Name: induction of myocardial infarction and myocardial ischemia-reperfusion injury in mice
Uploaded: 2022-01-19T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Induction of Myocardial Infarction and Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury in Mice at JoVE.com

Эта работа была поддержана Национальным фондом естественных наук Китая (82070317, 81700390 Цзибинь Линь, 8210021880 Бинцзе Лю и 82000428 Боюань Ван) и Национальной ключевой программой исследований и разработок Китая (2017YFA0208000 Шаолинь Хэ).

Исследования на животных были одобрены Комитетом по уходу и использованию животных Хуачжунского университета науки и технологий (Ухань, Китай).
ПРИМЕЧАНИЕ: В качестве моделей используются самцы мышей C57BL/6J (8-10 недель). Мыши имеют свободный доступ к пище и воде и размножаю?...

<ol>
	<li>Reed, G. W., Rossi, J. E., Cannon, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+myocardial+infarction.">Acute myocardial infarction.</a> Lancet. 389 (10065), 197-210 (2017).</li><li>Ibanez, B., Heusch, G., Ovize, M., Van de Werf, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolving+therapies+for+myocardial+ischemia/reperfusion+injury.">Evolving therapies for myocardial ischemia/reperfusion injury.</a> Journal of the American College of Cardiology. 65 (14), 1454-1471 (2015).</li><li>Bryda, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mighty+mouse:+The+impact+of+rodents+on+advances+in+biomedical+research.">The mighty mouse: The impact of rodents on advances in biomedical research.</a> Missouri Medicine. 110 (3), 207-211 (2013).</li><li>Kim, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+closed-chest+model+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion.">A murine closed-chest model of myocardial ischemia and reperfusion.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (65), e3896 (2012).</li><li>Xu, Z., Alloush, J., Beck, E., Weisleder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+through+ligation+of+the+left+anterior+descending+artery.">A murine model of myocardial ischemia-reperfusion injury through ligation of the left anterior descending artery.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (86), e51329 (2014).</li><li>Xu, Z., McElhanon, K. E., Beck, E. X., Weisleder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+myocardial+ischemia-reperfusion+injury.">A murine model of myocardial ischemia-reperfusion injury.</a> Methods in Molecular Biology. 1717, 145-153 (2018).</li><li>Muthuramu, I., Lox, M., Jacobs, F., De Geest, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Permanent+ligation+of+the+left+anterior+descending+coronary+artery+in+mice:+a+model+of+post-myocardial+infarction+remodelling+and+heart+failure.">Permanent ligation of the left anterior descending coronary artery in mice: a model of post-myocardial infarction remodelling and heart failure.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (94), e52206 (2014).</li><li>Reichert, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+left+anterior+descending+(LAD)+coronary+artery+ligation:+An+improved+and+simplified+model+for+myocardial+infarction.">Murine left anterior descending (LAD) coronary artery ligation: An improved and simplified model for myocardial infarction.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (122), e55353 (2017).</li><li>Lugrin, J., Parapanov, R., Krueger, T., Liaudet, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+myocardial+infarction+model+using+permanent+ligation+of+left+anterior+descending+coronary+artery.">Murine myocardial infarction model using permanent ligation of left anterior descending coronary artery.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (150), e59591 (2019).</li><li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardioprotective+effects+of+Puerarin-V+on+isoproterenol-induced+myocardial+infarction+mice+is+associated+with+regulation+of+PPAR-Y/NF-Kappa+B+pathway.">Cardioprotective effects of Puerarin-V on isoproterenol-induced myocardial infarction mice is associated with regulation of PPAR-Y/NF-Kappa B pathway.</a> Molecules. 23 (12), 3322 (2018).</li><li>Vanden Bos, E. J., Mees, B. M., de Waard, M. C., de Crom, R., Duncker, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+model+of+cryoinjury-induced+myocardial+infarction+in+the+mouse:+A+comparison+with+coronary+artery+ligation.">A novel model of cryoinjury-induced myocardial infarction in the mouse: A comparison with coronary artery ligation.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 289 (3), 1291-1300 (2005).</li><li>Wang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cryoinjury+model+to+study+myocardial+infarction+in+the+mouse.">A cryoinjury model to study myocardial infarction in the mouse.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (151), e59958 (2019).</li><li>Brooks, W. W., Garibaldi, B. A., Conrad, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+injury+in+the+mouse+induced+by+transthoracic+cauterization.">Myocardial injury in the mouse induced by transthoracic cauterization.</a> Laboratory Animal Science. 48 (4), 374-378 (1998).</li><li>Tao, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+modeling+and+multimodality+imaging+of+chronic+myocardial+infarction+in+minipigs+induced+by+novel+interventional+embolization+technique.">Preclinical modeling and multimodality imaging of chronic myocardial infarction in minipigs induced by novel interventional embolization technique.</a> EJNMMI Research. 6 (1), 59 (2016).</li><li>Gao, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+and+efficient+model+of+coronary+artery+ligation+and+myocardial+infarction+in+the+mouse.">A novel and efficient model of coronary artery ligation and myocardial infarction in the mouse.</a> Circulation Research. 107 (12), 1445-1453 (2010).</li><li>Scofield, S. L., Singh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Confirmation+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion+injury+in+mice+using+surface+pad+electrocardiography.">Confirmation of myocardial ischemia and reperfusion injury in mice using surface pad electrocardiography.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (117), e54814 (2016).</li><li>Gnyawali, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-frequency+high-resolution+echocardiography:+First+evidence+on+non-invasive+repeated+measure+of+myocardial+strain,+contractility,+and+mitral+regurgitation+in+the+ischemia-reperfused+murine+heart.">High-frequency high-resolution echocardiography: First evidence on non-invasive repeated measure of myocardial strain, contractility, and mitral regurgitation in the ischemia-reperfused murine heart.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (41), e1781 (2010).</li><li>Pistner, A., Belmonte, S., Coulthard, T., Blaxall, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+echocardiography+and+ultrasound+imaging.">Murine echocardiography and ultrasound imaging.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (42), e2100 (2010).</li><li>Shibata, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adiponectin+protects+against+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+through+AMPK-+and+COX-2-dependent+mechanisms.">Adiponectin protects against myocardial ischemia-reperfusion injury through AMPK- and COX-2-dependent mechanisms.</a> Nature Medicine. 11 (10), 1096-1103 (2005).</li><li>Anderson, J. L., Morrow, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+myocardial+infarction.">Acute myocardial infarction.</a> New England Journal of Medicine. 376 (21), 2053-2064 (2017).</li><li>Frank, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+ischemia+reperfusion+injury:+From+basic+science+to+clinical+bedside.">Myocardial ischemia reperfusion injury: From basic science to clinical bedside.</a> Seminars in Cardiothoracic and Vascular Anesthesia. 16 (3), 123-132 (2012).</li><li>Mares, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studying+the+innate+immune+response+to+myocardial+infarction+in+a+highly+efficient+experimental+animal+model.">Studying the innate immune response to myocardial infarction in a highly efficient experimental animal model.</a> Romanian Journal of Cardiology. 31 (3), 573-585 (2021).</li><li>Fernandez, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+coronary+arteries+of+the+C57bl/6+mouse+strains:+Implications+for+comparison+with+mutant+models.">The coronary arteries of the C57bl/6 mouse strains: Implications for comparison with mutant models.</a> Journal of Anatomy. 212 (1), 12-18 (2008).</li><li>Zhang, R., Hess, D. T., Reynolds, J. D., Stamler, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemoglobin+S-nitrosylation+plays+an+essential+role+in+cardioprotection.">Hemoglobin S-nitrosylation plays an essential role in cardioprotection.</a> Journal of Clinical Investigation. 126 (12), 4654-4658 (2016).</li><li>Sorop, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+animal+models+of+coronary+microvascular+dysfunction.">Experimental animal models of coronary microvascular dysfunction.</a> Cardiovascular Research. 116 (4), 756-770 (2020).</li><li>Sicard, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Right+coronary+artery+ligation+in+mice:+A+novel+method+to+investigate+right+ventricular+dysfunction+and+biventricular+interaction.">Right coronary artery ligation in mice: A novel method to investigate right ventricular dysfunction and biventricular interaction.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 316 (3), 684-692 (2019).</li><li>Chen, J., Ceholski, D. K., Liang, L., Fish, K., Hajjar, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variability+in+coronary+artery+anatomy+affects+consistency+of+cardiac+damage+after+myocardial+infarction+in+mice.">Variability in coronary artery anatomy affects consistency of cardiac damage after myocardial infarction in mice.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 313 (2), 275-282 (2017).</li><li>Kato, R., Foex, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+protection+by+anesthetic+agents+against+ischemia-reperfusion+injury:+An+update+for+anesthesiologists.">Myocardial protection by anesthetic agents against ischemia-reperfusion injury: An update for anesthesiologists.</a> Canadian Journal of Anaesthesia. 49 (8), 777-791 (2002).</li></ol>

В последние годы быстрыми темпами развивается создание моделей ИМ и МИРИ в клинических и научных исследованиях20,21. Тем не менее, все еще остаются некоторые вопросы, такие как механизмы действий и способы улучшения ИМ/МИРИ, которые необходимо решить. Здес?...

Острый инфаркт миокарда (ОИМ) является распространенным сердечно-сосудистым заболеванием во всем мире и сопровождается высокойсмертностью1. Достижения в области технологий делают раннюю и эффективную реваскуляризацию доступной для пациентов с ОИМ. После этих процедур у некоторых пациентов может возникнуть ишемически-реперфузионное повреждение миокарда (MIRI)2. Таким образом, большое значение имеет понимание механизмов действия и способов улучшения ИМ/МИРИ. Мыши широко используются в качестве моделей из-за их низкой стоимости, быстрого времени размножения и легкости внесениягенетических изменений. Ученые разработали различные методы моделирования MIRI и MI у животных 4,5,6,7,8,9. Эта стратегия способствует проведению исследований, но различные критерии и методы, используемые исследовательскими группами, усложняют интерпретацию результатов исследовательскими группами.
У мышей инфаркт миокарда индуцировался изопротеренолом10, криотравмой 11,12 или прижиганием13. Инфаркт миокарда может быть легко индуцирован изопротеренолом, но патофизиологический процесс отличается от такового при клиническом инфаркте миокарда. Криотравма-индуцированный инфаркт миокарда имеет плохую консистенцию, вызывает чрезмерное повреждение миокарда вокруг левой передней нисходящей коронарной артерии (LAD) и может легко индуцировать аритмию. Инфаркт миокарда, индуцированный прижиганием, значительно отличается от естественного процесса инфаркта миокарда, и воспалительная реакция в области ожога более интенсивна; Кроме того, хирургический доступ имеет технические трудности. Кроме того, некоторыелаборатории разрабатывают модель инфаркта миокарда у минипигов с использованием баллонной блокады или эмболизации или метода тромбоза с помощью интервенционной техники. Все эти методы могут вызвать окклюзию коронарных артерий напрямую, но необходимость в коронарных ангиографических аппаратах и, прежде всего, слишком тонкие коронарные артерии мыши делают эти операции нецелесообразными. Для MIRI различия между разными моделями были довольно скромными, например, использование респираторов/микроманипуляций или нет 5,6.
Здесь описан простой и надежный метод, который может индуцировать ИМ и модель MIRI, адаптированная из ранее опубликованных методов 4,5,6,7,8,9,15. Этот метод позволяет моделировать патофизиологические процессы путем прямой блокады LAD посредством лигирования. Более того, снимая лигирование, эта модель также может имитировать реперфузионное повреждение. В этом протоколе для визуализации LAD используется препарирующий микроскоп. После этого исследователь может легко идентифицировать LAD. Впоследствии точное лигирование LAD приводит к воспроизводимой и предсказуемой окклюзии крови и ишемии желудочков. Кроме того, изменения электрокардиографии (ЭКГ) могут быть использованы для подтверждения ишемии и реперфузии в дополнение к изменениям цвета LAD, наблюдаемым под микроскопом. Эта стратегия приводит к сокращению продолжительности процедуры, снижению риска хирургических осложнений и меньшему количеству экспериментальных мышей. Также описаны методы теста на тропонин-Т, УЗИ сердца и окрашивания трифенилтетразолия хлорида (ТТС). В целом, этот протокол полезен для изучения механизма ИМ/МИР, а также для разработки лекарственных препаратов.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.9 % sodium chloride solution</td>
			<td>Kelun Industry Group,China</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4% paraformaldehyde fixing solution</td>
			<td>Servicebio,China</td>
			<td>G1101</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 silk suture</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products,China</td>
			<td>C412</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8-0 suture</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products,China</td>
			<td>H801</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>IsoReag,China</td>
			<td>IR-11190</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camera</td>
			<td>Canon,Japan</td>
			<td>EOS 80D</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Depilatory cream</td>
			<td>Veet,French</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Elecsys Troponin T hs STAT</td>
			<td>Roche,Germany</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrochemical luminescence immunoanalyzer</td>
			<td>Roche,Germany</td>
			<td>Elecsys 2010</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Evans blue</td>
			<td>Sigma,America</td>
			<td>E2129</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye scissors</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>JC2303</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Haemostatic forceps</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>J31020</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High frequency in vivo imaging systems</td>
			<td>Visualsonics,Canada</td>
			<td>Vevo2100</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ibuprofen</td>
			<td>PerFeMiKer,China</td>
			<td>CLS-12921</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intravenous catheter</td>
			<td>Introcan,Germany</td>
			<td>4254090B</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Sigma-Aldrich,America</td>
			<td>&#160;K2753</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical alcohol</td>
			<td>Huichang ,China</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microneedle holders</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>WA2040</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscopic shears</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>WA1040</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgical forceps</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>WA3020</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse electrocardiograph</td>
			<td>Techman,China</td>
			<td>BL-420F</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holders</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>JC3202</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>operating floor</td>
			<td>Chico,China</td>
			<td>ZK-HJPT</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-10 tube</td>
			<td>Huamei,China</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbital</td>
			<td>Merck,America</td>
			<td>1030001</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Ventilator</td>
			<td>Shanghai Alcott Biotech,China</td>
			<td>ALC-V8S-P</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo microscope</td>
			<td>Aomei Industry,China</td>
			<td>SZM0745-STL3-T3</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical thermostatic heating pad</td>
			<td>Globalebio, China</td>
			<td>GE0-20W</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triphenyltetrazolium chloride</td>
			<td>Servicebio,China</td>
			<td>G1017</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Huamaike Biochemicals and Life Science Research Prouducts,China</td>
			<td>323004</td>
			<td>-</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

induction of myocardial infarction and myocardial ischemia-reperfusion injury in mice

Острый инфаркт миокарда является распространенным сердечно-сосудистым заболеванием с высокой смертностью. Реперфузионное повреждение миокарда может противодействовать благотворному эффекту сердечного оттока и индуцировать вторичное повреждение миокарда. Простая и воспроизводимая модель инфаркта миокарда и ишемически-реперфузионного повреждения миокарда является хорошим инструментом для исследователей. Описан настраиваемый метод создания модели инфаркта миокарда (ИМ) и МИРИ путем прецизионного перевязки левой передней нисходящей коронарной артерии (ЛДП) с помощью микроманипуляций. Точное и воспроизводимое расположение лигатуры LAD помогает получить стабильные результаты при травме сердца. Изменения сегмента ST могут помочь определить точность модели. Для оценки повреждения миокарда используется сывороточный уровень сердечного тропонина Т (cTnT), для оценки систолической функции миокарда используется ультразвуковое исследование сердца, а для измерения размера инфаркта используется окрашивание Evans-Blue/трифенилтетразолия хлоридом. В целом, этот протокол сокращает продолжительность процедуры, обеспечивает контролируемый размер инфаркта и улучшает выживаемость мышей.

Экспериментальный рабочий процесс показан на рисунке 1A. Исследователь может запланировать временные узлы в соответствии с планом эксперимента после начала исследования. Продолжительность лигирования LAD определяется в соответствии с целью исследования. Для инфаркта ?...

Watch this Scientific Journal Video about Induction of Myocardial Infarction and Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury in Mice at JoVE.com

Induction of Myocardial Infarction and Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury in Mice

Здесь мы описываем простой и воспроизводимый метод, который может индуцировать инфаркт миокарда или ишемически-реперфузионное повреждение миокарда у мышей путем прецизионного перевязки левой передней нисходящей коронарной артерии с помощью микроманипуляций.

Индукция инфаркта миокарда и ишемически-реперфузионного повреждения миокарда у мышей

Acute myocardial infarction is a common cardiovascular disease with high mortality. Myocardial reperfusion injury can counteract the beneficial effects of ...

В данном исследовании описывается настраиваемый метод создания модели функции миокарда в Miro путем прецизионного перевязки левой передней нисходящей коронарной артерии с помощью микроманипуляций. Этот протокол сокращает продолжительность процедуры, обеспечивает контролируемый размер инфаркта и улучшает выживаемость мышей. Используйте прямоугольный OT с грелкой, предварительно нагретой до 37 градусов Цельсия на протяжении всей хирургической процедуры.Перед процедурой продезинфицируйте доску ультрафиолетом и 70%-ным спиртом. Начните с того, что положите мышь на ОТ в положение лежа на спине, подложив под голову марлю, чтобы избежать перегрева глаз. Нанесите офтальмологическую мазь на глаза, чтобы предотвратить их пересыхание.Нанесите крем для удаления шерсти на грудную клетку и равномерно помассируйте стерильным ватным тампоном в течение одной минуты. Протрите лишнюю шерсть марлей. Используйте повидон-йод, а затем 70%-ный спирт, чтобы очистить эту область, и накройте грудную клетку марлей.Используйте шов 4-O под верхними резцами и закрепите его в точке крепления, чтобы рот оставался слегка открытым и облегчал канюлю. Потяните за хвост, чтобы тело держалось прямо, и закрепите его к ОТ с помощью скотча. Закрепите четыре конечности скотчем и затяните их на опорных точках.Не перенапрягайте передние конечности, чтобы избежать нарушения дыхания. Используйте щипцы, чтобы открыть челюсть и приподнять язык. Затем с помощью осветителя визуализируйте горло и голосовую щель.Осторожно введите канюлю 22 калибра с тупой усеченной иглой через рот в трахею примерно на один сантиметр ниже горла. Одной рукой придерживайте язык и слегка двигайте его вверх тупыми щипцами. Одновременно другой рукой аккуратно введите трубку в трахею.Будьте осторожны, чтобы не ввести трубку в пищевод. Аккуратно извлеките иглу. Перед подключением к аппарату искусственной вентиляции легких проверьте интубацию, поместив трубку в воду для образования пузырьков.Подключите эндотрахеальную трубку к аппарату искусственной вентиляции легких, настроенному на 120 в минуту, и дыхательному объему, отрегулированному до 250 микролитров. Проверьте интубацию, проверив двустороннее симметричное расширение грудной клетки. Затем закрепите соединение с ОТ скотчем, чтобы избежать его отвала.Поместите электроды ЭКГ на лапы и подключите их к регистратору ЭКГ. Контролируйте электрофизиологию сердца на протяжении всей процедуры. Снимите марлю с грудной клетки.Продезинфицируйте область разреза с помощью трех циклов скрабирования с 70% спиртом. Чтобы уменьшить загрязнение операционного поля, накройте мышь стерильной хирургической простыней с отверстием над операционным полем. Сделав скальпелем косой разрез кожи, обнажают ребра, проводя тупое рассечение подкожных тканей.Будьте осторожны, чтобы не повредить сосуды, ребра и легкие. Используйте стерильные ватные аппликаторы, чтобы остановить кровотечение. Определите третье межреберье и сделайте разрез около шести-восьми миллиметров.Затем вскрывают грудную полость, проводя тупое рассечение тканей в межреберье. Будьте осторожны, чтобы не травмировать внутреннюю грудную артерию. Протяните межреберье с помощью щипцов.Вставьте предварительно стерилизованные самодельные ретракторы в грудную клетку и потяните назад, чтобы расширить разрез примерно до шести миллиметров в ширину. Прикрепите втягивающие устройства к ОТ с помощью резинок. Осторожно удалите окружающие ткани, чтобы полностью обнажить сердце.Аккуратно оттяните перикард изогнутыми щипцами, не травмируя сердце. Используйте препарирующий микроскоп и направляйте сфокусированный и подходящий свет для визуализации LAD. Осторожно надавите на участок под выбранным положением лигирования, чтобы временно увеличить LAD, а затем повторно проверьте LAD.Под препарирующим микроскопом используйте коническую иглу, чтобы пропустить 8-0 шелковая лигатура под LAD. Убедитесь, что игла находится недостаточно глубоко, чтобы войти в левый желудочек, и не слишком глубоко, чтобы не повредить LAD. Завяжите лигатуру свободным двойным узлом.Поместите двух-трехмиллиметровую трубку из ПЭ-10 в петлю, параллельную артерии. Осторожно затяните лигатурную петлю, пока она не окажется вокруг артерии и трубки. Затем закрепите петлю скользящим узлом.Следите за тем, чтобы не повредить стенку миокарда чрезмерным стягивающим давлением. Бледная окраска передней стенки левого желудочка после перевязки подтверждает прекращение кровотока в ЛАД. Если требуется постоянная перевязка, действуйте, как описано в текстовой рукописи.Извлеките втягивающие устройства из разреза. Затем временно закройте рану бульдожьим зажимом. Убедитесь, что мышь по-прежнему подключена к аппарату искусственной вентиляции легких.Когда период ишемии закончится, снимите бульдожий зажим и вставьте ретракторы, чтобы открыть разрез и обнажить сердце и место перевязки. Развяжите скользящий узел и снимите трубку ПЭ-10. Изменение бледной окраски на розово-красную свидетельствует о восстановлении кровотока.Одновременно, чтобы обнаружить реперфузию, наблюдают ЭКГ на предмет потенциального растворения подъема сегмента ST. Оставьте 8-0 лигатуру in situ при последующем окрашивании в синий цвет Эванса и TTC. В противном случае снимите шов на этом этапе.Снимите ретракторы и закройте разрез, зашив третье и четвертое ребра шелковым шовным швом 4-O. Будьте осторожны, чтобы не повредить легкое. Осторожно надавите на грудную клетку, завязывая шовные узлы, чтобы вытолкнуть воздух, который может попасть в грудную полость.Закройте мышечные слои непрерывными шелковыми швами 4-O. Стандартные изображения экспериментального процесса были получены от эндотрахеальной интубации, разреза кожи, торакотомии, идентификации и перевязки LAD до реперфузии. Репрезентативные изображения ЭКГ верифицировали ишемию миокарда и реперфузию со значительным повышением сегмента ST после перевязки.И растворение подъема ST после того, как узел скольжения был развязан. Перед торакотомией очень важно держать дыхательные пути открытыми, и самое главное – убедиться, что LAD прочно перевязан и избежать повреждений. За этой процедурой последует эхокардиография для оценки сердечной функции, а также ТТС для оценки повреждения миокарда.

Research

JoVE Journal

Medicine

Acute Myocardial Infarction in Rats

Острого инфаркта миокарда у крыс

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular ...

Induction of Myocardial Infarction in Adult Zebrafish Using Cryoinjury

Индукции инфаркта миокарда у взрослых данио рерио использование Cryoinjury

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and ...

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

Ишемии-реперфузии Модель острого почечного повреждения и фиброза после травмы у мышей

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction

МРТ и ПЭТ в мыши модели инфаркта миокарда

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ...

Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Инфаркт миокарда и функциональная оценка результат в Свиней

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Мышиной модели ишемии миокарда-реперфузии через перевязки левой передней нисходящей артерии

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

Минимально инвазивная хирургическая процедура индукции инфаркта миокарда у мышей

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last ...

Induction and Assessment of Ischemia-reperfusion Injury in Langendorff-perfused Rat Hearts

Индукция и оценка ишемии-реперфузии в Лангендорфа-перфузии сердца крыс

The biochemical events surrounding ischemia reperfusion injury in the acute setting are of great importance to furthering novel treatment options for ...

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

Инфаркт миокарда у новорожденных мышей, Модель регенерации сердца

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and ...

Confirmation of Myocardial Ischemia and Reperfusion Injury in Mice Using Surface Pad Electrocardiography

Подтверждение инфарктом ишемией и реперфузии у мышей с использованием поверхности Pad электрокардиографии

Many animal models have been established for the study of myocardial remodeling and heart failure due to its status as the number one cause of mortality ...