Name: application of optical coherence tomography to a mouse model of retinopathy
Uploaded: 2022-01-12T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy at JoVE.com

Projektkilde: Natural Science Foundation of Guangdong-provinsen (2018A0303130306). Forfatterne vil gerne takke Ophthalmic Research Laboratory, Joint Shantou International Eye Center of Shantou University og Chinese University of Hong Kong for finansiering og materialer.

Operationerne blev udført efter erklæringen om brug af dyr i oftalmisk og synsforskning fra Association for Research in Vision and Ophthalmology. Det eksperimentelle design blev godkendt af den institutionelle dyreetiske komité (Medical Ethics Committee of JSIEC, EC 20171213(4)-P01). To måneder gamle C57BL/6J-mus og Vldlr-knockoutmus blev brugt i denne undersøgelse. Der var 7 mus i hver gruppe, som alle var hunmus og vejede 20 g til 24 g.
1. Eksperimentelle betingelser
<ol><li>...

<ol>
	<li>Frombach, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serine+protease-mediated+cutaneous+inflammation:+characterization+of+an+ex+vivo+skin+model+for+the+assessment+of+dexamethasone-loaded+core+multishell-nanocarriers.">Serine protease-mediated cutaneous inflammation: characterization of an ex vivo skin model for the assessment of dexamethasone-loaded core multishell-nanocarriers.</a> Pharmaceutics. 12 (9), 862 (2020).</li><li>Osiac, E., S&#259;ftoiu, A., Gheonea, D. I., Mandrila, I., Angelescu, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+and+Doppler+optical+coherence+tomography+in+the+gastrointestinal+tract.">Optical coherence tomography and Doppler optical coherence tomography in the gastrointestinal tract.</a> Journal of Gastroenterology. 17 (1), 15-20 (2011).</li><li>Xiong, Y. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnostic+accuracy+of+optical+coherence+tomography+for+bladder+cancer:+A+systematic+review+and+meta-analysis.">Diagnostic accuracy of optical coherence tomography for bladder cancer: A systematic review and meta-analysis.</a> Photodiagnosis and Photodynamic Therapy. 27, 298-304 (2019).</li><li>Andrews, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+of+the+aging+kidney.">Optical coherence tomography of the aging kidney.</a> &amp; Clinical Transplantation. 14 (6), 617-622 (2016).</li><li>Terashima, M., Kaneda, H., Suzuki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+optical+coherence+tomography+in+coronary+intervention.">The role of optical coherence tomography in coronary intervention.</a> The Korean Journal of Internal Medicine. 27 (1), 1-12 (2012).</li><li>Avital, Y., Madar, A., Arnon, S., Koifman, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+coronary+calcifications+in+optical+coherence+tomography+imaging+using+deep+learning.">Identification of coronary calcifications in optical coherence tomography imaging using deep learning.</a> Scientific Reports. 11 (1), 11269 (2021).</li><li>Huang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography.">Optical coherence tomography.</a> Science. 254 (5035), 1178-1181 (1991).</li><li>Tsai, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+in+gastroenterology:+a+review+and+future+outlook.">Optical coherence tomography in gastroenterology: a review and future outlook.</a> Journal of Biomedical Optics. 22 (12), 1-17 (2017).</li><li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+optical+intensity+on+optical+coherence+tomography+and+retinal+ischemia+in+branch+retinal+vein+occlusion.">Relationship between optical intensity on optical coherence tomography and retinal ischemia in branch retinal vein occlusion.</a> Scientific Reports. 8 (1), 9626 (2018).</li><li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+analysis+of+retinal+layer+optical+intensities+on+three-dimensional+optical+coherence+tomography.">Quantitative analysis of retinal layer optical intensities on three-dimensional optical coherence tomography.</a> Investigative Opthalmology &amp; Visual Science. 54 (10), 6846-6851 (2013).</li><li>Cruz-Herranz, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+retinal+changes+with+optical+coherence+tomography+predicts+neuronal+loss+in+experimental+autoimmune+encephalomyelitis.">Monitoring retinal changes with optical coherence tomography predicts neuronal loss in experimental autoimmune encephalomyelitis.</a> Journal of Neuroinflammation. 16 (1), 203 (2019).</li><li>Podoleanu, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography.">Optical coherence tomography.</a> Journal of Microscopy. 247 (3), 209-219 (2012).</li><li>Augustin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+findings+in+the+retinas+of+SOD1+knockout+mice.">Optical coherence tomography findings in the retinas of SOD1 knockout mice.</a> Translational Vision Science &amp; Technology. 9 (4), 15 (2020).</li><li>Berger, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spectral-domain+optical+coherence+tomography+of+the+rodent+eye:+highlighting+layers+of+the+outer+retina+using+signal+averaging+and+comparison+with+histology.">Spectral-domain optical coherence tomography of the rodent eye: highlighting layers of the outer retina using signal averaging and comparison with histology.</a> PLoS One. 9 (5), 96494 (2014).</li><li>Burns, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+developments+in+murine+imaging+for+assessing+photoreceptor+degeneration+in+vivo.">New developments in murine imaging for assessing photoreceptor degeneration in vivo.</a> Advances in Experimental Medicine &amp; Biology. 854, 269-275 (2016).</li><li>Jagodzinska, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography:+imaging+mouse+retinal+ganglion+cells+in+vivo.">Optical coherence tomography: imaging mouse retinal ganglion cells in vivo.</a> Journal of Visualized Experiments: Jove. (127), e55865 (2017).</li><li>Kocaoglu, O. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+fundus+imaging+and+optical+coherence+tomography+of+the+mouse+retina.">Simultaneous fundus imaging and optical coherence tomography of the mouse retina.</a> Investigative Opthalmology &amp; Visual Science. 48 (3), 1283-1289 (2007).</li><li>Tode, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermal+stimulation+of+the+retina+reduces+Bruch's+membrane+thickness+in+age+related+macular+degeneration+mouse+models.">Thermal stimulation of the retina reduces Bruch's membrane thickness in age related macular degeneration mouse models.</a> Translational Vision Science &amp; Technology. 7 (3), 2 (2018).</li><li>Wang, R., Jiang, C., Ma, J., Young, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+morphological+changes+in+the+retina+of+rhodopsin-/-+mice+with+spectral+domain+optical+coherence+tomography.">Monitoring morphological changes in the retina of rhodopsin-/- mice with spectral domain optical coherence tomography.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 53 (7), 3967-3972 (2012).</li><li>Xie, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+spectral-domain+optical+coherence+tomographic+analysis+of+Rdh5-/-+mice+retina.">A spectral-domain optical coherence tomographic analysis of Rdh5-/- mice retina.</a> PLoS ONE. 15 (4), 0231220 (2020).</li><li>Li, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+imaging+by+optical+coherence+tomography+to+monitor+retinal+degeneration+in+the+mouse.">Noninvasive imaging by optical coherence tomography to monitor retinal degeneration in the mouse.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 42 (12), 2981-2989 (2001).</li><li>Horio, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+change+of+optical+coherence+tomography+scans+in+retinal+degeneration+slow+mice.">Progressive change of optical coherence tomography scans in retinal degeneration slow mice.</a> Archives of Ophthalmology. 119 (9), 1329-1332 (2001).</li><li>Hu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+VLDLR+in+the+retina+and+evolution+of+subretinal+neovascularization+in+the+knockout+mouse+model's+retinal+angiomatous+proliferation.">Expression of VLDLR in the retina and evolution of subretinal neovascularization in the knockout mouse model's retinal angiomatous proliferation.</a> Investigative Opthalmology &amp; Visual Science. 49 (1), 407-415 (2008).</li><li>Wyne, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+the+VLDL+receptor+in+endothelial+cells.">Expression of the VLDL receptor in endothelial cells.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 16 (3), 407-415 (1996).</li><li>Augustin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+characterization+of+spontaneous+retinal+neovascularization+in+the+mouse+eye+by+multifunctional+optical+coherence+tomography.">In vivo characterization of spontaneous retinal neovascularization in the mouse eye by multifunctional optical coherence tomography.</a> Investigative Opthalmology &amp; Visual Science. 59 (5), 2054-2068 (2018).</li><li>Fang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fundus+autofluorescence,+spectral-domain+optical+coherence+tomography,+and+histology+correlations+in+a+Stargardt+disease+mouse+model.">Fundus autofluorescence, spectral-domain optical coherence tomography, and histology correlations in a Stargardt disease mouse model.</a> The FASEB Journal. 34 (3), 3693-3714 (2020).</li></ol>

I denne undersøgelse blev OCT-billeddannelse ved hjælp af et retinalt billeddannelsessystem til små dyr anvendt til at evaluere retinale ændringer i Vldlr knockout-mus, som viser ufuldstændig posterior glasagtig løsrivelse, subretinal neovaskularisering og retinal tykkelse udtynding. OCT er en ikke-invasiv billeddannelsesmetode til at undersøge nethindens tilstand in vivo. De fleste OCT-enheder er designet til menneskelig øjenundersøgelse. Størrelsen på hardwareudstyret, indstillingen af bræ...

Optisk kohærenstomografi (OCT) er en billeddannelsesteknik, der kan give in vivo høj opløsning og tværsnitsbilleddannelse for væv 1,2,3,4,5,6,7,8, især til den ikke-invasive undersøgelse i nethinden 9,10,11,12 . Det kan også bruges til at kvantificere nogle vigtige biomarkører, såsom retinal tykkelse og retinal nervefiberlagtykkelse. OCT-princippet er optisk kohærensreflektometri, som opnår tværsnitsvævsinformation fra kohærensen af lys, der reflekteres fra en prøve, og omdanner den til en grafisk eller digital form gennem et computersystem7. OCT anvendes i vid udstrækning i oftalmologiske klinikker som et vigtigt redskab til diagnose, opfølgning og styring for patienter med retinale lidelser. Det kan også give indsigt i patogenesen af retinale sygdomme.
Ud over kliniske anvendelser er OLT også blevet anvendt i dyreforsøg. Selvom patologi er guldstandarden for morfologisk karakterisering, har OCT fordelen ved ikke-invasiv in vivo-billeddannelse og langsgående opfølgning. Desuden har det vist sig, at OCT er godt korreleret med histopatologi i retinopati dyremodeller 11,13,14,15,16,17,18,19,20. Musen er det mest almindeligt anvendte dyr i biomedicinske undersøgelser. Imidlertid udgør dens små øjenkugler en teknisk udfordring for at udføre OCT-billeddannelse hos mus.
Sammenlignet med det OCT, der først blev brugt til retinal billeddannelse hos mus21,22, er OCT hos små dyr nu blevet optimeret med hensyn til hardware- og softwaresystemer. For eksempel reducerer OCT i kombination med trackeren signifikant signal-støj-forholdet; OCT-softwaresystemopgraderinger gør det muligt at registrere flere retinale lag automatisk; og den integrerede DLP-beamer hjælper med at reducere bevægelsesartefakterne.
Lipoproteinreceptor med meget lav densitet (Vldlr) er et transmembranprotein i endotelceller. Det udtrykkes på retinale vaskulære endotelceller, retinale pigmentepitelceller og omkring den ydre begrænsende membran23,24. Subretinal neovaskularisering er fænotypen af Vldlr knockout mus23. Derfor bruges Vldlr knockout-mus til at undersøge patogenesen og potentiel terapi af subretinal neovaskularisering. Denne artikel demonstrerer anvendelsen af OCT-billeddannelse til påvisning af retinale læsioner i Vldlr knockout-mus i håb om at give en teknisk reference til retinopatiforskning i smådyrsmodeller.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>100-Dpt contact lens</td>
			<td>Volk Optical,Inc, Mentor, OH</td>
			<td></td>
			<td>Accessory belonging to the RETImap</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double aspheric 60-Dpt glass lens</td>
			<td>Volk Optical,Inc, Mentor, OH</td>
			<td></td>
			<td>Accessory belonging to the RETImap</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric heating blanket</td>
			<td>POPOCOLA</td>
			<td>CW-DRT-01</td>
			<td>50 x 35 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection syringe (1 mL)</td>
			<td>Kaile</td>
			<td></td>
			<td>0.45 x 16RWLB</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Levofloxacin Hydrochloride Eye Gel</td>
			<td>EBE PHARMACEUTICAL Co.LTD</td>
			<td></td>
			<td>5 g: 0.015 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical sodium hyaluronate gel</td>
			<td>Alcon</td>
			<td>16H01E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microliter syringes</td>
			<td>Shanghai high pigeon industry and trade co., LTD</td>
			<td>Q31/0113000236C001-2017</td>
			<td>50 &#181;L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone iodine solution</td>
			<td>Guangdong medihealth pharmaceutical Co.,LTD</td>
			<td></td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RETImap</td>
			<td>ROLAND CONSULT</td>
			<td>19-99_50-2.1_1.2E</td>
			<td>cSLO/ERG/VEP/FA/OCT/GFP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal ear studs</td>
			<td>OSMO POCKET OT110</td>
			<td>INS1005-1S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropicamide Phenylephrine Eye Drops</td>
			<td>Santen Pharmaceutical Co.,LTD</td>
			<td></td>
			<td>5 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>X1251-5G</td>
			<td>5 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zoletil 50</td>
			<td>Virbac.S.A</td>
			<td>7FRPA</td>
			<td>Tiletamine 125 mg + Zolazepam 125 mg</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

application of optical coherence tomography to a mouse model of retinopathy

Optisk kohærenstomografi (OCT) tilbyder en ikke-invasiv metode til diagnosticering af retinopati. OCT-maskinen kan tage retinale tværsnitsbilleder, hvorfra retinaltykkelsen kan beregnes. Selvom OLT er meget udbredt i klinisk praksis, er dets anvendelse i grundforskning ikke så udbredt, især hos små dyr som mus. På grund af den lille størrelse af deres øjenkugler er det udfordrende at foretage fundusbilledundersøgelser hos mus. Derfor kræves et specialiseret retinalt billeddannelsessystem for at imødekomme OCT-billeddannelse på små dyr. Denne artikel viser et system for OLT-undersøgelsesprocedurer for små dyr og en detaljeret metode til billedanalyse. Resultaterne af retinal OCT-undersøgelse af lipoproteinreceptor (Vldlr) og C57BL/6J-mus præsenteres. OCT-billederne af C57BL/6J-mus viste nethindelag, mens Vldlr-knockout-mus viste subretinal neovaskularisering og retinal udtynding. Sammenfattende kan OCT-undersøgelse lette ikke-invasiv påvisning og måling af retinopati i musemodeller.

Takket være OCT's højopløsningsscanninger kan lagene i musens nethinden observeres, og unormale refleksioner og deres nøjagtige placeringer kan identificeres. De retinale OCT-billeder af Vldlr-knockoutmus og C57BL/6J-mus blev sammenlignet i denne undersøgelse. OCT-billederne af alle C57BL/6J-mus viste forskellige retinale lag med forskellig reflektivitet, og afgrænsningen var klar (figur 8D). I modsætning hertil viste alle Vldlr knockout-mus unormale, hyperreflektere...

Watch this Scientific Journal Video about Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy at JoVE.com

Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy

Her beskriver vi en in vivo-billeddannelsesteknik ved hjælp af optisk kohærenstomografi for at lette diagnosen og den kvantitative måling af retinopati hos mus.

Anvendelse af optisk kohærenstomografi på en musemodel af retinopati

Optical coherence tomography (OCT) offers a noninvasive method for the diagnosis of retinopathy. The OCT machine can capture retinal crosssectional images ...

Optisk kohærenstomografi anvendes i vid udstrækning i den kliniske diagnose af forskellige nethindesygdomme, men det er stadig udfordrende at anvende i musemodeller. Denne protokol beskriver, hvordan man styrer OLT-teknikken hos dyr. Denne teknologi kan anvendes på dyr med forskellige øjenkugler.Det muliggør ikke-invasiv, høj opløsning og retinal tværsnitsbilleddannelse i realtid sammen med kvantitative målinger af retinal tykkelse. OCT hjælper med retinopati diagnose ved at identificere læsionsfunktionerne såsom placering, rækkevidde, form og størrelse af læsionerne samt alle mistænkte retinale abnormiteter såsom retinal neovaskularisering. Denne protokol gælder for dyreforsøg eller fundussygdomme, herunder og nethindesygdomme.Før du starter proceduren, skal du være forberedt og følge protokollen trin for trin. Udfør eksperimentet, når dyret er bedøvet. Man skal være i stand til at få OCT-billeder af god kvalitet efter lidt øvelse.For at begynde skal du tænde computeren og starte softwaren. Klik på testprogramknappen for at fuldføre testprogrammet. Tænd derefter termostaten og forvarm den til 37 grader Celsius.Efter programtesten skal du starte OCT-modulproceduren. Opret et nyt emne, og udfyld museoplysningerne. Forvarm derefter det elektriske tæppe og dæk det med kirurgiske håndklæder.Placer den bedøvede mus på den elektriske tæppeplatform og overtræk straks begge øjne med medicinsk natriumhyaluronatgel. Placer derefter en 100D kontaktlinse på musens hornhinde med den konkave side, der berører natriumhyaluronatgelen på hornhindeoverfladen. Placer derefter musen på cSLO-enhedens lille dyreplatform med konstant temperatur.Juster kontaktlinsens vinkel med tang for at holde pupillen i midten af linsen. Finjuster justeringerne af hovedet for at få øjet til at vende lige frem. Klik på OCT-knappen, vælg musemodulet, og start cSLO-programmet.Brug derefter betjeningshåndtaget til langsomt at flytte den forudindstillede linse mod kontaktlinsen. Foretag yderligere justeringer for at justere billedet af den forreste bageste pol og centrere den ved synsnervehovedet. Start derefter OCT-programmet, og klik på statuslinjen op og ned, indtil OCT-billedet vises.Juster minimumsområdet mellem 0 og 20 og det maksimale interval mellem 40 og 60. Juster derefter den forudindstillede linseafstand og positionsretning, indtil der opnås et ideelt OCT-billede. Vælg scanningspositionen ved at flytte standardlinjen i cSLO'en.Klik derefter på gennemsnit for at overlejre cSLO- og OCT-billedsignalet, og klik på optageknappen for at erhverve SLO OCT-billedet. Efter eksperimentet skal du fjerne 100D-kontaktlinsen og anvende levofloxacin øjengelen for at beskytte hornhinden. For retinal stratificeringskorrektion skal du klikke på indlæsningsundersøgelse på OCT-grænsefladen og kalde OCT-billederne ud af et pop op-vindue.Dobbeltklik derefter på billedet i mediebeholderen for at få det vist på skærmen. Klik derefter på lagdetektion for at fuldføre automatisk lagdeling på nethinden. Når du har valgt skillelinjen på begge sider af det lag, der er forberedt til analyse, skal du klikke på rediger lag for at justere afstanden og begrænse området.Rediger derefter linjen ved at flytte den røde cirkel. For at måle nethindelamineringstykkelsen skal du klikke på knappen Målemarkør og vælge skillelinjen for det lag, der skal analyseres, for at få vist grænsen for laget på OCT-billedet. Vælg derefter Opret forbindelse med lag og hold forbindelsen på farten.Vælg derefter det område, der skal vises resultaterne, og klik på den position, der skal analyseres på OCT-billedet for at få målelinjen til at vises. Klik på den næste kolonne for efterfølgende målinger og for at afsløre de tidligere data. Hvis du vil måle fuld retinal tykkelse, skal du vælge linje et og linje syv på listen i øverste højre hjørne.Derefter måles fire værdier ved 200 mikrometerafstandsintervaller på den vandrette lineal fra udseendet af retinal struktur ved kanten af den optiske papilla. OCT-billeder af C57BL/6-mus viste forskellige nethindelager med klar afgrænsning. I modsætning hertil viste Vldlr knockout-mus unormale hyperreflekterende læsioner.OCT-billederne viste nogle midterste reflekterende bånd på nethindefladerne på Vldlr-knockoutmusene. Disse bånd klæbede til retinalfartøjet og var i overensstemmelse med OLT-egenskaberne ved ufuldstændig glasagtig løsrivelse. En hyperreflekterende læsion optrådte på det subretinale rum og spredte sig til det ydre nukleare lag, men brød ikke gennem det ydre plexiformlag.OCT-udseendet af denne læsion var i overensstemmelse med patologiske fund. Det patologiske afsnit viste, at neovaskularisering brød gennem retinalt pigmentepitellaget, fotoreceptorens indre-ydre segmenter og den eksterne begrænsende membran, der invaderede det ydre nukleare lag, men ikke det ydre plexiformlag. Et andet bånd af hyperreflekterende læsion, der er placeret i det subretinale rum, involverede ikke det ydre nukleare lag.I overensstemmelse med patologiske fund brød denne subretinale neovaskularisering ikke gennem den ydre begrænsende membran. Sammenligning af retinaltykkelsen af højre øje i de tidsmæssige, nasale, overlegne og ringere retninger af den bageste polare mellem de to grupper afslørede, at retinal tykkelsen af Vldlr knockout mus var signifikant lavere end for C57BL / 6J musene. Når du udfører protokollen, skal du placere en 100D-kontaktlinse korrekt på hornhinden og derefter justere billedpositionen.Vælg scanningsplaceringen, og overlejr billedet, før du optager. Efter denne procedure er forreste segment OCT mulig, hvilket kræver ændring af afstanden mellem den forudindstillede linse og hornhinden. Det kan vise hornhinden, det forreste kammer, iris, ciliary krop og linse.Denne teknik giver et vigtigt redskab til retinopatiforskning i smådyrsmodeller, der fremmer ikke-invasiv påvisning og måling af retinopati i grundforskning.

Research

JoVE Journal

Medicine

Doppler Optical Coherence Tomography of Retinal Circulation

Doppler Optical Coherence Tomography af Retinal cirkulation

Noncontact retinal blood flow measurements are performed with a Fourier domain optical coherence tomography (OCT) system using a circumpapillary double ...

Near Infrared Optical Projection Tomography for Assessments of &beta;-cell Mass Distribution in Diabetes Research

Near Infrared Optical Projection Tomography for Assessments of ÃƒÅ½Ã‚Â²-cell Mass Distribution in Diabetes Research

Near Infrared Optical Projection Tomography for Vurderinger af β-celle Mass Distribution i Diabetes Research

By adapting OPT to include the capability of imaging in the near infrared (NIR) spectrum, we here illustrate the possibility to image larger bodies of ...

Generation and 3-Dimensional Quantitation of Arterial Lesions in Mice Using Optical Projection Tomography

Generation og 3-Dimensional Kvantificering af Arteriel Læsioner i mus Brug Optisk Projection Tomography

The generation and analysis of vascular lesions in appropriate animal models is a cornerstone of research into cardiovascular disease, generating ...

In Vivo, Percutaneous, Needle Based, Optical Coherence Tomography of Renal Masses

In Vivo, Percutaneous, Needle Based, Optical Coherence Tomography of Renal Masses

In vivo, perkutan, Needle Based, Optisk kohærenstomografi af Nyrer Masses

Optical coherence tomography (OCT) is the optical equivalent of ultrasound imaging, based on the backscattering of near infrared light. OCT provides real ...

A Neonatal Mouse Spinal Cord Compression Injury Model

En Neonatal Mouse rygmarvskompression Skade Model

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal ...

Diffuse Optical Spectroscopy for the Quantitative Assessment of Acute Ionizing Radiation Induced Skin Toxicity Using a Mouse Model

Diffus optisk spektroskopi til kvantitativ vurdering af akut ioniserende stråling induceret hudtoksicitet Brug af mus Model

Acute skin toxicities from ionizing radiation (IR) are a common side effect from therapeutic courses of external beam radiation therapy (RT) and ...

Using Micro-computed Tomography for the Assessment of Tumor Development and Follow-up of Response to Treatment in a Mouse Model of Lung Cancer

Brug Micro-computertomografi for Vurdering af Tumor Udvikling og opfølgning af respons på behandling i en musemodel for lungekræft

Lung cancer is the most lethal cancer in the world. Intensive research is ongoing worldwide to identify new therapies for lung cancer. Several mouse ...

Ultrahigh Resolution Mouse Optical Coherence Tomography to Aid Intraocular Injection in Retinal Gene Therapy Research

Ultrahigh opløsning musen optisk kohærens tomografi til støtte intraokulært injektion i Retinal genterapi forskning

HR-SD-OCT is utilized to monitor the progression of photoreceptor degeneration in live mouse models, assess the delivery of therapeutic agents into the ...

In Vivo Imaging of Cx3cr1gfp/gfp Reporter Mice with Spectral-domain Optical Coherence Tomography and Scanning Laser Ophthalmoscopy

In Vivo Imaging of Cx3cr1gfp/gfp Reporter Mice with Spectral-domain Optical Coherence Tomography and Scanning Laser Ophthalmoscopy

In Vivo Billeddannelse af Cx3cr1normal god landbrugspraksis/NGL Reporter mus med røde-domæne optisk kohærens tomografi og Scanning Laser oftalmoskopi

Spectral domain optical coherence tomography (SD-OCT) and scanning laser ophthalmoscopy (SLO) are extensively used in experimental ophthalmology. In the ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Isometrisk kontraktilitet måling af musen mesenterica arterie ved hjælp af Wire blodkar

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...