Name: aggravation of myocardial ischemia upon particulate matter exposure in atherosclerosis animal model
Uploaded: 2021-12-10T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Aggravation of Myocardial Ischemia upon Particulate Matter Exposure in Atherosclerosis Animal Model at JoVE.com

Ce modèle a été développé avec le soutien de la Fondation nationale des sciences naturelles de Chine (n° 81673640, 81841001 et 81803814) et du Major National Science and Technology Program of China for Innovative Drug (2017ZX09301012002 et 2017ZX09101002001-001-3).

Toutes les activités animales décrites ici ont été approuvées par le Comité d’éthique animale de l’Institut de matière médicale chinoise de l’Académie chinoise des sciences médicales chinoises. Des souris mâles ApoE−/− (fond C57BL/6) âgées de 6 à 8 semaines ont été utilisées pour l’étude.
1. Préparation expérimentale
<ol><li>Préparer des anesthésiques au tribromoéthanol (15 mg/mL) : dissoudre 0,75 g de tribromoéthanol dans 1 mL...

<ol>
	<li>Al-Kindi, S. G., Brook, R. D., Biswal, S., Rajagopalan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Environmental+determinants+of+cardiovascular+disease:+lessons+learned+from+air+pollution.">Environmental determinants of cardiovascular disease: lessons learned from air pollution.</a> Nature Reviews: Cardiology. 17 (10), 656-672 (2020).</li><li>Ambient (outdoor) Air Pollution. WHO Available from: <a target="_blank" href="https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/ambient-(outdoor)">https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/ambient-(outdoor)</a> (2021)</li><li>Kim, K. H., Kabir, E., Kabir, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+on+the+human+health+impact+of+airborne+particulate+matter.">A review on the human health impact of airborne particulate matter.</a> Environment International. 74, 136-143 (2015).</li><li>Rajagopalan, S., Al-Kindi, S. G., Brook, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Air+pollution+and+cardiovascular+disease:+JACC+State-of-the-Art+Review.">Air pollution and cardiovascular disease: JACC State-of-the-Art Review.</a> Journal of the American College of Cardiology. 72 (17), 2054-2070 (2018).</li><li>Wolf, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Associations+between+short-term+exposure+to+particulate+matter+and+ultrafine+particles+and+myocardial+infarction+in+Augsburg,+Germany.">Associations between short-term exposure to particulate matter and ultrafine particles and myocardial infarction in Augsburg, Germany.</a> International Journal of Hygiene and Environmental Health. 218 (6), 535-542 (2015).</li><li>Sun, Q., Hong, X., Wold, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+effects+of+ambient+particulate+air+pollution+exposure.">Cardiovascular effects of ambient particulate air pollution exposure.</a> Circulation. 121 (25), 2755-2765 (2010).</li><li>Emini Veseli, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+atherosclerosis.">Animal models of atherosclerosis.</a> European Journal of Pharmacology. 816, 3-13 (2017).</li><li>Reichert, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+Left+anterior+descending+(LAD)+coronary+artery+ligation:+An+improved+and+simplified+model+for+myocardial+infarction.">Murine Left anterior descending (LAD) coronary artery ligation: An improved and simplified model for myocardial infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55353 (2017).</li><li>Lei, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+acute+effect+of+diesel+exhaust+particles+and+different+fractions+exposure+on+blood+coagulation+function+in+mice.">The acute effect of diesel exhaust particles and different fractions exposure on blood coagulation function in mice.</a> International Journal of Environmental Research and Public Health. 18 (8), 4136 (2021).</li><li>Gao, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+and+efficient+model+of+coronary+artery+ligation+and+myocardial+infarction+in+the+mouse.">A novel and efficient model of coronary artery ligation and myocardial infarction in the mouse.</a> Circulation Research. 107 (12), 1445-1453 (2010).</li><li>Pei, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LncRNA+PEAMIR+inhibits+apoptosis+and+inflammatory+response+in+PM2.5+exposure+aggravated+myocardial+ischemia/reperfusion+injury+as+a+competing+endogenous+RNA+of+miR-29b-3p.">LncRNA PEAMIR inhibits apoptosis and inflammatory response in PM2.5 exposure aggravated myocardial ischemia/reperfusion injury as a competing endogenous RNA of miR-29b-3p.</a> Nanotoxicology. 14 (5), 638-653 (2020).</li><li>Jia, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PM2.5-induced+pulmonary+inflammation+via+activating+of+the+NLRP3/caspase-1+signaling+pathway.">PM2.5-induced pulmonary inflammation via activating of the NLRP3/caspase-1 signaling pathway.</a> Environmental Toxicology. 36 (3), 298-307 (2021).</li><li>Vogel, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ST-segment+elevation+myocardial+infarction.">ST-segment elevation myocardial infarction.</a> Nature Reviews Disease Primers. 5 (1), 39 (2019).</li><li>Libby, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+changing+landscape+of+atherosclerosis.">The changing landscape of atherosclerosis.</a> Nature. 592 (7855), 524-533 (2021).</li><li>Zhou, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Excessive+neutrophil+extracellular+trap+formation+aggravates+acute+myocardial+infarction+injury+in+Apolipoprotein+E+deficiency+mice+via+the+ROS-dependent+pathway.">Excessive neutrophil extracellular trap formation aggravates acute myocardial infarction injury in Apolipoprotein E deficiency mice via the ROS-dependent pathway.</a> Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2019, 1209307 (2019).</li><li>Pluijmert, N. J., Bart, C. I., Bax, W. H., Quax, P. H. A., Atsma, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+on+cardiac+function,+remodeling+and+inflammation+following+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+or+unreperfused+myocardial+infarction+in+hypercholesterolemic+APOE*3-Leiden+mice.">Effects on cardiac function, remodeling and inflammation following myocardial ischemia-reperfusion injury or unreperfused myocardial infarction in hypercholesterolemic APOE*3-Leiden mice.</a> Scientific Reports. 10 (1), 16601 (2020).</li><li>Centa, M., Ketelhuth, D. F. J., Malin, S., Gistera, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+atherosclerosis+in+mice.">Quantification of atherosclerosis in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (148), e59828 (2019).</li><li>Benedek, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+TTC+staining+for+the+evaluation+of+tissue+injury+in+the+early+phases+of+reperfusion+after+focal+cerebral+ischemia+in+rats.">Use of TTC staining for the evaluation of tissue injury in the early phases of reperfusion after focal cerebral ischemia in rats.</a> Brain Research. 1116 (1), 159-165 (2006).</li><li>Mehlem, A., Hagberg, C. E., Muhl, L., Eriksson, U., Falkevall, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+neutral+lipids+by+oil+red+O+for+analyzing+the+metabolic+status+in+health+and+disease.">Imaging of neutral lipids by oil red O for analyzing the metabolic status in health and disease.</a> Nature Protocols. 8 (6), 1149-1154 (2013).</li><li>Nelson, A. M., Nolan, K. E., Davis, I. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repeated+orotracheal+intubation+in+mice.">Repeated orotracheal intubation in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (157), e60844 (2020).</li><li>Zheng, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exposure+to+fine+airborne+particulate+matters+induces+hepatic+fibrosis+in+murine+models.">Exposure to fine airborne particulate matters induces hepatic fibrosis in murine models.</a> Journal of Hepatology. 63 (6), 1397-1404 (2015).</li><li>Bai, N., van Eeden, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systemic+and+vascular+effects+of+circulating+diesel+exhaust+particulate+matter.">Systemic and vascular effects of circulating diesel exhaust particulate matter.</a> Inhalation Toxicology. 25 (13), 725-734 (2013).</li><li>Furuyama, A., Kanno, S., Kobayashi, T., Hirano, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extrapulmonary+translocation+of+intratracheally+instilled+fine+and+ultrafine+particles+via+direct+and+alveolar+macrophage-associated+routes.">Extrapulmonary translocation of intratracheally instilled fine and ultrafine particles via direct and alveolar macrophage-associated routes.</a> Archives of Toxicology. 83 (5), 429-437 (2009).</li><li>Brunekreef, B., Holgate, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Air+pollution+and+health.">Air pollution and health.</a> Lancet. 360 (9341), 1233-1242 (2002).</li></ol>

L’établissement d’un modèle animal composite est légèrement différent du modèle d’IM unique. Le maintien d’un taux de survie élevé est difficile dans le développement du modèle composite. La gravité de l’athérosclérose chez les souris ApoE−/− deviendra plus sévère avec l’allongement du temps d’alimentation riche en graisses7, et la faiblesse des souris entraîne une mortalité accrue. Par conséquent, il est nécessaire de surveiller continuellement l’...

La pollution atmosphérique a été associée à une mortalité élevée toutes causes confondues et a contribué à une charge de morbidité importante plus que la somme de la pollution de l’eau, de la pollution des sols et de l’exposition professionnelle1. Un rapport de l’OMS a révélé que la pollution de l’air extérieur a causé 4,2 millions de décès prématurés dans les villes et les zones rurales du monde entier en 20162. 91% de la population mondiale vit dans des endroits où la qualité de l’air dépasse les limites recommandées par l’OMS2. En outre, les particules fines (PM) (≤2,5 μm de diamètre, PM2,5) sont reconnues comme la menace la plus importante de pollution atmosphérique pour la santé publique mondiale3, en particulier pour les personnes qui vivent dans les villes des pays à faible revenu et à revenu intermédiaire.
Les effets néfastes de la pollution atmosphérique sur les maladies cardiovasculaires méritent plus d’attention. Des études antérieures ont montré que les particules entraînent un risque accru de maladies cardiovasculaires (MCV)4. L’exposition à de fortes concentrations de particules ultrafines pendant plusieurs heures peut entraîner une augmentation de la mortalité par infarctus du myocarde. Pour les personnes ayant des antécédents d’infarctus du myocarde, l’exposition à des particules ultrafines peut augmenter considérablement le risque de récidive5. De plus, il est généralement admis que l’exposition aux particules accélère la progression de l’athérosclérose6.
Pour la recherche médicale, il est crucial de choisir un modèle animal approprié. Les modèles animaux simples d’athérosclérose 7, l’ischémie myocardique modèles animaux 8 et lesmodèles animauxd’exposition aux particules9 existent déjà. ApoE−/− (apolipoprotéine E assommée) souris est un modèle murin traditionnel utilisé dans les études sur l’athérosclérose. La capacité d’éliminer les lipoprotéines plasmatiques chez les souris ApoE−/− est gravement altérée. L’alimentation riche en graisses provoquerait une athérosclérose sévère, ressemblant à la dépendance alimentaire de la cardiopathie athéroscléreuse observée chez l’homme7. La ligature de l’artère coronaire descendante antérieure gauche (DAL) est une méthode classique pour induire l’événement ischémique 8,10. La perfusion trachéale a été utilisée dans de nombreuses recherches et se distingue des modèles d’exposition11,12 en raison de sa meilleure simulation et de son coût inférieur.
Cependant, les modèles animaux d’une seule maladie ont des limites importantes dans la recherche scientifique. L’ischémie myocardique induite simplement par la ligature LAD n’est pas simulée dans la situation réelle. À l’état naturel, l’ischémie myocardique est généralement causée par la rupture de la plaque et le blocage des artères coronaires13. Les patients atteints de cardiomyopathie ischémique présentent généralement des lésions basiques athéroscléreuses13. Il existe également un métabolisme lipidique anormal et des réactions inflammatoires dans le corps14. Par conséquent, l’ischémie causée par des facteurs physiques ou dans des conditions naturelles a différentes manifestations pathologiques. Des études existantes ont montré que l’infarctus et l’inflammation dans les modèles d’ischémie myocardique avec athérosclérose sont plus graves15,16. L’exposition aux particules peut aggraver davantage l’athérosclérose et l’ischémie myocardique en induisant une inflammation et un stress oxydatif1. Trois facteurs coexistent généralement à l’état naturel, de sorte que la situation réelle pourrait être mieux simulée en utilisant un modèle composé.
Ce protocole décrit le développement d’un modèle animal d’ischémie myocardique (IM) combinant l’athérosclérose (SA) et l’exposition aiguë aux particules. Les souris ApoE−/− ont été nourries avec un régime riche en graisses pour induire l’athérosclérose. L’exposition pulmonaire aux particules a été imitée par une suspension de particules dégoulinante à travers la trachée. La ligature du LAD chez la souris a été utilisée pour induire une ischémie myocardique. Ces méthodes ont été combinées et optimisées pour mieux simuler l’état de la maladie et améliorer le taux de survie des animaux. Aucune grande unité d’exposition ou machine d’anesthésie gazeuse n’est nécessaire, ce qui rend l’expérience facile à réaliser. Ce modèle peut être utilisé pour étudier l’impact de l’exposition aux particules dans la pollution atmosphérique sur l’athérosclérose et la cardiomyopathie ischémique et mener des recherches sur de nouveaux médicaments développés pour traiter des maladies avec des facteurs aussi complexes.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>2,2,2-Tribromoethanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T48402</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>75% alcohol disinfectant</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal ventilator</td>
			<td>Shanghai Alcott Biotech</td>
			<td>ALC-V8S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs for babies</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Sterile , Approximately 3 mm in diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Culture Dish</td>
			<td>Corning</td>
			<td>430597</td>
			<td>150 mm x 25 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diesel Particulate Matter</td>
			<td>National Institute of Standards Technology</td>
			<td>1650b</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissection board</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>About 25 x 17 cm. The dissecting board can be replaced with a wooden board of the same size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High-fat diet for mice</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Prescription: egg yolk powder 10%, lard 10%, sterol 1%, maintenance feed 79%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodophor disinfectant</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LED spotlight</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>5 V, 3 W,with hoses and clamps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical silk yarn ball</td>
			<td>Shanghai Medical Suture Needle Factory Co., Ltd.</td>
			<td>-</td>
			<td>0-0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical tape</td>
			<td>3M</td>
			<td>1527C-0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Vascular Hemostatic Forceps</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>W40350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Holders</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>JC32010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal saline</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic Scissors</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>Y00040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic tweezer, 10cm, curved, with hooks</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>JD1080</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic tweezer, 10cm, curved, with teeth</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>JD1060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipet Tips</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>T-200-Y-R-S</td>
			<td>0-200 &#956;L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette</td>
			<td>eppendorf</td>
			<td>3121000074</td>
			<td>100 uL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safety pin</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Approximately 4.5 cm in length , for making chest opening tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal I.V. Cannulas</td>
			<td>Baayen healthcare suzhou</td>
			<td>BAAN-322025</td>
			<td>I.V CATHETER 22FG x 25 MM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture needle with thread</td>
			<td>Shanghai Medical Suture Needle Factory Co., Ltd.</td>
			<td>-</td>
			<td>6-0,Nylon line</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture needle with thread</td>
			<td>JinHuan Medical</td>
			<td>F503</td>
			<td>5-0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>1 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tert-amyl alcohol</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zoom-stereo microscope</td>
			<td>Mshot</td>
			<td>MZ62</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

aggravation of myocardial ischemia upon particulate matter exposure in atherosclerosis animal model

Les problèmes de santé causés par la pollution de l’air (en particulier la pollution particulaire) attirent de plus en plus l’attention, en particulier chez les patients atteints de maladies cardiovasculaires, ce qui aggrave les troubles compliqués et provoque un mauvais pronostic. Le modèle d’exposition à l’ischémie myocardique simple (IM) ou aux particules (PM) ne convient pas à de telles études de maladies aux causes multiples. Ici, une méthode de construction d’un modèle composite combinant l’exposition aux particules, l’athérosclérose et l’ischémie myocardique a été décrite. Les souris ApoE−/− ont été nourries avec un régime riche en graisses pendant 16 semaines pour développer l’athérosclérose, l’instillation trachéale de suspension standard PM a été effectuée pour simuler l’exposition pulmonaire aux particules et l’artère coronaire descendante antérieure gauche a été ligaturée une semaine après la dernière exposition. L’instillation trachéale de particules peut simuler une exposition pulmonaire aiguë tout en réduisant considérablement le coût de l’expérience; La ligature classique de l’artère descendante antérieure gauche avec intubation trachéale non invasive et un nouveau dispositif d’expansion auxiliaire peuvent assurer le taux de survie de l’animal et réduire la difficulté de l’opération. Ce modèle animal peut raisonnablement simuler les changements pathologiques du patient de l’infarctus du myocarde aggravé par la pollution de l’air et fournir une référence pour la construction de modèles animaux liés à des études impliquant des maladies aux causes multiples.

Les souris ont été euthanasiées 24 heures après la ligature de l’artère coronaire et le sang a été prélevé après l’anesthésie. Les souris ont été anesthésiées au tribromoéthanol (conformément à l’étape 3.2) et l’échantillon de sang a été prélevé dans le sinus rétroorbitaire. Le cœur a été récolté et le degré d’ischémie a été examiné par coloration au chlorure de 2,3,5-triphényltétrazolium (TTC) (figure 1). Les tissus normaux dev...

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Aggravation of Myocardial Ischemia upon Particulate Matter Exposure in Atherosclerosis Animal Model

Ce protocole décrit un modèle animal composite avec exposition à des particules (PM) qui aggrave l’ischémie myocardique avec athérosclérose.

Aggravation de l’ischémie myocardique lors de l’exposition aux particules dans un modèle animal d’athérosclérose

The health problems caused by air pollution (especially particulate pollution) are getting more and more attention, especially among cardiovascular ...

Le protocole ici est pour la construction d’un modèle animal composé de l’ischémie myocardique. Combinaison avec l’athérosclérose et l’exposition aiguë aux particules. Il s’agit d’un modèle animal plus fiable pour la recherche sur les maladies connexes.Ce modèle animal permet de mieux simuler de telles maladies en situation réelle. De plus, cette méthode a un taux de réussite élevé et elle est facile à effectuer. Le modèle peut être utilisé pour la recherche pathologique et le développement de médicaments pour des maladies à facteurs complexes.Ce modèle peut fournir une plate-forme pour la recherche en toxicologie cardiovasculaire et environnementale, et il apporte des idées et des références pour la recherche sur la maladie multifactorielle. L’intubation orotrachéale, l’ouverture fissurée de la poitrine et la position de ligature correcte sont les clés du succès de ce modèle. Il est essentiel de maintenir le briefing de la souris et de prévenir les hémorragies.Commencez par sélectionner deux à trois souris au hasard et vérifiez s’il y a une plaque dans l’arc aortique par imagerie échographique ou par observation anatomique directe. Anesthésiez la souris sélectionnée et placez-la en décubitus dorsal sur la planche de la souris. Accrochez les incisives supérieures à l’élastique.Concentrez un petit projecteur LED avec un tuyau flexible sur la trachée, qui se trouve autour du milieu de la ligne axillaire. Mettez un petit coton-tige stérile dans la bouche de la souris, puis roulez l’écouvillon pour sortir la langue. Tenez la langue et tirez-la doucement vers le haut pour faire la cavité buccale, le pharynx et la trachée dans la même direction longitudinale.La glotte, qui est l’entrée de la trachée, peut être vue comme un point lumineux qui s’ouvre et se ferme à chaque respiration. Insérez un canola de calibre 22 dans la trachée de la souris en visant la glotte, puis retirez le noyau de l’aiguille. Utilisez un pistolet à pipette avec une petite quantité de solution saline normale pour vérifier si le tube est correctement dans la respiration sifflante.Si le tube est à la bonne position, la colonne de liquide dans le pistolet à pipette rebondira à chaque respiration. Déposez 50 microlitres de suspension DPM dans le tube avec un pistolet à pipette. Retirez l’aiguille à demeure de l’animal après une exposition aux particules.Gardez la souris sur le coussin chauffant jusqu’à ce qu’elle reprenne conscience, puis replacez-la dans la cage de la maison. Placez la souris en décubitus dorsal sur la plate-forme d’intubation et fixez la souris. Enlevez les poils de la poitrine gauche et une partie de la poitrine droite adjacente avec une crème dépilatoire.Ensuite, reliez l’aiguille à demeure de l’animal à un ventilateur pour animaux. Essuyez la peau avec de l’iodoforme et de l’alcool pour désinfecter. Faites une coupe de peau d’environ un centimètre à l’aide de ciseaux ophtalmiques et fixez les muscles pour exposer les côtes.Serrez la côte avec une pince ophtalmique avec une dent et faites une petite coupe au troisième espace intercostal. Faites une fenêtre d’opération avec des outils d’ouverture de poitrine faits maison, puis déchirez les membranes péricardiques. Tenez la suture stérile six zéro soie avec une aiguille à l’aide d’une pince hémostatique microvasculaire.Passez la soie à travers une largeur de myocarde de deux millimètres dans la zone où se trouve l’artère coronaire. Placez un petit morceau de soie stérile cinq zéro entre la ligature et les tissus myocardiques pour éviter la rupture des tissus. Attachez étroitement l’artère coronaire descendante antérieure gauche et le petit faisceau du myocarde qui l’entoure.La légation est considérée comme réussie lorsque la paroi antérieure du ventricule gauche devient pâle. Pressez doucement l’air de la poitrine. Ensuite, suturez les muscles intercostaux et la peau séquentiellement avec de la soie stérile cinq zéro.Nettoyez toute la tache de sang après la chirurgie, puis placez la souris sur un coussin chauffant en position couchée latérale. Surveillez continuellement les signes de la souris pendant environ cinq à 20 minutes jusqu’à ce qu’ils se rétablissent de l’anesthésie. Une fois le réflexe de redressement récupéré, transférez la souris dans une cage de récupération propre sur un coussin chauffant avec la bouteille de nourriture et d’eau.Continuez à surveiller pendant 15 à 30 minutes pour assurer la survie de la souris. Enfin, injectez de la pénicilline sodique par voie intramusculaire selon la dose souhaitée pour prévenir l’infection de la plaie. Le degré d’ischémie a été examiné par coloration TTC.Les tissus normaux deviennent rouges lorsque le TTC réagit avec la succinate déshydrogénase. Alors que les tissus ischémiques restent pâles en raison de la diminution de l’activité de la déshydrogénase. Les images représentatives montrent les tissus cardiaques qui n’ont subi aucune chirurgie de l’IM ou de l’exposition aux particules, qui ont subi une chirurgie de l’IM mais aucune exposition aux particules, et qui ont subi une chirurgie de l’IM et une exposition aux particules.L’exposition aux particules a aggravé l’ischémie myocardique. Oil Red O peut colorer avec précision les graisses neutres, telles que les triglycérides dans les tissus. Les taches rouges sur l’image indiquent des plaques.Les plaques dans l’aorte des souris de type sauvage avec un régime alimentaire régulier, des souris knockout APO E avec un régime riche en graisses et des souris knockout APO E avec un régime riche en graisses et souffrant d’exposition aux particules sont montrées ici par coloration O rouge huile. Une alimentation riche en graisses a conduit à l’athérosclérose chez les souris knockout APO E et l’exposition aux particules a aggravé l’athérosclérose. Il est important de s’assurer que le tube endotrachéal est correctement inséré pendant la séromyotomie.L’opérateur doit effectuer l’opération d’intubation rapidement, avec précision et toujours faire attention à l’état respiratoire de l’animal pendant l’opération. Notre méthode aide les chercheurs qui sont préoccupés par l’intersection de la pollution de l’air et des maladies cardiovasculaires. Nous vous donnons ici une idée.Bien entendu, les chercheurs peuvent également effectuer directement des recherches basées sur le modèle animal que nous avons décrit.

Research

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