Name: a microphysiological system to study leukocyte-endothelial cell interaction during inflammation
Uploaded: 2021-12-09T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Microphysiological System to Study Leukocyte-Endothelial Cell Interaction during Inflammation at JoVE.com

Bu çalışma Ulusal Sağlık Enstitüleri, Hibe Numarası: GM114359 ve GM134701 (M.F.K. ve L.E.K.), 1F31AI164870-01 (J.C.L.) ve Savunma Tehdidi Azaltma Ajansı, Hibe Numarası: HDTRA11910012 (M.F.K. ve L.E.K.) tarafından desteklenmiştir.

Heparinize insan kanı, Temple Üniversitesi Kurumsal İnceleme Kurulu (Philadelphia, PA, ABD) tarafından onaylanan bilgilendirilmiş onam sonrasında, sağlıklı yetişkin donörlerden (21 ila 60 yaşları arasındaki erkek ve kadınlar) nötrofil izolasyonu için elde edilir.
1. Cihazın insan fibronektini ile astarlanması ve kaplanması
NOT: bMFA'nın vasküler bölmeye bağlı iki giriş bağlantı noktası ve iki çıkış bağlantı noktası ...

<ol>
	<li>Kolaczkowska, E., Kubes, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+recruitment+and+function+in+health+and+inflammation.">Neutrophil recruitment and function in health and inflammation.</a> Nature Reviews Immunology. 13 (3), 159-175 (2013).</li><li>Yang, Q., Wijerathne, H., Langston, J. C., Kiani, M. F., Kilpatrick, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emerging+approaches+to+understanding+microvascular+endothelial+heterogeneity:+A+roadmap+for+developing+anti-inflammatory+therapeutics.">Emerging approaches to understanding microvascular endothelial heterogeneity: A roadmap for developing anti-inflammatory therapeutics.</a> International Journal of Molecular Sciences. 22 (15), 7770 (2021).</li><li>Joffre, J., Hellman, J., Ince, C., Ait-Oufella, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+responses+in+sepsis.">Endothelial responses in sepsis.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 202, 361-370 (2020).</li><li>Ince, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+endothelium+in+sepsis.">The endothelium in sepsis.</a> Shock. 45, 259-270 (2016).</li><li>Ruparelia, N., Chai, J. T., Fisher, E. A., Choudhury, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+processes+in+cardiovascular+disease:+a+route+to+targeted+therapies.">Inflammatory processes in cardiovascular disease: a route to targeted therapies.</a> Nature Reviews Cardiology. 14 (3), 133-144 (2017).</li><li>Kilpatrick, L. E., Kiani, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+approaches+to+evaluate+leukocyte-endothelial+cell+interactions+in+sepsis+and+inflammation.">Experimental approaches to evaluate leukocyte-endothelial cell interactions in sepsis and inflammation.</a> Shock. 53, 585-595 (2020).</li><li>Langer, H. F., Chavakis, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Leukocyte-endothelial+interactions+in+inflammation.">Leukocyte-endothelial interactions in inflammation.</a> Journal of Cellular and Molecular Medicine. 13 (7), 1211-1220 (2009).</li><li>Sadik, C. D., Luster, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipid-cytokine-chemokine+cascades+orchestrate+leukocyte+recruitment+in+inflammation.">Lipid-cytokine-chemokine cascades orchestrate leukocyte recruitment in inflammation.</a> Journal of Leukocyte Biology. 91 (2), 207-215 (2012).</li><li>Phillipson, M., Kubes, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neutrophil+in+vascular+inflammation.">The neutrophil in vascular inflammation.</a> Nature Medicine. 17, 1381-1390 (2011).</li><li>Maniatis, N. A., Orfanos, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+endothelium+in+acute+lung+injury/acute+respiratory+distress+syndrome.">The endothelium in acute lung injury/acute respiratory distress syndrome.</a> Current Opinion in Critical Care. 14, 22-30 (2008).</li><li>Ley, K., Laudanna, C., Cybulsky, M. I., Nourshargh, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Getting+to+the+site+of+inflammation:+the+leukocyte+adhesion+cascade+updated.">Getting to the site of inflammation: the leukocyte adhesion cascade updated.</a> Nature Reviews Immunology. 7, 678-689 (2007).</li><li>Molteni, R., Fabbri, M., Bender, J. R., Pardi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathophysiology+of+leukocyte-tissue+interactions.">Pathophysiology of leukocyte-tissue interactions.</a> Current Opinion in Cell Biology. 18, 491-498 (2006).</li><li>Chistiakov, D. A., Orekhov, A. N., Bobryshev, Y. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+shear+stress+on+endothelial+cells:+go+with+the+flow.">Effects of shear stress on endothelial cells: go with the flow.</a> Acta Physiologica. 219 (2), 382-408 (2017).</li><li>Prabhakarpandian, B., Shen, M. -. C., Pant, K., Kiani, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microfluidic+devices+for+modeling+cell-cell+and+particle-cell+interactions+in+the+microvasculature.">Microfluidic devices for modeling cell-cell and particle-cell interactions in the microvasculature.</a> Microvascular Research. 82, 210-220 (2011).</li><li>Zou, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PSGL-1+derived+from+human+neutrophils+is+a+high-efficiency+ligand+for+endothelium-expressed+E-selectin+under+flow.">PSGL-1 derived from human neutrophils is a high-efficiency ligand for endothelium-expressed E-selectin under flow.</a> American Journal of Physiology-Cell Physiology. 289, 415-424 (2005).</li><li>Lamberti, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioinspired+microfluidic+assay+for+in+vitro+modeling+of+leukocyte-endothelium+interactions.">Bioinspired microfluidic assay for in vitro modeling of leukocyte-endothelium interactions.</a> Analytical Chemistry (Journal). 86, 8344-8351 (2014).</li><li>Prabhakarpandian, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthetic+microvascular+networks+for+quantitative+analysis+of+particle+adhesion.">Synthetic microvascular networks for quantitative analysis of particle adhesion.</a> Biomedical Microdevices. 10 (4), 585-595 (2008).</li><li>Soroush, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+microfluidic+assay+reveals+a+key+role+for+protein+kinase+C+delta+in+regulating+human+neutrophil-endothelium+interaction.">A novel microfluidic assay reveals a key role for protein kinase C delta in regulating human neutrophil-endothelium interaction.</a> Journal of Leukocyte Biology. 100, 1027-1035 (2016).</li><li>Roth, N. M., Kiani, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+&amp;#34;geographic+information+systems&amp;#34;+based+technique+for+the+study+of+microvascular+networks.">A &amp;#34;geographic information systems&amp;#34; based technique for the study of microvascular networks.</a> Annals of Biomedical Engineering. 27, 42-47 (1999).</li><li>Prabhakarpandian, B., Wang, Y. I., Rea-Ramsey, A., Sundaram, S., Kiani, M. F., Pant, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bifurcations:+Focal+points+of+particle+adhesion+in+microvascular+networks.">Bifurcations: Focal points of particle adhesion in microvascular networks.</a> Microcirculation. 18, 380-389 (2011).</li><li>Rosano, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+physiologically+realistic+in+vitro+model+of+microvascular+networks.">A physiologically realistic in vitro model of microvascular networks.</a> Biomedical Microdevices. 11, 1051-1057 (2009).</li><li>Tousi, N., Wang, B., Pant, K., Kiani, M. F., Prabhakarpandian, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preferential+adhesion+of+leukocytes+near+bifurcations+is+endothelium+independent.">Preferential adhesion of leukocytes near bifurcations is endothelium independent.</a> Microvascular Research. 80, 384-388 (2010).</li><li>Yona, S., Hayhoe, R., Avraham-Davidi, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monocyte+and+neutrophil+isolation+and+migration+assays.">Monocyte and neutrophil isolation and migration assays.</a> Current Protocols in Immunology. 88 (1), 11-14 (2010).</li><li>Entschladen, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+methods+of+human+cell+migration.">Analysis methods of human cell migration.</a> Experimental Cell Research. 307 (2), 418-426 (2005).</li><li>Chen, H. -. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Boyden+chamber+assay.+Methods+in+Molecular+Biology.">Boyden chamber assay. Methods in Molecular Biology.</a> Cell Migration: Developmental Methods and Protocols. , (2005).</li><li>Deosarkar, S. P., Prabhakarpandian, B., Wang, B., Sheffield, J. B., Krynska, B., Kiani, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+dynamic+neonatal+blood-brain+barrier+on+a+chip.">A novel dynamic neonatal blood-brain barrier on a chip.</a> PloS one. 10, 142725 (2015).</li><li>Soroush, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil-endothelial+interactions+of+murine+cells+is+not+a+good+predictor+of+their+interactions+in+human+cells.">Neutrophil-endothelial interactions of murine cells is not a good predictor of their interactions in human cells.</a> The FASEB Journal. 34, 2691-2702 (2020).</li><li>Soroush, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+Kinase+C-Delta+(PKC&#948;)+tyrosine+phosphorylation+is+a+critical+regulator+of+neutrophil-endothelial+cell+interaction+in+inflammation.">Protein Kinase C-Delta (PKC&#948;) tyrosine phosphorylation is a critical regulator of neutrophil-endothelial cell interaction in inflammation.</a> Shock. 51 (5), 538-547 (2019).</li><li>Soroush, F., Tang, Y., Zaidi, H. M., Sheffield, J. B., Kilpatrick, L. E., Kiani, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PKC&#948;+inhibition+as+a+novel+medical+countermeasure+for+radiation-induced+vascular+damage.">PKC&#948; inhibition as a novel medical countermeasure for radiation-induced vascular damage.</a> The FASEB Journal. 32, 6436-6444 (2018).</li><li>Pradhan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+microvascularized+tumor-mimetic+platform+for+assessing+anti-cancer+drug+efficacy.">A microvascularized tumor-mimetic platform for assessing anti-cancer drug efficacy.</a> Scientific Reports. 8 (1), 3171 (2018).</li><li>Tang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+biomimetic+microfluidic+tumor+microenvironment+platform+mimicking+the+EPR+effect+for+rapid+screening+of+drug+delivery+systems.">A biomimetic microfluidic tumor microenvironment platform mimicking the EPR effect for rapid screening of drug delivery systems.</a> Scientific Reports. 7 (1), 1-14 (2017).</li><li>Tang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+kinase+C-delta+inhibition+protects+blood-brain+barrier+from+sepsis-induced+vascular+damage.">Protein kinase C-delta inhibition protects blood-brain barrier from sepsis-induced vascular damage.</a> Journal of Neuroinflammation. 15, 309 (2018).</li><li>Mondrinos, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulmonary+endothelial+protein+kinase+C-delta+(PKCd)+regulates+neutrophil+migration+in+acute+lung+inflammation.">Pulmonary endothelial protein kinase C-delta (PKCd) regulates neutrophil migration in acute lung inflammation.</a> The American Journal of Pathology. 184, 200-213 (2014).</li><li>Kilpatrick, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protection+against+sepsis-induced+lung+injury+by+selective+inhibition+of+protein+kinase+C-d+(d-PKC).">Protection against sepsis-induced lung injury by selective inhibition of protein kinase C-d (d-PKC).</a> Journal of Leukocyte Biology. 89, 3-10 (2011).</li><li>Mondrinos, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biodistribution+and+efficacy+of+targeted+pulmonary+delivery+of+a+protein+kinase+C-d+inhibitory+peptide:+Impact+on+Indirect+lung+Injury.">Biodistribution and efficacy of targeted pulmonary delivery of a protein kinase C-d inhibitory peptide: Impact on Indirect lung Injury.</a> Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 355, 86-98 (2015).</li><li>Liverani, E., Mondrinos, M. J., Sun, S., Kunapuli, S. P., Kilpatrick, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+protein+kinase+C-delta+in+regulating+platelet+activation+and+platelet-leukocyte+interaction+during+sepsis.">Role of protein kinase C-delta in regulating platelet activation and platelet-leukocyte interaction during sepsis.</a> PloS one. 13, 0195379 (2018).</li><li>Smith, A. M., Prabhakarpandian, B., Pant, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+shear+adhesion+map+using+SynVivo+synthetic+microvascular+networks.">Generation of shear adhesion map using SynVivo synthetic microvascular networks.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (87), e51025 (2014).</li></ol>

bMFA, in vivo mikrovasküler ağların topografyasını ve akış koşullarını yeniden üretir ve fizyolojik olarak gerçekçi koşullar altında lökosit-endotelyal hücre etkileşimini ve endotel fonksiyonunu in vitro olarak incelemek için kullanılabilir. Fare veya insanın mikrovaskülatüründe, mikrovasküler ağların geometrisi kendine benzer ve fraktaldır ve Reynolds sayısı 1'<<, vasküler geometrinin akış modellerini önemli ölçüde etkilemediğini gösterir. Bu nedenle, bFMA, insanl...

Enflamasyon, enfeksiyon ve yaralanmaya karşı konakçı yanıtıdır ve endotel, inflamatuar yanıtta önemli bir rol oynar 1,2,3. İnflamatuar disregülasyon, sepsis, kardiyovasküler hastalıklar, astım, inflamatuar bağırsak hastalığı, kanser ve COVID-19 gibi bir dizi hastalık patolojisinin altında yatan nedendir. Lökosit-endotelyal hücre etkileşimleri bu inflamatuar hastalıklarda merkezi bir rol oynamaktadır. Enflamasyon sırasında, patojenlerden PAMPS'nin (patojenle ilişkili moleküler paternler) veya hasarla ilişkili moleküler paternler) yaralı dokulardan DAMPS'lerin (hasarla ilişkili moleküler paternler) salınması, endotelin aktivasyonuna yol açan sitokinler / kemokinler ve diğer proinflamatuar mediatörleri serbest bırakmak için bağışıklık hücrelerini aktive eder, bu da vasküler endotel bariyer fonksiyonunda değişikliklere ve geçirgenliğin artmasına neden olur 3,4 . Enflamasyon sırasında endotel hücrelerinin artan aktivasyonu, artmış lökosit-endotel hücre etkileşimi ile sonuçlanır ve aktif lökositlerin vasküler endotel boyunca anahtar organlara aşırı göçüne yol açar 1,5,6,7.
Lökositlerin işe alımı, biyoaktif lipitler, sitokinler, kemokinler ve kompleman bileşenlerinden oluşan kimyasal olarak çeşitli kemoattractantlar tarafından başlatılır 8,9. Lökosit işe alımı, beş ayrı adımı içeren çok adımlı bir süreçtir: 1) lökosit marjinasyonu ve yakalama / bağlanma, 2) yuvarlanma, 3) sıkı tutuklama, 4) yayılma ve tarama ve 5) ekstravazasyon / göç (Şekil 1). Bu sürecin her adımı, bu dinamik fenomeni düzenlemek için lökositler ve endotel hücreleri arasında çapraz konuşma gerektirir 1,9. Nihayetinde, tutuklanan lökositler, eşzamanlı kemoattractant'a bağımlı sinyaller, yapışkan olaylar ve hemodinamik kesme kuvvetleri 1,9,10,11,12 tarafından kontrol edilen çok adımlı bir süreçle endotel boyunca iltihaplı dokulara ekstravaze olurlar.
Endotel hücre fonksiyonunun düzenlenmesinde kayma stresinin merkezi rolü ve lökosit-endotel hücre etkileşimlerinin önemi göz önüne alındığında13, lökosit migrasyon kaskadının çeşitli yönlerini daha kontrollü bir ortamda incelemek için son birkaç on yılda birkaç in vitro model geliştirilmiştir14. Lökosit-endotelyal hücre etkileşimlerini incelemek için geleneksel akışkan cihazlar iki geniş kategoriye ayrılabilir14: a) paralel plaka akış odaları gibi lökosit haddeleme, yapışma ve adezyon molekülü ekspresyonunu incelemek için cihazlar ve b) transwell odaları gibi statik koşullar altında lökosit göçünü incelemek için cihazlar. Paralel plaka akış odaları gibi sistemler, yapışma moleküllerinin ve ligandlarının kesme kuvvetleri15 altındaki yapışma kaskadındaki rollerini incelemek için kullanılmıştır. Bununla birlikte, önemli bir dezavantaj, bu basit, idealize edilmiş cihazların (örneğin, düz kanal), in vivo mikrovaskülatürün ölçeğini ve geometrisini (örneğin, ardışık vaskülarjikasyonlar, vasküler morfoloji) ve sonuçta ortaya çıkan akış koşullarını (örneğin, bifurkasyonlarda yakınsak veya saptırıcı akışlar) yeniden üretememesidir. Sonuç olarak, bu cihazlar yalnızca yapışmayı modelleyebilir, ancak geçişi modelleyemez. Transwell odaları, in vivo geometrik özellikleri ve akış koşullarını dikkate almadan yalnızca statik koşullar altında transmigrasyon üzerinde çalışabilir. Bu nedenle, bu geleneksel modeller canlı dokuların mikro ortamını taklit etmez veya yapışma ve göç kaskadını tek bir tahlilde çözmez6.
Bu sınırlamayı ele almak için,16,17,18 çip üzerinde in vivo mikrovasküler ağları gerçekçi bir şekilde yeniden üreten yeni bir 3D biyomimetik mikroakışkan testi (bMFA) geliştirdik ve kapsamlı bir şekilde doğruladık. Bu cihazın mikrofabrikasyonu için protokol daha önce17 yayınlanmıştır ve burada sadece kısaca açıklanmıştır. Fare cremaster kasının mikrovaskülatürü, modifiye edilmiş bir Coğrafi Bilgi Sistemi (CBS) yaklaşımı19 kullanılarak sayısallaştırılmıştır. Daha sonra, sentetik mikrovasküler ağ, sayısallaştırılmış mikrovasküler ağ 14,17,20,21,22'ye dayanan yumuşak litografi işlemleri kullanılarak polidimetilsiloksan (PDMS) üzerinde üretildi. Kısaca, sayısallaştırılmış ağ görüntüleri Mylar filmine basıldı ve daha sonra imalat için ustalar oluşturmak için bir silikon gofret üzerine SU-8 pozitif fotodirenci modellemek için bir maske olarak kullanıldı. Mikrofabrikasyon sütunlar (10 μm çap, 3 μm boyunda), vasküler kanalları ve doku bölmelerini birbirine bağlayan lökosit migrasyonu23,24,25 için optimum boyut olan 3 μm yüksekliğinde ve 100 μm genişliğinde gözenekler oluşturmak için kullanılmıştır. PDMS, üreticinin talimatlarına göre hazırlandı ve geliştirilen ustaların üzerine döküldü. Ayrıca, PDMS gazdan arındırıldı ve PDMS'de tamamlayıcı mikro kanallar oluşturmak için bir fırında (65 ° C) gece boyunca kürlenmesine izin verildi. Daha sonra, kürlenmiş PDMS SU-8 master'dan soyuldu, ardından girişler / çıkışlar için delme portları izlendi. Daha sonra, PMDS plazma bir cam slayta bağlandı. Mikroakışkan cihazın yüzeyi doğal cam ve PDMS'den oluşur. Hücre bağlanmasını, yayılmasını ve çoğalmasını teşvik etmek için, hücre dışı matris (ECM) kaplaması gereklidir. bMFA, mikrovasküler bir ağ ve 3 μm yüksekliğinde ve 100 μm genişliğinde gözeneklerle bağlanmış bir doku bölmesi içerir (Şekil 2). Bu mikroakışkan sistem, lökositlerin dolaşımı, marjinasyonu, yuvarlanması, yapışması ve ekstravasküler doku bölmesine göçü dahil olmak üzere birbirine bağlı damarlar ve çatallanmalar ile tam bir mikrovasküler ağın fizyolojik olarak ilgili 3D ortamında tüm lökosit yapışması / migrasyon kaskadını tek bir sistemde yeniden üretir 14,16,17,21,26.
bMFA girişindeki akış hızı sabit olsa bile, ağdaki akış koşullarının farklı yerlerde değiştiği ve basit bir matematiksel formülle hesaplanamayacağı belirtilmelidir. Ağdaki farklı konumlarda farklı akış parametrelerini (örneğin, kesme gerilimi, kesme hızı, hız) hesaplamak için hesaplamalı akışkanlar dinamiği (CFD) tabanlı bir model geliştirilmiştir. Bu CFD modeli, bMFA'daki boya perfüzyon modellerini ve akış parametrelerini simüle etmek için kullanılmıştır. Deneysel sonuçlarla çapraz doğrulama, ağ üzerindeki akış dirençlerinin hesaplama modeli tarafından iyi tahmin edildiğini göstermiştir (Şekil 3)17. Bu CFD modeli daha sonra bMFA'nın her bir kabındaki hız ve kesme hızı profilini tahmin etmek için kullanıldı (Şekil 4), kesme akışının ve geometrinin lökosit haddeleme, yapışma ve migrasyon üzerindeki etkilerinin analizine izin verdi16. Lökositler tercihen bifurkasyonların yakınında ve düşük kesme bölgelerinde in vivo olarak yapışırlar ve lökosit yapışmasının bu uzamsal kalıpları nötrofiller kullanılarak bMFA'da başarıyla gösterilmiştir (Şekil 5)16. Bu yazıda, insan akciğer mikrovasküler endotel hücreleri (HLMVEC) ve insan nötrofilleri kullanılarak enflamatuar koşullar altında lökosit-endotelyal hücre etkileşimini incelemek için bMFA'nın hazırlanması protokolü açıklanmaktadır. bMFA gibi mikrofizyolojik sistemler, nötrofiller, monositler, lenfositler ve tümör hücreleri 18,27,28,29,30 gibi farklı hücre tipleriyle endotel hücre etkileşimlerini incelemek için kullanılabilir. bMFA, farklı organlardan (örneğin, akciğere karşı beyin) ve farklı türlerden (örneğin, insan ve murin endotel hücreleri) birincil endotel hücreleri ve endotel hücre hatları21,27,31,32 ile tohumlanabilir. bMFA, çoklu hücresel yanıtları, hücre-hücre etkileşimlerini, bariyer fonksiyonunu, ilaç dağıtımını ve ilaç toksisitesini incelemek için kullanılabilir.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 mL syringe</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>14-823-30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Biomimetic microfluidic assay (bMFA)</td>
			<td>SynVivo</td>
			<td>SMN1-C001</td>
			<td>Exclusive at SynVivo</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Blunt needle</td>
			<td>Jensen Global</td>
			<td>JG24-0.5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Chloride</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>C70-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CFDA, SE</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>C1157</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dextran, 250,000, Powder</td>
			<td>Spectrum Chemical Mfg. Corp</td>
			<td>DE-130</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ficoll-Paque Premium</td>
			<td>GE Health Care</td>
			<td>17-5442-02</td>
			<td>Leukocyte isolation media</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fMLP</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>F3506</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hepes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>AAJ1692630</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human fibronectin</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>33-016-015</td>
			<td>use vendor recommended ECM for different cell lines</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microvascular Endothelial Cell Growth Medium-2 BulletKit</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>cc-3202</td>
			<td>Human lung microvascular endothelial cell culture medium (HLMVEC).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human lung microvascular endothelial cells</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>cc-2527</td>
			<td>use vedor remommended trypsin-EDTA and TNS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium Chloride</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP214-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nikon Eclipse Ti2</td>
			<td>Nikon Instruments Inc.</td>
			<td></td>
			<td>Microscope</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NIS-elements, 5.20.01</td>
			<td>Nikon Instruments Inc.</td>
			<td></td>
			<td>Imaging software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>MT21040CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PhD Ultra Syringe Pump</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>70-3007</td>
			<td>Syringe Pump</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium Hydroxide</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>02-003-763</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Recombinant Human TNF-alpha</td>
			<td>R&#38;D Systems</td>
			<td>210-TA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Slide clamp</td>
			<td>SynVivo</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>S640-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Synvivo Pneumatic Primer</td>
			<td>SynVivo</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA, Trypsin Neutralization Solution(TNS)</td>
			<td>Lonza</td>
			<td>cc-5034</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tygon tubing</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>50-206-8921</td>
			<td>Tubing</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a microphysiological system to study leukocyte-endothelial cell interaction during inflammation

Lökosit-endotelyal hücre etkileşimleri sepsis gibi inflamatuar hastalıklarda önemli rol oynamaktadır. Enflamasyon sırasında, aktif lökositlerin vasküler endotel boyunca anahtar organlara aşırı göçü organ yetmezliğine yol açabilir. Fizyolojik olarak ilgili bir biyomimetik mikroakışkan testi (bMFA), lökosit-endotelyal hücre etkileşimlerini incelemek için tüm lökosit haddeleme / adezyon / migrasyon kaskadını yeniden üretebilen çeşitli deneysel ve hesaplama teknikleri kullanılarak geliştirilmiş ve doğrulanmıştır. Kemirgenlerde in vivo görüntülerden elde edilen mikrovasküler ağlar, Coğrafi Bilgi Sistemi (CBS) yaklaşımı kullanılarak sayısallaştırıldı ve mikroskop slaytı üzerinde polidimetilsiloksan (PDMS) ile mikrofabrikasyona tabi tutuldu. Kesme hızının ve vasküler topolojinin lökosit-endotel hücre etkileşimleri üzerindeki etkisini incelemek için, ağ boyunca kayma hızlarının ve hızlarının karşılık gelen bir haritasını oluşturmak için bir Hesaplamalı Akışkanlar Dinamiği (CFD) modeli geliştirilmiştir. bMFA, yuvarlanma hızı, farklı kesme oranlarına yanıt olarak yapıştırılmış lökosit sayısı, göç eden lökosit sayısı, endotel hücre geçirgenliği, adezyon molekülü ekspresyonu ve diğer önemli değişkenler dahil olmak üzere lökosit-endotel hücre etkileşimlerinin miktarını sağlar. Ayrıca, insan endotel hücreleri ve lökositler gibi insanla ilgili örnekleri kullanarak, bMFA, klinik çevrilebilirliklerini artırmak için potansiyel terapötiklerin hızlı bir şekilde taranması için bir araç sağlar.

bMFA'da kesme akımı altında 48 saatlik kültürden sonra, endotel hücreleri bMFA'daki vasküler kanalların yüzeyini kapladı ve akış yönünde hizalandı (Şekil 6). Konfokal mikroskopi, vasküler kanalların tüm yüzeylerinin endotel hücreleri tarafından kaplandığını ve bMFA18'de tam bir 3D lümen oluşturduğunu gösterdi.
Bu protokol kullanılarak, bMFA'da nötrofillerin endotel hücresine önemli ölçüde yapıştığın...

Watch this Scientific Journal Video about A Microphysiological System to Study Leukocyte-Endothelial Cell Interaction during Inflammation at JoVE.com

A Microphysiological System to Study Leukocyte-Endothelial Cell Interaction during Inflammation

Bu protokolde, fizyolojik olarak ilgili bir mikrovasküler ortamı yeniden üretebilen ve tüm lökosit adezyon / migrasyon kaskadını yeniden üretebilen bir biyomimetik mikroakışkan testi, inflamatuar hastalıkta lökosit-endotel hücre etkileşimlerini incelemek için kullanılmaktadır.

Enflamasyon Sırasında Lökosit-Endotelyal Hücre Etkileşimini İnceleyen Mikrofizyolojik Bir Sistem

Leukocyte-endothelial cell interactions play an important role in inflammatory diseases such as sepsis. During inflammation, excessive migration of ...

Lökosit-endotelyal hücre etkileşimleri sepsis gibi inflamatuar hastalıklarda önemli rol oynamaktadır. Enflamasyon disregülasyonu sıklıkla değişmiş vasküler endotel bariyer fonksiyonuna ve aşırı lökosit kaçakçılığına neden olur ve bu da organ hasarına neden olabilir. bMFA dediğimiz biyomimetik mikroakışkan tahlili, in-vivo mikrovasküler ağların topografyasını ve akış koşullarını yeniden üretir ve nötrofillerin yuvarlanma, sıkı yapışma, yayılma ve doku bölmesine göçünün gerçek zamanlı olarak değerlendirilmesine izin verir.Biyomimetik mikroakışkan tahlilin bir gücü, klinik translasyonu arttırmak ve potansiyel terapötikleri hızlı bir şekilde taramak için birincil insan hücrelerini ve klinik olarak ilgili hasta örneklerini kullanma yeteneğidir. Prosedürleri gösteren, laboratuvarımdan mezun bir araştırma asistanı olan Bay Qingliang Yang olacak. Bir giriş portu hariç, ince forseps kullanarak portların içine yaklaşık bir inç uzunluğundaki tüpü yerleştirmeye başlayın.Çene kelepçelerini kullanarak, iki çıkış portunu ve doku bölmesini birbirine kenetleyin. Fibronektin stok çözeltisini PBS ile mililitre başına 100 mikrograma kadar seyreltin. Seyreltilmiş fibronektin çözeltisi ile 24 gauge künt iğneye bağlı bir mililitrelik bir şırınga yükleyin ve şırıngayı dört inç uzunluğundaki bir boruya bağlayın.Boruyu açık giriş portuna yerleştirin, ardından insan fibronektininin başka bir giriş portundan serbest bırakılana kadar pistonu itin ve kelepçeleyin. Tüm kanallar, doku bölmesi ve borular insan fibronektin çözeltisi ile dolana kadar kalan portlar için işlemi tekrarlayın. İğneyi çıkarın, ancak dört inç uzunluğundaki boruyu takılı ve açılmamış halde tutun.Gazdan arındırma işlemini gerçekleştirmek için, kapaksız boruyu, 15 dakika boyunca inç kare başına beş pound basınçla sıkıştırılmış bir azot tankına bağlı pnömatik astara bağlayın. Mikroskop altında, kanal veya doku bölmesi içinde sıkışmış hava kabarcığı olmadığını kontrol edin ve hava kabarcıkları varsa cihazı yeniden bağlayın. Cihazı pnömatik astardan çıkarın ve bir saat boyunca 37 santigrat derecede inkübe edin.Önceden ısıtılmış insan akciğeri mikrovasküler endotel hücre kültürü ortamını kullanarak, tüm kanalları ve doku bölmesini yıkayın. Metin yazısında açıklandığı gibi endotel hücrelerini topladıktan sonra, programlanabilir şırınga pompasını G.In 150 kez beş dakika boyunca santrifüjleme yoluyla hücreleri peletleyin, bir mililitrelik bir şırınga takın ve tüpü künt iğneye takın. Şırınga namlusuna girmesine izin vermeden yaklaşık 20 mikrolitre hücre süspansiyonunu boruya çekin.Kelepçeyi cihazın çıkış portundan çıkarın. Kanala herhangi bir hava kabarcığı sokmadan boruyu giriş portuna bağlayın. Pompayı dakikada dört ila sekiz mikrolitre akış hızıyla durdurun ve mikroskop altında gözlemleyin.Kanallar hücrelerle doldurulduğunda pompayı durdurun. Çıkışı kelepçeleyin ve giriş borusunu kesin. Cihazı% 5 karbondioksit ve 37 santigrat derecede dört saat boyunca inkübatöre yerleştirin.Dört saatlik inkübasyondan sonra, başka bir şırınga hazırlayın ve taze hücre kültürü ortamı ile doldurun. Şırıngayı bir şırınga pompasına monte edin ve giriş portuna bağlayın. Kelepçeyi çıkış portundan çıkarın.Yüzen veya bağlanmamış hücreleri çıkarmak için taze medyayı dakikada dört ila sekiz mikrolitrede yaklaşık beş dakika boyunca cihazdan geçirin. Taze hücre kültürü ortamı ile doldurarak bir şırınga hazırlayın. Şırıngayı bir şırınga pompasına monte edin ve çıkış portunu açık tutarken bir giriş portuna bağlayın.Cihazı 37 santigrat derece ve% 5 karbondioksitte bir inkübatöre yerleştirin. Şırınga pompasını, metin yazısında açıklandığı gibi akış altındaki endotel hücrelerini kültürlemek için programlayın. Bir mikroskop kullanarak, akış altında 48 saatlik kültürden sonra bMFA'yı kontrol edin.Konfokal mikroskopi, vasküler kanalların tüm yüzeylerinin endotel hücreleri tarafından kaplandığını ve bMFA'da tam bir 3D lümen oluşturduğunu gösterdi. Üç farklı bMFA cihazı hazırladıktan sonra, endotel hücrelerini ve nötrofilleri uyarmak için TNF-alfa ve inflamatuar sitokinin kullanıldığı PKC delta inhibitörü ile kombine edilmiş hücre kültürü ortamı veya TNF-alfa veya TNF-alfa ile üç adet bir mililitrelik şırınga yükleyin. PKC delta inhibitörü yeni bir antiinflamatuar inhibitördür.Yüklü üç şırıngayı üç bMFA cihazına bağlayın. Tampon TNF-alfa veya TNF-alfa ilave inhibitör kullanarak, insan akciğer mikrovasküler endotel hücrelerini dakikada 0.1 mikrolitrede dört saat boyunca tedavi edin. Metin makalesinde açıklandığı gibi insan nötrofillerini izole ettikten sonra, nötrofilleri 999 mikrolitre HEPES tamponunda yeniden askıya alın ve süspansiyona bir mikrolitre 10 milimolar CFDA SE boya stok çözeltisi ekleyin, bu da CFDA SE'nin 10 mikromolar çalışma çözeltisi ile sonuçlanır ve oda sıcaklığında 10 dakika boyunca inkübe edin.Çözeltiyi 315 kez G.'de beş dakika boyunca santrifüj ederek hücreleri iki kez HEPES tamponu ile yıkayın.Hücreleri saydıktan sonra, hücre kültürü ortamında mililitre başına 2 milyon nötrofilde veya PKC delta inhibitörü ile eklenen TNF-alfa veya TNF-alfa'da yeniden askıya alın ve 15 dakika boyunca oda sıcaklığında inkübe edin. Şırıngayı, hücre kültürü ortamında hazırlanan kemo-çekici, fMLP'nin bir mikromolar ile doldurun. bMFA'nın bir giriş ve çıkış portunu açın.Portu boruyu doku bölmesinden çıkarın ve fMLP borusunu takın. Tüm bMFA'lar için doku bölmesine yaklaşık 20 mikrolitre fMLP enjekte edin ve hücre kültürü ortamı ile tedavi edileni bırakın. Boruyu kesin ve kelepçeleyin.Şırıngayı yaklaşık 200 mikrolitre nötrofil süspansiyonu ile doldurun ve şırıngayı şırınga pompasına monte edin. Cihazı ters çevrilmiş bir mikroskop aşamasına yerleştirdikten sonra, akış hızını dakikada bir mikrolitreye ayarlayın ve pompayı çalıştırın. Nötrofil süspansiyonunun küçük bir damlası borudan çıkana kadar bekleyin ve boruyu giriş portuna yerleştirin.Floresan etiketli nötrofiller vasküler kanallara akar ve endotel hücreleri ve fizyolojik olarak ilgili akış koşulları ile etkileşime girer. Deneye başladıktan 10 dakika sonra, görüntü analiz yazılımını açın, objektif lensi 10x'e değiştirin ve cihazı mikroskop altında ortalamak için sahne joystick'ini kullanın. Yapışma haritasını edinmek için, Al'a gidin, Büyük Resmi Tara'yı tıklatın.Yeni bir pencere açılır. 10x Hedef lensi seçin ve alan seçeneğini ayarlayın, örneğin, 5 x 3. Tara'yı tıklatın, Dosya'yı tıklatın ve yapışma haritasını kaydedin.Geçiş analizi için geçiş haritasını elde etmek üzere sahne alanı joystick'ini kullanarak cihazı mikroskop altında ortalayın. Görüntüle, Edinme Denetimleri, ND Alımı'na tıklayın. Yeni bir pencere açılır.Dosyayı kaydetmek için Yol'u ayarlayın ve dosya adını yazın. Büyük Görüntü işlevini kontrol edin, Tarama Alanı'nı ayarlayın, örneğin, 5 x 3. Zaman işlevini kontrol edin, Aralık'ı beş dakika ve Süre'yi 60 dakika olarak ayarlayın.Doku bölmesinin hızlandırılmış görüntülerini alın ve sonraki saat boyunca her beş dakikada bir görüntü alın. CFD simülasyonu, akış deseninin bozulduğu çatallanma alanları hariç, vasküler kanallardaki laminer akış modelini gösterir. Biyomimetik mikroakışkan testi yapıldıktan sonra, faz kontrast görüntüleri, vasküler kanalların yüzeylerinin endotel hücreleri ile kaplandığını ve 48 saatlik kültürden sonra kesme akışı yönünde hizalandığını ortaya koydu.Floresan görüntüleme, endotel hücrelerinin bMFA'da tam bir üç boyutlu lümen oluşturduğunu gösteren konfokal mikroskopi kullanılarak gerçekleştirildi Bir nötrofil adezyon haritası elde edildi ve bu da bMFA'da nötrofillerin endotel hücrelerine önemli ölçüde yapıştığını ortaya koydu. bMFA'daki nötrofil migrasyon haritası, TNF-alfa aktivasyonu üzerine, nötrofillerin doku bölmesi içinde önemli miktarda göçünün meydana geldiğini, TNF-alfa aktivasyonu olmadan böyle bir göçün gözlenmediğini ortaya koymuştur. Nötrofillerin mekansal dağılımını kesme hızıyla ilişkilendiren bir yapışma haritası, nötrofil yapışmasının düşük kesme oranına sahip kaplarda ve çatallanma bölgelerine yakın yerlerde tercihen meydana geldiğini göstermiştir.Ayrıca, TNF-alfa tedavisi, PKC delta inhibitörü ile inhibe edilen adezyonu önemli ölçüde arttırır. Hızlandırılmış görüntülerin analizi, endotel hücrelerinin TNF aktivasyonunun fMLP'ye yanıt olarak nötrofil göçünü arttırdığını, PKC delta inhibitörü ile tedavinin TNF-alfa ile tedavi edilen hücrelere kıyasla göçü azalttığını göstermiştir. Bu nedenle, bMFA, enflamatuar hastalığın tedavisi için yeni bir terapinin etkinliğini test etmek için kullanılabilir.bMFA ayrıca geçirgenlik ve trans-endotel elektrik direnci, TEER olarak adlandırılan ve inflamasyon sırasında adezyon molekülü ekspresyonu gibi değişkenleri ölçerek endotel bütünlüğünü incelemek için de kullanılabilir. Biyomimetik mikroakışkan tahlil, farklı organların mikro çevresini taklit edebilir ve tek hücre tipleri veya türleriyle sınırlı değildir ve ayrıca organ fonksiyonu için kritik olan hücre / hücre iletişimini modelleyebilir ve farklı hastalıkları modelleyebilir.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Design of a Cyclic Pressure Bioreactor for the Ex Vivo Study of Aortic Heart Valves

Design of a Cyclic Pressure Bioreactor for the Ex Vivo Study of Aortic Heart Valves

Devirli Basınç Biyoreaktör Tasarım Ex vivo</emAort Kalp Vanalar> Eğitim

The aortic valve, located between the left ventricle and the aorta, allows for unidirectional blood flow, preventing backflow into the ventricle. Aortic ...

Constructing a Low-budget Laser Axotomy System to Study Axon Regeneration in C. elegans

Constructing a Low-budget Laser Axotomy System to Study Axon Regeneration in C. elegans

Axon Rejenerasyon Eğitim Düşük bütçeli Lazer Axotomy Sistemi oluşturulması C. elegans</em

Laser axotomy followed by time-lapse microscopy is a sensitive assay for axon regeneration phenotypes in C. elegans1.  The main difficulty of this assay ...

An Experimental System to Study Mechanotransduction in Fetal Lung Cells

Fetal Akciğer Hücrelerinde Mechanotransduction Okumak Deneysel Bir Sistem

Mechanical forces generated in utero by repetitive breathing-like movements and by fluid distension are critical for normal lung development. A key ...

Microfabrication of Nanoporous Gold Patterns for Cell-material Interaction Studies

Hücre-malzeme Etkileşim Araştırmalar Nanogözenekli Altın Patterns mikroimalat

Nanostructured materials with feature sizes in tens of nanometers have enhanced the performance of several technologies, including fuel cells, biosensors, ...

Assessing Leukocyte-endothelial Interactions Under Flow Conditions in an Ex Vivo Autoperfused Microflow Chamber Assay

Assessing Leukocyte-endothelial Interactions Under Flow Conditions in an Ex Vivo Autoperfused Microflow Chamber Assay

Bir Flow Koşullarında lökosit-endotel Etkileşimleri değerlendirilmesi<em&gt; Ex vivo</em&gt; Autoperfused Microflow Odası Deneyi

Leukocyte-endothelial interactions are early and critical events in acute and chronic inflammation and can, when dysregulated, mediate tissue injury ...

Concentric Gel System to Study the Biophysical Role of Matrix Microenvironment on 3D Cell Migration

Konsantrik Jel Sistemi 3D Hücre Göç Matrix mikroçevresinin biyofiziksel Rolü Eğitim için

The ability of cells to migrate is crucial in a wide variety of cell functions throughout life&#160;from embryonic development and wound healing&#160;to ...

Live Cell Imaging during Mechanical Stretch

Mekanik Stretch sırasında Canlı Hücre Görüntüleme

There is currently a significant interest in understanding how cells and tissues respond to mechanical stimuli, but current approaches are limited in ...

Construction of Defined Human Engineered Cardiac Tissues to Study Mechanisms of Cardiac Cell Therapy

Tanımlı İnsan Engineered Kalp Dokuların inşaatı Kardiyak Hücre Tedavisinin Mekanizmaları Eğitim için

Human cardiac tissue engineering can fundamentally impact therapeutic discovery through the development of new species-specific screening systems that ...

A Microfluidic System with Surface Patterning for Investigating Cavitation Bubble(s)&#8211;Cell Interaction and the Resultant Bioeffects at the Single-cell Level

A Microfluidic System with Surface Patterning for Investigating Cavitation BubblesÃƒÆ’Ã‚Â¢ÃƒÂ¢Ã¢â‚¬Å¡Ã‚Â¬ÃƒÂ¢Ã¢â€šÂ¬Ã…â€œCell Interaction and the Resultant Bioeffects at the Single-cell Level

Tek hücreli Seviyesinde Kavitasyon Kabarcık (ler) -Hücre Etkileşim ve Sonuç biyoetkiler incelenmesi için yüzey Desenlendirme ile mikroakışkan Sistemi

In this manuscript, we first describe the fabrication protocol of a microfluidic chip, with gold dots and fibronectin-coated regions on the same glass ...

DNA Nanotubes as a Versatile Tool to Study Semiflexible Polymers

DNA nanotüpler Semiflexible polimerler eğitim için çok yönlü bir araç olarak

Mechanical properties of complex, polymer-based soft matter, such as cells or biopolymer networks, can be understood in neither the classical frame of ...