Name: applications of rna interference in american cockroach
Uploaded: 2021-12-17T15:00:00
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이 연구는 중국 국립 자연 과학 재단 (보조금 번호 32070500, 31620103917, 31330072 및 31572325 C.R., Sh.L.), 광동성 자연 과학 재단 (보조금 번호 2021B1515020044 및 2020A1515011267 ~ C.R.), 광동성 과학 기술부 (보조금 번호 2019B090905003 및 2019A0102006), 광저우 과학 기술부 (보조금 번호 202102020110), 심천 과학 기술 프로그램 (보조금 번호. KQTD20180411143628272 to Sh.L.).

P. americana의 라인은 처음에 Huiling Hao 박사에 의해 제공되었습니다. 이 종은 30 년 동안 근친 교배로 유지되어왔습니다 9.
1. P. americana의 부화 및 먹이주기
<ol><li>P. americana의 신선한 oothecae (알을 낳는 직후)를 수집하고 ~ 25 일 동안 25 °C 및 60 % 습도의 어두운 인큐베이터에서 배양하십시오. 그런 다음 부화 3 일 전에 온도와 습도?...

<ol>
	<li>Miller, S. C., Miyata, K., Brown, S. J., Tomoyasu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dissecting+systemic+RNA+interference+in+the+red+flour+beetle+Tribolium+castaneum:+Parameters+affecting+the+efficiency+of+RNAi.">Dissecting systemic RNA interference in the red flour beetle Tribolium castaneum: Parameters affecting the efficiency of RNAi.</a> PloS One. 7 (10), 47431 (2012).</li><li>Fire, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potent+and+specific+genetic+interference+by+double-stranded+RNA+in+Caenorhabditis+elegans.">Potent and specific genetic interference by double-stranded RNA in Caenorhabditis elegans.</a> Nature. 391 (6669), 806-811 (1998).</li><li>Ambesajir, A., Kaushik, A., Kaushik, J. J., Petros, S. 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S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNA+interference+supports+a+role+for+Nanchung-Inactive+in+mechanotransduction+by+the+cockroach,+Periplaneta+americana,+tactile+spine.">RNA interference supports a role for Nanchung-Inactive in mechanotransduction by the cockroach, Periplaneta americana, tactile spine.</a> Invertebrate Neuroscience: IN. 20 (1), 1 (2020).</li><li>Immonen, E. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=EAG+channels+expressed+in+microvillar+photoreceptors+are+unsuited+to+diurnal+vision.">EAG channels expressed in microvillar photoreceptors are unsuited to diurnal vision.</a> The Journal of Physiology. 595 (16), 5465-5479 (2017).</li><li>Li, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+genomic+and+functional+landscapes+of+developmental+plasticity+in+the+American+cockroach.">The genomic and functional landscapes of developmental plasticity in the American cockroach.</a> Nature Communications. 9 (1), 1008 (2018).</li><li>Zhao, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Grainy+head+signaling+regulates+epithelium+development+and+ecdysis+in+Blattella+germanica.">Grainy head signaling regulates epithelium development and ecdysis in Blattella germanica.</a> Insect Science. 28 (2), 485-494 (2021).</li><li>Lozano, J., Belles, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conserved+repressive+function+of+Kr&#252;ppel+homolog+1+on+insect+metamorphosis+in+hemimetabolous+and+holometabolous+species.">Conserved repressive function of Kr&#252;ppel homolog 1 on insect metamorphosis in hemimetabolous and holometabolous species.</a> Scientific Reports. 1, 163 (2011).</li><li>Philip, B. N., Tomoyasu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+knockdown+analysis+by+double-stranded+RNA+injection.">Gene knockdown analysis by double-stranded RNA injection.</a> Methods in Molecular Biology (Clifton, N. J). 772, 471-497 (2011).</li><li>Zheng, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CRISPR+interference-based+specific+and+efficient+gene+inactivation+in+the+brain.">CRISPR interference-based specific and efficient gene inactivation in the brain.</a> Nature Neuroscience. 21 (3), 447-454 (2018).</li><li>Garbutt, J. S., Bell&#233;s, X., Richards, E. H., Reynolds, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Persistence+of+double-stranded+RNA+in+insect+hemolymph+as+a+potential+determiner+of+RNA+interference+success:+Evidence+from+Manduca+sexta+and+Blattella+germanica.">Persistence of double-stranded RNA in insect hemolymph as a potential determiner of RNA interference success: Evidence from Manduca sexta and Blattella germanica.</a> Journal of Insect Physiology. 59 (2), 171-178 (2013).</li><li>Parrish, S., Fleenor, J., Xu, S., Mello, C., Fire, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+anatomy+of+a+dsRNA+trigger:+differential+requirement+for+the+two+trigger+strands+in+RNA+interference.">Functional anatomy of a dsRNA trigger: differential requirement for the two trigger strands in RNA interference.</a> Molecular Cell. 6 (5), 1077-1087 (2000).</li><li>Lemonds, T. R., Liu, J., Popadi&#263;, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+contribution+of+the+melanin+pathway+to+overall+body+pigmentation+during+ontogenesis+of+Periplaneta+americana.">The contribution of the melanin pathway to overall body pigmentation during ontogenesis of Periplaneta americana.</a> Insect Science. 23 (4), 513-519 (2016).</li><li>Jackson, A. L., Linsley, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noise+amidst+the+silence:+Off-target+effects+of+siRNAs.">Noise amidst the silence: Off-target effects of siRNAs.</a> Trends in Genetics: TIG. 20 (11), 521-524 (2004).</li><li>Patel, M., Peter, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+DISE-inducing+shRNAs+by+monitoring+cellular+responses.">Identification of DISE-inducing shRNAs by monitoring cellular responses.</a> Cell Cycle (Georgetown, Tex). 17 (4), 506-514 (2018).</li><li>Vent&#243;s-Alfonso, A., Ylla, G., Monta&#241;es, J. C., Belles, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=DNMT1+promotes+genome+methylation+and+early+embryo+development+in+cockroaches.">DNMT1 promotes genome methylation and early embryo development in cockroaches.</a> iScience. 23 (12), 101778 (2020).</li><li>Wang, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variation+in+RNAi+efficacy+among+insect+species+is+attributable+to+dsRNA+degradation+in+vivo.">Variation in RNAi efficacy among insect species is attributable to dsRNA degradation in vivo.</a> Insect Biochemistry and Molecular Biology. 77, 1-9 (2016).</li><li>Bi, F., Liu, N., Small Fan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=interfering+RNA:+A+new+tool+for+gene+therapy.">interfering RNA: A new tool for gene therapy.</a> Current Gene Therapy. 3 (5), 411-417 (2003).</li></ol>

이 보고서는 P. americana의 방법론적 단계별 RNAi 전략을 기술하였다; 참고로, 그것은 또한 다른 바퀴벌레 (예 : Blattella germanica )와 사소한 변화가있는 다른 많은 곤충에도 적용될 수 있습니다. 그러나, RNAi의 유전자 침묵 효율이 항상 충분히 높은 것은 아니며, 유전자 녹아웃 전략(13)과 비교하여 명백한 단점이 있다. 유전자 수준의 다음의 잔류 효과는 실제 표현형을 방?...

진화적으로 보존된 기전인 RNA 간섭(RNAi)은 앤드류 파이어(Andrew Fire)와 크레이그 멜로 2(Craig Mello2)가 이중 가닥 RNA(dsRNA) 매개 유전자 침묵 전략을 개발했기 때문에 점차 많은 유기체1에서 유전자 발현을 억제하는 필수적인 역유전학적 도구가 된다. dsRNA는 21-23 뉴클레오티드의 단편으로 절단되고, 작은 간섭 RNA (siRNAs)는, 세포 내의 다이서 효소에 의해 RNAi 경로를 활성화시킨다. 그런 다음 siRNA가 표적 mRNA에 결합하고 mRNA 절단을 일으키고, 최종적으로 유전자 기능 3,4,5의 손실을 초래하는 RNA-유도 침묵 복합체 (RISC)에 혼입된다. 곤충 종 중에서, 많은 전신 RNAi 실험은 지금까지 Orthoptera, Isoptera, Hemiptera, Coleoptera, Neuroptera, Diptera, Hymenoptera, Lepidoptera 및 Blattodea 5,6,7,8과 같은 많은 곤충 순서에서보고되었습니다.
바퀴벌레 (Blattaria)는 급속한 성장주기, 환경에 대한 강한 적응력 및 높은 발달 가소성으로 발달 및 변형 연구에서 필수적인 곤충 군입니다9. RNAi가 바퀴벌레와 호환된다는 것을 발견하기 전에 이전 연구는 바퀴벌레의 유전자 조작 기술이 부족하기 때문에 바퀴벌레 예방 및 통제에만 중점을 두었습니다. 바퀴벌레 오테카의 독특한 구조는 CRISPR-Cas9 시스템으로 배아 주입 기반 유전자 녹아웃을 수행하는 것을 어렵게 만들었습니다. 게다가, 바퀴벌레의 대부분의 조직 (예 : P. americana)은 강력한 전신 RNAi 반응을 보여 하나 이상의 표적화 dsRNAs 9,10,11을 주입하여 기능 장애 표현형을 신속하게 생성 할 수 있습니다. 이러한 특징은 RNAi를 P. americana의 유전자 기능 연구에서 없어서는 안될 기술로 만들었습니다.
P. americana의 기능적 유전자 연구에서 RNAi의 사용이보고되었지만 상세하거나 단계별 설명은 제공되지 않았습니다. 이 보고서는 다른 바퀴벌레의 유전자 기능 연구에 유용한 P. americana의 RNAi에 대한 단계별 운영 지침을 제공합니다. 또한,이 가이드는 Blattodea에 국한되지 않으며 사소한 수정으로 다른 많은 곤충에 적용 할 수 있습니다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>701 N 10 &#181;L Syr (26s/51/2)</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>PN:80300</td>
			<td>Injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>Ningbo Jiangnan Instrument Factory</td>
			<td>RXZ-380A-LED</td>
			<td>For cockroaches hatching and feeding</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-injection pump</td>
			<td>Alcott Biotechnology</td>
			<td>ALC-IP600</td>
			<td>Injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pTOPO-Blunt Cloning Kit</td>
			<td>Aidlab Biotechnology</td>
			<td>CV16</td>
			<td>For Gene clonging</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>quantitative Real-Time PCR Systems</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>CFX Connect</td>
			<td>For qRT-PCR analysis</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T7 RiboMAX Express RNAi System</td>
			<td>Promega</td>
			<td>P1700</td>
			<td>For dsRNA synthesis, which contains Rnase A Solution (4 &#956;g/&#956;L), Sodium Acetate, 3.0M (pH 5.2), Enzyme Mix, T7 Express, Nuclease-Free water, Express T7 2x Buffer, RQ1 RNase-Free DNase</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermal Cyclers</td>
			<td>Bio-Rad</td>
			<td>S1000</td>
			<td>For DNA amplification</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

applications of rna interference in american cockroach

위생 해충 인 바퀴벌레는 쉬운 먹이와 반대사 적 특성으로 인해 곤충 발달 및 변형 연구에서 필수적인 종입니다. 주석이 잘 달린 게놈 서열과 함께, 이러한 장점은 미국 바퀴벌레 인 Periplaneta americana를 중요한 반대사 곤충 모델로 만들었습니다. 녹아웃 전략의 부족으로 제한되는 효과적인 RNA 간섭 (RNAi) 기반 유전자 녹다운은 P. americana의 기능적 유전자 연구에 없어서는 안될 기술이됩니다. 본 프로토콜은 P. americana에서의 RNAi 조작 기술을 기술한다. 프로토콜은 (1) 적절한 발달 단계에서 P. americana 의 선택, (2) 주사 설정을위한 준비, (3) dsRNA 주사, 및 (4) 유전자 녹다운 효율 검출을 포함한다. RNAi는 P. americana의 강력한 역 유전 도구입니다. P. americana 조직의 대부분은 세포외 dsRNA에 민감하다. 그것의 단순성은 연구자가 하나 또는 여러 개의 표적화 dsRNA 주사 하에서 기능 장애 표현형을 신속하게 얻을 수있게하여 연구자가 발달 및 변형 연구에 P. americana를 더 잘 사용할 수있게 해줍니다.

그림 1은 성공적인 주사를 보여줍니다. 마이크로 직경 바늘이 있는 미세주사 주사기는 부스터 위에 수평으로 놓아야 합니다(그림 1A). 바늘은 표피에 대해 수평으로 두 복부 소마이트 사이의 틈을 통해 삽입됩니다 (그림 1B). 액체가 P. americana 복부에 들어가는지 확인하십시오. 바늘의 너무 가파른 각도는 내부 장기를 ?...

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Applications of RNA Interference in American Cockroach

본 프로토콜은 P. americana에서 RNAi 조작 기술에 대한 단계별 지침을 설명합니다.

미국 바퀴벌레에 있는 RNA 간섭의 신청

Cockroaches, a sanitary pest, are essential species in insect developmental and metamorphic studies due to their easy feeding and hemimetabolous ...

이 프로토콜은 미국 바퀴벌레를 연구하는 간단한 방법을 제공합니다. 일반적인 위생 해충과 전통 중국 의학에 유익한 곤충. 그것은 특정 유전자를 무너 뜨림으로써 미국 바퀴벌레의 여러 생명 활동의 분자 메커니즘을 탐구하는 데 도움이 될 것입니다.이 기술의 가장 큰 장점은 미국 바퀴벌레 또는 유전자 편집에 적합하지 않은 다른 유사한 곤충의 유전자를 무너 뜨릴 수 있다는 것입니다. 이 기술은 유전 및 후성 유전 학적 조절, 조직의 발달 과정, 부속기의 재생, 짝짓기 행동 및 미국 바퀴벌레의 다른 흥미로운 측면과 같은 다양한 분야를 탐구하는 데 사용할 수 있습니다. 이 기술은 작동하기 쉽고 다재다능합니다.DSRA 주사 치료 중에 동물을 건강하게 유지하는 것이 좋습니다. 초보자는 여러 연습 세션 후에이 기술을 쉽게 습득 할 수 있다고 생각합니다. 시작하려면 부화 한 님프를 네 밀리미터 조리개 체로 oothecae에서 분리하십시오.유리 튜브가있는 흰색 갓 맥아 P.americana를 골라냅니다. P.americana를 새 용기에 넣고 올바른 치료 단계를 기다립니다. 반응 시스템에서 10 마이크로리터의 T7 2X 완충액, 2 마이크로리터의 T7 익스프레스 효소 믹스 및 2마이크로그램의 PCR 생성물을 첨가한다.마지막으로, 이중 증류수로 총 부피를 20 마이크로 리터로 구성하십시오. 수동으로 부드럽게 거꾸로 섞어서 섭씨 37도에서 30 분 동안 배양 한 다음 섭씨 70도에서 10 분 동안 배양하십시오. 마이크로리터 RNase A 용액 당 4 마이크로그램을 DEPC 물로 1 내지 200의 비율로 희석한다.그런 다음 마이크로리터 당 1 마이크로리터의 RQ1 RNase 프리 드나제 및 희석된 RNase A 용액 1 마이크로리터를 시스템에 첨가한다. 섭씨 37도에서 30 분 동안 배양하십시오. 그런 다음 아세트산 나트륨의 총 부피의 10 %와 이소프로판올의 총 부피의 세 부피를 첨가하십시오.수동으로 거꾸로 부드럽게 섞은 다음 얼음 위에 5 분 동안 놓고 섭씨 4도에서 10 분 동안 13, 000g에서 원심 분리하십시오. 피펫으로 상층액을 제거하십시오. 다음으로, 잔류물을 75% 에탄올, 25% DEPC 처리수로 세척한 다음, 섭씨 4도에서 5분 동안 13, 000 g에서 원심분리한다.상층액을 다시 제거하고, 펠렛을 실온에서 15분 동안 공기 건조시킨다. 그런 다음 이중 가닥 RNA를 약 100 마이크로리터의 DEPC 물로 용해시키고 마이크로리터 당 2 마이크로그램의 최종 농도로 희석한다. 미세 주입 펌프에 프로그램을 설정하여 각 주입의 부피가 일정한지 확인하십시오.그런 다음 주사기를 DEPC 물로 8 ~ 10 번 채워서 청소하십시오. 마이크로 주입 펌프에 10 마이크로 리터 주사기를 설치하십시오. 그런 다음 펌프를 시작하고 주사기를 10 마이크로 리터의 이중 가닥 RNA 용액으로 채 웁니다.바퀴벌레를 이산화탄소로 마취 한 다음 핀셋으로 부드럽게 집어 들고 바퀴벌레를 손으로 바늘쪽으로 전달하십시오. 다음으로, 표피에 대해 수평으로 두 개의 복부 소마이트 사이의 틈을 통해 바늘을 삽입하십시오. 바퀴벌레에 이중 가닥 RNA 용액을 주입하여 바늘 끝이 표피에 최대한 가까워 내부 장기가 손상되지 않도록하십시오.마지막으로, 바늘 끝을 당깁니다. 주입 된 바퀴벌레를 깨끗한 생물 분석 용기에 넣으십시오. 이산화탄소의 영향으로부터 회복 할 수 있도록 약 10 ~ 20 분 동안 기다리십시오.용기에 주사 날짜, 이중 가닥 RNA의 유형 및 복용량 및 P.americana의 나이를 표시하십시오. Ddc 또는 DOPA 데카르복실라제 및 Dpp 또는 데카펜타플레기 유전자는 이중 가닥 RNA 주사 후 맥아 바퀴벌레의 표현형을 관찰하기 위해 두 가지 예로서 선정하였고, 동물에서 표적이 없는 dsMocK를 음성 대조군으로 취하였다. RNAi 효율을 qRT PCR에 의해 검출하였다.유전자는 dsDdc에 대해 0.01 미만, dsDpp에 대해 0.05 미만의 P 값으로 유의하게 녹다운되었다. 녹다운 Ddc 유전자를 가진 P.americana는 막힌 멜라닌화로 인해 흰 표피를 가졌다. dsDpp 주사를 사용한 실험에서, RNAi는 사지 재생을 방해했다.곤충은 건강해야하며 해를 끼치 지 않고 주사해야합니다. 이 기술은 미국 바퀴벌레와 같이 유전자 편집 할 수없는 곤충의 유전자 기능을 탐구하는 간단한 방법을 제공합니다.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Transcriptional Analysis by Nascent RNA FISH of In Vivo Trophoblast Giant Cells or In Vitro Short-term Cultures of Ectoplacental Cone Explants

Transcriptional  Analysis by Nascent RNA FISH of In Vivo Trophoblast Giant Cells or In Vitro Short-term Cultures of Ectoplacental Cone Explants

의 초기 RNA 물고기에 의해 전사 분석<em&gt; 생체</em&gt; 영양막 세포 거대 세포 또는<em&gt; 체외</em&gt; Ectoplacental 콘의 Explants의 단기 문화

The placenta derives from one extra-embryonic lineage, the trophectoderm. In the peri-implantation murine blastocyst, mural trophectoderm cells ...

연구

발생학

A Modified Trier Social Stress Test for Vulnerable Mexican American Adolescents

취약한 멕시코 계 미국인 청소년을위한 수정 된 트리어 사회 스트레스 테스트

The Trier Social Stress Test (TSST) is a well validated and widely used social stressor that has been shown to induce a 2-4 fold increase in cortisol, the ...

Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains

Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains

해 부 및 Immunofluorescent 얼룩의 버섯 몸과 성인 초파리 melanogaster 두뇌 신경 세포 포토 리셉터

Nervous system development involves a sequential series of events that are coordinated by several signaling pathways and regulatory networks. Many of the ...

Processing of Human Cardiac Tissue Toward Extracellular Matrix Self-assembling Hydrogel for In Vitro and In Vivo Applications

Processing of Human Cardiac Tissue Toward Extracellular Matrix Self-assembling Hydrogel for In Vitro and In Vivo Applications

기질 자체 히드로 생체 외에서 그리고 Vivo에서 응용 프로그램에 대 한 조립으로 인간의 심장 조직 처리

Acellular extracellular matrix preparations are useful for studying cell-matrix interactions and facilitate regenerative cell therapy applications. ...

Genetic Engineering of Primary Mouse Intestinal Organoids Using Magnetic Nanoparticle Transduction Viral Vectors for Frozen Sectioning

냉동 절편을 위한 자기 나노입자 전착 바이러스성 벡터를 사용하여 1 차적인 마우스 장 오르가노이드의 유전 공학

Intestinal organoid cultures provide a unique opportunity to investigate intestinal stem cell and crypt biology in vitro, although efficient approaches to ...

Thin Film Composite Silicon Elastomers for Cell Culture and Skin Applications: Manufacturing and Characterization

세포 배양 및 피부 응용 프로그램에 대 한 영화 복합 실리콘 탄성 체를 얇은: 제조 및 특성

In this protocol, we present methods to fabricate thin elastomer composite films for advanced cell culture applications and for the development of skin ...

RNA-based Reprogramming of Human Primary Fibroblasts into Induced Pluripotent Stem Cells

인간의 기본 섬유 아 세포의 유도 만능 줄기 세포로 재프로그래밍 RNA 기반

Induced pluripotent stem cells (iPSCs) have proven to be a valuable tool to study human development and disease. Further advancing iPSCs as a regenerative ...

Dissection, Culture and Analysis of Primary Cranial Neural Crest Cells from Mouse for the Study of Neural Crest Cell Delamination and Migration

신경 문장 세포 박리 및 이동의 연구를 위한 마우스에서 1 차적인 두개골 신경 문장 세포의 해부, 문화 및 분석

Over the past several decades there has been an increased availability of genetically modified mouse models used to mimic human pathologies. However, the ...

Preparation of Small RNA Libraries for Sequencing from Early Mouse Embryos

초기 마우스 배아에서 시퀀싱을 위한 작은 RNA 라이브러리 의 준비

MicroRNAs (miRNAs) are important for the complex regulation of cell fate decisions and developmental timing. In vivo studies of the contribution of miRNAs ...

A Protocol for Immunohistochemistry and RNA In-situ Distribution within Early Drosophila Embryo

A Protocol for Immunohistochemistry and RNA In-situ Distribution within Early Drosophila Embryo

초기 초파리 배아 내의 면역조직화학 및 RNA 계내 분포를 위한 프로토콜

Calcium induced calcium release signaling (CICR) plays a critical role in many biological processes. Every cellular activity from cell proliferation and ...