Name: microsurgical skills of establishing permanent jugular vein cannulation in rats for serial blood sampling of orally administered drug
Uploaded: 2021-12-14T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Microsurgical Skills of Establishing Permanent Jugular Vein Cannulation in Rats for Serial Blood Sampling of Orally Administered Drug at JoVE.com

עבודה זו נתמכת על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מס '82003692) כדי R.X. Zhang; מלגה אקדמית מובילה באוניברסיטה הפוליטכנית נורת'ווסטרן לר' מיאו.

ההליכים המתוארים להלן בוצעו כחלק מפרוטוקול שאושר על ידי הוועדה המוסדית לטיפול בבעלי חיים ולשימוש באוניברסיטה הפוליטכנית נורת'ווסטרן (מס ' 202101117).
1. הכנה טרום ניתוחית (יום לפני הניתוח)
הערה: פתרונות נדרשים: תמיסת מלח רגילה (0.9% עם נתרן כלורי), תמיסת מלח הפ...

<ol>
	<li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> Journal of Pharmacology and Pharmacotherapeutics. 1 (2), 87-93 (2010).</li><li>Sadler, A. M., Bailey, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+a+refined+technique+for+taking+repeated+blood+samples+from+juvenile+and+adult+mice.">Validation of a refined technique for taking repeated blood samples from juvenile and adult mice.</a> Laboratory Animals. 47 (4), 316-319 (2013).</li><li>Zhang, R. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordinating+biointeraction+and+bioreaction+of+a+nanocarrier+material+and+an+anticancer+drug+to+overcome+membrane+rigidity+and+target+mitochondria+in+multidrug-resistant+cancer+cells.">Coordinating biointeraction and bioreaction of a nanocarrier material and an anticancer drug to overcome membrane rigidity and target mitochondria in multidrug-resistant cancer cells.</a> Advanced Functional Materials. 27 (39), 12 (2017).</li><li>Zhang, R. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polymer-lipid+hybrid+nanoparticles+synchronize+pharmacokinetics+of+co-encapsulated+doxorubicin-mitomycin+C+and+enable+their+spatiotemporal+co-delivery+and+local+bioavailability+in+breast+tumor.">Polymer-lipid hybrid nanoparticles synchronize pharmacokinetics of co-encapsulated doxorubicin-mitomycin C and enable their spatiotemporal co-delivery and local bioavailability in breast tumor.</a> Nanomedicine-Nanotechnology Biology and Medicine. 12 (5), 1279-1290 (2016).</li><li>Zhang, R. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sample+extraction+and+simultaneous+chromatographic+quantitation+of+doxorubicin+and+mitomycin+C+following+drug+combination+delivery+in+nanoparticles+to+tumor-bearing+mice.">Sample extraction and simultaneous chromatographic quantitation of doxorubicin and mitomycin C following drug combination delivery in nanoparticles to tumor-bearing mice.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (128), e11 (2017).</li><li>Bakar, S. K., Niazi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+reliable+method+for+chronic+cannulation+of+the+jugular+vein+for+pharmacokinetic+studies+in+rats.">Simple reliable method for chronic cannulation of the jugular vein for pharmacokinetic studies in rats.</a> Journal of Pharmaceutical Sciences. 72 (9), 1027-1029 (1983).</li><li>Harms, P. G., Ojeda, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rapid+and+simple+procedure+for+chronic+cannulation+of+the+rat+jugular+vein.">A rapid and simple procedure for chronic cannulation of the rat jugular vein.</a> Journal of Applied Physiology. 36 (3), 391-392 (1974).</li><li>Thrivikraman, K. V., Huot, R. L., Plotsky, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Jugular+vein+catheterization+for+repeated+blood+sampling+in+the+unrestrained+conscious+rat.">Jugular vein catheterization for repeated blood sampling in the unrestrained conscious rat.</a> Brain Research Protocols. 10 (2), 84-94 (2002).</li><li>Weeks, J. R., Davis, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+intravenous+cannulas+for+rats.">Chronic intravenous cannulas for rats.</a> Journal of Applied Physiology. 19 (3), 540-541 (1964).</li><li>Goldkuhl, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasma+concentrations+of+corticosterone+and+buprenorphine+in+rats+subjected+to+jugular+vein+catheterization.">Plasma concentrations of corticosterone and buprenorphine in rats subjected to jugular vein catheterization.</a> Laboratory Animals. 44 (4), 337-343 (2010).</li><li>Steffens, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+frequent+sampling+of+blood+and+continuous+infusion+of+fluids+in+the+rat+without+disturbing+the+animal.">A method for frequent sampling of blood and continuous infusion of fluids in the rat without disturbing the animal.</a> Physiology &amp; Behavior. 4 (5), 833-836 (1969).</li><li>Terao, N., Shen, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alterations+in+serum+protein+binding+and+pharmacokinetics+of+l-propranolol+in+the+rat+elicited+by+the+presence+of+an+indwelling+venous+catheter.">Alterations in serum protein binding and pharmacokinetics of l-propranolol in the rat elicited by the presence of an indwelling venous catheter.</a> Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 227 (2), 369-375 (1983).</li><li>Feng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catheterization+of+the+carotid+artery+and+jugular+vein+to+perform+hemodynamic+measures,+infusions+and+blood+sampling+in+a+conscious+rat+model.">Catheterization of the carotid artery and jugular vein to perform hemodynamic measures, infusions and blood sampling in a conscious rat model.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (95), e51881 (2015).</li><li>Karim, N., Ali, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Jugular+vein+cannulation+in+rats+-+A+mini+review.">Jugular vein cannulation in rats - A mini review.</a> Canadian Journal of Pure and Applied Sciences. 3, 929-935 (2009).</li><li>Ling, S., Jamali, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+cannulation+surgery+and+restraint+stress+on+the+plasma+corticosterone+concentration+in+the+rat:+application+of+an+improved+corticosterone+HPLC+assay.">Effect of cannulation surgery and restraint stress on the plasma corticosterone concentration in the rat: application of an improved corticosterone HPLC assay.</a> Journal of Pharmacy &amp; Pharmaceutical Sciences. 6 (2), (2003).</li><li>Lei, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacokinetic+study+of+ellagic+acid+in+rat+after+oral+administration+of+pomegranate+leaf+extract.">Pharmacokinetic study of ellagic acid in rat after oral administration of pomegranate leaf extract.</a> Journal of Chromatography B-Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences. 796 (1), 189-194 (2003).</li><li>Yan, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+development+and+validation+for+pharmacokinetic+and+tissue+distributions+of+ellagic+acid+using+Ultrahigh+Performance+Liquid+Chromatography-Tandem+Mass+Spectrometry+(UPLC-MS/MS).">Method development and validation for pharmacokinetic and tissue distributions of ellagic acid using Ultrahigh Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry (UPLC-MS/MS).</a> Molecules. 19 (11), 18923-18935 (2014).</li><li>Long, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioavailability+and+bioactivity+of+free+ellagic+acid+compared+to+pomegranate+juice.">Bioavailability and bioactivity of free ellagic acid compared to pomegranate juice.</a> Food &amp; Function. 10 (10), 6582-6588 (2019).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PKSolver:+An+add-in+program+for+pharmacokinetic+and+pharmacodynamic+data+analysis+in+Microsoft+Excel.">PKSolver: An add-in program for pharmacokinetic and pharmacodynamic data analysis in Microsoft Excel.</a> Computer Methods and Programs in Biomedicine. 99 (3), 306-314 (2010).</li><li>Christakis, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Learning+curve+of+vessel+cannulation+in+rats+using+cumulative+sum+analysis.">Learning curve of vessel cannulation in rats using cumulative sum analysis.</a> Journal of Surgical Research. 193 (1), 69-76 (2015).</li><li>Nm, S., Oduola, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Haematological+profile+shows+that+Inbred+Sprague+Dawley+rats+have+exceptional+promise+for+use+in+biomedical+and+pharmacological+studies.">Haematological profile shows that Inbred Sprague Dawley rats have exceptional promise for use in biomedical and pharmacological studies.</a> Asian Journal of Biomedical and Pharmaceutical Sciences. 4 (37), 33-37 (2014).</li><li>Lillie, L. E., Temple, N. J., Florence, L. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reference+values+for+young+normal+Sprague-Dawley+rats:+weight+gain,+hematology+and+clinical+chemistry.">Reference values for young normal Sprague-Dawley rats: weight gain, hematology and clinical chemistry.</a> Human &amp; Experimental Toxicology. 15 (8), 612-616 (1996).</li><li>He, Q. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex-specific+reference+intervals+of+hematologic+and+biochemical+analytes+in+Sprague-Dawley+rats+using+the+nonparametric+rank+percentile+method.">Sex-specific reference intervals of hematologic and biochemical analytes in Sprague-Dawley rats using the nonparametric rank percentile method.</a> PLoS One. 12 (12), 18 (2017).</li><li>EPA. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recommendations+for+and+Documentation+of+Biological+Values+for+Use+in+Risk+Assessment.">Recommendations for and Documentation of Biological Values for Use in Risk Assessment.</a> U.S. Environmental Protection Agency. , (1988).</li><li>Gaud, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+jugular+vein+cannulated+rats+may+not+be+suitable+for+intravenous+pharmacokinetic+screening+of+high+logP+compounds.">Single jugular vein cannulated rats may not be suitable for intravenous pharmacokinetic screening of high logP compounds.</a> European Journal of Pharmaceutical Sciences. 99, 272-278 (2017).</li><li>Turck, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+pharmacokinetics+of+meloxicam.">Clinical pharmacokinetics of meloxicam.</a> Arzneimittel-Forschung/Drug Research. 47 (3), 253-258 (1997).</li><li>Aghazadeh-Habashi, A., Jamali, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacokinetics+of+meloxicam+administered+as+regular+and+fast+dissolving+formulations+to+the+rat:+Influence+of+gastrointestinal+dysfunction+on+the+relative+bioavailability+of+two+formulations.">Pharmacokinetics of meloxicam administered as regular and fast dissolving formulations to the rat: Influence of gastrointestinal dysfunction on the relative bioavailability of two formulations.</a> European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 70 (3), 889-894 (2008).</li><li>Ludwig, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+human+cytochrome+P-450+3A4-catalyzed+meloxicam+5+'-methylhydroxylation+by+quinidine+and+hydroquinidine+in+vitro.">Activation of human cytochrome P-450 3A4-catalyzed meloxicam 5 '-methylhydroxylation by quinidine and hydroquinidine in vitro.</a> Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 290 (1), 1-8 (1999).</li><li>Zhang, R. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanoparticulate+drug+delivery+strategies+to+address+intestinal+cytochrome+P450+CYP3A4+metabolism+towards+personalized+medicine.">Nanoparticulate drug delivery strategies to address intestinal cytochrome P450 CYP3A4 metabolism towards personalized medicine.</a> Pharmaceutics. 13 (8), (2021).</li></ol>

שליטה בטכניקה של קנוניציה כלי דורש תרגול משמעותי ולמידה של הלקח מכל פעולה. Christakis ואח ' באמצעות ניתוח סכום מצטבר (CUSUM), מצא כי חוקר צריך לתרגל 200 חולדות על פני תקופה של שנה אחת לפני להיות מוכן להערכת PK של מועמדים לסמים20. עם זאת, זמן הפעולה הנדרש עבור cannulation הווריד יכול להיות מופחת ב?...

רכישה חוזרת ונשנית של דגימות דם מחיות מעבדה קטנות, כגון מכרסמים, שרקנים וארנבות, היא היבט חשוב לאופטימיזציה של עופרת פרמצבטית וגם להפחתת מספר בעלי החיים המשמשים במחקר 1,2. הצינור לפיתוח כלי אבחון חדשים וניסוחים תרופתיים (למשל, חיסון) דורש גישה לכמויות שונות של דם על מנת להעריך את החוסן והביצועים שלהם ב- vivo, כגון פרמקוקינטיקה (PK), רעילות ורגישות 3,4,5.
גישת המעבדה לאיסוף דגימות דם מסווגת באופן כללי לשני סוגים, כירורגיים ולא כירורגיים6. הגישה הלא-כירורגית קלה יחסית לתפיסה עבור החוקר, הכוללת טכניקות נפוצות, כגון ניקוב לב, ניקוב סינוס מסלולי ודימום של הווריד הספני והזנב. דגימת דם מרובה אפשרית על ידי כמה שיטות לא כירורגיות, אבל נפח המדגם הוא קטן והוא יכול לגרום פצע פיזי ומתח פסיכולוגי לבעלי החיים1. מצד שני, הגישה הכירורגית היא חלופה מועדפת לווניפונקטורה חוזרת ונשנית, והיא כוללת מיקום של צינורית זמנית או קבועה בכלי הדם של בעלי חיים 7,8,9. נפח הדם הגדול יכול להיות נסוג שוב ושוב דרך הצינורית בחולדות מודעות תוך הימנעות הלחץ והכאב עקב טכניקת הטיפול, ריסון, והרדמה 7,8,10,111. עם זאת, השתלת הצינורית דורשת חוקר מנוסה עם הכשרה נאותה על מנת לאסוף בהצלחה את הדם.
איסוף דם באמצעות קנסולציה וריד הצוואר (JVC) בחולדות היא השיטה הנפוצה ביותר ללמוד את התרופה PK 6,10,12,13. עם זאת, הקמת מודל חולדות JVC זקוקה לתרגול זהיר של מיומנויות מיקרו-כירורגיות וידע בטיפול ותחזוקה פוסט-כירורגיים. במיוחד, לאחר הניתוח, החולדה דורשת מתן משככי כאבים וזמן החלמה מספיק כדי להגיע למצב פיזיולוגי יציב לניסויים נוספים 13,14,15. למרות העלייה במשקל הגוף (כלומר, >10 גרם) הוא אינדיקטור תקף ומיושם בדרך כלל להתאוששות החולדה, זה לא נדיר כי החולדות יש מוות בלתי צפוי לאחר הניתוח עקב התייבשות, זיהום, ודלקת, אשר יכול להיות עדין להבחין בתחילת14,15. בנוסף, חסימת קטטר במודל JVC נותרה בעיה במהלך איסוף הדם.
הפרוטוקול הנוכחי הדגים בפירוט את ההליכים המיקרוכירורגיים עבור JVC בחולדה מרדימה עם דגש ספציפי על זיהוי, בידוד, ו cannulation של וריד הצוואר. החשיבות של ניטור פיזיולוגי והמטולוגי של החולדות במהלך שלב ההתאוששות מודגשת. לבסוף, דגימות דם סדרתיות נאספו דרך צנתר ורידים כדי ללמוד את PK של חומצה אלגית פנול טבעי מנוהל דרך הפה עם זמינות ביולוגית ירודה (כלומר, ריכוז מערכתי נמוך) כדי לאמת את מודל חולדת JVC.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.5 mL test tube containing EDTA anticoagulant</td>
			<td>Xinkang</td>
			<td>N/A</td>
			<td>collecting blood samples for hematology test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.5*20 mm 1.0-mL syringe</td>
			<td>KLMEDICAL</td>
			<td>N/A</td>
			<td>washing or replacing the fluid with saline</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.6*28.5 mm 5.0-mL syringe</td>
			<td>HD</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Subcutaneous injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.0-mL Blunt tipped syringe (22G)</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>S4-PKT22G</td>
			<td>Inject the saline and collect blood samples through catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL sterile microcentrifuge tube</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>MCT-150-C-S</td>
			<td>Store sterile catheter lock solution heparinized saline and meloxicam solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5&#160;mL microcentrifuge tubes</td>
			<td>Biosharp</td>
			<td>BS-15-M</td>
			<td>blood collection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1/2&#160; circle cutting 5*12 mm suture needle</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>S4-FHZ</td>
			<td>Thread the muscle layer to fix the catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3/8 circle cutting 7*17 mm suture needle</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>S5-FHZ</td>
			<td>Suture the incision of rat cortex</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 sterile non-absorbable silk suture thread</td>
			<td>JUNSHENG</td>
			<td>N/A</td>
			<td>ligature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>75% medical alcohol</td>
			<td>HONGSONG</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Disinfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adhensive tape</td>
			<td>LIUTAI</td>
			<td>N/A</td>
			<td>positioning the rat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Autoclave sterilization tape</td>
			<td>Biosharp</td>
			<td>BS-QT-028</td>
			<td>Mark sterilized items</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automated blood cell counter</td>
			<td>Sysmex</td>
			<td>XN-550</td>
			<td>Hematology test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castroviejo micro scissors</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>WA1010</td>
			<td>Cut the opening in the blood vessel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>75002402</td>
			<td>Plasma preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clean cushion</td>
			<td>Qingjie</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Prepare the operation area</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton balls</td>
			<td>HC</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Wound disinfection and sterilization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td>BEITAGOGO</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Disinfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved hemostat</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>N/A</td>
			<td>ligature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DN50 Stainless-steel rat restrainer</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>S4-RGDQ1</td>
			<td>Restrict the movement of rats for easy operation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ellagic acid</td>
			<td>Aladdin</td>
			<td>E102710-25g</td>
			<td>natural phenol for oral administration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Half-curved forceps</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>53072</td>
			<td>Lift the muscle layer and tissue, isolate the jugular vein and tie the suture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Warm mate</td>
			<td>N/A</td>
			<td>preventing heat loss of animal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin sodium</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>H8060</td>
			<td>anticoagulant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodophor</td>
			<td>Xidebao</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Clean the wound</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris scissors</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>54002</td>
			<td>Bluent separation the muscle layer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>RWD</td>
			<td>R510-22-16</td>
			<td>anaesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LED lamp</td>
			<td>EMPERORFEEL</td>
			<td>N/A</td>
			<td>sugery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid chromatography-mass spectroscopy</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>VQF01-20001/ TSQ02-10002</td>
			<td>detection of drug concentration in plasma</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam</td>
			<td>Hongqiang</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Analgesic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal saline</td>
			<td>KL</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Prepara the solution and protect blood vessels from drying out</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pet razor</td>
			<td>Codos</td>
			<td>3180</td>
			<td>Shaving the fur</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered saline</td>
			<td>ZHHC</td>
			<td>PW012</td>
			<td>Preparation of Ellagic acid solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PU catheter</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>RJVC-PU</td>
			<td>Jugular vein cannulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal operation anesthesia console</td>
			<td>RWD</td>
			<td>68620</td>
			<td>Operation workstation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spray bottle</td>
			<td>Other</td>
			<td>N/A</td>
			<td>aseptic workstation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless steel plug (22G)</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>S4-PKD22G</td>
			<td>Plug the catheter to ensure its sealing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless steel trochar</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>S$-PKDGZ</td>
			<td>Guide the catheter exteriorization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile lock solution</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>SK-FB</td>
			<td>lock the catheter to ensure its sterility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight feeding needle</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Oral gavage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical pouch</td>
			<td>BKMAM</td>
			<td>N/A</td>
			<td>container for sterilization of surgical instruments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical scissors</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>J21070</td>
			<td>Cut incision on rat skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vessel dilator balanced forceps</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>WA3020</td>
			<td>Expand the blood vessel and guide the cannula to slide in</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZS-MV Small animal anesthesia machine</td>
			<td>ZSLab</td>
			<td>1057003</td>
			<td>inducing and maintaining anaesthesia</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

microsurgical skills of establishing permanent jugular vein cannulation in rats for serial blood sampling of orally administered drug

דגימת דם בחיות מעבדה קטנות נחוצה לאופטימיזציה של עופרת פרמצבטית, אך יכולה לגרום נזק רב ומתח לבעלי חיים ניסיוניים, מה שעלול להשפיע על התוצאות. קנדול וריד הצוואר (JVC) בחולדות הוא מודל נפוץ לאיסוף דם חוזר, אך דורש הכשרה נאותה של מיומנויות ניתוח וטיפול בבעלי חיים. מאמר זה מפרט את ההליכים המיקרוכירורגיים להקמת ושמירה על מודל עכברוש JVC קבוע עם דגש ספציפי על מיקום ואיטום של צינורית הצוואר. החשיבות של ניטור פיזיולוגי (למשל, משקל גוף, מזון וצריכת מים) ופרמטרים המטולוגיים, הודגשה עם תוצאות שהוצגו במשך 6 ימים לאחר הניתוח במהלך התאוששות החולדה. פרופיל זמן ריכוז פלזמה סמים של חומצה אלגית פנול טבעי מנוהל דרך הפה נקבע במודל חולדת JVC.

פרוטוקול זה הדגים ביסודיות כיצד להקים מודל JVC לטווח ארוך באמצעות מיומנויות מיקרו-כירורגיות לאיסוף דם סדרתי. איור 1A מציג את המכשירים והחומרים הכירורגיים החיוניים המשמשים לביצוע הניתוח. המפרט של קטטר PU עם שלושה סימנים כחולים מודגם גם, אשר מועיל להנחות את החוקר למקם את צינור?...

Watch this Scientific Journal Video about Microsurgical Skills of Establishing Permanent Jugular Vein Cannulation in Rats for Serial Blood Sampling of Orally Administered Drug at JoVE.com

Microsurgical Skills of Establishing Permanent Jugular Vein Cannulation in Rats for Serial Blood Sampling of Orally Administered Drug

טכניקות מיקרוכירורגיות מפורטות מודגמות כדי להקים מודל עכברוש קנביטציה וריד הצוואר לטווח ארוך יותר עבור איסוף דם רציף באותה חיה. פרמטרים פיזיולוגיים והמטולוגיים היו במעקב במהלך שלב ההתאוששות של החולדה. מודל זה יושם כדי ללמוד פרמקוקינטיקה של פוליפנול דרך הפה מבלי לגרום ללחץ בעלי חיים.

מיומנויות מיקרוכירורגיות של הקמת קנדול וריד הצוואר קבוע בחולדות עבור דגימת דם סדרתית של תרופה מנוהלת דרך הפה

Blood sampling in small laboratory animals is necessary for pharmaceutical lead optimization but can cause great harm and stress to experimental animals, ...

דגימת דם חוזרת ונשנית מחיית המעבדה הקטנה היא היבט חשוב של אופטימיזציה של עופרת פרמצבטית. פרוטוקול זה מפרט את הכישורים המיקרו-כירורגיים כדי להקים מודל קבוע של חולדת קנביטת וריד הצוואר. טכניקה זו יכולה להקים ביעילות מודל עכברוש קנולי וריד הצוואר ולאסוף שוב ושוב דגימות דם דרך הצינורית בחולדות מודעות תוך הימנעות מתח וכאב.חשוב לאתר את וריד הצוואר ואת הקנוליה שלו כמו הדגמה חזותית של מורכבות אנטומית אינו זמין עבור מודל זה. כדי להתחיל, להכין את תחנת העבודה aseptic עם 75% אלכוהול רפואי, ולאחר מכן להרדים את החולדה מגולחת עם איזופלוריין מעורבב עם חמצן. תת עורית להזריק תמיסת meloxicam במינון של שני מיליגרם לקילוגרם, ולאחר מכן בזהירות להרים את העור ליד עצם הבריח בצד ימין של קו האמצע של הצוואר עם מלקחיים, באמצעות זוג מספריים כירורגיים, לעשות חתך באורך 1.5 עד 2 ס"מ לכיוון החזה.לחשיפת הווריד הצווארי שמתחת, השתמש במספריים קשתית כדי לנתח בוטה את כיסוי הרקמה הדקה. הקצה הצפאלי הפרוקסימלי של וריד הצוואר החיצוני מורכב משני ענפים שניתן לזהות חזותית. הרם את וריד הצוואר יחד עם רקמת הממברנה החיבורית שלו כדי לדמיין את בלוטת הלימפה המחוברת לווריד הצוואר.בזהירות להפריד את הווריד לאורך כיוון כלי הדם מן השריר שמסביב, שומן, ורקמות אחרות. לדחוף את המלקחיים מתחת לווריד הצוואר מבלי לפגוע בכלי הדם המשניים ולעבור שתי חתיכות של תפר 6-0 מתחת לווריד כדי לסמן את שני הקצוות של כלי הדם בנפרד. משוך חתיכה אחת של התפר ככל האפשר לכיוון ראש החולדה ולכסות את הווריד cranily עם שניים עד שלושה קשרים באמצעות מלקחיים.מניחים את הקשירה השנייה על הקצה caudal של הווריד עם קשר רופף אחד. חבר פוליאוריטן 11 ס"מ, או PU, קטטר למזרק קצה קהה מוכן מלא תמיסת מלח הפרין, ולדחוף לאט את מלוח הפרין לתוך קטטר כדי למנוע בועות אוויר. דחף את הצד השטוח ללא קצה של המלקחיים מתחת לווריד הצוואר כדי לצאת בצד השני.לעשות חתך קטן בצורת V על הווריד ליד העניבה הגולגולתית עם זוג microscissors castroviejo, ופתח בעדינות את החתך עם קצה מלקחיים מרחיבים כלי המרפק. חותכים את הפתח האלכסוני של הקצה הקדמי של צנתר וריד הצוואר. לשתול את הקצה האלכסוני של הצינור עם מלקחיים ולהחליק אותו לתוך הווריד הצווארי.תוך כדי קידום הצנתר, לסגת לאט את המלקחיים המיקרוכירורגיים המרפק, ומהדקים את פני השטח החיצוניים של הכלי עם מלקחיים. להפסיק להכניס את הצנתר על להכות את הסימן הכחול הראשון של צינור PU, שהוא כשלושה סנטימטרים אורך. אבטחו את הצנתר המוחדר לווריד עם קשירות קוודליות ורוסטרליות באמצעות מלקחיים.חוט תפר 6-0 דרך הרקמה החשופה בצד ימין של החתך באמצעות מחט תפר, ולקשור את הקשירה עם hemostat. ואז לכופף את הצנתר בסימן הכחול השני כדי לאגד עם אותו קשירה ולהימנע חסימת צינורות PU. לאחר חיתוך כל חוט התפר הנוסף, לסגור את הצנתר על ידי החלפת מזרק קצה קהה עם תקע נירוסטה 22 מד.מניחים את החולדה בתנוחת הגב ומנקים בעדינות את האזור שבין השכם עם כדור הכותנה ספוג ב -75% אלכוהול רפואי. באמצעות המספריים כירורגיים, לעשות חתך קטן מאוד במרכז הצוואר הגב. דרך חתך הגב, להנחות בעדינות לדחוף את trochar מתחת לעור לכיוון החתך הגחוני בצד ימין של הצוואר.שים את קטטר ורידים לתוך trochar ולאחר מכן לשלוף ולהנחות את קטטר ורידים לכיוון חתך הגב. לאחר אבטחת הצנתר החיצוני לשכבת השריר, סגור את שכבת העור של החתכים הגחוניים והגביים עם תפר ניילון 6-0 ומחט תפירה וספוגית כל החתכים הכירורגיים עם יודופור. לאחר מכן, להסיר את תקע קטטר על ידי הידוק הצנתר עם קצות האצבעות.מניחים מזרק קצה קהה חדש לאט למשוך בחזרה את המזרק כדי לבדוק את זרימת הדם. החזק את הצנתר שוב עם קצות האצבעות. הזריקו 0.2 מיליליטר של תמיסת מלח הפריניזציה ו-0.1 מיליליטר של תמיסת נעילה לצנתר באמצעות מזרק קצה קהה, ולאחר מכן החליפו את המזרק בתקע נירוסטה.מבטלים את הקטטר ודוחפים מעט את התקע פנימה כדי להבטיח את ההידוק של הצנתר. כדי לאסוף דגימות דם לבדיקות המטולוגיות, למקם את החולדה בריסון, לפתוח את התקע, ולהכניס את המזרק לתוך קטטר PU ורידים כדי להבטיח את הצנתר אינו חסום. השליכו את הדם שנסוג בתחילה המכיל תערובת של דם, תמיסת מלח הפרינה ותמיסת נעילת קטטר.באמצעות מזרק חדש, לאסוף 150 microliters של דגימת דם טרי ולהעביר את דגימת הדם לצינור 0.5 מיליליטר רוסס בעבר עם K2EDTA. הזריקו 150 מיקרוליטרים של תמיסת מלח רגילה שחוממה מראש, והחדירו 0.2 מיליליטרים של תמיסת מלח רגילה הפרינית סטרילית דרך הצנתר. הזריקו 100 מיקרוליטרים של תמיסת המנעול לצנתר כדי להבטיח את האיטום והסטריליות של הצנתר לפני איסוף הדגימה הבאה.במחקר הנוכחי נחקרו התנאים הפיזיולוגיים וההמטולוגיים במשך שישה ימים לאחר הניתוח. רוב החולדות התאוששו בתוך ארבעה עד שישה ימים לאחר הניתוח כפי שמעיד על ידי עלייה במשקל הגוף של יותר מ -10 גרם, צריכת מזון קבועה, רכיבי דם נבחרים הנוגעים לזיהום, התייבשות ודלקת, כולל תאי דם לבנים, תאי דם אדומים, המוגלובין, וספירת טסיות דם. לכן, החולדות דרשו מינימום של ארבעה עד שישה ימים להחלמה לאחר ההליך.צריכת המים הגדולה הצביעה על התייבשות ביום הראשון שלאחר הניתוח. בנוסף, הפרמקוקינטיקה של החומצה האלגית פוליפנול הטבעית נחקרה במודל חולדת הקנוליה של וריד הצווארי שנקבע והזמינות הביולוגית הירודה של החומצה האלגית צוינה על ידי ריכוז הפלזמה הנמוך שלה במשך 24 שעות. בידוד נכון של וריד הצוואר הוא הצעד הראשון החשוב ביותר כי וריד הצוואר מוטבע בתוך רקמות רכות אחרות לא יכול להיות גלוי מיד לחוקר.דגימת דם רציפה בתוך אותה חיה יכולה להתבצע במודל העכברושים JVC שנקבע. זהו כלי שימושי וחזק להערכת ביצועי ניסוחים של תרופות ב- vivo.

Research

JoVE Journal

Medicine

Femoral Arterial and Venous Catheterization for Blood Sampling, Drug Administration and Conscious Blood Pressure and Heart Rate Measurements

צנתור עורקי ורידי הירך עבור דגימה דם, והתרופות ולחץ דם מודעת דרג מדידות הלב

In multiple fields of study, access to the circulatory system in laboratory studies is necessary. Pharmacological studies in rats using chronically ...

Training a Sophisticated Microsurgical Technique: Interposition of External Jugular Vein Graft in the Common Carotid Artery in Rats

אימון טכניקה מתוחכמת מייקרו: התערבותם של שתלי וריד צוואר חיצוניים בעורק התרדמה המשותף בחולדות

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in ...

Adult Mouse Venous Hypertension Model: Common Carotid Artery to External Jugular Vein Anastomosis.

למבוגרים עכבר ורידי יתר לחץ דם דגם: עורק תרדמה משותף לחיצוני הצוואר וריד השקה.

The understanding of the pathophysiology of brain arteriovenous malformations and arteriovenous fistulas has improved thanks to animal models. A rat model ...

Catheterization of the Carotid Artery and Jugular Vein to Perform Hemodynamic Measures, Infusions and Blood Sampling in a Conscious Rat Model

צנתור של עורק התרדמה וצוואר הווריד לבצע צעדים המודינמית, חליטות ודגימת דם במודל עכברוש מודע

The success of a small animal model to study critical illness is, in part, dependent on the ability of the model to simulate the human condition. ...

Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

חזר על איסוף דם של וריד הזנב של חולדות שאינם מרדימים עם מערכת איסוף דם ואקום

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the ...

A Rabbit Model of Durable Transgene Expression in Jugular Vein to Common Carotid Artery Interposition Grafts

דגם ארנב של ביטוי Transgene עמיד ומוחלף כדי שתלי Interposition נפוצים של העורק הראשי

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, ...

Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats

בריחי וריד לנקב כאמצעי חלופי של איסוף דגימת דם בחולדות

Blood collection with enough blood volume is essential in animal experiments. Blood collection from the tail vein of rats is popular and less stressful ...

Blood Collection Through Subclavian Vein Puncture in Mice

איסוף דם באמצעות ניקוב ורידים תת-מותני בעכברים

The mouse is the foremost mammalian model for studying human disease and human health. However, blood sample collection from mice is challenging in ...

Repetitive Blood Sampling from the Subclavian Vein of Conscious Rat

דגימת דם חוזרת מהווריד הסובקלבי של חולדה מודעת

Rats are widely used in pharmacokinetics (PK) and toxicokinetic (TK) studies that need to collect a certain amount of blood at specific time points to ...

Comparative Study of Blood Collection Techniques in Rats

Modified Tail Vein and Penile Vein Puncture for Blood Sampling in the Rat Model

Context Dependent Blood Collection Methods in Rats (Video) | JoVE

וריד זנב שונה וניקוב ורידים פין לדגימת דם במודל החולדה

Blood samples are required in most experimental animal designs to assess various hematological parameters. This paper presents two procedures for blood ...