Name: a rodent model of the ross operation: syngeneic pulmonary artery graft implantation in a systemic position
Uploaded: 2022-04-01T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Rodent Model of The Ross Operation: Syngeneic Pulmonary Artery Graft Implantation in A Systemic Position at JoVE.com

Studien ble finansiert av det integrerte budsjettet for tverretatlig forskning (BIRD) 2019.

Alle prosedyrer er godkjent av University of Padova Animal Care Committee (OPBA, protokollnummer n° 55/2017) og autorisert av det italienske helsedepartementet (Autorisasjon n° 700/2018-PR), i samsvar med EU-direktivet 2010/63/UE og den italienske loven 26/2014 for pleie og bruk av forsøksdyr.
1. Dyrepleie og eksperimentell modell
<ol><li>Forsikre deg om at alle Lewis rotter er hentet fra et enkelt selskap (Tabell over materialer). Vedlikehold rotter i ko...

<ol>
	<li>Botto, L. D., Correa, A., Erickson, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Racial+and+temporal+variations+in+the+prevalence+of+heart+defects.">Racial and temporal variations in the prevalence of heart defects.</a> Pediatrics. 107 (3), 32 (2001).</li><li>Vergnat, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aortic+stenosis+of+the+neonate:+A+single-center+experience.">Aortic stenosis of the neonate: A single-center experience.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 157 (1), 318-326 (2019).</li><li>Hra&#353;ka, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+long-term+outcome+of+open+valvotomy+for+critical+aortic+stenosis+in+neonates.">The long-term outcome of open valvotomy for critical aortic stenosis in neonates.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 94 (5), 1519-1526 (2012).</li><li>Kaza, A. K., Pigula, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Are+bioprosthetic+valves+appropriate+for+aortic+valve+replacement+in+young+patients.">Are bioprosthetic valves appropriate for aortic valve replacement in young patients.</a> Seminars in Thoracic and Cardiovascular Surgery: Pediatric Cardiac Surgery Annual. 19 (1), 63-67 (2016).</li><li>Myers, P. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Outcomes+after+mechanical+aortic+valve+replacement+in+children+and+young+adults+with+congenital+heart+disease.">Outcomes after mechanical aortic valve replacement in children and young adults with congenital heart disease.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 157 (1), 329-340 (2019).</li><li>Donald, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ross+operation+in+children:+23-year+experience+from+a+single+institution.">Ross operation in children: 23-year experience from a single institution.</a> The Annals of thoracic surgery. 109 (4), 1251-1259 (2020).</li><li>Khwaja, S., Nigro, J. J., Starnes, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Ross+procedure+is+an+ideal+aortic+valve+replacement+operation+for+the+teen+patient.">The Ross procedure is an ideal aortic valve replacement operation for the teen patient.</a> Seminars in Thoracic and Cardiovascular Surgery: Pediatric Cardiac Surgery Annual. , 173-175 (2005).</li><li>Elkins, R. C., Lane, M. M., McCue, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ross+operation+in+children:+late+results.">Ross operation in children: late results.</a> The Journal of Heart Valve Disease. 10 (6), 736-741 (2001).</li><li>Chambers, J. C., Somerville, J., Stone, S., Ross, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+autograft+procedure+for+aortic+valve+disease:+long-term+results+of+the+pioneer+series.">Pulmonary autograft procedure for aortic valve disease: long-term results of the pioneer series.</a> Circulation. 96 (7), 2206-2214 (1997).</li><li>Mazine, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ross+procedure+in+adults+for+cardiologists+and+cardiac+surgeons:+JACC+state-of-the-art+review.">Ross procedure in adults for cardiologists and cardiac surgeons: JACC state-of-the-art review.</a> Journal of the American College of Cardiology. 72 (22), 2761-2777 (2018).</li><li>Sengupta, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+laboratory+rat:+Relating+its+age+with+humans.">The laboratory rat: Relating its age with humans.</a> International Journal of Preventive Medicine. 4 (6), 624-630 (2013).</li><li>Ashfaq, A., Leeds, H., Shen, I., Muralidaran, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reinforced+ross+operation+and+intermediate+to+long+term+follow+up.">Reinforced ross operation and intermediate to long term follow up.</a> Journal of Thoracic Disease. 12 (3), 1219-1223 (2020).</li><li>Vida, V. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age+is+a+risk+factor+for+maladaptive+changes+of+the+pulmonary+root+in+rats+exposed+to+increased+pressure+loading.">Age is a risk factor for maladaptive changes of the pulmonary root in rats exposed to increased pressure loading.</a> Cardiovascular Pathology: The Official Journal of the Society for Cardiovascular Pathology. 21 (3), 199-205 (2012).</li><li>Nappi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+experimental+model+of+the+Ross+operation:+Development+of+resorbable+reinforcements+for+pulmonary+autografts.">An experimental model of the Ross operation: Development of resorbable reinforcements for pulmonary autografts.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 149 (4), 1134-1142 (2015).</li><li>Vanderveken, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechano-biological+adaptation+of+the+pulmonary+artery+exposed+to+systemic+conditions.">Mechano-biological adaptation of the pulmonary artery exposed to systemic conditions.</a> Scientific Reports. 10 (1), 2724 (2020).</li></ol>

Aortaventilutskifting med autolog lungerot (Ross-operasjon) representerer et attraktivt alternativ for medfødt aortaventilstenosereparasjon på grunn av den gunstige profilen og potensiell vekst av autograft10. Den største begrensningen i denne prosedyren er den potensielle dilatasjonen av den aortaiske neoventilen, som predisponerer for utviklingen av langsiktig oppblåsthet. Muligheten for å karakterisere modifikasjonene på lungearterien etter eksponering for systemisk trykk kan representere...

Medfødt aortaventilstenose er en undergruppe av medfødt hjertesykdom preget av en hindring av venstre ventrikulære kanal der lesjonen ligger på valvulært nivå. Misdannelse påvirker ca. 0,04-0,38 per 1000 levendefødte1.
De tilgjengelige alternativene for korreksjonen er mange, hver med sine egne fordeler og ulemper. For pasienter som er egnet for en biventrikulær korreksjon2, kan tilnærmingen være rettet mot ventilreparasjon (perkutan eller kirurgisk valvulotomi) eller erstatning3. Sistnevnte foretrekkes når aortaventilen anses som usalvasjerbar; De tilgjengelige alternativene er imidlertid begrenset for pediatriske pasienter. Faktisk er bioprosthetiske ventiler ikke indikert for aorta erstatning i den unge befolkningen på grunn av deres tidlige forkalkning4. På den annen side er degenerasjon i mekaniske ventiler betydelig langsommere, men disse krever livslang antikoagulantbehandling5. I tillegg er den store begrensningen av disse protesene representert av mangelen på vekstpotensial, noe som predisponerer pasientene for ytterligere gjenintervensjoner.
Et interessant terapeutisk alternativ i den pediatriske befolkningen er overføringen av lunge autograft til aortaposisjonen kalt "Ross operasjon". I dette tilfellet erstattes lungeventilen med en homograft (figur 1)6. Denne prosedyren kan muligens representere det beste kirurgiske valget for barn fordi lunge autograften bevarer vekstpotensialet og ikke bærer risikoen for livslang antikoagulantbehandling. Videre kan Ross-prosedyren være av stor verdi også hos unge voksne for å unngå en mekanisk eller biologisk ventil, med potensial til å bli den beste kirurgiske løsningen.
Resultater etter aortaventilutskifting med lunge autograft er utmerket, med overlevelse større enn 98% og gode langsiktige resultater7. Litteraturstudier rapporterer 93% og 90% frihet fra å erstatte lunge homograft på henholdsvis 4 og 12 år, henholdsvis8.
Den største begrensningen i denne prosedyren er tendensen til at autograften utvider seg på lang sikt, spesielt når den brukes som en frittstående roterstatning. Dette kan føre til valvulær inkompetanse som kan kreve en ny intervensjon. Faktisk rapporterer den lengste oppfølgingsstudien som er utført så langt frihet fra reoperering for autograftering på 88% på 10 år og 75% ved 20 år9.
Muligheten for å gjenskape en Ross-operasjon i eksperimentell setting representerer en grunnleggende forutsetning for å undersøke den underliggende mekanismen for lunge autograft tilpasning til systemisk trykk. Flere modeller har blitt foreslått tidligere. Imidlertid er disse vanligvis begrenset til ex-vivo eksperimenter eller in-vivo dyremodeller med relativt dyre store dyr. I denne studien forsøkte vi å etablere en gnagermodell av lungearteriegraft (PAG) implantasjon i en systemisk posisjon, som frittstående rot.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.9% Sodium Chloride</td>
			<td>Monico SpA</td>
			<td>AIC 030805105</td>
			<td>Two bottles of 100 mL. The cold one (4&#176;C) for flushing the harvesting organ; the warm one (39&#176;C) for moistening, and rehydration of the recipient</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>7.5% Povidone-Iodine</td>
			<td>B Braun</td>
			<td>AIC 032151211</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Barraquer</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>FD 232R</td>
			<td>Straight micro needle holder for the vascular anastomoses</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castroviejo needle holder</td>
			<td>Not available</td>
			<td>J 4065</td>
			<td>To close the animal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clip applying forceps</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 3994-05</td>
			<td>For clip application</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical SpA</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Supermarket product. Sterilized</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved micro jeweller forceps</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 4240-06</td>
			<td>Used to pass sutures underneath the vases.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Depilatory cream</td>
			<td>RB healthcare</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Supermarket product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrocautery machine</td>
			<td>LED SpA</td>
			<td>Surton 200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissors</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 2422-11</td>
			<td>For opening the abdomen (recipient)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine-tip curved Vannas micro scissors</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>OC 497R</td>
			<td>Only for preparing the pulmonary root, cut the lumbar vases and the 10/0 Prolene</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluovac Isoflurane/Halotane Scavanger unit</td>
			<td>Harvard Apparatus Ltd</td>
			<td>K 017041</td>
			<td>Complete of anesthesia machine, anesthesia tubing, induction chamber and scavenger unit with absorbable filter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamycin</td>
			<td>MSD Italia Srl</td>
			<td>AIC 020891014</td>
			<td>Antibiotic. Single dose, 5 mg/kg intramuscular, administered during surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>Pharmatex Italia Srl</td>
			<td>AIC 034692044</td>
			<td>500 IU into the recipient abdominal vena cava</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>I.V. Catheter</td>
			<td>Smiths Medical Ltd</td>
			<td>4036</td>
			<td>20G</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin Syringe, 1 mL</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-841-33</td>
			<td>To inject heparin in the harvesting animal and to flush the sectioned aorta in the recipient</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Jeweler bipolar forceps</td>
			<td>GIMA SpA</td>
			<td>30665</td>
			<td>0.25 mm tip. For electrocautery of very small vases</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lewis rats (LEW/HanHsd)</td>
			<td>Envigo RMS SRL, San Pietro al Natisone, Udine, Italy</td>
			<td>86104M</td>
			<td>Male or female, weighing 200-250 g (pulmonary root harvesting animals) and 320-400 g (recipients)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Mosquito</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 3121-10</td>
			<td>In number of four, with tips covered with silicon tubing. To keep in traction the Prolene suture during anastomosis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating microscope</td>
			<td>Leica Microsystems</td>
			<td>M 400-E</td>
			<td>Used with 6x, 10x and 16x in-procedure interchangeable magnifications</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perma-Hand silk 2-0</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical SpA</td>
			<td>C026D</td>
			<td>To lift the aorta</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petrolatum ophthalmic ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>NDC 17033-211-38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolene 10-0</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical SpA</td>
			<td>W2790</td>
			<td>Very fine non-absorbable suture, with a BV75-3 round bodied needle, for the vascular anastomoses</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retractors</td>
			<td>Not any</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Two home-made retractors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ring tip micro forceps</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 4079-14</td>
			<td>For delicate manipulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sevoflurane</td>
			<td>AbbVie Srl</td>
			<td>AIC 031841036</td>
			<td>Mixed with oxygen, for inhalatory anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spring type micro scissors</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 2380-14</td>
			<td>Straight; 14 cm long</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard aneurysm clips</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 3980-12</td>
			<td>Two clips (7.5 mm; 180 g; 1.77 N) to close the aorta</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile gauze of non-woven fabric material</td>
			<td>Luigi Salvadori SpA</td>
			<td>26161V</td>
			<td>7.5x7.5 cm, four layers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Doyen scissors</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU/1428-16</td>
			<td>For use to the donor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight micro jeweller forceps</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 4240-04</td>
			<td>10.5 cm long. Used throughout the anastomosis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes</td>
			<td>Artsana SpA</td>
			<td>N/A</td>
			<td>20 mL (for the harvesting animal) and 5 mL (for the recipient). For saline flushing and dipping</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TiCron 4-0</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>CV-331</td>
			<td>For closing muscles and skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue forceps V. Mueller</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>CH 6950-009</td>
			<td>Used for skin and muscles</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tramadol</td>
			<td>SALF SpA</td>
			<td>AIC 044718029</td>
			<td>Analgesic. Single dose, 5 mg/kg intramuscular</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Virgin silk 8-0</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical SpA</td>
			<td>W818</td>
			<td>For arterial branch ligation</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a rodent model of the ross operation: syngeneic pulmonary artery graft implantation in a systemic position

Ross-operasjonen for aortaventilsykdom har fått ny interesse på grunn av sine fremragende langsiktige resultater. Likevel, når ansatt som frittstående roterstatning, beskrives mulig utvidelse av lunge autograft og påfølgende aortaregurgitasjon. Flere dyremodeller er foreslått. Imidlertid er disse vanligvis begrenset til ex-vivo-modeller eller in-vivo-eksperimenter med relativt dyre store dyremodeller. I denne studien forsøkte vi å etablere en gnagermodell av lungearteriegraft (PAG) implantasjon i en systemisk posisjon. Totalt 39 voksne Lewis rotter ble inkludert. Umiddelbart etter eutanasi ble lungeroten høstet fra et donordyr (n = 17). Syngeneiske mottaker (n=17) og sham-opererte (n=5) rotter ble bedøvet og ventilert. I mottakergruppen ble PAG implantert med en ende-til-ende anastomose i infra-nyre abdominal aorta posisjon. Sham-opererte rotter gjennomgikk bare transeksjon og re-anastomose av aorta. Dyr ble fulgt med serielle ultralydstudier i to måneder og post-mortem histologisk analyse. Median PAG-diameter i opprinnelig posisjon var 3,20 mm (IQR = 3,18-3,23). Ved oppfølging var median diameter på PAG 4,03 mm (IQR = 3,74-4,13) ved 1 uke, 4,07 mm (IQR = 3,80-4,28) ved 1 måned og 4,27 mm (IQR = 3,90-4,35) ved 2 måneder (s<0,01). Høyeste systoliske hastighet var 220,07 mm/s (IQR=210,43-246,41) ved 1 uke, 430,88 mm/s (IQR=375,28-495,56) ved 1 måned, og 373,68 mm/s (IQR=305,78-429,81) ved 2 måneder (p = 0,02) og var ikke forskjellig fra den sham-opererte gruppen på slutten av eksperimentet (p = 0,5). Histologisk analyse viste ingen tegn på endoteltrombose. Denne studien viste at gnagermodeller kan tillate evaluering av den langsiktige tilpasningen av lungeroten til et høytrykkssystem. En systemisk plassert syngeneisk PAG-implantasjon representerer en enkel og gjennomførbar plattform for utvikling og evaluering av nye kirurgiske teknikker og legemiddelbehandlinger for å forbedre resultatene av Ross-operasjonen ytterligere.

Totalt 39 voksne Lewis-rotter ble inkludert i denne studien: 17 dyr ble brukt som PAG-donorer, 17 dyr som mottakere og 5 som sham-opererte (kontrollgruppe) (tabell 1). Hannrotter var 22 (56 %) og kvinner 17 (44 %); sistnevnte ble bare brukt i givergruppen.
Ingen dødelig hendelse skjedde under operasjonen med 100% overlevelse. Under oppfølgingen hadde to dyr i transplantasjonsgruppen et dødelig utfall, henholdsvis 12 og 51 dager; overlevelsesraten ved slutten av studien var ...

Watch this Scientific Journal Video about A Rodent Model of The Ross Operation: Syngeneic Pulmonary Artery Graft Implantation in A Systemic Position at JoVE.com

A Rodent Model of The Ross Operation: Syngeneic Pulmonary Artery Graft Implantation in A Systemic Position

Vi demonstrerer hvordan man etablerer en murinmodell av lungerotimplantasjon i den synkende aorta for å simulere Ross-prosedyren. Denne modellen muliggjør mellomlang/langsiktig evaluering av pulmonal autograft-ombygging i en systemisk posisjon, som representerer grunnlaget for å utvikle terapeutiske strategier for å fremme tilpasningen.

En gnagermodell av Ross-operasjonen: Syngeneic Pulmonary Artery Graft Implantation i en systemisk posisjon

The Ross operation for aortic valve disease has regained new interest due to its outstanding long-term results. Nonetheless, when employed as freestanding ...

Medfødt aortastenose er en undergruppe av medfødt hjertesykdom, preget av en hindring av venstre ventrikulære kanal der lesjonen ligger på valvulært nivå. Alternativene som er tilgjengelige for korreksjon av en medfødt aortastenose er mange. Hver med sine egne og ulemper.Et interessant terapeutisk alternativ i den pediatriske befolkningen er overføringen av lunge autografen til aortaposisjonen som heter Ross-operasjonen. I dette tilfellet erstattes lungeventilen med homograften. Lunge autografen er preget av vekstpotensial, og bærer ikke risikoen for livslang antikoagulant behandling.Til tross for dette forblir bruken ekstremt begrenset på grunn av mulig dilatasjon av lunge autografen og påfølgende aortaregurgitasjon. I denne studien forsøkte vi å etablere en gnagermodell av lungeventiltransplantasjonsimplantasjon i en systemisk posisjon, for å evaluere tilpasningen av lungetransplantatet. En sjekkliste over alt nødvendig materiale ble utført før hver operasjon.Etter induksjonsbedøvelsen, med 4% sevofluran i en liter per minutt oksygen, ble det bedøvede dyret plassert på en korkbrett og magen ble barbert med en barberhøvel. Huden ble deretter sterilisert ved hjelp av en jodoppløsning. For å beskytte dyret mot å bli våt og for å forhindre varmespredning under operasjonen, ble dyret dekket med en gjennomsiktig plastfolie.Nivået av anestesi ble evaluert før du utførte Pfannenstiel pubic snitt ved å vurdere fraværet av respons på motbydelig stimulans. Pericardiectomy og atherectomy ble utført for å få en fullstendig utsikt over aortabuen. De resterende fettvevene rundt aorta ble også fjernet.En mikro tang ble satt inn under bakre vegg av fartøyet for å isolere lungearterien. For å maksimere lenken til transplantatet ble sistnevnte kuttet så nært som mulig til bifurkasjonen ved hjelp av mikrosaks. Lungearterien ble deretter forsiktig holdt med en ringspissede mikro tang, og skilt fra høyre ventrikkel ved hjelp av mikrofjærsaksen.Lungetransplantatet ble derfor høstet, inkludert noen høyre ventrikulære muskler. Lungearterien er plassert på en gasbind fuktet med kald saltvann på operasjonsbordet og lungeroten ble inspisert under operasjonsmikroskopet. Enhver overflod rundt vevet ble avskåret.Bare en millimeter ventrikkelmuskel var igjen mens koblingen til fartøyet ble satt til fem millimeter. En median langsgående abdominal snitt ble utført og to mini retractors ble brukt til å holde magen åpen. Tarmene ble ekstrahert, slik at visualisering og eksponering av den infrarenale abdominal aorta.En 2-0 silke sutur ble brukt til å lage en løkke rundt abdominal aorta for å løfte fartøyet og skille abdominal aorta fra dårligere vena cava. To Yasargil klips ble brukt til å klemme den infrarenale abdominal aorta og plassert i en avstand på 1,5 centimeter fra hverandre. Abdominal aorta ble transektert midtpunktet mellom de to klippene.Lungearterien ble plassert mellom de to endene i ventrikkelenden mot kranialdelen av dyret. En 10-0 Prolene sutur ble brukt til å utføre to landemerke enkelt masker som forbinder lungearterien til abdominal aorta. Disse suturene ble plassert på motsatte sider av den proksimale karomkretsen.Den samme prosedyren ble utført på den distale enden av transplantatet. En ende til slutt anastomose mellom lungearterie og abdominal aorta ble deretter utført begynner med den distale enden. Enden som ligger mer distalt til kirurgen ble brukt til bakre anastomose, ved hjelp av mottakeren til å transplantere out-in, in-out sekvens for å skape en løpende sutur på omtrent seks masker.Når suturen nådde det proksimale landemerket, fullførte en dobbel halv sting ved å lage en firkantet knute ved hjelp av suturen og en av de to endene av den proksimale landemerke-suturen. Beskyttede mygg ble deretter påført suturene for å gi trekkraft. Den samme anastomose ble utført på den fremre veggen.Hele prosedyren ble deretter utført på den proksimale enden av lungearterien, og spesiell oppmerksomhet ble tatt for å unngå å inkludere brosjyrer i suturlinjen. Det distale klippet ble utgitt først for å la lungetransplantatet fylles opp med retrograd blod, det er en lavtrykksstrøm for å sjekke anastomose. Når den distale anastomose ble evaluert, ble den samme prosedyren utført i den proksimale enden.På slutten av operasjonen ble rotten deretter plassert under en varmelampe og visuelt overvåket til våken. Under oppfølgingen gjennomgikk dyrene serielle ultralydstudier på en uke, en måned og to måneder. Disse studiene tillater måling av kardiameter, topper systolisk hastighet og end-diastolisk hastighet.Disse parametrene ble målt inne i transplantatet og på nivået av proksimal og distal abdominal aorta. Vi brukte totalt 39 voksne Lewis rotter. 17 dyr ble brukt som lungetransplantasjonsdonorer, 17 dyr som mottakere, og fem dyr som skam opererte og betraktet som kontrollgruppen.Det oppstod ingen uopprettelig hendelse på operasjonstidspunktet. Vi hadde to dødsfall etter operasjonen med en total overlevelsesrate på 91% på to måneder. Median kroppsvekt av dyrene var litt lavere for donorgruppen sammenlignet med mottakerne, 328 gram mot 387 gram.Vi har eksperimentert med 6% grader i kroppsvekt etter en uke, og deretter gjenvunnet alle rotter sin vekt og nådde en medianverdi på 397 gram etter to måneder. Resultatet av studien viste en rask signifikant økning av lungegraftdiameteren i løpet av den første uken av implantasjon etterfulgt av et platå i løpet av de neste to månedene. Medianverdien av lungetransplantatet i genetisk posisjon var 3,2 millimeter, og den økte umiddelbart til 4,0 centimeter etter en uke, og den opprettholdt seg til 4,07 millimeter etter en måned og 4,27 millimeter på to måneder.Det andre resultatet var i stand til å demonstrere at det var en rask betydelig reduksjon i topp systolisk hastighetsmål på graftnivå med 2D-ekko etter en uke med implantasjon, etterfulgt av en økning i løpet av de siste to månedene, og nådde verdien som vi er sammenlignbare med den som er oppnådd i sham opererte rotter. Når vi vurderte den astrologiske analysen av grafen og tidspunktet for utvisning, så vi ingen signifikant tegn på endotheliatrombose eller multi-cification. Denne eksperimentelle modellen av syngeneisk lungeventilutkastimplantasjon i systemisk posisjon i en gnagermodell avslører sikker, effektiv og reproduserbar.Det ga oss muligheten til å karakterisere modifikasjonen på lungearterien etter eksponering for systemisk trykk, og dette kan representere grunnlaget for å forstå årsakene til lunge autograftsvikt. Den lille størrelsen på dyret som brukes forenklet kirurgisk og postoperativ ledelse. Dette tillot oss å skaffe en nyttig modell med begrensede bakterier og dyreutgifter.Konklusjonen, den nåværende studien viste at den systemisk plassere i syngeneic lunge graft i en gnager modell representerer den enkle og fysiske plattformen for utvikling og evaluering av nye kirurgiske teknikker, som rotforsterkning og narkotika terapier som tar sikte på å redusere denne dilatasjon av graft, kanskje med sikte på å ytterligere forbedre resultatene av Ross-operasjonen.

Research

JoVE Journal

Medicine

Training a Sophisticated Microsurgical Technique: Interposition of External Jugular Vein Graft in the Common Carotid Artery in Rats

Trene en sofistikert mikrokirurgisk teknikk: interposition av ekstern halsvene Graft i Common carotisar i rotter

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in ...

A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis

En murine modell av stent i halspulsåren for studier av Restenosis

Despite  the considerable progress made in the stent development in the last decades,  cardiovascular diseases remain the main cause of death in western ...

Implantation of Inferior Vena Cava Interposition Graft in Mouse Model

Implantasjon av vena cava inferior inter Graft i Mouse Model

Biodegradable scaffolds seeded with bone marrow mononuclear cells (BMCs) are often used for reconstructive surgery to treat congenital cardiac anomalies. ...

Murine Model of Femoral Artery Wire Injury with Implantation of a Perivascular Drug Delivery Patch

Murine Modell av lårarteriens Wire Injury med Implantasjon av en perivaskulære Drug Delivery Patch

Percutaneous interventions including balloon angioplasty and stenting have been used to restore blood flow in vessels with occlusive vascular disease. ...

A "Patient-Like" Orthotopic Syngeneic Mouse Model of Hepatocellular Carcinoma Metastasis

En &quot;Patient-Like&quot; ortotopiske syngeniske musemodell for leverkreft metastaser

The majority of cancer-related deaths are caused by the metastasis of the cancer rather than the primary tumor itself. Yet, the underlying mechanisms of ...

Orthotopic Implantation and Peripheral Immune Cell Monitoring in the II-45 Syngeneic Rat Mesothelioma Model

Orthotopic Implantasjon og Peripheral Immune Cell Monitoring i II-45 syngeniske Rat Mesothelioma Model

The enormous upsurge of interest in immune-based treatments for cancer such as vaccines and immune checkpoint inhibitors, and increased understanding of ...

Murine Echocardiography of Left Atrium, Aorta, and Pulmonary Artery

Murine Ekkokardiografi av Venstre Atrium, aorta, og lungearterien

The present methodology teaches the investigator how to measure and use the LAV as a surrogate of chronic elevations in Left Ventricular diastolic ...

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery (ALCAPA)

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery ALCAPA

Direkte Re-implantasjon av Venstre koronar inn i aorta hos voksne med Anomalous opprinnelse Venstre koronar fra lungearterien (ALCAPA)

Anomalous origin of the left coronary artery from the pulmonary artery (ALCAPA) is a rare congenital anomaly which is one of leading causes of myocardial ...

Invasive Hemodynamic Monitoring of Aortic and Pulmonary Artery Hemodynamics in a Large Animal Model of ARDS

Invasiv Hemodynamic overvåking av aorta og pulmonal arterien Hemodynamics i en stor dyr modell av ARDS

One of the leading causes of morbidity and mortality in patients with heart failure is right ventricular (RV) dysfunction, especially if it is due to ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Isometrisk Contractility måling av musen hvem arterien bruker Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...