 개)에서 일반적으로 사용되는 동맥주위 혈액 배치는 항응고된 자가 혈액 또는 유사한 혈액 생성물을 혈관 주위에 배치하는 것을 포함한다. 동맥의 직경 변화는 현미경으로 관찰 할 수 있으며 SAH13 이후 뇌 혈관 경련의 지표 역할을합니다.
Barry et al. 먼저 1979년에 두개골을 제거한 후 바질라 동맥이 노출되는 혈관 내 천공 모델을 기술하였다; 동맥은 그 후 미세한 입체 전술 기술(14)을 사용하여 텅스텐 미세전극으로 구멍을 뚫는다. 1995년, 베더슨과 벨켄은 뇌허혈의 Zea-Longa 모델을 수정하고 혈관 내 천공을 확립하였으며, 이는15,16년 이래 지속적으로 개선되고 있다. 이 방법은 생쥐와 인간이 윌리스의 원으로 알려진 유사한 두개내 혈관 네트워크를 공유한다는 사실에 기초합니다.
마우스 모델에서 SAH의 수술 후 평가 및 등급을 매기기 위해 다양한 접근법이 제안되었습니다. Sugawara et al.은 200817 이후 널리 사용 된 등급 척도를 개발했습니다. 이 방법은 형태학적 변화에 기초하여 SAH의 심각도를 평가한다. 그러나이 방법의 경우 마우스의 뇌 조직 형태를 직접 시력으로 검사해야하므로 평가를 위해 마우스를 희생해야합니다. 또한, 생체내에서 SAH 중증도를 결정하기 위한 몇 가지 방법이 확립되었다. 접근법은 간단한 신경 학적 채점에서 두개내 압력 (ICP)의 모니터링에 이르기까지 다양한 방사선 이미징 기술에 이르기까지 다양합니다. 또한, MRI 등급은 SAH 중증도를 등급화하는 새로운 비침습적 도구로 밝혀졌으며, 이는 신경학적 점수18,19와 상관관계가 있다.
여기에서, 혈관 내 천공에 의해 야기된 SAH 모델에 대한 프로토콜이 제시되고, 수술 후 MRI와 결합된다. 생체 내 환경에서 출혈량을 객관화하는 시스템을 구축하기 위한 시도로, 우리는 또한 7.0 T 고해상도 T2 가중 MRI를 기반으로 총 혈액량의 SAH 등급 및 정량화를 위한 시스템을 개발하였다. 이 접근법은 SAH의 올바른 유도와 뇌졸중, 뇌수종 또는 뇌출혈 (ICH) 및 합병증과 같은 다른 병리를 배제합니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Eye cream</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>815529836</td>
			<td>Bepanthen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Images analysis software</td>
			<td>ImageJ</td>
			<td></td>
			<td>Bundled with Java 1.8.0_172</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ligation suture (5-0)</td>
			<td>SMI</td>
			<td></td>
			<td>Silk black USP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light source for microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>CL 6000 LED</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>CP-pharma</td>
			<td>797-037</td>
			<td>100 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MRI</td>
			<td>Bruker</td>
			<td>Pharmascan 70/16</td>
			<td>&#160;7 Tesla</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MRI images acquired software</td>
			<td>Bruker</td>
			<td></td>
			<td>Bruker Paravision 5.1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paracetamol (40 mg/mL)</td>
			<td>bene Arzneimittel</td>
			<td>4993736</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolene filament (5-0)</td>
			<td>Erhicon</td>
			<td>EH7255</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Razor</td>
			<td>Wella</td>
			<td>HS61</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical instrument (Fine Scissors)</td>
			<td>FST</td>
			<td>14060-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical instrument (forceps#1)</td>
			<td>AESCULAP</td>
			<td>FM001R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical instrument (forceps#2)</td>
			<td>AESCULAP</td>
			<td>FD2855R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical instrument (forceps#3)</td>
			<td>Hammacher</td>
			<td>HCS 082-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical instrument (Needle holder)</td>
			<td>FST</td>
			<td>91201-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical instrument (Vannas Spring Scissors)</td>
			<td>FST</td>
			<td>15000-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical microscope</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>Stemi 2000 C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ventilation monitoring</td>
			<td>Stony Brook</td>
			<td></td>
			<td>Small Animal Monitoring &#38; Gating System</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wounding suture(4-0)</td>
			<td>Erhicon</td>
			<td>CB84D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylavet</td>
			<td>CP-pharma</td>
			<td>797-062</td>
			<td>20 mg/mL</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

endovascular perforation model for subarachnoid hemorrhage combined with magnetic resonance imaging (mri)

지주막하 출혈 (SAH)을 모방하는 혈관 내 필라멘트 천공 모델은 일반적으로 사용되는 모델입니다 - 그러나, 기술은 높은 사망률뿐만 아니라 SAH 및 뇌졸중 또는 두개내 출혈과 같은 다른 두개내 합병증의 통제 할 수없는 부피를 유발할 수 있습니다. 이 프로토콜에서, 표준화된 SAH 마우스 모델이 제시되고, 혈관 내 필라멘트 천공에 의해 유도되고, 수술 후 24시간 후에 자기 공명 영상(MRI)과 결합되어 정확한 출혈 부위를 보장하고 다른 관련 두개내 병리를 배제한다. 간단히 말해서, C57BL / 6J 마우스는 복강 내 케타민 / 자일라진 (70mg / 16mg / kg 체중) 주사로 마취되어 수핀 위치에 놓입니다. 미드라인 목 절개 후, 일반적인 경동맥 (CCA) 및 경동맥 분기가 노출되고, 5-0 비흡수성 모노필라멘트 폴리프로필렌 봉합사가 역행 방식으로 외부 경동맥 (ECA)으로 삽입되고 일반적인 경동맥으로 진행된다. 이어서, 필라멘트는 내부 경동맥(ICA)으로 질내 내로 들어가고, 전방 대뇌동맥(ACA)을 천공하기 위해 앞으로 밀려난다. 수술에서 회복 한 후, 마우스는 24 시간 후에 7.0 T MRI를 겪습니다. 출혈의 양은 수술 후 MRI를 통해 정량화되고 등급화 될 수 있으므로 혈액량에 따라 추가 하위 그룹 분석을 수행 할 수있는 옵션을 갖춘 강력한 실험 SAH 그룹이 가능합니다.

사망률 본 연구를 위해, 8-12주 사이에 숙성된 총 92마리의 수컷 C57Bl/6J 마우스가 SAH 수술을 받았다; 이들에서, 우리는 11.9 %의 전체 사망률을 관찰했다 (n = 12). 사망률은 수술 후 처음 6-24 시간 이내에 독점적으로 발생했으며, 이는 수술 전 사망률과 SAH 출혈 자체가 가장 큰 기여 요인임을 시사합니다.
SAH 출혈 등급 총 50 마리의 마우스가 수술 후 24 시...

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Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging MRI

여기서 우리는 정확한 출혈 부위를 보장하고 다른 관련 두개내 병리를 배제하기 위해 수술 후 24 시간 동안 자기 공명 영상 (MRI)과 결합 된 혈관 내 필라멘트 천공에 의해 유도 된 표준화 된 SAH 마우스 모델을 제시합니다.

자기 공명 영상(MRI)과 결합된 Subarachnoid 출혈에 대한 혈관 내 천공 모델

The endovascular filament perforation model to mimic subarachnoid hemorrhage (SAH) is a commonly used model - however, the technique can cause a high ...

수술 후 MRI와 결합 된 혈관 내 천공 모델은 출혈의 검증과 다른 두개간 병리의 배제를 허용합니다. 이 접근법의 장점 중 하나는 추가 하위 그룹 분석을 위해 출혈량을 정량화하는 옵션입니다. 마우스의 목 머리카락을 면도하는 것으로 시작하십시오.절차 중에 안과 연고를 바르십시오. 70 % 에탄올로 피부를 살균 한 다음 Betadine 또는 chlorhexidine을 바르고 1 % 리도카인을 바르십시오. 마우스를 머리와 몸통이 위쪽 방향을 향하도록 수핀 위치에 놓습니다.네 사지에 테이프를 사용하여 마우스를 등쪽으로 안정화하십시오. 목의 피부를 스트레칭하고 들어 올립니다. 턱에서 유방 뼈의 위쪽 가장자리까지 목 피부를 펼치고 인접한 결합 조직에서 타액선을 분리하십시오.기관의 한쪽을 따라 근육을 분리하여 일반적인 경동맥 외피를 노출시킵니다. 수축기 또는 멸균 거즈 면봉으로 수술 현장을 노출시키고 경동맥을 분리하고 자유 8-0을 남겨 둡니다. 실크 봉합사를 결찰하지 않고 미주 신경을 손상시키지 않도록합니다. ECA의 원위 말단을 해부하고 원위 위치에서 혈관을 두 번 절제하십시오.두 번 결찰 된 필라멘트 세그먼트의 중간 지점에서 ECA를 분리하고 용기 그루터기를 만듭니다. 실크 봉합사를 닫지 않고 ICA 주위에 두십시오. ECA 그루터기 주위의 필라멘트에 대한 하나의 결찰을 미리 배열하십시오.필라멘트 삽입이 성공할 때까지 닫지 마십시오. 봉합사 또는 마이크로 클립을 사용하여 ICA 및 CCA를 일시적으로 닫습니다. 미세 혈관 가위를 사용하여 ECA를 절개하고 5-0 대안으로 4-O Prolene 필라멘트를 삽입하고 CCA로 전진시킵니다.ICA 및 CCA의 마이크로 클립을 분리하면서 ECA의 합자를 닫습니다. 필라멘트를 부드럽게 뒤로 당기고 ECA 그루터기를 두개골 방향으로 조정하면서 ICA로의 분기를 통해 필라멘트를 질질합니다. 필라멘트 팁을 수평면의 기관 미드라인에 약 30도 각도로 중앙에 놓고 ICA 내부로 밀어 넣습니다.ACA-MCA 분기에서 저항이 관찰됩니다. 필라멘트를 앞으로 세 밀리미터까지 이동하고 오른쪽 ACA를 천공합니다. 필라멘트를 ECA 그루터기로 신속하게 철수시켜 지주막하 공간에서 혈류를 허용합니다.필라멘트를 이 위치에 10초 동안 놓습니다. 필라멘트를 철회하십시오. CCA는 과도한 혈액 손실을 피하기 위해 사전에 일시적으로 폐쇄 된 다음 필라멘트를 철회 할 수 있습니다.미리 배열 된 봉합사를 사용하여 ECA를 취소하고 이전에 닫은 경우 CCA를 다시 엽니 다. 근육 떨림, 동측성 근증, 호흡을 위해 헐떡이는 것, 변경된 심장 리듬 및 요실금의 존재는 성공적인 수술의 증거를 뒷받침 할 수 있습니다. 출혈 누출이 없는지 확인하고 피부를 소독하십시오.상처를 봉합하십시오. 마우스를 열 상자에 넣고 동물이 흉골 잔해를 갖기에 충분한 의식을 가질 때까지 기다리십시오. 통증을 완화하려면 파라세타몰 밀리리터 당 1.2 밀리그램을 투여하십시오.마우스 머리 공진기에 설치류 스캐너를 사용하여 수술 24 시간 후 MRI를 수행하고 마우스를 섭씨 37도에서 가열 된 순환 물 담요에 놓습니다. 먼저 세 개의 직교 슬라이스 패키지를 획득하는 빠른 참조 스캔을 수행합니다. 그런 다음 이미징을 위해 고해상도 T2 가중 2D 터보 스핀 에코 시퀀스를 사용하십시오.데이터를 DICOM 이미지 형식으로 전송하고 혈전의 SAH 등급 및 체적 측정을 위해 Imagej 소프트웨어를 사용하십시오. 정확한 출혈 부위를 보장하고 다른 두개내 병리를 배제하기 위해, MRI 스캔은 수술 후 24시간 동안 수행되었다. SAH 출혈 등급은 T2 가중 MRI 스캔을 기준으로 정량화되었다.조사된 마우스 중에서, 동물의 14%는 SAH 또는 출혈에 대한 방사선학적 증거 없이 출혈 등급 0으로 분류되었다. 대부분의 동물은 한 명에서 세 명 사이의 출혈 등급을 보였고 10 %는 뇌졸중 및 / 또는 ICH를 따라 SAH로 정의 된 출혈 등급 네 번째 등급을 보였습니다. SAH 두께를 기준으로 각 SAH 등급의 총 출혈 부피를 정량화하여 출혈 부위를 결정하는 데 도움을줍니다.축방향 SAH 두께에 기초하여 계산된 출혈 부피는 그들의 상응하는 하위군 등급에서 하나 내지 세 등급에서 유의한 차이를 보였다. 전체 수술 전반에 걸쳐, 봉합사의 올바른 위치를 위해 주변 연결 조직의 철저한 해부가 중요합니다. ECA 그루터기의 길이가 충분하여 필라멘트의 결찰, 절개 및 삽입을위한 편안한 작업 공간을 확보하십시오.조기 혈관 천공을 방지하기 위해 MCA-ACA 분기 전에 저항을 느낄 때 필라멘트를 앞으로 밀지 마십시오.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Endovascular Perforation Model for Subarachnoid Hemorrhage Combined with Magnetic Resonance Imaging (MRI)

Multiple-mouse Neuroanatomical Magnetic Resonance Imaging

여러 마우스 Neuroanatomical 자기 공명 영상

The field of mouse phenotyping with magnetic resonance imaging (MRI) is rapidly growing, motivated by the need for improved tools for characterizing and ...

연구

신경과학

High-resolution Functional Magnetic Resonance Imaging Methods for Human Midbrain

인간 Midbrain위한 고해상도 기능성 자기 공명 영상 방법

Functional MRI (fMRI) is a widely used tool for non-invasively measuring correlates of human brain activity. However, its use has mostly been focused upon ...

The Use of Magnetic Resonance Spectroscopy as a Tool for the Measurement of Bi-hemispheric Transcranial Electric Stimulation Effects on Primary Motor Cortex Metabolism

일차 운동 피질 대사에 양성 반구 경 두개 전기 자극 효과의 측정을위한 도구로 자기 공명 분광학의 사용

Transcranial direct current stimulation (tDCS) is a neuromodulation technique that has been increasingly used over the past decade in the treatment of ...

High-resolution In Vivo Manual Segmentation Protocol for Human Hippocampal Subfields Using 3T Magnetic Resonance Imaging

High-resolution In Vivo Manual Segmentation Protocol for Human Hippocampal Subfields Using 3T Magnetic Resonance Imaging

높은 해상도<em&gt; 생체</em&gt; 3T 자기 공명 영상을 이용하여 인간의 해마 서브 필드에 대한 수동 분할 프로토콜

The human hippocampus has been broadly studied in the context of memory and normal brain function and its role in different neuropsychiatric disorders has ...

High-resolution Structural Magnetic Resonance Imaging of the Human Subcortex In Vivo and Postmortem

High-resolution Structural Magnetic Resonance Imaging of the Human Subcortex In Vivo and Postmortem

인간 Subcortex의 고해상도 구조 자기 공명 영상<I&gt; 생체</I&gt; 및 사후

The focus of this study was to test the resolution limits of structural MRI of a postmortem brain compared to living human brains. The resolution of ...

A Magnetic Resonance Imaging Protocol for Stroke Onset Time Estimation in Permanent Cerebral Ischemia

영구적인 뇌 허 혈에서 뇌졸중 발병 시간 추정에 대 한 자기 공명 화상 진 찰 프로토콜

MRI provides a sensitive and specific imaging tool to detect acute ischemic stroke by means of a reduced diffusion coefficient of brain water. In a rat ...

A Volumetric Method for Quantification of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage

거미 막 밑 출혈의 Murine 모델에 대뇌 Vasospasm의 정량화에 대 한 체적 메서드

Subarachnoid hemorrhage (SAH) is a subtype of hemorrhagic stroke. Cerebral vasospasm that occurs in the aftermath of the bleeding is an important factor ...

Double Direct Injection of Blood into the Cisterna Magna as a Model of Subarachnoid Hemorrhage

수브라크누드 출혈의 모델로 시스테나 마그나에 혈액을 이중 직접 주입

Among strokes, subarachnoid hemorrhage (SAH) consecutive to the rupture of a cerebral arterial aneurysm represents 5-9% but is responsible for about 30% ...

Analysis of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage with High Frequency Transcranial Duplex Ultrasound

고주파 두개골 이중 초음파를 가진 수브라크누이드 출혈의 뮤린 모형에 있는 뇌 혈관경련의 분석

Cerebral vasospasm that occurs in the weeks after subarachnoid hemorrhage, a type of hemorrhagic stroke, contributes to delayed cerebral ischemia. A ...

Whole-Brain Single-Cell Imaging and Analysis of Intact Neonatal Mouse Brains Using MRI, Tissue Clearing, and Light-Sheet Microscopy

MRI, 조직 투명화 및 라이트 시트 현미경을 사용한 온전한 신생아 마우스 뇌의 전뇌 단일 세포 이미징 및 분석

Tissue clearing followed by light-sheet microscopy (LSFM) enables cellular-resolution imaging of intact brain structure, allowing quantitative analysis of ...