Name: autofluorescence imaging to evaluate cellular metabolism
Uploaded: 2021-11-15T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Autofluorescence Imaging to Evaluate Cellular Metabolism at JoVE.com

Finansieringskilder inkluderer Cancer Prevention and Research Institute of Texas (CPRIT RP200668) og Texas A&M University. Figur 1 ble opprettet med BioRender.com.

1. Cellebelegg for avbildning
<ol><li>Aspirer mediet fra en 80-90% konfluent T-75 kolbe av MCF-7 celler, skyll cellene med 10 ml steril fosfatbufret saltvann (PBS), og tilsett 2 ml 0,25% trypsin (1x) for å løsne cellene fra kolbebunnen.</li>
	<li>Inkuber kolben ved 37 °C i ~4 min. Kontroller cellene under mikroskopet for å bekrefte løsrivelse.</li>
	<li>Tilsett umiddelbart 8 ml kulturmedium for å deaktivere trypsin.</li>
	<li>Samle cellene i et konisk rør (15 ml eller 50 ml). Tell cellene ved hj...

Autofluorescence intensitet og livstidsavbildning har blitt mye brukt til å vurdere metabolisme i celler21,55. FLIM er høyoppløselig og løser derfor enkeltceller, noe som er viktig for kreftstudier fordi cellulær heterogenitet bidrar til tumor aggresjon og narkotikaresistens7,39,41,44,45,46,58.<su...

Metabolisme er den cellulære prosessen med å produsere energi. Cellulær metabolisme omfatter flere veier, inkludert glykolyse, oksidativ fosforylering og glutaminolyse. Sunn celler bruker disse metabolske veiene for å generere energi til spredning og funksjon, for eksempel produksjon av cytokiner av immunceller. Mange sykdommer, inkludert metabolske forstyrrelser, kreft og nevrodegenerasjon, er preget av endret cellulær metabolisme1. For eksempel har noen kreftcelletyper forhøyede glykolysehastigheter, selv i nærvær av oksygen, for å generere molekyler for syntese av nukleinsyrer, proteiner og lipider2,3. Dette fenomenet, kjent som Warburg-effekten, er et kjennetegn på mange krefttyper, inkludert brystkreft, lungekreft og glioblastomer4. På grunn av endringene i cellulær metabolisme forbundet med kreftprogresjon, kan cellulær metabolisme være en surrogatbiomarkør for legemiddelrespons5,6. Videre er det avgjørende å forstå legemiddeleffekten på cellenivå, da celle heterogenitet kan føre til forskjellige legemiddelresponser hos personer7,8.
Teknologier som identifiserer og kvantifiserer endringer i cellulær metabolisme er avgjørende for studier av kreft og legemiddelrespons. Kjemiske og proteinanalyser brukes til å evaluere metabolismen av celler eller vev, men mangler encellet oppløsning og romlig informasjon. Metabolske plateleserbaserte analyser kan måle pH- og oksygenforbruk i prøven over tid og den påfølgende metabolske perturbasjonen av kjemikalier. pH kan brukes til å beregne den ekstracellulære forsuringshastigheten (ECAR), som gir et innblikk i cellenes glykolytiske aktivitet9. Avbildningsmetoder for hele kroppen, inkludert 2-[fluor-18] fluor-D-glukose positronutslippstomografi (FDG PET) og magnetisk resonansspektroskopi (MRS), er ikke-invasive avbildningsmodaliteter som brukes klinisk for å identifisere tumor gjentakelse og legemiddeleffekt gjennom metabolske målinger10,11,12,13,14.
FDG-PET tar bilder av vevsopptaket til FDG, en radiomerket glukoseanalog. Økt opptak av FDG-PET av svulster i forhold til omkringliggende vev skyldes Warburg-effekten12,13. MRS-bilder vanlige kjerner av molekyler som brukes til metabolisme, for eksempel 13C og 31P, og kan få dynamisk informasjon om hvordan metabolisme endres som respons på stimuli, for eksempel trening eller spising14. Selv om FDG-PET og MRS kan brukes klinisk, mangler disse teknologiene den romlige oppløsningen for å løse intratumoral heterogenitet. På samme måte gjøres oksygenforbruksmålinger på en bulkpopulasjon av celler. Autofluorescence imaging overvinner den romlige oppløsningen hinderet for disse teknologiene og gir en ikke-invasiv metode for kvantifisering av cellulær metabolisme.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63282/63282fig01v2.jpg"> Figur 1: NADH og FAD i vanlige metabolske veier. NADH og FAD er koenzymer som brukes i glykolyse, Krebs-syklusen og elektrontransportkjeden. Autofluorescence avbildning av disse molekylene gir informasjon om cellulær metabolisme. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63282/63282fig01largev2.jpg" target="_blank">Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.</a>
Redusert nikotinamid adenin (fosfat) dinukleotid (NAD(P)H) og oksidert flavin adenin dinukleotid (FAD) er koenzymer av metabolske reaksjoner, inkludert glykolyse, oksidativ fosforylering og glutaminolyse (figur 1). Både NAD(P)H og FAD er autofluorescerende og gir endogen kontrast for fluorescensavbildning1,15. NADPH har lignende fluorescerende egenskaper som NADH. På grunn av dette brukes NAD(P)H ofte til å representere det kombinerte signalet til NADH og NADPH2,16.
Fluorescens livstidsavbildning (FLIM) kvantifiserer fluorescenslevetiden eller tiden som en fluorofor er i spent tilstand. Fluorescenslevetidene reagerer på mikromiljøet i fluoroforene og gir informasjon om cellulær metabolisme17. NAD(P)H og FAD kan eksistere i celler i enten proteinbundne eller frie konformasjoner, som hver har forskjellig levetid. Gratis NAD(P)H har kortere levetid enn proteinbundet NAD(P)H; på den annen side har fri FAD lengre levetid enn bundet FAD18,19. Levetids- og levetidskomponentvektene kan kvantifiseres fra fluorescenslevetidsforfallsdata gjennom Eq. (1)20:
I(t) = α 1e-t/τ1 + α 2e-t/τ2 + C (1)
Eq (1) representerer den normaliserte fluorescensintensiteten som en tidsfunksjon. Den α 1 og α 2 i denne ligningen representerer de proporsjonale komponentene i kort og lang levetid (henholdsvis α 1+ α 2 = 1), henholdsvis τ1 og τ2 representerer henholdsvis korte og lange levetider, og C står for bakgrunnslys7,20. Den amplitudevektede levetiden, representert her som τm, beregnes ved hjelp av Eq. (2).
τm= α 1τ1+ α 2τ2 (2)
En gjennomsnittlig levetid kan beregnes ved å beregne "t" over fluoroforens intensitetsforfall, som for et to eksponentielt forfall er vist av Eq. (3)17,21.
τ*m= (α 1τ12+ α 2τ22)/ (α 1τ1+ α 2τ2) (3)
Et fluorescensintensitetsbilde kan beregnes fra levetidsbildet ved å integrere fluorescenslevetidens forfall. Autofluorescence avbildning er en ikke-ødeleggende og etikettfri metode som kan brukes til å karakterisere metabolismen av levende celler med en subcellulær oppløsning. Det optiske redoksforholdet gir en optisk analog beregning av cellens kjemiske redokstilstand og beregnes som forholdet mellom NAD(P)H- og FAD-intensiteter. Selv om formelen for beregning av det optiske redoksforholdet ikke er standardisert22,23,24,25, er det her definert som intensiteten av FAD over de kombinerte intensitetene til NAD (P)H og FAD. Denne definisjonen brukes fordi den summerte intensiteten i nevneren normaliserer metrikkverdien mellom 0 og 1, og det forventede resultatet av cyanidinhiberingen er en reduksjon i redoksforholdet. Fluorescenslevetidene til fri NAD(P)H og FAD gir innsikt i endringer i det metabolske løsningsmiddelmikromiljøet, inkludert pH, temperatur, nærhet til oksygen og osmolaritet17.
Endringer i fluorescenslevetiden for de bundne fraksjonene av NAD(P)H og FAD kan indikere metabolsk baneutnyttelse og substratspesifikk metabolisme26. Komponentvekter kan tolkes for endringer i fri til den bundne brøkdelen av koenzymene18,19. Til sammen tillater disse kvantitative autofluorescence levetidsmålingene analysen av cellulær metabolisme, og autofluorescence imaging har blitt brukt til å identifisere neoplasmer fra normale vev27,28, karakterisere stamceller29,30, evaluere immuncellefunksjon31,32,33,34,35, måle nevrologisk aktivitet36, 37,38, og forstå legemiddeleffekt i krefttyper som brystkreft og hode- og nakkekreft21,39,40,41,42. Høyoppløselig autofluorescence-avbildning kan kombineres med bildesegmentering for encellet analyse og kvantifisering av intrapopulerings heterogenitet43,44,45,46,47.
NAD(P)H og FAD kan avbildes på enkeltfoton- eller multifotonfluorescensmikroskoper som er konfigurert for intensitet eller livstidsavbildning. For enkeltfotonmikroskoper er NAD(P)H og FAD vanligvis begeistret for bølgelengder på henholdsvis 375-405 nm og 488 nm på grunn av vanlige laserkilder ved disse bølgelengdene48. I to-foton fluorescens excitation, NAD (P)H og FAD vil begeistre ved bølgelengder på ca 700 til 750 nm og 700 til 900 nm, henholdsvis15,49. Når fluoroforene er begeistret, avgir NAD(P)H og FAD fotoner ved bølgelengder mellom ~ 410 nm til ~ 490 nm og ~ 510 nm til ~ 640 nm, henholdsvis15. NAD(P)H og FAD maxima utslipp bølgelengder er ca 450 nm og 535 nm, henholdsvis48.
På grunn av deres forskjellige eksitasjons- og utslippsbølgelengder, kan fluorescensen til de to metabolske koenzymene isoleres spektralt. En forståelse av spektralkarakteristikkene til NAD(P)H og FAD er nødvendig for design og optimalisering av autofluorescence imaging protokoller. Cyanid er en elektrontransportkjede (ETC) kompleks IV-hemmer. Effektene av cyanid på cellulær metabolisme og autofluorescensintensiteter og levetider for NAD(P)H og FAD i celler er godt karakterisert27,40. Derfor er et cyanidperturbasjonseksperiment et effektivt middel for å validere NAD(P)H- og FAD-bildebehandlingsprotokoller. Et vellykket cyanideksperiment gir tillit til at NAD(P)H- og FAD-bildebehandlingsprotokollen kan brukes til å vurdere metabolismen av ukjente grupper eller perturbasjoner.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>2-deoxy-d-glucose (2-DG)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>AC111980000; AC111980010; AC111980050; AC111980250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibiotic Antimicrobial (pen-strep)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15240096</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Samples</td>
			<td>American Type Culture Collection</td>
			<td>N/A</td>
			<td>MCF-7 cancer line</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CellProfiler</td>
			<td>Broad Institute</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Image analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conical Tube</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89039-664</td>
			<td>15 mL conical tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>11965092</td>
			<td>Culture media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FAD dichroic mirror</td>
			<td>Semrock</td>
			<td>FF495-Di03-25x36</td>
			<td>495 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FAD emission filter</td>
			<td>Semrock</td>
			<td>FF01-550/88-25</td>
			<td>550/88 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FAD excitation filter</td>
			<td>Semrock</td>
			<td>FF01-458/64-25</td>
			<td>458/64 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>16000036</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence Lifetime Microscope</td>
			<td>3i</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass bottom dish</td>
			<td>MatTek Corp</td>
			<td>P35G-1.0-14-C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Multiphoton Laser</td>
			<td>Coherent</td>
			<td>N/A</td>
			<td>2P Coherent Laser, Tunable 680 nm-1080 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NAD(P)H dichroic mirror</td>
			<td>Semrock</td>
			<td>FF409-Di03-25x36</td>
			<td>409 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NAD(P)H emission filter</td>
			<td>Semrock</td>
			<td>FF02-447/60-25</td>
			<td>447/60 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NAD(P)H excitation filter</td>
			<td>Semrock</td>
			<td>FF01-357/44-25</td>
			<td>357/44 nm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>70011044</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Cyanide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>380970</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SlideBooks 6</td>
			<td>3i</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Image acquisition software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SPCImage</td>
			<td>Becker &#38; Hickl GmbH</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Fluorescence lifetime analysis software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stage Top Incubator</td>
			<td>okoLab</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin</td>
			<td>Biosciences</td>
			<td>786-262</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Urea</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>U5128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>YG beads</td>
			<td>Polysciences</td>
			<td>19096-2</td>
			<td>Yg microspheres (20.0 &#181;m)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

autofluorescence imaging to evaluate cellular metabolism

Cellulær metabolisme er prosessen der celler genererer energi, og mange sykdommer, inkludert kreft, er preget av unormal metabolisme. Redusert nikotinamid adenin (fosfat) dinukleotid (NAD(P)H) og oksidert flavin adenin dinukleotid (FAD) er koenzymer av metabolske reaksjoner. NAD(P)H og FAD utviser autofluorescens og kan isoleres av eksitasjons- og utslippsbølgelengder. Både koenzymer, NAD (P)H og FAD, kan eksistere i enten en fri eller proteinbundet konfigurasjon, som hver har en tydelig fluorescens levetid - tiden som fluoroforen forblir i spent tilstand. Fluorescens livstidsavbildning (FLIM) tillater kvantifisering av fluorescensintensiteten og levetiden til NAD (P)H og FAD for etikettfri analyse av cellulær metabolisme. Fluorescensintensitet og livstidsmikroskop kan optimaliseres for avbildning av NAD(P)H og FAD ved å velge passende eksitasjons- og utslippsbølgelengder. Metabolske perturbasjoner ved cyanid verifiserer autofluorescence imaging protokoller for å oppdage metabolske endringer i celler. Denne artikkelen vil demonstrere teknikken for autofluorescence imaging av NAD (P)H og FAD for måling av cellulær metabolisme.

Den epiteliale brystkreftcellelinjen, MCF-7, ble dyrket i DMEM supplert med 10% foster bovint serum (FBS) og 1% penicillin-streptomycin. For fluorescensavbildning ble cellene sådd med en tetthet på 4 × 105 celler per 35 mm glassbunnavbildningsfat 48 timer før avbildning. Cellene ble avbildet før og etter cyanidbehandling ved hjelp av protokollene nevnt ovenfor. Målet med cyanideksperimentet er å bekrefte spektral isolering av NAD(P)H og FAD fluorescens og validere bildesystemet og analyseprotokollen for...

Watch this Scientific Journal Video about Autofluorescence Imaging to Evaluate Cellular Metabolism at JoVE.com

Autofluorescence Imaging to Evaluate Cellular Metabolism

Denne protokollen beskriver fluorescensavbildning og analyse av endogene metabolske koenzymer, redusert nikotinamid adenin (fosfat) dinukleotid (NAD(P)H) og oksidert flavin adenin dinukleotid (FAD). Autofluorescence imaging av NAD (P)H og FAD gir en etikettfri, ikke-ødeleggende metode for å vurdere cellulær metabolisme.

Autofluorescence Imaging for å evaluere cellulær metabolisme

Cellular metabolism is the process by which cells generate energy, and many diseases, including cancer, are characterized by abnormal metabolism. Reduced ...

ADH og FAD er endogene molekyler som viser autofluorescens ved ulike eksitasjons- og utslippsbølgelengder. På grunn av deres bruk som koenzymer av metabolske reaksjoner, kan autofluorescence mikroskopi vurdere cellulær metabolisme. Autofluorescence avbildning av NADH og FAD krever ikke eksogene etiketter og er en ikke-destruktiv metode med subcellulær oppløsning.Autofluorescence mikroskopi kan brukes på levende prøver og for tidskursstudier. Autofluorescent avbildning kan brukes bredt på levende celler eller vev. Autofluorescent avbildning har blitt brukt på nevron, kreftcelle, svulst, in-vivo, stamcelle og immunceller.Linghao Hu, en avgangsstudent fra Quantitative Optical Imaging Laboratory ved Texas A&M University, demonstrerer prosedyren. Start eksperimentet ved å slå på alle komponentene i multi-photon fluorescens levetid mikroskop, inkludert laserkilden og detektorene. Før prøveplassering må du slå på den lyse feltlampen og sørge for at lyset går inn i okularet.Velg deretter et mål for celleavbildningen. Hvis du ikke bruker et luftmål, bruk en dråpe av riktig nedsenkingsmedium på toppen av målet. Plasser glassbunnsfatet på prøveholderen på mikroskopstadiet.Sentrer deretter prøven med målet ved hjelp av X/Y-trinnkontrollen Forsikre deg om at prøven er sikret og ikke vil bevege seg under avbildning. Når du er ferdig, se inn i okularet og flytt målet opp for å fokusere på cellene. Hvis mikroskopet er innenfor et kabinett, lukker du lysboksdøren.Deretter åpner du programvaren for bildeanskaffelse og klikker kategorien Multi-photon Imaging for å angi multi photon imaging-parametrene som beskrevet i manuskriptet. Juster forsterkningen av detektoren til den optimale verdien for fluorescenslevetidsavbildningen, eller FILM. Deretter endrer du oppholdstiden for laserutgiftene på hver piksel av prøven til ønsket verdi.For nikotinamid adeninfosfat dinukleotid, eller NADPH, sett multi-photon laser til 750 nanometer. Bekreft deretter at strømkontrollen for laseren er satt til null, slik at cellene ikke blir skadet når lukkeren åpnes på laseren. Sett et utslippsfilter på 400 til 500 nanometer.Når parameterne er angitt, begynner du å bildebehandling på en fokuserings- eller livevisningsmåte for å optimalisere bildeinnstillingene. Øk laserkraften sakte fra tre til åtte milliwatt samtidig som du sikrer at cellene er i fokus. Når den er justert, registrerer du den maksimale effekten som brukes.Bruk den registrerte maksimale strøminnstillingen for avbildningen på andre segmenter av Petri-parabolen. Samle et NADPH-FILM-bilde med en bildeintegrasjonstid på 60 sekunder og kontroller at bildet har et tilstrekkelig antall fotoner, for eksempel en topp på 100 fotoner for en cytoplasmak pixel innenfor fluorescensens levetid forfallskurve. Hvis antallet fotoner er for lavt, øker du lasereffekten eller varigheten av bildeanskaffelsen.For flavin adenin dinucleotide, eller FAD, bildebehandling, sett multi-photon laser til 890 nanometer og vent på laseren til modus-lås ved den nye bølgelengden. Kontroller at strømkontrollen for laseren er satt til null i utgangspunktet. Sett et utslippsfilter på 500 til 600 nanometer.For å optimalisere bildeinnstillingene begynner du å forestille deg på en fokusert eller live-view måte ved å øke laserkraften til 5 til 10 milliwatt og registrere maksimal effekt som brukes. Bruk samme strøminnstilling for FAD-bildet av etterfølgende synsfelt. Samle FAD-FILM-bildet med en bildeintegrasjonstid på 60 sekunder og kontroller at bildet har tilstrekkelige fotoner innenfor fluorescensens levetid forfallskurve.Hvis antallet fotoner er for lavt, øker du lasereffekten eller varigheten for bildeanskaffelse og gjentar bildet for ytterligere fire til fem synsfelt, eller FOVer, med hvert bilde plassert på to FOVer unna. For å lage en 80 millimolar natriumcyanidoppløsning, oppløs 130,24 milligram natriumcyanid i 25 milliliter PBS. Fra kulturretten aspirerer du 100 mikroliter kulturmedium for å erstatte med 100 mikroliter natriumcyanidoppløsning for å oppnå en fire millimolar konsentrasjon av cyanid i parabolen.Sett cellene i en inkubator i fem minutter for å la cellene reagere med cyanidoppløsningen. Etter cyanideksponeringen får du NADPH- og FAD-bilder av cellene som beskrevet tidligere. Studien beregnet fluorescenslevetidsparametrene ved hjelp av den målte instrumentresponsfunksjonen, eller IRF, fra urea.Parametrene ble gjennomsnittet på tvers av pikslene til cytoplasmaet til hver celle som brukes til segmentering. Individuelle celler ble identifisert og maskert for å eliminere bakgrunnsstøy. Deretter ble kjernen identifisert og projisert på cellemasken.Videre ble cellene filtrert for å fjerne de maskerte områdene som ikke passer til størrelsen på typiske celler. Multi-photon fluorescens levetid avbildning av NADPH og FAD tillot visualisering av cellemorfologi og metabolisme før og etter cyanid behandling. Det ble observert at NADPH livstid reduseres med cyanidbehandling, mens FAD-levetiden øker etter cyanidbehandling.Den representative boksplottet indikerte at det optiske redoksforholdet til MCF7-celler ble redusert etter cyanidbehandling. Cyanideksponeringen reduserte den amplitudevektede NADPH-levetiden til MCF7-celler. Den korte og lange levetiden gikk ned for NADPH, men økte for NADPH alfa en.For FAD økte den amplitudevektede levetiden til MCF7-celler etter cyanideksponering. Både korte og lange levetider økte for FAD, men redusert for FAD alfa en. Det er viktig å ha nok laserkraft til å gå til prøvene, men husk at for mye strøm kan forårsake skade på cellene.Fordi autofluorescence avbildning ikke er skadelig for cellene, kan etterfølgende biokjemiske analyser brukes på de samme prøvene.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

High-resolution Fiber-optic Microendoscopy for in situ Cellular Imaging

High-resolution Fiber-optic Microendoscopy for in situ Cellular Imaging

Many biological and clinical studies require the longitudinal study and analysis of morphology and function with cellular level resolution.  ...

Analyzing Cellular Internalization of Nanoparticles and Bacteria by Multi-spectral Imaging Flow Cytometry

Nanoparticulate  systems have emerged as valuable tools in vaccine delivery through their  ability to efficiently deliver cargo, including proteins, to ...

Models and Methods to Evaluate Transport of Drug Delivery Systems Across Cellular Barriers

Modeller og metoder for å vurdere transport av Drug Delivery Systems Across Cellular Barrierer

Sub-micrometer carriers (nanocarriers; NCs) enhance efficacy of drugs by improving solubility, stability, circulation time, targeting, and release. ...

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

En Full huddefekt modell for å evaluere vaskularisering av biomaterialer<em&gt; In Vivo</em

Insufficient vascularization is considered to be one of the main factors limiting the clinical success of tissue-engineered constructs. In order to ...

Using Cell-substrate Impedance and Live Cell Imaging to Measure Real-time Changes in Cellular Adhesion and De-adhesion Induced by Matrix Modification

Ved hjelp av Cell-substrat Impedans og Live Cell Imaging å måle sanntid Endringer i Cellular Grep og De-adhesjon indusert av Matrix Modification

Cell-matrix adhesion plays a key role in controlling cell morphology and signaling. Stimuli that disrupt cell-matrix adhesion (e.g., myeloperoxidase and ...

Initial Evaluation of Antibody-conjugates Modified with Viral-derived Peptides for Increasing Cellular Accumulation and Improving Tumor Targeting

Innledende vurdering av antistoff-conjugates endret med Viral-avledet peptider for øke mobilnettet akkumulering og forbedre svulst målretting

Antibody-conjugates (ACs) modified with virus-derived peptides are a potentially powerful class of tumor cell delivery agents for molecular payloads used ...

Calorespirometry: A Powerful, Noninvasive Approach to Investigate Cellular Energy Metabolism

Calorespirometry: En kraftig, Noninvasive tilnærming til undersøke Cellular energi metabolisme

Many cell lines used in basic biological and biomedical research maintain energy homeostasis through a combination of both aerobic and anaerobic ...

Intra-cardiac Side-Firing Light Catheter for Monitoring Cellular Metabolism using Transmural Absorbance Spectroscopy of Perfused Mammalian Hearts

Intra-CARDIAC side-avfyring lys kateter for overvåking Cellular metabolisme bruker transmuralt absorbansen spektroskopi av Perfusert pattedyr hjerter

Absorbance spectroscopy of cardiac muscle provides non-destructive assessment of cytosolic and mitochondrial oxygenation via myoglobin and cytochrome ...

3D Analysis of Multi-cellular Responses to Chemoattractant Gradients

3D-analyse av multi-Cellular Svar å Chemoattractant graderinger

Various limitations of 2D cell culture systems have sparked interest in 3D cell culture and analysis platforms, which would better mimic the spatial and ...

Imaging Integrin Tension and Cellular Force at Submicron Resolution with an Integrative Tension Sensor

Imaging Integrin spenning og mobilnettet Force Submicron oppløsning med en integrerende spenning Sensor

Molecular tension transmitted by integrin-ligand bonds is the fundamental mechanical signal in the integrin pathway that plays significant roles in many ...