Name: induction of myocardial infarction and myocardial ischemia-reperfusion injury in mice
Uploaded: 2022-01-19T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Induction of Myocardial Infarction and Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury in Mice at JoVE.com

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (82070317, 81700390 Jibin Lin'e, 8210021880 Bingjie Lv'ye ve 82000428 Boyuan Wang'a) ve Çin Ulusal Anahtar Ar-Ge Programı (2017YFA0208000'den Shaolin He'ye) tarafından desteklenmiştir.

Hayvan çalışmaları, Huazhong Bilim ve Teknoloji Üniversitesi (Wuhan, Çin) Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanmıştır.
NOT: Model olarak erkek C57BL/6J fareler (8-10 hafta) kullanılmıştır. Fareler yiyecek ve suya serbestçe erişebilir ve belirli patojen içermeyen koşullarda yetiştirilir. Oda, kontrollü sıcaklık (22 °C ± 2 °C) ve nem (%45-%65) altında tutulur. Fareler, bu kurum tarafından belirlenen yönergelere göre Tongji Tıp Fakültesi (Wuhan, Çi...

<ol>
	<li>Reed, G. W., Rossi, J. E., Cannon, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+myocardial+infarction.">Acute myocardial infarction.</a> Lancet. 389 (10065), 197-210 (2017).</li><li>Ibanez, B., Heusch, G., Ovize, M., Van de Werf, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolving+therapies+for+myocardial+ischemia/reperfusion+injury.">Evolving therapies for myocardial ischemia/reperfusion injury.</a> Journal of the American College of Cardiology. 65 (14), 1454-1471 (2015).</li><li>Bryda, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mighty+mouse:+The+impact+of+rodents+on+advances+in+biomedical+research.">The mighty mouse: The impact of rodents on advances in biomedical research.</a> Missouri Medicine. 110 (3), 207-211 (2013).</li><li>Kim, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+closed-chest+model+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion.">A murine closed-chest model of myocardial ischemia and reperfusion.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (65), e3896 (2012).</li><li>Xu, Z., Alloush, J., Beck, E., Weisleder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+through+ligation+of+the+left+anterior+descending+artery.">A murine model of myocardial ischemia-reperfusion injury through ligation of the left anterior descending artery.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (86), e51329 (2014).</li><li>Xu, Z., McElhanon, K. E., Beck, E. X., Weisleder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+myocardial+ischemia-reperfusion+injury.">A murine model of myocardial ischemia-reperfusion injury.</a> Methods in Molecular Biology. 1717, 145-153 (2018).</li><li>Muthuramu, I., Lox, M., Jacobs, F., De Geest, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Permanent+ligation+of+the+left+anterior+descending+coronary+artery+in+mice:+a+model+of+post-myocardial+infarction+remodelling+and+heart+failure.">Permanent ligation of the left anterior descending coronary artery in mice: a model of post-myocardial infarction remodelling and heart failure.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (94), e52206 (2014).</li><li>Reichert, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+left+anterior+descending+(LAD)+coronary+artery+ligation:+An+improved+and+simplified+model+for+myocardial+infarction.">Murine left anterior descending (LAD) coronary artery ligation: An improved and simplified model for myocardial infarction.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (122), e55353 (2017).</li><li>Lugrin, J., Parapanov, R., Krueger, T., Liaudet, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+myocardial+infarction+model+using+permanent+ligation+of+left+anterior+descending+coronary+artery.">Murine myocardial infarction model using permanent ligation of left anterior descending coronary artery.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (150), e59591 (2019).</li><li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardioprotective+effects+of+Puerarin-V+on+isoproterenol-induced+myocardial+infarction+mice+is+associated+with+regulation+of+PPAR-Y/NF-Kappa+B+pathway.">Cardioprotective effects of Puerarin-V on isoproterenol-induced myocardial infarction mice is associated with regulation of PPAR-Y/NF-Kappa B pathway.</a> Molecules. 23 (12), 3322 (2018).</li><li>Vanden Bos, E. J., Mees, B. M., de Waard, M. C., de Crom, R., Duncker, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+model+of+cryoinjury-induced+myocardial+infarction+in+the+mouse:+A+comparison+with+coronary+artery+ligation.">A novel model of cryoinjury-induced myocardial infarction in the mouse: A comparison with coronary artery ligation.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 289 (3), 1291-1300 (2005).</li><li>Wang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+cryoinjury+model+to+study+myocardial+infarction+in+the+mouse.">A cryoinjury model to study myocardial infarction in the mouse.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (151), e59958 (2019).</li><li>Brooks, W. W., Garibaldi, B. A., Conrad, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+injury+in+the+mouse+induced+by+transthoracic+cauterization.">Myocardial injury in the mouse induced by transthoracic cauterization.</a> Laboratory Animal Science. 48 (4), 374-378 (1998).</li><li>Tao, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+modeling+and+multimodality+imaging+of+chronic+myocardial+infarction+in+minipigs+induced+by+novel+interventional+embolization+technique.">Preclinical modeling and multimodality imaging of chronic myocardial infarction in minipigs induced by novel interventional embolization technique.</a> EJNMMI Research. 6 (1), 59 (2016).</li><li>Gao, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+and+efficient+model+of+coronary+artery+ligation+and+myocardial+infarction+in+the+mouse.">A novel and efficient model of coronary artery ligation and myocardial infarction in the mouse.</a> Circulation Research. 107 (12), 1445-1453 (2010).</li><li>Scofield, S. L., Singh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Confirmation+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion+injury+in+mice+using+surface+pad+electrocardiography.">Confirmation of myocardial ischemia and reperfusion injury in mice using surface pad electrocardiography.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (117), e54814 (2016).</li><li>Gnyawali, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-frequency+high-resolution+echocardiography:+First+evidence+on+non-invasive+repeated+measure+of+myocardial+strain,+contractility,+and+mitral+regurgitation+in+the+ischemia-reperfused+murine+heart.">High-frequency high-resolution echocardiography: First evidence on non-invasive repeated measure of myocardial strain, contractility, and mitral regurgitation in the ischemia-reperfused murine heart.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (41), e1781 (2010).</li><li>Pistner, A., Belmonte, S., Coulthard, T., Blaxall, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+echocardiography+and+ultrasound+imaging.">Murine echocardiography and ultrasound imaging.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (42), e2100 (2010).</li><li>Shibata, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adiponectin+protects+against+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+through+AMPK-+and+COX-2-dependent+mechanisms.">Adiponectin protects against myocardial ischemia-reperfusion injury through AMPK- and COX-2-dependent mechanisms.</a> Nature Medicine. 11 (10), 1096-1103 (2005).</li><li>Anderson, J. L., Morrow, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+myocardial+infarction.">Acute myocardial infarction.</a> New England Journal of Medicine. 376 (21), 2053-2064 (2017).</li><li>Frank, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+ischemia+reperfusion+injury:+From+basic+science+to+clinical+bedside.">Myocardial ischemia reperfusion injury: From basic science to clinical bedside.</a> Seminars in Cardiothoracic and Vascular Anesthesia. 16 (3), 123-132 (2012).</li><li>Mares, R. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studying+the+innate+immune+response+to+myocardial+infarction+in+a+highly+efficient+experimental+animal+model.">Studying the innate immune response to myocardial infarction in a highly efficient experimental animal model.</a> Romanian Journal of Cardiology. 31 (3), 573-585 (2021).</li><li>Fernandez, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+coronary+arteries+of+the+C57bl/6+mouse+strains:+Implications+for+comparison+with+mutant+models.">The coronary arteries of the C57bl/6 mouse strains: Implications for comparison with mutant models.</a> Journal of Anatomy. 212 (1), 12-18 (2008).</li><li>Zhang, R., Hess, D. T., Reynolds, J. D., Stamler, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemoglobin+S-nitrosylation+plays+an+essential+role+in+cardioprotection.">Hemoglobin S-nitrosylation plays an essential role in cardioprotection.</a> Journal of Clinical Investigation. 126 (12), 4654-4658 (2016).</li><li>Sorop, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+animal+models+of+coronary+microvascular+dysfunction.">Experimental animal models of coronary microvascular dysfunction.</a> Cardiovascular Research. 116 (4), 756-770 (2020).</li><li>Sicard, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Right+coronary+artery+ligation+in+mice:+A+novel+method+to+investigate+right+ventricular+dysfunction+and+biventricular+interaction.">Right coronary artery ligation in mice: A novel method to investigate right ventricular dysfunction and biventricular interaction.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 316 (3), 684-692 (2019).</li><li>Chen, J., Ceholski, D. K., Liang, L., Fish, K., Hajjar, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variability+in+coronary+artery+anatomy+affects+consistency+of+cardiac+damage+after+myocardial+infarction+in+mice.">Variability in coronary artery anatomy affects consistency of cardiac damage after myocardial infarction in mice.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 313 (2), 275-282 (2017).</li><li>Kato, R., Foex, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+protection+by+anesthetic+agents+against+ischemia-reperfusion+injury:+An+update+for+anesthesiologists.">Myocardial protection by anesthetic agents against ischemia-reperfusion injury: An update for anesthesiologists.</a> Canadian Journal of Anaesthesia. 49 (8), 777-791 (2002).</li></ol>

Son yıllarda, klinik ve bilimsel araştırmalarda MI ve MIRI için modellerin oluşturulması hızla gelişmiştir20,21. Bununla birlikte, eylem mekanizmaları ve MI/MIRI'nin nasıl iyileştirileceği gibi çözülmesi gereken bazı sorular var. Burada, MI ve MIRI'nin bir murin modeli oluşturmak için değiştirilmiş bir protokol açıklanmaktadır. Birkaç önemli nokta dikkatlice düşünülmelidir.
İlk kilit nokta endotrakeal en...

Akut miyokard enfarktüsü (AMİ) dünya çapında yaygın bir kardiyovasküler hastalıktır ve yüksek mortalite taşır1. Teknolojilerdeki gelişmeler, hastaları için erken ve etkili revaskülarizasyonu mümkün kılmaktadır. Bazı hastalarda bu tedavilerden sonra miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarı (MIRI) oluşabilir2. Bu nedenle, eylem mekanizmalarını ve MI/MIRI'nin nasıl iyileştirileceğini anlamak büyük önem taşımaktadır. Fareler, düşük maliyetleri, hızlı üreme süreleri ve genetik değişiklik yapma kolaylıkları nedeniyle model olarak yaygın olarak kullanılmaktadır3. Bilim adamları, 4,5,6,7,8,9 numaralı hayvanlarda MIRI ve MI'yı modellemek için farklı yöntemler geliştirdiler. Bu strateji araştırmayı teşvik eder, ancak kullanılan farklı kriterler ve yöntemler, araştırma ekipleri arasında sonuçların yorumlanmasını zorlaştırır.
Farelerde MI, izoproterenol10, kriyoyaralanma 11,12 veya koterizasyon13 ile indüklenmiştir. MI, izoproterenol tarafından kolayca indüklenebilir, ancak patofizyolojik süreç klinik MI'dakinden farklıdır. Kriyoyaralanmaya bağlı MI, zayıf tutarlılığa sahiptir, sol ön inen koroner arter (LAD) çevresinde aşırı miyokardiyal hasara neden olur ve kolayca aritmiye neden olabilir. Koterizasyona bağlı MI, miyokard enfarktüsünün doğal sürecinden oldukça farklıdır ve yanma alanındaki enflamatuar reaksiyon daha yoğundur; Ek olarak, cerrahi yaklaşımın teknik zorlukları vardır. Ayrıca, girişimsel teknikle balon blokajı veya embolizasyon veya tromboz yöntemi kullanarak minipiglerde MI modeli geliştiren bazı laboratuvarlar14 bulunmaktadır. Tüm bu yöntemler doğrudan koroner arter tıkanıklığına neden olabilir, ancak koroner anjiyografi cihazlarına ve hepsinden önemlisi fare koroner arterlerinin çok ince olmasına ihtiyaç duyulması bu ameliyatları pratik olmaktan çıkarır. MIRI için, farklı modeller arasındaki farklar, solunum cihazları / mikromanipülasyon kullanmak veya 5,6 kullanmamak gibi oldukça mütevazıydı.
Burada, daha önce yayınlanmış 4,5,6,7,8,9,15 yöntemlerinden uyarlanan MI ve MIRI modelini indükleyebilecek basit ve güvenilir bir yöntem açıklanmaktadır. Bu yöntem, LAD'nin ligasyon yoluyla doğrudan bloke edilmesiyle patofizyolojik süreçleri simüle edebilir. Ayrıca, ligasyonu hafifleterek, bu model aynı zamanda reperfüzyon hasarını da simüle edebilir. Bu protokolde, LAD görselleştirmesi için bir diseksiyon mikroskobu kullanılır. Daha sonra, araştırmacı LAD'yi kolayca tanımlayabilir. Daha sonra, LAD'nin doğru bağlanması, tekrarlanabilir ve öngörülebilir kan tıkanıklığına ve ventriküler iskemiye yol açar. Ayrıca, elektrokardiyografi (EKG) değişiklikleri, mikroskop altında gözlenen LAD'nin renk değişikliklerine ek olarak iskemi ve reperfüzyonu doğrulamak için kullanılabilir. Bu strateji, daha kısa bir prosedür süresine, daha düşük cerrahi komplikasyon riskine ve daha az deneysel fareye ihtiyaç duyulmasına yol açar. Troponin-T testi, kardiyak ultrason ve trifenil tetrazolyum klorür (TTC) boyama yöntemleri de açıklanmaktadır. Genel olarak, bu protokol MI/MIR mekanizmasının yanı sıra ilaç keşfi çalışmaları için de yararlıdır.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.9 % sodium chloride solution</td>
			<td>Kelun Industry Group,China</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4% paraformaldehyde fixing solution</td>
			<td>Servicebio,China</td>
			<td>G1101</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>4-0 silk suture</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products,China</td>
			<td>C412</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8-0 suture</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products,China</td>
			<td>H801</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>IsoReag,China</td>
			<td>IR-11190</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camera</td>
			<td>Canon,Japan</td>
			<td>EOS 80D</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Depilatory cream</td>
			<td>Veet,French</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Elecsys Troponin T hs STAT</td>
			<td>Roche,Germany</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrochemical luminescence immunoanalyzer</td>
			<td>Roche,Germany</td>
			<td>Elecsys 2010</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Evans blue</td>
			<td>Sigma,America</td>
			<td>E2129</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye scissors</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>JC2303</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Haemostatic forceps</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>J31020</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High frequency in vivo imaging systems</td>
			<td>Visualsonics,Canada</td>
			<td>Vevo2100</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ibuprofen</td>
			<td>PerFeMiKer,China</td>
			<td>CLS-12921</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intravenous catheter</td>
			<td>Introcan,Germany</td>
			<td>4254090B</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Sigma-Aldrich,America</td>
			<td>&#160;K2753</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical alcohol</td>
			<td>Huichang ,China</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microneedle holders</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>WA2040</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscopic shears</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>WA1040</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsurgical forceps</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>WA3020</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mouse electrocardiograph</td>
			<td>Techman,China</td>
			<td>BL-420F</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle holders</td>
			<td>Shanghai Medical Instruments,China</td>
			<td>JC3202</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>operating floor</td>
			<td>Chico,China</td>
			<td>ZK-HJPT</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-10 tube</td>
			<td>Huamei,China</td>
			<td></td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbital</td>
			<td>Merck,America</td>
			<td>1030001</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rodent Ventilator</td>
			<td>Shanghai Alcott Biotech,China</td>
			<td>ALC-V8S-P</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo microscope</td>
			<td>Aomei Industry,China</td>
			<td>SZM0745-STL3-T3</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical thermostatic heating pad</td>
			<td>Globalebio, China</td>
			<td>GE0-20W</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triphenyltetrazolium chloride</td>
			<td>Servicebio,China</td>
			<td>G1017</td>
			<td>-</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Huamaike Biochemicals and Life Science Research Prouducts,China</td>
			<td>323004</td>
			<td>-</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

induction of myocardial infarction and myocardial ischemia-reperfusion injury in mice

Akut miyokard enfarktüsü, mortalitesi yüksek yaygın bir kardiyovasküler hastalıktır. Miyokardiyal reperfüzyon hasarı, kalp reflowunun yararlı etkilerine karşı koyabilir ve sekonder miyokard hasarına neden olabilir. Miyokard enfarktüsü ve miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarının basit ve tekrarlanabilir bir modeli araştırmacılar için iyi bir araçtır. Burada, mikromanipülasyon yoluyla sol ön inen koroner arterin (LAD) hassas ligasyonu ile bir miyokard enfarktüsü (MI) modeli ve MIRI oluşturmak için özelleştirilebilir bir yöntem açıklanmaktadır. LAD'nin doğru ve tekrarlanabilir ligatür konumlandırması, kalp hasarı için tutarlı sonuçlar elde edilmesine yardımcı olur. ST segmenti değişiklikleri, model doğruluğunu belirlemeye yardımcı olabilir. Miyokard hasarını değerlendirmek için serum kardiyak troponin T (cTnT) seviyesi, miyokardiyal sistolik fonksiyonu değerlendirmek için kardiyak ultrason ve enfarktüs boyutunu ölçmek için Evans-Blue/trifenil tetrazolyum klorür boyaması kullanıldı. Genel olarak, bu protokol prosedür süresini kısaltır, kontrol edilebilir enfarktüs boyutunu sağlar ve farenin hayatta kalmasını iyileştirir.

Deneysel iş akışı Şekil 1A'da gösterilmiştir. Araştırmacı, çalışma başlatıldıktan sonra deneysel tasarıma göre zaman düğümlerini planlayabilir. LAD ligasyonunun süresi araştırma amacına göredir. MI için, araştırma reperfüzyon adımını göz ardı edebilir. Kardiyak ultrason, non-invaziv olduğu için çalışmanın farklı aşamalarında mevcuttur, Evans-Blue / TTC boyama ise sadece fare feda edildiğinde gerçekleştirilebilir. Fibroz ve ventriküler yeniden ?...

Watch this Scientific Journal Video about Induction of Myocardial Infarction and Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury in Mice at JoVE.com

Induction of Myocardial Infarction and Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury in Mice

Burada, mikromanipülasyon yoluyla sol ön inen koroner arterin hassas ligasyonu ile farelerde miyokard enfarktüsü veya miyokardiyal iskemi-reperfüzyon hasarını indükleyebilen basit ve tekrarlanabilir bir yöntem tanımlanmıştır.

Farelerde Miyokard Enfarktüsü ve Miyokard İskemi-Reperfüzyon Hasarının İndüksiyonu

Acute myocardial infarction is a common cardiovascular disease with high mortality. Myocardial reperfusion injury can counteract the beneficial effects of ...

Bu çalışma, mikro manipülasyon yoluyla sol ön inen koroner arterin hassas ligasyonu ile Miro'da bir miyokardiyal fonksiyon modeli oluşturmak için özelleştirilebilir bir yöntemi tanımlamaktadır. Bu protokol prosedür süresini kısaltır, kontrol edilebilir enfarktüs boyutu sağlar ve farenin hayatta kalmasını iyileştirir. Cerrahi prosedür boyunca önceden 37 santigrat dereceye kadar ısıtılmış bir ısıtma yastığına sahip dikdörtgen bir OT kullanın.İşlemden önce, tahtayı ultraviyole ışık ve% 70 alkol ile dezenfekte edin. Gözlerin aşırı ısınmasını önlemek için fareyi OT'ye sırtüstü pozisyonda gazlı bezle yerleştirerek başlayın. Kurumasını önlemek için gözlere oftalmik merhem sürün.Göğüs kafesinde tüy dökücü bir krem kullanın ve steril bir pamuklu çubukla bir dakika boyunca eşit şekilde masaj yapın. Fazla kürkü gazlı bezle silin. Bölgeyi temizlemek için povidon iyot ve ardından %70 alkol kullanın ve göğüs kafesini gazlı bezle örtün.Üst kesici dişlerin altında bir 4-O sütür kullanın ve ağzı hafifçe açık tutmak ve kanülasyonu kolaylaştırmak için bağlantı noktasına sabitleyin. Gövdeyi düz tutmak için kuyruğu çekin ve bant kullanarak OT'ye sabitleyin. Dört uzvu bantla sabitleyin ve bağlantı noktalarında sıkın.Solunum riskini önlemek için ön uzuvları aşırı germeyin. Çeneyi açmak ve dili kaldırmak için forseps kullanın. Ardından boğazı ve glotis'i görselleştirmek için bir aydınlatıcı kullanın.Künt kesik bir iğne ile 22 gauge kanülü ağızdan boğazın yaklaşık bir santimetre aşağısındaki trakeaya nazikçe sokun. Dili tutmak için bir elinizi kullanın ve künt forseps ile hafifçe yukarı doğru hareket ettirin. Tüpü trakeaya nazikçe yerleştirmek için aynı anda diğer elinizi kullanın.Tüpü yemek borusuna sokmamaya dikkat edin. İğneyi dikkatlice çıkarın. Ventilatöre bağlanmadan önce, kabarcıkların oluşması için tüpü suya yerleştirerek entübasyonu kontrol edin.Endotrakeal tüpü dakikada 120'ye ayarlanmış bir ventilatöre ve 250 mikrolitreye ayarlanmış tidal hacme bağlayın. Bilateral simetrik göğüs genişlemesini kontrol ederek entübasyonu doğrulayın. Ardından, düşmesini önlemek için OT bağlantısını bantla sabitleyin.EKG elektrotlarını pençelere yerleştirin ve EKG kayıt cihazına bağlayın. Prosedür boyunca kardiyak elektrofizyolojiyi izleyin. Göğüs kafesindeki gazlı bezi çıkarın.Kesi bölgesini %70 alkol ile üç ovma döngüsü kullanarak dezenfekte edin. Cerrahi bölgenin kontaminasyonunu azaltmak için, fareyi cerrahi alan üzerinde bir delik bulunan steril bir cerrahi örtü ile örtün. Bir neşter ile eğik bir cilt kesisi yaptıktan sonra, deri altı dokuların künt bir diseksiyonunu gerçekleştirerek kaburgaları ortaya çıkarın.Damarlara, kaburgalara ve akciğerlere zarar vermemeye dikkat edin. Kanamayı durdurmak için steril pamuk aplikatörleri kullanın. Üçüncü interkostal boşluğu tanımlayın ve yaklaşık altı ila sekiz milimetrelik bir kesi yapın.Daha sonra interkostal boşluktaki dokuların künt diseksiyonunu yaparak göğüs boşluğunu açın. İç torasik artere zarar vermemeye dikkat edin. Forseps kullanarak interkostal boşluğu genişletin.Önceden sterilize edilmiş ev yapımı ekartörleri göğüs kafesine yerleştirin ve kesiği yaklaşık altı milimetre genişliğe yaymak için geri çekin. Ekartörleri lastik bantlarla OT'ye takın. Kalbi tamamen ortaya çıkarmak için çevredeki dokuları dikkatlice çıkarın.Kalbi incitmeden perikardları kavisli forseps ile nazikçe çekin. Bir diseksiyon mikroskobu kullanın ve LAD görselleştirmesi için odaklanmış ve uygun bir ışığı yönlendirin. LAD'yi geçici olarak büyütmek için seçilen ligasyon pozisyonunun altındaki bölgeye hafifçe bastırın ve ardından LAD'yi yeniden kontrol edin.Diseksiyon mikroskobu altında, 8-0'ı geçmek için konik bir iğne kullanın LAD'nin altında ipek bağ. İğnenin sol ventriküle girecek kadar derin olmadığından ve LAD'ye zarar vermemek için çok sığ olmadığından emin olun. Bağı gevşek bir çift düğümle bağlayın.Artere paralel bir halkaya iki ila üç milimetrelik bir PE-10 tüpü yerleştirin. Bağ halkasını arter ve hortumun etrafına gelene kadar hafifçe sıkın. Ardından halkayı bir kayma düğümü ile sabitleyin.Aşırı sıkma basıncı ile miyokard duvarına zarar vermemeye dikkat edin. Ligasyondan sonra sol ventrikülün ön duvarında solgun bir renklenme, LAD'de kan akışının durduğunu doğrular. Kalıcı ligasyon gerekiyorsa, metin yazısında açıklandığı gibi devam edin.Ekartörleri kesiden çıkarın. Sonra yarayı geçici olarak bir bulldog kelepçesi ile kapatın. Farenin ventilatöre bağlı kalmaya devam ettiğinden emin olun.İskemi süresi sona erdiğinde, bulldog kelepçesini çıkarın ve insizyonu açmak ve kalbi ve ligasyon bölgesini ortaya çıkarmak için ekartörleri yerleştirin. Kayma düğümünü çözün ve PE-10 borusunu çıkarın. Soluk rengin pembe-kırmızıya dönüşmesi, kan akışının restorasyonunu doğrular.Eşzamanlı olarak, reperfüzyonu tespit etmek için, ST yükselmesinin potansiyel bir çözünmesi için EKG'yi gözlemleyin. 8-0'dan ayrıl sonraki Evans mavisi ve TTC boyama yapılıyorsa yerinde ligatür. Aksi takdirde, bu adımda dikişi çıkarın.Ekartörleri çıkarın ve üçüncü ve dördüncü kaburgaları 4-O ipek dikişle dikerek kesiyi kapatın. Akciğere zarar vermemeye dikkat edin. Göğüs boşluğunda sıkışmış olabilecek havayı dışarı atmak için dikiş düğümlerini bağlarken göğse hafifçe bastırın.Kas katmanlarını sürekli 4-O ipek dikişlerle kapatın. Deneysel sürecin standart görüntüleri endotrakeal entübasyon, cilt insizyonu, torakotomi, LAD tanımlaması ve ligasyondan reperfüzyona kadar elde edildi. Temsili EKG görüntüleri, miyokardiyal iskemi ve reperfüzyonu doğruladı ve ligasyondan sonra önemli ST yükselmesi gösterdi.Ve kayma düğümü çözüldükten sonra ST yüksekliğinin çözülmesi. Torakotomiden önce hava yolunu açık tutmak çok önemlidir ve en önemli şey LAD'nin sıkıca bağlandığından emin olmak ve hasarı önlemektir. Bu prosedürü, kardiyak fonksiyonu değerlendirmek için ekokardiyografi ve miyokard hasarını değerlendirmek için TTC izleyecektir.

Research

JoVE Journal

Medicine

Acute Myocardial Infarction in Rats

Sıçanlarda Akut Miyokard Enfarktüsü

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular ...

Induction of Myocardial Infarction in Adult Zebrafish Using Cryoinjury

Yetişkin Zebra balığı Myokard İnfarktüsü İndüksiyon Cryoinjury kullanma

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and ...

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

Farelerde Akut Böbrek Hasarı ve Post Yaralanma Fibrozis iskemi-reperfüzyon Model

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ...

Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Domuzlar miyokard enfarktüsü ve Fonksiyonel Sonuç Değerlendirmesi

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Sol ön inen arter ligasyonu ile Miyokard İskemi-reperfüzyon Hasarı bir fare modeli

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

Farelerde Miyokard İnfarktüsü Oluşturan Minimal İnvaziv Cerrahi Prosedür

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last ...

Induction and Assessment of Ischemia-reperfusion Injury in Langendorff-perfused Rat Hearts

Langendorff-perfüze sıçan Hearts indüksiyon ve İskemi-reperfüzyon Hasarı Değerlendirilmesi

The biochemical events surrounding ischemia reperfusion injury in the acute setting are of great importance to furthering novel treatment options for ...

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

Yenidoğan Farelerde Miyokard Enfarktüsü, Kalp Rejenerasyon Bir Model

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and ...

Confirmation of Myocardial Ischemia and Reperfusion Injury in Mice Using Surface Pad Electrocardiography

Yüzey Pad Elektrokardiyografi kullanılması Farelerde Miyokard İskemi ve Reperfüzyon Hasarı Onayı

Many animal models have been established for the study of myocardial remodeling and heart failure due to its status as the number one cause of mortality ...