Name: induction of myocardial infarction and myocardial ischemia-reperfusion injury in mice
Uploaded: 2022-01-19T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Induction of Myocardial Infarction and Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury in Mice at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av National Natural Science Foundation of China (82070317, 81700390 til Jibin Lin, 8210021880 til Bingjie Lv og 82000428 til Boyuan Wang) og National Key R &D Program of China (2017YFA0208000 til Shaolin He).

Dyrestudier er godkjent av Animal Care and Utilization Committee ved Huazhong University of Science and Technology (Wuhan, Kina).
MERK: Hannmus C57BL/6J (8-10 uker) brukes som modeller. Mus har fri tilgang til mat og vann og er avlet i spesifikke patogenfrie forhold. Rommet holdes under kontrollert temperatur (22 °C ± 2 °C) og fuktighet (45 %-65 %). Mus blir utsatt for et 12-timers lys / mørkt miljø på Animal Care Facility of Tongji Medical School (Wuhan, Kina) i henhold til retningslinj...

<ol>
	<li>Reed, G. W., Rossi, J. E., Cannon, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+myocardial+infarction.">Acute myocardial infarction.</a> Lancet. 389 (10065), 197-210 (2017).</li><li>Ibanez, B., Heusch, G., Ovize, M., Van de Werf, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolving+therapies+for+myocardial+ischemia/reperfusion+injury.">Evolving therapies for myocardial ischemia/reperfusion injury.</a> Journal of the American College of Cardiology. 65 (14), 1454-1471 (2015).</li><li>Bryda, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mighty+mouse:+The+impact+of+rodents+on+advances+in+biomedical+research.">The mighty mouse: The impact of rodents on advances in biomedical research.</a> Missouri Medicine. 110 (3), 207-211 (2013).</li><li>Kim, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+closed-chest+model+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion.">A murine closed-chest model of myocardial ischemia and reperfusion.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (65), e3896 (2012).</li><li>Xu, Z., Alloush, J., Beck, E., Weisleder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+through+ligation+of+the+left+anterior+descending+artery.">A murine model of myocardial ischemia-reperfusion injury through ligation of the left anterior descending artery.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (86), e51329 (2014).</li><li>Xu, Z., McElhanon, K. E., Beck, E. X., Weisleder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+myocardial+ischemia-reperfusion+injury.">A murine model of myocardial ischemia-reperfusion injury.</a> Methods in Molecular Biology. 1717, 145-153 (2018).</li><li>Muthuramu, I., Lox, M., Jacobs, F., De Geest, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Permanent+ligation+of+the+left+anterior+descending+coronary+artery+in+mice:+a+model+of+post-myocardial+infarction+remodelling+and+heart+failure.">Permanent ligation of the left anterior descending coronary artery in mice: a model of post-myocardial infarction remodelling and heart failure.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (94), e52206 (2014).</li><li>Reichert, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+left+anterior+descending+(LAD)+coronary+artery+ligation:+An+improved+and+simplified+model+for+myocardial+infarction.">Murine left anterior descending (LAD) coronary artery ligation: An improved and simplified model for myocardial infarction.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (122), e55353 (2017).</li><li>Lugrin, J., Parapanov, R., Krueger, T., Liaudet, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+myocardial+infarction+model+using+permanent+ligation+of+left+anterior+descending+coronary+artery.">Murine myocardial infarction model using permanent ligation of left anterior descending coronary artery.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (150), e59591 (2019).</li><li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardioprotective+effects+of+Puerarin-V+on+isoproterenol-induced+myocardial+infarction+mice+is+associated+with+regulation+of+PPAR-Y/NF-Kappa+B+pathway.">Cardioprotective effects of Puerarin-V on isoproterenol-induced myocardial infarction mice is associated with regulation of PPAR-Y/NF-Kappa B pathway.</a> Molecules. 23 (12), 3322 (2018).</li><li>Vanden Bos, E. J., Mees, B. M., de Waard, M. C., de Crom, R., Duncker, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+model+of+cryoinjury-induced+myocardial+infarction+in+the+mouse:+A+comparison+with+coronary+artery+ligation.">A novel model of cryoinjury-induced myocardial infarction in the mouse: A comparison with coronary artery ligation.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 289 (3), 1291-1300 (2005).</li><li>Wang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cryoinjury+model+to+study+myocardial+infarction+in+the+mouse.">A cryoinjury model to study myocardial infarction in the mouse.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (151), e59958 (2019).</li><li>Brooks, W. W., Garibaldi, B. A., Conrad, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+injury+in+the+mouse+induced+by+transthoracic+cauterization.">Myocardial injury in the mouse induced by transthoracic cauterization.</a> Laboratory Animal Science. 48 (4), 374-378 (1998).</li><li>Tao, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+modeling+and+multimodality+imaging+of+chronic+myocardial+infarction+in+minipigs+induced+by+novel+interventional+embolization+technique.">Preclinical modeling and multimodality imaging of chronic myocardial infarction in minipigs induced by novel interventional embolization technique.</a> EJNMMI Research. 6 (1), 59 (2016).</li><li>Gao, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+and+efficient+model+of+coronary+artery+ligation+and+myocardial+infarction+in+the+mouse.">A novel and efficient model of coronary artery ligation and myocardial infarction in the mouse.</a> Circulation Research. 107 (12), 1445-1453 (2010).</li><li>Scofield, S. L., Singh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Confirmation+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion+injury+in+mice+using+surface+pad+electrocardiography.">Confirmation of myocardial ischemia and reperfusion injury in mice using surface pad electrocardiography.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (117), e54814 (2016).</li><li>Gnyawali, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-frequency+high-resolution+echocardiography:+First+evidence+on+non-invasive+repeated+measure+of+myocardial+strain,+contractility,+and+mitral+regurgitation+in+the+ischemia-reperfused+murine+heart.">High-frequency high-resolution echocardiography: First evidence on non-invasive repeated measure of myocardial strain, contractility, and mitral regurgitation in the ischemia-reperfused murine heart.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (41), e1781 (2010).</li><li>Pistner, A., Belmonte, S., Coulthard, T., Blaxall, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+echocardiography+and+ultrasound+imaging.">Murine echocardiography and ultrasound imaging.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (42), e2100 (2010).</li><li>Shibata, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adiponectin+protects+against+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+through+AMPK-+and+COX-2-dependent+mechanisms.">Adiponectin protects against myocardial ischemia-reperfusion injury through AMPK- and COX-2-dependent mechanisms.</a> Nature Medicine. 11 (10), 1096-1103 (2005).</li><li>Anderson, J. L., Morrow, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+myocardial+infarction.">Acute myocardial infarction.</a> New England Journal of Medicine. 376 (21), 2053-2064 (2017).</li><li>Frank, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+ischemia+reperfusion+injury:+From+basic+science+to+clinical+bedside.">Myocardial ischemia reperfusion injury: From basic science to clinical bedside.</a> Seminars in Cardiothoracic and Vascular Anesthesia. 16 (3), 123-132 (2012).</li><li>Mares, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studying+the+innate+immune+response+to+myocardial+infarction+in+a+highly+efficient+experimental+animal+model.">Studying the innate immune response to myocardial infarction in a highly efficient experimental animal model.</a> Romanian Journal of Cardiology. 31 (3), 573-585 (2021).</li><li>Fernandez, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+coronary+arteries+of+the+C57bl/6+mouse+strains:+Implications+for+comparison+with+mutant+models.">The coronary arteries of the C57bl/6 mouse strains: Implications for comparison with mutant models.</a> Journal of Anatomy. 212 (1), 12-18 (2008).</li><li>Zhang, R., Hess, D. T., Reynolds, J. D., Stamler, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemoglobin+S-nitrosylation+plays+an+essential+role+in+cardioprotection.">Hemoglobin S-nitrosylation plays an essential role in cardioprotection.</a> Journal of Clinical Investigation. 126 (12), 4654-4658 (2016).</li><li>Sorop, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+animal+models+of+coronary+microvascular+dysfunction.">Experimental animal models of coronary microvascular dysfunction.</a> Cardiovascular Research. 116 (4), 756-770 (2020).</li><li>Sicard, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Right+coronary+artery+ligation+in+mice:+A+novel+method+to+investigate+right+ventricular+dysfunction+and+biventricular+interaction.">Right coronary artery ligation in mice: A novel method to investigate right ventricular dysfunction and biventricular interaction.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 316 (3), 684-692 (2019).</li><li>Chen, J., Ceholski, D. K., Liang, L., Fish, K., Hajjar, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variability+in+coronary+artery+anatomy+affects+consistency+of+cardiac+damage+after+myocardial+infarction+in+mice.">Variability in coronary artery anatomy affects consistency of cardiac damage after myocardial infarction in mice.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 313 (2), 275-282 (2017).</li><li>Kato, R., Foex, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+protection+by+anesthetic+agents+against+ischemia-reperfusion+injury:+An+update+for+anesthesiologists.">Myocardial protection by anesthetic agents against ischemia-reperfusion injury: An update for anesthesiologists.</a> Canadian Journal of Anaesthesia. 49 (8), 777-791 (2002).</li></ol>

De siste årene har etableringen av modeller for MI og MIRI i klinisk og vitenskapelig forskning utviklet seg raskt20,21. Imidlertid er det fortsatt noen spørsmål, for eksempel handlingsmekanismer og hvordan man kan forbedre MI/MIRI, som må løses. Her beskrives en modifisert protokoll for etablering av en murinmodell av MI og MIRI. Flere sentrale punkter må vurderes nøye.
Det første hovedpunktet er endotrakeal intubasjon. Noen p...

Akutt hjerteinfarkt (AMI) er en vanlig hjerte- og karsykdom på verdensbasis og bærer høy dødelighet1. Fremskritt innen teknologi gjør tidlig og effektiv revaskularisering tilgjengelig for AMI-pasienter. Etter disse behandlingene hos noen pasienter kan myokardiskemi-reperfusjonsskade (MIRI) forekomme2. Det er derfor av stor betydning å forstå virkningsmekanismene og hvordan man kan forbedre MI/MIRI. Mus er mye brukt som modeller på grunn av deres lave kostnader, raske avlstid og letthet for å gjøre genetiske endringer3. Forskere har utviklet forskjellige metoder for å modellere MIRI og MI i dyr 4,5,6,7,8,9. Denne strategien fremmer forskning, men de ulike kriteriene og metodene som brukes, kompliserer tolkningen av resultater blant forskerteam.
Hos mus har MI blitt indusert av isoproterenol10, kryoskade 11,12 eller cauterization13. MI kan lett induseres av isoproterenol, men den patofysiologiske prosessen er forskjellig fra den i klinisk MI. Kryoskadeindusert MI har dårlig konsistens, fremkaller overdreven myokardskade rundt venstre fremre nedadgående koronararterie (LAD), og kan lett indusere arytmi. Cauterization-indusert MI er ganske forskjellig fra den naturlige prosessen med hjerteinfarkt, og den inflammatoriske reaksjonen i det brennende området er mer intens; I tillegg har den kirurgiske tilnærmingen tekniske vanskeligheter. Videre er det noen laboratorier14 som utvikler MI-modell hos minigriser ved hjelp av ballongblokkering eller embolisering eller trombosemetode gjennom intervensjonsteknikk. Alle disse metodene kan forårsake okklusjon av kranspulsårene direkte, men å trenge koronar angiografi-enheter og fremfor alt de altfor tynne musekoronararteriene gjør at disse operasjonene ikke er praktiske. For MIRI var forskjellene mellom ulike modeller ganske beskjedne, for eksempel bruk av respirator/mikromanipulasjon eller ikke 5,6.
Her beskrives en enkel og pålitelig metode som kan indusere MI og MIRI-modellen, tilpasset fra tidligere publiserte metoder 4,5,6,7,8,9,15. Denne metoden kan simulere patofysiologiske prosesser ved direkte blokkering av LAD gjennom ligering. Videre, ved å lindre ligeringen, kan denne modellen også simulere reperfusjonsskade. I denne protokollen brukes et dissekerende mikroskop for LAD-visualisering. Deretter kan forskeren enkelt identifisere LAD. Deretter fører nøyaktig ligering av LAD til reproduserbar og forutsigbar blodokklusjon og ventrikulær iskemi. Videre kan elektrokardiografi (EKG) endringer brukes til å bekrefte iskemi og reperfusjon i tillegg til fargeendringene i LAD observert under et mikroskop. Denne strategien fører til kortere prosedyrevarighet, lavere risiko for kirurgiske komplikasjoner og færre eksperimentelle mus som trengs. Metodene for troponin-T-testen, hjerte ultralyd og trifenyltetrazoliumklorid (TTC) farging er også beskrevet. Samlet sett er denne protokollen nyttig for studier av MI/MIR-mekanismen, så vel som for oppdagelse av legemidler.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.9 % sodium chloride solution</td>
			<td>Kelun Industry Group,China</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4% paraformaldehyde fixing solution</td>
			<td>Servicebio,China</td>
			<td>G1101</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 silk suture</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products,China</td>
			<td>C412</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8-0 suture</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products,China</td>
			<td>H801</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>IsoReag,China</td>
			<td>IR-11190</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camera</td>
			<td>Canon,Japan</td>
			<td>EOS 80D</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Depilatory cream</td>
			<td>Veet,French</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Elecsys Troponin T hs STAT</td>
			<td>Roche,Germany</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrochemical luminescence immunoanalyzer</td>
			<td>Roche,Germany</td>
			<td>Elecsys 2010</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Evans blue</td>
			<td>Sigma,America</td>
			<td>E2129</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye scissors</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>JC2303</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Haemostatic forceps</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>J31020</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High frequency in vivo imaging systems</td>
			<td>Visualsonics,Canada</td>
			<td>Vevo2100</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ibuprofen</td>
			<td>PerFeMiKer,China</td>
			<td>CLS-12921</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intravenous catheter</td>
			<td>Introcan,Germany</td>
			<td>4254090B</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Sigma-Aldrich,America</td>
			<td>&#160;K2753</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical alcohol</td>
			<td>Huichang ,China</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microneedle holders</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>WA2040</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscopic shears</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>WA1040</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgical forceps</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>WA3020</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse electrocardiograph</td>
			<td>Techman,China</td>
			<td>BL-420F</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holders</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>JC3202</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>operating floor</td>
			<td>Chico,China</td>
			<td>ZK-HJPT</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-10 tube</td>
			<td>Huamei,China</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbital</td>
			<td>Merck,America</td>
			<td>1030001</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Ventilator</td>
			<td>Shanghai Alcott Biotech,China</td>
			<td>ALC-V8S-P</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo microscope</td>
			<td>Aomei Industry,China</td>
			<td>SZM0745-STL3-T3</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical thermostatic heating pad</td>
			<td>Globalebio, China</td>
			<td>GE0-20W</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triphenyltetrazolium chloride</td>
			<td>Servicebio,China</td>
			<td>G1017</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Huamaike Biochemicals and Life Science Research Prouducts,China</td>
			<td>323004</td>
			<td>-</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

induction of myocardial infarction and myocardial ischemia-reperfusion injury in mice

Akutt hjerteinfarkt er en vanlig hjerte- og karsykdom med høy dødelighet. Myokardreperfusjonsskade kan motvirke de gunstige effektene av hjertereflow og indusere sekundær myokardskade. En enkel og reproduserbar modell for hjerteinfarkt og myokardiskemi-reperfusjonsskade er et godt verktøy for forskere. Her beskrives en tilpassbar metode for å lage en myokardinfarkt (MI) modell og MIRI ved presisjonsligering av venstre fremre synkende koronararterie (LAD) gjennom mikromanipulasjon. Nøyaktig og reproduserbar ligaturposisjonering av LAD bidrar til å oppnå konsistente resultater for hjerteskade. ST-segmentendringer kan bidra til å identifisere modellens nøyaktighet. Serumnivået av hjertetroponin T (cTnT) brukes til å vurdere myokardskaden, hjerteultralyd brukes til å evaluere myokardial systolisk funksjon, og Evans-Blue / trifenyltetrazoliumkloridfarging brukes til å måle infarktstørrelse. Generelt reduserer denne protokollen prosedyrens varighet, sikrer kontrollerbar infarktstørrelse og forbedrer musens overlevelse.

Den eksperimentelle arbeidsflyten er vist i figur 1A. Forskeren kan planlegge tidsnodene i henhold til eksperimentelt design ved studiestart. Varigheten av LAD ligering er i henhold til forskningsformålet. For MI kan forskningen ignorere reperfusjonstrinnet. Hjerte ultralyd er tilgjengelig på ulike stadier av studien fordi den er ikke-invasiv, mens Evans-Blue / TTC-farging kun kan utføres når musen ofres. For forskning som fokuserer på fibrose og ventrikulær remodellering, er observasj...

Watch this Scientific Journal Video about Induction of Myocardial Infarction and Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury in Mice at JoVE.com

Induction of Myocardial Infarction and Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury in Mice

Her beskriver vi en enkel og reproduserbar metode som kan indusere hjerteinfarkt eller myokardiskemi-reperfusjonsskade hos mus ved presisjonsligering av venstre fremre nedadgående koronararterie gjennom mikromanipulasjon.

Induksjon av hjerteinfarkt og myokardiskemi-reperfusjonsskade hos mus

Acute myocardial infarction is a common cardiovascular disease with high mortality. Myocardial reperfusion injury can counteract the beneficial effects of ...

Denne studien beskriver en tilpassbar metode for å lage en myokardfunksjonsmodell i Miro ved presisjonsligering av venstre fremre synkende koronararterie gjennom mikromanipulasjon. Denne protokollen reduserer prosedyrens varighet, sikrer kontrollerbar infarktstørrelse og forbedrer museoverlevelse. Bruk en rektangulær OT med en varmepute forvarmet til 37 grader Celsius gjennom hele den kirurgiske prosedyren.Før prosedyren, desinfiser brettet med ultrafiolett lys og 70% alkohol. Begynn med å plassere musen på OT i en liggende stilling med gasbind under hodet for å unngå overoppheting av øynene. Påfør oftalmisk salve på øynene for å forhindre at de tørker ut.Bruk en pelsfjerningskrem på brystkassen og masser jevnt med en steril bomullspinne i ett minutt. Tørk overflødig pels med gasbind. Bruk povidonjod etterfulgt av 70% alkohol for å rengjøre området, og dekk thoraxen med gasbind.Bruk en 4-O sutur under de øvre fortennene og fest den til ankerpunktet for å holde munnen litt åpen og lette kanylering. Trekk halen for å holde kroppen rett, og fest den til OT ved hjelp av tape. Fest de fire lemmer med tape og stram dem på ankerpunktene.Ikke overstretch de fremre lemmer for å unngå åndedrettskompromiss. Bruk tang for å åpne kjeven og løfte tungen. Bruk deretter en belysning for å visualisere halsen og glottis.Sett forsiktig inn en 22 gauge kanyle med en stump avkortet nål gjennom munnen i luftrøret, omtrent en centimeter ned i halsen. Bruk den ene hånden til å holde tungen og beveg den litt oppover med butt tang. Bruk samtidig den andre hånden til å forsiktig sette røret inn i luftrøret.Vær forsiktig så du ikke setter røret inn i spiserøret. Fjern kanylen forsiktig. Før du kobler til ventilatoren, kontroller intubasjonen ved å plassere røret i vannet for at bobler skal dannes.Koble endotrakealrøret til en ventilator satt til 120 per minutt, og tidevannsvolumet justert til 250 mikroliter. Verifiser intubasjon ved å sjekke bilateral symmetrisk brystekspansjon. Fest deretter tilkoblingen til OT med tape for å unngå at den faller av.Plasser EKG-elektroder på potene og koble dem til EKG-opptakeren. Overvåk hjertets elektrofysiologi gjennom hele prosedyren. Fjern gasbindet på thoraxen.Desinfiser snittområdet ved hjelp av tre skrubbesykluser med 70% alkohol. For å redusere forurensning av operasjonsstedet, dekk musen med et sterilt kirurgisk drap med et hull over det kirurgiske feltet. Etter å ha gjort et skrå hudinnsnitt med en skalpell, utsett ribbeina ved å utføre en stump disseksjon av det subkutane vevet.Vær forsiktig så du ikke skader karene, ribbeina og lungene. Bruk sterile bomullsapplikatorer for å stoppe blødningen. Identifiser det tredje interkostalrommet og gjør et snitt på omtrent seks til åtte millimeter.Åpne deretter brysthulen ved å utføre stump disseksjon av vev i interkostalrommet. Vær forsiktig så du ikke skader den indre thoraxarterien. Span intercostal plass ved hjelp av tang.Sett inn pre steriliserte hjemmelagde retractors inn i brystkassen, og trekk tilbake for å spre snittet til omtrent seks millimeter i bredden. Fest tilbaketrekkerne til OT med gummibånd. Fjern forsiktig det omkringliggende vevet for å eksponere hjertet helt.Trekk av perikardiet forsiktig med buede tang uten å skade hjertet. Bruk et dissekerende mikroskop og rett et fokusert og passende lys for LAD-visualisering. Trykk forsiktig på stedet under den valgte ligeringsposisjonen for å forstørre LAD midlertidig, og kontroller deretter LAD på nytt.Under et dissekerende mikroskop, bruk en konisk nål for å passere en 8-0 silke ligatur under LAD. Forsikre deg om at nålen ikke er dyp nok til å komme inn i venstre ventrikkel og ikke for grunt for å unngå å skade LAD. Bind ligaturen med en løs dobbel knute.Plasser en to til tre millimeter PE-10 slange i en sløyfe parallelt med arterien. Stram ligatursløyfen forsiktig til den er rundt arterien og slangen. Fest deretter løkken med en glideknute.Pass på at du ikke skader myokardveggen med overdreven tiltrekkingstrykk. En blekhet farge i den fremre veggen av venstre ventrikkel etter ligering bekrefter opphør av blodstrømmen i LAD. Hvis permanent ligering er nødvendig, fortsett som beskrevet i tekstmanuskriptet.Fjern retractorene fra snittet. Lukk deretter såret midlertidig med en bulldogklemme. Kontroller at musen fortsatt er koblet til ventilatoren.Når iskemiperioden avsluttes, fjern bulldogklemmen og sett inn retractorene for å åpne snittet og avsløre hjertet og ligeringsstedet. Løsne glideknuten og fjern PE-10-slangen. Endring i den bleke fargen til rosa-rød bekrefter restaurering av blodstrømmen.Samtidig, for å oppdage reperfusjon, observer EKG for en potensiell oppløsning av ST-elevasjon. La 8-0 stå ligatur in situ hvis du utfører påfølgende Evans blå og TTC-farging. Ellers fjerner du suturen på dette trinnet.Fjern tilbaketrekkerne og lukk snittet ved å suturere den tredje og fjerde ribben med en 4-O silkesutur. Vær forsiktig så du ikke skader lungen. Trykk forsiktig på brystet mens du knytter suturknutene for å presse ut luft som kan være fanget i brysthulen.Lukk muskellagene med kontinuerlige 4-O silkesuturer. Standardbildene av den eksperimentelle prosessen ble anskaffet fra endotrakeal intubasjon, hudsnitt, torakotomi, LAD-identifikasjon og ligering, til reperfusjon. De representative EKG-bildene verifiserte myokardiskemi og reperfusjon med signifikant ST-elevasjon etter ligering.Og oppløsning av ST-elevasjon etter glideknuten ble løsnet. Før torakotomi er det svært viktig å holde luftveiene åpne, og det viktigste er å sørge for at LAD er godt ligert og unngår skade. Denne prosedyren vil bli etterfulgt av ekkokardiografi for å evaluere hjertefunksjonen, samt TTC for å vurdere myokardskaden.

Research

JoVE Journal

Medicine

Acute Myocardial Infarction in Rats

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular ...

Induction of Myocardial Infarction in Adult Zebrafish Using Cryoinjury

Induksjon av hjerteinfarkt hos Adult sebrafisk Bruke Cryoinjury

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and ...

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

Iskemi-reperfusjon Modell av akutt nyreskade og Post Injury fibrose i Mus

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction

MR og PET i musemodeller av hjerteinfarkt

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ...

Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Hjerteinfarkt og funksjonelle resultatet Vurdering i Pigs

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

En murine modell av myokardiskemi-reperfusjon Injury gjennom Ligation av Left Anterior Synkende Artery

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

Minimal Invasive Kirurgisk prosedyre for å indusere hjerteinfarkt i Mus

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last ...

Induction and Assessment of Ischemia-reperfusion Injury in Langendorff-perfused Rat Hearts

Induksjon og vurdering av iskemi-reperfusjon Injury in Langendorff-perfuserte rottehjerter

The biochemical events surrounding ischemia reperfusion injury in the acute setting are of great importance to furthering novel treatment options for ...

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

Hjerteinfarkt i Neonatal mus, en modell av Cardiac Regeneration

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and ...

Confirmation of Myocardial Ischemia and Reperfusion Injury in Mice Using Surface Pad Electrocardiography

Bekreftelse av myokardiskemi og reperfusjonsskade i Mus Bruke Surface Pad Elektrokardiografi

Many animal models have been established for the study of myocardial remodeling and heart failure due to its status as the number one cause of mortality ...