Name: a rodent model of the ross operation: syngeneic pulmonary artery graft implantation in a systemic position
Uploaded: 2022-04-01T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Rodent Model of The Ross Operation: Syngeneic Pulmonary Artery Graft Implantation in A Systemic Position at JoVE.com

L’étude a été financée par le budget intégré pour la recherche interministérielle (BIRD) 2019.

Toutes les procédures ont été approuvées par le Comité des soins aux animaux de l’Université de Padoue (OPBA, numéro de protocole n° 55/2017) et autorisées par le ministère italien de la Santé (autorisation n° 700/2018-PR), conformément à la directive de l’Union européenne 2010/63/UE et à la loi italienne 26/2014 pour le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire.
1. Soins aux animaux et modèle expérimental
<ol><li>Assurez-vous que tous les rats...

<ol>
	<li>Botto, L. D., Correa, A., Erickson, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Racial+and+temporal+variations+in+the+prevalence+of+heart+defects.">Racial and temporal variations in the prevalence of heart defects.</a> Pediatrics. 107 (3), 32 (2001).</li><li>Vergnat, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aortic+stenosis+of+the+neonate:+A+single-center+experience.">Aortic stenosis of the neonate: A single-center experience.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 157 (1), 318-326 (2019).</li><li>Hra&#353;ka, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+long-term+outcome+of+open+valvotomy+for+critical+aortic+stenosis+in+neonates.">The long-term outcome of open valvotomy for critical aortic stenosis in neonates.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 94 (5), 1519-1526 (2012).</li><li>Kaza, A. K., Pigula, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Are+bioprosthetic+valves+appropriate+for+aortic+valve+replacement+in+young+patients.">Are bioprosthetic valves appropriate for aortic valve replacement in young patients.</a> Seminars in Thoracic and Cardiovascular Surgery: Pediatric Cardiac Surgery Annual. 19 (1), 63-67 (2016).</li><li>Myers, P. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Outcomes+after+mechanical+aortic+valve+replacement+in+children+and+young+adults+with+congenital+heart+disease.">Outcomes after mechanical aortic valve replacement in children and young adults with congenital heart disease.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 157 (1), 329-340 (2019).</li><li>Donald, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ross+operation+in+children:+23-year+experience+from+a+single+institution.">Ross operation in children: 23-year experience from a single institution.</a> The Annals of thoracic surgery. 109 (4), 1251-1259 (2020).</li><li>Khwaja, S., Nigro, J. J., Starnes, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Ross+procedure+is+an+ideal+aortic+valve+replacement+operation+for+the+teen+patient.">The Ross procedure is an ideal aortic valve replacement operation for the teen patient.</a> Seminars in Thoracic and Cardiovascular Surgery: Pediatric Cardiac Surgery Annual. , 173-175 (2005).</li><li>Elkins, R. C., Lane, M. M., McCue, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ross+operation+in+children:+late+results.">Ross operation in children: late results.</a> The Journal of Heart Valve Disease. 10 (6), 736-741 (2001).</li><li>Chambers, J. C., Somerville, J., Stone, S., Ross, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+autograft+procedure+for+aortic+valve+disease:+long-term+results+of+the+pioneer+series.">Pulmonary autograft procedure for aortic valve disease: long-term results of the pioneer series.</a> Circulation. 96 (7), 2206-2214 (1997).</li><li>Mazine, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ross+procedure+in+adults+for+cardiologists+and+cardiac+surgeons:+JACC+state-of-the-art+review.">Ross procedure in adults for cardiologists and cardiac surgeons: JACC state-of-the-art review.</a> Journal of the American College of Cardiology. 72 (22), 2761-2777 (2018).</li><li>Sengupta, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+laboratory+rat:+Relating+its+age+with+humans.">The laboratory rat: Relating its age with humans.</a> International Journal of Preventive Medicine. 4 (6), 624-630 (2013).</li><li>Ashfaq, A., Leeds, H., Shen, I., Muralidaran, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reinforced+ross+operation+and+intermediate+to+long+term+follow+up.">Reinforced ross operation and intermediate to long term follow up.</a> Journal of Thoracic Disease. 12 (3), 1219-1223 (2020).</li><li>Vida, V. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age+is+a+risk+factor+for+maladaptive+changes+of+the+pulmonary+root+in+rats+exposed+to+increased+pressure+loading.">Age is a risk factor for maladaptive changes of the pulmonary root in rats exposed to increased pressure loading.</a> Cardiovascular Pathology: The Official Journal of the Society for Cardiovascular Pathology. 21 (3), 199-205 (2012).</li><li>Nappi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+experimental+model+of+the+Ross+operation:+Development+of+resorbable+reinforcements+for+pulmonary+autografts.">An experimental model of the Ross operation: Development of resorbable reinforcements for pulmonary autografts.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 149 (4), 1134-1142 (2015).</li><li>Vanderveken, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechano-biological+adaptation+of+the+pulmonary+artery+exposed+to+systemic+conditions.">Mechano-biological adaptation of the pulmonary artery exposed to systemic conditions.</a> Scientific Reports. 10 (1), 2724 (2020).</li></ol>

Le remplacement de la valve aortique par la racine pulmonaire autologue (opération de Ross) représente une option attrayante pour la réparation de la sténose de la valve aortique congénitale en raison du profil favorable et de la croissance potentielle de l’autogreffe10. La principale limitation de cette procédure est la dilatation potentielle de la néo-valve aortique, qui prédispose au développement d’une régurgitation à long terme. La possibilité de caractériser les modification...

La sténose valvulaire aortique congénitale est un sous-groupe de cardiopathie congénitale caractérisée par une obstruction du tractus ventriculaire gauche dans lequel la lésion est située au niveau valvulaire. La malformation affecte environ 0,04-0,38 pour 1000 naissances vivantes1.
Les options disponibles pour la correction sont nombreuses, chacune avec ses propres avantages et inconvénients. Pour les patients aptes à une correction biventriculaire2, l’approche peut viser la réparation valvulotomie (valvulotomie percutanée ou chirurgicale) ou son remplacement3. Ce dernier est préféré lorsque la valve aortique est considérée comme irrécupérable; cependant, les options disponibles sont limitées pour les patients pédiatriques. En effet, les valves bioprothétiques ne sont pas indiquées pour le remplacement aortique dans la population jeune en raison de leur calcification précoce4. D’autre part, la dégénérescence des valves mécaniques est considérablement plus lente, mais celles-ci nécessitent un traitement anticoagulant à vie5. De plus, la limitation majeure de ces prothèses est représentée par le manque de potentiel de croissance, ce qui prédispose les patients à des réinterventions supplémentaires.
Une option thérapeutique intéressante dans la population pédiatrique est le transfert de l’autogreffe pulmonaire à la position aortique appelée « opération de Ross ». Dans ce cas, la valve pulmonaire est alors remplacée par une homogreffe (Figure 1)6. Cette procédure peut éventuellement représenter le meilleur choix chirurgical pour les enfants car l’autogreffe pulmonaire préserve son potentiel de croissance et ne comporte pas les risques d’un traitement anticoagulant à vie. En outre, la procédure Ross peut être d’une grande valeur également chez les jeunes adultes pour éviter une valve mécanique ou biologique, ayant le potentiel de devenir la meilleure solution chirurgicale.
Les résultats après remplacement valvulaire aortique par autogreffe pulmonaire sont excellents, avec une survie supérieure à 98 % et de bons résultats à long terme7. Des études de littérature font état de 93 % et 90 % d’absence de remplacement de l’homogregreffe pulmonaire à 4 et 12 ans, respectivement8.
La principale limitation de cette procédure est la tendance de l’autogreffe à se dilater à long terme, en particulier lorsqu’elle est utilisée comme remplacement de racine autoportante. Cela peut provoquer une incompétence valvulaire qui peut nécessiter une réintervention. En effet, l’étude de suivi la plus longue réalisée jusqu’à présent fait état d’une absence de réopération pour le remplacement de l’autogreffe de 88% à 10 ans et de 75% à 20 ans9.
La possibilité de recréer une opération de Ross dans un cadre expérimental représente une condition préalable fondamentale pour étudier le mécanisme sous-jacent de l’adaptation de l’autogreffe pulmonaire aux pressions systémiques. Plusieurs modèles ont été proposés dans le passé. Cependant, ceux-ci sont généralement limités à des expériences ex-vivo ou à des modèles animaux in vivo avec de gros animaux relativement coûteux. Dans cette étude, nous avons cherché à établir un modèle de rongeur d’implantation de greffe d’artère pulmonaire (PAG) dans une position systémique, en tant que racine autoportante.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.9% Sodium Chloride</td>
			<td>Monico SpA</td>
			<td>AIC 030805105</td>
			<td>Two bottles of 100 mL. The cold one (4&#176;C) for flushing the harvesting organ; the warm one (39&#176;C) for moistening, and rehydration of the recipient</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>7.5% Povidone-Iodine</td>
			<td>B Braun</td>
			<td>AIC 032151211</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Barraquer</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>FD 232R</td>
			<td>Straight micro needle holder for the vascular anastomoses</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castroviejo needle holder</td>
			<td>Not available</td>
			<td>J 4065</td>
			<td>To close the animal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clip applying forceps</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 3994-05</td>
			<td>For clip application</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical SpA</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Supermarket product. Sterilized</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved micro jeweller forceps</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 4240-06</td>
			<td>Used to pass sutures underneath the vases.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Depilatory cream</td>
			<td>RB healthcare</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Supermarket product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrocautery machine</td>
			<td>LED SpA</td>
			<td>Surton 200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissors</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 2422-11</td>
			<td>For opening the abdomen (recipient)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine-tip curved Vannas micro scissors</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>OC 497R</td>
			<td>Only for preparing the pulmonary root, cut the lumbar vases and the 10/0 Prolene</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluovac Isoflurane/Halotane Scavanger unit</td>
			<td>Harvard Apparatus Ltd</td>
			<td>K 017041</td>
			<td>Complete of anesthesia machine, anesthesia tubing, induction chamber and scavenger unit with absorbable filter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamycin</td>
			<td>MSD Italia Srl</td>
			<td>AIC 020891014</td>
			<td>Antibiotic. Single dose, 5 mg/kg intramuscular, administered during surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>Pharmatex Italia Srl</td>
			<td>AIC 034692044</td>
			<td>500 IU into the recipient abdominal vena cava</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>I.V. Catheter</td>
			<td>Smiths Medical Ltd</td>
			<td>4036</td>
			<td>20G</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin Syringe, 1 mL</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-841-33</td>
			<td>To inject heparin in the harvesting animal and to flush the sectioned aorta in the recipient</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Jeweler bipolar forceps</td>
			<td>GIMA SpA</td>
			<td>30665</td>
			<td>0.25 mm tip. For electrocautery of very small vases</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lewis rats (LEW/HanHsd)</td>
			<td>Envigo RMS SRL, San Pietro al Natisone, Udine, Italy</td>
			<td>86104M</td>
			<td>Male or female, weighing 200-250 g (pulmonary root harvesting animals) and 320-400 g (recipients)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Mosquito</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 3121-10</td>
			<td>In number of four, with tips covered with silicon tubing. To keep in traction the Prolene suture during anastomosis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating microscope</td>
			<td>Leica Microsystems</td>
			<td>M 400-E</td>
			<td>Used with 6x, 10x and 16x in-procedure interchangeable magnifications</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perma-Hand silk 2-0</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical SpA</td>
			<td>C026D</td>
			<td>To lift the aorta</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petrolatum ophthalmic ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>NDC 17033-211-38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolene 10-0</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical SpA</td>
			<td>W2790</td>
			<td>Very fine non-absorbable suture, with a BV75-3 round bodied needle, for the vascular anastomoses</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retractors</td>
			<td>Not any</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Two home-made retractors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ring tip micro forceps</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 4079-14</td>
			<td>For delicate manipulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sevoflurane</td>
			<td>AbbVie Srl</td>
			<td>AIC 031841036</td>
			<td>Mixed with oxygen, for inhalatory anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spring type micro scissors</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 2380-14</td>
			<td>Straight; 14 cm long</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard aneurysm clips</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 3980-12</td>
			<td>Two clips (7.5 mm; 180 g; 1.77 N) to close the aorta</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile gauze of non-woven fabric material</td>
			<td>Luigi Salvadori SpA</td>
			<td>26161V</td>
			<td>7.5x7.5 cm, four layers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Doyen scissors</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU/1428-16</td>
			<td>For use to the donor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight micro jeweller forceps</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 4240-04</td>
			<td>10.5 cm long. Used throughout the anastomosis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes</td>
			<td>Artsana SpA</td>
			<td>N/A</td>
			<td>20 mL (for the harvesting animal) and 5 mL (for the recipient). For saline flushing and dipping</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TiCron 4-0</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>CV-331</td>
			<td>For closing muscles and skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue forceps V. Mueller</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>CH 6950-009</td>
			<td>Used for skin and muscles</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tramadol</td>
			<td>SALF SpA</td>
			<td>AIC 044718029</td>
			<td>Analgesic. Single dose, 5 mg/kg intramuscular</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Virgin silk 8-0</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical SpA</td>
			<td>W818</td>
			<td>For arterial branch ligation</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a rodent model of the ross operation: syngeneic pulmonary artery graft implantation in a systemic position

L’opération de Ross pour la maladie valvulaire aortique a retrouvé un nouvel intérêt en raison de ses résultats exceptionnels à long terme. Néanmoins, lorsqu’il est utilisé comme remplacement racinaire autoportant, la dilatation possible de l’autogreffe pulmonaire et la régurgitation aortique ultérieure sont décrites. Plusieurs modèles animaux ont été proposés. Cependant, ceux-ci sont généralement limités à des modèles ex-vivo ou à des expériences in vivo avec de grands modèles animaux relativement coûteux. Dans cette étude, nous avons cherché à établir un modèle rongeur d’implantation de greffe d’artère pulmonaire (PAG) dans une position systémique. Au total, 39 rats Lewis adultes ont été inclus. Immédiatement après l’euthanasie, la racine pulmonaire a été prélevée sur un animal donneur (n = 17). Les rats receveurs syngéniques (n = 17) et opérés par simulacre (n = 5) ont été sédatifs et ventilés. Dans le groupe receveur, le PAG a été implanté avec une anastomose de bout en bout en position aortique abdominale infra-rénale. Les rats opérés par simulacre n’ont subi que la transsection et la réanastomose de l’aorte. Les animaux ont été suivis par des études échographiques en série pendant deux mois et une analyse histologique post-mortem. Le diamètre médian du PAG en position native était de 3,20 mm (IQR = 3,18-3,23). Au suivi, le diamètre médian du PAG était de 4,03 mm (IQR = 3,74-4,13) à 1 semaine, de 4,07 mm (IQR = 3,80-4,28) à 1 mois et de 4,27 mm (IQR = 3,90-4,35) à 2 mois (p<0,01). La vitesse systolique maximale était de 220,07 mm/s (IQR = 210,43-246,41) à 1 semaine, de 430,88 mm/s (IQR = 375,28-495,56) à 1 mois et de 373,68 mm/s (IQR = 305,78-429,81) à 2 mois (p = 0,02) et ne différait pas du groupe simulé à la fin de l’expérience (p = 0,5). L’analyse histologique n’a montré aucun signe de thrombose endothéliale. Cette étude a montré que les modèles de rongeurs peuvent permettre d’évaluer l’adaptation à long terme de la racine pulmonaire à un système à haute pression. Une implantation de PAG syngénique placée de manière systémique représente une plate-forme simple et réalisable pour le développement et l’évaluation de nouvelles techniques chirurgicales et thérapies médicamenteuses afin d’améliorer encore les résultats de l’opération de Ross.

Au total, 39 rats Lewis adultes ont été inclus dans cette étude : 17 animaux ont été utilisés comme donneurs de PAG, 17 animaux comme receveurs et 5 comme faux (groupe témoin) (tableau 1). Les rats mâles étaient 22 (56 %) et femelles 17 (44 %); ces derniers n’ont été utilisés que dans le groupe des donneurs.
Aucun événement mortel ne s’est produit pendant l’opération avec une survie à 100%. Au cours du suivi, deux animaux du groupe transplanté ont eu une...

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A Rodent Model of The Ross Operation: Syngeneic Pulmonary Artery Graft Implantation in A Systemic Position

Nous montrons comment établir un modèle murin d’implantation de racine pulmonaire dans l’aorte descendante pour simuler la procédure de Ross. Ce modèle permet l’évaluation à moyen/long terme du remodelage de l’autogreffe pulmonaire dans une position systémique, représentant la base du développement de stratégies thérapeutiques pour favoriser son adaptation.

Un modèle de rongeur de l’opération de Ross: implantation d’une greffe d’artère pulmonaire syngénique dans une position systémique

The Ross operation for aortic valve disease has regained new interest due to its outstanding long-term results. Nonetheless, when employed as freestanding ...

La sténose aortique congénitale est un sous-groupe de cardiopathie congénitale, caractérisée par une obstruction du tractus ventriculaire gauche dans lequel la lésion est située au niveau valvulaire. Les options disponibles pour la correction d’une sténose aortique congénitale sont nombreuses. Chacun avec ses propres inconvénients.Une option thérapeutique intéressante dans la population pédiatrique est le transfert de l’autographe pulmonaire à la position aortique nommée opération de Ross. Dans ce cas, la valve pulmonaire est alors remplacée par l’homogreffe. L’autographe pulmonaire est caractérisé par un potentiel de croissance et ne comporte pas les risques d’un traitement anticoagulant à vie.Malgré cela, son utilisation reste extrêmement limitée en raison de la dilatation possible de l’autographe pulmonaire et de la régurgitation aortique ultérieure. Dans cette étude, nous avons cherché à établir un modèle rongeur d’implantation de greffe valvulaire pulmonaire dans une position systémique, afin d’évaluer l’adaptation du greffon pulmonaire. Une liste de contrôle de tous les matériaux requis a été effectuée avant chaque opération.Après l’anesthésie par induction, avec 4% de sévoflurane dans un litre par minute d’oxygène, l’animal sous sédation a été placé sur un plateau en liège et son abdomen a été rasé avec un rasoir. La peau a ensuite été stérilisée à l’aide d’une solution d’iode. Afin de protéger l’animal de l’humidité et d’empêcher la dispersion de la chaleur pendant la chirurgie, l’animal a été recouvert d’une pellicule de plastique transparente.Le niveau d’anesthésie a été évalué avant d’effectuer l’incision pubienne de Pfannenstiel en évaluant l’absence de réponse à un stimulus odieux. La péricardiectomie et l’athérectomie ont été réalisées afin d’obtenir une vue complète de l’arc aortique. Les tissus adipeux restants entourant l’aorte ont également été enlevés.Une micro-pince a été insérée sous la paroi postérieure du vaisseau pour isoler l’artère pulmonaire. Pour maximiser le lien avec le greffon, ce dernier a été coupé le plus près possible de sa bifurcation à l’aide de micro ciseaux. L’artère pulmonaire a ensuite été maintenue doucement avec une micro-pince à pointe annulaire et séparée de la ventriculaire droite à l’aide des ciseaux à micro-ressort.La greffe pulmonaire a donc été récoltée incluant un peu de muscle ventriculaire droit. L’artère pulmonaire est placée sur une gaze humidifiée avec une solution saline froide sur la table d’opération et la racine pulmonaire a été inspectée au microscope opératoire. Toute abondance de tissus environnants a été coupée.Il ne restait qu’un millimètre de muscle ventriculaire alors que le lien avec le vaisseau était fixé à cinq millimètres. Une incision abdominale longitudinale médiane a été pratiquée et deux mini-rétracteurs ont été utilisés pour maintenir l’abdomen ouvert. Les intestins ont été extraits, permettant la visualisation et l’exposition de l’aorte abdominale infrarénale.Une suture de soie 2-0 a été utilisée pour créer une boucle autour de l’aorte abdominale afin de soulever le vaisseau et de séparer l’aorte abdominale de la veine cave inférieure. Deux clips Yasargil ont été utilisés pour serrer l’aorte abdominale infrarénale et placés à une distance de 1,5 centimètre l’un de l’autre. L’aorte abdominale a été transectée au milieu entre les deux clips.L’artère pulmonaire a été placée entre les deux extrémités de l’extrémité ventriculaire vers la partie crânienne de l’animal. Une suture de prolène 10-0 a été utilisée pour effectuer deux points de suture uniques marquants reliant l’artère pulmonaire à l’aorte abdominale. Ces sutures ont été placées sur les côtés opposés de la circonférence du vaisseau proximal.La même procédure a été effectuée à l’extrémité distale du greffon. Une anastomose de bout en bout entre l’artère pulmonaire et l’aorte abdominale a ensuite été réalisée en commençant par l’extrémité distale. L’extrémité située plus distalement au chirurgien a été utilisée pour l’anastomose postérieure, en utilisant le receveur pour greffer une séquence d’entrée et d’entrée afin de créer une suture courante d’environ six points de suture.Une fois que la suture a atteint le repère proximal, un double demi-point complété par la fabrication d’un nœud carré à l’aide de la suture et de l’une des deux extrémités de la suture proximale. Des moustiques protégés ont ensuite été appliqués sur les sutures pour assurer la traction. La même anastomose a été réalisée sur la paroi antérieure.Toute la procédure a ensuite été effectuée à l’extrémité proximale de l’artère pulmonaire et une attention particulière a été portée afin d’éviter d’inclure une foliole dans la ligne de suture. Le clip distal a été libéré en premier pour laisser la greffe pulmonaire se remplir de sang rétrograde, c’est-à-dire un flux de basse pression afin de vérifier l’anastomose. Une fois l’anastomose distale évaluée, la même procédure a été effectuée à l’extrémité proximale.À la fin de l’opération, le rat a ensuite été placé sous une lampe chauffante et surveillé visuellement jusqu’au réveil. Au cours du suivi, les animaux ont subi des études échographiques en série à une semaine, un mois et deux mois. Ces études permettent de mesurer le diamètre du vaisseau, les pics de vitesse systolique et la vitesse diastolique terminale.Ces paramètres ont été mesurés à l’intérieur du greffon et au niveau de l’aorte abdominale proximale et distale. Nous avons utilisé un total de 39 rats Lewis adultes. 17 animaux ont été utilisés comme donneurs de greffe pulmonaire, 17 animaux comme receveurs et cinq animaux comme simulacre opérés et considérés comme le groupe témoin.Aucun événement mortel ne s’est produit au moment de l’opération. Nous avons eu deux décès après l’opération avec un taux de survie global de 91% à deux mois. Le poids corporel médian des animaux était un peu plus faible pour le groupe de donneurs par rapport aux receveurs, 328 grammes contre 387 grammes.Nous avons expérimenté à 6% de degrés de poids corporel après une semaine, puis tous les rats ont repris leur poids atteignant une valeur médiane de 397 grammes après deux mois. Le résultat de l’étude a montré une augmentation significative rapide du diamètre du greffon pulmonaire au cours de la première semaine d’implantation, suivie d’un plateau au cours des deux mois suivants. La valeur médiane du greffon pulmonaire en position génétique était de 3,2 millimètres, et elle a augmenté immédiatement à 4,0 centimètres après une semaine et elle s’est maintenue à 4,07 millimètres après un mois et à 4,27 millimètres à deux mois.L’autre résultat a pu démontrer qu’il y avait une diminution rapide et significative de la mesure de la vitesse systolique maximale au niveau du greffon avec écho 2D après une semaine d’implantation, suivie d’une augmentation au cours des deux derniers mois, atteignant la valeur que nous sommes comparable à celle obtenue chez les rats opérés simulés. En considérant l’analyse astrologique du graphique et le moment de l’explantation, nous n’avons vu aucun signe significatif de thrombose endothéliale ou de multi-cification. Ce modèle expérimental d’implantation de projet valvulaire pulmonaire syngénique en position systémique dans un modèle de rongeur révèle sûr, efficace et reproductible.Cela nous a donné la possibilité de caractériser la modification sur l’artère pulmonaire après une exposition à la pression systémique et cela pourrait représenter la base pour comprendre les causes de l’échec de l’autogreffe pulmonaire. La petite taille de l’animal utilisé a simplifié la prise en charge chirurgicale et postopératoire. Cela nous a permis d’obtenir un modèle utile avec des bactéries et des dépenses animales limitées.Conclusion, la présente étude a montré que la place systémique dans le greffon pulmonaire syngénique dans un modèle de rongeur représente la plate-forme simple et physique pour le développement et l’évaluation de nouvelles techniques chirurgicales, telles que le renforcement racinaire et les thérapies médicamenteuses visant à réduire cette dilatation du greffon, peut-être dans le but d’améliorer encore les résultats de l’opération de Ross.

Research

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Medicine

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