Name: application of optical coherence tomography to a mouse model of retinopathy
Uploaded: 2022-01-12T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy at JoVE.com

Projectbron: Natural Science Foundation van de provincie Guangdong (2018A0303130306). De auteurs willen het Ophthalmic Research Laboratory, Joint Shantou International Eye Center van Shantou University en de Chinese University of Hong Kong bedanken voor financiering en materialen.

De operaties werden uitgevoerd naar aanleiding van de Verklaring over het gebruik van dieren in oogheelkundig en visieonderzoek van de Association for Research in Vision and Ophthalmology. Het experimentele ontwerp werd goedgekeurd door de institutionele commissie voor dierethiek (Medisch-ethische commissie van JSIEC, EC 20171213(4)-P01). Twee maanden oude C57BL/6J muizen en Vldlr knock-out muizen werden gebruikt in deze studie. Er waren 7 muizen in elke groep, die allemaal vrouwelijk waren en 20 g tot 24 g woge...

<ol>
	<li>Frombach, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serine+protease-mediated+cutaneous+inflammation:+characterization+of+an+ex+vivo+skin+model+for+the+assessment+of+dexamethasone-loaded+core+multishell-nanocarriers.">Serine protease-mediated cutaneous inflammation: characterization of an ex vivo skin model for the assessment of dexamethasone-loaded core multishell-nanocarriers.</a> Pharmaceutics. 12 (9), 862 (2020).</li><li>Osiac, E., S&#259;ftoiu, A., Gheonea, D. I., Mandrila, I., Angelescu, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+and+Doppler+optical+coherence+tomography+in+the+gastrointestinal+tract.">Optical coherence tomography and Doppler optical coherence tomography in the gastrointestinal tract.</a> Journal of Gastroenterology. 17 (1), 15-20 (2011).</li><li>Xiong, Y. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnostic+accuracy+of+optical+coherence+tomography+for+bladder+cancer:+A+systematic+review+and+meta-analysis.">Diagnostic accuracy of optical coherence tomography for bladder cancer: A systematic review and meta-analysis.</a> Photodiagnosis and Photodynamic Therapy. 27, 298-304 (2019).</li><li>Andrews, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+of+the+aging+kidney.">Optical coherence tomography of the aging kidney.</a> &amp; Clinical Transplantation. 14 (6), 617-622 (2016).</li><li>Terashima, M., Kaneda, H., Suzuki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+optical+coherence+tomography+in+coronary+intervention.">The role of optical coherence tomography in coronary intervention.</a> The Korean Journal of Internal Medicine. 27 (1), 1-12 (2012).</li><li>Avital, Y., Madar, A., Arnon, S., Koifman, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+coronary+calcifications+in+optical+coherence+tomography+imaging+using+deep+learning.">Identification of coronary calcifications in optical coherence tomography imaging using deep learning.</a> Scientific Reports. 11 (1), 11269 (2021).</li><li>Huang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography.">Optical coherence tomography.</a> Science. 254 (5035), 1178-1181 (1991).</li><li>Tsai, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+in+gastroenterology:+a+review+and+future+outlook.">Optical coherence tomography in gastroenterology: a review and future outlook.</a> Journal of Biomedical Optics. 22 (12), 1-17 (2017).</li><li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+optical+intensity+on+optical+coherence+tomography+and+retinal+ischemia+in+branch+retinal+vein+occlusion.">Relationship between optical intensity on optical coherence tomography and retinal ischemia in branch retinal vein occlusion.</a> Scientific Reports. 8 (1), 9626 (2018).</li><li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+analysis+of+retinal+layer+optical+intensities+on+three-dimensional+optical+coherence+tomography.">Quantitative analysis of retinal layer optical intensities on three-dimensional optical coherence tomography.</a> Investigative Opthalmology &amp; Visual Science. 54 (10), 6846-6851 (2013).</li><li>Cruz-Herranz, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+retinal+changes+with+optical+coherence+tomography+predicts+neuronal+loss+in+experimental+autoimmune+encephalomyelitis.">Monitoring retinal changes with optical coherence tomography predicts neuronal loss in experimental autoimmune encephalomyelitis.</a> Journal of Neuroinflammation. 16 (1), 203 (2019).</li><li>Podoleanu, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography.">Optical coherence tomography.</a> Journal of Microscopy. 247 (3), 209-219 (2012).</li><li>Augustin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+findings+in+the+retinas+of+SOD1+knockout+mice.">Optical coherence tomography findings in the retinas of SOD1 knockout mice.</a> Translational Vision Science &amp; Technology. 9 (4), 15 (2020).</li><li>Berger, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spectral-domain+optical+coherence+tomography+of+the+rodent+eye:+highlighting+layers+of+the+outer+retina+using+signal+averaging+and+comparison+with+histology.">Spectral-domain optical coherence tomography of the rodent eye: highlighting layers of the outer retina using signal averaging and comparison with histology.</a> PLoS One. 9 (5), 96494 (2014).</li><li>Burns, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+developments+in+murine+imaging+for+assessing+photoreceptor+degeneration+in+vivo.">New developments in murine imaging for assessing photoreceptor degeneration in vivo.</a> Advances in Experimental Medicine &amp; Biology. 854, 269-275 (2016).</li><li>Jagodzinska, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography:+imaging+mouse+retinal+ganglion+cells+in+vivo.">Optical coherence tomography: imaging mouse retinal ganglion cells in vivo.</a> Journal of Visualized Experiments: Jove. (127), e55865 (2017).</li><li>Kocaoglu, O. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+fundus+imaging+and+optical+coherence+tomography+of+the+mouse+retina.">Simultaneous fundus imaging and optical coherence tomography of the mouse retina.</a> Investigative Opthalmology &amp; Visual Science. 48 (3), 1283-1289 (2007).</li><li>Tode, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermal+stimulation+of+the+retina+reduces+Bruch's+membrane+thickness+in+age+related+macular+degeneration+mouse+models.">Thermal stimulation of the retina reduces Bruch's membrane thickness in age related macular degeneration mouse models.</a> Translational Vision Science &amp; Technology. 7 (3), 2 (2018).</li><li>Wang, R., Jiang, C., Ma, J., Young, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+morphological+changes+in+the+retina+of+rhodopsin-/-+mice+with+spectral+domain+optical+coherence+tomography.">Monitoring morphological changes in the retina of rhodopsin-/- mice with spectral domain optical coherence tomography.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 53 (7), 3967-3972 (2012).</li><li>Xie, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+spectral-domain+optical+coherence+tomographic+analysis+of+Rdh5-/-+mice+retina.">A spectral-domain optical coherence tomographic analysis of Rdh5-/- mice retina.</a> PLoS ONE. 15 (4), 0231220 (2020).</li><li>Li, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+imaging+by+optical+coherence+tomography+to+monitor+retinal+degeneration+in+the+mouse.">Noninvasive imaging by optical coherence tomography to monitor retinal degeneration in the mouse.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 42 (12), 2981-2989 (2001).</li><li>Horio, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+change+of+optical+coherence+tomography+scans+in+retinal+degeneration+slow+mice.">Progressive change of optical coherence tomography scans in retinal degeneration slow mice.</a> Archives of Ophthalmology. 119 (9), 1329-1332 (2001).</li><li>Hu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+VLDLR+in+the+retina+and+evolution+of+subretinal+neovascularization+in+the+knockout+mouse+model's+retinal+angiomatous+proliferation.">Expression of VLDLR in the retina and evolution of subretinal neovascularization in the knockout mouse model's retinal angiomatous proliferation.</a> Investigative Opthalmology &amp; Visual Science. 49 (1), 407-415 (2008).</li><li>Wyne, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+the+VLDL+receptor+in+endothelial+cells.">Expression of the VLDL receptor in endothelial cells.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 16 (3), 407-415 (1996).</li><li>Augustin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+characterization+of+spontaneous+retinal+neovascularization+in+the+mouse+eye+by+multifunctional+optical+coherence+tomography.">In vivo characterization of spontaneous retinal neovascularization in the mouse eye by multifunctional optical coherence tomography.</a> Investigative Opthalmology &amp; Visual Science. 59 (5), 2054-2068 (2018).</li><li>Fang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fundus+autofluorescence,+spectral-domain+optical+coherence+tomography,+and+histology+correlations+in+a+Stargardt+disease+mouse+model.">Fundus autofluorescence, spectral-domain optical coherence tomography, and histology correlations in a Stargardt disease mouse model.</a> The FASEB Journal. 34 (3), 3693-3714 (2020).</li></ol>

In deze studie werd OCT-beeldvorming met behulp van een retinaal beeldvormingssysteem voor kleine dieren toegepast om retinale veranderingen te evalueren bij Vldlr knock-out muizen, die onvolledige posterieure glasvochtloslating, subretinale neovascularisatie en dunner wordende retinale dikte vertonen. OCT is een niet-invasieve beeldvormingsmethode om de toestand van het netvlies in vivo te onderzoeken. De meeste OCT-apparaten zijn ontworpen voor menselijk oogonderzoek. De grootte van de hardware-appara...

Optische coherentietomografie (OCT) is een beeldvormingstechniek die in vivo hoge resolutie en crosssectieve beeldvorming kan bieden voor weefsel 1,2,3,4,5,6,7,8, vooral voor het niet-invasieve onderzoek in het netvlies 9,10,11,12 . Het kan ook worden gebruikt om enkele belangrijke biomarkers te kwantificeren, zoals retinale dikte en retinale zenuwvezellaagdikte. Het principe van OCT is optische coherentiereflectometrie, waarbij crosssectionale weefselinformatie wordt verkregen uit de samenhang van licht dat door een monster wordt gereflecteerd en via een computersysteem in een grafische of digitale vorm wordt omgezet7. OCT wordt veel gebruikt in oogheelkundige klinieken als een essentieel hulpmiddel voor diagnose, follow-up en management voor patiënten met retinale aandoeningen. Het kan ook inzicht geven in de pathogenese van netvliesaandoeningen.
Naast klinische toepassingen is OCT ook gebruikt in dierstudies. Hoewel pathologie de gouden standaard is voor morfologische karakterisering, heeft OCT het voordeel van niet-invasieve in vivo beeldvorming en longitudinale follow-up. Bovendien is aangetoond dat OCT goed gecorreleerd is met histopathologie in retinopathie diermodellen 11,13,14,15,16,17,18,19,20. De muis is het meest gebruikte dier in biomedische studies. De kleine oogbollen vormen echter een technische uitdaging voor het uitvoeren van OCT-beeldvorming bij muizen.
Vergeleken met de OCT die voor het eerst werd gebruikt voor retinale beeldvorming bij muizen 21,22, is OCT bij kleine dieren nu geoptimaliseerd met betrekking tot hardware- en softwaresystemen. Oct vermindert bijvoorbeeld, in combinatie met de tracker, de signaal-ruisverhouding aanzienlijk; Oct-softwaresysteemupgrades maken het mogelijk om automatisch meer retinale lagen te detecteren; en de geïntegreerde DLP-beamer helpt de bewegingsartefacten te verminderen.
Very-low-density lipoprotein receptor (Vldlr) is een transmembraaneiwit in endotheelcellen. Het wordt uitgedrukt op retinale vasculaire endotheelcellen, retinale pigmentepitheelcellen en rond het buitenste beperkende membraan23,24. Subretinale neovascularisatie is het fenotype van Vldlr knock-out muizen23. Daarom worden Vldlr knock-out muizen gebruikt om de pathogenese en potentiële therapie van subretinale neovascularisatie te onderzoeken. Dit artikel demonstreert de toepassing van OCT-beeldvorming om retinale laesies te detecteren bij Vldlr knock-out muizen, in de hoop een technische referentie te bieden voor retinopathie-onderzoek in modellen met kleine dieren.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>100-Dpt contact lens</td>
			<td>Volk Optical,Inc, Mentor, OH</td>
			<td></td>
			<td>Accessory belonging to the RETImap</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double aspheric 60-Dpt glass lens</td>
			<td>Volk Optical,Inc, Mentor, OH</td>
			<td></td>
			<td>Accessory belonging to the RETImap</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric heating blanket</td>
			<td>POPOCOLA</td>
			<td>CW-DRT-01</td>
			<td>50 x 35 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection syringe (1 mL)</td>
			<td>Kaile</td>
			<td></td>
			<td>0.45 x 16RWLB</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Levofloxacin Hydrochloride Eye Gel</td>
			<td>EBE PHARMACEUTICAL Co.LTD</td>
			<td></td>
			<td>5 g: 0.015 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical sodium hyaluronate gel</td>
			<td>Alcon</td>
			<td>16H01E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microliter syringes</td>
			<td>Shanghai high pigeon industry and trade co., LTD</td>
			<td>Q31/0113000236C001-2017</td>
			<td>50 &#181;L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone iodine solution</td>
			<td>Guangdong medihealth pharmaceutical Co.,LTD</td>
			<td></td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RETImap</td>
			<td>ROLAND CONSULT</td>
			<td>19-99_50-2.1_1.2E</td>
			<td>cSLO/ERG/VEP/FA/OCT/GFP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal ear studs</td>
			<td>OSMO POCKET OT110</td>
			<td>INS1005-1S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropicamide Phenylephrine Eye Drops</td>
			<td>Santen Pharmaceutical Co.,LTD</td>
			<td></td>
			<td>5 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>X1251-5G</td>
			<td>5 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zoletil 50</td>
			<td>Virbac.S.A</td>
			<td>7FRPA</td>
			<td>Tiletamine 125 mg + Zolazepam 125 mg</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

application of optical coherence tomography to a mouse model of retinopathy

Optische coherentietomografie (OCT) biedt een niet-invasieve methode voor de diagnose van retinopathie. De OCT-machine kan retinale crosssectiebeelden vastleggen waaruit de retinale dikte kan worden berekend. Hoewel OCT veel wordt gebruikt in de klinische praktijk, is de toepassing ervan in fundamenteel onderzoek niet zo gangbaar, vooral bij kleine dieren zoals muizen. Vanwege de kleine omvang van hun oogbollen is het een uitdaging om fundusbeeldvormingsonderzoeken uit te voeren bij muizen. Daarom is een gespecialiseerd retinaal beeldvormingssysteem vereist om OCT-beeldvorming bij kleine dieren mogelijk te maken. Dit artikel demonstreert een specifiek systeem voor kleine dieren voor LGO-onderzoeksprocedures en een gedetailleerde methode voor beeldanalyse. De resultaten van retinaal OCT-onderzoek van zeer low-density lipoproteïne receptor (Vldlr) knock-out muizen en C57BL / 6J muizen worden gepresenteerd. De OCT-beelden van C57BL / 6J-muizen toonden retinale lagen, terwijl die van Vldlr knock-out muizen subretinale neovascularisatie en retinale verdunning vertoonden. Kortom, OCT-onderzoek zou de niet-invasieve detectie en meting van retinopathie in muismodellen kunnen vergemakkelijken.

Dankzij de hoge resolutie scans van OCT kunnen de lagen van het netvlies van de muis worden waargenomen en kunnen abnormale reflecties en hun exacte locaties worden geïdentificeerd. De retinale OCT-beelden van Vldlr knock-out muizen en C57BL/6J muizen werden vergeleken in deze studie. De OCT-beelden van alle C57BL/6J-muizen toonden verschillende retinale lagen met verschillende reflectiviteit en de afbakening was duidelijk (figuur 8D). Daarentegen vertoonden alle Vldlr kno...

Watch this Scientific Journal Video about Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy at JoVE.com

Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy

Hier beschrijven we een in vivo beeldvormingstechniek met behulp van optische coherentietomografie om de diagnose en kwantitatieve meting van retinopathie bij muizen te vergemakkelijken.

Toepassing van optische coherentietomografie op een muismodel van retinopathie

Optical coherence tomography (OCT) offers a noninvasive method for the diagnosis of retinopathy. The OCT machine can capture retinal crosssectional images ...

Optische coherentietomografie wordt veel gebruikt bij de klinische diagnose van verschillende retinale ziekten, maar het is nog steeds een uitdaging om toe te passen in muismodellen. Dit protocol beschrijft hoe de OCT-techniek bij dieren moet worden beheerd. Deze technologie kan worden toegepast op dieren met verschillende oogbolgroottes.Het maakt niet-invasieve, hoge resoluties en real-time retinale cross-sectionele beeldvorming mogelijk, samen met kwantitatieve metingen van retinale dikte. OCT helpt bij de diagnose van retinopathie door de laesiekenmerken te identificeren, zoals locatie, bereik, vorm en grootte van de laesies, evenals alle vermoedelijke retinale afwijkingen zoals retinale neovascularisatie. Dit protocol is van toepassing op dierstudies of fundusziekten, waaronder en netvliesaandoeningen.Voordat u de procedure start, moet u voorbereid zijn en het protocol stap voor stap volgen. Voer het experiment uit wanneer het dier is verdoofd. Men moet in staat zijn om OCT-afbeeldingen van goede kwaliteit te verkrijgen na enige oefening.Schakel om te beginnen de computer in en start de software op. Klik op de knop testprogramma om het testprogramma te voltooien. Zet vervolgens de thermostaat aan en verwarm deze voor op 37 graden Celsius.Start na het testen van het programma de OCT-moduleprocedure. Maak een nieuw onderwerp aan en vul de muisinformatie in. Verwarm vervolgens de elektrische deken voor en bedek deze met chirurgische handdoeken.Plaats de verdoofde muis op het elektrische dekenplatform en bedek beide ogen onmiddellijk met medische natriumhyaluronaatgel. Plaats vervolgens een 100D-contactlens op het hoornvlies van de muis met de holle kant die de natriumhyaluronaatgel op het hoornvliesoppervlak raakt. Plaats de muis vervolgens op het kleine, constante temperatuur dierlijke platform van het cSLO-apparaat.Pas de hoek van de contactlens aan met een tang om de pupil in het midden van de lens te houden. Verfijn de aanpassingen aan het hoofd om het oog recht vooruit te laten kijken. Klik op de knop OCT, kies de muismodule en start het cSLO-programma.Gebruik vervolgens de bedieningshendel om de vooraf ingestelde lens langzaam naar de contactlens te bewegen. Breng verdere aanpassingen aan om het beeld van de voorste-achterste pool uit te lijnen en centreer deze op de oogzenuwkop. Start vervolgens het OCT-programma en klik op de voortgangsbalk omhoog en omlaag totdat de OCT-afbeelding verschijnt.Pas het minimumbereik aan tussen 0 en 20 en het maximale bereik tussen 40 en 60. Pas vervolgens de vooraf ingestelde lensafstand en positierichting aan totdat een ideaal OCT-beeld is verkregen. Selecteer de scanpositie door de standaardregel in de cSLO te verplaatsen.Klik vervolgens op gemiddelde om het cSLO- en OCT-afbeeldingssignaal te bedekken en klik op de opnameknop om de SLO OCT-afbeelding te verkrijgen. Verwijder na het experiment de 100D-contactlens en breng de levofloxacine-ooggel aan om het hoornvlies te beschermen. Voor retinale stratificatiecorrectie klikt u op belastingsonderzoek op de OCT-interface en roept u de OCT-afbeeldingen op vanuit een pop-upvenster.Dubbelklik vervolgens op de afbeelding in de mediacontainer om deze op het scherm weer te geven. Klik vervolgens op laagdetectie om automatische gelaagdheid op het netvlies te voltooien. Nadat u de scheidingslijn aan beide zijden van de laag hebt geselecteerd die is voorbereid voor analyse, klikt u op Laag bewerken om de afstand en het limietbereik aan te passen.Wijzig vervolgens de lijn door de rode cirkel te verplaatsen. Als u de dikte van het retinale lamineren wilt meten, klikt u op de knop metenmarkering en selecteert u de deellijn van de laag die moet worden geanalyseerd om de grens van de laag op de OCT-afbeelding weer te geven. Selecteer vervolgens Verbinden met laag en blijf onderweg verbonden.Selecteer vervolgens het gebied om de resultaten weer te geven en klik op de positie die moet worden geanalyseerd op de OCT-afbeelding om de meetlijn te laten verschijnen. Klik op de volgende kolom voor volgende metingen en om de vorige gegevens weer te geven. Als u de volledige dikte van het netvlies wilt meten, selecteert u lijn één en regel zeven in de lijst in de rechterbovenhoek.Meet vervolgens, vanaf het verschijnen van de retinale structuur aan de rand van de optische papilla, vier waarden met intervallen van 200 micrometer op de horizontale liniaal. OCT-beelden van C57BL/6-muizen toonden verschillende retinale lagen met duidelijke afbakening. Vldlr knock-out muizen daarentegen vertoonden abnormale hyperreflectieve laesies.De OCT-beelden toonden enkele middelste reflecterende banden op de retinale oppervlakken van de Vldlr knock-out muizen. Deze banden hechtten zich aan het retinale vat en waren consistent met de OCT-kenmerken van onvolledig glasvochtloslating. Eén hyperreflecterende laesie verscheen op de subretinale ruimte en verspreidde zich naar de buitenste nucleaire laag, maar brak niet door de buitenste plexiforme laag.Het OCT-uiterlijk van deze laesie was consistent met pathologische bevindingen. De pathologische sectie toonde aan dat neovascularisatie door de retinale pigmentepitheellaag, fotoreceptor binnen-buitenste segmenten en het externe beperkende membraan brak, waardoor de buitenste nucleaire laag werd binnengedrongen, maar niet de buitenste plexiforme laag. Een andere band van hyperreflectieve laesie, gelegen in de subretinale ruimte, betrof niet de buitenste nucleaire laag.In overeenstemming met pathologische bevindingen brak deze subretinale neovascularisatie niet door het externe beperkende membraan. Het vergelijken van de retinale dikte van het rechteroog in de temporale, nasale, superieure en inferieure richtingen van de achterste polaire tussen de twee groepen onthulde dat de retinale dikte van Vldlr knock-out muizen significant lager was dan die van de C57BL / 6J-muizen. Plaats bij het uitvoeren van het protocol een 100D-contactlens op het hoornvlies en pas vervolgens de beeldpositie aan.Selecteer de scanlocatie en leg de afbeelding over elkaar voordat u gaat fotograferen. Volgens deze procedure is anterieur segment OCT haalbaar, waarbij de afstand tussen de vooraf ingestelde lens en het hoornvlies moet worden gewijzigd. Het kan het hoornvlies, de voorste kamer, de iris, het ciliaire lichaam en de lens laten zien.Deze techniek biedt een belangrijk hulpmiddel voor retinopathieonderzoek in kleine diermodellen, waardoor niet-invasieve detectie en meting van retinopathie in fundamenteel onderzoek wordt bevorderd.

Research

JoVE Journal

Medicine

Doppler Optical Coherence Tomography of Retinal Circulation

Doppler Optical Coherence Tomography van het netvlies Circulation

Noncontact retinal blood flow measurements are performed with a Fourier domain optical coherence tomography (OCT) system using a circumpapillary double ...

Near Infrared Optical Projection Tomography for Assessments of &beta;-cell Mass Distribution in Diabetes Research

Near Infrared Optical Projection Tomography for Assessments of ÃƒÅ½Ã‚Â²-cell Mass Distribution in Diabetes Research

Nabij Infrarood Optische projectie Tomografie voor de beoordeling van β-cel Massa Distributie in Diabetes Research

By adapting OPT to include the capability of imaging in the near infrared (NIR) spectrum, we here illustrate the possibility to image larger bodies of ...

Generation and 3-Dimensional Quantitation of Arterial Lesions in Mice Using Optical Projection Tomography

Generatie en 3-dimensionale kwantificering van arteriële laesies in Muizen met behulp van optische projectie Tomografie

The generation and analysis of vascular lesions in appropriate animal models is a cornerstone of research into cardiovascular disease, generating ...

In Vivo, Percutaneous, Needle Based, Optical Coherence Tomography of Renal Masses

In Vivo, Percutaneous, Needle Based, Optical Coherence Tomography of Renal Masses

In Vivo, percutane, Naald Based, Optical Coherence Tomography van niertumoren

Optical coherence tomography (OCT) is the optical equivalent of ultrasound imaging, based on the backscattering of near infrared light. OCT provides real ...

A Neonatal Mouse Spinal Cord Compression Injury Model

Een Neonatale Mouse Spinal Cord Injury Compressie Model

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal ...

Diffuse Optical Spectroscopy for the Quantitative Assessment of Acute Ionizing Radiation Induced Skin Toxicity Using a Mouse Model

Diffuse optische spectroscopie voor de kwantitatieve beoordeling van Acute ioniserende straling veroorzaakte Huidtoxiciteit Met behulp van een muismodel

Acute skin toxicities from ionizing radiation (IR) are a common side effect from therapeutic courses of external beam radiation therapy (RT) and ...

Using Micro-computed Tomography for the Assessment of Tumor Development and Follow-up of Response to Treatment in a Mouse Model of Lung Cancer

Met behulp van micro-computertomografie voor de evaluatie van de ontwikkeling van tumoren en follow-up van de respons op de behandeling in een muismodel van longkanker

Lung cancer is the most lethal cancer in the world. Intensive research is ongoing worldwide to identify new therapies for lung cancer. Several mouse ...

Ultrahigh Resolution Mouse Optical Coherence Tomography to Aid Intraocular Injection in Retinal Gene Therapy Research

Met resolutie muis optische coherentie tomografie steun intraoculaire injectie in het netvlies gentherapie onderzoek

HR-SD-OCT is utilized to monitor the progression of photoreceptor degeneration in live mouse models, assess the delivery of therapeutic agents into the ...

In Vivo Imaging of Cx3cr1gfp/gfp Reporter Mice with Spectral-domain Optical Coherence Tomography and Scanning Laser Ophthalmoscopy

In Vivo Imaging of Cx3cr1gfp/gfp Reporter Mice with Spectral-domain Optical Coherence Tomography and Scanning Laser Ophthalmoscopy

In Vivo Beeldvorming van Cx3cr1gfp/gfp Reporter muizen met spectrale domein optische coherentie tomografie en scannen Laser Ophthalmoscopy

Spectral domain optical coherence tomography (SD-OCT) and scanning laser ophthalmoscopy (SLO) are extensively used in experimental ophthalmology. In the ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Isometrische Contractility meting van de muis mesenterische slagader met behulp van draad Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...