Name: a step-by-step method to detect neutralizing antibodies against aav using a colorimetric cell-based assay
Uploaded: 2021-12-07T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Step-By-Step Method to Detect Neutralizing Antibodies Against AAV using a Colorimetric Cell-Based Assay at JoVE.com

تم تمويل هذه الدراسة من خلال منحة مشروع المجلس الوطني للصحة والبحوث الطبية إلى JRM و CJT (ID 1163732) وجزئيا من قبل برنامج دعم البنية التحتية التشغيلية التابع لحكومة فيكتوريا. يتم دعم SB من خلال منحة دكتوراه مشتركة بين معهد بيكر للقلب والسكري وجامعة لا تروب. يتم دعم KLW من قبل مؤسسة Shine On Foundation وزمالة قادة المستقبل من مؤسسة القلب الوطنية الأسترالية (ID 102539). يتم دعم JRM من قبل زمالة أبحاث عليا من المجلس الوطني للصحة والبحوث الطبية (ID 1078985).

أجريت جميع جوانب رعاية الحيوانات والتجارب وفقا لمعهد فلوري للعلوم العصبية والمبادئ التوجيهية للصحة العقلية والقانون الأسترالي لرعاية واستخدام الحيوانات للأغراض العلمية بعد المرجع 25. تم استخدام نعاج ميرينو البالغة من العمر 1.5-3 سنوات للدراسة. ويرد في الشكل 1 ?...

يصف هذا التقرير مقايسة لونية تقيم مدى تحييد AAV في عينة مصل معينة من خلال تقييم تفاعل كروموجيني يتوافق مع درجة النقل الفيروسي في المختبر. استند تطوير البروتوكول إلى التفاعل اللوني المعروف بين إنزيم الفوسفاتيز القلوي و NBT / BCIP ، والذي تم استخدامه على نطاق واسع كأداة تلطيخ للكشف عن أهداف ?...

تستخدم الفيروسات المرتبطة بالأغينو (AAV) بشكل متزايد كناقلات لتوصيل العلاجات الجينية إلى العلاجات التجريبية لمختلف الحالات الصحية التي تؤثر على الجهاز القلبي الوعائي والرئوي والدورة الدموية والعينية والجهاز العصبي المركزي1،2،3،4،5. تنبع شعبية ناقلات AAV كمنصة رائدة للعلاج الجيني من ملف تعريف السلامة الإيجابي الخاص بها ، والتعبير الجيني المتحول على المدى الطويل ، والاستوائيات الخاصة بالأنسجة واسعة النطاق1,6. وقد مهدت النتائج الناجحة في الدراسات التي أجريت على الحيوانات الطريق لأكثر من خمسين تجربة سريرية للعلاج الجيني AAV وصلت بنجاح إلى نقاط نهاية فعاليتها7، فضلا عن إطلاق أول دواء متاح تجاريا للعلاج الجيني AAV معتمد من قبل إدارة الغذاء والدواء الأمريكية8. بعد النجاحات الأولية ، واصلت AAV اكتساب قوة دفع في قطاعات البحوث الأساسية والسريرية كناقل مفضل وهي حاليا العلاج الجيني الوحيد في الجسم الحي المعتمد للاستخدام السريري في الولايات المتحدة وأوروبا9. ومع ذلك، فإن وجود أجسام مضادة محايدة موجودة مسبقا (NAbs) ضد قفيصات ناقلات AAV لا يزال يشكل عائقا أمام كل من البحوث قبل السريرية وفعالية التجارب السريرية. وتوجد NAbs في كل من المجموعات البشرية والحيوانية الساذجة وتمنع نقل الجينات بعد إعطاء ناقل AAV في الجسم الحي1. الإيجابية المصلية AAV هي معيار استبعاد لمعظم تجارب العلاج الجيني ، وبالتالي فإن الفحص الأولي لمناعة المضيف أمر بالغ الأهمية في كل من المختبر والعيادة. يعد إنشاء فحص يمكنه اكتشاف وجود NAbs ضد AAV خطوة أساسية في خط أنابيب أي مشروع بحثي قائم على العلاج الجيني AAV. يركز هذا التقرير على AAV6 الذي كان موضع اهتمام الباحثين بسبب نقله الفعال والانتقائي في العضلات المخططة (القلب والعضلات الهيكلية)1،10،11،12. يعتبر العلاج الجيني استراتيجية واعدة لاستهداف القلب لأنه من الصعب استهداف القلب على وجه التحديد دون إجراءات القلب المفتوح الغازية.
عادة ما يتم تحديد نشاط التحييد باستخدام إما اختبار تثبيط النقل القائم على الخلايا في المختبر أو في الجسم الحي. في الجسم الحي عادة ما تتضمن اختبارات NAb إعطاء مصل من موضوع اختبار (على سبيل المثال ، إنسان أو كبير) إلى الفئران ، يليه AAV مع جين مراسل ، يليه اختبار للتعبير عن جين المراسل أو المستضد المقابل. تحدد الفحوص المخبرية عيارات NAb عن طريق احتضان المصل أو البلازما من إنسان أو كبير في تخفيفات تسلسلية باستخدام AAV المؤتلف (rAAV) الذي يعبر عن جين مراسل. الخلايا مصابة بخليط المصل / الفيروس ، ويتم تقييم مدى تثبيط التعبير الجيني للمراسل مقارنة بالضوابط. تستخدم الفحوصات في المختبر على نطاق واسع لفحص NAb بسبب تكلفتها المنخفضة نسبيا ، والسرعة في الاختبار ، والقدرة الأكبر على التوحيد القياسي والتحقق من الصحة 13,14 مقارنة بالفحوصات في الجسم الحي. غالبا ما يتم الإبلاغ عن أن الفحوصات في الجسم الحي لها حساسية أكبر15،16 ، ولكن تم تقديم نفس الادعاء فيما يتعلق بالمقايسات في المختبر14،17.
حتى الآن ، استخدمت اختبارات NAb في المختبر بشكل أساسي التلألؤ (luciferase) كجين مراسل للكشف عن التحييد. على الرغم من أن الطريقة القائمة على الضوء لها ميزة في العديد من السياقات ، إلا أن اختبار NAb اللوني / اللوني قد يكون مفيدا في بعض الظروف. تم استخدام المقايسات اللونية لتقييم التحييد بنجاح لفيروسات أخرى مثل الأنفلونزا والفيروسات الغدية18,19. وتنبع جاذبيتها من بساطتها وانخفاض تكلفتها والحاجة إلى أجهزة وأدوات مختبرية يومية فقط20. تتطلب مقايسات NAb التي تستخدم جين مراسل قائم على التلألؤ مجموعات ركيزة باهظة الثمن ومقياس لمعان وبرامج مقابلة للتحليل21. يتميز هذا الفحص اللوني بأنه يتطلب فقط مجهرا ضوئيا وركيزة رخيصة جدا. وقد أسفر الإبلاغ عن حساسية المقايسات اللونية مقابل المضيئة عن نتائج متضاربة. اقترحت إحدى الدراسات أن اختبارات ELISA القائمة على التلألؤ تعرض حساسية أكبر وقابلية تكرار مماثلة لمقايسات قياس الألوان22 ، في حين وجدت دراسة أخرى أن اختبارات ELISA القائمة على القياس اللوني تضفي حساسية أكبر23. هنا ، يتم توفير بروتوكول مفصل لفحص NAb في المختبر ضد AAV يستخدم التفاعل الكروموجيني بين AAV الذي يشفر جين مراسل الفوسفاتيز القلوي (AP) ورباعي التيتانوليوم الأزرق النيترو / 5-bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate (NBT / BCIP). تم تطوير هذا البروتوكول خطوة بخطوة استنادا إلى تقرير سابق استخدم جين مراسل hPLAP (الفوسفاتيز القلوي للمشيمة البشرية) (AAV6-hPLAP) للكشف عن النشاط المحايد ضد AAV24. هذا الفحص فعال من حيث التكلفة ، وفعال من حيث الوقت ، وسهل الإعداد ، ويتطلب الحد الأدنى من المهارات التقنية والمعدات المختبرية والكواشف. علاوة على ذلك ، فإن بساطة هذا الفحص تمنحه إمكانية تحسينه للتطبيقات الواسعة عبر أنواع مختلفة من الخلايا أو الأنسجة أو الأنماط المصلية الفيروسية.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.05% Trypsin/EDTA</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>25300-054</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>50 mL conical centrifuge tube</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>14-432-22</td>
			<td>Or equivalent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>75 cm2 square flasks</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>353136</td>
			<td>Or equivalent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96 well flat bottomed plate</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>353072</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>AAV6-CMV-hPLAP Vector</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Muscle Research &#38; Therapeutics Lab (University of Melbourne, Australia) AAV6-CMV-hPLAP can be provided upon request.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aluminium foil</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-AAV6 (intact particle) mouse monoclonal antibody, (ADK6)</td>
			<td>PROGEN</td>
			<td>610159</td>
			<td>Positive control monoclonal antibody</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BCIP/NBT</td>
			<td>SIGMAFAST</td>
			<td>B5655</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell and tissue culture safety cabinet</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electronic Pipette</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>5 &#38; 10 mL stripette inserts</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10099-141</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Haemocytometer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High glucose Dulbecco&#39;s Modified Eagle Medium (DMEM)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11965118</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HT1080 cells</td>
			<td>ATCC</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImageJ Software</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Freely available: https://imagej.nih.gov/ij/download.html</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>37 &#176;C, 5% CO2</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light microscope with camera</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Capable of taking photos with a 4x objective lens</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Oven</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>For a 65 &#176;C incubation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paraformaldehyde</td>
			<td>MERCK</td>
			<td>30525-89-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin Streptomycin</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15140-122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pipettes and tips</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>20 &#956;L, 200 &#956;L &#38; 1 mL single pipettes and tips &#38; 200 &#956;L multichannel pipette</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stericup quick release filter</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>S2GPU10RE</td>
			<td>Used for combining media reagents</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan blue solution</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T8154</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>VACUETTE TUBE 8 ml CAT Serum Separator Clot Activator</td>
			<td>Greiner BIO-ONE</td>
			<td>455071</td>
			<td>Used for serum collection &#38; processing from sheep</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water bath</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a step-by-step method to detect neutralizing antibodies against aav using a colorimetric cell-based assay

أثبتت الفيروسات المرتبطة بالغدية المؤتلفة (rAAV) أنها ناقل آمن وناجح لنقل المواد الوراثية لعلاج مختلف الحالات الصحية في كل من المختبر والعيادة. ومع ذلك ، فإن الأجسام المضادة المحايدة الموجودة مسبقا (NAbs) ضد قفيصات AAV تشكل تحديا مستمرا للإدارة الناجحة للعلاجات الجينية في كل من النماذج التجريبية الحيوانية الكبيرة والمجموعات البشرية. يعد الفحص الأولي لمناعة المضيف ضد AAV ضروريا لضمان فعالية العلاجات الجينية القائمة على AAV كأداة بحثية وكعامل علاجي قابل للتطبيق سريريا. يصف هذا البروتوكول مقايسة قياس الألوان في المختبر للكشف عن العوامل المحايدة ضد النمط المصلي AAV 6 (AAV6). يستخدم الفحص التفاعل بين AAV الذي يشفر جين مراسل الفوسفاتيز القلوي (AP) وركيزته NBT / BCIP ، والتي تولد وصمة أرجوانية غير قابلة للذوبان كميا عند الجمع. 
في هذا البروتوكول ، يتم دمج عينات المصل مع AAV الذي يعبر عن AP ويتم احتضانه للسماح بحدوث نشاط تحييد محتمل. يضاف خليط مصل الفيروسات لاحقا إلى الخلايا للسماح بالنقل الفيروسي لأي AAVs لم يتم تحييدها. تتم إضافة الركيزة NBT / BCIP وتخضع لتفاعل كروموجيني ، يتوافق مع النقل الفيروسي ونشاط التحييد. يتم تحديد نسبة المساحة الملونة باستخدام أداة برمجية حرة لإنشاء عيارات محايدة. يظهر هذا الفحص علاقة إيجابية قوية بين التلوين والتركيز الفيروسي. أدى تقييم عينات المصل من الأغنام قبل وبعد إعطاء AAV6 المؤتلف إلى زيادة كبيرة في نشاط التحييد (125 إلى > زيادة قدرها 10000 ضعف). أظهر الفحص حساسية كافية للكشف عن النشاط المحايد في >1:32,000 تخفيف المصل. يوفر هذا الفحص طريقة بسيطة وسريعة وفعالة من حيث التكلفة للكشف عن NAbs ضد AAVs.

فحص النقل لتحديد الجرعة الفيروسية المثلى لتغطية اللوحة تم اختيار خلايا HT1080 ، وهي خط خلايا الساركوما الليفية الراسخ ، لهذا الفحص. تركيز 1 × 104 HT1080 خلية / بئر قدمت ~ 50٪ التقاء الخلايا في كل بئر من لوحة 96 بئر. لتحديد التركيز الفيروسي الأمثل للفحص، تمت إضافة rAAV ترميز جين مراسل hPLAP ...

Watch this Scientific Journal Video about A Step-By-Step Method to Detect Neutralizing Antibodies Against AAV using a Colorimetric Cell-Based Assay at JoVE.com

A Step-By-Step Method to Detect Neutralizing Antibodies Against AAV using a Colorimetric Cell-Based Assay

يتم وصف بروتوكول المختبر الشامل وسير عمل التحليل لإجراء فحص سريع وفعال من حيث التكلفة ومباشر قائم على الخلايا اللونية للكشف عن العناصر المحايدة ضد AAV6.

طريقة خطوة بخطوة للكشف عن الأجسام المضادة المحايدة ضد AAV باستخدام فحص قائم على الخلايا اللونية

Recombinant adeno-associated viruses (rAAV) have proven to be a safe and successful vector for transferring genetic material to treat various health ...

تشكل الأجسام المضادة الموجودة مسبقا والتي تحيد AAV عائقا أمام تقدم العلاجات الجينية AAV. هذا الفحص هو أداة فحص للكشف عن الأجسام المضادة المحايدة ضد AAV. الميزة الرئيسية هي أنها فعالة من حيث التكلفة ، وفعالة من حيث الوقت ، وسهلة الإعداد ، وتتطلب الحد الأدنى من المهارات التقنية ، ومعدات المختبر ، والكواشف.ابدأ في طلاء خلايا HT1080 في اليوم الأول عن طريق تخفيف الخلايا إلى تركيز 1 × 10 إلى الخلايا الخامسة لكل ملليلتر في وسائط DMEM الكاملة التي تم تسخينها مسبقا. ثم زرع 100 ميكرولتر من الخلايا لكل بئر في لوحات واضحة ذات قاع مسطح من 96 بئرا إلى تركيز 1 × 10 إلى الخلايا الرابعة لكل بئر. احتضن الصفيحة عند 37 درجة مئوية مع 5٪ من ثاني أكسيد الكربون بين عشية وضحاها لمدة 16 إلى 22 ساعة.في اليوم الثاني ، قم بإنشاء تخفيفات تسلسلية لعينات المصل ذات الأهمية في أنابيب الطرد المركزي الدقيقة 1.5 ملليلتر باستخدام DMEM الكامل الذي تم تسخينه مسبقا. إلى كل أنبوب يحتوي على عينات مصل مخففة ، أضف 66 ميكرولتر من 7.5 × 10 إلى الجينوم الفيروسي الستة لكل ميكرولتر فيروس يعمل محلولا. امزج تخفيف مصل الفيروس عن طريق السحب ثم ضع الأنابيب التي تحتوي على مخاليط مصل الفيروس في حاضنة عند 37 درجة مئوية مع 5٪ من ثاني أكسيد الكربون لمدة 30 دقيقة للسماح بحدوث تحييد محتمل.بعد 30 دقيقة ، ماصة 100 ميكرولتر من خليط مصل الفيروس إلى كل بئر على صفيحة 96 بئرا تحتوي على 1x10 إلى الخلايا الرابعة لكل بئر ، ثم لف اللوحة في رقائق لوضعها في حاضنة عند 37 درجة مئوية مع 5٪ ثاني أكسيد الكربون بين عشية وضحاها لمدة 16 إلى 24 ساعة. في اليوم الثالث ، قم بسحب الوسائط من آبار الصفيحة المكونة من 96 بئرا باستخدام فراغ غطاء الدخان دون تعطيل الخلايا الملتصقة وإضافة 50 ميكرولتر من 4٪ paraformaldehyde إلى كل بئر. بعد لف الطبق في رقائق معدنية ، اتركه لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة.في وقت لاحق ، اغسل الخلايا واستنشقها مرتين باستخدام 200 ميكرولتر من PBS في درجة حرارة الغرفة. بعد الغسيل الثاني ، قم بماصة 200 ميكرولتر من PBS المسخن مسبقا في كل بئر ولف اللوحة في رقائق تليها حضانة عند 65 درجة مئوية لمدة 90 دقيقة لتشويه نشاط الفوسفاتيز القلوي الداخلي المنشأ ، بعد حضانة 50 ميكرولتر من BCIP / NBT المذاب حديثا في كل بئر واحتضان الألواح الملفوفة في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعتين إلى 24 ساعة. في وقت لاحق ، التقط صورا لكل بئر باستخدام عدسة موضوعية 4X في كاميرا مجهر ضوئي ، مما يضمن الاستخدام المتسق لنفس التعرض والتوازن الأبيض وإعدادات الضوء لجميع المقاييس.لتحليل الصورة في ImageJ، حدد الملف وانقر فوق فتح. بالنسبة للصور الملونة، قم بالتحويل إلى تدرج رمادي عن طريق تحديد علامات التبويب صورة ونوع و8 بت بالترتيب. ثم انتقل إلى علامة التبويب صورة وحدد ضبط وعتبة لتغيير العتبة حتى يتم تلوين جميع المساحات الملونة والحمراء ولكن الخلفية ليست كذلك.انقر فوق تحليل وتعيين القياسات وحدد خانات الاختيار الخاصة بالمساحة وجزء المساحة والحد من العتبة وتسمية العرض قبل الضغط على OK.To تحديد قراءة الإشارة لبئر معين ، انقر فوق تحليل وقياس بحيث يعرض عمود النسبة المئوية للمنطقة في النافذة المنبثقة قراءة الإشارة. حددت الدراسة الجرعة الفيروسية المثلى عن طريق إضافة جين مراسل AAV6-hPLAP في الخلايا في مجموعة من تركيزات الجينوم الفيروسي. منح تعدد العدوى من 15،000 تلوين لوحة 36 ٪ وتم اختياره كجرعة فيروسية مثالية.يعرض التحليل التمثيلي العلاقة بين التلوين وتعدد العدوى. تم الحصول على أعلى تركيز تم اختباره ولم يؤثر على العلاقة الخطية بين التلوين والتركيز الفيروسي. أظهرت دراسة تحييد النشاط على جسم مضاد أحادي النسيلة مضاد ل AAV6 ضد الفيروس المرتبط بالغدة الدرقية أو AAV6 عند تخفيف log 10 تثبيطا بنسبة 50٪ لنقل AAV6 أو TI50 بتركيز 10 نانوغرام لكل ملليلتر.في الأجسام المضادة المحايدة أو فحص NAb ، اختلفت درجة تحييد AAV داخل مجتمع العينة الساذج مع قيم عيار TI50 التي تتراوح من 1/2 إلى 1/80. أشارت نتائج الفحص إلى أن قيم عيار تثبيط AAV TI50 قبل إعطاء AAV تراوحت من 1/4 إلى 1/80. بعد إدارة AAV ، زاد عيار TI50 إلى ما بين 1/2000 وأكبر من 1/32،000 ، مما يدل على تباين واضح في قيم العيار بين إدارة AAV قبل وبعد AAV.عند التقاط صور للآبار ، من المهم استخدام نفس إعدادات المجهر باستمرار طوال الفحص والتأكد أيضا من التقاط الصور مباشرة في وسط الآبار.

Research

JoVE Journal

Biology

A Step-by-step Method for the Reconstitution of an ABC Transporter into Nanodisc Lipid Particles

A أسلوب الخطوة بخطوة لإعادة تشكيل ناقلة الى جزيئات الدهون ABC Nanodisc

The nanodisc is a discoidal particle (~ 10-12 nm large) that trap membrane proteins into a small patch of phospholipid bilayer. The nanodisc is a ...

Conversion of a Capture ELISA to a Luminex xMAP Assay using a Multiplex Antibody Screening Method

تحويل لالتقاط ELISA لفحص xMAP Luminex باستخدام فحص الجسم المضاد الطريقة ملتيبليكس

The enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) has long been the primary tool for detection of analytes of interest in biological samples for both life ...

Using Coculture to Detect Chemically Mediated Interspecies Interactions

باستخدام Coculture لكشف كيميائيا وساطة بين الأنواع التفاعلات

In nature, bacteria rarely exist in isolation; they are instead surrounded by a diverse array of other microorganisms that alter the local environment by ...

Analysis of Apoptosis in Zebrafish Embryos by Whole-mount Immunofluorescence to Detect Activated Caspase 3

Whole-mount immunofluorescence to detect activated Caspase 3 (Casp3 assay) is useful to identify cells undergoing either intrinsic or extrinsic apoptosis ...

A Method for Screening and Validation of Resistant Mutations Against Kinase Inhibitors

وهناك طريقة لفحص والتحقق من الطفرات المقاومة ضد كيناز مثبطات

The discovery of BCR/ABL as a driver oncogene in chronic myeloid leukemia (CML) resulted in the development of Imatinib, which, in fact, demonstrated the ...

A Method for Selecting Structure-switching Aptamers Applied to a Colorimetric Gold Nanoparticle Assay

منهج في اختيار الأبتامرات تبديل الهيكل تطبيقها على اللونية الذهب جسيمات متناهية الصغر الفحص

Small molecules provide rich targets for biosensing applications due to their physiological implications as biomarkers of various aspects of human health ...

Colorimetric Detection of Bacteria Using Litmus Test

كشف اللونية من البكتيريا عن طريق محك الاختبار

There are increasing demands for simple but still effective methods that can be used to detect specific pathogens for point-of-care or field applications. ...

A Quantitative Dot Blot Assay for AAV Titration and Its Use for Functional Assessment of the Adeno-associated Virus Assembly-activating Proteins

مقايسة دوت كمية وصمة عار لمعايرة إف واستخدامها لتقييم وظيفي للفيروسات المرتبطة بالغدة الجمعية-تفعيل البروتينات

While adeno-associated virus (AAV) is widely accepted as an attractive vector for gene therapy, it also serves as a model virus for understanding virus ...

A Step-by-Step Guide to Mosquito Electroantennography

دليل خطوة بخطوة لتخطيط كهربية البعوض

Female mosquitoes are the deadliest animals on earth, claiming the lives of more than 1 million people every year due to pathogens they transmit when ...