Name: a rodent model of the ross operation: syngeneic pulmonary artery graft implantation in a systemic position
Uploaded: 2022-04-01T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Rodent Model of The Ross Operation: Syngeneic Pulmonary Artery Graft Implantation in A Systemic Position at JoVE.com

Studien finansierades genom den integrerade budgeten för interdelmental forskning (BIRD) 2019.

Alla förfaranden har godkänts av universitetet i Padova Animal Care Committee (OPBA, protokollnummer n° 55/2017) och godkänts av det italienska hälsoministeriet (tillstånd nr 700/2018-PR), i enlighet med EU:s direktiv 2010/63/UE och den italienska lagen 26/2014 för vård och användning av laboratoriedjur.
1. Djurvård och experimentell modell
<ol><li>Se till att alla Lewis råttor erhålls från ett enda företag (materialtabell). Håll råttorna i k...

<ol>
	<li>Botto, L. D., Correa, A., Erickson, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Racial+and+temporal+variations+in+the+prevalence+of+heart+defects.">Racial and temporal variations in the prevalence of heart defects.</a> Pediatrics. 107 (3), 32 (2001).</li><li>Vergnat, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aortic+stenosis+of+the+neonate:+A+single-center+experience.">Aortic stenosis of the neonate: A single-center experience.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 157 (1), 318-326 (2019).</li><li>Hra&#353;ka, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+long-term+outcome+of+open+valvotomy+for+critical+aortic+stenosis+in+neonates.">The long-term outcome of open valvotomy for critical aortic stenosis in neonates.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 94 (5), 1519-1526 (2012).</li><li>Kaza, A. K., Pigula, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Are+bioprosthetic+valves+appropriate+for+aortic+valve+replacement+in+young+patients.">Are bioprosthetic valves appropriate for aortic valve replacement in young patients.</a> Seminars in Thoracic and Cardiovascular Surgery: Pediatric Cardiac Surgery Annual. 19 (1), 63-67 (2016).</li><li>Myers, P. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Outcomes+after+mechanical+aortic+valve+replacement+in+children+and+young+adults+with+congenital+heart+disease.">Outcomes after mechanical aortic valve replacement in children and young adults with congenital heart disease.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 157 (1), 329-340 (2019).</li><li>Donald, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ross+operation+in+children:+23-year+experience+from+a+single+institution.">Ross operation in children: 23-year experience from a single institution.</a> The Annals of thoracic surgery. 109 (4), 1251-1259 (2020).</li><li>Khwaja, S., Nigro, J. J., Starnes, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Ross+procedure+is+an+ideal+aortic+valve+replacement+operation+for+the+teen+patient.">The Ross procedure is an ideal aortic valve replacement operation for the teen patient.</a> Seminars in Thoracic and Cardiovascular Surgery: Pediatric Cardiac Surgery Annual. , 173-175 (2005).</li><li>Elkins, R. C., Lane, M. M., McCue, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ross+operation+in+children:+late+results.">Ross operation in children: late results.</a> The Journal of Heart Valve Disease. 10 (6), 736-741 (2001).</li><li>Chambers, J. C., Somerville, J., Stone, S., Ross, D. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+autograft+procedure+for+aortic+valve+disease:+long-term+results+of+the+pioneer+series.">Pulmonary autograft procedure for aortic valve disease: long-term results of the pioneer series.</a> Circulation. 96 (7), 2206-2214 (1997).</li><li>Mazine, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ross+procedure+in+adults+for+cardiologists+and+cardiac+surgeons:+JACC+state-of-the-art+review.">Ross procedure in adults for cardiologists and cardiac surgeons: JACC state-of-the-art review.</a> Journal of the American College of Cardiology. 72 (22), 2761-2777 (2018).</li><li>Sengupta, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+laboratory+rat:+Relating+its+age+with+humans.">The laboratory rat: Relating its age with humans.</a> International Journal of Preventive Medicine. 4 (6), 624-630 (2013).</li><li>Ashfaq, A., Leeds, H., Shen, I., Muralidaran, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reinforced+ross+operation+and+intermediate+to+long+term+follow+up.">Reinforced ross operation and intermediate to long term follow up.</a> Journal of Thoracic Disease. 12 (3), 1219-1223 (2020).</li><li>Vida, V. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age+is+a+risk+factor+for+maladaptive+changes+of+the+pulmonary+root+in+rats+exposed+to+increased+pressure+loading.">Age is a risk factor for maladaptive changes of the pulmonary root in rats exposed to increased pressure loading.</a> Cardiovascular Pathology: The Official Journal of the Society for Cardiovascular Pathology. 21 (3), 199-205 (2012).</li><li>Nappi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+experimental+model+of+the+Ross+operation:+Development+of+resorbable+reinforcements+for+pulmonary+autografts.">An experimental model of the Ross operation: Development of resorbable reinforcements for pulmonary autografts.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 149 (4), 1134-1142 (2015).</li><li>Vanderveken, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechano-biological+adaptation+of+the+pulmonary+artery+exposed+to+systemic+conditions.">Mechano-biological adaptation of the pulmonary artery exposed to systemic conditions.</a> Scientific Reports. 10 (1), 2724 (2020).</li></ol>

Aorta ventil ersätter med autologa pulmonell rot (Ross operation) representerar ett attraktivt alternativ för medfödda aorta ventil stenos reparation på grund av den gynnsamma profilen och potentiella tillväxten av autograft10. Den största begränsningen till detta förfarande är den potentiella dilateringen av den aorta neo-valve, som predisponerar för utvecklingen av långsiktiga uppstötning. Möjligheten att karakterisera modifieringar på pulmonell gatan efter exponering för systemis...

Medfödda aorta valve stenos är en undergrupp av medfödda hjärtsjukdomar som kännetecknas av en obstruktion av det vänstra ventrikulärt systemet där lesion ligger på valvular nivå. Missbildningen påverkar cirka 0,04-0,38 per 1000 levande födda1.
De tillgängliga alternativen för korrigeringen är många, var och en med sina egna fördelar och nackdelar. För patienter som är lämpliga för en biventrikulär korrigering2 kan tillvägagångssättet syfta till ventilreparation (perkutan eller kirurgisk valvulotomy) eller dess ersättning3. Den senare föredras när aortaventilen anses vara oanningsbar; De tillgängliga alternativen är dock begränsade för pediatriska patienter. Bioprosthetic ventiler är inte indicerade för aorta ersättning i den unga befolkningen på grund av deras tidiga förkalkning4. Å andra sidan är degenerering i mekaniska ventiler betydligt långsammare, men dessa kräver livslång antikoagulantiabehandling5. Dessutom representeras den stora begränsningen av dessa proteser av bristen på tillväxtpotential, vilket predisponerar patienterna för ytterligare reinterventioner.
Ett intressant terapeutiskt alternativ i pediatrisk befolkning är överföringen av lungauktorympatet till den aorta positionen som heter "Ross operation". I detta fall ersätts lungventilen med ett homograft (figur 1)6. Detta förfarande kan möjligen utgöra det bästa kirurgiska valet för barn eftersom pulmonell autograft bevarar sin tillväxtpotential och inte medför riskerna för livslång antikoagulantia terapi. Dessutom kan Ross-proceduren vara av stort värde även hos unga vuxna för att undvika en mekanisk eller biologisk ventil, med potential att bli den bästa kirurgiska lösningen.
Resultaten efter aorta ventil ersätter med pulmonell autograft är utmärkt, med överlevnad större än 98% och goda långsiktiga resultat7. Litteraturstudier rapporterar 93% och 90% frihet från att ersätta pulmonell homograft vid 4 respektive 12 år, respektive8.
Den största begränsningen av detta förfarande är tendensen hos autograft att vidga på lång sikt, särskilt när det används som en fristående rot ersättning. Detta kan orsaka valvulär inkompetens som kan kräva en omintervention. Faktum är att den längsta uppföljningsstudien som hittills utförts rapporterar frihet från reoperation för autograft ersättning av 88% vid 10 år och 75% vid 20 år9.
Möjligheten att återskapa en Ross operation i en experimentell miljö representerar en grundläggande förutsättning för att undersöka den underliggande mekanismen för pulmonell autograft anpassning till systemiska tryck. Flera modeller har föreslagits tidigare. Dessa är dock vanligtvis begränsade till ex-vivo-experiment eller in vivo-djurmodeller med relativt dyra stora djur. I denna studie försökte vi upprätta en gnagare modell av pulmonell gatan moderplantor (PAG) implantation i en systemisk position, som fristående rot.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.9% Sodium Chloride</td>
			<td>Monico SpA</td>
			<td>AIC 030805105</td>
			<td>Two bottles of 100 mL. The cold one (4&#176;C) for flushing the harvesting organ; the warm one (39&#176;C) for moistening, and rehydration of the recipient</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>7.5% Povidone-Iodine</td>
			<td>B Braun</td>
			<td>AIC 032151211</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Barraquer</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>FD 232R</td>
			<td>Straight micro needle holder for the vascular anastomoses</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Castroviejo needle holder</td>
			<td>Not available</td>
			<td>J 4065</td>
			<td>To close the animal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clip applying forceps</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 3994-05</td>
			<td>For clip application</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical SpA</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Supermarket product. Sterilized</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved micro jeweller forceps</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 4240-06</td>
			<td>Used to pass sutures underneath the vases.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Depilatory cream</td>
			<td>RB healthcare</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Supermarket product</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrocautery machine</td>
			<td>LED SpA</td>
			<td>Surton 200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine scissors</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 2422-11</td>
			<td>For opening the abdomen (recipient)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine-tip curved Vannas micro scissors</td>
			<td>Aesculap</td>
			<td>OC 497R</td>
			<td>Only for preparing the pulmonary root, cut the lumbar vases and the 10/0 Prolene</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluovac Isoflurane/Halotane Scavanger unit</td>
			<td>Harvard Apparatus Ltd</td>
			<td>K 017041</td>
			<td>Complete of anesthesia machine, anesthesia tubing, induction chamber and scavenger unit with absorbable filter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gentamycin</td>
			<td>MSD Italia Srl</td>
			<td>AIC 020891014</td>
			<td>Antibiotic. Single dose, 5 mg/kg intramuscular, administered during surgery</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>Pharmatex Italia Srl</td>
			<td>AIC 034692044</td>
			<td>500 IU into the recipient abdominal vena cava</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>I.V. Catheter</td>
			<td>Smiths Medical Ltd</td>
			<td>4036</td>
			<td>20G</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin Syringe, 1 mL</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-841-33</td>
			<td>To inject heparin in the harvesting animal and to flush the sectioned aorta in the recipient</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Jeweler bipolar forceps</td>
			<td>GIMA SpA</td>
			<td>30665</td>
			<td>0.25 mm tip. For electrocautery of very small vases</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lewis rats (LEW/HanHsd)</td>
			<td>Envigo RMS SRL, San Pietro al Natisone, Udine, Italy</td>
			<td>86104M</td>
			<td>Male or female, weighing 200-250 g (pulmonary root harvesting animals) and 320-400 g (recipients)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-Mosquito</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 3121-10</td>
			<td>In number of four, with tips covered with silicon tubing. To keep in traction the Prolene suture during anastomosis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating microscope</td>
			<td>Leica Microsystems</td>
			<td>M 400-E</td>
			<td>Used with 6x, 10x and 16x in-procedure interchangeable magnifications</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Perma-Hand silk 2-0</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical SpA</td>
			<td>C026D</td>
			<td>To lift the aorta</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Petrolatum ophthalmic ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>NDC 17033-211-38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolene 10-0</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical SpA</td>
			<td>W2790</td>
			<td>Very fine non-absorbable suture, with a BV75-3 round bodied needle, for the vascular anastomoses</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Retractors</td>
			<td>Not any</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Two home-made retractors</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ring tip micro forceps</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 4079-14</td>
			<td>For delicate manipulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sevoflurane</td>
			<td>AbbVie Srl</td>
			<td>AIC 031841036</td>
			<td>Mixed with oxygen, for inhalatory anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spring type micro scissors</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 2380-14</td>
			<td>Straight; 14 cm long</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard aneurysm clips</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 3980-12</td>
			<td>Two clips (7.5 mm; 180 g; 1.77 N) to close the aorta</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile gauze of non-woven fabric material</td>
			<td>Luigi Salvadori SpA</td>
			<td>26161V</td>
			<td>7.5x7.5 cm, four layers</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight Doyen scissors</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU/1428-16</td>
			<td>For use to the donor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight micro jeweller forceps</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU 4240-04</td>
			<td>10.5 cm long. Used throughout the anastomosis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringes</td>
			<td>Artsana SpA</td>
			<td>N/A</td>
			<td>20 mL (for the harvesting animal) and 5 mL (for the recipient). For saline flushing and dipping</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TiCron 4-0</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>CV-331</td>
			<td>For closing muscles and skin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue forceps V. Mueller</td>
			<td>McKesson</td>
			<td>CH 6950-009</td>
			<td>Used for skin and muscles</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tramadol</td>
			<td>SALF SpA</td>
			<td>AIC 044718029</td>
			<td>Analgesic. Single dose, 5 mg/kg intramuscular</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Virgin silk 8-0</td>
			<td>Johnson &#38; Johnson Medical SpA</td>
			<td>W818</td>
			<td>For arterial branch ligation</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a rodent model of the ross operation: syngeneic pulmonary artery graft implantation in a systemic position

Ross operation för aorta ventil sjukdom har återfått nytt intresse på grund av dess enastående långsiktiga resultat. Icke desto mindre, när används som fristående rot ersätter, beskrivs den möjliga dilation av pulmonell autograft och efterföljande aorta uppstötning. Flera djurmodeller har föreslagits. Dessa är dock vanligtvis begränsade till ex-vivo-modeller eller in vivo-experiment med relativt dyra stora djurmodeller. I denna studie försökte vi upprätta en gnagare modell av pulmonell gatan moderplantor (PAG) implantation i en systemisk position. Totalt inkluderades 39 vuxna Lewis råttor. Omedelbart efter dödshjälp skördades lungroten från ett donatordjur (n=17). Syngeneic mottagare (n=17) och sham-operated (n=5) råttor sederades och ventilerades. I den mottagande gruppen implanterades PAG med en end-to-end annastomosis i infra-renal buken kolorektal position. Sham-operated råttor genomgick endast transection och re-anastomosis av aorta. Djur följdes med seriell ultraljud studier i två månader och post-mortem histologiska analys. Medianvärdet för PAG-diameter i den ursprungliga positionen var 3, 20 mm (IQR=3,18-3, 23). Vid uppföljning var mediandiametern för PAG 4, 03 mm (IQR=3, 74-4, 13) vid 1 vecka, 4, 07 mm (IQR=3, 80-4, 28) vid 1 månad och 4, 27 mm (IQR=3, 90-4, 35) vid 2 månader (p<0). Toppsystolisk hastighet var 220,07 mm/s (IQR=210,43-246,41) vid 1 vecka, 430,88 mm/s (IQR=375,28-495,56) vid 1 månad och 373,68 mm/s (IQR=305,78-429,81) vid 2 månader (p=0,02) och skilde sig inte från den skenstyrda gruppen i slutet av experimentet (p=0,02). Histological analys visade inte några tecken på endotel blodpropp. Denna studie visade att gnagare modeller kan möjliggöra utvärdering av den långsiktiga anpassningen av lungroten till ett högtryckssystem. En systemiskt placerad syngenesk PAG implantation representerar en enkel och genomförbar plattform för utveckling och utvärdering av nya kirurgiska tekniker och läkemedelsbehandlingar för att ytterligare förbättra resultaten av Ross operationen.

Totalt 39 vuxna Lewis råttor ingick i denna studie: 17 djur användes som PAG-donatorer, 17 djur som mottagare och 5 som sham-operated (kontrollgrupp) (tabell 1). Hanråttor var 22 (56%) och kvinnliga 17 (44%); de senare användes endast i givargruppen.
Ingen dödlig händelse inträffade under operationen med 100% överlevnad. Under uppföljningen hade två djur i transplantationsgruppen ett dödligt utfall, vid 12 respektive 51 dagar. Överlevnadsgraden i slutet av studien ...

Watch this Scientific Journal Video about A Rodent Model of The Ross Operation: Syngeneic Pulmonary Artery Graft Implantation in A Systemic Position at JoVE.com

A Rodent Model of The Ross Operation: Syngeneic Pulmonary Artery Graft Implantation in A Systemic Position

Vi visar hur man upprättar en murin modell av pulmonell rot implantation i den fallande stora kroppspulsåder för att simulera Ross förfarandet. Denna modell möjliggör en utvärdering på medellång/lång sikt av pulmonell autograft ombyggnad i en systemisk position, som utgör grunden för att utveckla terapeutiska strategier för att främja dess anpassning.

En gnagare modell av Ross operation: Syngeneic lungartär graft implantation i en systemisk position

The Ross operation for aortic valve disease has regained new interest due to its outstanding long-term results. Nonetheless, when employed as freestanding ...

Medfödda aorta stenos är en undergrupp av medfödd hjärtsjukdom, kännetecknas av en obstruktion av det vänstra ventrikulärt systemet där lesion ligger på valvular nivå. De alternativ som finns tillgängliga för korrigering av en medfödd aorta stenos är många. Var och en med sina egna och nackdelar.Ett intressant terapeutiskt alternativ i pediatrisk befolkning är överföringen av lung autografen till den aorta positionen som heter Ross operation. I detta fall ersätts lungventilen med homograftet. Lung autografen kännetecknas av tillväxtpotential och medför inte riskerna för livslång antikoagulantiabehandling.Trots detta är dess användning fortfarande extremt begränsad på grund av den möjliga dilateringen av pulmonell autograf och efterföljande aorta uppstötning. I denna studie försökte vi upprätta en gnagare modell av pulmonell ventil moderplantor implantation i en systemisk position, för att utvärdera anpassningen av pulmonell ympkvist. En checklista över allt material som krävs utfördes före varje operation.Efter induktionsbedövningen, med 4% sevofluran i en liter per minut syre, placerades det sederade djuret på en korkbricka och buken rakades med en rakhyvel. Huden steriliserades sedan med hjälp av en jodlösning. För att skydda djuret från att bli vått och för att förhindra värmespridning under operationen var djuret täckt med en transparent plastfolie.Nivån av anestesi utvärderades innan Pfannenstiel pubic snitt genom att bedöma avsaknaden av svar på avskyvärda stimulans. Pericardiectomy och atherectomy genomfördes för att få en fullständig bild av aorta arch. De återstående fettvävnaderna som omger aortan togs också bort.En micro plier sattes in under bakre väggen i fartyget för att isolera pulmonell gatan. För att maximera länken till transplantatet skars den senare så nära som möjligt till sin bifurcation med hjälp av mikrosax. Lungartären hölls sedan försiktigt med en ring tippad mikro tång och separerades från rätt ventrikulärt med hjälp av mikrofjädersaxen.Pulmonell ympkvist skördades därför inklusive några rätt Ventrikulärt muskel. Lungartären placeras på en gasväv fuktad med kall saltlösning på operationsbordet och lungroten inspekterades under operationsmikroskopet. Allt överflöd kring vävnad var avskuret.Endast en millimeter ventrikulära muskeln lämnades medan länken till fartyget var inställd på fem millimeter. En median längsgående buken snitt utfördes och två mini upprullningsdon användes för att hålla buken öppen. Tarmarna extraherades, så att visualisering och exponering av den infraröda buken stora kroppspulsåder.En 2-0 silke sutur användes för att skapa en slinga runt buken aorta för att lyfta fartyget och separera buken aorta från sämre vena cava. Två Yasargil klipp användes för att klämma den infraröda buken stora kroppspulsåder och placeras på ett avstånd av 1,5 centimeter från varandra. Buken aorta var transected vid mittpunkten mellan de två klippen.Lungartären placerades mellan de två ändarna i ventrikulära änden mot hjärnskålen delen av djuret. En 10-0 Prolene suture användes för att utföra två landmärke enstaka stygn som förbinder pulmonell gatan till buken stora kroppspulsåder. Dessa suturer placerades på motsatta sidor av proximala fartyg omkrets.Samma förfarande utfördes på den distala änden av transplantatet. En slutet till slutet annastomosis mellan pulmonell gatan och buken stora kroppspulsåder utfördes sedan börjar med distala slutet. Slutet ligger mer distally till kirurgen användes för den bakre anastomosis, med hjälp av mottagaren att ympa ut-in, in-out sekvens för att skapa en löpande sutur av cirka sex stygn.När suturen nådde det proximala landmärket avslutades en dubbel halvstygn genom att göra en fyrkantig knut med suturen och en av de två ändarna av den proximala landmärke suturen. Skyddade myggor applicerades sedan på suturerna för att ge dragkraft. Samma annastomosis utfördes på den främre väggen.Hela förfarandet utfördes sedan på den proximala änden av lungartären och särskild uppmärksamhet togs för att undvika att inkludera någon broschyr i suturlinjen. Det distala klippet släpptes först för att låta lungtransplantatet fyllas med bakåtsträvande blod, det vill säga ett lågtrycksflöde för att kontrollera annastomosen. När den distala anestesi anestesi utvärderades, utfördes samma förfarande i proximala slutet.I slutet av operationen placerades råttan sedan under en värmelampa och övervakades visuellt tills den vaknade. Under uppföljningen genomgick djuren seriella ultraljudsstudier på en vecka, en månad och två månader. Dessa studier möjliggör mätning av kärldiameter, toppar systolisk hastighet och end-diastolisk hastighet.Dessa parametrar mättes inuti moderplantorna och på nivån proximal och distala buken aorta. Vi använde totalt 39 vuxna Lewis råttor. 17 djur användes som lungtransplantatdonatorer, 17 djur som mottagare och fem djur som sham opererade och betraktade kontrollgruppen.Ingen allvarlig händelse inträffade vid tidpunkten för operationen. Vi hade två dödsfall efter operationen med en total överlevnadsgrad på 91%på två månader. Djurens medianvikt var något lägre för givargruppen jämfört med mottagarna, 328 gram jämfört med 387 gram.Vi har experimenterat vid 6% grader i kroppsvikt efter en vecka, och sedan återfick alla råttor sin vikt och nådde ett medianvärde på 397 gram efter två månader. Resultatet av studien visade en snabb signifikant ökning av lungtransplantatdiametern under den första veckan av implantationen följt av en platå under de följande två månaderna. Medianvärdet för lungtransplantatet i genetisk position var 3,2 millimeter, och det ökade omedelbart till 4,0 centimeter efter en vecka och det bibehöll till 4,07 millimeter efter en månad och 4,27 millimeter vid två månader.Det andra resultatet kunde visa att det fanns en snabb signifikant minskning av toppsystoliska hastighetsmåttet på transplantatnivå med 2D-eko efter en veckas implantation, följt av en ökning under de senaste två månaderna och nått det värde som vi är jämförbara med det som erhållits hos sham opererade råttor. När vi övervägde den astrologiska analysen av diagrammet och tidpunkten för explantation såg vi inga signifikanta tecken på endoteltrombos eller multicenifikation. Denna experimentella modell av syngeneic pulmonell ventil utkast implantation i systemisk position i en gnagare modell avslöjar säker, effektiv och reproducerbar.Det gav oss möjlighet att karakterisera modifieringen på lungartären efter exponering för systemiskt tryck och detta kan utgöra grunden för att förstå orsakerna till pulmonell autograft misslyckande. Den lilla storleken på djuret som används förenklade kirurgiska och postoperativa förvaltningen. Detta gjorde det möjligt för oss att få en användbar modell med begränsade bakterier och djurkostnader.Slutsats visade den aktuella studien att den systemiskt placera i syngeneska pulmonell ympkvist i en gnagare modell representerar den enkla och fysiska plattformen för utveckling och utvärdering av nya kirurgiska tekniker, såsom rotförstärkning och läkemedelsbehandlingar som syftar till att minska denna dilatation av transplantatet, kanske i syfte att ytterligare förbättra resultaten av Ross operationen.

Research

JoVE Journal

Medicine

Training a Sophisticated Microsurgical Technique: Interposition of External Jugular Vein Graft in the Common Carotid Artery in Rats

Utbildning en sofistikerad mikrokirurgisk teknik: mellanliggande yttre halsvenen Graft i den gemensamma halspulsådern i råttor

Neointimal hyperplasia is one the primary causes of stenosis in arterialized veins that are of great importance in arterial coronary bypass surgery, in ...

A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis

En mus modell av stentimplantation i halspulsådern för studier av restenos

Despite  the considerable progress made in the stent development in the last decades,  cardiovascular diseases remain the main cause of death in western ...

Implantation of Inferior Vena Cava Interposition Graft in Mouse Model

Implantation av nedre hålvenen inter Graft i musmodell

Biodegradable scaffolds seeded with bone marrow mononuclear cells (BMCs) are often used for reconstructive surgery to treat congenital cardiac anomalies. ...

Murine Model of Femoral Artery Wire Injury with Implantation of a Perivascular Drug Delivery Patch

Murina Modell av lårbensartären Wire Skada med Implantation av en perivaskulär Drug Delivery Patch

Percutaneous interventions including balloon angioplasty and stenting have been used to restore blood flow in vessels with occlusive vascular disease. ...

A "Patient-Like" Orthotopic Syngeneic Mouse Model of Hepatocellular Carcinoma Metastasis

En &quot;Patient-Like&quot; Orthotopic syngena musmodell för Hepatocellulär cancer metastas

The majority of cancer-related deaths are caused by the metastasis of the cancer rather than the primary tumor itself. Yet, the underlying mechanisms of ...

Orthotopic Implantation and Peripheral Immune Cell Monitoring in the II-45 Syngeneic Rat Mesothelioma Model

Orthotopic Implantation och perifera immunceller Övervakning av II-45 syngena Rat mesoteliom Modell

The enormous upsurge of interest in immune-based treatments for cancer such as vaccines and immune checkpoint inhibitors, and increased understanding of ...

Murine Echocardiography of Left Atrium, Aorta, and Pulmonary Artery

Murina ekokardiografi av vänster förmak, Aorta, och lungartären

The present methodology teaches the investigator how to measure and use the LAV as a surrogate of chronic elevations in Left Ventricular diastolic ...

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery (ALCAPA)

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery ALCAPA

Direkt Re-implantation av vänstra kransartären in i aorta i Adults med Anomalous ursprung vänstra kransartären från lungartären (ALCAPA)

Anomalous origin of the left coronary artery from the pulmonary artery (ALCAPA) is a rare congenital anomaly which is one of leading causes of myocardial ...

Invasive Hemodynamic Monitoring of Aortic and Pulmonary Artery Hemodynamics in a Large Animal Model of ARDS

Invasiva hemodynamiska övervakning av aorta och Pulmonell artär hemodynamiken i en stor djurmodell av ARDS

One of the leading causes of morbidity and mortality in patients with heart failure is right ventricular (RV) dysfunction, especially if it is due to ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Isometrisk kontraktilitet mätning av mus mesenterica artär med Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...