Name: induction of myocardial infarction and myocardial ischemia-reperfusion injury in mice
Uploaded: 2022-01-19T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Induction of Myocardial Infarction and Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury in Mice at JoVE.com

Detta arbete stöddes av National Natural Science Foundation of China (82070317, 81700390 till Jibin Lin, 8210021880 till Bingjie Lv och 82000428 till Boyuan Wang) och National Key R&D Program of China (2017YFA0208000 till Shaolin He).

Djurstudier har godkänts av Animal Care and Utilization Committee vid Huazhong University of Science and Technology (Wuhan, Kina).
OBS: Manliga C57BL/6J-möss (8-10 veckor) används som modeller. Möss har fri tillgång till mat och vatten och föds upp under specifika patogenfria förhållanden. Rummet hålls under kontrollerad temperatur (22 °C ± 2 °C) och luftfuktighet (45%-65%). Möss utsätts för en 12-timmars ljus/mörk miljö på djurvårdsanläggningen vid Tongji Medical School (W...

<ol>
	<li>Reed, G. W., Rossi, J. E., Cannon, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+myocardial+infarction.">Acute myocardial infarction.</a> Lancet. 389 (10065), 197-210 (2017).</li><li>Ibanez, B., Heusch, G., Ovize, M., Van de Werf, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolving+therapies+for+myocardial+ischemia/reperfusion+injury.">Evolving therapies for myocardial ischemia/reperfusion injury.</a> Journal of the American College of Cardiology. 65 (14), 1454-1471 (2015).</li><li>Bryda, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mighty+mouse:+The+impact+of+rodents+on+advances+in+biomedical+research.">The mighty mouse: The impact of rodents on advances in biomedical research.</a> Missouri Medicine. 110 (3), 207-211 (2013).</li><li>Kim, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+closed-chest+model+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion.">A murine closed-chest model of myocardial ischemia and reperfusion.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (65), e3896 (2012).</li><li>Xu, Z., Alloush, J., Beck, E., Weisleder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+through+ligation+of+the+left+anterior+descending+artery.">A murine model of myocardial ischemia-reperfusion injury through ligation of the left anterior descending artery.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (86), e51329 (2014).</li><li>Xu, Z., McElhanon, K. E., Beck, E. X., Weisleder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+myocardial+ischemia-reperfusion+injury.">A murine model of myocardial ischemia-reperfusion injury.</a> Methods in Molecular Biology. 1717, 145-153 (2018).</li><li>Muthuramu, I., Lox, M., Jacobs, F., De Geest, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Permanent+ligation+of+the+left+anterior+descending+coronary+artery+in+mice:+a+model+of+post-myocardial+infarction+remodelling+and+heart+failure.">Permanent ligation of the left anterior descending coronary artery in mice: a model of post-myocardial infarction remodelling and heart failure.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (94), e52206 (2014).</li><li>Reichert, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+left+anterior+descending+(LAD)+coronary+artery+ligation:+An+improved+and+simplified+model+for+myocardial+infarction.">Murine left anterior descending (LAD) coronary artery ligation: An improved and simplified model for myocardial infarction.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (122), e55353 (2017).</li><li>Lugrin, J., Parapanov, R., Krueger, T., Liaudet, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+myocardial+infarction+model+using+permanent+ligation+of+left+anterior+descending+coronary+artery.">Murine myocardial infarction model using permanent ligation of left anterior descending coronary artery.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (150), e59591 (2019).</li><li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardioprotective+effects+of+Puerarin-V+on+isoproterenol-induced+myocardial+infarction+mice+is+associated+with+regulation+of+PPAR-Y/NF-Kappa+B+pathway.">Cardioprotective effects of Puerarin-V on isoproterenol-induced myocardial infarction mice is associated with regulation of PPAR-Y/NF-Kappa B pathway.</a> Molecules. 23 (12), 3322 (2018).</li><li>Vanden Bos, E. J., Mees, B. M., de Waard, M. C., de Crom, R., Duncker, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+model+of+cryoinjury-induced+myocardial+infarction+in+the+mouse:+A+comparison+with+coronary+artery+ligation.">A novel model of cryoinjury-induced myocardial infarction in the mouse: A comparison with coronary artery ligation.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 289 (3), 1291-1300 (2005).</li><li>Wang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cryoinjury+model+to+study+myocardial+infarction+in+the+mouse.">A cryoinjury model to study myocardial infarction in the mouse.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (151), e59958 (2019).</li><li>Brooks, W. W., Garibaldi, B. A., Conrad, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+injury+in+the+mouse+induced+by+transthoracic+cauterization.">Myocardial injury in the mouse induced by transthoracic cauterization.</a> Laboratory Animal Science. 48 (4), 374-378 (1998).</li><li>Tao, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+modeling+and+multimodality+imaging+of+chronic+myocardial+infarction+in+minipigs+induced+by+novel+interventional+embolization+technique.">Preclinical modeling and multimodality imaging of chronic myocardial infarction in minipigs induced by novel interventional embolization technique.</a> EJNMMI Research. 6 (1), 59 (2016).</li><li>Gao, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+and+efficient+model+of+coronary+artery+ligation+and+myocardial+infarction+in+the+mouse.">A novel and efficient model of coronary artery ligation and myocardial infarction in the mouse.</a> Circulation Research. 107 (12), 1445-1453 (2010).</li><li>Scofield, S. L., Singh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Confirmation+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion+injury+in+mice+using+surface+pad+electrocardiography.">Confirmation of myocardial ischemia and reperfusion injury in mice using surface pad electrocardiography.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (117), e54814 (2016).</li><li>Gnyawali, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-frequency+high-resolution+echocardiography:+First+evidence+on+non-invasive+repeated+measure+of+myocardial+strain,+contractility,+and+mitral+regurgitation+in+the+ischemia-reperfused+murine+heart.">High-frequency high-resolution echocardiography: First evidence on non-invasive repeated measure of myocardial strain, contractility, and mitral regurgitation in the ischemia-reperfused murine heart.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (41), e1781 (2010).</li><li>Pistner, A., Belmonte, S., Coulthard, T., Blaxall, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+echocardiography+and+ultrasound+imaging.">Murine echocardiography and ultrasound imaging.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (42), e2100 (2010).</li><li>Shibata, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adiponectin+protects+against+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+through+AMPK-+and+COX-2-dependent+mechanisms.">Adiponectin protects against myocardial ischemia-reperfusion injury through AMPK- and COX-2-dependent mechanisms.</a> Nature Medicine. 11 (10), 1096-1103 (2005).</li><li>Anderson, J. L., Morrow, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+myocardial+infarction.">Acute myocardial infarction.</a> New England Journal of Medicine. 376 (21), 2053-2064 (2017).</li><li>Frank, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+ischemia+reperfusion+injury:+From+basic+science+to+clinical+bedside.">Myocardial ischemia reperfusion injury: From basic science to clinical bedside.</a> Seminars in Cardiothoracic and Vascular Anesthesia. 16 (3), 123-132 (2012).</li><li>Mares, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studying+the+innate+immune+response+to+myocardial+infarction+in+a+highly+efficient+experimental+animal+model.">Studying the innate immune response to myocardial infarction in a highly efficient experimental animal model.</a> Romanian Journal of Cardiology. 31 (3), 573-585 (2021).</li><li>Fernandez, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+coronary+arteries+of+the+C57bl/6+mouse+strains:+Implications+for+comparison+with+mutant+models.">The coronary arteries of the C57bl/6 mouse strains: Implications for comparison with mutant models.</a> Journal of Anatomy. 212 (1), 12-18 (2008).</li><li>Zhang, R., Hess, D. T., Reynolds, J. D., Stamler, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemoglobin+S-nitrosylation+plays+an+essential+role+in+cardioprotection.">Hemoglobin S-nitrosylation plays an essential role in cardioprotection.</a> Journal of Clinical Investigation. 126 (12), 4654-4658 (2016).</li><li>Sorop, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+animal+models+of+coronary+microvascular+dysfunction.">Experimental animal models of coronary microvascular dysfunction.</a> Cardiovascular Research. 116 (4), 756-770 (2020).</li><li>Sicard, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Right+coronary+artery+ligation+in+mice:+A+novel+method+to+investigate+right+ventricular+dysfunction+and+biventricular+interaction.">Right coronary artery ligation in mice: A novel method to investigate right ventricular dysfunction and biventricular interaction.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 316 (3), 684-692 (2019).</li><li>Chen, J., Ceholski, D. K., Liang, L., Fish, K., Hajjar, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variability+in+coronary+artery+anatomy+affects+consistency+of+cardiac+damage+after+myocardial+infarction+in+mice.">Variability in coronary artery anatomy affects consistency of cardiac damage after myocardial infarction in mice.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 313 (2), 275-282 (2017).</li><li>Kato, R., Foex, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+protection+by+anesthetic+agents+against+ischemia-reperfusion+injury:+An+update+for+anesthesiologists.">Myocardial protection by anesthetic agents against ischemia-reperfusion injury: An update for anesthesiologists.</a> Canadian Journal of Anaesthesia. 49 (8), 777-791 (2002).</li></ol>

Under de senaste åren har skapandet av modeller för MI och MIRI i klinisk och vetenskaplig forskning utvecklats snabbt20,21. Det finns dock fortfarande några frågor, såsom verkningsmekanismerna och hur man kan förbättra MIRI/MIRI, som måste lösas. Här beskrivs ett modifierat protokoll för att etablera en musmodell av MI och MIRI. Flera viktiga punkter måste övervägas noggrant.
Den första nyckelpunkten är endotrakeal int...

Akut hjärtinfarkt (AMI) är en vanlig hjärt-kärlsjukdom över hela världen och medför hög dödlighet1. Tekniska framsteg gör tidig och effektiv revaskularisering tillgänglig för AMI-patienter. Efter dessa behandlingar hos vissa patienter kan myokardiell ischemi-reperfusionsskada (MIRI) uppstå2. Det är därför av stor betydelse att förstå verkningsmekanismerna och hur man kan förbättra MIRI. Möss används ofta som modeller på grund av deras låga kostnad, snabba avelstid och lätthet att göra genetiska förändringar3. Forskare har utvecklat olika metoder för att modellera MIRI och MI i djur 4,5,6,7,8,9. Strategin främjar forskning, men de olika kriterier och metoder som används försvårar tolkningen av resultaten bland forskargrupperna.
Hos möss har hjärtinfarkt inducerats av isoproterenol10, kryoskada 11,12 eller kauterisering13. Hjärtinfarkt kan lätt induceras av isoproterenol, men den patofysiologiska processen skiljer sig från den vid klinisk hjärtinfarkt. Kryoskadeinducerad hjärtinfarkt har dålig konsistens, framkallar överdriven myokardskada runt vänster främre nedåtgående kranskärl (LAD) och kan lätt inducera arytmi. Kauteriseringsinducerad hjärtinfarkt skiljer sig ganska mycket från den naturliga processen för hjärtinfarkt, och den inflammatoriska reaktionen i det brännande området är mer intensiv; Dessutom har det kirurgiska tillvägagångssättet tekniska svårigheter. Dessutom finns det några laboratorier14 som utvecklar MI-modell hos minigrisar med hjälp av ballongblockering eller embolisering eller trombosmetod genom interventionsteknik. Alla dessa metoder kan orsaka ocklusion av kranskärl direkt, men att behöva kranskärlsröntgenapparater och framför allt de för tunna muskranskärlen gör att dessa operationer inte är praktiska. För MIRI var skillnaderna mellan olika modeller ganska blygsamma, till exempel användning av respiratorer/mikromanipulation eller inte 5,6.
Här beskrivs en enkel och tillförlitlig metod som kan inducera hjärtinfarkt och MIRI-modellen, anpassad från tidigare publicerade metoder 4,5,6,7,8,9,15. Denna metod kan simulera patofysiologiska processer genom direkt blockad av LAD genom ligering. Dessutom, genom att avlasta ligeringen, kan denna modell också simulera reperfusionsskada. I detta protokoll används ett dissekerande mikroskop för LAD-visualisering. Sedan kan forskaren lätt identifiera LAD. Därefter leder noggrann ligering av LAD till reproducerbar och förutsägbar blodocklusion och ventrikulär ischemi. Dessutom kan elektrokardiografiförändringar (EKG) användas för att bekräfta ischemi och reperfusion utöver de färgförändringar av LAD som observeras under ett mikroskop. Denna strategi leder till en kortare ingreppstid, lägre risk för kirurgiska komplikationer och färre experimentella möss behövs. Metoderna för troponin-T-test, hjärtultraljud och trifenyltetrazoliumklorid (TTC) färgning beskrivs också. Sammantaget är detta protokoll användbart för studier av MI/MIR-mekanismen, såväl som för läkemedelsupptäckt.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.9 % sodium chloride solution</td>
			<td>Kelun Industry Group,China</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4% paraformaldehyde fixing solution</td>
			<td>Servicebio,China</td>
			<td>G1101</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 silk suture</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products,China</td>
			<td>C412</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8-0 suture</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products,China</td>
			<td>H801</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>IsoReag,China</td>
			<td>IR-11190</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camera</td>
			<td>Canon,Japan</td>
			<td>EOS 80D</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Depilatory cream</td>
			<td>Veet,French</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Elecsys Troponin T hs STAT</td>
			<td>Roche,Germany</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrochemical luminescence immunoanalyzer</td>
			<td>Roche,Germany</td>
			<td>Elecsys 2010</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Evans blue</td>
			<td>Sigma,America</td>
			<td>E2129</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye scissors</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>JC2303</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Haemostatic forceps</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>J31020</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High frequency in vivo imaging systems</td>
			<td>Visualsonics,Canada</td>
			<td>Vevo2100</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ibuprofen</td>
			<td>PerFeMiKer,China</td>
			<td>CLS-12921</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intravenous catheter</td>
			<td>Introcan,Germany</td>
			<td>4254090B</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Sigma-Aldrich,America</td>
			<td>&#160;K2753</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical alcohol</td>
			<td>Huichang ,China</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microneedle holders</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>WA2040</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscopic shears</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>WA1040</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgical forceps</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>WA3020</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse electrocardiograph</td>
			<td>Techman,China</td>
			<td>BL-420F</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holders</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>JC3202</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>operating floor</td>
			<td>Chico,China</td>
			<td>ZK-HJPT</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-10 tube</td>
			<td>Huamei,China</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbital</td>
			<td>Merck,America</td>
			<td>1030001</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Ventilator</td>
			<td>Shanghai Alcott Biotech,China</td>
			<td>ALC-V8S-P</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo microscope</td>
			<td>Aomei Industry,China</td>
			<td>SZM0745-STL3-T3</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical thermostatic heating pad</td>
			<td>Globalebio, China</td>
			<td>GE0-20W</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triphenyltetrazolium chloride</td>
			<td>Servicebio,China</td>
			<td>G1017</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Huamaike Biochemicals and Life Science Research Prouducts,China</td>
			<td>323004</td>
			<td>-</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

induction of myocardial infarction and myocardial ischemia-reperfusion injury in mice

Akut hjärtinfarkt är en vanlig hjärt-kärlsjukdom med hög dödlighet. Myokardreperfusionsskada kan motverka de positiva effekterna av hjärtreflow och inducera sekundär myokardskada. En enkel och reproducerbar modell av hjärtinfarkt och hjärtischemi-reperfusionsskada är ett bra verktyg för forskare. Här beskrivs en anpassningsbar metod för att skapa en modell för hjärtinfarkt (MI) och MIRI genom precisionsligering av vänster främre nedåtgående kranskärl (LAD) genom mikromanipulation. Exakt och reproducerbar ligaturpositionering av LAD hjälper till att få konsekventa resultat för hjärtskada. ST-segmentsändringar kan hjälpa till att identifiera modellens noggrannhet. Serumnivån av hjärttroponin T (cTnT) används för att bedöma hjärtmuskelskadan, hjärtultraljud används för att utvärdera myokardens systoliska funktion och Evans-Blue/trifenyltetrazoliumkloridfärgning används för att mäta infarktstorleken. I allmänhet minskar detta protokoll procedurens varaktighet, säkerställer kontrollerbar infarktstorlek och förbättrar musens överlevnad.

Det experimentella arbetsflödet visas i figur 1A. Forskaren kan schemalägga tidsnoderna enligt den experimentella designen vid studiestart. Varaktigheten av LAD-ligering är enligt forskningssyftet. För hjärtinfarkt kan forskningen bortse från reperfusionssteget. Hjärtultraljud är tillgängligt i olika stadier av studien eftersom det är icke-invasivt, medan Evans-Blue/TTC-färgning endast kan utföras när musen offras. För forskning som fokuserar på fibros och ventrikelremodelleri...

Watch this Scientific Journal Video about Induction of Myocardial Infarction and Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury in Mice at JoVE.com

Induction of Myocardial Infarction and Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury in Mice

Här beskriver vi en enkel och reproducerbar metod som kan inducera hjärtinfarkt eller myokardiell ischemi-reperfusionsskada hos möss genom precisionsligering av vänster främre nedåtgående kranskärl genom mikromanipulation.

Induktion av hjärtinfarkt och myokardiell ischemi-reperfusionsskada hos möss

Acute myocardial infarction is a common cardiovascular disease with high mortality. Myocardial reperfusion injury can counteract the beneficial effects of ...

Denna studie beskriver en anpassningsbar metod för att skapa en myokardfunktionsmodell i Miro genom precisionsligering av vänster främre nedåtgående kranskärl genom mikromanipulation. Detta protokoll minskar procedurens varaktighet, säkerställer kontrollerbar infarktstorlek och förbättrar musens överlevnad. Använd en rektangulär OT med en värmedyna förvärmd till 37 grader Celsius under hela det kirurgiska ingreppet.Desinficera brädan med ultraviolett ljus och 70 % alkohol före proceduren. Börja med att placera musen på OT i ryggläge med gasbinda under huvudet för att undvika överhettning av ögonen. Applicera ögonsalva på ögonen för att förhindra att de torkar ut.Använd en pälsborttagningskräm på bröstkorgen och massera jämnt med en steril bomullspinne i en minut. Torka av överflödig päls med gasbinda. Använd povidonjod följt av 70 % alkohol för att rengöra området och täck bröstkorgen med gasbinda.Använd en 4-O-sutur under de övre framtänderna och fäst den vid förankringspunkten för att hålla munnen något öppen och underlätta kanylering. Dra i svansen för att hålla kroppen rak och fäst den vid OT med hjälp av tejp. Fäst de fyra lemmarna med tejp och dra åt dem på förankringspunkterna.Översträck inte de främre extremiteterna för att undvika andningsproblem. Använd en pincett för att öppna käken och lyfta tungan. Använd sedan en illuminator för att visualisera halsen och glottis.För försiktigt in en 22 gauge kanyl med en trubbig avkortad nål genom munnen in i luftstrupen, cirka en centimeter ner i halsen. Använd en hand för att hålla tungan och flytta den något uppåt med en trubbig pincett. Använd samtidigt den andra handen för att försiktigt föra in slangen i luftstrupen.Var försiktig så att du inte för in slangen i matstrupen. Ta försiktigt bort nålen. Innan du ansluter till ventilatorn, kontrollera intubationen genom att placera slangen i vattnet för att bubblor ska bildas.Anslut endotrakealtuben till en ventilator inställd på 120 per minut och tidalvolymen justerad till 250 mikroliter. Verifiera intubationen genom att kontrollera bilateral symmetrisk bröstkorgsexpansion. Fäst sedan anslutningen till OT med tejp för att undvika att den faller av.Placera EKG-elektroder på tassarna och anslut dem till EKG-inspelaren. Övervaka hjärtats elektrofysiologi under hela proceduren. Ta bort gasbindan på bröstkorgen.Desinficera snittområdet med tre skrubbcykler med 70 % alkohol. För att minska kontamineringen av operationsområdet, täck musen med ett sterilt kirurgiskt draperi med ett hål över operationsområdet. Efter att ha gjort ett snett hudsnitt med en skalpell, exponera revbenen genom att utföra en trubbig dissektion av de subkutana vävnaderna.Var försiktig så att du inte skadar kärlen, revbenen och lungorna. Använd sterila bomullsapplikatorer för att stoppa blödningen. Identifiera det tredje interkostala utrymmet och gör ett snitt på cirka sex till åtta millimeter.Öppna sedan brösthålan genom att utföra trubbig dissektion av vävnader i det interkostala utrymmet. Var försiktig så att du inte skadar den inre bröstpulsådern. Spänn över det interkostala utrymmet med hjälp av pincett.Sätt in försteriliserade hemmagjorda upprullningsdon i bröstkorgen och dra tillbaka för att sprida snittet till cirka sex millimeter i bredd. Fäst upprullningsdonen på OT med gummiband. Ta försiktigt bort de omgivande vävnaderna för att exponera hjärtat helt.Dra försiktigt av hjärtsäcken med en böjd pincett utan att skada hjärtat. Använd ett dissekerande mikroskop och rikta ett fokuserat och lämpligt ljus för LAD-visualisering. Tryck försiktigt på platsen under den valda ligeringspositionen för att tillfälligt förstora LAD och kontrollera sedan LAD igen.Under ett dissekerande mikroskop, använd en avsmalnande nål för att passera en 8-0 silkesligatur under LAD. Se till att nålen inte är tillräckligt djup för att komma in i vänster kammare och inte för grund för att undvika att skada LAD. Knyt ligaturen med en lös dubbelknut.Placera en två till tre millimeter PE-10-slang i en ögla parallellt med artären. Dra åt ligaturöglan försiktigt tills den är runt artären och slangen. Fäst sedan öglan med en glidknut.Var försiktig så att du inte skadar myokardväggen med överdrivet åtdragningstryck. En blek färgning i den främre väggen av vänster kammare efter ligering bekräftar upphörande av blodflödet i LAD. Om permanent ligering krävs, fortsätt enligt beskrivningen i textmanuskriptet.Ta bort upprullningsdonen från snittet. Stäng sedan såret tillfälligt med en bulldog-klämma. Se till att musen fortsätter att vara ansluten till ventilatorn.När ischemperioden är över, ta bort bulldog-klämman och sätt in upprullningsdonen för att öppna snittet och exponera hjärtat och ligeringsstället. Lossa glidknuten och ta bort PE-10-slangen. Förändring i den bleka färgen till rosa-röd bekräftar att blodflödet återställs.Samtidigt, för att detektera reperfusion, observera EKG för en potentiell upplösning av ST-höjning. Lämna 8-0 ligatur in situ om efterföljande Evans blå och TTC-färgning utförs. Annars, ta bort suturen i detta steg.Ta bort upprullningsdonen och stäng snittet genom att suturera de tredje och fjärde revbenen med en 4-O silkessutur. Var försiktig så att du inte skadar lungan. Tryck försiktigt på bröstet samtidigt som du knyter suturknutarna för att trycka ut eventuell luft som kan ha fastnat i brösthålan.Stäng muskellagren med kontinuerliga 4-O silkessuturer. Standardbilderna av den experimentella processen erhölls från endotrakeal intubation, hudsnitt, torakotomi, LAD-identifiering och ligering till reperfusion. De representativa EKG-bilderna verifierade myokardischemi och reperfusion med signifikant ST-förhöjning efter ligering.Och upplösning av ST-höjning efter att slipknuten var oknuten. Före torakotomin är det mycket viktigt att hålla luftvägarna öppna, och det viktigaste är att se till att LAD är ordentligt ligerad och undvika skador. Denna procedur kommer att följas av ekokardiografi för att utvärdera hjärtfunktionen samt TTC för att bedöma hjärtmuskelskadan.

Research

JoVE Journal

Medicine

Acute Myocardial Infarction in Rats

Akut hjärtinfarkt hos råttor

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular ...

Induction of Myocardial Infarction in Adult Zebrafish Using Cryoinjury

Induktion av hjärtinfarkt hos vuxna Zebrafish Använda Cryoinjury

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and ...

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

Ischemi-reperfusion modell av akut Kidneyskadan och efter skada Fibros i möss

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ...

Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Hjärtinfarkt och bedömning Funktionell Utfall i Grisar

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

En mus modell av ischemi-reperfusion skada genom Ligation i vänstra främre nedåt Artery

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

Minimal invasiv kirurgisk procedur att inducera hjärtinfarkt hos möss

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last ...

Induction and Assessment of Ischemia-reperfusion Injury in Langendorff-perfused Rat Hearts

Induktion och Bedömning av ischemi-reperfusion skada i Langendorff-perfusion Rat Hearts

The biochemical events surrounding ischemia reperfusion injury in the acute setting are of great importance to furthering novel treatment options for ...

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

Hjärtinfarkt i neonatala möss, en modell av Cardiac Regeneration

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and ...

Confirmation of Myocardial Ischemia and Reperfusion Injury in Mice Using Surface Pad Electrocardiography

Bekräftelse av ischemi och reperfusion skada i möss med användning av Surface Pad Elektrokardiografi

Many animal models have been established for the study of myocardial remodeling and heart failure due to its status as the number one cause of mortality ...