Name: microsurgical skills of establishing permanent jugular vein cannulation in rats for serial blood sampling of orally administered drug
Uploaded: 2021-12-14T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Microsurgical Skills of Establishing Permanent Jugular Vein Cannulation in Rats for Serial Blood Sampling of Orally Administered Drug at JoVE.com

وتدعم هذا العمل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم 82003692) إلى R.X. Zhang؛ أفضل منحة دراسية أكاديمية في جامعة نورث وسترن للفنون التطبيقية إلى R. Miao.

تم تنفيذ الإجراءات الموضحة أدناه كجزء من بروتوكول وافقت عليه اللجنة المؤسسية لرعاية الحيوانات واستخدامها بجامعة نورث وسترن للفنون التطبيقية (رقم 202101117).
1. التحضير قبل الجراحة (في اليوم السابق للجراحة)
ملاحظة: المحاليل المطلوبة: محلول ملحي عادي (0.9٪ ث /...

<ol>
	<li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> Journal of Pharmacology and Pharmacotherapeutics. 1 (2), 87-93 (2010).</li><li>Sadler, A. M., Bailey, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+a+refined+technique+for+taking+repeated+blood+samples+from+juvenile+and+adult+mice.">Validation of a refined technique for taking repeated blood samples from juvenile and adult mice.</a> Laboratory Animals. 47 (4), 316-319 (2013).</li><li>Zhang, R. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordinating+biointeraction+and+bioreaction+of+a+nanocarrier+material+and+an+anticancer+drug+to+overcome+membrane+rigidity+and+target+mitochondria+in+multidrug-resistant+cancer+cells.">Coordinating biointeraction and bioreaction of a nanocarrier material and an anticancer drug to overcome membrane rigidity and target mitochondria in multidrug-resistant cancer cells.</a> Advanced Functional Materials. 27 (39), 12 (2017).</li><li>Zhang, R. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polymer-lipid+hybrid+nanoparticles+synchronize+pharmacokinetics+of+co-encapsulated+doxorubicin-mitomycin+C+and+enable+their+spatiotemporal+co-delivery+and+local+bioavailability+in+breast+tumor.">Polymer-lipid hybrid nanoparticles synchronize pharmacokinetics of co-encapsulated doxorubicin-mitomycin C and enable their spatiotemporal co-delivery and local bioavailability in breast tumor.</a> Nanomedicine-Nanotechnology Biology and Medicine. 12 (5), 1279-1290 (2016).</li><li>Zhang, R. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sample+extraction+and+simultaneous+chromatographic+quantitation+of+doxorubicin+and+mitomycin+C+following+drug+combination+delivery+in+nanoparticles+to+tumor-bearing+mice.">Sample extraction and simultaneous chromatographic quantitation of doxorubicin and mitomycin C following drug combination delivery in nanoparticles to tumor-bearing mice.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (128), e11 (2017).</li><li>Bakar, S. K., Niazi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+reliable+method+for+chronic+cannulation+of+the+jugular+vein+for+pharmacokinetic+studies+in+rats.">Simple reliable method for chronic cannulation of the jugular vein for pharmacokinetic studies in rats.</a> Journal of Pharmaceutical Sciences. 72 (9), 1027-1029 (1983).</li><li>Harms, P. G., Ojeda, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rapid+and+simple+procedure+for+chronic+cannulation+of+the+rat+jugular+vein.">A rapid and simple procedure for chronic cannulation of the rat jugular vein.</a> Journal of Applied Physiology. 36 (3), 391-392 (1974).</li><li>Thrivikraman, K. V., Huot, R. L., Plotsky, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Jugular+vein+catheterization+for+repeated+blood+sampling+in+the+unrestrained+conscious+rat.">Jugular vein catheterization for repeated blood sampling in the unrestrained conscious rat.</a> Brain Research Protocols. 10 (2), 84-94 (2002).</li><li>Weeks, J. R., Davis, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+intravenous+cannulas+for+rats.">Chronic intravenous cannulas for rats.</a> Journal of Applied Physiology. 19 (3), 540-541 (1964).</li><li>Goldkuhl, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasma+concentrations+of+corticosterone+and+buprenorphine+in+rats+subjected+to+jugular+vein+catheterization.">Plasma concentrations of corticosterone and buprenorphine in rats subjected to jugular vein catheterization.</a> Laboratory Animals. 44 (4), 337-343 (2010).</li><li>Steffens, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+frequent+sampling+of+blood+and+continuous+infusion+of+fluids+in+the+rat+without+disturbing+the+animal.">A method for frequent sampling of blood and continuous infusion of fluids in the rat without disturbing the animal.</a> Physiology &amp; Behavior. 4 (5), 833-836 (1969).</li><li>Terao, N., Shen, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alterations+in+serum+protein+binding+and+pharmacokinetics+of+l-propranolol+in+the+rat+elicited+by+the+presence+of+an+indwelling+venous+catheter.">Alterations in serum protein binding and pharmacokinetics of l-propranolol in the rat elicited by the presence of an indwelling venous catheter.</a> Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 227 (2), 369-375 (1983).</li><li>Feng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catheterization+of+the+carotid+artery+and+jugular+vein+to+perform+hemodynamic+measures,+infusions+and+blood+sampling+in+a+conscious+rat+model.">Catheterization of the carotid artery and jugular vein to perform hemodynamic measures, infusions and blood sampling in a conscious rat model.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (95), e51881 (2015).</li><li>Karim, N., Ali, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Jugular+vein+cannulation+in+rats+-+A+mini+review.">Jugular vein cannulation in rats - A mini review.</a> Canadian Journal of Pure and Applied Sciences. 3, 929-935 (2009).</li><li>Ling, S., Jamali, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+cannulation+surgery+and+restraint+stress+on+the+plasma+corticosterone+concentration+in+the+rat:+application+of+an+improved+corticosterone+HPLC+assay.">Effect of cannulation surgery and restraint stress on the plasma corticosterone concentration in the rat: application of an improved corticosterone HPLC assay.</a> Journal of Pharmacy &amp; Pharmaceutical Sciences. 6 (2), (2003).</li><li>Lei, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacokinetic+study+of+ellagic+acid+in+rat+after+oral+administration+of+pomegranate+leaf+extract.">Pharmacokinetic study of ellagic acid in rat after oral administration of pomegranate leaf extract.</a> Journal of Chromatography B-Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences. 796 (1), 189-194 (2003).</li><li>Yan, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+development+and+validation+for+pharmacokinetic+and+tissue+distributions+of+ellagic+acid+using+Ultrahigh+Performance+Liquid+Chromatography-Tandem+Mass+Spectrometry+(UPLC-MS/MS).">Method development and validation for pharmacokinetic and tissue distributions of ellagic acid using Ultrahigh Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry (UPLC-MS/MS).</a> Molecules. 19 (11), 18923-18935 (2014).</li><li>Long, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioavailability+and+bioactivity+of+free+ellagic+acid+compared+to+pomegranate+juice.">Bioavailability and bioactivity of free ellagic acid compared to pomegranate juice.</a> Food &amp; Function. 10 (10), 6582-6588 (2019).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PKSolver:+An+add-in+program+for+pharmacokinetic+and+pharmacodynamic+data+analysis+in+Microsoft+Excel.">PKSolver: An add-in program for pharmacokinetic and pharmacodynamic data analysis in Microsoft Excel.</a> Computer Methods and Programs in Biomedicine. 99 (3), 306-314 (2010).</li><li>Christakis, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Learning+curve+of+vessel+cannulation+in+rats+using+cumulative+sum+analysis.">Learning curve of vessel cannulation in rats using cumulative sum analysis.</a> Journal of Surgical Research. 193 (1), 69-76 (2015).</li><li>Nm, S., Oduola, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Haematological+profile+shows+that+Inbred+Sprague+Dawley+rats+have+exceptional+promise+for+use+in+biomedical+and+pharmacological+studies.">Haematological profile shows that Inbred Sprague Dawley rats have exceptional promise for use in biomedical and pharmacological studies.</a> Asian Journal of Biomedical and Pharmaceutical Sciences. 4 (37), 33-37 (2014).</li><li>Lillie, L. E., Temple, N. J., Florence, L. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reference+values+for+young+normal+Sprague-Dawley+rats:+weight+gain,+hematology+and+clinical+chemistry.">Reference values for young normal Sprague-Dawley rats: weight gain, hematology and clinical chemistry.</a> Human &amp; Experimental Toxicology. 15 (8), 612-616 (1996).</li><li>He, Q. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex-specific+reference+intervals+of+hematologic+and+biochemical+analytes+in+Sprague-Dawley+rats+using+the+nonparametric+rank+percentile+method.">Sex-specific reference intervals of hematologic and biochemical analytes in Sprague-Dawley rats using the nonparametric rank percentile method.</a> PLoS One. 12 (12), 18 (2017).</li><li>EPA. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recommendations+for+and+Documentation+of+Biological+Values+for+Use+in+Risk+Assessment.">Recommendations for and Documentation of Biological Values for Use in Risk Assessment.</a> U.S. Environmental Protection Agency. , (1988).</li><li>Gaud, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+jugular+vein+cannulated+rats+may+not+be+suitable+for+intravenous+pharmacokinetic+screening+of+high+logP+compounds.">Single jugular vein cannulated rats may not be suitable for intravenous pharmacokinetic screening of high logP compounds.</a> European Journal of Pharmaceutical Sciences. 99, 272-278 (2017).</li><li>Turck, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+pharmacokinetics+of+meloxicam.">Clinical pharmacokinetics of meloxicam.</a> Arzneimittel-Forschung/Drug Research. 47 (3), 253-258 (1997).</li><li>Aghazadeh-Habashi, A., Jamali, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacokinetics+of+meloxicam+administered+as+regular+and+fast+dissolving+formulations+to+the+rat:+Influence+of+gastrointestinal+dysfunction+on+the+relative+bioavailability+of+two+formulations.">Pharmacokinetics of meloxicam administered as regular and fast dissolving formulations to the rat: Influence of gastrointestinal dysfunction on the relative bioavailability of two formulations.</a> European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 70 (3), 889-894 (2008).</li><li>Ludwig, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+human+cytochrome+P-450+3A4-catalyzed+meloxicam+5+'-methylhydroxylation+by+quinidine+and+hydroquinidine+in+vitro.">Activation of human cytochrome P-450 3A4-catalyzed meloxicam 5 '-methylhydroxylation by quinidine and hydroquinidine in vitro.</a> Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 290 (1), 1-8 (1999).</li><li>Zhang, R. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanoparticulate+drug+delivery+strategies+to+address+intestinal+cytochrome+P450+CYP3A4+metabolism+towards+personalized+medicine.">Nanoparticulate drug delivery strategies to address intestinal cytochrome P450 CYP3A4 metabolism towards personalized medicine.</a> Pharmaceutics. 13 (8), (2021).</li></ol>

يتطلب إتقان تقنية تعليب السفن ممارسة كبيرة وتعلم الدرس من كل عملية. وجد كريستاكيس وآخرون باستخدام تحليل المجموع التراكمي (CUSUM) أن الباحث يحتاج إلى ممارسة 200 فأر على مدى عام واحد قبل أن يكون مستعدا لتقييم PK للأدوية المرشحة20. ومع ذلك ، يمكن تقليل وقت التشغيل اللازم لتقليب الوريد ?...

يعد الحصول المتكرر على عينات الدم من المختبر الصغيرة ، مثل القوارض والخنازير الغينية والأرانب ، جانبا مهما لتحسين الرصاص الصيدلاني وأيضا لتقليل عدد الحيوانات المستخدمة في البحث 1,2. يتطلب خط الأنابيب لتطوير أدوات تشخيصية جديدة وصياغة دوائية (مثل اللقاح) الوصول إلى كميات مختلفة من الدم من أجل تقييم قوتها وأدائها في الجسم الحي ، مثل الحرائك الدوائية (PK) ، والسمية ، والحساسية3،4،5.
يتم تصنيف النهج المختبري لجمع عينات الدم على نطاق واسع إلى نوعين ، الجراحية وغير الجراحية6. من السهل نسبيا فهم النهج غير الجراحي للباحث ، والذي يتضمن تقنيات شائعة ، مثل ثقب القلب ، وثقب الجيوب الأنفية المدارية ، ونزيف الوريد الصافن والذيل. يمكن أخذ عينات دم متعددة من خلال بعض الطرق غير الجراحية ، ولكن حجم العينة صغير ويمكن أن يسبب جرحا جسديا وضغطا نفسيا للحيوانات1. من ناحية أخرى ، فإن النهج الجراحي هو البديل المفضل للوخز بالإبر الوريدية المتكرر ، وينطوي على وضع قنية مؤقتة أو دائمة في الأوعية الدموية للحيوانات7،8،9. يمكن سحب حجم الدم الكبير بشكل متكرر من خلال القنية في الفئران الواعية مع تجنب الإجهاد والألم بسبب تقنية المناولة وكبح النفس والتخدير7،8،10،11. ومع ذلك ، فإن زرع القنية يتطلب باحثا متمرسا لديه تدريب كاف من أجل جمع الدم بنجاح.
جمع الدم من خلال تقليب الوريد الوداجي (JVC) في الفئران هو الطريقة الأكثر استخداما على نطاق واسع لدراسة الدواء PK 6,10,12,13. ومع ذلك ، فإن إنشاء نموذج الفئران JVC يحتاج إلى ممارسة دقيقة لمهارات الجراحة المجهرية ومعرفة الرعاية والصيانة بعد الجراحة. على وجه الخصوص ، بعد الجراحة ، يتطلب الفئران إعطاء المسكنات ووقت كاف للتعافي للوصول إلى حالة فسيولوجية مستقرة لمزيد من التجارب13،14،15. على الرغم من أن زيادة وزن الجسم (أي >10 جم) هي مؤشر صالح وشائع التطبيق لتعافي الفئران ، إلا أنه ليس من غير المألوف أن الفئران لديها موت غير متوقع بعد العملية الجراحية بسبب الجفاف والعدوى والالتهابات ، والتي قد تكون خفية لملاحظة في البداية المبكرة14,15. بالإضافة إلى ذلك ، لا يزال انسداد القسطرة في نموذج JVC يمثل مشكلة أثناء جمع الدم.
وقد أظهر هذا البروتوكول بالتفصيل الإجراءات الجراحية المجهرية ل JVC في فأر مخدر مع التركيز بشكل خاص على تحديد الوريد الوداجي وعزله وتعليبه. يتم تسليط الضوء على أهمية الرصد الفسيولوجي والدموية للفئران خلال مرحلة الانتعاش. وأخيرا ، تم جمع عينات الدم التسلسلية من خلال القسطرة الوريدية لدراسة PK لحمض الإيلاجيك الفينول الطبيعي الذي يتم إعطاؤه عن طريق الفم مع ضعف التوافر البيولوجي (أي التركيز الجهازي المنخفض) للتحقق من نموذج الفئران JVC.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.5 mL test tube containing EDTA anticoagulant</td>
			<td>Xinkang</td>
			<td>N/A</td>
			<td>collecting blood samples for hematology test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.5*20 mm 1.0-mL syringe</td>
			<td>KLMEDICAL</td>
			<td>N/A</td>
			<td>washing or replacing the fluid with saline</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.6*28.5 mm 5.0-mL syringe</td>
			<td>HD</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Subcutaneous injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.0-mL Blunt tipped syringe (22G)</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>S4-PKT22G</td>
			<td>Inject the saline and collect blood samples through catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL sterile microcentrifuge tube</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>MCT-150-C-S</td>
			<td>Store sterile catheter lock solution heparinized saline and meloxicam solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5&#160;mL microcentrifuge tubes</td>
			<td>Biosharp</td>
			<td>BS-15-M</td>
			<td>blood collection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1/2&#160; circle cutting 5*12 mm suture needle</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>S4-FHZ</td>
			<td>Thread the muscle layer to fix the catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3/8 circle cutting 7*17 mm suture needle</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>S5-FHZ</td>
			<td>Suture the incision of rat cortex</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 sterile non-absorbable silk suture thread</td>
			<td>JUNSHENG</td>
			<td>N/A</td>
			<td>ligature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>75% medical alcohol</td>
			<td>HONGSONG</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Disinfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adhensive tape</td>
			<td>LIUTAI</td>
			<td>N/A</td>
			<td>positioning the rat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Autoclave sterilization tape</td>
			<td>Biosharp</td>
			<td>BS-QT-028</td>
			<td>Mark sterilized items</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automated blood cell counter</td>
			<td>Sysmex</td>
			<td>XN-550</td>
			<td>Hematology test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castroviejo micro scissors</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>WA1010</td>
			<td>Cut the opening in the blood vessel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>75002402</td>
			<td>Plasma preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clean cushion</td>
			<td>Qingjie</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Prepare the operation area</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton balls</td>
			<td>HC</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Wound disinfection and sterilization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td>BEITAGOGO</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Disinfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved hemostat</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>N/A</td>
			<td>ligature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DN50 Stainless-steel rat restrainer</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>S4-RGDQ1</td>
			<td>Restrict the movement of rats for easy operation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ellagic acid</td>
			<td>Aladdin</td>
			<td>E102710-25g</td>
			<td>natural phenol for oral administration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Half-curved forceps</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>53072</td>
			<td>Lift the muscle layer and tissue, isolate the jugular vein and tie the suture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Warm mate</td>
			<td>N/A</td>
			<td>preventing heat loss of animal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin sodium</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>H8060</td>
			<td>anticoagulant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodophor</td>
			<td>Xidebao</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Clean the wound</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris scissors</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>54002</td>
			<td>Bluent separation the muscle layer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>RWD</td>
			<td>R510-22-16</td>
			<td>anaesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LED lamp</td>
			<td>EMPERORFEEL</td>
			<td>N/A</td>
			<td>sugery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid chromatography-mass spectroscopy</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>VQF01-20001/ TSQ02-10002</td>
			<td>detection of drug concentration in plasma</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam</td>
			<td>Hongqiang</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Analgesic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal saline</td>
			<td>KL</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Prepara the solution and protect blood vessels from drying out</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pet razor</td>
			<td>Codos</td>
			<td>3180</td>
			<td>Shaving the fur</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered saline</td>
			<td>ZHHC</td>
			<td>PW012</td>
			<td>Preparation of Ellagic acid solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PU catheter</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>RJVC-PU</td>
			<td>Jugular vein cannulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal operation anesthesia console</td>
			<td>RWD</td>
			<td>68620</td>
			<td>Operation workstation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spray bottle</td>
			<td>Other</td>
			<td>N/A</td>
			<td>aseptic workstation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless steel plug (22G)</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>S4-PKD22G</td>
			<td>Plug the catheter to ensure its sealing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless steel trochar</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>S$-PKDGZ</td>
			<td>Guide the catheter exteriorization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile lock solution</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>SK-FB</td>
			<td>lock the catheter to ensure its sterility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight feeding needle</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Oral gavage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical pouch</td>
			<td>BKMAM</td>
			<td>N/A</td>
			<td>container for sterilization of surgical instruments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical scissors</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>J21070</td>
			<td>Cut incision on rat skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vessel dilator balanced forceps</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>WA3020</td>
			<td>Expand the blood vessel and guide the cannula to slide in</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZS-MV Small animal anesthesia machine</td>
			<td>ZSLab</td>
			<td>1057003</td>
			<td>inducing and maintaining anaesthesia</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

microsurgical skills of establishing permanent jugular vein cannulation in rats for serial blood sampling of orally administered drug

يعد أخذ عينات الدم في المختبر الصغيرة ضروريا لتحسين الرصاص الصيدلاني ولكنه يمكن أن يسبب ضررا كبيرا وإجهادا لحيوانات التجارب ، مما قد يؤثر على النتائج. القنية الوريدية الوداجية (JVC) في الفئران هي نموذج يستخدم على نطاق واسع لجمع الدم المتكرر ولكنه يتطلب تدريبا كافيا على مهارات الجراحة ورعاية الحيوانات. تفصل هذه المقالة الإجراءات الجراحية المجهرية لإنشاء والحفاظ على نموذج دائم للفئران JVC مع التركيز بشكل خاص على وضع وختم القنية الوداجية. تم تسليط الضوء على أهمية المراقبة الفسيولوجية (على سبيل المثال ، وزن الجسم والطعام وتناول الماء) والمعلمات الدموية ، مع النتائج المقدمة لمدة 6 أيام بعد الجراحة أثناء تعافي الفئران. تم تحديد ملف تعريف وقت تركيز البلازما الدوائية لحمض الإيلاجيك الفينول الطبيعي الذي يتم إعطاؤه عن طريق الفم في نموذج الفئران JVC.

وقد أظهر هذا البروتوكول بدقة كيفية إنشاء نموذج JVC طويل الأجل باستخدام مهارات الجراحة المجهرية لجمع الدم التسلسلي. ويبين الشكل 1 ألف الأدوات والمواد الجراحية الأساسية المستخدمة في إجراء الجراحة. كما تم توضيح مواصفات قسطرة PU مع ثلاث علامات زرقاء ، وهو أمر مفيد لتوجيه الباحث ...

Watch this Scientific Journal Video about Microsurgical Skills of Establishing Permanent Jugular Vein Cannulation in Rats for Serial Blood Sampling of Orally Administered Drug at JoVE.com

Microsurgical Skills of Establishing Permanent Jugular Vein Cannulation in Rats for Serial Blood Sampling of Orally Administered Drug

تم إثبات تقنيات الجراحة المجهرية التفصيلية لإنشاء نموذج فأر تقنية الوريد الوداجي على المدى الطويل لجمع الدم المتسلسل في نفس الحيوان. تم رصد المعلمات الفسيولوجية والدموية خلال مرحلة تعافي الفئران. تم تطبيق هذا النموذج لدراسة الحرائك الدوائية للبوليفينول الذي يتم إعطاؤه عن طريق الفم دون التسبب في الإجهاد الحيواني.

مهارات الجراحة المجهرية لإنشاء قنية دائمة للوريد الوداجي في الفئران لأخذ عينات الدم التسلسلية من الدواء الذي يتم إعطاؤه عن طريق الفم

Blood sampling in small laboratory animals is necessary for pharmaceutical lead optimization but can cause great harm and stress to experimental animals, ...

يعد أخذ عينات الدم المتكررة من المختبر الصغير جانبا مهما من جوانب تحسين الرصاص الصيدلاني. يفصل هذا البروتوكول مهارات الجراحة المجهرية لإنشاء نموذج دائم لقنية الوريد الوداجي. يمكن لهذه التقنية إنشاء نموذج فئران تقليب الوريد الوداجي بكفاءة وجمع عينات الدم بشكل متكرر من خلال القنية في الفئران الواعية مع تجنب الإجهاد والألم.من المهم تحديد موقع الوريد الوداجي وقنواته لأن العرض المرئي للتعقيد التشريحي غير متوفر لهذا النموذج. للبدء ، قم بإعداد محطة العمل المعقمة بالكحول الطبي بنسبة 75٪ ، ثم قم بتخدير الفئران المحلوقة بالأيزوفلوران الممزوج بالأكسجين. حقن محلول ميلوكسيكام تحت الجلد بجرعة ملليغرام لكل كيلوغرام ، ثم ارفع الجلد بعناية بالقرب من الترقوة على الجانب الأيمن من خط الوسط من الرقبة باستخدام ملقط ، وباستخدام زوج من المقص الجراحي ، قم بعمل شق طوله 1.5 إلى 2 سم نحو الصدر.لكشف الوريد الوداجي تحت الوريد ، استخدم مقص القزحية لتشريح غطاء الأنسجة الرقيقة. تتكون النهاية الرأسية القريبة من الوريد الوداجي الخارجي من فرعين يمكن تحديدهما بصريا. ارفع الوريد الوداجي مع أنسجته الغشائية الضامة لتصور الغدة الليمفاوية المرتبطة بالوريد الوداجي.افصل الوريد بعناية على طول اتجاه الأوعية الدموية عن العضلات المحيطة والدهون والأنسجة الأخرى. دفع الملقط تحت الوريد الوداجي دون إتلاف الأوعية الدموية الجانبية وتمرير قطعتين من خياطة 6-0 تحت الوريد لتحديد طرفي الوعاء الدموي بشكل فردي. اسحب قطعة واحدة من الخيط قدر الإمكان نحو رأس الفئران وقم بربط الوريد بالجمجمة باستخدام عقدتين إلى ثلاث عقد باستخدام الملقط.ضع الرباط الثاني على الطرف الذيلي من الوريد بعقدة واحدة فضفاضة. قم بتوصيل قسطرة من البولي يوريثين بطول 11 سم ، أو PU ، بحقنة الطرف الحاد المحضرة المملوءة بالمحلول الملحي الهيبارين ، وادفع ببطء المالحة الهيبارينية إلى القسطرة لتجنب فقاعات الهواء. ادفع الجانب المسطح غير المائل من الملقط تحت الوريد الوداجي للخروج من الجانب الآخر.قم بعمل قطع صغير على شكل حرف V على الوريد بالقرب من ربطة الجمجمة باستخدام زوج من المقصات الدقيقة كاستروفيجو ، وافتح الشق بلطف بطرف ملقط موسع وعاء الكوع. قطع الفتحة المائلة للطرف الأمامي من قسطرة الوريد الوداجي. زرع الطرف المائل من الأنبوب مع ملقط وتحريكه في الوريد الوداجي.أثناء تقدم القسطرة ، اسحب ببطء ملقط الجراحة المجهرية للكوع ، وقم بتثبيت السطح الخارجي للوعاء باستخدام ملقط. توقف عن إدخال القسطرة عند ضرب العلامة الزرقاء الأولى لأنبوب PU ، الذي يبلغ طوله حوالي ثلاثة سنتيمترات. قم بتثبيت القسطرة المثبتة على الوريد باستخدام كل من الأربطة الذيلية والسطحية باستخدام الملقط.خيط خياطة 6-0 من خلال الأنسجة المكشوفة على الجانب الأيمن من الشق باستخدام إبرة خياطة ، وربط الرباط مع مرقئ. ثم ثني القسطرة عند العلامة الزرقاء الثانية للربط بنفس الرباط وتجنب انسداد أنابيب PU. بعد قص كل خيط الخياطة الإضافي ، أغلق القسطرة عن طريق استبدال المحقنة ذات الرؤوس الحادة بقابس من الفولاذ المقاوم للصدأ قياس 22.ضع الفئران في الوضع الظهري ونظف المنطقة الواقعة بين لوح الكتف بلطف باستخدام كرة القطن المنقوعة في الكحول الطبي بنسبة 75٪. باستخدام المقص الجراحي ، قم بعمل شق صغير جدا في وسط الرقبة الظهرية. من خلال الشق الظهري ، قم بتوجيه ودفع trochar بلطف تحت الجلد نحو الشق البطني على الجانب الأيمن من الرقبة.ضع القسطرة الوريدية في التروشار ثم اسحب القسطرة الوريدية ووجهها نحو الشق الظهري. بعد تثبيت القسطرة الخارجية في طبقة العضلات ، أغلق طبقة الجلد من الشقوق البطنية والظهرية باستخدام خياطة النايلون 6-0 وإبرة الخياطة ومسح جميع الشقوق الجراحية باليودوفور. بعد ذلك ، قم بإزالة قابس القسطرة عن طريق ربط القسطرة بأطراف الأصابع.ضع حقنة جديدة ذات طرف حاد واسحب المحقنة ببطء لاختبار تدفق الدم. أمسك القسطرة مرة أخرى بأطراف الأصابع. حقن 0.2 ملليلتر من محلول ملحي هيبارين و 0.1 ملليلتر من محلول القفل في القسطرة باستخدام حقنة الطرف الحاد ، ثم استبدل المحقنة بقابس من الفولاذ المقاوم للصدأ.قم بفك القسطرة وادفع القابس قليلا لضمان ضيق القسطرة. لجمع عينات الدم لإجراء اختبارات الدم ، ضع الفئران في مقيد ، وافتح القابس ، وأدخل المحقنة في قسطرة PU الوريدية لضمان عدم إعاقة القسطرة. تخلص من الدم المسحوب في البداية الذي يحتوي على خليط من الدم والمحلول الملحي الهيبارين ومحلول قفل القسطرة.باستخدام حقنة جديدة ، قم بجمع 150 ميكرولتر من عينة الدم الطازجة ونقل عينة الدم إلى أنبوب 0.5 ملليلتر تم رشه مسبقا باستخدام K2EDTA. حقن 150 ميكرولتر من المياه المالحة العادية التي تم تسخينها مسبقا ، وغرس 0.2 ملليلتر من محلول ملحي طبيعي هيباريني معقم من خلال القسطرة. حقن 100 ميكرولتر من محلول القفل في القسطرة لضمان ختم وعقم القسطرة قبل جمع العينات التالية.في الدراسة الحالية ، تم التحقيق في الحالات الفسيولوجية والدموية على مدى ستة أيام بعد الجراحة. تعافت غالبية الفئران في غضون أربعة إلى ستة أيام بعد الجراحة كما يتضح من زيادة وزن الجسم لأكثر من 10 غرامات ، وتناول الطعام بانتظام ، ومكونات الدم المختارة المتعلقة بالعدوى والجفاف والالتهابات ، بما في ذلك خلايا الدم البيضاء وخلايا الدم الحمراء والهيموجلوبين وعدد الصفائح الدموية. وبالتالي ، تطلبت الفئران ما لا يقل عن أربعة إلى ستة أيام للتعافي بعد الإجراء.يشير المدخول الكبير من الماء إلى الجفاف في اليوم الأول بعد العملية. بالإضافة إلى ذلك ، تمت دراسة الحرائك الدوائية لحمض الإيلاجيك البوليفينول الطبيعي في نموذج الفئران الوداجي الوداجي ، وأشير إلى ضعف التوافر البيولوجي لحمض الإيلاجيك من خلال انخفاض تركيز البلازما على مدار 24 ساعة. يعد العزل الصحيح للوريد الوداجي أهم خطوة أولى لأن الوريد الوداجي المضمن في الأنسجة الرخوة الأخرى قد لا يكون مرئيا على الفور للباحث.يمكن إجراء أخذ عينات الدم المتسلسلة داخل نفس الحيوان في نموذج الفئران JVC المعمول به. إنها أداة مفيدة وقوية لتقييم أداء تركيبات الأدوية في الجسم الحي.

Research

JoVE Journal

Medicine

Femoral Arterial and Venous Catheterization for Blood Sampling, Drug Administration and Conscious Blood Pressure and Heart Rate Measurements

الفخذ قسطرة الشرايين والأوردة لاخذ عينات من الدم ، وإدراكا منها الدواء وضغط الدم وقياسات معدل ضربات القلب

In multiple fields of study, access to the circulatory system in laboratory studies is necessary. Pharmacological studies in rats using chronically ...

Training a Sophisticated Microsurgical Technique: Interposition of External Jugular Vein Graft in the Common Carotid Artery in Rats

تدريب تقنية متطورة المجهرية: مداخلة من حبل الوريد الخارجية الكسب غير المشروع في الشريان السباتي المشترك في الجرذان

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in ...

Adult Mouse Venous Hypertension Model: Common Carotid Artery to External Jugular Vein Anastomosis.

الكبار ماوس وريدي ارتفاع ضغط الدم نموذج: الشريان السباتي المشترك لجهات خارجية الوداجي الوريد التحام.

The understanding of the pathophysiology of brain arteriovenous malformations and arteriovenous fistulas has improved thanks to animal models. A rat model ...

Catheterization of the Carotid Artery and Jugular Vein to Perform Hemodynamic Measures, Infusions and Blood Sampling in a Conscious Rat Model

القسطرة من الشريان السباتي والوريد الوداجي إلى تنفيذ تدابير الدورة الدموية، الحقن والدم أخذ العينات في وإدراكا نموذج الفأر

The success of a small animal model to study critical illness is, in part, dependent on the ability of the model to simulate the human condition. ...

Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

وكرر جمع الدم من الوريد الذيل من الفئران غير تخديره مع نظام لجمع دم فراغ

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the ...

A Rabbit Model of Durable Transgene Expression in Jugular Vein to Common Carotid Artery Interposition Grafts

نموذج أرنب التعبير التحوير دائم في الوريد للشريان السباتي المشترك فاصلة الطعوم

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, ...

Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats

ثقب الوريد Subclavian كطريقة بديلة لجمع عينات الدم في الفئران

Blood collection with enough blood volume is essential in animal experiments. Blood collection from the tail vein of rats is popular and less stressful ...

Blood Collection Through Subclavian Vein Puncture in Mice

جمع الدم من خلال ثقب الوريد تحت الترقوة في الفئران

The mouse is the foremost mammalian model for studying human disease and human health. However, blood sample collection from mice is challenging in ...

Repetitive Blood Sampling from the Subclavian Vein of Conscious Rat

أخذ عينات الدم المتكررة من الوريد تحت الترقوة للفأر الواعي

Rats are widely used in pharmacokinetics (PK) and toxicokinetic (TK) studies that need to collect a certain amount of blood at specific time points to ...

Comparative Study of Blood Collection Techniques in Rats

Modified Tail Vein and Penile Vein Puncture for Blood Sampling in the Rat Model

Context Dependent Blood Collection Methods in Rats (Video) | JoVE

تعديل الوريد الذيل وثقب الوريد القضيب لأخذ عينات الدم في نموذج الفئران

Blood samples are required in most experimental animal designs to assess various hematological parameters. This paper presents two procedures for blood ...