Name: microsurgical skills of establishing permanent jugular vein cannulation in rats for serial blood sampling of orally administered drug
Uploaded: 2021-12-14T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Microsurgical Skills of Establishing Permanent Jugular Vein Cannulation in Rats for Serial Blood Sampling of Orally Administered Drug at JoVE.com

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (No. 82003692) tarafından R.X. Zhang'a desteklenmektedir; Northwestern Politeknik Üniversitesi'nde R. Miao'ya En İyi Akademik Bursu.

Aşağıda açıklanan prosedürler, Northwestern Politeknik Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi (No. 202101117) tarafından onaylanan bir protokolün parçası olarak gerçekleştirilmiştir.
1. Preoperatif hazırlık (ameliyattan bir gün önce)
NOT: Gerekli çözeltiler: normal salin (% 0.9 w / v sodyum klorür), heparinize salin (% 1 w / v heparin sodyum), kateter kilit çözeltisi, meloksikam çözeltisi (2 mg / mL) gib...

<ol>
	<li>Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+sample+collection+in+small+laboratory+animals.">Blood sample collection in small laboratory animals.</a> Journal of Pharmacology and Pharmacotherapeutics. 1 (2), 87-93 (2010).</li><li>Sadler, A. M., Bailey, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validation+of+a+refined+technique+for+taking+repeated+blood+samples+from+juvenile+and+adult+mice.">Validation of a refined technique for taking repeated blood samples from juvenile and adult mice.</a> Laboratory Animals. 47 (4), 316-319 (2013).</li><li>Zhang, R. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Coordinating+biointeraction+and+bioreaction+of+a+nanocarrier+material+and+an+anticancer+drug+to+overcome+membrane+rigidity+and+target+mitochondria+in+multidrug-resistant+cancer+cells.">Coordinating biointeraction and bioreaction of a nanocarrier material and an anticancer drug to overcome membrane rigidity and target mitochondria in multidrug-resistant cancer cells.</a> Advanced Functional Materials. 27 (39), 12 (2017).</li><li>Zhang, R. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polymer-lipid+hybrid+nanoparticles+synchronize+pharmacokinetics+of+co-encapsulated+doxorubicin-mitomycin+C+and+enable+their+spatiotemporal+co-delivery+and+local+bioavailability+in+breast+tumor.">Polymer-lipid hybrid nanoparticles synchronize pharmacokinetics of co-encapsulated doxorubicin-mitomycin C and enable their spatiotemporal co-delivery and local bioavailability in breast tumor.</a> Nanomedicine-Nanotechnology Biology and Medicine. 12 (5), 1279-1290 (2016).</li><li>Zhang, R. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sample+extraction+and+simultaneous+chromatographic+quantitation+of+doxorubicin+and+mitomycin+C+following+drug+combination+delivery+in+nanoparticles+to+tumor-bearing+mice.">Sample extraction and simultaneous chromatographic quantitation of doxorubicin and mitomycin C following drug combination delivery in nanoparticles to tumor-bearing mice.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (128), e11 (2017).</li><li>Bakar, S. K., Niazi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+reliable+method+for+chronic+cannulation+of+the+jugular+vein+for+pharmacokinetic+studies+in+rats.">Simple reliable method for chronic cannulation of the jugular vein for pharmacokinetic studies in rats.</a> Journal of Pharmaceutical Sciences. 72 (9), 1027-1029 (1983).</li><li>Harms, P. G., Ojeda, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rapid+and+simple+procedure+for+chronic+cannulation+of+the+rat+jugular+vein.">A rapid and simple procedure for chronic cannulation of the rat jugular vein.</a> Journal of Applied Physiology. 36 (3), 391-392 (1974).</li><li>Thrivikraman, K. V., Huot, R. L., Plotsky, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Jugular+vein+catheterization+for+repeated+blood+sampling+in+the+unrestrained+conscious+rat.">Jugular vein catheterization for repeated blood sampling in the unrestrained conscious rat.</a> Brain Research Protocols. 10 (2), 84-94 (2002).</li><li>Weeks, J. R., Davis, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+intravenous+cannulas+for+rats.">Chronic intravenous cannulas for rats.</a> Journal of Applied Physiology. 19 (3), 540-541 (1964).</li><li>Goldkuhl, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasma+concentrations+of+corticosterone+and+buprenorphine+in+rats+subjected+to+jugular+vein+catheterization.">Plasma concentrations of corticosterone and buprenorphine in rats subjected to jugular vein catheterization.</a> Laboratory Animals. 44 (4), 337-343 (2010).</li><li>Steffens, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+frequent+sampling+of+blood+and+continuous+infusion+of+fluids+in+the+rat+without+disturbing+the+animal.">A method for frequent sampling of blood and continuous infusion of fluids in the rat without disturbing the animal.</a> Physiology &amp; Behavior. 4 (5), 833-836 (1969).</li><li>Terao, N., Shen, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alterations+in+serum+protein+binding+and+pharmacokinetics+of+l-propranolol+in+the+rat+elicited+by+the+presence+of+an+indwelling+venous+catheter.">Alterations in serum protein binding and pharmacokinetics of l-propranolol in the rat elicited by the presence of an indwelling venous catheter.</a> Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 227 (2), 369-375 (1983).</li><li>Feng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catheterization+of+the+carotid+artery+and+jugular+vein+to+perform+hemodynamic+measures,+infusions+and+blood+sampling+in+a+conscious+rat+model.">Catheterization of the carotid artery and jugular vein to perform hemodynamic measures, infusions and blood sampling in a conscious rat model.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (95), e51881 (2015).</li><li>Karim, N., Ali, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Jugular+vein+cannulation+in+rats+-+A+mini+review.">Jugular vein cannulation in rats - A mini review.</a> Canadian Journal of Pure and Applied Sciences. 3, 929-935 (2009).</li><li>Ling, S., Jamali, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+cannulation+surgery+and+restraint+stress+on+the+plasma+corticosterone+concentration+in+the+rat:+application+of+an+improved+corticosterone+HPLC+assay.">Effect of cannulation surgery and restraint stress on the plasma corticosterone concentration in the rat: application of an improved corticosterone HPLC assay.</a> Journal of Pharmacy &amp; Pharmaceutical Sciences. 6 (2), (2003).</li><li>Lei, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacokinetic+study+of+ellagic+acid+in+rat+after+oral+administration+of+pomegranate+leaf+extract.">Pharmacokinetic study of ellagic acid in rat after oral administration of pomegranate leaf extract.</a> Journal of Chromatography B-Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences. 796 (1), 189-194 (2003).</li><li>Yan, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Method+development+and+validation+for+pharmacokinetic+and+tissue+distributions+of+ellagic+acid+using+Ultrahigh+Performance+Liquid+Chromatography-Tandem+Mass+Spectrometry+(UPLC-MS/MS).">Method development and validation for pharmacokinetic and tissue distributions of ellagic acid using Ultrahigh Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry (UPLC-MS/MS).</a> Molecules. 19 (11), 18923-18935 (2014).</li><li>Long, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioavailability+and+bioactivity+of+free+ellagic+acid+compared+to+pomegranate+juice.">Bioavailability and bioactivity of free ellagic acid compared to pomegranate juice.</a> Food &amp; Function. 10 (10), 6582-6588 (2019).</li><li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PKSolver:+An+add-in+program+for+pharmacokinetic+and+pharmacodynamic+data+analysis+in+Microsoft+Excel.">PKSolver: An add-in program for pharmacokinetic and pharmacodynamic data analysis in Microsoft Excel.</a> Computer Methods and Programs in Biomedicine. 99 (3), 306-314 (2010).</li><li>Christakis, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Learning+curve+of+vessel+cannulation+in+rats+using+cumulative+sum+analysis.">Learning curve of vessel cannulation in rats using cumulative sum analysis.</a> Journal of Surgical Research. 193 (1), 69-76 (2015).</li><li>Nm, S., Oduola, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Haematological+profile+shows+that+Inbred+Sprague+Dawley+rats+have+exceptional+promise+for+use+in+biomedical+and+pharmacological+studies.">Haematological profile shows that Inbred Sprague Dawley rats have exceptional promise for use in biomedical and pharmacological studies.</a> Asian Journal of Biomedical and Pharmaceutical Sciences. 4 (37), 33-37 (2014).</li><li>Lillie, L. E., Temple, N. J., Florence, L. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reference+values+for+young+normal+Sprague-Dawley+rats:+weight+gain,+hematology+and+clinical+chemistry.">Reference values for young normal Sprague-Dawley rats: weight gain, hematology and clinical chemistry.</a> Human &amp; Experimental Toxicology. 15 (8), 612-616 (1996).</li><li>He, Q. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex-specific+reference+intervals+of+hematologic+and+biochemical+analytes+in+Sprague-Dawley+rats+using+the+nonparametric+rank+percentile+method.">Sex-specific reference intervals of hematologic and biochemical analytes in Sprague-Dawley rats using the nonparametric rank percentile method.</a> PLoS One. 12 (12), 18 (2017).</li><li>EPA. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recommendations+for+and+Documentation+of+Biological+Values+for+Use+in+Risk+Assessment.">Recommendations for and Documentation of Biological Values for Use in Risk Assessment.</a> U.S. Environmental Protection Agency. , (1988).</li><li>Gaud, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+jugular+vein+cannulated+rats+may+not+be+suitable+for+intravenous+pharmacokinetic+screening+of+high+logP+compounds.">Single jugular vein cannulated rats may not be suitable for intravenous pharmacokinetic screening of high logP compounds.</a> European Journal of Pharmaceutical Sciences. 99, 272-278 (2017).</li><li>Turck, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+pharmacokinetics+of+meloxicam.">Clinical pharmacokinetics of meloxicam.</a> Arzneimittel-Forschung/Drug Research. 47 (3), 253-258 (1997).</li><li>Aghazadeh-Habashi, A., Jamali, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacokinetics+of+meloxicam+administered+as+regular+and+fast+dissolving+formulations+to+the+rat:+Influence+of+gastrointestinal+dysfunction+on+the+relative+bioavailability+of+two+formulations.">Pharmacokinetics of meloxicam administered as regular and fast dissolving formulations to the rat: Influence of gastrointestinal dysfunction on the relative bioavailability of two formulations.</a> European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 70 (3), 889-894 (2008).</li><li>Ludwig, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activation+of+human+cytochrome+P-450+3A4-catalyzed+meloxicam+5+'-methylhydroxylation+by+quinidine+and+hydroquinidine+in+vitro.">Activation of human cytochrome P-450 3A4-catalyzed meloxicam 5 '-methylhydroxylation by quinidine and hydroquinidine in vitro.</a> Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 290 (1), 1-8 (1999).</li><li>Zhang, R. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanoparticulate+drug+delivery+strategies+to+address+intestinal+cytochrome+P450+CYP3A4+metabolism+towards+personalized+medicine.">Nanoparticulate drug delivery strategies to address intestinal cytochrome P450 CYP3A4 metabolism towards personalized medicine.</a> Pharmaceutics. 13 (8), (2021).</li></ol>

Damar kanülasyonu tekniğinde ustalaşmak, önemli bir uygulama ve her işlemden ders çıkarmayı gerektirir. Christakis ve ark. kümülatif toplam (CUSUM) analizini kullanarak, bir araştırmacının ilaç adaylarının PK değerlendirmesine hazır olmadan önce bir yıllık bir süre boyunca200 sıçan uygulaması gerektiğini bulmuşlardır 20. Bununla birlikte, damar kanülasyonu için gereken çalışma süresi,13,20 yapılan sıça...

Kemirgenler, kobaylar ve tavşanlar gibi küçük laboratuvar hayvanlarından kan örneklerinin tekrar tekrar alınması, farmasötik kurşun optimizasyonu ve ayrıca araştırmada kullanılan hayvan sayısını azaltmak için önemli bir husustur 1,2. Yeni tanı araçları ve ilaç formülasyonu (örneğin, aşı) geliştirme boru hattı, farmakokinetiği (PK), toksisitesi ve duyarlılığı 3,4,5 gibi sağlamlıklarını ve performanslarını in vivo olarak değerlendirmek için farklı kan hacimlerine erişim gerektirir.
Kan örneği toplamaya laboratuvar yaklaşımı genel olarak cerrahi ve cerrahi olmayan 6 olmak üzere iki tip olaraksınıflandırılır. Cerrahi olmayan yaklaşımın, kardiyak ponksiyon, orbital sinüs delinmesi ve safen ve kuyruk veninin kanaması gibi yaygın teknikleri içeren araştırmacı için kavranması nispeten kolaydır. Bazı cerrahi olmayan yöntemlerle çoklu kan örneklemesi mümkündür, ancak numune hacmi küçüktür ve hayvanlarda fiziksel yara ve psikolojik strese neden olabilir1. Öte yandan, cerrahi yaklaşım tekrarlanan venipunktura favori bir alternatiftir ve hayvanların kan damarlarına geçici veya kalıcı bir kanülün yerleştirilmesini içerir 7,8,9. Büyük kan hacmi, bilinçli sıçanlarda kanülden tekrar tekrar çekilebilirken, kullanım tekniği, kısıtlama ve anestezi 7,8,10,11 nedeniyle stres ve ağrıdan kaçınılabilir. Bununla birlikte, kanül implantasyonu, kanı başarılı bir şekilde toplamak için yeterli eğitime sahip deneyimli bir araştırmacı gerektirir.
Sıçanlarda juguler ven kanülasyonu (JVC) yoluyla kan toplanması, PK6,10,12,13 ilacını incelemek için en yaygın kullanılan yöntemdir. Bununla birlikte, JVC sıçan modelinin kurulması, mikrocerrahi becerilerin dikkatli bir şekilde uygulanmasını ve cerrahi sonrası bakım ve bakım bilgisine ihtiyaç duymaktadır. Özellikle ameliyattan sonra sıçan, daha ileri deneyler için stabil fizyolojik duruma ulaşmak için analjeziklerin uygulanmasını ve yeterli iyileşme süresini gerektirir13,14,15. Vücut ağırlığı artışı (yani, >10 g), sıçanın iyileşmesi için geçerli ve yaygın olarak uygulanan bir gösterge olmasına rağmen, sıçanların, erken başlangıçtaki14,15'te fark edilmesi ince olabilen dehidrasyon, enfeksiyon ve iltihaplanma nedeniyle ameliyat sonrası beklenmedik bir ölüme sahip olmaları nadir değildir. Ek olarak, JVC modelinde kateter tıkanıklığı, kan alımı sırasında bir sorun olmaya devam etmektedir.
Mevcut protokol, juguler venin tanımlanması, izolasyonu ve kanülasyonuna özel olarak odaklanarak anestezi uygulanmış bir sıçanda JVC için mikrocerrahi prosedürleri ayrıntılı olarak göstermiştir. İyileşme aşamasında sıçanların fizyolojik ve hematolojik olarak izlenmesinin önemi vurgulanmaktadır. Son olarak, JVC sıçan modelini doğrulamak için oral yoldan uygulanan doğal fenol ellajik asidin PK'sini zayıf biyoyararlanımlı (yani düşük sistemik konsantrasyon) incelemek için venöz kateter yoluyla seri kan örnekleri toplandı.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.5 mL test tube containing EDTA anticoagulant</td>
			<td>Xinkang</td>
			<td>N/A</td>
			<td>collecting blood samples for hematology test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.5*20 mm 1.0-mL syringe</td>
			<td>KLMEDICAL</td>
			<td>N/A</td>
			<td>washing or replacing the fluid with saline</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.6*28.5 mm 5.0-mL syringe</td>
			<td>HD</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Subcutaneous injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.0-mL Blunt tipped syringe (22G)</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>S4-PKT22G</td>
			<td>Inject the saline and collect blood samples through catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL sterile microcentrifuge tube</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>MCT-150-C-S</td>
			<td>Store sterile catheter lock solution heparinized saline and meloxicam solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5&#160;mL microcentrifuge tubes</td>
			<td>Biosharp</td>
			<td>BS-15-M</td>
			<td>blood collection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1/2&#160; circle cutting 5*12 mm suture needle</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>S4-FHZ</td>
			<td>Thread the muscle layer to fix the catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3/8 circle cutting 7*17 mm suture needle</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>S5-FHZ</td>
			<td>Suture the incision of rat cortex</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-0 sterile non-absorbable silk suture thread</td>
			<td>JUNSHENG</td>
			<td>N/A</td>
			<td>ligature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>75% medical alcohol</td>
			<td>HONGSONG</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Disinfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adhensive tape</td>
			<td>LIUTAI</td>
			<td>N/A</td>
			<td>positioning the rat</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Autoclave sterilization tape</td>
			<td>Biosharp</td>
			<td>BS-QT-028</td>
			<td>Mark sterilized items</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Automated blood cell counter</td>
			<td>Sysmex</td>
			<td>XN-550</td>
			<td>Hematology test</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castroviejo micro scissors</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>WA1010</td>
			<td>Cut the opening in the blood vessel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>75002402</td>
			<td>Plasma preparation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clean cushion</td>
			<td>Qingjie</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Prepare the operation area</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton balls</td>
			<td>HC</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Wound disinfection and sterilization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td>BEITAGOGO</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Disinfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved hemostat</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>N/A</td>
			<td>ligature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DN50 Stainless-steel rat restrainer</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>S4-RGDQ1</td>
			<td>Restrict the movement of rats for easy operation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ellagic acid</td>
			<td>Aladdin</td>
			<td>E102710-25g</td>
			<td>natural phenol for oral administration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Half-curved forceps</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>53072</td>
			<td>Lift the muscle layer and tissue, isolate the jugular vein and tie the suture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>Warm mate</td>
			<td>N/A</td>
			<td>preventing heat loss of animal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin sodium</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>H8060</td>
			<td>anticoagulant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodophor</td>
			<td>Xidebao</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Clean the wound</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris scissors</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>54002</td>
			<td>Bluent separation the muscle layer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>RWD</td>
			<td>R510-22-16</td>
			<td>anaesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LED lamp</td>
			<td>EMPERORFEEL</td>
			<td>N/A</td>
			<td>sugery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Liquid chromatography-mass spectroscopy</td>
			<td>Thermo Fisher Scientific</td>
			<td>VQF01-20001/ TSQ02-10002</td>
			<td>detection of drug concentration in plasma</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Meloxicam</td>
			<td>Hongqiang</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Analgesic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal saline</td>
			<td>KL</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Prepara the solution and protect blood vessels from drying out</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pet razor</td>
			<td>Codos</td>
			<td>3180</td>
			<td>Shaving the fur</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered saline</td>
			<td>ZHHC</td>
			<td>PW012</td>
			<td>Preparation of Ellagic acid solution</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PU catheter</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>RJVC-PU</td>
			<td>Jugular vein cannulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal operation anesthesia console</td>
			<td>RWD</td>
			<td>68620</td>
			<td>Operation workstation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spray bottle</td>
			<td>Other</td>
			<td>N/A</td>
			<td>aseptic workstation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless steel plug (22G)</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>S4-PKD22G</td>
			<td>Plug the catheter to ensure its sealing</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stainless steel trochar</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>S$-PKDGZ</td>
			<td>Guide the catheter exteriorization</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile lock solution</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>SK-FB</td>
			<td>lock the catheter to ensure its sterility</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight feeding needle</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Oral gavage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical pouch</td>
			<td>BKMAM</td>
			<td>N/A</td>
			<td>container for sterilization of surgical instruments</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical scissors</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>J21070</td>
			<td>Cut incision on rat skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vessel dilator balanced forceps</td>
			<td>skillsmodel</td>
			<td>WA3020</td>
			<td>Expand the blood vessel and guide the cannula to slide in</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZS-MV Small animal anesthesia machine</td>
			<td>ZSLab</td>
			<td>1057003</td>
			<td>inducing and maintaining anaesthesia</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

microsurgical skills of establishing permanent jugular vein cannulation in rats for serial blood sampling of orally administered drug

Küçük laboratuvar hayvanlarında kan örneklemesi farmasötik kurşun optimizasyonu için gereklidir, ancak deney hayvanlarına büyük zarar ve strese neden olabilir ve bu da sonuçları potansiyel olarak etkileyebilir. Sıçanlarda juguler ven kanülasyonu (JVC), tekrarlanan kan alımı için yaygın olarak kullanılan bir modeldir, ancak cerrahi becerilerin ve hayvan bakımının yeterli eğitimini gerektirir. Bu makalede, juguler kanülün yerleştirilmesi ve sızdırmazlığına özel olarak odaklanarak kalıcı bir JVC sıçan modelinin kurulması ve sürdürülmesi için mikrocerrahi prosedürler detaylandırılmıştır. Fizyolojik (örneğin, vücut ağırlığı, yiyecek ve su alımı) ve hematolojik parametrelerin izlenmesinin önemi, sıçanın iyileşmesi sırasında ameliyat sonrası 6 gün boyunca sunulan sonuçlarla vurgulanmıştır. JVC sıçan modelinde oral yoldan uygulanan doğal fenol ellajik asidin ilaç-plazma konsantrasyon-zaman profili belirlenmiştir.

Bu protokol, seri kan alımı için mikrocerrahi becerileri kullanarak uzun vadeli bir JVC modelinin nasıl oluşturulacağını kapsamlı bir şekilde göstermiştir. Şekil 1A , ameliyatı yürütmek için kullanılan temel cerrahi aletleri ve malzemeleri göstermektedir. Üç mavi işaretli PU kateterinin spesifikasyonu da gösterilmiştir, bu da araştırmacıya damar kanülünü adım 3.3'e yerleştirmesi için rehberlik etmek için yararlıdır., kanülasyonu yönlendirmek iç...

Watch this Scientific Journal Video about Microsurgical Skills of Establishing Permanent Jugular Vein Cannulation in Rats for Serial Blood Sampling of Orally Administered Drug at JoVE.com

Microsurgical Skills of Establishing Permanent Jugular Vein Cannulation in Rats for Serial Blood Sampling of Orally Administered Drug

Aynı hayvanda sıralı kan alımı için daha uzun süreli juguler ven kanülasyon sıçanı modeli oluşturmak için ayrıntılı mikrocerrahi teknikler gösterilmiştir. Sıçanın iyileşme aşamasında fizyolojik ve hematolojik parametreler izlenmiştir. Bu model, hayvan stresine neden olmadan oral yoldan uygulanan polifenolün farmakokinetiğini incelemek için uygulanmıştır.

Oral Yoldan Verilen İlacın Seri Kan Örneklemesi için Sıçanlarda Kalıcı Juguler Ven Kanülasyonu Oluşturma Mikrocerrahi Becerileri

Blood sampling in small laboratory animals is necessary for pharmaceutical lead optimization but can cause great harm and stress to experimental animals, ...

Küçük laboratuvar hayvanından tekrarlanan kan örneklemesi, farmasötik kurşun optimizasyonunun önemli bir yönüdür. Bu protokol, kalıcı bir juguler ven kanülasyon sıçan modeli oluşturmak için mikrocerrahi becerileri detaylandırmaktadır. Bu teknik, bir juguler ven kanülasyon sıçan modelini verimli bir şekilde kurabilir ve stres ve ağrıdan kaçınırken bilinçli sıçanlarda kanül yoluyla tekrar tekrar kan örnekleri toplayabilir.Juguler veni ve kanülasyonunu bulmak önemlidir, çünkü anatomik karmaşıklığın görsel gösterimi bu model için mevcut değildir. Başlamak için, aseptik iş istasyonunu % 75tıbbi alkol ile hazırlayın, ardından tıraş edilmiş sıçanı oksijenle karıştırılmış izofluran ile uyuşturun. Subkutan olarak meloksikam solüsyonunu kilogram başına iki miligramlık bir dozda enjekte edin, daha sonra boynun orta çizgisinin sağ tarafındaki klavikula yakınındaki cildi forseps ile dikkatlice kaldırın ve bir çift cerrahi makas kullanarak göğse doğru 1.5 ila 2 santimetre uzunluğunda bir kesi yapın.Juguler venin altını açığa çıkarmak için, ince doku kapağını künt diseke etmek için iris makası kullanın. Dış juguler venin proksimal sefalik ucu, görsel olarak tanımlanabilen iki daldan oluşur. Juguler vene, juguler vene bağlı lenf bezini görselleştirmek için bağ zarı dokusu ile birlikte juguler veni kaldırın.Damar yönü boyunca damarı çevreleyen kas, yağ ve diğer dokulardan dikkatlice ayırın. Forsepsleri kollateral kan damarlarına zarar vermeden juguler venin altına dürtün ve kan damarının iki ucunu ayrı ayrı işaretlemek için damarın altına iki parça 6-0 dikiş geçirin. Dikişin bir parçasını sıçan kafasına doğru mümkün olduğunca çekin ve forseps kullanarak damarı kraniyal olarak iki ila üç düğümle yağlayabilirsiniz.İkinci bağı damarın kaudal ucuna bir gevşek düğümle yerleştirin. Heparinize salin ile doldurulmuş hazırlanmış künt uç şırıngasına 11 santimetrelik bir poliüretan veya PU kateter takın ve hava kabarcıklarını önlemek için heparinize salini yavaşça kateterin içine itin. Forsepslerin uçsuz bucaksız düz tarafını juguler venin altından diğer taraftan çıkmak için dürtün.Bir çift castroviejo mikromakas ile kraniyal bağın yakınındaki damarda küçük V şeklinde bir kesim yapın ve dirsek damarı dilatatör forsepslerinin ucuyla insizyonu yavaşça açın. Juguler ven kateterinin ön ucunun eğik açıklığını kesin. Tüpün eğik ucunu forseps ile yerleştirin ve juguler damara kaydırın.Kateteri ilerletirken, dirsek mikrocerrahi forsepslerini yavaşça geri çekin ve damarın dış yüzeyini forseps ile sıkıştırın. Yaklaşık üç santimetre uzunluğundaki PU tüpünün ilk mavi işaretine çarptıktan sonra kateteri yerleştirmeyi bırakın. Yerleştirilen kateteri forseps kullanarak hem kaudal hem de rostral ligatürlerle damara sabitleyin.Bir dikiş iğnesi kullanarak insizyonun sağ tarafındaki açıkta kalan dokudan 6-0'lık bir dikiş geçirin ve bağı bir hemostat ile bağlayın. Daha sonra aynı bağ ile bağlamak için kateteri ikinci mavi işarette bükün ve PU borusunu tıkamaktan kaçının. Tüm ekstra dikiş ipliğini kestikten sonra, künt uçlu şırıngayı 22 gauge paslanmaz çelik bir tapayla değiştirerek kateteri kapatın.Sıçanı sırt pozisyonuna yerleştirin ve% 75 tıbbi alkole batırılmış pamuk topu ile kürek kemiği arasındaki alanı nazikçe temizleyin. Cerrahi makası kullanarak, dorsal boynun merkezinde çok küçük bir kesi yapın. Dorsal insizyondan, cildin altındaki trokarı boynun sağ tarafındaki ventral insizyona doğru yönlendirin ve yavaşça itin.Venöz kateteri trokar içine koyun ve ardından dışarı çekin ve venöz kateteri dorsal insizyona doğru yönlendirin. Dışsal kateteri kas tabakasına sabitledikten sonra ventral ve dorsal insizyonların deri tabakasını 6-0 naylon sütür ve dikiş iğnesi ile kapatın ve tüm cerrahi kesileri iyodofor ile sürün. Ardından, kateteri parmak uçlarıyla sıkıştırarak kateter tıkacını çıkarın.Yeni bir künt uç şırıngası yerleştirin ve kan akışını test etmek için şırıngayı yavaşça geri çekin. Kateteri parmak uçlarıyla tekrar tutun. Künt uç şırıngasını kullanarak kateterin içine 0,2 mililitre heparinize salin ve 0,1 mililitre kilit çözeltisi enjekte edin ve ardından şırıngayı paslanmaz çelik bir tapayla değiştirin.Kateteri açın ve kateterin sıkılığını sağlamak için fişi hafifçe itin. Hematolojik testler için kan örnekleri toplamak için, sıçanı bir kısıtlayıcıya yerleştirin, fişi açın ve kateterin tıkanmadığından emin olmak için şırıngayı venöz PU kateterine yerleştirin. Bir kan karışımı, heparinize salin ve kateter kilit çözeltisi içeren başlangıçta çekilmiş kanı atın.Yeni bir şırınga kullanarak, 150 mikrolitre taze kan örneği toplayın ve kan örneğini daha önce K2EDTA ile püskürtülen 0.5 mililitrelik bir tüpe aktarın. 150 mikrolitre önceden ısıtılmış normal salin enjekte edin ve kateterden 0.2 mililitre steril heparinize normal salin enjekte edin. Bir sonraki numune toplamadan önce kateterin sızdırmazlığını ve sterilitesini sağlamak için kateterin içine 100 mikrolitre kilit çözeltisi enjekte edin.Bu çalışmada postoperatif altı gün içindeki fizyolojik ve hematolojik durumlar araştırılmıştır. Sıçanların çoğunluğu, 10 gramdan fazla vücut ağırlığı artışı, düzenli gıda alımı, beyaz kan hücresi, kırmızı kan hücresi, hemoglobin ve trombosit sayısı dahil olmak üzere enfeksiyon, dehidrasyon ve inflamasyonla ilgili seçilmiş kan bileşenleri ile kanıtlandığı gibi, ameliyattan sonraki dört ila altı gün içinde iyileşti. Bu nedenle, sıçanlar işlemden sonra iyileşme için en az dört ila altı gün gerektirdi.Büyük miktarda su alımı, operasyon sonrası ilk günde dehidrasyona işaret etti. Ek olarak, doğal polifenol ellajik asidin farmakokinetiği, yerleşik juguler ven kanülasyon sıçanı modelinde incelenmiş ve ellagik asidin zayıf biyoyararlanımı, 24 saat boyunca düşük plazma konsantrasyonu ile belirtilmiştir. Juguler venin doğru izolasyonu en önemli ilk adımdır, çünkü diğer yumuşak dokulara gömülü juguler ven araştırmacı tarafından hemen görülemeyebilir.Aynı hayvan içinde sıralı kan örneklemesi yerleşik JVC sıçan modelinde gerçekleştirilebilir. İlaç formülasyonlarının performansını in vivo olarak değerlendirmek için kullanışlı ve sağlam bir araçtır.

Research

JoVE Journal

Medicine

Femoral Arterial and Venous Catheterization for Blood Sampling, Drug Administration and Conscious Blood Pressure and Heart Rate Measurements

Kan Örnekleme, İlaç İdaresi ve Bilinçli Kan Basıncı ve Nabız ölçümleri Femoral Arter ve Venöz Kateterizasyon

In multiple fields of study, access to the circulatory system in laboratory studies is necessary. Pharmacological studies in rats using chronically ...

Training a Sophisticated Microsurgical Technique: Interposition of External Jugular Vein Graft in the Common Carotid Artery in Rats

Sıçanlarda Common Karotid Arter interpozisyon Harici Juguler Ven Greft: Gelişmiş Mikrocerrahi Tekniği Eğitimi

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in ...

Adult Mouse Venous Hypertension Model: Common Carotid Artery to External Jugular Vein Anastomosis.

Yetişkin Fare Venöz Hipertansiyon Modeli: Dış Boyun Ven Anastomoza Ortak Karotis Arter.

The understanding of the pathophysiology of brain arteriovenous malformations and arteriovenous fistulas has improved thanks to animal models. A rat model ...

Catheterization of the Carotid Artery and Jugular Vein to Perform Hemodynamic Measures, Infusions and Blood Sampling in a Conscious Rat Model

Karotis Arter ve Ven Juguler kateterizasyon bir Bilinçli Rat Modelinde, İnfüzyonları ve Kan Örnekleme hemodinamik Tedbirleri Gerçekleştirme

The success of a small animal model to study critical illness is, in part, dependent on the ability of the model to simulate the human condition. ...

Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System

Kuyruk damar anestezi sıçan bir vakum kan toplama sistemi ile kan koleksiyonundan tekrarlanan

Blood can be collected from rats in a number of sampling locations. For instance, the tail vein is a superior location for blood sampling. However, the ...

A Rabbit Model of Durable Transgene Expression in Jugular Vein to Common Carotid Artery Interposition Grafts

Tavşan manken dayanıklı Transgene ifade juguler ven ortak karotid arter interpozisyonu Greftler için

Vein graft bypass surgery is a common treatment for occlusive arterial disease; however, long-term success is limited by graft failure due to thrombosis, ...

Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats

Subklaviyan ven ponksiyon kan örnek fareleri koleksiyonunda alternatif bir yöntem olarak

Blood collection with enough blood volume is essential in animal experiments. Blood collection from the tail vein of rats is popular and less stressful ...

Blood Collection Through Subclavian Vein Puncture in Mice

Farelerde subclavian ven delinme yoluyla kan toplama

The mouse is the foremost mammalian model for studying human disease and human health. However, blood sample collection from mice is challenging in ...

Repetitive Blood Sampling from the Subclavian Vein of Conscious Rat

Bilinçli Sıçan Subklaviyen Veninden Tekrarlayan Kan Örneklemesi

Rats are widely used in pharmacokinetics (PK) and toxicokinetic (TK) studies that need to collect a certain amount of blood at specific time points to ...

Comparative Study of Blood Collection Techniques in Rats

Modified Tail Vein and Penile Vein Puncture for Blood Sampling in the Rat Model

Context Dependent Blood Collection Methods in Rats (Video) | JoVE

Sıçan Modelinde Kan Örneklemesi için Modifiye Kuyruk Veni ve Penil Ven Delinmesi

Blood samples are required in most experimental animal designs to assess various hematological parameters. This paper presents two procedures for blood ...