Name: using 2-photon microscopy to quantify the effects of chronic unilateral ureteral obstruction on glomerular processes
Uploaded: 2022-03-04T12:30:00
Duration: 11 min 47 s
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इस काम को नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ डायबिटीज एंड डाइजेस्टिव एंड किडनी डिजीज ग्रांट्स आरओ 1 डीके 091623 और पी 30 डीके079312 (बीएएम के लिए) द्वारा समर्थित किया गया था। हम नैनोस्ट्रिंग विश्लेषण करने के लिए मिशिगन स्टेट यूनिवर्सिटी में रिसर्च टेक्नोलॉजी सपोर्ट फैसिलिटी (आरटीएसएफ) के जीनोमिक्स कोर फैसिलिटी के कर्मचारियों को धन्यवाद देते हैं।

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	<li>Dunn, K. W., Molitoris, B. A., Dagher, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Indiana+O'Brien+center+for+advanced+renal+microscopic+analysis.">The Indiana O'Brien center for advanced renal microscopic analysis.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 320 (5), 671-682 (2021).</li><li>Dunn, K. 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M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+normal+kidney+filters+nephrotic+levels+of+albumin+retrieved+by+proximal+tubule+cells:+retrieval+is+disrupted+in+nephrotic+states.">The normal kidney filters nephrotic levels of albumin retrieved by proximal tubule cells: retrieval is disrupted in nephrotic states.</a> Kidney International. 71 (6), 504-513 (2007).</li><li>Sandoval, R. M., Wang, E., Molitoris, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Finding+the+bottom+and+using+it:+Offsets+and+sensitivity+in+the+detection+of+low+intensity+values+in+vivo+with+2-photon+microscopy.">Finding the bottom and using it: Offsets and sensitivity in the detection of low intensity values in vivo with 2-photon microscopy.</a> Intravital. 2 (1), 23674 (2014).</li><li>Kuligowski, M. 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लेखकों के हितों का कोई टकराव नहीं है।

ग्लोमेरुलर फिजियोलॉजी के अध्ययन में कई अलग-अलग दृष्टिकोण देखे गए हैं, विशेष रूप से माइक्रोपंक्चर का उपयोग, पृथक ग्लोमेरुली का छिड़काव, और माइक्रोस्कोपी। म्यूनिख विस्टार चूहों, फ्रॉटर और सिमोनसेन उपभेदों में सतह ग्लोमेरुली की उपलब्धता ने विवो गतिशील अध्ययनों में अनुमति दी है। इस तकनीक को अपनाने वाले जांचकर्ताओं के लिए एक महत्वपूर्ण नोट अध्ययनों के बीच सुसंगत छवियों को बनाए रखने के लिए अधिग्रहण मापदंडों को सेट करने की आवश्यकता है, इसलिए ऊतक में ऑटोफ्लोरेसेंस सुसंगत रहता है। रोडामाइन एपिफ्लोरेसेंस क्यूब का उपयोग करना और कंप्यूटर स्क्रीन पर नकल करने के लिए हरे और लाल उत्सर्जन चैनलों के लिए लाभ सेटिंग्स को समायोजित करना जो आईपीस के माध्यम से देखा जाता है, विभिन्न माइक्रोस्कोप सिस्टम के बीच भी ऑटोफ्लोरेसेंस में एक सुसंगत रंग हस्ताक्षर सुनिश्चित करेगा।
फ्रॉटर स्ट्रेन का बड़े पैमाने पर उपयोग किया गया है क्योंकि इसमें कुल ग्लोमेरुली की संख्या कम होती है, ~ 75% सामान्य, और पुरुष लगभग 12 सप्ताह की उम्र में सहज रूप से उच्च रक्तचाप विकसित करते हैं, प्रगतिशील प्रोटीनमेह और बाद में फोकल ग्लोमेरुलर स्केलेरोसिस के साथ, अंततः गुर्दे की विफलतासे मर जाते हैं। इन चूहों के उपयोग और इसकी कम फोटोटॉक्सिसिटी के साथ 2-फोटॉन माइक्रोस्कोपी के अलावा, प्रवेश की बेहतर गहराई, और एक साथ कई फ्लोरोसेंट जांच देखने की क्षमता ने नई खोजों 1,4,5 के लिए मार्ग प्रशस्त किया। कंप्यूटर हार्डवेयर और सॉफ्टवेयर के विकास के साथ, मात्रात्मक डेटा अब सभी 2-फोटॉन प्रयोगशालाओं के लिए मानक हैं। फिजियोलॉजिकल और रोग स्थितियों 1,4,5,27,28,29,30 के तहत ग्लोमेरुलर, समीपस्थ नलिका, संवहनी और अंतरालीय प्रक्रियाओं पर कई मात्रात्मक तकनीकों को विकसित और लागू किया गया है।
ट्रांसजेनिक माउस उत्पादन सुविधाओं ने किडनी फिजियोलॉजी और पैथोलॉजी के अध्ययन में एक नया आयाम जोड़ा, और यह केवल समय की बात थी जब तक कि इसे गुर्दे की संरचना और कार्य में विशिष्ट जीन उत्पादों के महत्व को और चित्रित करने के लिए 2-फोटॉन माइक्रोस्कोपी के साथ जोड़ा नहीं गया था। हालांकि, माउस ग्लोमेरुली, बहुत युवा चूहों को छोड़कर, गुर्दे की सतह से 100 μm से अधिक स्थित हैं। दो-फोटॉन माइक्रोस्कोपी को रिज़ॉल्यूशन के रूप में 20 और 50 μm के बीच की गहराई पर सबसे अच्छा किया जाता है, और उत्सर्जित प्रकाश के प्रकाश प्रकीर्णन और हीमोग्लोबिन के साथ बातचीत से अवशोषण के कारण प्रतिदीप्ति तीव्रता तेजी से कम हो जाती है। इसलिए, सतह ग्लोमेरुली को प्रेरित करना आवश्यक था। आमतौर पर इस्तेमाल किया जाने वाला दृष्टिकोण 12 सप्ताह के लिए एक लंबे समय तक एकतरफा बाधा मॉडल है। चूंकि ये मॉडल आधारभूत निर्धारण की अनुमति नहीं देते हैं, इसलिए अध्ययन की जा रही प्रक्रिया से यूयूओ के प्रभावों को अलग करना संभव नहीं है।
एमडब्ल्यूएफ चूहों का उपयोग करके, कोई यूयूओ के बाद बेसलाइन ग्लोमेरुलर फ़ंक्शन की तुलना कर सकता है। यह यूयूओ मॉडल सूजन और फाइब्रोसिस की तीव्र दर को प्रेरित करने के लिए जाना जाता है और इसका उपयोग सीकेडी और फाइब्रोसिस10,11,12 का अध्ययन करने के लिए किया गया है। जैसा कि अपेक्षित था, एमडब्ल्यूएफ और एसडी चूहों दोनों में सतह ग्लोमेरुली में वृद्धि हुई थी। इसके अलावा, एमडब्ल्यूएफ और एसडी चूहों के लिए यूयूओ के बाद प्राप्त मात्रात्मक परिणाम बहुत तुलनीय थे। यहां दर्ज रक्त प्रवाह में कमी को पहले यूयूओ के बाद सूक्ष्म डेटा की तुलना माइक्रोपंक्चर डेटा3 से करने की सूचना दी गई थी। यह भी अच्छी तरह से ज्ञात था कि ट्यूबलर और अंतरालीय हिस्टोलॉजी स्पष्ट रूप से बदल जाती है, और पीटी ज्यादातर गैर-कार्यात्मक होते हैं, जैसा कि यहां बताया गया है, एल्बुमिन एंडोसाइटोसिस की कमी के साथ। चित्रा 2 और चित्रा 3 में अध्ययन ग्लोमेरुलर और पेरिटुबुलर केशिकाओं में आरबीसी प्रवाह दर में नाटकीय कमी दिखाते हैं और डब्ल्यूबीसी आसंजन को बढ़ाते हैं। प्रवाह में कमी डब्ल्यूबीसी आसंजन और रूलेक्स संरचनाओं से केशिका रुकावट के कारण होने की संभावना है।
सूजन का मूल्यांकन करने के लिए, हमने एल्बुमिन पारगम्यता को निर्धारित किया और इसे दस गुना बढ़ाने के लिए दिखाया। इसके अतिरिक्त, पृथक ग्लोमेरुली से पता चला है कि विभिन्न प्रकार के गुर्दे की बीमारी राज्यों में गुर्दे की सूजन में वृद्धि के लिए पहले से ज्ञात कई जीनों के लिए एमआरएनए अभिव्यक्ति में वृद्धि हुई है 17,19,20,21,22,23,24,25,26 . ग्लोमेरुलर सतह घनत्व और एल्बुमिन पारगम्यता में वृद्धि प्रगतिशील थी, जैसा कि 12-सप्ताह के यूयूओ डेटा द्वारा दिखाया गया है। वर्तमान डेटा सीधे दिखाने वाला पहला है कि ग्लोमेरुली यूयूओ मॉडल में महत्वपूर्ण संरचनात्मक क्षति, सूजन और आणविक परिवर्तनों से गुजरता है। परिणाम पूरे गुर्दे के ऊतकों के पहले के अध्ययन के अनुरूप हैं, जिसने यूयूओ के बाद भेड़ के गुर्दे की बायोप्सी का विश्लेषण किया, जिसमें कई सूजन मार्कर19 तक बढ़ गए। वर्तमान परिणाम इंगित करते हैं कि ग्लोमेरुली के भीतर चिह्नित सूजन मौजूद है, जिसे पहले केवल कॉर्टिकल ऊतक के लिए जाना जाता था।
वर्तमान डेटा चूहों में पहले के अध्ययनों से भिन्न है जहां 12 सप्ताह के पोस्टहाइड्रोनेफ्रोटिक और सामान्य ग्लोमेरुली31 के बीच आसंजन अणु अभिव्यक्ति, पूरक जमाव और न्यूट्रोफिल घुसपैठ में कोई बदलाव नहीं पाया गया था। इसके अलावा, हिक्की प्रयोगशाला ने चूहों के ग्लोमेरुली में प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं का अध्ययन करने के लिए 12 सप्ताह के यूयूओ मॉडल का उपयोग किया। उन्होंने चार सप्ताह के माउस ग्लोमेरुली और पोस्टऑबस्ट्रक्टिव ग्लोमेरुली32,33 के बीच न्यूट्रोफिल घुसपैठ में कोई अंतर नहीं पाया। ये बाद के अध्ययन बाधित गुर्दे के श्रोणि को मूत्र से बाहर निकालने के बाद आयोजित किए गए थे। हमने ऐसा नहीं किया क्योंकि हम ग्लोमेरुलर फ़ंक्शन पर यूयूओ के प्रभाव को निर्धारित करना चाहते थे क्योंकि यह विवो में होगा, कृत्रिम रूप से रुकावट पैदा करने वाले तरल पदार्थ को हटाए बिना। अंत में, चूहों में यूयूओ का उपयोग सतह के नीचे 100 μm से अधिक पर इमेजिंग ग्लोमेरुली द्वारा प्रतिस्थापित किया जा रहा है। जबकि संभव हो, रिज़ॉल्यूशन और तीव्रता में एक व्यापार-बंद है, दोनों को काफी कम किया जा रहा है क्योंकि एक 50 μm34 से आगे जाता है।
प्रस्तुत परिणाम आश्चर्यजनक नहीं हैं यदि एक साथ हिस्टोलॉजिकल परिवर्तन, एटुबुलर ग्लोमेरुली के गठन, सूजन, फाइब्रोसिस, हेमोडायनामिक्स10,11,12 पर मौजूदा साहित्य से डेटा को एक साथ जोड़ता है। डब्ल्यूबीसी आसंजन, रूलेक्स संरचनाओं, ग्लोमेरुलर आणविक सूजन मार्करों और बढ़ी हुई एल्ब्यूमिन पारगम्यता सहित प्रस्तुत डेटा, इस यूयूओ मॉडल में पांच सप्ताह में भी चल रही व्यापक सूजन को इंगित करता है और बारह सप्ताह में भी मौजूद है। स्पष्ट रूप से, क्रोनिक यूयूओ एक शारीरिक स्थिति नहीं है, और सतह ग्लोमेरुली को प्रेरित करने के लिए यूयूओ का उपयोग एक चोट मॉडल का प्रतिनिधित्व करता है। एमडब्ल्यूएफ चूहों, जिनके पास शारीरिक परिस्थितियों में सतह ग्लोमेरुली होती है, को चोट लगने पर अनुदैर्ध्य रूप से अध्ययन किया जा सकता है। ट्रांसजेनिक चूहों को उत्पन्न करना संभव है, और कई जांचकर्ता विशिष्ट प्रश्न पूछने के लिए उन्हें बायोसेंसर के साथ बना रहे हैं। विशेष रूप से, विस्कॉन्सिन के मेडिकल कॉलेज में अब एमडब्ल्यूएफ चूहों की एक कॉलोनी है और फिजियोलॉजिकल और पैथोलॉजिकल स्थितियों के तहत ग्लोमेरुलर प्रक्रियाओं का अध्ययन करने के उद्देश्य से ट्रांसजेनिक चूहे बनाए गए हैं। ये एमडब्ल्यूएफ चूहे सामान्य, रोगग्रस्त और आनुवंशिक रूप से परिवर्तित चूहों में ग्लोमेरुलर प्रक्रियाओं का अध्ययन करने का एक शानदार अवसर प्रदान करते हैं।

ग्लोमेरुलर प्रक्रियाओं को समझना, विशेष रूप से पोडोसाइट्स जीव विज्ञान, 50 से अधिक वर्षों के लिए एक लक्ष्य रहा है। सतह ग्लोमेरुली के साथ म्यूनिख विस्टार चूहों ने फिजियोलॉजिकल और पैथोलॉजिकल प्रक्रियाओंके कई पहलुओं को समझने के लिए माइक्रोपंक्चर अध्ययन सहित इन अध्ययनों में एक केंद्रीय भूमिका निभाई है। ग्लोमेरुलर घटकों का अध्ययन करने के लिए माइक्रोस्कोपी का उपयोग 2-फोटॉन माइक्रोस्कोपी के आगमन तक फोटोटॉक्सिसिटी के प्रभावों के कारण सीमित था, जिसने इस विषाक्त जोखिम को कम किया और प्रवेश 1,2 की गहराई में वृद्धि की। कंप्यूटर हार्डवेयर और सॉफ्टवेयर में तेजी से प्रगति के साथ, इसने एक ही सेटिंग 1,4,5 में घंटों के लिए त्रि-आयामी (3 डी) और चार-आयामी (समय) अध्ययन की अनुमति दी है।
दवाओं, पारगम्यता के जवाब में ग्लोमेरुलर केशिका रक्त प्रवाह, वाहिकासंकीर्णन और फैलाव की मात्रा, पारगम्यता और पारगम्यता और सूजन पर चार्ज के प्रभाव कुछ ग्लोमेरुलर प्रक्रियाएं हैं जिनका अध्ययन किया गया है। इसके अलावा, समीपस्थ नलिका का एस 1 खंड पहचान योग्य है, और एस 1 और एस 2 ट्यूबलर एपिथेलियम के व्यवहार में अंतरको 1,4 निर्धारित किया जा सकता है। चूहों में अध्ययन, विशेष रूप से माउस ट्रांसजेनिक सुविधाओं की सार्वभौमिक उपलब्धता के साथ, ग्लोमेरुलर रोग प्रक्रियाओं के आणविक जीव विज्ञान की समझ में तेजी से प्रगति हुई है। नॉकआउट अध्ययनों में ग्लोमेरुलर डिसफंक्शन के लिए व्यक्तिगत प्रोटीन जिम्मेदार हैं, खासकर प्रोटीनमेह 6,7,8 के संबंध में। हालांकि, ग्लोमेरुलर इमेजिंग अध्ययनों के लिए माउस मॉडल का उपयोग सीमित है क्योंकि ग्लोमेरुली अध्ययन किए गए कई उपभेदों में सतह से 100 μ m से अधिक नीचे हैं।
इसने जांचकर्ताओं को माउस मॉडल विकसित करने और उपयोग करने के लिए प्रेरित किया है जिसके परिणामस्वरूप सतह ग्लोमेरुली का अध्ययन किया जा सकता है। सबसे आम मॉडल पूर्ण यूयूओ 10,11,12 का उपयोग है। विस्तारित यूयूओ अवधि के अंत में, चूहों के गुर्दे में कई सतह ग्लोमेरुली हैं जो हो सकते हैं और अध्ययन किया गया है13,14। ग्लोमेरुलर जीव विज्ञान पर लंबे समय तक यूयूओ के प्रभावों को निर्धारित करने के लिए इन माउस अध्ययनों में कोई आधारभूत या नियंत्रण अध्ययन नहीं किया गया है। चूंकि यह चोट का एक गंभीर और लंबे समय तक मॉडल है जिसके परिणामस्वरूप तेजी से फाइब्रोसिस और कॉर्टिकल विनाश 10,11,12 है, हमने अनुमान लगाया कि ग्लोमेरुलर प्रक्रियाओं और कार्य पर प्रभाव पड़ेगा। इस प्रश्न का उत्तर देने के लिए, सतह ग्लोमेरुली के साथ म्यूनिख विस्टार फ्रॉटर (एमडब्ल्यूएफ) चूहों का उपयोग नियंत्रण / बेसलाइन मापदंडों का अध्ययन करने के लिए किया गया था, और बेसलाइन खोज की तुलना यूयूओ के पांच सप्ताह के बाद एमडब्ल्यूएफ चूहों में ग्लोमेरुलर अध्ययनों के साथ की गई थी। हमने स्प्राग डॉवले (एसडी) चूहों का भी अध्ययन किया, जिनके पास यूयूओ के बाद सतह ग्लोमेरुली नहीं है। निष्कर्ष बताते हैं कि एमडब्ल्यूएफ और एसडी चूहों में यूयूओ के 5 सप्ताह वास्तव में सतह ग्लोमेरुली की संख्या में वृद्धि करते हैं। हालांकि, ये ग्लोमेरुलर रक्त प्रवाह, सूजन और मैक्रोमोलेक्यूल पारगम्यता और आकार में चिह्नित परिवर्तनों के साथ असामान्य ग्लोमेरुली थे।

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>70 &#181;m sterile cell strainer</td>
			<td>Corning</td>
			<td>#421751</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 &#181;m sterile cell strainer</td>
			<td>Corning</td>
			<td>#421752</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CA Micro scissors Model 1C300</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>Cat# 72930</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric heating pad</td>
			<td>Sunbeam</td>
			<td>Kroger</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Handling Forceps</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>Cat# 72962</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kelly Hemostatic Forceps (straight)</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>Cat#72930</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Leica Dive SP-8 Multi-Photon Inverted Microscope</td>
			<td>Leica Microsystems</td>
			<td>Note: Version 7.1r1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>MaiTai DeepSee titanium-sapphire laser</td>
			<td>Spectra-Physics</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mayo Dissecting Scissors</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>Cat# 78180-1C3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metamorph Image processing Software</td>
			<td>Molecular Dynamics</td>
			<td>Cat# 78266-04</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsoft Excel</td>
			<td>Microsoft Corportation</td>
			<td>2007 version</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Quant-iT RNA Assay Kit</td>
			<td>Invitrogen/ThermoFisher</td>
			<td>Q33140</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reptitherm Undertank Heater</td>
			<td>Zoomed</td>
			<td>Amazon</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNeasy MinElute Cleanup Kit (Spin columns)</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>74204</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPE buffer</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>1018013</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Strate-Line Autoclave Tape</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>Cat# 11-889-1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TRI Reagent</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T9424</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Willco-dish Coverslip Bottom Dishes (50 mm/40 mm coverslip)</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>Cat# 70665-07</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

using 2-photon microscopy to quantify the effects of chronic unilateral ureteral obstruction on glomerular processes

गुर्दे के गतिशील शरीर विज्ञान का पता लगाने के लिए उपयुक्त पशु रोग मॉडल के लिए नवीन माइक्रोस्कोपी विधियों को लागू करना एक चुनौती बनी हुई है। सतह ग्लोमेरुली वाले चूहे इंट्रावाइटल 2-फोटॉन माइक्रोस्कोपी का उपयोग करके शारीरिक और पैथोफिजियोलॉजिकल प्रक्रियाओं की जांच करने का एक अनूठा अवसर प्रदान करते हैं। ग्लोमेरुलर केशिका रक्त प्रवाह और वाहिकासंकीर्णन और दवाओं, पारगम्यता और सूजन के जवाब में फैलाव का परिमाणीकरण कुछ ऐसी प्रक्रियाएं हैं जिनका अध्ययन किया जा सकता है। इसके अलावा, ट्रांसजेनिक चूहे, यानी, फ्लोरोसेंट रंजक और अन्य आणविक बायोमार्कर दृष्टिकोण के साथ लेबल किए गए पोडोसाइट्स, प्रोटीन-प्रोटीन इंटरैक्शन और विशिष्ट आणविक परिवर्तनों के प्रभावों की सीधे निगरानी और मात्रा निर्धारित करने के लिए बढ़े हुए संकल्प प्रदान करते हैं।
चूहों में, जिनमें चार सप्ताह की उम्र के बाद सतह ग्लोमेरुली की कमी होती है, सतह ग्लोमेरुली को प्रेरित करने के लिए कई हफ्तों तक एकतरफा मूत्रवाहिनी रुकावट (यूयूओ) का उपयोग किया गया है। चूंकि यह प्रेरण मॉडल बेसलाइन अध्ययन की अनुमति नहीं देता है, इसलिए हमने म्यूनिख विस्टार फ्रॉमीटर (एमडब्ल्यूएफ) चूहों में यूयूओ मॉडल में ग्लोमेरुलर प्रक्रियाओं पर यूयूओ के प्रभावों को निर्धारित किया, जिनके पास शारीरिक स्थितियों के तहत सतह ग्लोमेरुली है। पांच सप्ताह या उससे अधिक के लिए यूयूओ मॉडल ने सकल गुर्दे की आकृति विज्ञान, पेरिटुबुलर और ग्लोमेरुलर माइक्रोवास्कुलचर, साथ ही ट्यूबलर एपिथेलिया की संरचना और कार्य में महत्वपूर्ण परिवर्तन ों को प्रेरित किया। ग्लोमेरुलर और पेरिटुबुलर लाल रक्त कोशिका (आरबीसी) प्रवाह में काफी कमी आई (पी < 0.01), शायद ग्लोमेरुलर और पेरिटुबुलर केशिकाओं के भीतर सफेद रक्त कोशिकाओं (डब्ल्यूबीसी) के पालन में महत्वपूर्ण वृद्धि के कारण। एल्ब्यूमिन का ग्लोमेरुलर चोरी गुणांक अनुपचारित एमडब्ल्यूएफ में 0.015 ± 0.002 से बढ़कर 5 सप्ताह के यूयूओ एमडब्ल्यूएफ चूहों में 0.045 ± 0.05 हो गया। यूयूओ के बारह सप्ताह के परिणामस्वरूप एल्ब्यूमिन के लिए सतह ग्लोमेरुलर घनत्व और ग्लोमेरुलर साइविंग गुणांक (जीएससी) में और वृद्धि हुई। ग्लोमेरुली में फ़िल्टर किए गए फ्लोरोसेंट एल्बुमिन को समीपस्थ नलिकाओं द्वारा पुन: अवशोषित नहीं किया गया था। इन आंकड़ों से पता चलता है कि सतह ग्लोमेरुली को प्रेरित करने के लिए यूयूओ का उपयोग सामान्य ग्लोमेरुलर प्रक्रियाओं और रोग परिवर्तनों का अध्ययन और व्याख्या करने की क्षमता को सीमित करता है।

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Using 2-Photon Microscopy to Quantify the Effects of Chronic Unilateral Ureteral Obstruction on Glomerular Processes

यहां, हम ग्लोमेरुलर गतिशीलता और कार्य पर लंबे समय तक मूत्रवाहिनी अवरोध के प्रभावों को निर्धारित करने के लिए सतह ग्लोमेरुली के साथ म्यूनिख विस्टार फ्रॉटर चूहों में 2-फोटॉन माइक्रोस्कोपी का उपयोग करके एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं।

ग्लोमेरुलर प्रक्रियाओं पर क्रोनिक एकतरफा मूत्रवाहिनी अवरोध के प्रभावों को निर्धारित करने के लिए 2-फोटॉन माइक्रोस्कोपी का उपयोग करना

Applying novel microscopy methods to suitable animal disease models to explore the dynamic physiology of the kidney remains a challenge. Rats with surface ...

Research

JoVE Journal

Medicine

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In living organisms, intestinal hyperpermeability is a serious symptom that leads to many inflammatory bowel diseases (IBDs). Caenorhabditis elegans is a ...

A Murine Model of Fetal Exposure to Maternal Inflammation to Study the Effects of Acute Chorioamnionitis on Newborn Intestinal Development

नवजात आंतों के विकास पर तीव्र कोरियोनामियोनाइटिस के प्रभाव का अध्ययन करने के लिए मातृ सूजन के भ्रूण एक्सपोजर का एक मुरीन मॉडल

Chorioamnionitis is a common precipitant of preterm birth and is associated with many of the morbidities of prematurity, including necrotizing ...

Isolation of Intrapulmonary Artery and Smooth Muscle Cells to Investigate Vascular Responses

संवहनी प्रतिक्रियाओं की जांच के लिए इंट्रापल्मोनरी धमनी और चिकनी मांसपेशी कोशिकाओं का अलगाव

The intrapulmonary artery (IPA) and vascular smooth muscle cells (VSMCs) isolated from rat lungs can be used to study the underlying mechanisms of ...