Name: ex vivo hepatic perfusion through the portal vein in mouse
Uploaded: 2022-03-09T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Hepatic Perfusion Through the Portal Vein in Mouse at JoVE.com

تم دعم هذا العمل بتمويل من المعاهد الوطنية للصحة (R01-DK105346 ، P41-GM122698 ، 5U2C-DK119889). تم تنفيذ جزء من هذا العمل في معهد McKnight Brain Institute في مرفق التصوير بالرنين المغناطيسي المتقدم والتحليل الطيفي (AMRIS) التابع للمختبر الوطني للمجال المغناطيسي العالي ، والذي تدعمه الاتفاقية التعاونية لمؤسسة العلوم الوطنية رقم . DMR-1644779 وولاية فلوريدا.

تم التعامل مع التجارب التي شملت الفئران وفقا للجنة جامعة فلوريدا المؤسسية لرعاية الحيوانات واستخدامها (رقم البروتوكول #201909320). كانت سلالة الماوس المستخدمة هي C57BL/6J. جميع الفئران كانت من الذكور. تنطبق هذه الطريقة بشكل عام على الدراسات التي تستخدم سلالات الماوس القياسية الأخرى أيضا. يتم إجرا...

<ol>
	<li>Ragavan, M., McLeod, M. A., Giacalone, A. G., Merritt, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperpolarized+Dihydroxyacetone+Is+a+Sensitive+Probe+of+Hepatic+Gluconeogenic+State.">Hyperpolarized Dihydroxyacetone Is a Sensitive Probe of Hepatic Gluconeogenic State.</a> Metabolites. 11 (7), 441 (2021).</li><li>Lumata, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperpolarized+(13)C+Magnetic+Resonance+and+Its+Use+in+Metabolic+Assessment+of+Cultured+Cells+and+Perfused+Organs.">Hyperpolarized (13)C Magnetic Resonance and Its Use in Metabolic Assessment of Cultured Cells and Perfused Organs.</a> Methods in Enzymology. 561, 561-573 (2015).</li><li>Moreno, K. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+detection+of+hepatic+gluconeogenic+and+glycogenolytic+states+using+hyperpolarized+[2-13C]+dihydroxyacetone.">Real-time detection of hepatic gluconeogenic and glycogenolytic states using hyperpolarized [2-13C] dihydroxyacetone.</a> The Journal of Biological Chemistry. 289 (52), 35859-35867 (2014).</li><li>Moreno, K. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hyperpolarized+&#948;-[1-13C]+gluconolactone+as+a+probe+of+the+pentose+phosphate+pathway.">Hyperpolarized &#948;-[1-13C] gluconolactone as a probe of the pentose phosphate pathway.</a> NMR in Biomedicine. 30 (6), (2017).</li><li>Merritt, M. E., Harrison, C., Sherry, A. D., Malloy, C. R., Burgess, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Flux+through+hepatic+pyruvate+carboxylase+and+phosphoenolpyruvate+carboxykinase+detected+by+hyperpolarized+13C+magnetic+resonance.">Flux through hepatic pyruvate carboxylase and phosphoenolpyruvate carboxykinase detected by hyperpolarized 13C magnetic resonance.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 108 (47), 19084-19089 (2011).</li><li>Bailey, L. E., Ong, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Krebs-Henseleit+solution+as+a+physiological+buffer+in+perfused+and+superfused+preparations.">Krebs-Henseleit solution as a physiological buffer in perfused and superfused preparations.</a> Journal of Pharmacological Methods. 1 (2), 171-175 (1978).</li><li>Kolwicz, S. C., Tian, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+Cardiac+Function+and+Energetics+in+Isolated+Mouse+Hearts+Using+31P+NMR+Spectroscopy.">Assessment of Cardiac Function and Energetics in Isolated Mouse Hearts Using 31P NMR Spectroscopy.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (42), e2069 (2010).</li><li>Hwang, G. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effect+of+butylated+hydroxylanisole+against+hydrogen+peroxide-induced+apoptosis+in+primary+cultured+mouse+hepatocytes.">Protective effect of butylated hydroxylanisole against hydrogen peroxide-induced apoptosis in primary cultured mouse hepatocytes.</a> Journal of Veterinary Science. 16 (1), 17-23 (2015).</li><li>Bessems, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+isolated+perfused+rat+liver:+standardization+of+a+time-honoured+model.">The isolated perfused rat liver: standardization of a time-honoured model.</a> Laboratory Animals. 40 (3), 236-246 (2006).</li><li>Beal, E. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Small+Animal+Model+of+Ex+Vivo+Normothermic+Liver+Perfusion.">A Small Animal Model of Ex Vivo Normothermic Liver Perfusion.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (136), e57541 (2018).</li><li>Collins, J. B., Song, J., Mahabir, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Onset+and+duration+of+intradermal+mixtures+of+bupivacaine+and+lidocaine+with+epinephrine.">Onset and duration of intradermal mixtures of bupivacaine and lidocaine with epinephrine.</a> The Canadian Journal of Plastic Surgery. 21 (1), 51-53 (2013).</li><li>. Medical Dictionary Available from: <a target="_blank" href="https://www.merriam-webster.com/medical">https://www.merriam-webster.com/medical</a> (2022)</li><li>Thorpe, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> A Dissection in Color: The Rat (and the Sheep's Brain). , (1968).</li><li>Cabral, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purification+of+Hepatocytes+and+Sinusoidal+Endothelial+Cells+from+Mouse+Liver+Perfusion.">Purification of Hepatocytes and Sinusoidal Endothelial Cells from Mouse Liver Perfusion.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (132), e56993 (2018).</li><li>. Operations Manual Setup, Installation and Maintenance Available from: <a target="_blank" href="https://www.chem.ucla.edu/dept/Faculty/merchant/pdf/electrode_prep_maintenance.pdf">https://www.chem.ucla.edu/dept/Faculty/merchant/pdf/electrode_prep_maintenance.pdf</a> (2006)</li><li>. Heparin Available from: <a target="_blank" href="https://go.drugbank.com/drugs/DB01109">https://go.drugbank.com/drugs/DB01109</a> (2022)</li><li>Overmyer, K. A., Thonusin, C., Qi, N. R., Burant, C. F., Evans, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impact+of+anesthesia+and+euthanasia+on+metabolomics+of+mammalian+tissues:+studies+in+a+C57BL/6J+mouse+model.">Impact of anesthesia and euthanasia on metabolomics of mammalian tissues: studies in a C57BL/6J mouse model.</a> PloS One. 10 (2), 0117232 (2015).</li></ol>

هذا الإجراء الجراحي صعب ويتطلب ممارسة واسعة النطاق لتحقيق نتائج قابلة للتكرار. يجب تعديل الإيسوفلوران والغاز الناقل حسب الحاجة للحفاظ على صلاحية الحيوان من خلال أكبر قدر ممكن من الإجراء الجراحي. البيئة والوقت من اليوم والعمر والوزن والعديد من العوامل الأخرى ستؤثر على التخدير. يمكن أن يؤ?...

تعتبر التروية خارج الجسم الحي حاسمة في دراسة التمثيل الغذائي الكبدي ، والتروية من خلال الوريد البابي هو المعيار لهذه الدراسات. من أجل دراسة التمثيل الغذائي الكبدي بمعزل عن الآخرين ، يجب استئصال الكبد من الجسم لتجنب المضاعفات الناشئة عن التمثيل الغذائي في الأعضاء الأخرى (أي التمثيل الغذائي للجسم كله) وممارسة السيطرة على توافر الهرمونات (الأنسولين ، الجلوكاجون ، إلخ). يمكن أن يكون هذا النهج ضروريا لفهم آثار أمراض مثل السكري و NAFLD و NASH على التمثيل الغذائي الكبدي وكذلك آليات عمل الدواء. هذه المقالة بمثابة دليل لاستئصال الكبد والتروية. لقد طورنا إجراء مبسطا لإجراء دراسات الكبد الأيضية هذه بدقة كافية وقابلية للتكرار. إذا لم يتم إجراء الجراحة بشكل صحيح ، فهناك تباين واضح في البيانات الأيضية التي تم الحصول عليها. نحن نصف طريقة منظمة لإجراء قسطرة الوريد البابي واستئصال الكبد في سياق الدراسات الأيضية في الموقع في مطياف الرنين المغناطيسي النووي (NMR) ، كما هو موضح في الأدبيات1،2،3،4،5.
حاليا ، لا توجد أدبيات تصف تروية كبدية خارج الجسم الحي باستخدام عمود زجاجي داخل الرنين المغناطيسي النووي. كما لا يوجد فيديو أو منشور نصي يقدم مثالا واضحا على كيفية تنفيذ الإجراء مع كبد الفأر ، على وجه التحديد ، يوضح كيفية قسطرة الوريد البابي ، واستئصال الكبد ، ونقله ، وتعليقه على عمود زجاجي. نظرا لأن الفأر المعدل وراثيا يستخدم في كل مكان لدراسة استقلاب الكبد ، فهذا إجراء أساسي يستحق وصفا كاملا. جراحات تروية الكبد ليست جديدة ، ولكن هذه المقالة هي طريقة قياسية ذهبية مصحوبة بمقطع فيديو يوضح التميز التقني الموصوف في هذه الورقة لمساعدة جميع المهتمين بهذا الإجراء. من الأفضل تطبيق الطريقة المعروضة هنا على التمثيل الغذائي في الوقت الفعلي للكشف عن وظيفة ودوران المستقلبات في نماذج الأمراض.
تستخدم هذه الطريقة عمودا زجاجيا مغطى بالماء يبلغ طوله 100 سم ، مما يسمح للكبد بالتعليق في الجزء السفلي من القنية المغلفة بواسطة النفخ داخل أنبوب الرنين المغناطيسي النووي. يتم استخدام الماء الساخن في السترة الزجاجية للتحكم في درجة حرارة العطر. يتم ضغط الأوكسجين ذو الطبقة الرقيقة بنسبة 95٪ / 5٪ O 2 / CO2 للتحكم في درجة الحموضة. باستخدام ثلاث مضخات منفصلة ، يتم ضبط ارتفاع عمود perfusate ، مما يوفر ضغطا ثابتا على الكبد. لا يتم التحكم في معدلات التدفق خارج نطاق تطبيق الضغط الثابت (الشكل 1). للتأكد من أن الكبد يعمل بشكل مناسب ، يتم أخذ قياسات الأكسجين جنبا إلى جنب مع معدلات التدفق. في أيدينا ، تؤدي هذه المجموعة من الشروط المسبقة إلى تجارب NMR قابلة للتكرار للغاية لتقييم وظيفة التمثيل الغذائي للكبد.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 mL Luer-Lock Single Use Sterile Disposable Syringe</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Non-specific Brand</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 cm Water Jacketed Glass Column</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom Made</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-0 Silk Suture</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>22 Gauge Catherter 1 in. Without Safety</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>SRFF2225</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>23 G 0.75 in. Hypodemeric Needles</td>
			<td>Exel International</td>
			<td>26407</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27 G 1.5 in. Hypodemeric Needles</td>
			<td>Exel International</td>
			<td>26426</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4x4 in. Surgical Platform</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom Made</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% Alcohol Wipe</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Non-specific Brand</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Circulating Water Bath</td>
			<td>MS Lauda</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Model no longer manufactured</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton Tip Applicator</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Non-specific Brand</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Delicate Operating Scissors; Straight; Sharp-Sharp; 30mm Blade Length; 4 3/4 &#34;</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-6702</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #5/45 Forceps</td>
			<td>Fine Scientific Tools</td>
			<td>11251-35</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont #7 - Fine Forceps</td>
			<td>Fine Scientific Tools</td>
			<td>11274-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hemostats</td>
			<td>Fine Scientific Tools</td>
			<td>13015-14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin Sodium Injectable 1000 units/mL</td>
			<td>RX Generics</td>
			<td>71288-0402-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>14043-0704-06</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lidocaine HCl 2%</td>
			<td>VEDCO Inc.</td>
			<td>50989-0417-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Membrane-Thin-Layer Oxygenator</td>
			<td>Radnoti</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum Scissors; Curved; Blunt; 27 mm Blade Length; 5 &#34;</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>RS-6013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oxygen Meter System</td>
			<td>Hanstech Instruments Ltd.</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline 0.9% Solution</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Saline is made in lab</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scale</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Non-specific Brand</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&#160;Variable Speed Analog Console Pump Systems</td>
			<td>Cole Palmer</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Models are custom per application</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weigh boats</td>
			<td>N/A</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Non-specific Brand</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

ex vivo hepatic perfusion through the portal vein in mouse

أصبحت الأمراض الأيضية مثل مرض السكري ، وما قبل السكري ، ومرض الكبد الدهني غير الكحولي (NAFLD) ، والتهاب الكبد الدهني غير الكحولي (NASH) شائعة بشكل متزايد. تسمح عمليات تروية الكبد خارج الجسم الحي بإجراء تحليل شامل لعملية التمثيل الغذائي للكبد باستخدام الرنين المغناطيسي النووي (NMR) ، في الظروف الغذائية التي يمكن التحكم فيها بدقة. كما هو الحال في محاكاة سيليكو لا تزال وسيلة نظرية في المقام الأول لتقييم الإجراءات الهرمونية وآثار التدخل الصيدلاني، والكبد perfed لا تزال واحدة من أسرة الاختبار الأكثر قيمة لفهم التمثيل الغذائي الكبدي. نظرا لأن هذه الدراسات توجه الأفكار الأساسية في فسيولوجيا الكبد ، يجب أن تكون النتائج دقيقة وقابلة للتكرار. أكبر عامل في تكرار التروية الكبدية خارج الجسم الحي هو جودة الجراحة. لذلك ، أدخلنا طريقة منظمة ومبسطة لإجراء عمليات تروية كبد الفئران خارج الجسم الحي في سياق تجارب الرنين المغناطيسي النووي في الموقع . كما نصف تطبيقا فريدا ونناقش المشكلات الشائعة التي تمت مواجهتها في هذه الدراسات. الغرض العام هو توفير دليل غير معقد لتقنية قمنا بتحسينها على مدى عدة سنوات والتي نعتبرها المعيار الذهبي للحصول على نتائج قابلة للتكرار في عمليات استئصال الكبد والتروية في سياق تجارب الرنين المغناطيسي النووي في الموقع . المسافة إلى مركز المجال للمغناطيس وكذلك عدم إمكانية وصول الأنسجة إلى التدخل أثناء تجربة الرنين المغناطيسي النووي تجعل أساليبنا جديدة.

يتم تقييم وظائف الكبد في المقام الأول من خلال استهلاك الأكسجين ومعدل التدفق. معدل التدفق من 4-8 مل / دقيقة واستهلاك الأكسجين من 1 ميكرومول / min.g نموذجي. وستختلف هذه التدابير تبعا لظروف تجريبية محددة واختلافات بيولوجية.
تعتمد الكمية الدقيقة من الأيزوفلوران المستخدمة على نوع نظ?...

Watch this Scientific Journal Video about Ex Vivo Hepatic Perfusion Through the Portal Vein in Mouse at JoVE.com

Ex Vivo Hepatic Perfusion Through the Portal Vein in Mouse

يصف البروتوكول طريقة مباشرة لاستئصال كبد الفأر السليم للدراسات الأيضية من خلال تروية الوريد البابي.

السابقين فيفو التروية الكبدية من خلال الوريد البابي في الماوس

Metabolic diseases such as diabetes, pre-diabetes, non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD), and nonalcoholic steatohepatitis (NASH) are becoming ...

يوضح هذا الفيديو إجراء مبسطا تم تطويره لإجراء دراسات الكبد الأيضية بدقة كافية وقابلية للتكرار ، والتي يمكن أن تكون بمثابة دليل لإجراء استئصال الكبد لدراسات تروية الجسم الحي. من الأفضل تطبيق هذه التقنية على عملية التمثيل الغذائي في الوقت الفعلي للكشف عن الوظيفة ، في مستقلبات الدوران في نماذج الأمراض. يسمح التروية بالتحكم الدقيق في العناصر الغذائية والهرمونات المتاحة للكبد.على الرغم من أن هذه التقنية ليست موجهة نحو العلاج ، إلا أن تروية الكبد يمكن أن تكون مفيدة في فهم مسببات الأمراض وتأثيرها ، مثل مرض السكري و NAFLD و NASH على التمثيل الغذائي الكبدي. مع تطوير مستحضرات صيدلانية جديدة ، تصبح طرق تقييم استقلاب الطاقة المركزية الكبدية ضرورية. يمكن استخدام هذه الطريقة مع نماذج للعديد من الأمراض ، بما في ذلك السرطانات وفي عدة مراحل مختلفة من تطور المرض.بادئ ذي بدء ، ضع أنف الفأر في مخروط الأنف بعد تحريض التخدير ، وسجل مخالبه. إدارة يدوكائين من خلال حقن تحت الجلد ثنائيا في منطقة القمة الحرقفية الأمامية. قم بإجراء اختبار قرصة إصبع القدم للتأكد من عدم وجود جميع ردود الفعل المؤلمة.قم بإجراء بضع الاضطرابات الهضمية لفضح الأعضاء الداخلية عن طريق إجراء شق بعرض ثلاثة سنتيمترات. قم بتوسيع الشق باستخدام مرقئ يسحب الجر عن طريق تثبيت عملية الخنازير. استخدم قضيب قطني مائل لتنظيف الأمعاء الدقيقة والغليظة التي تغطي الوريد البابي.ضع خياطة حريرية تحت قوس الوريد البابي القريب من الكبد. ضع الخيط الحريري الثاني القريب أو البعيد من الوريد المساريقي السفلي البعيد عن الكبد باستخدام خياطة 2-0. بمجرد أن تكون الغرز في مكانها ، قم بتقليب الوريد البابي باستخدام قسطرة قياس 22 ، مع الحفاظ على الشطبة تشير إلى أعلى.أدخل الوريد البابي بزاوية لا تزيد عن 15 درجة. اربط الخيط الأول بعد نقرة القسطرة. بعد أن يتم تعليب الوريد البابي ، قم بتثبيت القسطرة على بعد مليمترين إلى ثلاثة ملليمترات من فرع الوريد البابي باستخدام خياطة الحرير.قم بتأمين الجزء السفلي من القسطرة باستخدام الخيط الثاني. اربط عقدة مع الخيط لتثبيت القسطرة بالجزء البعيد من الوريد البابي والأنسجة المحيطة. بعد تأمين القسطرة، أدخل حقنة بملليلتر واحد مع إبرة قياس 27 يبلغ طولها 38.1 ملم في القسطرة لتدفق فقاعات الدم والهواء.استخدم قطرا داخليا ملليمترا واحدا وأنبوب سيليكون قطره الخارجي خمسة ملليمترات مع ديك ثابت لإقران عمود التروية بالقسطرة ، مما يسمح بتدفق المخزن المؤقت إلى الكبد ، مما يمثل بداية التروية. بعد بدء تشغيل جهاز ضبط الوقت ، قم بتخفيف ضغط الأوعية الدموية المتزايد عن طريق شق باستخدام مقص في الوريد الأجوف السفلي. تأكد من تدفق العطر عبر الكبد من خلال ملاحظة التغير المتجانس في لون الكبد من الوردي أو الأحمر إلى الأصفر الشاحب.بمجرد تأكيد التدفق ، قم باستئصال المعدة والأمعاء الدقيقة والأمعاء الغليظة والكلى اليمنى من الأنسجة المحيطة. بمساعدة المساعد الجراحي ، قم بمناورة الكبد حول تجويف البطن والصدر حيث يقوم الجراح بقطع الصفاق الجداري والأنسجة الصدرية لاستئصال الكبد. ارفع الكبد لأعلى واقطع الأنسجة الضامة المتبقية التي تثبت الكبد في مكانه باستخدام المقص.تعامل ببطء مع الكبد لسهولة الرؤية. معدل التدفق وقياسات استهلاك الأكسجين أمر حيوي لمراقبة صحة الكبد ووظيفته. غالبا ما يكون هناك فرق طفيف في استهلاك الأكسجين بين الكبد الذي يتم تغذيته والصيام ، والذي يمكن أن يعزى إلى زيادة الطلب على الطاقة التي يفرضها تكوين الجلوكوز في الكبد الصائم.وتشمل أهم الخطوات إدخال القسطرة بزاوية 15 درجة، وتصور طرف القسطرة، ولف المعصم والكتفين عند ربط الخياطة، وتجنب الالتواء على الوريد البابي. يمكن دراسة الأنسجة المستأصالة بعد التروية بأي عدد من الأساليب الكيميائية الحيوية أو التحليلية. تتيح عمليات التروية خارج الجسم الحي بالاشتراك مع التصوير بالرنين المغناطيسي والتحليل الطيفي في الوقت الفعلي قياس التدفقات الأيضية في الوقت الفعلي.بطبيعة الحال ، يمتد هذا إلى اضطراب التدفق من حالة التحكم استجابة للأمراض.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Ex Vivo Hepatic Perfusion Through the Portal Vein in Mouse

Detection of the pH-dependent Activity of Escherichia coli Chaperone HdeB In Vitro and In Vivo

Detection of the pH-dependent Activity of Escherichia coli Chaperone HdeB In Vitro and In Vivo

الكشف عن تعتمد على درجة الحموضة آخر من<em&gt; كولاي</em&gt; الوصيفة HdeB<em&gt; في المختبر</em&gt; و<em&gt; في فيفو</em

Bacteria are frequently exposed to environmental changes, such as alterations in pH, temperature, redox status, light exposure or mechanical force. Many ...

Brain Membrane Fractionation: An Ex Vivo Approach to Assess Subsynaptic Protein Localization

Brain Membrane Fractionation: An Ex Vivo Approach to Assess Subsynaptic Protein Localization

غشاء الدماغ تجزئة: أ<em&gt; إكس فيفو</em&gt; نهج لتقييم توطين البروتين سوبسينابتيك

Assessing the synaptic protein composition and function constitutes an important challenge in neuroscience. However, it is not easy to evaluate ...

Purification of Hepatocytes and Sinusoidal Endothelial Cells from Mouse Liver Perfusion

تنقية خلايا الكبد وخلايا بطانية جيبية من الكبد الماوس التروية

This protocol demonstrates a method for obtaining high yield and viability for mouse hepatocytes and sinusoidal endothelial cells (SECs) suitable for ...

A Colorimetric Method for Measuring Iron Content in Plants

أسلوب قياس ألوان لقياس محتوى الحديد في النباتات

Iron, one of the most important micronutrients in living organisms, is involved in basic processes, such as respiration and photosynthesis. Iron content ...

Polysome Profiling in Leishmania, Human Cells and Mouse Testis

Polysome Profiling in Leishmania, Human Cells and Mouse Testis

Polysome التنميط في الليشمانياوالخلايا البشرية والخصية الماوس

Proper protein expression at the right time and in the right amounts is the basis of normal cell function and survival in a fast-changing environment. For ...

Dynamic Proteomic and miRNA Analysis of Polysomes from Isolated Mouse Heart After Langendorff Perfusion

دينامية البروتين وميرنا "تحليل بوليسوميس" من "قلب الفأرة متفرقة بعد نضح لانجيندورف"

Studies in dynamic changes in protein translation require specialized methods. Here we examined changes in newly-synthesized proteins in response to ...

Measuring and Interpreting Oxygen Consumption Rates in Whole Fly Head Segments

قياس وتفسير معدلات استهلاك الأوكسجين كلياً يطير رئيس قطاعات

Regulated metabolic activity is essential for the normal functioning of living cells. Indeed, altered metabolic activity is causally linked with the ...

An In Vivo Estrogen Deficiency Mouse Model for Screening Exogenous Estrogen Treatments of Cardiovascular Dysfunction After Menopause

A في فيفيفو نقص الإستروجين نموذج الماوس لفحص علاجات الإستروجين الخارجية من خلل القلب والأوعية الدموية بعد انقطاع الطمث

Postmenopausal women are at greater risk of developing cardiovascular diseases than premenopausal women. Female mice ovariectomized (OVX) at weaning ...

Translating Ribosome Affinity Purification (TRAP) for RNA Isolation from Endothelial Cells In Vivo

Translating Ribosome Affinity Purification TRAP for RNA Isolation from Endothelial Cells In Vivo

ترجمة تنقية التقارب الريبوسم (TRAP) لعزل الحمض النووي الريبي عن الخلايا البطانية في الجسم الحي

Many studies have been limited to using in vitro cellular assays and whole tissues or isolating of specific cell types from animals for in vitro analysis ...

In Vivo Hydroxyl Radical Protein Footprinting for the Study of Protein Interactions in Caenorhabditis elegans

In Vivo Hydroxyl Radical Protein Footprinting for the Study of Protein Interactions in Caenorhabditis elegans

في فيفو هيدروكسيل الجذر البروتين البصمة لدراسة التفاعلات البروتين في Caenorhabditis elegans

Fast oxidation of proteins (FPOP) is a hydroxyl radical protein footprinting (HRPF) method used to study protein structure, protein-ligand interactions, ...