Name: ex utero culture of mouse embryos from pregastrulation to advanced organogenesis
Uploaded: 2021-10-19T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Ex Utero Culture of Mouse Embryos from Pregastrulation to Advanced Organogenesis at JoVE.com

この作品はパスカルとイラナ・マントゥーによって資金提供されました。欧州研究評議会(ERC-CoG-2016 726497-細胞性);客室乗務員医学研究評議会(FAMRI);イスラエルがん研究基金(ICRF)教授職、BSF、ヘレン・アンド・マーティン・キンメル幹細胞研究所、ヘレン・アンド・マーティン・キンメル賞(革新的調査)イスラエル科学財団(ISF)、ミネルバ、シャーマン薬化学研究所、ネラとレオンベノジヨ神経疾患センター、遺伝性疾患研究のためのデビッドとフェラシェイペルファミリーセンター、ケクストファミリー遺伝研究所、ベスロムライマー幹細胞研究基金、エドモンドデロスチャイルド財団、ザントカー慈善財団、ズビアゼロニの不動産。

すべての動物実験は、ワイツマン科学研究所の動物保護ガイドラインに従って実施され、関連するワイツマン研究所IACUC(#01390120-1、01330120-2、33520117-2)によって承認されました。健康な妊婦は、ランバム医療センターヘルシンキ委員会(#RMB-0452-15)によって承認されたように、臍帯から血液を採取するためにインフォームドコンセントを与えるよう求められました。健康な成人は、ワイツマン科学...

<ol>
	<li>New, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-embryo+culture+and+the+study+of+mammalian+embryos+during+organogenesis.">Whole-embryo culture and the study of mammalian embryos during organogenesis.</a> Biological Reviews of the Cambridge Philosophical Society. 53 (1), 81-122 (1978).</li><li>Tam, P. P., Behringer, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+gastrulation:+the+formation+of+a+mammalian+body+plan.">Mouse gastrulation: the formation of a mammalian body plan.</a> Mechanisms of Development. 68 (1-2), 3-25 (1997).</li><li>Huang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravital+imaging+of+mouse+embryos.">Intravital imaging of mouse embryos.</a> Science. 368 (6487), 181-186 (2020).</li><li>White, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-lived+binding+of+Sox2+to+DNA+predicts+cell+fate+in+the+four-cell+mouse+embryo.">Long-lived binding of Sox2 to DNA predicts cell fate in the four-cell mouse embryo.</a> Cell. 165 (1), 75-87 (2016).</li><li>Tam, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postimplantation+mouse+development:+whole+embryo+culture+and+micro-manipulation.">Postimplantation mouse development: whole embryo culture and micro-manipulation.</a> International Journal of Developmental Biology. 42 (7), 895-902 (1998).</li><li>Nicholas, J. S., Rudnick, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+development+of+rat+embryos+in+tissue+culture.">The development of rat embryos in tissue culture.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 20 (12), 656-658 (1934).</li><li>New, D. A., Stein, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cultivation+of+mouse+embryos+in+vitro.">Cultivation of mouse embryos in vitro.</a> Nature. 199, 297-299 (1963).</li><li>Rivera-P&#233;rez, J. A., Jones, V., Tam, P. P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Culture+of+whole+mouse+embryos+at+early+postimplantation+to+organogenesis+stages:+developmental+staging+and+methods.">Culture of whole mouse embryos at early postimplantation to organogenesis stages: developmental staging and methods.</a> Methods in Enzymology. 476, 185-203 (2010).</li><li>New, D. A. T., Coppola, P. T., Terry, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Culture+of+explanted+rat+embryos+in+rotating+tubes.">Culture of explanted rat embryos in rotating tubes.</a> Journal of Reproduction and Fertility. 35 (1), 135-138 (1973).</li><li>Cockroft, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparative+and+historical+review+of+culture+methods+for+vertebrates.">A comparative and historical review of culture methods for vertebrates.</a> International Journal of Developmental Biology. 41 (12), 127-137 (1997).</li><li>Parameswaran, M., Tam, P. P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regionalisation+of+cell+fate+and+morphogenetic+movement+of+the+mesoderm+during+mouse+gastrulation.">Regionalisation of cell fate and morphogenetic movement of the mesoderm during mouse gastrulation.</a> Developmental Genetics. 17 (1), 16-28 (1995).</li><li>Beddington, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+a+second+neural+axis+by+the+mouse+node.">Induction of a second neural axis by the mouse node.</a> Development. 120 (3), 613-620 (1994).</li><li>Aguilera-Castrejon, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+utero+mouse+embryogenesis+from+pre-gastrulation+to+late+organogenesis.">Ex utero mouse embryogenesis from pre-gastrulation to late organogenesis.</a> Nature. 593 (7857), 119-124 (2021).</li><li>Takahashi, M., Makino, S., Kikkawa, T., Osumi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+rat+serum+suitable+for+mammalian+whole+embryo+culture.">Preparation of rat serum suitable for mammalian whole embryo culture.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (90), e51969 (2014).</li><li>Behringer, R., Gertsenstein, M., Nagy, K. V., Nagy, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation,+culture+and+manipulation+of+postimplantation+embryos.">Isolation, culture and manipulation of postimplantation embryos.</a> Manipulating the Mouse Embryo: a Laboratory Manual. , 149-193 (2014).</li><li>Takahashi, M., Nomura, T., Osumi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transferring+genes+into+cultured+mammalian+embryos+by+electroporation.">Transferring genes into cultured mammalian embryos by electroporation.</a> Development, Growth and Differentiation. 50 (6), 485-497 (2008).</li><li>Mathieu, J., Ruohola-Baker, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metabolic+remodeling+during+the+loss+and+acquisition+of+pluripotency.">Metabolic remodeling during the loss and acquisition of pluripotency.</a> Development. 144 (4), 541-551 (2017).</li><li>Sturm, K., Tam, P. P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+and+culture+of+whole+postimplantation+embryos+and+germ+layer+derivatives.">Isolation and culture of whole postimplantation embryos and germ layer derivatives.</a> Methods in Enzymology. 225, 164-190 (1993).</li></ol>

本明細書に提示される培養プロトコールは、E5.5からE11までの6日間、子宮外で適切かつ連続的なマウス胚発生を維持することができる。以前は、これらの発生段階の胚は、短期間(最大48時間)の培養で正常に発達することができました15。酸素濃度および高圧ガス圧を正確に制御するためのローラー培養器へのガス調節モジュールの結合は、本明細書に記載の適切なマ?...

哺乳類胚の子宮内発育は、着床後発達の初期段階の研究を制限している1,2。発達中の胚にアクセスできないことは、動物の身体計画の確立、生殖層の仕様、または組織および器官の形成など、胚が子宮に移植された後に起こる重要な発生プロセスの理解を妨げる。さらに、早期移植後胚のサイズが非常に小さいため、E103の前に子宮内での生体内イメージングによる観察が困難になる。これらの段階で生きている胚を観察して操作することができないため、早期着床後胚発生の研究は発生中のスナップショットに限定されています。
着床前哺乳動物胚の体外培養のためのプロトコルは、十分に確立されており、信頼性が高く、定期的に利用されています4。それにもかかわらず、適切な哺乳動物の着床後胚成長をサポートできる元子宮培養システムを確立しようとする試みは、限られた成功にとどまった5。1世紀以上にわたり、主に従来の静的プレート6,7,8または回転ボトル(ローラー培養)5,9,10で胚を培養することによって、様々な培養技術が提案されている。これらのプラットフォームは、正常な胚生存には非常に非効率的であり、短期間に限定されているにもかかわらず、移植後の哺乳類の発達に関する知識を広げるのに有用であることが証明されました11,12。胚は、培養開始後24〜48時間で発生遅延および形態学的異常を示し始めた。
この研究は、着床後発達の最大6日間にわたって、胃形成前から高度な器官形成段階までの継続的な発達を可能にする 元子宮 胚培養システムを設定するための詳細な説明を提供する13。この論文では、E7.5胚(神経プレートおよびヘッドフォールドステージ)から後肢形成段階(〜E11)までの成長をサポートする改良されたローラー培養プロトコルと、静的プレートおよびローラー培養プラットフォーム上での培養を組み合わせることによってE5.5 / E6.5からの拡張培養について説明する。

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.22 &#181;m pore size filter (250 mL)</td>
			<td>JetBiofil</td>
			<td>FCA-206-250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.22 &#181;m pore size syringe PVDF filter</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>SLGV033RS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8-well &#181;-plates glass bottom/ibiTreat</td>
			<td>iBidi</td>
			<td>80827/80826</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bottle with adaptor cap for gas inlet</td>
			<td>Arad Technologies</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bungs (Hole)</td>
			<td>B.T.C. Engineering, Cullum Starr Precision Engineering</td>
			<td>BTC 06</td>
			<td>Used to seal the bottles to the drum</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bungs (Solid)</td>
			<td>B.T.C. Engineering, Cullum Starr Precision Engineering</td>
			<td>BTC 07</td>
			<td>Used to seal the rotating drum</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Culture bottles</td>
			<td>B.T.C. Engineering, Cullum Starr Precision Engineering</td>
			<td>BTC 03/BTC 04</td>
			<td>Either Glass Bottles (Small) BTC 03 or Glass Bottles (Large) BTC 04</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D(+)-glucose Monohydrate</td>
			<td>J.T. Baker</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diamond knife</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10100-30/45</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Pressure Gauge</td>
			<td>Shanghai Benxu Electronics Technology co. Ltd</td>
			<td>BX-DPG80</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>11880</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dulbecco&#39;s Phosphate Buffered Saline</td>
			<td>Biological industries</td>
			<td>02-020-1A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Biological industries</td>
			<td>04-013-1A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas regulation module</td>
			<td>Arad Technologies</td>
			<td>HannaLab1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutamax</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>35050061</td>
			<td>glutamine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Graefe forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11052-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>15630056</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgical forceps (Dumont #5, #55)</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11255-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pasteur pipettes (glass)</td>
			<td>Hilgenberg</td>
			<td>3150102</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pasteur pipettes (plastic)</td>
			<td>Alexred</td>
			<td>SO P12201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/Streptomycin</td>
			<td>Biological industries</td>
			<td>03-031-1B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petri Dishes (60 mm and 100 mm)</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>351007/351029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Precision incubator system</td>
			<td>B.T.C. Engineering, Cullum Starr Precision Engineering</td>
			<td>BTC01</td>
			<td>BTC01 model with gas bubbler kit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pro-coagulant sterile test tubes (5 mL)</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>#456005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat whole embryo culture serum</td>
			<td>ENVIGO Bioproducts</td>
			<td>B-4520</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereoscopic microscope equipped with heating plate</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>SMZ18</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile syringes (5, 10 ml) for sera filtration</td>
			<td>Pic Solution</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14094-11</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

ex utero culture of mouse embryos from pregastrulation to advanced organogenesis

着床後哺乳動物胚培養方法は、一般に非効率的であり、子宮から解剖した後の短い期間に限定されてきた。プラットフォームは最近、卵筒段階から高度な器官形成までのマウス胚の非常に堅牢で長期の 子宮外 培養のために開発されました。これらのプラットフォームは、後肢形成段階(E11)までの胃骨前胚(E5.5)の適切かつ忠実な発達を可能にする。後期胃胚(E7.5)は、これらの設定で回転ボトルで増殖するが、胃形成前段階(E5.5またはE6.5)からの拡張培養は、静的および回転ボトル培養の組み合わせを必要とする。さらに、O2 およびCO2 濃度、ガス圧、グルコースレベル、および特定の 子宮外 培養培地の使用の敏感な調節は、適切な胚発生にとって重要である。ここでは、拡張 された子宮外 マウス胚培養のための詳細なステップバイステップのプロトコールが提供される。正常なマウス胚を胃胞形成から器官形成まで 子宮外で 成長させる能力は、胚発生中の異なる実験的摂動の影響を特徴付けるための貴重なツールを表す。

E7.5胚について記載したローラー培養条件(後期胃形成段階)は、培養4日後に75%に近い平均効率で一定かつ正常な胚増殖を支持する(図2 および 表1)。胚発生の効率は、多様なマウスの遺伝的背景によって異なる可能性があるが、一貫して頑健である(図2C)。HCSの代わりにHBSを補充すると、マウスの遺伝的背景に応じて、 元子宮 培養?...

Watch this Scientific Journal Video about Ex Utero Culture of Mouse Embryos from Pregastrulation to Advanced Organogenesis at JoVE.com

Ex Utero Culture of Mouse Embryos from Pregastrulation to Advanced Organogenesis

全胚培養のための強化されたプラットフォームは、着床後マウス胚の連続的かつ堅牢な 子宮外 発生を、胃支前段階から高度な器官形成まで、最大6日間可能にする。このプロトコルでは、静的プレートと回転ボトルシステムを使用して胚培養を成功させるための標準的な手順を詳述しています。

元ウテロ マウス胚の採虫前から高度器官形成までの培養

Postimplantation mammalian embryo culture methods have been generally inefficient and limited to brief periods after dissection out of the uterus. ...

この方法は、哺乳類の形成に沿ったガストルレーションを理解するための基本となるでしょう。長い間母体の子宮内に隠されてきた胚期に生きている胚の実験を可能にすることによって。それは、最大6日間の長期間にわたって子宮外のマウス胚の効率的かつ適切な成長を可能にし、継続する。迅速かつ適切な胚解剖およびガス濃度および圧力の胃前投与は、胚の成長を成功させるための最も重要なステップである。7.5日齢以上の進行マウス胚の培養を開始するには、胚解剖の前に少なくとも1時間、ローラー培養インキュベーターシステムの回転子および加熱ユニットをオンにする。また、ガス導入管および出口試験管にオートクレーブ水を加える。次に、メインスイッチを押してガスレギュレータモジュールの電源を入れ、各コントローラを使用して酸素と二酸化炭素の値を5%に設定し、ガスレギュレータを開き、圧力トランスミッタの電圧スイッチを動かしてガス圧力を約6.5〜7ポンド/平方インチに設定します。デジタル圧力計を使用してガス圧力値を確認します。精密インキュベーター内部に割り当てられた出口水充填試験管内に生じた気泡の速度をチェックして、ガスの流れを監視します。ウォーターボトルの蓋のガスフローバルブを開閉して、適切な気泡率を設定します。ガス流が毎秒2〜4個の気泡の割合で気泡の形成を可能にすることを確認するか、バブリングが水で満たされた出口チューブに出てくる最初の点に気泡流を設定する。次に、培養瓶に2ミリリットルの培養液を充填する。くり抜いたシリコンバンを使用してボトルを密封し、くり抜いた回転ドラムに差し込んで1時間の事前平衡化を行います。回転ドラム内の空きスペースは、固体バンズを使用して密閉してください。次に、安楽死させた妊婦マウスから胚を解剖する。70%エタノールで腹部をきれいにし、はさみを使って皮膚と腹壁をカットします。子宮の一端を見つけて、卵巣と子宮の交点で切断します。反対側まで子宮に沿って切断を続け、DPBSで満たされた100ミリメートルのペトリ皿に移します。DPBSの概念をすばやく洗い流し、胚の取り扱いを容易にするためにペアで切断します。概念のすべてのペアを60ミリメートルのペトリ皿で事前に平衡化された解剖媒体に移動し、個々の概念に切り込みます。次に、一対の肉眼的鉗子を用いて、子宮組織を引き裂くことによって概念の子宮壁を除去し、次いで、微細な顕微手術用鉗子を用いて、洋ナシ状の脱落膜の先端を切断する。胚の横の鉗子をその長軸に平行に挿入し、鉗子を開いて脱落膜を半分に分割する。最後に、細かい鉗子を使用して、胚を脱落膜から把持し、頭頂卵黄袋を胚から剥がし、無傷の外胎盤錐体を卵筒に付着させたままにする。神経プレートまたは初期の頭部折り畳み段階において、エピブラストに損傷を示さない胚を選択する。ボトルごとに5〜6個の選択された胚を予め平衡化されたガラス培養ボトルに移し、5%酸素および5%二酸化炭素の雰囲気下で、37°Cの回転培養システムにボトルを置く。胃前胚および初期胃形成胚および静的プレートを培養するために、新たに調製した250マイクロリットルの子宮外胚培養培地を8ウェルプレートの各ウェルに加える。プレートを摂氏37度の二酸化炭素インキュベーター内に置き、事前平衡化を行います。前述のように子宮から胚を解剖した後、マイクロピペットを使用して個々の胚を8ウェルプレートの各ウェルに移し、プレートを摂氏37度で5%二酸化炭素でインキュベーター内に置きます。胚を実体顕微鏡で画像化し、明らかな損傷がなく、ライヒャートの膜のない、よく形成された羊膜を有するもののみを培養用に選択する。このプロトコールに記載されている7.5日齢の胚に対するローラー培養条件は、4培養日後に75%に近い平均効率で一定かつ正常な胚増殖を支持する。胚発生の効率は、多様なマウスの遺伝的背景によって異なるが、一貫して堅牢である。HCSの代わりにHBSを補充すると、培養の4日後に約68%の効率が得られる。6.5個の胚および静的プレートの発生は、HCSおよびHBSの両方を有する子宮外胚培養培地を使用して、90%以上の効率で正しく反復される。前胃胚から始まる培養は、初期のソマイト段階までの適切な発達の46%の効率を示し、胚のほぼ17%は培養の6日後に適切な発達を完了する。形態形成および組織発達は、42個のソマイトまで適切に進行する。胚発生日目7.5、6.5、および5.5から開始された培養物について胚において観察された代表的な発生欠陥をここに示す。エピブラストに軽微な損傷を有する胚またはライヒェルトの膜を保持する胚は廃棄されるべきである。初期胚は適切に成長せず、または重度の発達遅延を示すが、プレートの表面に胚エピブラストが付着すると、さらなる胚発生の失敗を引き起こす。欠陥のある胚で観察される主な異常は、卵黄袋の外側の後領域の発達または神経ひだの成長における欠陥である。5.5日齢の胚から発達した培養物では、発生欠陥が頻繁に観察され、小さな未発達のエピブラストの存在である。この方法を使用して、研究者は移植後の胚を開発する際に様々な物理的または化学的操作を実行することができる。例えば、操作、細胞移植、または系統追跡。この方法は、マウスの着床後発達を非常に詳細に研究するだけでなく、ヒトなどの他の種の胚にも同様の培養方法を実装するための道を開く。

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Ex Utero Culture of Mouse Embryos from Pregastrulation to Advanced Organogenesis

Optimized Ex-ovo Culturing of Chick Embryos to Advanced Stages of Development

Optimized Ex-ovo Culturing of Chick Embryos to Advanced Stages of Development

最適化された<em&gt;元OVO</em&gt;開発の進んだ段階にニワトリ胚の培養

Research in anatomy, embryology, and developmental biology has largely relied on the use of model organisms. In order to study development in live embryos ...

In Utero Intra-cardiac Tomato-lectin Injections on Mouse Embryos to Gauge Renal Blood Flow

In Utero Intra-cardiac Tomato-lectin Injections on Mouse Embryos to Gauge Renal Blood Flow

マウス胚に子宮内 、心臓内トマトレクチン注射では腎血流量を測定する

The formation and perfusion of developing renal blood vessels (apart from glomeruli) are greatly understudied. As vasculature develops via angiogenesis ...

Ex Utero Electroporation and Organotypic Slice Culture of Mouse Hippocampal Tissue

Ex Utero Electroporation and Organotypic Slice Culture of Mouse Hippocampal Tissue

子宮外エレクトロポレーションおよびマウスの海馬組織の器官型スライス培養

Mouse genetics offers a powerful tool determining the role of specific genes during development. Analyzing the resulting phenotypes by immunohistochemical ...

Ex Vivo Culture of Pharyngeal Arches to Study Heart and Muscle Progenitors and Their Niche

Ex Vivo Culture of Pharyngeal Arches to Study Heart and Muscle Progenitors and Their Niche

咽頭アーチのex vivo培養は、ハートと筋前駆細胞とそのニッチを研究します

The pharyngeal mesoderm of developing embryos contributes to broad regions of head and heart musculature. We have developed a novel method to study head ...

Using Ex Vivo Upright Droplet Cultures of Whole Fetal Organs to Study Developmental Processes during Mouse Organogenesis

Using Ex Vivo Upright Droplet Cultures of Whole Fetal Organs to Study Developmental Processes during Mouse Organogenesis

使い方<em&gt;エクスビボ</em&gt;全体の胎児器官の直立飛沫培養物をマウス器官中に発生過程を研究します

Investigating organogenesis in utero is a technically challenging process in placental mammals due to inaccessibility of reagents to embryos that develop ...

Primary Endodermal Epithelial Cell Culture from the Yolk Sac Membrane of Japanese Quail Embryos

ウズラ胚の卵黄嚢の膜からの一次内胚葉上皮細胞培養

We established an endodermal epithelial cell culture model (EEC) for studying the function of certain enzymes and proteins in mediating nutrient ...

Quantitative Analysis of Protein Expression to Study Lineage Specification in Mouse Preimplantation Embryos

マウス着床前胚でリネージュの仕様を研究するためのタンパク質発現の定量分析

This protocol presents a method to perform quantitative, single-cell in situ analyses of protein expression to study lineage specification in mouse ...

Derivation of Stem Cell Lines from Mouse Preimplantation Embryos

マウス着床前胚幹細胞の誘導

Mouse embryonic stem cell (mESC) derivation is the process by which pluripotent cell lines are established from preimplantation embryos. These lines ...

Isolation, Culture, and Adipogenic Induction of Neural Crest Original Adipose-Derived Stem Cells from Periaortic Adipose Tissue

神経紋の分離、培養、脂肪形成誘導、周食脂肪組織由来の脂肪由来幹細胞

An excessive amount of adipose tissue surrounding the blood vessels (perivascular adipose tissue, also known as PVAT) is associated with a high risk of ...

Preparation of Small RNA Libraries for Sequencing from Early Mouse Embryos

初期マウス胚からのシーケンシングのための小型RNAライブラリーの調製

MicroRNAs (miRNAs) are important for the complex regulation of cell fate decisions and developmental timing. In vivo studies of the contribution of miRNAs ...

元ウテロ マウス胚の採虫前から高度器官形成までの培養

元ウテロマウス胚の採虫前から高度器官形成までの培養