Name: induction of myocardial infarction and myocardial ischemia-reperfusion injury in mice
Uploaded: 2022-01-19T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Induction of Myocardial Infarction and Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury in Mice at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af National Natural Science Foundation of China (82070317, 81700390 til Jibin Lin, 8210021880 til Bingjie Lv og 82000428 til Boyuan Wang) og National Key R&D Program of China (2017YFA0208000 til Shaolin He).

Dyreforsøg er blevet godkendt af Animal Care and Utilization Committee of Huazhong University of Science and Technology (Wuhan, Kina).
BEMÆRK: C57BL/6J-hanmus (8-10 uger) bruges som modeller. Mus har fri adgang til mad og vand og opdrættes under specifikke patogenfrie forhold. Rummet opretholdes under kontrolleret temperatur (22 °C ± 2 °C) og fugtighed (45% -65%). Mus udsættes for et 12-timers lys / mørkt miljø på Animal Care Facility of Tongji Medical School (Wuhan, Kina) i henhold ...

<ol>
	<li>Reed, G. W., Rossi, J. E., Cannon, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+myocardial+infarction.">Acute myocardial infarction.</a> Lancet. 389 (10065), 197-210 (2017).</li><li>Ibanez, B., Heusch, G., Ovize, M., Van de Werf, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolving+therapies+for+myocardial+ischemia/reperfusion+injury.">Evolving therapies for myocardial ischemia/reperfusion injury.</a> Journal of the American College of Cardiology. 65 (14), 1454-1471 (2015).</li><li>Bryda, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mighty+mouse:+The+impact+of+rodents+on+advances+in+biomedical+research.">The mighty mouse: The impact of rodents on advances in biomedical research.</a> Missouri Medicine. 110 (3), 207-211 (2013).</li><li>Kim, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+closed-chest+model+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion.">A murine closed-chest model of myocardial ischemia and reperfusion.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (65), e3896 (2012).</li><li>Xu, Z., Alloush, J., Beck, E., Weisleder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+through+ligation+of+the+left+anterior+descending+artery.">A murine model of myocardial ischemia-reperfusion injury through ligation of the left anterior descending artery.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (86), e51329 (2014).</li><li>Xu, Z., McElhanon, K. E., Beck, E. X., Weisleder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+myocardial+ischemia-reperfusion+injury.">A murine model of myocardial ischemia-reperfusion injury.</a> Methods in Molecular Biology. 1717, 145-153 (2018).</li><li>Muthuramu, I., Lox, M., Jacobs, F., De Geest, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Permanent+ligation+of+the+left+anterior+descending+coronary+artery+in+mice:+a+model+of+post-myocardial+infarction+remodelling+and+heart+failure.">Permanent ligation of the left anterior descending coronary artery in mice: a model of post-myocardial infarction remodelling and heart failure.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (94), e52206 (2014).</li><li>Reichert, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+left+anterior+descending+(LAD)+coronary+artery+ligation:+An+improved+and+simplified+model+for+myocardial+infarction.">Murine left anterior descending (LAD) coronary artery ligation: An improved and simplified model for myocardial infarction.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (122), e55353 (2017).</li><li>Lugrin, J., Parapanov, R., Krueger, T., Liaudet, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+myocardial+infarction+model+using+permanent+ligation+of+left+anterior+descending+coronary+artery.">Murine myocardial infarction model using permanent ligation of left anterior descending coronary artery.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (150), e59591 (2019).</li><li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardioprotective+effects+of+Puerarin-V+on+isoproterenol-induced+myocardial+infarction+mice+is+associated+with+regulation+of+PPAR-Y/NF-Kappa+B+pathway.">Cardioprotective effects of Puerarin-V on isoproterenol-induced myocardial infarction mice is associated with regulation of PPAR-Y/NF-Kappa B pathway.</a> Molecules. 23 (12), 3322 (2018).</li><li>Vanden Bos, E. J., Mees, B. M., de Waard, M. C., de Crom, R., Duncker, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+model+of+cryoinjury-induced+myocardial+infarction+in+the+mouse:+A+comparison+with+coronary+artery+ligation.">A novel model of cryoinjury-induced myocardial infarction in the mouse: A comparison with coronary artery ligation.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 289 (3), 1291-1300 (2005).</li><li>Wang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cryoinjury+model+to+study+myocardial+infarction+in+the+mouse.">A cryoinjury model to study myocardial infarction in the mouse.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (151), e59958 (2019).</li><li>Brooks, W. W., Garibaldi, B. A., Conrad, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+injury+in+the+mouse+induced+by+transthoracic+cauterization.">Myocardial injury in the mouse induced by transthoracic cauterization.</a> Laboratory Animal Science. 48 (4), 374-378 (1998).</li><li>Tao, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+modeling+and+multimodality+imaging+of+chronic+myocardial+infarction+in+minipigs+induced+by+novel+interventional+embolization+technique.">Preclinical modeling and multimodality imaging of chronic myocardial infarction in minipigs induced by novel interventional embolization technique.</a> EJNMMI Research. 6 (1), 59 (2016).</li><li>Gao, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+and+efficient+model+of+coronary+artery+ligation+and+myocardial+infarction+in+the+mouse.">A novel and efficient model of coronary artery ligation and myocardial infarction in the mouse.</a> Circulation Research. 107 (12), 1445-1453 (2010).</li><li>Scofield, S. L., Singh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Confirmation+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion+injury+in+mice+using+surface+pad+electrocardiography.">Confirmation of myocardial ischemia and reperfusion injury in mice using surface pad electrocardiography.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (117), e54814 (2016).</li><li>Gnyawali, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-frequency+high-resolution+echocardiography:+First+evidence+on+non-invasive+repeated+measure+of+myocardial+strain,+contractility,+and+mitral+regurgitation+in+the+ischemia-reperfused+murine+heart.">High-frequency high-resolution echocardiography: First evidence on non-invasive repeated measure of myocardial strain, contractility, and mitral regurgitation in the ischemia-reperfused murine heart.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (41), e1781 (2010).</li><li>Pistner, A., Belmonte, S., Coulthard, T., Blaxall, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+echocardiography+and+ultrasound+imaging.">Murine echocardiography and ultrasound imaging.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (42), e2100 (2010).</li><li>Shibata, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adiponectin+protects+against+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+through+AMPK-+and+COX-2-dependent+mechanisms.">Adiponectin protects against myocardial ischemia-reperfusion injury through AMPK- and COX-2-dependent mechanisms.</a> Nature Medicine. 11 (10), 1096-1103 (2005).</li><li>Anderson, J. L., Morrow, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+myocardial+infarction.">Acute myocardial infarction.</a> New England Journal of Medicine. 376 (21), 2053-2064 (2017).</li><li>Frank, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+ischemia+reperfusion+injury:+From+basic+science+to+clinical+bedside.">Myocardial ischemia reperfusion injury: From basic science to clinical bedside.</a> Seminars in Cardiothoracic and Vascular Anesthesia. 16 (3), 123-132 (2012).</li><li>Mares, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studying+the+innate+immune+response+to+myocardial+infarction+in+a+highly+efficient+experimental+animal+model.">Studying the innate immune response to myocardial infarction in a highly efficient experimental animal model.</a> Romanian Journal of Cardiology. 31 (3), 573-585 (2021).</li><li>Fernandez, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+coronary+arteries+of+the+C57bl/6+mouse+strains:+Implications+for+comparison+with+mutant+models.">The coronary arteries of the C57bl/6 mouse strains: Implications for comparison with mutant models.</a> Journal of Anatomy. 212 (1), 12-18 (2008).</li><li>Zhang, R., Hess, D. T., Reynolds, J. D., Stamler, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemoglobin+S-nitrosylation+plays+an+essential+role+in+cardioprotection.">Hemoglobin S-nitrosylation plays an essential role in cardioprotection.</a> Journal of Clinical Investigation. 126 (12), 4654-4658 (2016).</li><li>Sorop, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+animal+models+of+coronary+microvascular+dysfunction.">Experimental animal models of coronary microvascular dysfunction.</a> Cardiovascular Research. 116 (4), 756-770 (2020).</li><li>Sicard, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Right+coronary+artery+ligation+in+mice:+A+novel+method+to+investigate+right+ventricular+dysfunction+and+biventricular+interaction.">Right coronary artery ligation in mice: A novel method to investigate right ventricular dysfunction and biventricular interaction.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 316 (3), 684-692 (2019).</li><li>Chen, J., Ceholski, D. K., Liang, L., Fish, K., Hajjar, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variability+in+coronary+artery+anatomy+affects+consistency+of+cardiac+damage+after+myocardial+infarction+in+mice.">Variability in coronary artery anatomy affects consistency of cardiac damage after myocardial infarction in mice.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 313 (2), 275-282 (2017).</li><li>Kato, R., Foex, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+protection+by+anesthetic+agents+against+ischemia-reperfusion+injury:+An+update+for+anesthesiologists.">Myocardial protection by anesthetic agents against ischemia-reperfusion injury: An update for anesthesiologists.</a> Canadian Journal of Anaesthesia. 49 (8), 777-791 (2002).</li></ol>

I de senere år har oprettelsen af modeller for MI og MIRI i klinisk og videnskabelig forskning udviklet sig hurtigt20,21. Der er dog stadig nogle spørgsmål, såsom virkningsmekanismerne og forbedringen af MI/MIRI, der skal løses. Her beskrives en modificeret protokol til etablering af en murinmodel af MI og MIRI. Flere nøglepunkter skal overvejes nøje.
Det første nøglepunkt er endotracheal intubation. Nogle procedurer<sup class...

Akut myokardieinfarkt (AMI) er en almindelig hjerte-kar-sygdom på verdensplan og bærer høj dødelighed1. Fremskridt inden for teknologier gør tidlig og effektiv revaskularisering tilgængelig for AMI-patienter. Efter disse behandlinger hos nogle patienter kan myokardieiskæmi-reperfusionsskade (MIRI) forekomme2. Det er således af stor betydning at forstå virkningsmekanismerne og hvordan man kan forbedre MI/MIRI. Mus bruges i vid udstrækning som modeller på grund af deres lave omkostninger, hurtige yngletid og lethed til at foretage genetiske ændringer3. Forskere har udviklet forskellige metoder til at modellere MIRI og MI i dyr 4,5,6,7,8,9. Denne strategi fremmer forskning, men de forskellige kriterier og metoder, der anvendes, komplicerer fortolkningen af resultater blandt forskerhold.
Hos mus er MI blevet induceret af isoproterenol10, kryoskade 11,12 eller cauterization13. MI kan let induceres af isoproterenol, men den patofysiologiske proces er forskellig fra den i klinisk MI. Kryoskade-induceret MI har dårlig konsistens, fremkalder overdreven myokardieskade omkring venstre forreste nedadgående koronararterie (LAD) og kan let fremkalde arytmi. Cauterization-induceret MI er helt forskellig fra den naturlige proces med myokardieinfarkt, og den inflammatoriske reaktion i det brændende område er mere intens; Derudover har den kirurgiske tilgang tekniske vanskeligheder. Desuden er der nogle laboratorier14, der udvikler MI-model i minigrise ved hjælp af ballonblokering eller embolisering eller trombosemetode gennem interventionsteknik. Alle disse metoder kan forårsage koronararterieokklusion direkte, men behov for koronar angiografi enheder og frem for alt de for tynde mus koronararterier gør disse operationer ikke praktiske. For MIRI var forskellene mellem forskellige modeller ret beskedne, såsom brug af åndedrætsværn / mikromanipulation eller ikke 5,6.
Her beskrives en enkel og pålidelig metode, der kan inducere MI og MIRI-modellen, tilpasset fra tidligere publicerede metoder 4,5,6,7,8,9,15. Denne metode kan simulere patofysiologiske processer ved direkte blokade af LAD gennem ligering. Desuden kan denne model ved at lindre ligeringen også simulere reperfusionsskade. I denne protokol anvendes et dissekerende mikroskop til LAD-visualisering. Derefter kan forskeren let identificere LAD. Derefter fører nøjagtig ligering af LAD til reproducerbar og forudsigelig blodokklusion og ventrikulær iskæmi. Desuden kan elektrokardiografi (EKG) ændringer anvendes til at bekræfte iskæmi og reperfusion ud over farveændringerne af LAD observeret under et mikroskop. Denne strategi fører til en kortere procedurevarighed, lavere risiko for kirurgiske komplikationer og færre eksperimentelle mus, der er nødvendige. Metoderne til troponin-T-test, hjerteultralyd og triphenyltetrazoliumchlorid (TTC) farvning er også beskrevet. Samlet set er denne protokol nyttig til undersøgelser af MI / MIR-mekanismen såvel som til lægemiddelopdagelse.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.9 % sodium chloride solution</td>
			<td>Kelun Industry Group,China</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4% paraformaldehyde fixing solution</td>
			<td>Servicebio,China</td>
			<td>G1101</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 silk suture</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products,China</td>
			<td>C412</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8-0 suture</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products,China</td>
			<td>H801</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>IsoReag,China</td>
			<td>IR-11190</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camera</td>
			<td>Canon,Japan</td>
			<td>EOS 80D</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Depilatory cream</td>
			<td>Veet,French</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Elecsys Troponin T hs STAT</td>
			<td>Roche,Germany</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrochemical luminescence immunoanalyzer</td>
			<td>Roche,Germany</td>
			<td>Elecsys 2010</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Evans blue</td>
			<td>Sigma,America</td>
			<td>E2129</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye scissors</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>JC2303</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Haemostatic forceps</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>J31020</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High frequency in vivo imaging systems</td>
			<td>Visualsonics,Canada</td>
			<td>Vevo2100</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ibuprofen</td>
			<td>PerFeMiKer,China</td>
			<td>CLS-12921</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intravenous catheter</td>
			<td>Introcan,Germany</td>
			<td>4254090B</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Sigma-Aldrich,America</td>
			<td>&#160;K2753</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical alcohol</td>
			<td>Huichang ,China</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microneedle holders</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>WA2040</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscopic shears</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>WA1040</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgical forceps</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>WA3020</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse electrocardiograph</td>
			<td>Techman,China</td>
			<td>BL-420F</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holders</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>JC3202</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>operating floor</td>
			<td>Chico,China</td>
			<td>ZK-HJPT</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-10 tube</td>
			<td>Huamei,China</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbital</td>
			<td>Merck,America</td>
			<td>1030001</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Ventilator</td>
			<td>Shanghai Alcott Biotech,China</td>
			<td>ALC-V8S-P</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo microscope</td>
			<td>Aomei Industry,China</td>
			<td>SZM0745-STL3-T3</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical thermostatic heating pad</td>
			<td>Globalebio, China</td>
			<td>GE0-20W</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triphenyltetrazolium chloride</td>
			<td>Servicebio,China</td>
			<td>G1017</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Huamaike Biochemicals and Life Science Research Prouducts,China</td>
			<td>323004</td>
			<td>-</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

induction of myocardial infarction and myocardial ischemia-reperfusion injury in mice

Akut myokardieinfarkt er en almindelig hjerte-kar-sygdom med høj dødelighed. Myokardiereperfusionsskade kan modvirke de gavnlige virkninger af hjerterefluks og fremkalde sekundær myokardieskade. En simpel og reproducerbar model af myokardieinfarkt og myokardieiskæmi-reperfusionsskade er et godt værktøj for forskere. Her beskrives en tilpasselig metode til at skabe en myokardieinfarkt (MI) model og MIRI ved præcisionsligering af den venstre forreste nedadgående koronararterie (LAD) gennem mikromanipulation. Nøjagtig og reproducerbar ligaturpositionering af LAD hjælper med at opnå ensartede resultater for hjerteskade. Ændringer i ST-segmentet kan hjælpe med at identificere modellens nøjagtighed. Serumniveauet af hjertetroponin T (cTnT) bruges til at vurdere myokardieskaden, hjerte-ultralyd anvendes til at evaluere myokardiesystolisk funktion, og Evans-Blue / triphenyltetrazoliumchloridfarvning bruges til at måle infarktstørrelse. Generelt reducerer denne protokol procedurens varighed, sikrer kontrollerbar infarktstørrelse og forbedrer musens overlevelse.

Den eksperimentelle arbejdsgang er vist i figur 1A. Forskeren kan planlægge tidsknudepunkterne i henhold til det eksperimentelle design ved studiestart. Varigheden af LAD ligation er i overensstemmelse med forskningsformålet. For MI kan forskningen ignorere reperfusionstrinnet. Hjerte ultralyd er tilgængelig på forskellige stadier af undersøgelsen, fordi det er ikke-invasivt, mens Evans-Blue / TTC farvning kun kan udføres, når musen ofres. For forskning, der fokuserer på fibrose og v...

Watch this Scientific Journal Video about Induction of Myocardial Infarction and Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury in Mice at JoVE.com

Induction of Myocardial Infarction and Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury in Mice

Her beskriver vi en enkel og reproducerbar metode, der kan fremkalde myokardieinfarkt eller myokardieiskæmi-reperfusionsskade hos mus ved præcisionsligering af venstre forreste nedadgående koronararterie gennem mikromanipulation.

Induktion af myokardieinfarkt og myokardieiskæmi-reperfusionsskade hos mus

Acute myocardial infarction is a common cardiovascular disease with high mortality. Myocardial reperfusion injury can counteract the beneficial effects of ...

Denne undersøgelse beskriver en tilpasselig metode til at skabe en myokardiefunktionsmodel i Miro ved præcisionsligering af den venstre forreste nedadgående koronararterie gennem mikromanipulation. Denne protokol reducerer procedurens varighed, sikrer kontrollerbar infarktstørrelse og forbedrer musens overlevelse. Brug en rektangulær OT med en varmepude, der er forvarmet til 37 grader Celsius under hele den kirurgiske procedure.Før proceduren desinficeres brættet med ultraviolet lys og 70%alkohol. Begynd med at placere musen på OT i liggende stilling med gasbind under hovedet for at undgå overophedning af øjnene. Påfør oftalmisk salve til øjnene for at forhindre dem i at tørre ud.Brug en pelsfjerningscreme på brystkassen og massér jævnt med en steril vatpind i et minut. Tør overskydende pels af med gasbind. Brug povidon jod efterfulgt af 70% alkohol til at rense området, og dække thorax med gasbind.Brug en 4-O sutur under de øvre fortænder og fastgør den til ankerpunktet for at holde munden lidt åben og lette kanylering. Træk i halen for at holde kroppen lige, og fastgør den til OT ved hjælp af tape. Fastgør de fire lemmer med tape og stram dem på ankerpunkterne.Overstræk ikke de forreste lemmer for at undgå åndedrætsbesvær. Brug tang til at åbne kæben og løfte tungen. Brug derefter en belysning til at visualisere halsen og glottis.Indsæt forsigtigt en 22 gauge kanyle med en stump afkortet nål gennem munden ind i luftrøret, cirka en centimeter ned i halsen. Brug den ene hånd til at holde tungen og bevæg den lidt opad med stump tang. Brug samtidig den anden hånd til forsigtigt at indsætte røret i luftrøret.Pas på ikke at indsætte røret i spiserøret. Fjern forsigtigt nålen. Før du tilslutter til ventilatoren, skal du kontrollere intubationen ved at placere røret i vandet, så der dannes bobler.Tilslut endotrachealrøret til en ventilator indstillet til 120 pr. Minut, og tidevandsvolumen justeret til 250 mikroliter. Bekræft intubation ved at kontrollere bilateral symmetrisk brystudvidelse. Fastgør derefter forbindelsen til OT med tape for at undgå, at den falder af.Placer EKG-elektroder på poterne, og tilslut dem til EKG-optageren. Overvåg hjerteelektrofysiologi under hele proceduren. Fjern gasbindet på brystkassen.Desinficer snitområdet ved hjælp af tre skrubbecyklusser med 70% alkohol. For at reducere forurening af det kirurgiske sted skal du dække musen med et sterilt kirurgisk drapering med et hul over det kirurgiske felt. Efter at have lavet et skråt hudsnit med en skalpel, udsæt ribbenene ved at udføre en stump dissektion af det subkutane væv.Pas på ikke at skade kar, ribben og lunger. Brug sterile bomuldsapplikatorer til at stoppe blødningen. Identificer det tredje interkostale rum og lav et snit på ca. seks til otte millimeter.Åbn derefter brysthulen ved at udføre stump dissektion af væv i det interkostale rum. Pas på ikke at skade den indre thoraxarterie. Span det interkostale rum ved hjælp af tang.Indsæt præsteriliserede hjemmelavede retraktorer i brystkassen, og træk tilbage for at sprede snittet til ca. seks millimeter i bredden. Fastgør retraktorerne til OT med gummibånd. Fjern forsigtigt det omgivende væv for at udsætte hjertet helt.Træk forsigtigt perikardiet af med buede tang uden at skade hjertet. Brug et dissekerende mikroskop og ret et fokuseret og passende lys til LAD-visualisering. Tryk forsigtigt på stedet under den valgte ligeringsposition for midlertidigt at forstørre LAD'en, og kontroller derefter LAD igen.Under et dissekerende mikroskop skal du bruge en tilspidset nål til at passere en 8-0 silke ligatur under LAD. Sørg for, at nålen ikke er dyb nok til at komme ind i venstre ventrikel og ikke for lav til at undgå at beskadige LAD. Bind ligaturen med en løs dobbelt knude.Placer en to til tre millimeter PE-10 slange i en løkke parallelt med arterien. Stram ligatursløjfen forsigtigt, indtil den er omkring arterien og slangen. Fastgør derefter løkken med en glideknude.Pas på ikke at beskadige myokardievæggen med for stort stramningstryk. En bleghedsfarve i den forreste væg i venstre ventrikel efter ligering bekræfter ophør af blodgennemstrømning i LAD. Hvis permanent ligering er påkrævet, fortsæt som beskrevet i tekstmanuskriptet.Fjern retraktorerne fra snittet. Luk derefter såret midlertidigt med en bulldogklemme. Sørg for, at musen fortsat er tilsluttet ventilatoren.Når perioden med iskæmi slutter, skal du fjerne bulldogklemmen og indsætte retraktorerne for at åbne snittet og udsætte hjertet og ligeringsstedet. Løsn glideknuden, og fjern PE-10-slangen. Ændring i den blege farve til pink-rød bekræfter genoprettelse af blodgennemstrømningen.Samtidig, for at detektere reperfusion, observere EKG for en potentiel opløsning af ST-højde. Forlad 8-0 ligatur in situ, hvis der udføres efterfølgende Evans blå og TTC-farvning. Ellers skal du fjerne suturen på dette trin.Fjern retraktorerne og luk snittet ved at suturere den tredje og fjerde ribben med en 4-O silkesutur. Pas på ikke at skade lungen. Tryk forsigtigt på brystet, mens du binder suturknuderne for at skubbe luft ud, der kan være fanget i brysthulen.Luk muskellagene med kontinuerlige 4-O silkesuturer. Standardbillederne af den eksperimentelle proces blev erhvervet fra endotracheal intubation, hudsnit, thoracotomi, LAD-identifikation og ligering til reperfusion. De repræsentative EKG-billeder verificerede myokardieiskæmi og reperfusion med signifikant ST-forhøjelse efter ligering.Og opløsning af ST-højde efter slipknuden blev løsnet. Før thoracotomi er det meget vigtigt at holde luftvejene åbne, og det vigtigste er at sikre, at LAD er fast ligeret og undgå skader. Denne procedure vil blive efterfulgt af ekkokardiografi for at evaluere hjertefunktionen samt TTC for at vurdere myokardieskaden.

Research

JoVE Journal

Medicine

Acute Myocardial Infarction in Rats

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular ...

Induction of Myocardial Infarction in Adult Zebrafish Using Cryoinjury

Induktion af myokardieinfarkt i Adult Zebrafisk Brug kryobeskadigelse

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and ...

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

Iskæmireperfusion Model akut nyreskade og Post Injury Fibrose i mus

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction

MR og PET i musemodeller af myokardieinfarkt

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ...

Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Myokardieinfarkt og Functional resultatvurdering i Pigs

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

En murin model af myokardieiskæmi-reperfusionsskade gennem æggelederne for Venstre Anterior Faldende Artery

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

Minimal Invasive Kirurgisk Procedure inducere myokardieinfarkt i mus

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last ...

Induction and Assessment of Ischemia-reperfusion Injury in Langendorff-perfused Rat Hearts

Induktion og vurdering af iskæmi-reperfusion skade i Langendorff-perfusionerede rottehjerter

The biochemical events surrounding ischemia reperfusion injury in the acute setting are of great importance to furthering novel treatment options for ...

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

Myokardieinfarkt i neonatale mus, en model af Cardiac Regeneration

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and ...

Confirmation of Myocardial Ischemia and Reperfusion Injury in Mice Using Surface Pad Electrocardiography

Bekræftelse af myokardieiskæmi og reperfusionsskade i mus Brug Surface Pad elektrokardiografi

Many animal models have been established for the study of myocardial remodeling and heart failure due to its status as the number one cause of mortality ...