Name: terminal h-reflex measurements in mice
Uploaded: 2022-06-16T12:30:00
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लेखक एमजी की प्रयोगशाला की यात्रा के दौरान डलहौजी विश्वविद्यालय के टी अके द्वारा समर्थन को कृतज्ञतापूर्वक स्वीकार करते हैं। इस काम को फ्रिब फाउंडेशन (टी0498/28960/16) और ड्यूश फोर्सचुंग्सगेमिनशाफ्ट (डीएफजी, जर्मन रिसर्च फाउंडेशन) - प्रोजेक्ट-आईडी 431549029 - एसएफबी 1451 से वित्त पोषण द्वारा समर्थित किया गया था।

सभी प्रयोगों को यूरोपीय और राष्ट्रीय पशु देखभाल कानूनों और संस्थागत दिशानिर्देशों के अनुपालन में आयोजित किया गया था, और लैंडसेम्ट फर नेचुर-, उम्वेल्ट-, और वर्ब्रौचरचुट्ज़ नॉर्थ राइन-वेस्टफेलिया (एजे?...

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	<li>Palmieri, R. M., Ingersoll, C. D., Hoffman, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Hoffmann+reflex:+methodologic+considerations+and+applications+for+use+in+sports+medicine+and+athletic+training+research.">The Hoffmann reflex: methodologic considerations and applications for use in sports medicine and athletic training research.</a> Journal of Athletic Training. 39 (3), 268-277 (2004).</li><li>Henneman, E., Somjen, G., Carpenter, D. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Excitability+and+inhibitibility+of+motoneurons+of+different+sizes.">Excitability and inhibitibility of motoneurons of different sizes.</a> Journal of Neurophysiology. 28 (3), 599-620 (1965).</li><li>Toda, T., Ishida, K., Kiyama, H., Yamashita, T., Lee, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Down-regulation+of+KCC2+expression+and+phosphorylation+in+motoneurons,+and+increases+the+number+of+in+primary+afferent+projections+to+motoneurons+in+mice+with+post-stroke+spasticity.">Down-regulation of KCC2 expression and phosphorylation in motoneurons, and increases the number of in primary afferent projections to motoneurons in mice with post-stroke spasticity.</a> PLoS ONE. 9 (12), 114328 (2014).</li><li>Lee, S., Toda, T., Kiyama, H., Yamashita, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Weakened+rate-dependent+depression+of+Hoffmann&#8217;s+reflex+and+increased+motoneuron+hyperactivity+after+motor+cortical+infarction+in+mice.">Weakened rate-dependent depression of Hoffmann&#8217;s reflex and increased motoneuron hyperactivity after motor cortical infarction in mice.</a> Cell Death &amp; Disease. 5 (1), 1007 (2014).</li><li>Knikou, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+H-reflex+as+a+probe:+Pathways+and+pitfalls.">The H-reflex as a probe: Pathways and pitfalls.</a> Journal of Neuroscience Methods. 171 (1), 1-12 (2008).</li><li>Wieters, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Introduction+to+spasticity+and+related+mouse+models.">Introduction to spasticity and related mouse models.</a> Experimental Neurology. 335, 113491 (2020).</li><li>Pearson, K. G., Acharya, H., Fouad, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+electrode+configuration+for+recording+electromyographic+activity+in+behaving+mice.">A new electrode configuration for recording electromyographic activity in behaving mice.</a> Journal of Neuroscience Methods. 148 (1), 36-42 (2005).</li><li>Akay, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+measurement+of+muscle+denervation+and+locomotor+behavior+in+individual+wild-type+and+ALS+model+mice.">Long-term measurement of muscle denervation and locomotor behavior in individual wild-type and ALS model mice.</a> Journal of Neurophysiology. 111 (3), 694-703 (2014).</li><li>Haghighi, S. S., Green, D. K., Oro, J. J., Drake, R. K., Kracke, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Depressive+effect+of+isoflurane+anesthesia+on+motor+evoked+potentials.">Depressive effect of isoflurane anesthesia on motor evoked potentials.</a> Neurosurgery. 26 (6), 993 (1990).</li><li>Chang, H. -. Y., Havton, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+effects+of+urethane+and+isoflurane+on+external+urethral+sphincter+electromyography+and+cystometry+in+rats.">Differential effects of urethane and isoflurane on external urethral sphincter electromyography and cystometry in rats.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 295 (4), 1248-1253 (2008).</li><li>Nolan, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Section+4:+Nervous+system+(Br.+J.+Pharmacol).">Section 4: Nervous system (Br. J. Pharmacol).</a> Clinical pharmacology. , 295-310 (2012).</li><li>Struck, M. B., Andrutis, K. A., Ramirez, H. E., Battles, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+a+short-term+fast+on+ketamine-xylazine+anesthesia+in+rats.">Effect of a short-term fast on ketamine-xylazine anesthesia in rats.</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science: JAALAS. 50 (3), 344-348 (2011).</li><li>Zandieh, S., Hopf, R., Redl, H., Schlag, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+ketamine/xylazine+anesthesia+on+sensory+and+motor+evoked+potentials+in+the+rat.">The effect of ketamine/xylazine anesthesia on sensory and motor evoked potentials in the rat.</a> Spinal Cord. 41 (1), 16-22 (2003).</li></ol>

माउस6 में पहले वर्णित ट्रांसक्यूटेनियस एच-रिफ्लेक्स माप के विपरीत, हम एक अधिक प्रत्यक्ष और तंत्रिका-विशिष्ट माप प्रदान करते हैं। इस नए दृष्टिकोण को फोर- और हिंदलिम्ब (जैसे, मेडियन, अल्नार, और र?...

हॉफमैन रिफ्लेक्स (एच-रिफ्लेक्स), जिसका नाम फिजियोलॉजिस्ट पॉल हॉफमैन के नाम पर रखा गया है, को परिधीय नसों की विद्युत उत्तेजना द्वारा उत्पन्न किया जा सकता है, जो संवेदी और मोटर न्यूरॉन्स के अक्षतंतु को एक ही मांसपेशियों से उत्पन्न और अग्रणी बनाते हैं। यह मोनोसिनेप्टिक स्ट्रेच रिफ्लेक्स का विद्युत रूप से प्रेरित एनालॉग है, और एक ही मार्ग1 साझा करता है। मांसपेशियों के खिंचाव के विपरीत, एच-रिफ्लेक्स विद्युत उत्तेजना से उत्पन्न होता है। जब परिधीय तंत्रिकाओं को कम वर्तमान तीव्रता पर विद्युत रूप से उत्तेजित किया जाता है, तो आईए अभिवाही तंतुओं को आमतौर पर उनके बड़े अक्षतंतु व्यास2 के कारण पहले विध्रुवीकृत किया जाता है। उनकी क्रिया क्षमता रीढ़ की हड्डी में अल्फा मोटरन्यूरॉन (एसएमएन) को उत्तेजित करती है, जो बदले में कार्रवाई क्षमता प्राप्त करती है जो मांसपेशियों की ओर αMN अक्षतंतु की यात्रा करती है (चित्रा 1)। यह कैस्केड छोटे आयाम के साथ एक पेशी प्रतिक्रिया उत्पन्न करता है, जो तथाकथित एच-तरंग में परिलक्षित होता है। धीरे-धीरे उत्तेजना तीव्रता में वृद्धि करके, अतिरिक्त मोटर इकाइयों की भर्ती के कारण एच-तरंग का आयाम बढ़ जाता है। एक निश्चित उत्तेजना तीव्रता से, 1एमएन के पतले अक्षतंतु में कार्रवाई क्षमता सीधे प्राप्त की जाती है, जिसे एम-तरंग के रूप में दर्ज किया जाता है। यह एम-तरंग एच-तरंग (चित्रा 2) की तुलना में कम विलंबता के साथ दिखाई देती है। यदि उत्तेजना की तीव्रता में और वृद्धि होती है, तो एम-तरंग का आयाम अधिक αMN अक्षतंतु की भर्ती के कारण बड़ा हो जाता है, जबकि H-तरंग धीरे-धीरे छोटी हो जाती है। एच-तरंग को उच्च उत्तेजना तीव्रता पर दबाया जा सकता है क्योंकि αMN अक्षतंतु में कार्रवाई क्षमता के एंटीड्रोमिक बैकप्रोपेगेशन के कारण। ये ट्रिगर एक्शन पोटेंशिअल आईए उत्तेजना से टकराते हैं और इस प्रकार एक-दूसरे को रद्द कर सकते हैं। सुपरमैक्सिमम उत्तेजना तीव्रता पर, ऑर्थोड्रोमिक (मांसपेशियों की ओर) और एंटीड्रोमिक (रीढ़ की हड्डी की ओर) कार्रवाई क्षमता सभी एमएन अक्षतंतु में होती है; पूर्व अधिकतम एम-वेव आयाम (एममैक्स) को जन्म देता है, जबकि बाद वाले के परिणामस्वरूप एच-रिफ्लेक्स3 का पूर्ण उन्मूलन होता है।
पोस्ट-स्ट्रोक स्पास्टिकिटी (पीएसएस) या रीढ़ की हड्डी की चोट (एससीआई) के मूल्यांकन के लिए, एच-रिफ्लेक्स काउपयोग मनुष्यों में आंदोलन और स्पास्टिकिटी के तंत्रिका आधार का आकलन करने के लिए किया गया है। माप के बीच और विषयों के बीच एच-रिफ्लेक्स में परिवर्तन का एक बेहतर परिमाणीकरण एच- और एम-वेव (एच / एम अनुपात) के अनुपात का उपयोग करके प्राप्त किया जाता है। वैकल्पिक रूप से, दर-निर्भर अवसाद (आरडीडी) को आरोही आवृत्तियों (जैसे, 0.1, 0.5, 1.0, 2.0 और 5.0 हर्ट्ज) के एक सेट का उपयोग करके मापा जाता है। आरडीडी निरोधात्मक सर्किट की अखंडता को दर्शाता है जो स्ट्रोक या एससीआई से परेशान हो सकता है। जब सभी तंत्रिका सर्किट बरकरार होते हैं, तो एच-रिफ्लेक्स का एक समान, आवृत्ति-स्वतंत्र दमन होता है। हालांकि, यदि स्ट्रोक या एससीआई के परिणामस्वरूप तंत्रिका अवरोध कम हो जाता है, तो एच-रिफ्लेक्स का दमन उत्तेजना आवृत्ति4 बढ़ने के साथ कम हो जाता है।
सतह इलेक्ट्रोड का उपयोग करके सही इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल रिकॉर्डिंग चुनौतीपूर्ण हो सकती है और मोटर कार्यों, निरोधात्मक तंत्र और5एमएन उत्तेजना से प्रभावित हो सकती है। कृन्तकों में ट्रांसक्यूटेनियस रिकॉर्डिंग में, टिबियल तंत्रिका के पास एक उत्तेजना इलेक्ट्रोड रखा जाता है, और फोरपाव में संबंधित मांसपेशियों के पास एक रिकॉर्डिंग इलेक्ट्रोड रखा जाता है। हमारे अनुभव के अनुसार, हालांकि, ट्रांसक्यूटेनियस इलेक्ट्रोड (चित्रा 1 ए) का सही प्लेसमेंट मनुष्यों में सतह इलेक्ट्रोड प्लेसमेंट की तुलना में कृन्तकों में और भी अधिक जटिल और परिवर्तनशील है। इससे एच-रिफ्लेक्स को प्राप्त करने के लिए आवश्यक लंबाई, आवृत्ति और उत्तेजना तीव्रता में अंतर हो सकता है। ये पद्धतिगत चुनौतियां यह समझा सकती हैं कि एच-रिफ्लेक्स माप अध्ययनों की केवल बहुत सीमित संख्या क्यों है (उदाहरण के लिए, प्रयोगात्मक स्ट्रोक मॉडल 3,4, और अन्य स्पास्टिकिटी मॉडल6 में)। व्यक्तिगत तंत्रिकाओं पर एच-रिफ्लेक्स की एक सटीक (दीर्घकालिक) उत्तेजना और रिकॉर्डिंग, सिद्धांत रूप में, लक्ष्य तंत्रिका 7,8 के आसपास प्रत्यारोपण योग्य इलेक्ट्रोड का उपयोग करके प्राप्त की जा सकती है। जानवर के लिए संभावित दुष्प्रभावों और जांच की संभावित अस्थिरता के साथ चुनौतीपूर्ण सर्जरी के कारण, यह दृष्टिकोण क्षेत्र में एक मानक नहीं बन पाया है। यहां प्रस्तुत विधि को कुछ शल्य चिकित्सा विशेषज्ञता की भी आवश्यकता होती है। हालांकि, यह कम उत्तेजना तीव्रता का उपयोग करके विवो में पृथक नसों की एक नई, सटीक उत्तेजना और रिकॉर्डिंग की अनुमति देता है, जो पड़ोसी नसों की एक साथ उत्तेजना से बचता है।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Absorbent underpad</td>
			<td>VWR</td>
			<td>115-0684</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AD converter</td>
			<td>Cambridge Electronic Design, UK</td>
			<td>CED 1401micro</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amplifier</td>
			<td>Workshop Zoological Institute, UoC</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital stimulator</td>
			<td>Workshop Zoological Institute, UoC</td>
			<td>MS 501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EMG electrodes</td>
			<td>Workshop Zoological Institute, UoC</td>
			<td></td>
			<td>Two twisted, insulated copper wires (50 &#181;m outer diameter) were soldered to a male plug and connected to a differential amplifier.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eye ointment</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>Bepanthen</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass pipette</td>
			<td>Workshop Zoological Institute, UoC</td>
			<td>-</td>
			<td>Prepare a glass pipette bent into a simple glass hook in the flame of a Bunsen burner.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating box</td>
			<td>MediHeat</td>
			<td>MediHeat V1200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating pad</td>
			<td>WPI</td>
			<td>61840 Heating pad</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hook electrodes</td>
			<td>Workshop Zoological Institute, UoC</td>
			<td>-</td>
			<td>To produce the electrodes, bend stainless steel miniature pins into hooks at one end and insert into blunt cannulas to create direct mechanical contact. Solder the end of the cannula to copper wires (length approx. 50 cm), which are connected to either stimulation or recording device.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>Ketavet</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rectal probe</td>
			<td>WPI</td>
			<td>RET-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stimulator isolation unit</td>
			<td>Workshop Zoological Institute, UoC</td>
			<td>MI 401</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterilizer</td>
			<td>CellPoint Scientific</td>
			<td>Germinator 500</td>
			<td>Routine pre- and post-operative disinfection of the surgical equipment should be done by heat sterilization. Decontaminate instruments for 15 s in the heated glass bead bath (260&#176;C).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Temperature controller</td>
			<td>WPI</td>
			<td>ATC200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vaseline</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>Rompun</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

terminal h-reflex measurements in mice

हॉफमैन रिफ्लेक्स (एच-रिफ्लेक्स), खिंचाव रिफ्लेक्स के लिए एक विद्युत एनालॉग के रूप में, रीढ़ की हड्डी की क्षति या स्ट्रोक जैसी चोटों के बाद तंत्रिका सर्किट की अखंडता के इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल सत्यापन की अनुमति देता है। एच-रिफ्लेक्स प्रतिक्रिया में वृद्धि, गैर-स्वैच्छिक मांसपेशी संकुचन, पैथोलॉजिकल रूप से संवर्धित खिंचाव रिफ्लेक्स और संबंधित मांसपेशियों में हाइपरटोनिया जैसे लक्षणों के साथ, पोस्ट-स्ट्रोक स्पास्टिसिटी (पीएसएस) का एक संकेतक है।
तंत्रिका-अस्पष्ट ट्रांसक्यूटेनियस मापों के विपरीत, यहां, हम एच-रिफ्लेक्स को सीधे फोरपाव के उलनार और माध्य तंत्रिकाओं पर निर्धारित करने के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं, जो मामूली संशोधनों के साथ, हिंडपाव के टिबियल और साइटिक तंत्रिका पर लागू होता है। प्रत्यक्ष उत्तेजना और विभिन्न नसों के अनुकूलन के आधार पर, विधि स्पास्टिसिटी से संबंधित रोग मॉडल में इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल परिवर्तनों को मान्य करने के लिए एक विश्वसनीय और बहुमुखी उपकरण का प्रतिनिधित्व करती है।

एन = 15 उत्तेजना परीक्षणों प्रति उत्तेजना आवृत्ति और पंजे से, विश्लेषण के लिए कम से कम एन = 10 सफल रिकॉर्डिंग का चयन करें। माप त्रुटियों (जैसे, लापता एम-वेव) वाले परीक्षणों को विश्लेषण से बाहर रखा गया है। प्र?...

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Terminal H-reflex Measurements in Mice

हॉफमैन रिफ्लेक्स (एच-रिफ्लेक्स) के आधार पर स्पास्टिकिटी का नैदानिक मूल्यांकन और परिधीय नसों की विद्युत उत्तेजना का उपयोग करना एक स्थापित विधि है। यहां, हम माउस फोरपाव में एच-रिफ्लेक्स परिमाणीकरण के लिए एक टर्मिनल और प्रत्यक्ष तंत्रिका उत्तेजना के लिए एक प्रोटोकॉल प्रदान करते हैं।

चूहों में टर्मिनल एच-रिफ्लेक्स माप

The Hoffmann reflex (H-reflex), as an electrical analog to the stretch reflex, allows electrophysiological validation of the integrity of neural circuits ...

एच-रिफ्लेक्स न्यूरो सर्किट की अखंडता के इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल सत्यापन की अनुमति देता है। हम चूहों में फोरपॉ की नसों पर सीधे एच-रिफ्लेक्स को निर्धारित करने के लिए एक टर्मिनल प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं। पारंपरिक बल्कि तंत्रिका-अस्पष्ट ट्रांसक्यूटेनियस रिकॉर्डिंग से अलग, परिणाम चूहों और माप के दिनों के बीच कम परिवर्तनशील हैं।रोगियों में एच-रिफ्लेक्स रिकॉर्डिंग के समान, सटीक परिमाणीकरण रोग मॉडल में इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल लक्षण वर्णन की अनुमति देता है, जैसे रीढ़ की हड्डी की चोट और स्ट्रोक। प्रोटोकॉल को चूहों में सर्जरी उपकरण के साथ काम करने में ठोस प्रयोगात्मक कौशल की आवश्यकता होती है।यदि आप अनिश्चित हैं कि संयोजी ऊतक और रक्त वाहिकाओं से नसों को कैसे अलग किया जाए, तो पहले अभ्यास करें। प्रक्रिया का प्रदर्शन फ्रेडरिक वीटर्स द्वारा किया जाएगा, जो मेरी प्रयोगशाला से पीएचडी छात्र हैं। शुरू करने के लिए, वयस्क एनेस्थेटाइज्ड 8-से 16 सप्ताह के सी 57 ब्लैक / 6 जे माउस को कवर हीटिंग पैड पर रखें और तब तक प्रतीक्षा करें जब तक कि माउस शांत न हो, श्वास स्थिर हो, और सजगता अनुपस्थित हो।माउस को उसकी पीठ पर घुमाएं। फिर, टेप के साथ फोरपॉज को ठीक करें। टेप को इस तरह रखें कि मापने वाले इलेक्ट्रोड आसानी से फोरपाव्स में डाले जाते हैं।माउस के तापमान को मापने के लिए एक रेक्टल जांच डालें और इसे टेप के साथ ठीक करें। आंखों को सूखने से बचाने के लिए आंखों का मलहम लगाएं। चिमटी के साथ त्वचा को उठाते हुए बारीक, गोल कैंची की एक जोड़ी के साथ फर को सावधानी से हटा दें।इसके बाद, ठीक, गोल कैंची की एक जोड़ी के साथ फोरपाव के वेंट्रोपोस्टेरियर अक्ष के साथ त्वचा में एक सेंटीमीटर का चीरा लगाएं। संयोजी ऊतक को सावधानीपूर्वक हटा दें और मांसपेशियों और तंत्रिका के नीचे उजागर करें। फिर मध्य तंत्रिका का आकलन करने के लिए बल का उपयोग करके उजागर पेक्टोरलिस प्रोफंडस मांसपेशी को हटा दें।नरम टिशू पेपर के साथ रक्त और ऊतक द्रव की थोड़ी मात्रा को हटा दें। इसके बाद, तंत्रिका बंडल को उजागर करने के लिए स्तन या एक्सिलरी मांसपेशियों को ऊपर से नीचे तक सावधानीपूर्वक काटें। लगभग 1.5 सेंटीमीटर की लंबाई में संयोजी और मांसपेशियों के ऊतकों से तंत्रिका बंडल को मुक्त करें।मुड़े हुए कांच के पिपेट का उपयोग करके फोरपाव के उलनार और मध्य तंत्रिका को सावधानीपूर्वक अलग करें। ऊपरी तंत्रिका उलनार तंत्रिका है और निचला मध्य तंत्रिका है। उत्तेजक हुक इलेक्ट्रोड को समानांतर में 0.5 से एक मिलीमीटर की दूरी पर व्यवस्थित करें और तंत्रिका के करीब डबल हुक को रखने के लिए एक माइक्रोमैनिपुलेटर का उपयोग करें।उत्तेजना हुक इलेक्ट्रोड पर उलनार तंत्रिका को उठाने के लिए ग्लास हुक का उपयोग करें। फिर, इलेक्ट्रोड को तंत्रिका के साथ वापस खींचें और इसे अन्य नसों से अलग करें। मांसपेशियों के बीच क्रॉसस्टॉक को कम करने के लिए पंजे की लंबी धुरी के साथ इलेक्ट्रोड रखें।तंत्रिका से जुड़े इलेक्ट्रोड हुक को सतही रूप से सुखाएं और आसन्न ऊतक से विद्युत इन्सुलेशन प्रदान करने के लिए सिरिंज का उपयोग करके पेट्रोलियम जेली लागू करें। एच-रिफ्लेक्स को मापने के लिए, इलेक्ट्रोमोग्राफी इलेक्ट्रोड को फोरपॉ में इंट्रामस्क्युलर रूप से रखें। फिर, संदर्भ इलेक्ट्रोड को पिछले अंग में चमड़े के नीचे रखें, जिसे एक लघु मगरमच्छ क्लिप द्वारा रखा गया है।जब उत्तेजक चालू होता है, तो फोरपॉ के छोटे स्विच के रूप में एक सफल उत्तेजना का निरीक्षण करें। फोरपाव में एम-वेव और छोटे दृश्यमान स्विच को प्राप्त करने के लिए न्यूनतम उत्तेजना प्रवाह 10 से 50 माइक्रोआंदोल के बीच होता है। तंत्रिका उत्तेजना को 0.2-मिलीसेकंड लंबी दालों के साथ 15 बार करें।उत्तेजनाओं के सेट के बीच दो मिनट के विराम के साथ, आवृत्ति 0.1, 0.5, 1.0, 2.0, से 5 हर्ट्ज तक बढ़ जाती है। हॉफमैन रिफ्लेक्स और मांसपेशियों की प्रतिक्रिया को मापने के लिए मार्गों में स्थापित रिकॉर्डिंग का एक चित्रण यहां दिखाया गया है। एच-और एम-वेव आयाम के बीच अनुपात का मूल्यांकन किया गया था।उत्तेजना और संबंधित उत्तेजना विरूपण साक्ष्य शून्य मिलीसेकंड पर सेट किए गए थे, इसके बाद प्रत्यक्ष एम-तरंग और बाद में एच-तरंग का प्रतिनिधित्व करने वाली छोटी चोटी थी। एम-तरंग उत्तेजना के लगभग दो मिलीसेकंड बाद होती है, और रीढ़ की हड्डी के माध्यम से लंबे पारगमन समय के कारण छह से आठ मिलीसेकंड के बाद एच-तरंग होती है। नसों के पृथक्करण के बगल में, इलेक्ट्रोड के लिए पेट्रोलियम जेली का अनुप्रयोग और दो हुक के बीच भी महत्वपूर्ण हैं।यह एक टर्मिनल प्रयोग है। हमारी प्रयोगशाला में, इस तकनीक ने ट्रांसक्यूटेनियस एच-रिफ्लेक्स रिकॉर्डिंग के लिए एक नया स्वर्ण मानक संदर्भ प्रदान किया।

Research

JoVE Journal

Biology

A Reversible, Non-invasive Method for Airway Resistance Measurements and Bronchoalveolar Lavage Fluid Sampling in Mice

Airway प्रतिरोध माप और चूहे में Bronchoalveolar Lavage द्रव नमूनाकरण के लिए एक प्रतिवर्ती, गैर इनवेसिव विधि

Airway hyperreactivity (AHR) measurements and bronchoalveolar lavage (BAL) fluid sampling are essential to experimental asthma models, but repeated ...

Transverse Aortic Constriction in Mice

चूहे में ट्रांसवर्स महाधमनी कसना

Transverse aortic constriction (TAC) in the mouse is a commonly used experimental model for pressure overload-induced cardiac hypertrophy and heart ...

Ambulatory ECG Recording in Mice

चूहे में चल ईसीजी रिकॉर्डिंग

Telemetric ECG recording in mice is essential to understanding the mechanisms behind arrhythmias, conduction disorders, and sudden cardiac death. Although ...

Examination of Drosophila Larval Tracheal Terminal Cells by Light Microscopy

Examination of Drosophila Larval Tracheal Terminal Cells by Light Microscopy

की परीक्षा<em&gt; ड्रोसोफिला</emलाइट माइक्रोस्कोपी द्वारा&gt; लारवल Tracheal टर्मिनल प्रकोष्ठों

Cell shape is critical for cell function. However, despite the importance of cell morphology, little is known about how individual cells generate specific ...

Cytosolic Calcium Measurements in Renal Epithelial Cells by Flow Cytometry

फ्लो से गुर्दे उपकला कोशिकाओं में साइटोसोलिक कैल्शियम माप

A variety of cellular processes, both physiological and pathophysiological, require or are governed by calcium, including exocytosis, mitochondrial ...

Non-Terminal Blood Sampling Techniques in Guinea Pigs

गिनी सूअरों में गैर टर्मिनल रक्त नमूना तकनीक

Guinea pigs possess several biological similarities to humans and are validated experimental animal models1-3. However, the use of guinea pigs currently ...

Functional Reconstitution and Channel Activity Measurements of Purified Wildtype and Mutant CFTR Protein

शुद्ध wildtype और उत्परिवर्ती CFTR प्रोटीन के कार्यात्मक पुनर्गठन और चैनल गतिविधि माप

The Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator (CFTR) is a unique channel-forming member of the ATP Binding Cassette (ABC) superfamily of ...

Contractility Measurements on Isolated Papillary Muscles for the Investigation of Cardiac Inotropy in Mice

चूहे में कार्डिएक Inotropy की जांच के लिए पृथक इल्लों से भरा हुआ मांसपेशियों पर सिकुड़ना माप

Papillary muscle isolated from adult mouse hearts can be used to study cardiac contractility during different physiological/pathological conditions. The ...

Cystometric and External Urethral Sphincter Measurements in Awake Rats with Implanted Catheter and Electrodes Allowing for Repeated Measurements

Cystometric और बाह्य मूत्रमार्ग प्रत्यारोपित कैथेटर और दोहराया माप के लिए अनुमति इलेक्ट्रोड के साथ जाग चूहों में दबानेवाला माप

Lower urinary tract function is mainly assessed by means of cystometric bladder function analysis in rodents. Conventional cystometries are usually ...

Measurements of Physiological Stress Responses in C. Elegans

Measurements of Physiological Stress Responses in C. Elegans

सी. एलिगेंस में शारीरिक तनाव प्रतिक्रियाओं के माप

Organisms are often exposed to fluctuating environments and changes in intracellular homeostasis, which can have detrimental effects on their proteome and ...