Name: in vivo imaging of biological tissues with combined two-photon fluorescence and stimulated raman scattering microscopy
Uploaded: 2021-12-20T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about In vivo Imaging of Biological Tissues with Combined Two-Photon Fluorescence and Stimulated Raman Scattering Microscopy at JoVE.com

Эта работа была поддержана Советом по исследовательским грантам Гонконга посредством грантов 16103215, 16148816, 16102518, 16102920, T13-607/12R, T13-706/11-1, T13-605/18W, C6002-17GF, C6001-19E, N_HKUST603/19, Комиссии по инновациям и технологиям (ITCPD/17-9), Схемы области передового опыта Комитета по университетским грантам (AoE/M-604/16, AOE/M-09/12) и Гонконгского университета науки и технологии (HKUST) через грант RPC10EG33.

Все процедуры для животных, выполняемые в этой работе, проводятся в соответствии с руководящими принципами Лаборатории животных Гонконгского университета науки и технологии (HKUST) и были одобрены Комитетом по этике животных HKUST. Для настройки и эксплуатации микроскопа TPEF-SRS требуется об...

В этом протоколе подробно описана базовая настройка микроскопа TPEF-SRS. Для визуализации SRS пучки насоса и Стокса временно и пространственно перекрываются внутри OPO. Однако это перекрытие может быть нарушено после прохождения через систему микроскопа. Поэтому как пространственная, так и...

Рамановская микроскопия1,2 становится мощным методом без меток для изображения биологических тканей на основе характерных частот различных химических связей в биомолекулах. Благодаря своей неинвазивной и хорошо адаптивной способности к визуализации, рамановская микроскопия широко используется для визуализации обогащенных липидами компонентов в биологических тканях, таких как миелиновая оболочка3,4,5, адипоциты6,7 и липидные капли8,9,10 . Сигнал стимулированного комбинационного рассеяния (SRS), полученный в виде стимулированного комбинационного усиления (SRG) или стимулированного рамановского рассеяния (SRL), не имеет фона, показывая идеальное спектральное сходство со спонтанным комбинационным рассеянием11,12. Кроме того, SRL и SRG линейно зависят от концентрации анализируемого вещества, что позволяет проводить количественный анализ биохимических компонентов9,11,13. Двухфотонная возбужденная флуоресцентная микроскопия (TPEF) широко используется для биологической визуализации in vivo благодаря присущей ей способности к оптическому сечению, глубине глубокого проникновения и низкой фототоксичности14,15,16. Однако производительность визуализации TPEF зависит от характеристик флуоресцентных меток, а количество разрешимых цветов ограничено из-за широкополосных флуоресцентных спектров8,17,18,19. Визуализация SRS без меток и флуоресцентная визуализация TPEF являются двумя взаимодополняющими методами визуализации, и их комбинация может обеспечить обильную биофизическую и биохимическую информацию тканей. Эти два метода визуализации основаны на нелинейных оптических (NLO) процессах, что позволяет легко интегрировать их в одну систему микроскопа. Сочетание визуализации SRS и TPEF, так называемой двойной модальной визуализации, позволяет проводить многомерную визуализацию и профилирование клеток и тканей, способствуя всестороннему пониманию сложных биологических систем. В частности, пикосекундная (ps) SRS-микроскопия может достигать визуализации химических связей с высоким спектральным разрешением по сравнению с фемтосекундным (fs) методом SRS11, что позволяет дифференцировать несколько биохимических компонентов в биологической ткани, особенно в переполненной области отпечатков пальцев20,21. Кроме того, по сравнению с другой широко используемой двухмодальной системой микроскопа NLO с интеграцией когерентного микроскопа рассеяния против Стокса (CARS), SRS демонстрирует превосходную производительность по сравнению с CARS с точки зрения спектральной интерпретации и интерпретации изображений, а также чувствительности обнаружения11. Микроскоп SRS-TPEF использовался в качестве мощного инструмента для изучения различных биологических систем, таких как Caenorhabditis elegans9,22, Xenopus laevis головастик brain5, мозг мыши23,24, спинной мозг25,26, периферический нерв27 и жировая ткань7 и т.д.
Спинной мозг вместе с головным мозгом составляет центральную нервную систему (ЦНС). Визуализация клеточной активности в ЦНС in vivo при физиологических и патологических состояниях имеет решающее значение для понимания механизмов расстройств ЦНС28,29,30 и для разработки соответствующих методов лечения31,32,33. Миелиновая оболочка, которая оборачивает и изолирует аксоны для высокоскоростной проводимости потенциала действия, играет значительную роль в развитии ЦНС. Демиелинизация считается отличительной чертой при расстройствах белого вещества, таких как рассеянный склероз34. Кроме того, после травмы спинного мозга35 обломки миелина могут модулировать активацию макрофагов, способствуя хроническому воспалению и вторичному повреждению36. Поэтому визуализация in vivo миелиновой оболочки вместе с нейронами и глиальными клетками в живых мышиных моделях очень помогает понять динамические процессы при нарушениях ЦНС.
В этом протоколе описываются фундаментальные процедуры настройки домашнего микроскопа TPEF-SRS и представлены методы двойной модальной визуализации in vivo для спинного мозга мыши.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>#2 Forceps</td>
			<td>Dumont</td>
			<td>11223-20</td>
			<td>For laminectomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10X objective</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>CFI Plan Apo Lambda 10X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25X objective</td>
			<td>Olympus</td>
			<td>XLPLN25XSVMP2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Burn cream</td>
			<td>Betadine</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Camera</td>
			<td>Sony</td>
			<td>&#945;6300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Current amplifier</td>
			<td>Stanford research</td>
			<td>SR570</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Current photomultiplier modules</td>
			<td>Hamamatsu</td>
			<td>H11461-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D2 665 nm long-pass dichroic mirror</td>
			<td>Semrock</td>
			<td>FF665-Di02-25x36</td>
			<td>For directing epi-fluorescence signal to the detection module</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D3 700 nm short-pass dichroic mirror</td>
			<td>Edmund</td>
			<td>69-206</td>
			<td>For separating SRS from TPEF detection path</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Depilating cream</td>
			<td>Veet</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FS1 975 nm short-pass filter</td>
			<td>Edmund</td>
			<td>86-108</td>
			<td>For blocking stokes beam</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FS1 Bandpass filter</td>
			<td>Semrock</td>
			<td>FF01-850/310</td>
			<td>For blocking stokes beam</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fs2 Bandpass filter</td>
			<td>Semrock</td>
			<td>FF01-525/50</td>
			<td>For selecting YFP signal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fs2 Shortpass filter</td>
			<td>Semrock</td>
			<td>FF01-715/SP-25</td>
			<td>For blocking fs excitation laser beam</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Half-wave plate</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>SAHWP05M-1700</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High-speed photodetector</td>
			<td>MenloSystems</td>
			<td>FPD 310-F</td>
			<td>For checking Stokes beam modulation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodine</td>
			<td>Betadine</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IR Scope</td>
			<td>FJW</td>
			<td>FIND-R-SCOPE Infrared Viewer 2X Kit Model 84499C2X</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>CPA1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L1</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>AC254-060-B-ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L10</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>LA4052-A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L2</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>LA1422-B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L3</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>AC254-050-B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L4</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>AC254-060-B-ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L7</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>f=100 mm, AB coating</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L8</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>LA4874-A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L9</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>AC254-035-B-ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lock-in amplifier</td>
			<td>APE</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mirror</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>PF10-03-P01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Motorized flipper</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>MFF101/M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>multifunctional acquisition card</td>
			<td>National Instrument</td>
			<td>PCIe-6363</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oscilloscope</td>
			<td>Tektronix</td>
			<td>TDS2012C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Photodiode</td>
			<td>APE</td>
			<td></td>
			<td>For detecting SRS signal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Picosecond laser source</td>
			<td>APE</td>
			<td>picoEmerald</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polarizing beam splitter</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>CCM1-PBS252/M</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Power meter</td>
			<td>Newport</td>
			<td>843-R</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline</td>
			<td>Braun</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scan lens L5</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>SL50-CLS2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scanning mirror</td>
			<td>Cambridge Technology</td>
			<td>6215H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone gel</td>
			<td>World Precision Inc.</td>
			<td>KWIK-SIL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ti:sapphire fs laser</td>
			<td>Coherent</td>
			<td>Chameleon Ultra II</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tube lens L6</td>
			<td>Thorlabs</td>
			<td>TTL200-S8</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

in vivo imaging of biological tissues with combined two-photon fluorescence and stimulated raman scattering microscopy

Микроскопия с стимулированным комбинационным рассеянием (SRS) позволяет безметочно визуализировать биологические ткани в их естественном микроокружении на основе внутренней молекулярной вибрации, обеспечивая тем самым идеальный инструмент для изучения in vivo биологических процессов с субклеточным разрешением. Интегрируя двухфотонную возбужденную флуоресцентную (TPEF) визуализацию в микроскоп SRS, двухмодальная визуализация тканей in vivo может получать критически важную биохимическую и биофизическую информацию с нескольких точек зрения, которая помогает понять динамические процессы, участвующие в клеточном метаболизме, иммунном ответе и ремоделировании тканей и т. Д. В этом видеопротоколе вводится настройка системы микроскопа TPEF-SRS, а также метод визуализации спинного мозга животных in vivo . Спинной мозг, как часть центральной нервной системы, играет решающую роль в коммуникации между головным мозгом и периферической нервной системой. Миелиновая оболочка, богатая фосфолипидами, окружает и изолирует аксон, чтобы обеспечить солевую проводимость потенциалов действия. Визуализация in vivo миелиновых оболочек в спинном мозге важна для изучения прогрессирования нейродегенеративных заболеваний и травм спинного мозга. Протокол также описывает препараты животных и методы визуализации in vivo TPEF-SRS для получения биологических изображений с высоким разрешением.

In vivo двухмодальная визуализация спинномозговых аксонов, а также миелиновых оболочек проводится с использованием трансгенных мышей Thy1-YFPH, которые экспрессируют EYFP в афферентных нейронах дорсального корешка ганглия (рисунок 3). Эти меченые афферентные нейроны пере?...

Watch this Scientific Journal Video about In vivo Imaging of Biological Tissues with Combined Two-Photon Fluorescence and Stimulated Raman Scattering Microscopy at JoVE.com

In vivo Imaging of Biological Tissues with Combined Two-Photon Fluorescence and Stimulated Raman Scattering Microscopy

Микроскопия с стимулированным комбинационным рассеянием (SRS) позволяет безметочно визуализировать биомолекулы на основе их внутренней вибрации определенных химических связей. В этом протоколе описана инструментальная установка интегрированного SRS и двухфотонного флуоресцентного микроскопа для визуализации клеточных структур в спинном мозге живых мышей.

In vivo Визуализация биологических тканей с помощью комбинированной двухфотонной флуоресценции и стимулированной рамановской рассеянной микроскопии

Stimulated Raman scattering (SRS) microscopy enables label-free imaging of the biological tissues in its natural microenvironment based on intrinsic ...

Визуализация in vivo биологических тканей с субклеточным разрешением и химической специфичностью является мощным инструментом для понимания динамических процессов, участвующих в клеточном метаболизме, иммунном ответе и ремоделировании тканей. С помощью комбинированной двухфотонной флуоресценции и стимулированной рамановской рассеянной микроскопии критическая биохимическая и биофизическая информация биологических тканей может быть получена с нескольких точек зрения с субклеточным разрешением. В частности, эта двухмодальная микроскопия может быть использована для изображения клеточной динамики и взаимодействий в спинном мозге мыши для изучения прогрессирования нейродегенеративных заболеваний и травм спинного мозга.Для начала включите титановый сапфировый лазер, переключив переключатель клавиши из положения ожидания в положение и подождите 30 минут, пока лазер прогреется. Затем включите OPO, нажав кнопку «Пуск» на панели управления OPO, и подождите 20 минут, пока лазер прогреется. После того, как пикосекундный лазер прогреется, проверьте глубину модуляции луча Стокса, снизив мощность луча Стокса примерно до 20 милливатт, открыв лазерный затвор для луча Стокса и разместив высокоскоростной фотодетектор на выходе OPO для обнаружения луча.Затем подключите выходной порт фотоприемника к входному порту осциллографа с помощью коаксиального кабеля с разъемом BNC для мониторинга лазерного импульса. Затем откройте окно управления EOM в программном обеспечении управления OPO и отрегулируйте мощность и фазу EOM в соответствии с диаграммой интенсивности импульсов, показанной на осциллографе, для достижения максимальной глубины модуляции на 20 мегагерц. В программном обеспечении управления OPO откройте лазерный затвор накачки, остановив выход Stokes.Затем щелкните поле заданного сигнала, чтобы установить длину волны пучка насоса на 796 нанометров, затем щелкните установленный блок питания OPO и введите 20, чтобы установить его мощность до минимума для оптического выравнивания. Затем поместите выравнивание пластины P1 за поляризационным делителем пучка примерно на 10 сантиметров и поместите пластину P2 позади P1 примерно на 30 сантиметров на оптическом пути. После открытия затвора микроскопа для пикосекундного лазерного луча отрегулируйте зеркало M1, чтобы найти пикосекундный центр лазерного луча в сквозном отверстии P1. Используйте инфракрасный прицел для наблюдения за положением точки луча на P1 при регулировке зеркала M1. Аналогичным образом, отрегулируйте зеркало M2, чтобы найти пикосекундный центр лазерного луча в сквозном отверстии P2. Используйте инфракрасный прицел для наблюдения за положением точки луча на P2 при регулировке зеркала M2. После регулировки зеркал до тех пор, пока центр пикосекундного луча не расположится в сквозном отверстии обеих пластин выравнивания, закройте затвор пикосекундного луча в программном обеспечении управления микроскопом.Далее откройте затвор микроскопа для фемтосекундного лазерного луча. Отрегулируйте зеркало M3, чтобы найти центр пятна фемтосекундного лазерного луча в сквозном отверстии P1, затем отрегулируйте зеркало M4, чтобы найти центр пятна фемтосекундного лазерного луча в сквозном отверстии P2. После регулировки зеркал до тех пор, пока фемтосекундный центр лазерного луча не расположится в сквозных отверстиях двух пластин выравнивания, закройте затвор микроскопа для фемтосекундного луча. Затем поместите камеру в положение объектива, чтобы визуализировать расположение двух лучевых пятен и отметить положение пучка насоса на экране камеры в качестве ориентира.Затем поместите выравнивающую пластину P0 перед объективом L3 и отрегулируйте оптическую зеркальную с помощью шестигранного ключа так, чтобы центр луча Стокса проходил сквозное отверстие пластины выравнивания в выходном порту лазера. Используйте инфракрасный прицел для подтверждения положения пятна луча на P0 во время регулировки. Затем снимите выравнивающую пластину P0 и используйте шестигранную клавишу для регулировки двух оптических зеркал таким образом, чтобы центр луча Стокса солидаризировался с опорной отметкой пучка насоса на камере.Продолжайте регулировать зеркала до тех пор, пока луч Стокса не будет строго перекрываться с пучком насоса как в плоскостях P0, так и в плоскостях камеры. Откройте программное обеспечение управления блокирующим усилителем и установите длину волны лазера накачки на 796 нанометров, а мощность насоса и пучка Стокса на 50 и 70 милливатт, соответствующих 15 и 25 милливаттам на образце соответственно. Затем используйте оливковое масло для оптимизации фазы усилителя.Оливковое масло запечатано в слайд с папиросной бумагой, прикрепленной к дну, чтобы усилить обратное рассеяние сигнала или обнаружение EPI-SRS. Поместите образец оливкового масла на сцену и отрегулируйте фокус объектива 25X на образец. Используя программное обеспечение для управления микроскопом, установите параметры визуализации, как указано в текстовой рукописи.Затем, используя программное обеспечение для управления блокирующим усилителем, установите значение постоянной времени равным 10 микросекундам. Далее сканируем лазерный луч над образцом, настраивая фазу с размером шага 22,5 градуса до тех пор, пока интенсивность сигнала SRS не достигнет максимума. Затем сканируйте образец с закрытым лазерным затвором, настраивая значение смещения с размером шага в один милливольт до тех пор, пока средний сигнал SRS не будет близок к нулю.Затем откройте диалоговое окно менеджера задержек в программном обеспечении управления OPO и отсканируйте оливковое масло, настроив стадию задержки до тех пор, пока сигнал SRS оливкового масла не достигнет своего максимума. Затем остановите сканирование и нажмите кнопку добавления данных в диалоговом окне диспетчера задержек, чтобы записать текущие данные о задержке. После аналогичного получения данных о задержке при различных рамановских сдвигах путем визуализации различных химических образцов выберите данные в порядке пять в диалоговом окне диспетчера задержки, чтобы соответствовать текущим точкам данных с полиномической функцией пятого порядка.Затем примените подходящие данные, нажав на кнопку «Использовать в качестве пользовательского» и установив флажок. Стадия задержки автоматически регулируется на разных длинах волн в соответствии с установленной кривой задержки. Для визуализации in vivo зафиксируйте мышь на стадии стабилизации с обнажением спинного мозга и погружением в физиологический раствор.Теперь установите стабилизационную ступень на пятиосевой ступени под микроскопом TPEF-SRS. Затем закрепите голову мыши двумя стойками головы и опустите удерживающую пластину, чтобы обеспечить достаточно места для движения грудной клетки во время дыхания, облегчая артефакты движения. Затем отрегулируйте Z-трансляционную стадию, чтобы настроить фокус до тех пор, пока изображение Брайтфилда сосудистой системы спинного мозга не будет наблюдаться под объективом 10X.Найдите спинную вену спинного мозга в центре поля зрения, настроив двухосевую трансляционную стадию пятиосевой стадии. Затем настройте углы крена и тангажа пятиосевой ступени, чтобы отрегулировать спинную поверхность спинного мозга перпендикулярно оси цели на основе изображения Брайтфилда. Затем замените 10X на объектив погружения в воду 25X для визуализации TPEF-SRS.Для изображения SRS выберите поляризационный разветвитель луча над объективом, нажав кнопку переключателя, подключенную к моторизованному флипперу. Для получения изображений TPEF выберите дихроичное зеркало D2 над объективом, нажав кнопку переключателя, подключенную к моторизованному флипперу. Наконец, установите параметры изображения, как описано в текстовой рукописи, и начните сканирование образца.Двойная визуализация in vivo редко меченых аксонов YFP и миелиновых оболочек в спинном мозге мыши показала, что аксоны плотно обернуты толстым слоем миелиновых оболочек. Как видно на изображении спинного мозга TPEF-SRS, узлы Ранвье имеют уменьшенный аксональный диаметр и аксилемма непосредственно подвергается воздействию внеклеточного матрикса. В сочетании с новыми зондами для флуоресценции и визуализации SRS двухфотонная возбужденная флуоресцентная микроскопия SRS может обеспечить одновременную структурную и функциональную визуализацию различных биомолекул, облегчая наше понимание сложных биологических процессов.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

In vivo Imaging of Biological Tissues with Combined Two-Photon Fluorescence and Stimulated Raman Scattering Microscopy

Rejection of Fluorescence Background in Resonance and Spontaneous Raman Microspectroscopy

Отказ от флуоресцентного фона в резонанс и СКР микроспектроскопия

Raman spectroscopy is often plagued by a strong fluorescent background, particularly for biological samples. If a sample is excited with a train of ...

Three-dimensional Optical-resolution Photoacoustic Microscopy

Трехмерная оптическая разрешением Фотоакустическая микроскопии

Optical microscopy, providing valuable insights at the cellular and organelle levels, has been widely recognized as an enabling biomedical technology. As ...

Small and Wide Angle X-Ray Scattering Studies of Biological Macromolecules in Solution

Малый и широкий угол рассеяния рентгеновских лучей исследования биологических макромолекул в растворе

In this paper, Small and Wide Angle X-ray Scattering (SWAXS) analysis of macromolecules is demonstrated through experimentation. SWAXS is a technique ...

Creating Adhesive and Soluble Gradients for Imaging Cell Migration with Fluorescence Microscopy

Создание клей и растворимых Градиенты для работы с изображениями миграции клеток с флуоресцентной микроскопии

Cells can sense and migrate towards higher concentrations of adhesive cues such as the glycoproteins of the extracellular matrix and soluble cues such as ...

Imaging of Biological Tissues by Desorption Electrospray Ionization Mass Spectrometry

Изображений биологических тканей десорбцией Электроспрей ионизации масс-спектрометрии

Mass spectrometry imaging (MSI) provides untargeted molecular information with the highest specificity and spatial resolution for investigating biological ...

Long-term Intravital Immunofluorescence Imaging of Tissue Matrix Components with Epifluorescence and Two-photon Microscopy

Долгосрочный Прижизненные Иммунофлуоресценции Визуализация тканей компонентов матрицы с эпифлуоресцентной и двухфотонного микроскопии

Besides being a physical scaffold to maintain tissue morphology, the extracellular matrix (ECM) is actively involved in regulating cell and tissue ...

High-resolution Spatiotemporal Analysis of Receptor Dynamics by Single-molecule Fluorescence Microscopy

Высокое разрешение Пространственно-временная Анализ рецептора Dynamics по одиночных молекул флуоресцентной микроскопии

Single-molecule microscopy is emerging as a powerful approach to analyze the behavior of signaling molecules, in particular concerning those aspect (e.g., ...

3D Orbital Tracking in a Modified Two-photon Microscope: An Application to the Tracking of Intracellular Vesicles

3D Орбитальная слежения в модифицированной двухфотонного микроскопа: Приложение к отслеживая внутриклеточного везикулы

The objective of this video protocol is to discuss how to perform and analyze a three-dimensional fluorescent orbital particle tracking experiment using a ...

Fluorescence-quenching of a Liposomal-encapsulated Near-infrared Fluorophore as a Tool for In Vivo Optical Imaging

Fluorescence-quenching of a Liposomal-encapsulated Near-infrared Fluorophore as a Tool for In Vivo Optical Imaging

Флуоресценции тушение липосомальной инкапсулированный в ближней инфракрасной области флуорофорные как инструмент для<em&gt; В Vivo</em&gt; Оптических изображений

Optical imaging offers a wide range of diagnostic modalities and has attracted a lot of interest as a tool for biomedical imaging. Despite the enormous ...

Conducting Multiple Imaging Modes with One Fluorescence Microscope

Проведение нескольких режимов изображения с одной флуоресцентным микроскопом

Fluorescence microscopy is a powerful tool to detect biological molecules in situ and monitor their dynamics and interactions in real-time. In addition to ...