Name: stimulating and analyzing adult neurogenesis in the drosophila central brain
Uploaded: 2021-10-08T14:30:00
Duration: 6 min 31 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Stimulating and Analyzing Adult Neurogenesis in the Drosophila Central Brain at JoVE.com

हम तकनीकी सहायता के लिए स्टेसी रिमकस और बेकी काटज़ेनबर्गर के आभारी हैं और परमा-ट्विन स्टॉक साझा करने के लिए एडुआर्डो मोरेनो के लिए। हम बैरी Ganetzky और डेविड Wassarman जीवंत चर्चा है कि निस्संदेह विज्ञान और केंट Mok, Cayla Guerra, और बेली Spiegelberg प्रयोगशाला में उनके योगदान के लिए सुधार के लिए धन्यवाद करना चाहते हैं. FasII एंटीबॉडी को कोरी गुडमैन द्वारा विकसित किया गया था और विकासात्मक अध्ययन हाइब्रिडोमा बैंक से प्राप्त किया गया था, जिसे एनआईएच के एनआईसीएचडी द्वारा बनाया गया था और आयोवा विश्वविद्यालय, जीव विज्ञान विभाग, आयोवा सिटी, आईए 52242 में बनाए रखा गया था। इस अध्ययन में उपयोग किए जाने वाले अधिकांश ड्रोसोफिला उपभेदों को ब्लूमिंगटन ड्रोसोफिला स्टॉक सेंटर (BDSC) से प्राप्त किया गया था; एनआईएच P40OD018537)। यह काम NIH T32 GM007133 (KLC) द्वारा समर्थित था; एनआईएच NS090190 (GBF); एनआईएच एनएस 102698 (जीबीएफ); विस्कॉन्सिन ग्रेजुएट स्कूल विश्वविद्यालय (GBF); और UW-मैडिसन महिला विज्ञान और इंजीनियरिंग नेतृत्व संस्थान (WISELI) (GBF) में।

<ol>
	<li>. Report to Congress: Traumatic brain injury in the United States Available from: <a target="_blank" href="https://www.cdc.gov/traumaticbraininjury/pubs/tbi_report_to_congress.html">https://www.cdc.gov/traumaticbraininjury/pubs/tbi_report_to_congress.html</a> (1999)</li><li>. NIEHS Available from: <a target="_blank" href="https://www.nih.gov/research/supported/health/neurodegenerative/index.cfm">https://www.nih.gov/research/supported/health/neurodegenerative/index.cfm</a> (2021)</li><li>Morton, N. V., Wehman, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Psychosocial+and+emotional+sequelae+of+individuals+with+traumatic+brain+injury:+A+literature+review+and+recommendations.">Psychosocial and emotional sequelae of individuals with traumatic brain injury: A literature review and recommendations.</a> Brain Injury. 9 (1), 81-92 (2017).</li><li>Bonini, N. M., Berger, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+sustained+impact+of+model+organisms-in+genetics+and+epigenetics.">The sustained impact of model organisms-in genetics and epigenetics.</a> Genetics. 205, 1-4 (2017).</li><li>Brace, E. J., DiAntonio, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+of+axon+regeneration+in+Drosophila.">Models of axon regeneration in Drosophila.</a> Experimental Neurology. 287, 310-317 (2017).</li><li>Hao, Y., Collins, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrinsic+mechanisms+for+axon+regeneration:+insights+from+injured+axons+in+Drosophila.">Intrinsic mechanisms for axon regeneration: insights from injured axons in Drosophila.</a> Current Opinion in Genetics &amp; Development. 44, 84-91 (2017).</li><li>Chiang, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+reconstruction+of+brain-wide+wiring+networks+in+Drosophila+at+single-cell+resolution.">Three-dimensional reconstruction of brain-wide wiring networks in Drosophila at single-cell resolution.</a> Current Biology. 21 (1), 1-11 (2011).</li><li>Meinertzhagen, I. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+organisation+of+invertebrate+brains:+cells,+synapses+and+circuits.">The organisation of invertebrate brains: cells, synapses and circuits.</a> Acta Zoologica. 91 (1), 64-71 (2010).</li><li>Bellen, H. J., Tong, C., Tsuda, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=100+years+of+Drosophila+research+and+its+impact+on+vertebrate+neuroscience:+A+history+lesson+for+the+future.">100 years of Drosophila research and its impact on vertebrate neuroscience: A history lesson for the future.</a> Nature Reviews Neuroscience. 11 (7), 514-522 (2010).</li><li>Lessing, D., Bonini, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maintaining+the+brain:+insight+into+human+neurodegeneration+from+Drosophila+melanogaster+mutants.">Maintaining the brain: insight into human neurodegeneration from Drosophila melanogaster mutants.</a> Nature Reviews Genetics. 10 (6), 359-370 (2009).</li><li>Boone, J. Q., Doe, C. 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K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inactivation+of+both+Foxo+and+reaper+promotes+long-term+adult+neurogenesis+in+Drosophila.">Inactivation of both Foxo and reaper promotes long-term adult neurogenesis in Drosophila.</a> Current Biology. 20 (7), 643-648 (2010).</li><li>von Trotha, J. W., Egger, B., Brand, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+proliferation+in+the+Drosophila+adult+brain+revealed+by+clonal+analysis+and+bromodeoxyuridine+labelling.">Cell proliferation in the Drosophila adult brain revealed by clonal analysis and bromodeoxyuridine labelling.</a> Neural Development. 4, 9 (2009).</li><li>Fernandez-Hernandez, I., Rhiner, C., Moreno, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adult+neurogenesis+in+Drosophila.">Adult neurogenesis in Drosophila.</a> Cell Reports. 3 (6), 1857-1865 (2013).</li><li>Crocker, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurogenesis+in+the+adult+Drosophila+brain.">Neurogenesis in the adult Drosophila brain.</a> Genetics. , (2021).</li><li>Plavicki, J., Mader, S., Pueschel, E., Peebles, P., Boekhoff-Falk, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Homeobox+gene+distal-less+is+required+for+neuronal+differentiation+and+neurite+outgrowth+in+the+Drosophila+olfactory+system.">Homeobox gene distal-less is required for neuronal differentiation and neurite outgrowth in the Drosophila olfactory system.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 109 (5), 1578-1583 (2012).</li><li>Aso, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neuronal+architecture+of+the+mushroom+body+provides+a+logic+for+associative+learning.">The neuronal architecture of the mushroom body provides a logic for associative learning.</a> Elife. 3, 04577 (2014).</li><li>Ito, K., Awano, W., Suzuki, K., Hiromi, Y., Yamamoto, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Drosophila+mushroom+body+is+a+quadruple+structure+of+clonal+units+each+of+which+contains+a+virtually+identical+set+of+neurones+and+glial+cells.">The Drosophila mushroom body is a quadruple structure of clonal units each of which contains a virtually identical set of neurones and glial cells.</a> Development. 124 (4), 761-771 (1997).</li><li>Tito, A. J., Cheema, S., Jiang, M., Zhang, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+one-step+dissection+protocol+for+whole-mount+preparation+of+adult+Drosophila+brains.">Simple one-step dissection protocol for whole-mount preparation of adult Drosophila brains.</a> Journal of Visualized Experiments. (118), e55128 (2016).</li><li>Kelly, S. M., Elchert, A., Kahl, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissection+and+immunofluorescent+staining+of+mushroom+body+and+photoreceptor+neurons+in+adult+Drosophila+melanogaster+brains.">Dissection and immunofluorescent staining of mushroom body and photoreceptor neurons in adult Drosophila melanogaster brains.</a> Journal of Visualized Experiments. (129), e56174 (2017).</li><li>Arain, U., Valentino, P., Islam, I. M., Erclik, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissection,+immunohistochemistry+and+mounting+of+larval+and+adult+Drosophila+brains+for+optic+lobe+visualization.">Dissection, immunohistochemistry and mounting of larval and adult Drosophila brains for optic lobe visualization.</a> Journal of Visualized Experiments. (170), e61273 (2021).</li></ol>

लेखकों के हितों का कोई टकराव नहीं है।

हालांकि वयस्क ड्रोसोफिला मस्तिष्क को मर्मज्ञ चोटों को पहले 15,17,18 वर्णित किया गया है, ये चोटें ऑप्टिक लोब पर केंद्रित थीं, न कि केंद्रीय मस्तिष्क पर। इसके अलावा, चोटों को पूरा करने के तरीके के लिए विस्तृत निर्देशों की अब तक कमी है। यह प्रोटोकॉल वयस्क ड्रोसोफिला केंद्रीय मस्तिष्क को मर्मज्ञ चोट के लिए एक मॉडल का वर्णन करता है जो पीटीबीआई के बाद वयस्क न्यूरोजेनेसिस के लिए सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण सबूतों को पुन: पेश करता है।
इस PTBI प्रोटोकॉल की reproducibility के कारण, भाग में, चोट लक्ष्य क्षेत्र के रूप में मशरूम शरीर के लिए है। मशरूम शरीर बड़ा है, जिसमें बड़े और अत्यधिक रूढ़िवादी सरणियों में जटिल डेंड्राइट और अक्षतंतु आर्बर्स के साथ ~ 2200 न्यूरॉन्स शामिल हैं। मशरूम बॉडी न्यूरॉन्स के सेल निकाय मस्तिष्क की सतह के पास स्थित होते हैं और हरे फ्लोरोसेंट प्रोटीन (जीएफपी) (चित्रा 1 सी) की अभिव्यक्ति का उपयोग करके सिर छल्ली के माध्यम से कल्पना की जा सकती है। मशरूम शरीर के अग्रदूत विकास के दौरान एपोप्टोसिस से गुजरने के लिए अंतिम तंत्रिका स्टेम कोशिकाएं हैं13,12,19। इस प्रकार, कई मशरूम बॉडी न्यूरॉन्स एक्लोशन के समय बहुत छोटे होते हैं। इसने परिकल्पना को जन्म दिया कि मशरूम शरीर में अन्य मस्तिष्क क्षेत्रों की तुलना में अधिक माइटोटिक क्षमता हो सकती है16। इसके अलावा, मशरूम शरीर सीखने और स्मृति 18 के लिए महत्वपूर्ण है। यह किसी को यह पूछने की अनुमति देता है कि पीटीबीआई-ट्रिगर न्यूरोजेनेसिस कार्यात्मक वसूली की ओर जाता है या नहीं।
परिणामों की पुनरुत्पादकता में योगदान करने वाले अन्य कारकों में लगातार जीनोटाइप की बाहरी मक्खियों का उपयोग करना, हर बार एक ही दिशा में क्रॉस करना, पालन और उम्र बढ़ने के तापमान को ठीक से नियंत्रित करना, और पुरुषों और महिलाओं का अलग-अलग विश्लेषण करना शामिल है। एक आउटक्रॉस से एफ 1 मक्खियों का उपयोग करने से सहज उत्परिवर्तन के लिए मस्तिष्क के होमोजीगस का विश्लेषण करने की संभावना कम हो जाती है। y का मानक क्रॉस [1] w[1]; UAS-mCD8-GFP;; OK107-GAL4 वयस्क मादाओं के लिए y[1] w[1] वयस्क पुरुष मक्खियों के परिणामस्वरूप जीनोटाइप y की F1 संतानों में परिणाम होता है[1] w[1]; UAS-mCD8-GFP/+;; OK107-GAL4/+. OK107-GAL4 मशरूम शरीर के सभी आंतरिक न्यूरॉन्स में व्यक्त किया जाता है और झिल्ली-बाध्य रिपोर्टर UAS-mCD8-GFP की अभिव्यक्ति को मशरूम निकायों और उनके अनुमानों के विज़ुअलाइज़ेशन की अनुमति देता है। परमा-ट्विन क्रॉस के लिए, वंश अनुरेखण प्रणाली को बंद रखने के लिए क्रॉस को हर समय 17 डिग्री सेल्सियस पर रहना चाहिए। यह सुनिश्चित करता है कि विकास के दौरान कोई विभाजित कोशिकाओं को लेबल नहीं किया जाता है और केवल वयस्क-जन्मे न्यूरॉन्स और ग्लिया को लेबल किया जाता है। इस अंत तक, फ्लाई रूम को 17 डिग्री सेल्सियस पर भी बनाए रखा जा सकता है। यद्यपि परमा-ट्विन सिस्टम 15 के प्रारंभिक विवरण ने 18 डिग्री सेल्सियस पर मक्खियों को पालने की सिफारिश की, यह महत्वपूर्ण पृष्ठभूमि लेबलिंग का कारण बन सकता है।
स्थिरता के लिए, CO2 पैड पर नियंत्रण को अनियंत्रित मक्खियों को रखने की भी सिफारिश की जाती है क्योंकि कोई पीटीबीआई को बाहर ले जाता है। यह सुनिश्चित करता है कि मक्खियों के दोनों सेटों में समान संवेदनाहारी एक्सपोजर है। इसके अलावा, पुनरुत्पादन के लिए सिर को पूरी तरह से प्रवेश करना वांछनीय है। हालांकि, पैड के खिलाफ पिन की नोक को मोड़ने के लिए ध्यान नहीं रखा जाना चाहिए, जिससे यह भविष्य की चोटों के लिए अनुपयोगी हो जाता है। कुशल चिकित्सकों के लिए, पीटीबीआई मक्खियों को थोड़ा अनपेक्षित नुकसान होता है। फिर भी, चोट के दौरान मक्खी को स्थिर करने के लिए वक्ष पर बहुत मुश्किल से दबाना घातक हो सकता है। अनपेक्षित चोट की सीमा का आकलन करने का एक तरीका पीटीबीआई मक्खियों की मृत्यु दर को 24 घंटे की चोट के बाद निर्धारित करना है। एकतरफा घायल मक्खियों के लिए, यह शुरुआती लोगों के लिए 50% या उससे अधिक हो सकता है। इसलिए, यह सुनिश्चित करने के लिए कि देखे गए परिणाम पीटीबीआई के कारण हैं और अनपेक्षित चोट के कारण नहीं हैं, यह सलाह दी जाती है कि शुरुआती कई हफ्तों में दैनिक ~ 20 मक्खियों पर पीटीबीआई का प्रशासन करने का अभ्यास करते हैं और परिणामस्वरूप मस्तिष्क का विश्लेषण नहीं करते हैं जब तक कि 24 घंटे की मृत्यु दर लगातार <10% न हो।
केंद्रीय मस्तिष्क PTBI द्वारा प्रेरित प्रसार की मात्रा को मापने के लिए, एंटी-फॉस्फोहिस्टोन H3 (PH3) इम्युनोस्टेनिंग और 5-ethynyl-2'-deoxyuridine (EdU) निगमन दोनों को नियोजित किया जा सकता है। एंटी-पीएच 3 मेटाफ़ेज़ से पहले और पूरे मेटाफ़ेज़ में कोशिकाओं को लेबल करता है, जो सक्रिय रूप से विभाजित कोशिकाओं के केवल एक अंश तक पहचान को सीमित करता है। इस प्रकार, विरोधी PH3 धुंधला प्रसार की केवल एक आंशिक झलक प्रदान करता है। EdU एक थाइमिडिन एनालॉग है जिसे नए संश्लेषित डीएनए में शामिल किया जा सकता है। चोट से पहले और बाद में मक्खियों ईडीयू को खिलाने से, उन कोशिकाओं की अधिक पूर्ण तस्वीर प्राप्त करना संभव है जो या तो विभाजित हो रहे हैं या चोट के बाद विभाजित हो गए हैं। तथ्य यह है कि किसी भी कोशिकाओं को विभाजित करने वाले स्थायी रूप से चिह्नित किए जाते हैं, धीरे-धीरे साइकिल चलाने वाली कोशिकाओं की पहचान के लिए दोनों सहायक होते हैं और प्रारंभिक प्रसार के बाद कोशिकाओं के अस्तित्व को परखते हैं। अस्पष्ट कारणों से, लेकिन शायद रक्त-मस्तिष्क बाधा की सीमित पारगम्यता के कारण, ईडीयू लेबलिंग अक्षम है और वयस्क मस्तिष्क में सेल प्रसार की रिपोर्ट करता है। यह पीएच 3 + और ईडीयू + कोशिकाओं की समान संख्या से स्पष्ट है, दोनों नियंत्रण और प्रयोगात्मक दिमाग में 24 घंटे के बाद पीटीबीआई पर और यह देखकर कि पर्मा-ट्विन क्लोन में नई कोशिकाओं का केवल एक सबसेट EdU16 को शामिल करता है। अधिकतम लेबलिंग के लिए, ईडीयू के साथ मक्खियों को पूर्व-फ़ीड करना आवश्यक है क्योंकि घायल मक्खियां पीटीबीआई के बाद कई घंटों तक खिलाना फिर से शुरू नहीं करती हैं। ईडीयू समाधान में खाद्य रंग जोड़कर और पेट के क्यूटिकल 16 के माध्यम से आंत में डाई की मात्रा की निगरानी करके खिलाने का आकलन किया गया था।
यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि जबकि हमने चरण 4 में मस्तिष्क विच्छेदन प्रोटोकॉल प्रदान किया है, वैकल्पिक तकनीकों का उपयोग किया जा सकता है। इनमें से कई पहले प्रकाशित प्रोटोकॉल 20,21,22 में उपलब्ध हैं। ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर शक्तिशाली आनुवंशिक और आणविक उपकरणों के साथ एक कम लागत वाला मॉडल प्रदान करता है जिसका उपयोग कई ऊतकों के अंतर्निहित उत्थान के तंत्र का अध्ययन करने के लिए किया जा सकता है, जिसमें आंत और तंत्रिका तंत्र के घटक शामिल हैं। एक उपन्यास और पुनरुत्पादक चोट मॉडल जिसका उपयोग मस्तिष्क की चोट की प्रतिक्रिया का अध्ययन करने के लिए किया जा सकता है, यहां उल्लिखित है। इन प्रोटोकॉल का उपयोग करके प्राप्त डेटा इस विचार का समर्थन करता है कि वयस्क ड्रोसोफिला केंद्रीय मस्तिष्क प्रोलिफेरेटिव क्षमता को बरकरार रखता है, चोट के जवाब में नए न्यूरॉन्स उत्पन्न करता है। ये अवलोकन वयस्क न्यूरोजेनेसिस की सीमा और इसके अंतर्निहित आणविक तंत्र दोनों की आगे की जांच की गारंटी देते हैं। एक बार जब तंत्रिका पुनर्जनन में शामिल घटकों को इस प्रणाली में पहचाना जाता है, तो हम वयस्क ड्रोसोफिला न्यूरोजेनेसिस के अपने ज्ञान को मनुष्यों में परिवर्तित कर सकते हैं।

मस्तिष्क और तंत्रिका तंत्र को नुकसान दुनिया भर में मृत्यु और विकलांगता का एक प्रमुख कारण है। लगभग 1.5 मिलियन अमेरिकियों को हर साल दर्दनाक मस्तिष्क की चोटों (टीबीआई) का सामना करना पड़ता है, जबकि अकेले संयुक्त राज्य अमेरिका में अनुमानित 6 मिलियन व्यक्ति पार्किंसंस और अल्जाइमर रोग जैसे न्यूरोडीजेनेरेटिव बीमारियों से पीड़ित हैं। मस्तिष्क को बीमारी और चोट दोनों तंत्रिका अध: पतन का कारण बन सकते हैं, जिससे संवेदी, संज्ञानात्मक और मोटर दोष हो सकते हैं3। मानव मस्तिष्क की मरम्मत के लिए चिकित्सीय रणनीतियों का विकास करना मस्तिष्क के जटिल शरीर विज्ञान के कारण मुश्किल हो गया है। ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर जैसे मॉडल जीव न्यूरोडीजेनेरेशन और संभावित चिकित्सीय लक्ष्यों के अंतर्निहित मौलिक तंत्र की पहचान करने के लिए एक सरल प्रणाली प्रदान करते हैं।
फल मक्खी ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर एक सदी से अधिक समय से एक शक्तिशाली मॉडल जीव रहा है, जो आनुवांशिकी, विकासात्मक जीव विज्ञान और तंत्रिका विज्ञान के क्षेत्रों को आगे बढ़ाता है5,6। ड्रोसोफिला मस्तिष्क में केवल ~ 90,000 न्यूरॉन्स 7 शामिल हैं, जो औसत मानव मस्तिष्क 8 की तुलना में एक मिलियन गुना कम है, फिर भी उनके पास कई समानताएं हैं। मानव और मक्खी दिमाग दोनों न्यूरोट्रांसमीटर गाबा, ग्लूटामेट, एसिटाइलकोलाइन, और बायोजेनिक अमीन्स डोपामाइन और सेरोटोनिन 9 का उपयोग करते हैं। ड्रोसोफिला और मानव न्यूरॉन्स भी एक साझा सिनैप्टिक आर्किटेक्चर और अनुरूप तंत्रिका कोशिका प्रकार 10 के साथ समान रूप से कार्य करते हैं। ड्रोसोफिला के छोटे मस्तिष्क का आकार और उन्नत आनुवांशिकी तकनीकों की उपलब्धता, ड्रोसोफिला और स्तनधारियों के बीच आणविक, सेलुलर और शारीरिक तंत्र के संरक्षण के साथ संयोजन में, ड्रोसोफिला शोधकर्ताओं को ऐसे प्रश्न पूछने की अनुमति देती है जो स्तनधारी मॉडल में अव्यावहारिक या जवाब देने के लिए मुश्किल हैं।
ड्रोसोफिला में वयस्क न्यूरोजेनेसिस की हमारी वर्तमान समझ, होमियोस्टैसिस के दौरान और चोट के बाद दोनों, सीमित रहती है। सामान्य विकास के दौरान न्यूरोजेनेसिस के बारे में अधिक जाना जाता है। उदाहरण के लिए, न्यूरॉन्स और ग्लिया अग्रदूत कोशिकाओं से विकास के दौरान बनाए जाते हैं, जिन्हें न्यूरोब्लास्ट्स 10,11 कहा जाता है। केंद्रीय मस्तिष्क में कम से कम तीन अलग-अलग प्रकार के न्यूरोब्लास्ट्स को प्रतिष्ठित किया गया है। दोनों प्रकार I और प्रकार II वंश neuroblasts सेल चक्र से बाहर निकलें ~ 20-30 ज puparium गठन के बाद 12. इसके विपरीत, मशरूम बॉडी न्यूरोब्लास्ट्स सेल डिवीजन को समाप्त करने के लिए अंतिम हैं और प्यूपेरियम गठन के बाद रीपर-निर्भर एपोप्टोसिस ~ 85-90 एच के माध्यम से ऐसा करते हैं। Eclosion के बाद, वयस्क ड्रोसोफिला मस्तिष्क में कुछ विभाजित कोशिकाएं (~ 1 सेल / मस्तिष्क) होती हैं, मुख्य रूप से ग्लिया 14। वयस्क ऑप्टिक लोब में धीरे-धीरे साइकलिंग न्यूरोब्लास्ट होते हैं जो न्यूरोजेनेसिस 15 में सक्षम होते हैं, जबकि वयस्क केंद्रीय मस्तिष्क में कोई ज्ञात न्यूरोब्लास्ट नहीं होता है। तंत्रिका पूर्वजों की कमी और सीमित कोशिका प्रसार वयस्क स्तनधारी मस्तिष्क में स्थिति से मिलती-जुलती है, जो मनुष्यों के लिए ड्रोसोफिला में वयस्क न्यूरोजेनेसिस के तंत्र की संभावित प्रासंगिकता को रेखांकित करती है।
चोट 15 के बाद वयस्क ड्रोसोफिला ऑप्टिक लोब में वयस्क न्यूरोजेनेसिस के निम्न स्तर की खोज ने इस परिकल्पना को जन्म दिया कि वयस्क ड्रोसोफिला केंद्रीय मस्तिष्क भी वयस्क न्यूरोजेनेसिस 16 में सक्षम हो सकता है। यह प्रोटोकॉल वयस्क ड्रोसोफिला में केंद्रीय मस्तिष्क की चोट का एक कठोर, पुनरुत्पादक मॉडल बनाने का वर्णन करता है जिसका उपयोग वयस्क केंद्रीय मस्तिष्क में न्यूरोजेनेसिस की जांच करने के लिए किया जा सकता है। मानव और ड्रोसोफिला मस्तिष्क वास्तुकला और कार्य के बीच समानताओं को देखते हुए, इन खोजों से घायल और रोगग्रस्त मानव दिमाग में चिकित्सीय न्यूरोजेनेसिस के लिए महत्वपूर्ण लक्ष्यों की पहचान हो सकती है।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>#11 disposable scalpels</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>sc-395923</td>
			<td>used for separating Drosophila heads from trunks prior to brain dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>150 mm diameter black Sylgard dishes</td>
			<td>Dow</td>
			<td>1696157</td>
			<td>made in the laboratory with reagents from Dow; used for brain dissection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>18 mm coverslips</td>
			<td>any</td>
			<td></td>
			<td>for mounting brains on microscope slides</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4&#39;,6-Diamidino-2-Phenylindole, Dihydrochloride (DAPI)</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>D1306</td>
			<td>for immunohistochemistry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% Ethanol</td>
			<td>made from 95% ethanol sourced variously</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-mouse Cy5</td>
			<td>Jackson ImmunoResearch</td>
			<td>715-175-151</td>
			<td>for immunohistochemistry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>anti-rabbit 568</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>A11036</td>
			<td>for immunohistochemistry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>bovine serum albumin (BSA)</td>
			<td>SIgma Aldrich</td>
			<td>A7030</td>
			<td>for immunohistochemisty</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clear nail polish</td>
			<td>any</td>
			<td></td>
			<td>for sealing coverslips</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Click-It EdU labeling kit</td>
			<td>InVitrogen</td>
			<td>C10640</td>
			<td>to detect newly synthesized DNA</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 bubbler</td>
			<td>Genesee Scientific</td>
			<td>59-181</td>
			<td>for anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 pad</td>
			<td>Genesee Scientific</td>
			<td>59-114</td>
			<td>for anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CO2 regulator and supply</td>
			<td>any</td>
			<td></td>
			<td>for anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal microscope</td>
			<td>any</td>
			<td></td>
			<td>for imaging fixed, stained and mounted brains</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cotton plugs</td>
			<td>Genesee Scientific</td>
			<td>51-101</td>
			<td>for EdU labeling</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drosophila vials</td>
			<td>Genesee Scientific</td>
			<td>32-109</td>
			<td>for EdU labeling</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fix buffer (Pipes, EGTA, Magnesium; PEM)</td>
			<td>components sourced from various companies</td>
			<td></td>
			<td>for fixing adult brains; 100 mM piperazine-N,N&#8217;-bis(2-ethanesulfonic acid) [PIPES], 1 mM EGTA, 1 mM MgSO4, pH 7.0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Formaldehyde</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>252549</td>
			<td>for fixing adult brains, added to PEM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Grade 3 round Whatman filters, 23 mm round</td>
			<td>Tisch Scientific</td>
			<td>1003-323</td>
			<td>for EdU labeling</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microfuge tubes</td>
			<td>any</td>
			<td></td>
			<td>for fixing and staining reactions and for storing Minutien pins</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slides</td>
			<td>any</td>
			<td></td>
			<td>for mounting brains</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Minutien pins</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>26002-10</td>
			<td>for brain injury; 12.5 &#956;m diameter tip and 100 &#956;m diameter rod</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mouse anti-Fasiclin II</td>
			<td>Developmental Studies Hybridoma Bank</td>
			<td>1D4-s</td>
			<td>for immunohistochemistry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NIGHTSEA stereo microscope fluorescence adaptor</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>SFA-GR</td>
			<td>fluorescence setup for dissecting microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>P20, P200 and P1000 pipettors and tips</td>
			<td>any</td>
			<td></td>
			<td>for measuring solutions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>phosphate buffered saliine (PBS)</td>
			<td>components sourced from various companies</td>
			<td></td>
			<td>for dissecting brains and making immunohistochemistry blocking and washing solutions; 100 mM of K2HPO4, 140 mM of NaCl, pH 7.0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>phosphate buffered saline with 0.1% Triton X-100 (PT)</td>
			<td>components sourced from various companies</td>
			<td></td>
			<td>for washing dissected brains</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>phosphate buffered saline with 0.1% Triton X-100 + 2% bovine serum albumin (PBT)</td>
			<td>components sourced from various companies</td>
			<td></td>
			<td>blocking solution for immunohistochemistry and for diluting antibodies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rabbit anti-PH3</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology, Inc</td>
			<td>sc-8656-R</td>
			<td>for immunohistochemistry</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reinforcement labels</td>
			<td>Avery</td>
			<td>5721</td>
			<td>to maintain space between the microscope slide and the coverslip</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Size 0 paintbrushes</td>
			<td>any</td>
			<td></td>
			<td>to manipulate and stabilize adult Drosophila during injury</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>93443</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Two pair of #5 watchmakers forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11255-20</td>
			<td>used to hold the Minutien pins and for brain dissections</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vectashield</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td>H-1000</td>
			<td>mounting medium for microscope slides</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

stimulating and analyzing adult neurogenesis in the drosophila central brain

रोग या चोट के जवाब में न्यूरोजेनेसिस अंतर्निहित आणविक और सेलुलर तंत्र को अच्छी तरह से समझा नहीं गया है। हालांकि, इन तंत्रों को समझना तंत्रिका पुनर्योजी उपचार विकसित करने के लिए महत्वपूर्ण है। ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर तंत्रिका विकास के अध्ययन के लिए एक प्रमुख मॉडल है, लेकिन ऐतिहासिक रूप से वयस्क मस्तिष्क पुनर्जनन की जांच करने के लिए शोषण नहीं किया गया है। यह मुख्य रूप से इसलिए है क्योंकि वयस्क मस्तिष्क बहुत कम माइटोटिक गतिविधि प्रदर्शित करता है। फिर भी, वयस्क ड्रोसोफिला केंद्रीय मस्तिष्क के लिए मर्मज्ञ दर्दनाक मस्तिष्क की चोट (पीटीबीआई) नए न्यूरॉन्स और नए ग्लिया की पीढ़ी को ट्रिगर करती है। ड्रोसोफिला में उपलब्ध शक्तिशाली आनुवंशिक उपकरण यहां वर्णित सरल लेकिन कठोर चोट प्रोटोकॉल के साथ संयुक्त रूप से अब वयस्क ड्रोसोफिला मस्तिष्क को तंत्रिका पुनर्जनन अनुसंधान के लिए एक मजबूत मॉडल बनाते हैं। यहां प्रदान किया गया है कि (1) वयस्क केंद्रीय मस्तिष्क को मर्मज्ञ चोटों और (2) विच्छेदन, इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री और इमेजिंग पोस्ट-चोट के लिए विस्तृत निर्देश दिए गए हैं। ये प्रोटोकॉल अत्यधिक पुन: प्रस्तुत करने योग्य परिणाम देते हैं और तंत्रिका पुनर्जनन के अंतर्निहित तंत्र को विच्छेदित करने के लिए अतिरिक्त अध्ययन की सुविधा प्रदान करेंगे।

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Stimulating and Analyzing Adult Neurogenesis in the Drosophila Central Brain

यह लेख वयस्क ड्रोसोफिला को मर्मज्ञ दर्दनाक मस्तिष्क की चोट (पीटीबीआई) देने और परिणामी न्यूरोजेनेसिस की जांच करने के लिए विस्तृत प्रोटोकॉल प्रदान करता है।

उत्तेजक और ड्रोसोफिला केंद्रीय मस्तिष्क में वयस्क न्यूरोजेनेसिस का विश्लेषण

The molecular and cellular mechanisms underlying neurogenesis in response to disease or injury are not well understood. However, understanding these ...

यह प्रोटोकॉल महत्वपूर्ण है क्योंकि यह एक केंद्रीय मस्तिष्क की चोट विधि को प्रदर्शित करता है जो ड्रोसोफिला में वयस्क न्यूरोजेनेसिस को ट्रिगर करता है, जहां आमतौर पर कोई नहीं होता है। हम उम्मीद करते हैं कि वयस्क न्यूरोजेनेसिस अंतर्निहित आणविक तंत्र को समझने के लिए इस तकनीक का उपयोग करना मानव तंत्रिका उत्थान के लिए प्रासंगिक होगा। इस तकनीक को सीखने के लिए धैर्य और दृढ़ता की आवश्यकता होती है।हम विश्लेषण के लिए दिमाग इकट्ठा करने से पहले कई हफ्तों तक दैनिक पांच से 10 दिमागों पर अभ्यास करने की सलाह देते हैं। एक कार्बन डाइऑक्साइड पैड पर मक्खियों anesthetizing के बाद. एक्लोज़न के छह घंटे के भीतर नए eclosed F1 युवा पुरुष मक्खियों को सॉर्ट करें और उन्हें प्रति शीशी 40 या उससे कम मक्खियों के साथ भोजन युक्त साफ शीशियों में रखें।यदि ईडीयू के साथ विभाजित कोशिकाओं को लेबल करने की योजना बना रहे हैं, तो 10% सुक्रोज में 50 मिल या अधिक ईडीयू के 200 माइक्रोलीटर तैयार करें और तैयार समाधान को एक खाली शीशी में 23 मिलीमीटर गोल ग्रेड तीन फिल्टर पेपर पर रखें, फिर चोट से छह घंटे पहले पूर्व-खिलाने के लिए पुरुष मक्खियों को शीशी में रखें। इसके बाद, पांच मिनट के लिए 70% इथेनॉल से भरे 1.5 मिलीलीटर माइक्रो सेंट्रीफ्यूज ट्यूब में लगभग 100 पिन रखकर मिनुटिन पिन को सैनिटाइज करें। फिर 70% इथेनॉल छिड़काव करके और एक साफ लिंट-मुक्त ऊतक के साथ सूखी पोंछकर कार्बन डाइऑक्साइड पैड और पेंटब्रश को सैनिटाइज करें।एक बार जब उपकरण साफ और सूखे हो जाते हैं, तो 40 या उससे कम सॉर्ट किए गए एफ 1 पुरुषों को साफ पैड पर स्थानांतरित करें और उन्हें दो समूहों में अलग करें। एक समूह नियंत्रण uninjured मक्खियों के रूप में काम करेगा। और दूसरे प्रयोगात्मक समूह को मर्मज्ञ दर्दनाक मस्तिष्क की चोट के अधीन किया जाएगा।अगला, संदंश का उपयोग करके माइक्रो सेंट्रीफ्यूज ट्यूब से चार से पांच नए मिनुटिन पिन खींचें और उन्हें कार्बन डाइऑक्साइड पैड के किनारे के पास रखें। फिर विच्छेदन क्षेत्र के तहत एक तेज बिंदु के साथ एक सीधा मिनुटिन पिन चुनें। तेज पिन का पुन: उपयोग करें और सुरक्षित निपटान के लिए 70% इथेनॉल युक्त एक अलग ट्यूब में क्षतिग्रस्त या कुंद पिन रखें।इसके बाद, स्टीरियो माइक्रोस्कोप एलईडी लैंप पर मानक क्रॉस जीनोटाइप स्विच के साथ मक्खियों के लिए हरे प्रतिदीप्ति प्रोटीन के लिए उपयुक्त उत्तेजना और उत्सर्जन फिल्टर से सुसज्जित है जो 440 से 460 नैनोमीटर पर उत्तेजना की अनुमति देता है और 500 से 560 नैनोमीटर पर विज़ुअलाइज़ेशन की अनुमति देता है। फिर प्रयोगात्मक समूह को एक मक्खी चुनें और मक्खी को इस तरह से स्थिति दें कि प्रयोगकर्ता के पास दाईं ओर मक्खियों के सिर के साथ सिर कैप्सूल का पृष्ठीय दृश्य हो। संदंश का उपयोग करके एक हाथ में चयनित मिनुटिन पिन को उठाएं और पकड़ें, और दूसरे हाथ में पेंटब्रश।फिर ब्रश को पृष्ठीय वक्ष के पूर्वकाल पर रखें और मक्खी को स्थिर करने के लिए धीरे से नीचे धकेलें। सिर के दाईं ओर मशरूम निकायों सेल निकायों पर Minutien पिन की नोक का लक्ष्य और सिर कैप्सूल में प्रवेश. यदि स्थलों का उपयोग करके ओसेली और आंख के पृष्ठीय रिम के बीच पृष्ठीय सिर छल्ली को लक्षित करते हैं।चोट को पूरा करने के बाद, पेंटब्रश का उपयोग करें ताकि सिर को धीरे से मिनुटियन पिन से धक्का दिया जा सके। यदि आरएनए अनुक्रमण या क्यूआरटी पीसीआर के लिए मस्तिष्क का उपयोग करना हमें सिर के बाईं ओर दूसरी चोट पहुंचाता है। एक बार जब सभी प्रयोगात्मक मक्खियों को घायल कर दिया जाता है, तो नियंत्रण और घायल मक्खियों को भोजन युक्त अलग-अलग लेबल वाली शीशियों में रखा जाता है।मक्खियों को भोजन में पकड़े जाने से रोकने के लिए शीशियों को क्षैतिज रूप से रखें। मानक क्रॉस मक्खियों को 25 डिग्री सेल्सियस पर रखें और पर्माटविन मक्खियों को उम्र के लिए 30 डिग्री सेल्सियस पर रखें। यदि उम्र बढ़ने की उम्र 24 घंटे से अधिक है, तो हर एक से दो दिनों में साफ भोजन पर मक्खियों को स्थानांतरित करें।प्रसार में एक महत्वपूर्ण वृद्धि 24 घंटे के बाद चोट के बाद एंटी पीएच 3 का उपयोग करके सक्रिय रूप से माइटोसिस से गुजरने वाली कोशिकाओं के लिए एक मार्कर का उपयोग करके देखी गई थी। नियंत्रण केंद्रीय दिमाग में से प्रत्येक में लगभग तीन पीएच 3 सकारात्मक कोशिकाएं देखी जाती हैं। और घायल केंद्रीय दिमाग में से प्रत्येक में 11 पीएच 3 सकारात्मक कोशिकाएं।सात दिनों तक, नियंत्रण सेल दिमाग में से प्रत्येक में दो ईडीयू सकारात्मक कोशिकाओं का औसत मौजूद होता है। और घायल केंद्रीय दिमागों में से प्रत्येक में 11 ईडीयू सकारात्मक कोशिकाएं, जो पीएच 3 एंटीबॉडी के साथ 24 घंटे बाद की चोट के बाद प्राप्त परिणामों के समान हैं। 14 दिनों में नियंत्रण ने प्रति केंद्रीय मस्तिष्क एक ईडीयू सकारात्मक कोशिका का औसत निकाला, और घायल दिमाग ने प्रति केंद्रीय मस्तिष्क में 29 ईडीयू सकारात्मक कोशिकाओं का औसत निकाला।यह प्रदर्शित करते हुए कि कोशिका प्रसार कम से कम दूसरे सप्ताह में एक मर्मज्ञ दर्दनाक मस्तिष्क की चोट के बाद जारी रहता है। केंद्रीय मस्तिष्क में सबसे मजबूत प्रोलिफेरेटिव प्रतिक्रिया तब देखी जाती है जब मस्तिष्क एक्लोशन के बाद पहले 24 घंटों के भीतर घायल हो जाते हैं। सात दिनों तक एक्क्लोज़न के बाद एक मर्मज्ञ चोट अभी भी प्रसार में एक महत्वपूर्ण वृद्धि का कारण बनती है।हालांकि, 14 दिनों तक, विभाजित करने के लिए कोशिकाओं की क्षमता प्रति मस्तिष्क एक विभाजित कोशिका तक काफी कम हो जाती है। जो नियंत्रण मस्तिष्क के समान है। Permatwin लेबलिंग प्रणाली का उपयोग कर अधिक permatwin क्लोन दो दिनों में घायल नमूनों में पाया गया था, दो सप्ताह में, नियंत्रण की तुलना में.चोट के बाद समय के साथ क्लोन की संख्या में वृद्धि के साथ। चोट के दो सप्ताह बाद घायल दिमाग के 50% में नए मशरूम बॉडी न्यूरॉन्स थे। इन नए न्यूरॉन्स ने मशरूम बॉडी कैलिक्स के लिए लगभग अपने डेंड्राइट्स का अनुमान लगाया, और मशरूम बॉडी लोब के लिए अक्षतंतु।मस्तिष्क के अन्य क्षेत्रों जो पुनर्जीवित करने के लिए दिखाई दिए, उनमें अंडाकार शरीर एंटीनेल लोब और पार्श्व सींग शामिल हैं। मस्तिष्क की चोटों को करते समय एक तेज मिनुटिन पिन का उपयोग करना सुनिश्चित करें क्योंकि एक सुस्त या मुड़े हुए पिन का उपयोग मृत्यु दर में वृद्धि करेगा। यह भी सुनिश्चित करें कि पेंट ब्रश के साथ मक्खियों पर बहुत कठिन धक्का न दें क्योंकि इससे मृत्यु दर में भी वृद्धि होगी।इस प्रक्रिया के बाद, इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री का उपयोग आत्म प्रसार को मापने और नए न्यूरॉन्स और ग्लिया की पहचान करने के लिए भी किया जा सकता है।

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Stimulating and Analyzing Adult Neurogenesis in the Drosophila Central Brain

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

Visualization of Proprioceptors in Drosophila Larvae and Pupae

में Proprioceptors का विज़ुअलाइज़ेशन<em&gt; ड्रोसोफिला</em&gt; लार्वा और pupae

Proprioception is the ability to sense the motion, or position, of body parts by responding to stimuli arising within the body. In fruitflies and other ...

Stereotaxic Surgery for Excitotoxic Lesion of Specific Brain Areas in the Adult Rat

वयस्क चूहे में विशिष्ट मस्तिष्क क्षेत्रों की Excitotoxic घाव के लिए stereotaxic सर्जरी

Many behavioral functions in mammals, including rodents and humans, are mediated principally by discrete brain regions. A common method for discerning the ...

Labeling of Single Cells in the Central Nervous System of Drosophila melanogaster

Labeling of Single Cells in the Central Nervous System of Drosophila melanogaster

केन्द्रीय तंत्रिका तंत्र में एकल कक्षों के लेबल<em&gt; ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em

In this  article we describe how to individually label neurons in the embryonic CNS of Drosophila melanogaster by juxtacellular injection of the ...

Functional Interrogation of Adult Hypothalamic Neurogenesis with Focal Radiological Inhibition

फोकल रेडियोलॉजिकल निषेध के साथ वयस्क Hypothalamic Neurogenesis के कार्यात्मक पूछताछ

The functional characterization of adult-born neurons remains a significant challenge. Approaches to inhibit adult neurogenesis via invasive viral ...

Methods for the Modulation and Analysis of NF-&#954;B-dependent Adult Neurogenesis

Methods for the Modulation and Analysis of NF-ÃƒÅ½Ã‚ÂºB-dependent Adult Neurogenesis

NF-κB निर्भर वयस्क neurogenesis के मॉड्यूलेशन और विश्लेषण के लिए तरीके

The hippocampus plays a pivotal role in the formation and consolidation of episodic memories, and in spatial orientation. Historically, the adult ...

In vivo Optogenetic Stimulation of the Rodent Central Nervous System

In vivo Optogenetic Stimulation of the Rodent Central Nervous System

कृंतक केंद्रीय तंत्रिका तंत्र के विवो optogenetic उत्तेजना में

The ability to probe defined neural circuits in awake, freely-moving animals with cell-type specificity, spatial precision, and high temporal resolution ...

Stab Wound Injury of the Zebrafish Adult Telencephalon: A Method to Investigate Vertebrate Brain Neurogenesis and Regeneration

Zebrafish वयस्क telencephalon की चाकू मार चोट: हड्डीवाला मस्तिष्क Neurogenesis और पुनर्जनन जांच के लिए एक विधि

Adult zebrafish have an amazing capacity to regenerate their central nervous system after injury. To investigate the cellular response and the molecular ...

Assessing Primary Neurogenesis in Xenopus Embryos Using Immunostaining

Assessing Primary Neurogenesis in Xenopus Embryos Using Immunostaining

आकलन करने में प्राथमिक Neurogenesis<em&gt; Xenopus</em&gt; भ्रूण का उपयोग Immunostaining

Primary neurogenesis is a dynamic and complex process during embryonic development that sets up the initial layout of the central nervous system. During ...

A Simple One-step Dissection Protocol for Whole-mount Preparation of Adult Drosophila Brains

A Simple One-step Dissection Protocol for Whole-mount Preparation of Adult Drosophila Brains

एक साधारण एक कदम प्रौढ़ की साबुत माउंट तैयारी के लिए विच्छेदन प्रोटोकॉल<em&gt; ड्रोसोफिला</em&gt; दिमाग

There is an increasing interest in using Drosophila to model human brain degenerative diseases, map neuronal circuitries in adult brains, and study the ...

Analyzing Synaptic Modulation of Drosophila melanogaster Photoreceptors after Exposure to Prolonged Light

Analyzing Synaptic Modulation of Drosophila melanogaster Photoreceptors after Exposure to Prolonged Light

के Synaptic मॉड्यूलेशन का विश्लेषण<em&gt; ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em&gt; लंबे समय तक प्रकाश के संपर्क के बाद फोटोरिसेप्टर

The nervous system has the remarkable ability to adapt and respond to various stimuli. This neural adjustment is largely achieved through plasticity at ...