Name: aggravation of myocardial ischemia upon particulate matter exposure in atherosclerosis animal model
Uploaded: 2021-12-10T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Aggravation of Myocardial Ischemia upon Particulate Matter Exposure in Atherosclerosis Animal Model at JoVE.com

Bu model, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (No. 81673640, 81841001 ve 81803814) ve Çin'in Yenilikçi İlaç için Büyük Ulusal Bilim ve Teknoloji Programı (2017ZX09301012002 ve 2017ZX09101002001-001-3) desteğiyle geliştirilmiştir.

Burada açıklanan tüm hayvan faaliyetleri, Çin Materia Medica, Çin Tıp Bilimleri Akademisi Enstitüsü Hayvan Etiği Komitesi tarafından onaylanmıştır. Çalışma için 6-8 haftalık erkek ApoE-/- fareler (C57BL/6 arka plan) kullanıldı.
1. Deneysel hazırlık
<ol><li>Tribromoetanol anesteziklerini hazırlayın (15 mg / mL): 0.75 g tribromoetanol, 1 mL tert-amil alkol içinde çözün (bkz. Tamamen çözündükten sonra, steril salin ile...

<ol>
	<li>Al-Kindi, S. G., Brook, R. D., Biswal, S., Rajagopalan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Environmental+determinants+of+cardiovascular+disease:+lessons+learned+from+air+pollution.">Environmental determinants of cardiovascular disease: lessons learned from air pollution.</a> Nature Reviews: Cardiology. 17 (10), 656-672 (2020).</li><li>Ambient (outdoor) Air Pollution. WHO Available from: <a target="_blank" href="https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/ambient-(outdoor)">https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/ambient-(outdoor)</a> (2021)</li><li>Kim, K. H., Kabir, E., Kabir, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+on+the+human+health+impact+of+airborne+particulate+matter.">A review on the human health impact of airborne particulate matter.</a> Environment International. 74, 136-143 (2015).</li><li>Rajagopalan, S., Al-Kindi, S. G., Brook, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Air+pollution+and+cardiovascular+disease:+JACC+State-of-the-Art+Review.">Air pollution and cardiovascular disease: JACC State-of-the-Art Review.</a> Journal of the American College of Cardiology. 72 (17), 2054-2070 (2018).</li><li>Wolf, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Associations+between+short-term+exposure+to+particulate+matter+and+ultrafine+particles+and+myocardial+infarction+in+Augsburg,+Germany.">Associations between short-term exposure to particulate matter and ultrafine particles and myocardial infarction in Augsburg, Germany.</a> International Journal of Hygiene and Environmental Health. 218 (6), 535-542 (2015).</li><li>Sun, Q., Hong, X., Wold, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+effects+of+ambient+particulate+air+pollution+exposure.">Cardiovascular effects of ambient particulate air pollution exposure.</a> Circulation. 121 (25), 2755-2765 (2010).</li><li>Emini Veseli, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+atherosclerosis.">Animal models of atherosclerosis.</a> European Journal of Pharmacology. 816, 3-13 (2017).</li><li>Reichert, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+Left+anterior+descending+(LAD)+coronary+artery+ligation:+An+improved+and+simplified+model+for+myocardial+infarction.">Murine Left anterior descending (LAD) coronary artery ligation: An improved and simplified model for myocardial infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55353 (2017).</li><li>Lei, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+acute+effect+of+diesel+exhaust+particles+and+different+fractions+exposure+on+blood+coagulation+function+in+mice.">The acute effect of diesel exhaust particles and different fractions exposure on blood coagulation function in mice.</a> International Journal of Environmental Research and Public Health. 18 (8), 4136 (2021).</li><li>Gao, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+and+efficient+model+of+coronary+artery+ligation+and+myocardial+infarction+in+the+mouse.">A novel and efficient model of coronary artery ligation and myocardial infarction in the mouse.</a> Circulation Research. 107 (12), 1445-1453 (2010).</li><li>Pei, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LncRNA+PEAMIR+inhibits+apoptosis+and+inflammatory+response+in+PM2.5+exposure+aggravated+myocardial+ischemia/reperfusion+injury+as+a+competing+endogenous+RNA+of+miR-29b-3p.">LncRNA PEAMIR inhibits apoptosis and inflammatory response in PM2.5 exposure aggravated myocardial ischemia/reperfusion injury as a competing endogenous RNA of miR-29b-3p.</a> Nanotoxicology. 14 (5), 638-653 (2020).</li><li>Jia, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PM2.5-induced+pulmonary+inflammation+via+activating+of+the+NLRP3/caspase-1+signaling+pathway.">PM2.5-induced pulmonary inflammation via activating of the NLRP3/caspase-1 signaling pathway.</a> Environmental Toxicology. 36 (3), 298-307 (2021).</li><li>Vogel, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ST-segment+elevation+myocardial+infarction.">ST-segment elevation myocardial infarction.</a> Nature Reviews Disease Primers. 5 (1), 39 (2019).</li><li>Libby, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+changing+landscape+of+atherosclerosis.">The changing landscape of atherosclerosis.</a> Nature. 592 (7855), 524-533 (2021).</li><li>Zhou, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Excessive+neutrophil+extracellular+trap+formation+aggravates+acute+myocardial+infarction+injury+in+Apolipoprotein+E+deficiency+mice+via+the+ROS-dependent+pathway.">Excessive neutrophil extracellular trap formation aggravates acute myocardial infarction injury in Apolipoprotein E deficiency mice via the ROS-dependent pathway.</a> Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2019, 1209307 (2019).</li><li>Pluijmert, N. J., Bart, C. I., Bax, W. H., Quax, P. H. A., Atsma, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+on+cardiac+function,+remodeling+and+inflammation+following+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+or+unreperfused+myocardial+infarction+in+hypercholesterolemic+APOE*3-Leiden+mice.">Effects on cardiac function, remodeling and inflammation following myocardial ischemia-reperfusion injury or unreperfused myocardial infarction in hypercholesterolemic APOE*3-Leiden mice.</a> Scientific Reports. 10 (1), 16601 (2020).</li><li>Centa, M., Ketelhuth, D. F. J., Malin, S., Gistera, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+atherosclerosis+in+mice.">Quantification of atherosclerosis in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (148), e59828 (2019).</li><li>Benedek, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+TTC+staining+for+the+evaluation+of+tissue+injury+in+the+early+phases+of+reperfusion+after+focal+cerebral+ischemia+in+rats.">Use of TTC staining for the evaluation of tissue injury in the early phases of reperfusion after focal cerebral ischemia in rats.</a> Brain Research. 1116 (1), 159-165 (2006).</li><li>Mehlem, A., Hagberg, C. E., Muhl, L., Eriksson, U., Falkevall, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+neutral+lipids+by+oil+red+O+for+analyzing+the+metabolic+status+in+health+and+disease.">Imaging of neutral lipids by oil red O for analyzing the metabolic status in health and disease.</a> Nature Protocols. 8 (6), 1149-1154 (2013).</li><li>Nelson, A. M., Nolan, K. E., Davis, I. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repeated+orotracheal+intubation+in+mice.">Repeated orotracheal intubation in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (157), e60844 (2020).</li><li>Zheng, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exposure+to+fine+airborne+particulate+matters+induces+hepatic+fibrosis+in+murine+models.">Exposure to fine airborne particulate matters induces hepatic fibrosis in murine models.</a> Journal of Hepatology. 63 (6), 1397-1404 (2015).</li><li>Bai, N., van Eeden, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systemic+and+vascular+effects+of+circulating+diesel+exhaust+particulate+matter.">Systemic and vascular effects of circulating diesel exhaust particulate matter.</a> Inhalation Toxicology. 25 (13), 725-734 (2013).</li><li>Furuyama, A., Kanno, S., Kobayashi, T., Hirano, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extrapulmonary+translocation+of+intratracheally+instilled+fine+and+ultrafine+particles+via+direct+and+alveolar+macrophage-associated+routes.">Extrapulmonary translocation of intratracheally instilled fine and ultrafine particles via direct and alveolar macrophage-associated routes.</a> Archives of Toxicology. 83 (5), 429-437 (2009).</li><li>Brunekreef, B., Holgate, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Air+pollution+and+health.">Air pollution and health.</a> Lancet. 360 (9341), 1233-1242 (2002).</li></ol>

Kompozit bir hayvan modelinin kurulması, tek MI modelinden biraz farklıdır. Yüksek bir hayatta kalma oranını korumak, kompozit modelin geliştirilmesinde zordur. ApoE-/- farelerde aterosklerozun şiddeti, yüksek yağlı beslenme süresi7'nin uzatılmasıyla daha şiddetli hale gelir ve farelerin zayıflığı mortalitenin artmasına neden olur. Bu nedenle, deney sırasında farelerin durumunu sürekli izlemek ve aterosklerozu indükleme süresini deneyin ihtiyaçlarına göre aya...

Hava kirliliği, yüksek tüm nedenlere bağlı mortalite ile ilişkilendirilmiştir ve su kirliliği, toprak kirliliği ve mesleki maruziyetin toplamından daha fazla hastalık yüküne katkıda bulunmuştur1. DSÖ'nün bir raporu, dış hava kirliliğinin 2016 yılında dünya çapında hem şehirlerde hem de kırsal alanlarda 4,2 milyon erken ölüme neden olduğunu ortaya koymuştur2. Dünya çapında insanların% 91'i, hava kalitesinin DSÖ kılavuz sınırlarını aştığı yerlerde yaşamaktadır2. Ayrıca, ince partikül madde (PM) (≤2.5 μm çapında, PM2.5), küresel halk sağlığı3, özellikle düşük gelirli ve orta gelirli ülkelerin şehirlerinde yaşayan insanlar için en önemli hava kirliliği tehdidi olarak kabul edilmektedir.
Hava kirliliğinin kardiyovasküler hastalıklar üzerindeki olumsuz etkileri daha fazla ilgiyi hak etmektedir. Önceki çalışmalar, PM'nin kardiyovasküler hastalık (CVD'ler) riskinin artmasına yol açtığını göstermiştir4. Birkaç saat boyunca yüksek konsantrasyonlarda ultra ince partiküllere maruz kalmak, miyokard enfarktüsü mortalitesinin artmasına neden olabilir. Miyokard enfarktüsü öyküsü olan kişiler için, ultra ince parçacıklara maruz kalmak, nüks riskini önemli ölçüde artırabilir5. Ayrıca, PM maruziyetinin ateroskleroz6'nın ilerlemesini hızlandırdığı genel olarak kabul edilmektedir.
Tıbbi araştırmalar için uygun bir hayvan modeli seçmek çok önemlidir. Basit ateroskleroz hayvan modelleri7, miyokard iskemisi hayvan modelleri8 ve PM maruziyeti hayvan modelleri9 zaten mevcuttur. ApoE−/− (apolipoprotein E nakavt edilmiş) fare, ateroskleroz çalışmalarında kullanılan geleneksel bir fare modelidir. ApoE-/- farelerde plazma lipoproteinlerini temizleme yeteneği ciddi şekilde bozulmuştur. Yüksek yağlı diyetle beslenme, insanlarda gözlenen aterosklerotik kalp hastalığının diyet bağımlılığına benzeyen şiddetli ateroskleroza neden olur7. Sol anterior inen koroner arterin (LAD) ligasyonuiskemik olayı indüklemek için klasik bir yöntemdir 8,10. Trakeal infüzyon birçok araştırmada kullanılmıştır ve daha iyi simülasyonu ve daha düşük maliyeti nedeniyle maruzkalma modellerinden 11,12 öne çıkmaktadır.
Bununla birlikte, tek hastalığın hayvan modellerinin bilimsel araştırmalarda önemli sınırlamaları vardır. Sadece LAD ligasyonu ile indüklenen miyokard iskemisi gerçek durumda simüle edilmez. Doğal durumda, miyokard iskemisi genellikle plak rüptürü ve tıkalı koroner arterlerden kaynaklanır13. İskemik kardiyomiyopatili hastalarda genellikle aterosklerotik bazik lezyonlar vardır13. Ayrıca vücutta anormal lipid metabolizması ve inflamatuar reaksiyonlar vardır14. Bu nedenle, fiziksel faktörlerin neden olduğu veya doğal koşullar altında iskeminin farklı patolojik bulguları vardır. Mevcut çalışmalar aterosklerozlu miyokard iskemisi modellerinde enfarktüs ve inflamasyonun daha şiddetli olduğunu göstermiştir15,16. PM maruziyeti, inflamasyonu ve oksidatif stresi indükleyerek ateroskleroz ve miyokard iskemisini daha da kötüleştirebilir1. Üç faktör genellikle doğal durumda bir arada bulunur, bu nedenle gerçek durum bileşik bir model kullanılarak daha iyi simüle edilebilir.
Bu protokol, ateroskleroz (AS) ve PM akut maruziyetini birleştiren bir miyokard iskemisi (MI) hayvan modelinin geliştirilmesini açıklar. ApoE-/-- fareler, aterosklerozu indüklemek için yüksek yağlı bir diyetle beslendi. PM'nin pulmoner maruziyeti, PM süspansiyonunun trakeadan damlatılması ile taklit edildi. Farelerde LAD'nin bağlanması miyokard iskemisini indüklemek için kullanıldı. Bu yöntemler, hastalık durumunu daha iyi simüle etmek ve hayvanların hayatta kalma oranını artırmak için birleştirildi ve optimize edildi. Büyük bir maruz kalma ünitesine veya gaz anestezi makinesine gerek yoktur, bu da deneyin gerçekleştirilmesini kolaylaştırır. Bu model, hava kirliliğinde PM maruziyetinin ateroskleroz ve iskemik kardiyomiyopati üzerindeki etkisini incelemek ve bu tür karmaşık faktörlere sahip hastalıkları tedavi etmek için geliştirilen yeni ilaçlar üzerinde araştırma yapmak için kullanılabilir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>2,2,2-Tribromoethanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T48402</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>75% alcohol disinfectant</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animal ventilator</td>
			<td>Shanghai Alcott Biotech</td>
			<td>ALC-V8S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton swabs for babies</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Sterile , Approximately 3 mm in diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Culture Dish</td>
			<td>Corning</td>
			<td>430597</td>
			<td>150 mm x 25 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diesel Particulate Matter</td>
			<td>National Institute of Standards Technology</td>
			<td>1650b</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissection board</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>About 25 x 17 cm. The dissecting board can be replaced with a wooden board of the same size</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High-fat diet for mice</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Prescription: egg yolk powder 10%, lard 10%, sterol 1%, maintenance feed 79%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodophor disinfectant</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LED spotlight</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>5 V, 3 W,with hoses and clamps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical silk yarn ball</td>
			<td>Shanghai Medical Suture Needle Factory Co., Ltd.</td>
			<td>-</td>
			<td>0-0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical tape</td>
			<td>3M</td>
			<td>1527C-0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Vascular Hemostatic Forceps</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>W40350</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Holders</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>JC32010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Normal saline</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic Scissors</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>Y00040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic tweezer, 10cm, curved, with hooks</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>JD1080</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ophthalmic tweezer, 10cm, curved, with teeth</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td>
			<td>JD1060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipet Tips</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>T-200-Y-R-S</td>
			<td>0-200 &#956;L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipette</td>
			<td>eppendorf</td>
			<td>3121000074</td>
			<td>100 uL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safety pin</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Approximately 4.5 cm in length , for making chest opening tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small Animal I.V. Cannulas</td>
			<td>Baayen healthcare suzhou</td>
			<td>BAAN-322025</td>
			<td>I.V CATHETER 22FG x 25 MM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture needle with thread</td>
			<td>Shanghai Medical Suture Needle Factory Co., Ltd.</td>
			<td>-</td>
			<td>6-0,Nylon line</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture needle with thread</td>
			<td>JinHuan Medical</td>
			<td>F503</td>
			<td>5-0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>1 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tert-amyl alcohol</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zoom-stereo microscope</td>
			<td>Mshot</td>
			<td>MZ62</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

aggravation of myocardial ischemia upon particulate matter exposure in atherosclerosis animal model

Hava kirliliğinin neden olduğu sağlık sorunları (özellikle partikül kirliliği), özellikle kardiyovasküler hastalık hastaları arasında, karmaşık bozuklukları ağırlaştıran ve kötü prognoza neden olan giderek daha fazla dikkat çekmektedir. Basit miyokard iskemisi (MI) veya partikül madde (PM) maruziyet modeli, birden fazla nedeni olan hastalıkların bu tür çalışmaları için uygun değildir. Burada, PM maruziyeti, ateroskleroz ve miyokard iskemisini birleştiren kompozit bir model oluşturmak için bir yöntem tanımlanmıştır. ApoE − / - fareler ateroskleroz geliştirmek için 16 hafta boyunca yüksek yağlı bir diyetle beslendi, PM'nin pulmoner maruziyetini simüle etmek için PM standart süspansiyonunun trakeal instilasyonu yapıldı ve sol ön inen koroner arter son maruziyetten bir hafta sonra bağlandı. PM'nin trakeal instilasyonu, akut akciğer maruziyetini simüle ederken, deneyin maliyetini önemli ölçüde azaltabilir; noninvaziv trakeal entübasyon ile klasik sol ön inen arter ligasyonu ve yeni bir yardımcı genişleme cihazı hayvanın hayatta kalma oranını sağlayabilir ve operasyonun zorluğunu azaltabilir. Bu hayvan modeli, hastanın hava kirliliği ile ağırlaşan miyokard enfarktüsünün patolojik değişikliklerini makul bir şekilde simüle edebilir ve birden fazla nedeni olan hastalıkları içeren çalışmalarla ilgili hayvan modellerinin inşası için bir referans sağlayabilir.

Fareler koroner arter ligasyonundan 24 saat sonra ötenazi yapıldı ve anesteziden sonra kan toplandı. Fareler tribromoetanol (adım 3.2'ye göre) ile uyuşturuldu ve kan örneği retroorbital sinüsten toplandı. Kalp toplandı ve İskemi derecesi 2,3,5-Trifeniltetrazolyum Klorür (TTC) boyama ile incelendi (Şekil 1). TTC süksinat dehidrogenaz ile reaksiyona girdiğinde normal dokular kırmızıya dönerken, iskemik dokular azalmış dehidrogenaz aktivitesi nedeniyle so...

Watch this Scientific Journal Video about Aggravation of Myocardial Ischemia upon Particulate Matter Exposure in Atherosclerosis Animal Model at JoVE.com

Aggravation of Myocardial Ischemia upon Particulate Matter Exposure in Atherosclerosis Animal Model

Bu protokol, ateroskleroz ile miyokard iskemisini şiddetlendiren partikül maddeye (PM) maruz kalan kompozit bir hayvan modelini tanımlamaktadır.

Ateroskleroz Hayvan Modelinde Partikül Madde Maruziyeti Üzerine Miyokard İskemisinin Şiddetlenmesi

The health problems caused by air pollution (especially particulate pollution) are getting more and more attention, especially among cardiovascular ...

Buradaki protokol, miyokard iskemisinin bileşik bir hayvan modelini oluşturmak içindir. Ateroskleroz ve PM akut maruziyeti ile birleştirilir. Bu, ilgili hastalık üzerine yapılan araştırmalar için daha güvenilir bir hayvan modelidir.Bu hayvan modeli, bu tür hastalıkları gerçek bir durumda daha iyi simüle edebilir. Ayrıca bu yöntem yüksek bir başarı oranına sahiptir ve gerçekleştirilmesi kolaydır. Model, patolojik araştırma ve karmaşık faktörlere sahip hastalıkların ilaç geliştirilmesi için kullanılabilir.Bu model, kardiyovasküler ve çevresel toksikoloji araştırmaları için bir platform sağlayabilir ve çok faktörlü hastalığın araştırılması için fikir ve referanslara katkıda bulunur. Orotrakeal entübasyon, göğsün çatlak açıklığı ve doğru ligasyon pozisyonu bu modelin başarısının anahtarıdır. Fare brifingini sürdürmek ve kanamayı önlemek önemlidir.Rastgele iki ila üç fare seçerek başlayın ve ultrason görüntüleme veya doğrudan anatomik gözlem ile aort arkında bir plak olup olmadığını kontrol edin. Seçilen fareyi anestezi altına alın ve fare tahtasında sırtüstü pozisyonda yerleştirin. Üst kesici dişleri lastik banda bağlayın.Aksiller hattın orta noktasının etrafında bulunan trakea üzerinde esnek bir boruya sahip küçük bir LED spot ışığını odaklayın. Farenin ağzına küçük bir steril pamuklu çubuk koyun ve ardından dili dışarı çıkarmak için çubuğu yuvarlayın. Dili tutun ve ağız boşluğunu, farenksi ve trakeayı aynı uzunlamasına yönde yapmak için yavaşça yukarı çekin.Trakeanın girişi olan glottis, her nefeste açılıp kapanan parlak bir nokta olarak görülebilir. Glottis'i hedefleyerek farenin trakeasına 22 gauge kanola yerleştirin ve ardından iğne çekirdeğini çıkarın. Borunun hırıltılı suda doğru olup olmadığını test etmek için az miktarda normal salin içeren bir pipet tabancası kullanın.Tüp doğru konumdaysa, pipet tabancasındaki sıvı sütunu her nefeste zıplayacaktır. Pipet tabancasıyla tüpe 50 mikrolitre DPM süspansiyonu bırakın. PM maruziyetinden sonra evcil hayvan konut iğnesini çıkarın.Bilincini geri kazanana kadar fareyi ısıtma yastığının üzerinde tutun ve ardından fareyi tekrar ev kafesine yerleştirin. Fareyi entübasyon platformunda sırtüstü konuma getirin ve fareyi sabitleyin. Sol göğsün kıllarını ve bitişik sağ göğsün bir kısmını epilasyon kremi ile çıkarın.Ardından, evcil hayvan konut iğnesini bir hayvan vantilatörüne bağlayın. Dezenfekte etmek için cildi iyodoform ve alkolle silin. Oftalmik makasla yaklaşık bir santimetre boyunca bir cilt kesimi yapın ve kaburgaları açığa çıkarmak için kasları destekleyin.Kaburgayı dişli bir oftalmik cımbızla kelepçeleyin ve üçüncü interkostal boşlukta küçük bir kesim yapın. Ev yapımı göğüs açma aletleri ile bir ameliyat penceresi yapın ve ardından perikardiyal membranları sökün. Steril altı sıfır ipek sütürü mikrovasküler hemostatik forseps kullanarak bir iğne ile tutun.İpeği, koroner arterin bulunduğu bölgedeki iki milimetre genişliğinde bir miyokarddan geçirin. Doku kırılmasını önlemek için ligatür ve miyokard dokuları arasına kısa bir steril beş sıfır ipek parçası yerleştirin. Sol ön inen koroner arteri ve etrafındaki küçük miyokard demetini sıkıca bağlayın.Sol ventrikülün ön duvarı soluklaştığında lejyon başarılı kabul edilir. Havayı göğüsten yavaşça sıkın. Daha sonra interkostal kasları ve cildi steril beş sıfır ipek ile sırayla dikiştirin.Ameliyattan sonra tüm kan lekelerini temizleyin ve ardından fareyi yanal yaslanmış bir pozisyonda bir ısıtma yastığına yerleştirin. Fare işaretlerini anesteziden iyileşene kadar yaklaşık beş ila 20 dakika boyunca sürekli izleyin. Sağ refleks geri kazanıldıktan sonra, fareyi yiyecek ve su şişesiyle birlikte bir ısıtma yastığı üzerindeki temiz bir kurtarma kafesine aktarın.Farenin hayatta kalmasını sağlamak için 15 ila 30 dakika izlemeye devam edin. Son olarak, yara enfeksiyonunu önlemek için penisilin sodyumu istenen doza göre kas içinden enjekte edin. İskeminin derecesi TTC boyaması ile incelendi.TTC süksinat dehidrogenaz ile reaksiyona girdiğinde normal dokular kırmızıya döner. İskemik dokular azalmış dehidrogenaz aktivitesi nedeniyle soluk kalırken. Temsili görüntüler, MI ameliyatı veya PM maruziyeti olmayan, MI ameliyatı geçiren ancak PM maruziyeti olmayan ve MI ameliyatı ve PM maruziyeti geçiren kalp dokularını göstermektedir.PM maruziyeti ağırlaştırılmış miyokard iskemisi. Yağ Kırmızı O, dokulardaki trigliseritler gibi nötr yağları tam olarak renklendirebilir. Resimdeki kırmızı lekeler plakları gösterir.Düzenli diyet yapan vahşi tip farelerin aortundaki plaklar, yüksek yağlı diyete sahip APO E nakavt fareleri ve yüksek yağlı bir diyete sahip ve PM maruziyetinden muzdarip APO E nakavt fareleri burada yağ kırmızısı O boyama ile gösterilmiştir. Yüksek yağ beslenmesi APO E nakavt farelerde ateroskleroza ve PM maruziyeti ağırlaştırılmış ateroskleroza yol açmıştır. Seromiyotomi sırasında endotrakeal tüpün düzgün bir şekilde yerleştirildiğinden emin olmak önemlidir.Operatörün entübasyon operasyonunu hızlı, doğru bir şekilde tamamlaması ve operasyon sırasında hayvanın solunum durumuna her zaman dikkat etmesi gerekir. Yöntemimiz, hava kirliliği ve kardiyovasküler hastalıkların kesişimi ile ilgilenen araştırmacılara yardımcı olmaktadır. Burada bir fikir veriyoruz.Tabii ki, araştırmacılar doğrudan tanımladığımız hayvan modeline dayanarak araştırma da yapabilirler.

Research

JoVE Journal

Medicine

Assessing Teratogenic Changes in a Zebrafish Model of Fetal Alcohol Exposure

Fetal Alkol Pozlama bir Zebra balığı Modelinde teratojenik değişiklikler değerlendirilmesi

Fetal alcohol syndrome (FAS) is a severe manifestation of embryonic exposure to ethanol. It presents with characteristic defects to the face and organs, ...

A Murine Closed-chest Model of Myocardial Ischemia and Reperfusion

Miyokard İskemi ve Reperfüzyon bir Mürin Kapalı göğüs Modeli

Surgical trauma by thoracotomy in open-chest models of coronary ligation induces an immune response which modifies different mechanisms involved in ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Sol ön inen arter ligasyonu ile Miyokard İskemi-reperfüzyon Hasarı bir fare modeli

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model

Farelerde Hızlandırılmış Ateroskleroz Indüksiyonu: "Tel-Yaralanma" Modeli

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. ...

Confirmation of Myocardial Ischemia and Reperfusion Injury in Mice Using Surface Pad Electrocardiography

Yüzey Pad Elektrokardiyografi kullanılması Farelerde Miyokard İskemi ve Reperfüzyon Hasarı Onayı

Many animal models have been established for the study of myocardial remodeling and heart failure due to its status as the number one cause of mortality ...

A Chronic Cardiac Ischemia Model in Swine Using an Ameroid Constrictor

Bir Ameroid yılanı kullanarak domuz kronik kalp iskemi modelinde

Cardiovascular disease remains the number one cause of mortality in the United States. There are numerous approaches to treating these diseases, but ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

İzometrik Contractility ölçüm tel Myography kullanarak fare mezenterik arter

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits

Diyabetik tavşanların arka ekstremite Iskemi preklinik modeli

Peripheral vascular disease is a widespread clinical problem that affects millions of patients worldwide. A major consequence of peripheral vascular ...

Evaluation of Coronary Flow Reserve After Myocardial Ischemia Reperfusion in Rats

Farelerde miyokardiyal Iskemi reperfüzyon sonrası koroner akış rezervi değerlendirilmesi

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via ...

A Pre-clinical Rat Model for the Study of Ischemia-reperfusion Injury in Reconstructive Microsurgery

Rekonstrüktif Mikrocerrahide İskemi-Reperfüzyon Hasarı Nın İnceleştirilmesinde Klinik Öncesi Sıçan Modeli

Ischemia-reperfusion injury is the main cause of flap failure in reconstructive microsurgery. The rat is the preferred preclinical animal model in many ...