Name: application of optical coherence tomography to a mouse model of retinopathy
Uploaded: 2022-01-12T14:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy at JoVE.com

Fonte del progetto: Fondazione di scienze naturali della provincia del Guangdong (2018A0303130306). Gli autori desiderano ringraziare l'Ophthalmic Research Laboratory, il Joint Shantou International Eye Center della Shantou University e la Chinese University di Hong Kong per i finanziamenti e i materiali.

Le operazioni sono state eseguite a seguito della Dichiarazione sull'uso degli animali nella ricerca oftalmica e visiva dell'Associazione per la ricerca in visione e oftalmologia. Il progetto sperimentale è stato approvato dal Comitato etico istituzionale per gli animali (Medical Ethics Committee of JSIEC, EC 20171213(4)-P01). In questo studio sono stati utilizzati topi C57BL / 6J di due mesi e topi knockout Vldlr . C'erano 7 topi in ogni gruppo, tutti femmine e pesavano da 20 g a 24 g.
<p class="jove_title...

<ol>
	<li>Frombach, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serine+protease-mediated+cutaneous+inflammation:+characterization+of+an+ex+vivo+skin+model+for+the+assessment+of+dexamethasone-loaded+core+multishell-nanocarriers.">Serine protease-mediated cutaneous inflammation: characterization of an ex vivo skin model for the assessment of dexamethasone-loaded core multishell-nanocarriers.</a> Pharmaceutics. 12 (9), 862 (2020).</li><li>Osiac, E., S&#259;ftoiu, A., Gheonea, D. I., Mandrila, I., Angelescu, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+and+Doppler+optical+coherence+tomography+in+the+gastrointestinal+tract.">Optical coherence tomography and Doppler optical coherence tomography in the gastrointestinal tract.</a> Journal of Gastroenterology. 17 (1), 15-20 (2011).</li><li>Xiong, Y. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnostic+accuracy+of+optical+coherence+tomography+for+bladder+cancer:+A+systematic+review+and+meta-analysis.">Diagnostic accuracy of optical coherence tomography for bladder cancer: A systematic review and meta-analysis.</a> Photodiagnosis and Photodynamic Therapy. 27, 298-304 (2019).</li><li>Andrews, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+of+the+aging+kidney.">Optical coherence tomography of the aging kidney.</a> &amp; Clinical Transplantation. 14 (6), 617-622 (2016).</li><li>Terashima, M., Kaneda, H., Suzuki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+optical+coherence+tomography+in+coronary+intervention.">The role of optical coherence tomography in coronary intervention.</a> The Korean Journal of Internal Medicine. 27 (1), 1-12 (2012).</li><li>Avital, Y., Madar, A., Arnon, S., Koifman, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+coronary+calcifications+in+optical+coherence+tomography+imaging+using+deep+learning.">Identification of coronary calcifications in optical coherence tomography imaging using deep learning.</a> Scientific Reports. 11 (1), 11269 (2021).</li><li>Huang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography.">Optical coherence tomography.</a> Science. 254 (5035), 1178-1181 (1991).</li><li>Tsai, T. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+in+gastroenterology:+a+review+and+future+outlook.">Optical coherence tomography in gastroenterology: a review and future outlook.</a> Journal of Biomedical Optics. 22 (12), 1-17 (2017).</li><li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+optical+intensity+on+optical+coherence+tomography+and+retinal+ischemia+in+branch+retinal+vein+occlusion.">Relationship between optical intensity on optical coherence tomography and retinal ischemia in branch retinal vein occlusion.</a> Scientific Reports. 8 (1), 9626 (2018).</li><li>Chen, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+analysis+of+retinal+layer+optical+intensities+on+three-dimensional+optical+coherence+tomography.">Quantitative analysis of retinal layer optical intensities on three-dimensional optical coherence tomography.</a> Investigative Opthalmology &amp; Visual Science. 54 (10), 6846-6851 (2013).</li><li>Cruz-Herranz, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+retinal+changes+with+optical+coherence+tomography+predicts+neuronal+loss+in+experimental+autoimmune+encephalomyelitis.">Monitoring retinal changes with optical coherence tomography predicts neuronal loss in experimental autoimmune encephalomyelitis.</a> Journal of Neuroinflammation. 16 (1), 203 (2019).</li><li>Podoleanu, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography.">Optical coherence tomography.</a> Journal of Microscopy. 247 (3), 209-219 (2012).</li><li>Augustin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography+findings+in+the+retinas+of+SOD1+knockout+mice.">Optical coherence tomography findings in the retinas of SOD1 knockout mice.</a> Translational Vision Science &amp; Technology. 9 (4), 15 (2020).</li><li>Berger, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spectral-domain+optical+coherence+tomography+of+the+rodent+eye:+highlighting+layers+of+the+outer+retina+using+signal+averaging+and+comparison+with+histology.">Spectral-domain optical coherence tomography of the rodent eye: highlighting layers of the outer retina using signal averaging and comparison with histology.</a> PLoS One. 9 (5), 96494 (2014).</li><li>Burns, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+developments+in+murine+imaging+for+assessing+photoreceptor+degeneration+in+vivo.">New developments in murine imaging for assessing photoreceptor degeneration in vivo.</a> Advances in Experimental Medicine &amp; Biology. 854, 269-275 (2016).</li><li>Jagodzinska, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography:+imaging+mouse+retinal+ganglion+cells+in+vivo.">Optical coherence tomography: imaging mouse retinal ganglion cells in vivo.</a> Journal of Visualized Experiments: Jove. (127), e55865 (2017).</li><li>Kocaoglu, O. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+fundus+imaging+and+optical+coherence+tomography+of+the+mouse+retina.">Simultaneous fundus imaging and optical coherence tomography of the mouse retina.</a> Investigative Opthalmology &amp; Visual Science. 48 (3), 1283-1289 (2007).</li><li>Tode, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermal+stimulation+of+the+retina+reduces+Bruch's+membrane+thickness+in+age+related+macular+degeneration+mouse+models.">Thermal stimulation of the retina reduces Bruch's membrane thickness in age related macular degeneration mouse models.</a> Translational Vision Science &amp; Technology. 7 (3), 2 (2018).</li><li>Wang, R., Jiang, C., Ma, J., Young, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+morphological+changes+in+the+retina+of+rhodopsin-/-+mice+with+spectral+domain+optical+coherence+tomography.">Monitoring morphological changes in the retina of rhodopsin-/- mice with spectral domain optical coherence tomography.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 53 (7), 3967-3972 (2012).</li><li>Xie, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+spectral-domain+optical+coherence+tomographic+analysis+of+Rdh5-/-+mice+retina.">A spectral-domain optical coherence tomographic analysis of Rdh5-/- mice retina.</a> PLoS ONE. 15 (4), 0231220 (2020).</li><li>Li, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+imaging+by+optical+coherence+tomography+to+monitor+retinal+degeneration+in+the+mouse.">Noninvasive imaging by optical coherence tomography to monitor retinal degeneration in the mouse.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 42 (12), 2981-2989 (2001).</li><li>Horio, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progressive+change+of+optical+coherence+tomography+scans+in+retinal+degeneration+slow+mice.">Progressive change of optical coherence tomography scans in retinal degeneration slow mice.</a> Archives of Ophthalmology. 119 (9), 1329-1332 (2001).</li><li>Hu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+VLDLR+in+the+retina+and+evolution+of+subretinal+neovascularization+in+the+knockout+mouse+model's+retinal+angiomatous+proliferation.">Expression of VLDLR in the retina and evolution of subretinal neovascularization in the knockout mouse model's retinal angiomatous proliferation.</a> Investigative Opthalmology &amp; Visual Science. 49 (1), 407-415 (2008).</li><li>Wyne, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expression+of+the+VLDL+receptor+in+endothelial+cells.">Expression of the VLDL receptor in endothelial cells.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 16 (3), 407-415 (1996).</li><li>Augustin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+characterization+of+spontaneous+retinal+neovascularization+in+the+mouse+eye+by+multifunctional+optical+coherence+tomography.">In vivo characterization of spontaneous retinal neovascularization in the mouse eye by multifunctional optical coherence tomography.</a> Investigative Opthalmology &amp; Visual Science. 59 (5), 2054-2068 (2018).</li><li>Fang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fundus+autofluorescence,+spectral-domain+optical+coherence+tomography,+and+histology+correlations+in+a+Stargardt+disease+mouse+model.">Fundus autofluorescence, spectral-domain optical coherence tomography, and histology correlations in a Stargardt disease mouse model.</a> The FASEB Journal. 34 (3), 3693-3714 (2020).</li></ol>

In questo studio, l'imaging OCT utilizzando un sistema di imaging retinico di piccoli animali è stato applicato per valutare i cambiamenti retinici nei topi knockout Vldlr , che dimostrano distacco posteriore del vitreo incompleto, neovascolarizzazione sottoretinica e assottigliamento dello spessore retinico. OCT è un metodo di imaging non invasivo per esaminare la condizione della retina in vivo. La maggior parte dei dispositivi OCT sono progettati per l'esame oculistico umano. Le dimensioni dell'app...

La tomografia a coerenza ottica (OCT) è una tecnica di imaging in grado di fornire in vivo l'alta risoluzione e l'imaging trasversale per il tessuto 1,2,3,4,5,6,7,8, in particolare per l'esame non invasivo nella retina 9,10,11,12 . Può anche essere utilizzato per quantificare alcuni importanti biomarcatori, come lo spessore della retina e lo spessore dello strato di fibre nervose retiniche. Il principio dell'OCT è la riflettometria a coerenza ottica, che ottiene informazioni trasversali sui tessuti dalla coerenza della luce riflessa da un campione e la converte in forma grafica o digitale attraverso un sistema informatico7. L'OCT è ampiamente utilizzato nelle cliniche oftalmologiche come strumento essenziale per la diagnosi, il follow-up e la gestione per i pazienti con disturbi della retina. Può anche fornire informazioni sulla patogenesi delle malattie della retina.
Oltre alle applicazioni cliniche, l'OCT è stato utilizzato anche negli studi sugli animali. Sebbene la patologia sia il gold standard della caratterizzazione morfologica, l'OCT ha il vantaggio dell'imaging non invasivo in vivo e del follow-up longitudinale. Inoltre, è stato dimostrato che l'OCT è ben correlato con l'istopatologia nei modelli animali di retinopatia 11,13,14,15,16,17,18,19,20. Il topo è l'animale più comunemente usato negli studi biomedici. Tuttavia, i suoi piccoli bulbi oculari rappresentano una sfida tecnica per condurre l'imaging OCT nei topi.
Rispetto all'OCT utilizzato per la prima volta per l'imaging retinico nei topi21,22, l'OCT nei piccoli animali è stato ora ottimizzato rispetto ai sistemi hardware e software. Ad esempio, OCT, in combinazione con il tracker, riduce significativamente il rapporto segnale-rumore; Gli aggiornamenti del sistema software OCT consentono di rilevare automaticamente più strati retinici; e il proiettore DLP integrato aiuta a ridurre gli artefatti di movimento.
Il recettore della lipoproteina a bassissima densità (Vldlr) è una proteina transmembrana nelle cellule endoteliali. È espresso sulle cellule endoteliali vascolari retiniche, sulle cellule epiteliali pigmentate retiniche e intorno alla membrana limitante esterna23,24. La neovascolarizzazione sottoretinica è il fenotipo dei topi knockout Vldlr 23. Pertanto, i topi knockout Vldlr vengono utilizzati per studiare la patogenesi e la potenziale terapia della neovascolarizzazione sottoretinica. Questo articolo dimostra l'applicazione dell'imaging OCT per rilevare lesioni retiniche nei topi knockout Vldlr, sperando di fornire qualche riferimento tecnico per la ricerca sulla retinopatia in piccoli modelli animali.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>100-Dpt contact lens</td>
			<td>Volk Optical,Inc, Mentor, OH</td>
			<td></td>
			<td>Accessory belonging to the RETImap</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double aspheric 60-Dpt glass lens</td>
			<td>Volk Optical,Inc, Mentor, OH</td>
			<td></td>
			<td>Accessory belonging to the RETImap</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electric heating blanket</td>
			<td>POPOCOLA</td>
			<td>CW-DRT-01</td>
			<td>50 x 35 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Injection syringe (1 mL)</td>
			<td>Kaile</td>
			<td></td>
			<td>0.45 x 16RWLB</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Levofloxacin Hydrochloride Eye Gel</td>
			<td>EBE PHARMACEUTICAL Co.LTD</td>
			<td></td>
			<td>5 g: 0.015 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical sodium hyaluronate gel</td>
			<td>Alcon</td>
			<td>16H01E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microliter syringes</td>
			<td>Shanghai high pigeon industry and trade co., LTD</td>
			<td>Q31/0113000236C001-2017</td>
			<td>50 &#181;L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Povidone iodine solution</td>
			<td>Guangdong medihealth pharmaceutical Co.,LTD</td>
			<td></td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RETImap</td>
			<td>ROLAND CONSULT</td>
			<td>19-99_50-2.1_1.2E</td>
			<td>cSLO/ERG/VEP/FA/OCT/GFP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Small animal ear studs</td>
			<td>OSMO POCKET OT110</td>
			<td>INS1005-1S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tropicamide Phenylephrine Eye Drops</td>
			<td>Santen Pharmaceutical Co.,LTD</td>
			<td></td>
			<td>5 mg/mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>X1251-5G</td>
			<td>5 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zoletil 50</td>
			<td>Virbac.S.A</td>
			<td>7FRPA</td>
			<td>Tiletamine 125 mg + Zolazepam 125 mg</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

application of optical coherence tomography to a mouse model of retinopathy

La tomografia a coerenza ottica (OCT) offre un metodo non invasivo per la diagnosi di retinopatia. La macchina OCT può acquisire immagini della sezione trasversale retinica da cui è possibile calcolare lo spessore della retina. Sebbene l'OCT sia ampiamente utilizzato nella pratica clinica, la sua applicazione nella ricerca di base non è così prevalente, specialmente nei piccoli animali come i topi. A causa delle piccole dimensioni dei loro bulbi oculari, è difficile condurre esami di imaging del fondo nei topi. Pertanto, è necessario un sistema di imaging retinico specializzato per ospitare l'imaging OCT su piccoli animali. Questo articolo illustra un sistema specifico per i piccoli animali per le procedure di esame dello PTOM e un metodo dettagliato per l'analisi delle immagini. Vengono presentati i risultati dell'esame OCT retinico di topi knockout a bassissima densità del recettore delle lipoproteine (Vldlr) e topi C57BL/6J. Le immagini OCT dei topi C57BL / 6J hanno mostrato strati retinici, mentre quelle di topi knockout Vldlr hanno mostrato neovascolarizzazione sottoretinica e assottigliamento della retina. In sintesi, l'esame OCT potrebbe facilitare il rilevamento non invasivo e la misurazione della retinopatia nei modelli murini.

Grazie alle scansioni ad alta risoluzione dell'OCT, è possibile osservare gli strati della retina del topo e identificare riflessi anomali e le loro posizioni esatte. Le immagini OCT retiniche di topi knockout Vldlr e topi C57BL / 6J sono state confrontate in questo studio. Le immagini OCT di tutti i topi C57BL / 6J hanno mostrato vari strati retinici con riflettività diversa e la demarcazione era chiara (Figura 8D). Al contrario, tutti i topi knockout di Vldlr hanno most...

Watch this Scientific Journal Video about Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy at JoVE.com

Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy

Qui, descriviamo una tecnica di imaging in vivo che utilizza la tomografia a coerenza ottica per facilitare la diagnosi e la misurazione quantitativa della retinopatia nei topi.

Applicazione della tomografia a coerenza ottica a un modello murino di retinopatia

Optical coherence tomography (OCT) offers a noninvasive method for the diagnosis of retinopathy. The OCT machine can capture retinal crosssectional images ...

La tomografia a coerenza ottica è ampiamente utilizzata nella diagnosi clinica di diverse malattie della retina, ma è ancora difficile da applicare nei modelli murini. Questo protocollo descrive come gestire la tecnica OCT negli animali. Questa tecnologia può essere applicata ad animali con diverse dimensioni del bulbo oculare.Consente l'imaging della sezione trasversale retinica non invasivo, ad alta risoluzione e in tempo reale, insieme a misurazioni quantitative dello spessore della retina. L'OCT aiuta nella diagnosi della retinopatia identificando le caratteristiche della lesione come la posizione, la gamma, la forma e le dimensioni delle lesioni, nonché tutte le sospette anomalie retiniche come la neovascolarizzazione retinica. Questo protocollo è applicabile agli studi sugli animali o alle malattie del fondo oculare, comprese le malattie della retina.Prima di iniziare la procedura, essere preparati e seguire il protocollo passo dopo passo. Esegui l'esperimento quando l'animale è anestetizzato. Si dovrebbe essere in grado di ottenere immagini OCT di buona qualità dopo un po 'di pratica.Per iniziare, accendere il computer e avviare il software. Fare clic sul pulsante del programma di test per completare il programma di test. Quindi, accendere il termostato e preriscaldarlo a 37 gradi Celsius.Dopo il test del programma, avviare la procedura del modulo dello Strumento di personalizzazione di Office. Crea un nuovo soggetto e inserisci le informazioni del mouse. Quindi, preriscaldare la coperta elettrica e coprirla con asciugamani chirurgici.Posizionare il topo anestetizzato sulla piattaforma della coperta elettrica e rivestire immediatamente entrambi gli occhi con gel ialuronato di sodio medico. Quindi, posizionare una lente a contatto 100D sulla cornea del topo con il lato concavo che tocca il gel ialuronato di sodio sulla superficie corneale. Quindi, posizionare il mouse sulla piccola piattaforma animale a temperatura costante del dispositivo cSLO.Regolare l'angolo della lente a contatto con una pinza per mantenere la pupilla al centro della lente. Perfeziona le regolazioni della testa per rendere l'occhio rivolto dritto in avanti. Fare clic sul pulsante Strumento di personalizzazione di Office, scegliere il modulo mouse e avviare il programma cSLO.Quindi, utilizzare la leva operativa per spostare lentamente la lente preimpostata verso la lente a contatto. Effettuare ulteriori regolazioni per allineare l'immagine del polo antero-posteriore, centrandola sulla testa del nervo ottico. Avviare quindi il programma dello Strumento di personalizzazione di Office e fare clic sull'indicatore di stato verso l'alto e verso il basso finché non viene visualizzata l'immagine dello Strumento di personalizzazione di Office.Regolare l'intervallo minimo compreso tra 0 e 20 e l'intervallo massimo tra 40 e 60. Quindi, regolare la distanza dell'obiettivo preimpostata e la direzione della posizione fino a ottenere un'immagine OCT ideale. Selezionare la posizione di scansione spostando la linea standard nel cSLO.Quindi, fare clic su Media per sovrapporre il segnale dell'immagine cSLO e OCT e fare clic sul pulsante di scatto per acquisire l'immagine dello Strumento di personalizzazione di Office SLO. Dopo l'esperimento, rimuovere la lente a contatto 100D e applicare il gel per gli occhi levofloxacina per proteggere la cornea. Per la correzione della stratificazione retinica, fare clic su Esame carico nell'interfaccia dello Strumento di personalizzazione di Office e richiamare le immagini dello Strumento di personalizzazione di Office da una finestra popup.Quindi, fare doppio clic sull'immagine nel contenitore multimediale per visualizzarla sullo schermo. Quindi, fare clic sul rilevamento dello strato per completare la stratificazione automatica sulla retina. Dopo aver selezionato la linea di divisione su entrambi i lati del livello preparato per l'analisi, fate clic su Modifica livello per regolare la spaziatura e l'intervallo limite.Quindi, modificare la linea spostando il cerchio rosso. Per misurare lo spessore della laminazione retinica, fare clic sul pulsante indicatore di misura e selezionare la linea di demarcazione del livello da analizzare per visualizzare il limite del livello sull'immagine dello Strumento di personalizzazione di Office. Quindi, selezionate Connetti con layer e rimanete connessi in movimento.Quindi, selezionare l'area in cui visualizzare i risultati e fare clic sulla posizione da analizzare sull'immagine dello Strumento di personalizzazione di Office per visualizzare la linea di misurazione. Fare clic sulla colonna successiva per le misurazioni successive e per visualizzare i dati precedenti. Per misurare lo spessore completo della retina, selezionare la riga uno e la linea sette nell'elenco nell'angolo in alto a destra.Quindi, dall'aspetto della struttura retinica sul bordo della papilla ottica, misurare quattro valori a intervalli di distanza di 200 micrometri sul righello orizzontale. Le immagini OCT dei topi C57BL / 6 hanno mostrato vari strati retinici con una chiara demarcazione. Al contrario, i topi knockout Vldlr hanno mostrato lesioni iperriflettenti anormali.Le immagini OCT hanno mostrato alcune bande riflettenti centrali sulle superfici retiniche dei topi knockout Vldlr. Queste bande aderivano al vaso retinico, essendo coerenti con le caratteristiche OCT del distacco vitreo incompleto. Una lesione iperriflettente è apparsa sullo spazio sottoretinico e si è diffusa allo strato nucleare esterno, ma non ha sfondato lo strato plessiforme esterno.L'aspetto OCT di questa lesione era coerente con i risultati patologici. La sezione patologica ha mostrato che la neovascolarizzazione ha rotto lo strato di epitelio pigmentato retinico, i segmenti interno-esterno del fotorecettore e la membrana limitante esterna, invadendo lo strato nucleare esterno, ma non lo strato plessiforme esterno. Un'altra banda di lesione iperriflettente, situata nello spazio sottoretinico, non ha coinvolto lo strato nucleare esterno.Coerentemente con i risultati patologici, questa neovascolarizzazione sottoretinica non ha sfondato la membrana limitante esterna. Il confronto dello spessore retinico dell'occhio destro nelle direzioni temporale, nasale, superiore e inferiore del polare posteriore tra i due gruppi ha rivelato che lo spessore retinico dei topi knockout Vldlr era significativamente inferiore a quello dei topi C57BL / 6J. Quando si esegue il protocollo, posizionare correttamente una lente a contatto 100D sulla cornea, quindi regolare la posizione dell'immagine.Selezionare la posizione di scansione e sovrapporre l'immagine prima di scattare. Seguendo questa procedura, è possibile l'OCT del segmento anteriore, che richiede la modifica della distanza tra la lente preimpostata e la cornea. Può mostrare la cornea, la camera anteriore, l'iride, il corpo ciliare e la lente.Questa tecnica fornisce uno strumento importante per la ricerca sulla retinopatia in piccoli modelli animali, promuovendo il rilevamento non invasivo e la misurazione della retinopatia nella ricerca di base.

Research

JoVE Journal

Medicine

Doppler Optical Coherence Tomography of Retinal Circulation

Doppler Optical Coherence Tomography di circolazione retinica

Noncontact retinal blood flow measurements are performed with a Fourier domain optical coherence tomography (OCT) system using a circumpapillary double ...

Ricerca

Medicina

Near Infrared Optical Projection Tomography for Assessments of &beta;-cell Mass Distribution in Diabetes Research

Near Infrared Optical Projection Tomography for Assessments of ÃƒÅ½Ã‚Â²-cell Mass Distribution in Diabetes Research

Near Infrared Tomografia ottica di proiezione per la valutazione delle β-cellule Grande Distribuzione in Diabetes Research

By adapting OPT to include the capability of imaging in the near infrared (NIR) spectrum, we here illustrate the possibility to image larger bodies of ...

Generation and 3-Dimensional Quantitation of Arterial Lesions in Mice Using Optical Projection Tomography

Generazione e quantificazione 3-Dimensional di arteriosa lesioni nei topi mediante tomografia ottica di proiezione

The generation and analysis of vascular lesions in appropriate animal models is a cornerstone of research into cardiovascular disease, generating ...

In Vivo, Percutaneous, Needle Based, Optical Coherence Tomography of Renal Masses

In Vivo, Percutaneous, Needle Based, Optical Coherence Tomography of Renal Masses

In Vivo, percutanea, Ago Based, Optical Coherence Tomography di masse renali

Optical coherence tomography (OCT) is the optical equivalent of ultrasound imaging, based on the backscattering of near infrared light. OCT provides real ...

A Neonatal Mouse Spinal Cord Compression Injury Model

Un neonatale mouse Spinal Cord Injury compressione Modello

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal ...

Diffuse Optical Spectroscopy for the Quantitative Assessment of Acute Ionizing Radiation Induced Skin Toxicity Using a Mouse Model

Diffuse spettroscopia ottica per la valutazione quantitativa di acuta radiazioni ionizzanti tossicità cutanee indotte Utilizzando un modello di topo

Acute skin toxicities from ionizing radiation (IR) are a common side effect from therapeutic courses of external beam radiation therapy (RT) and ...

Using Micro-computed Tomography for the Assessment of Tumor Development and Follow-up of Response to Treatment in a Mouse Model of Lung Cancer

Utilizzando la tomografia micro-computerizzata per la valutazione di sviluppo del tumore e follow-up di risposta al trattamento in un modello murino di cancro ai polmoni

Lung cancer is the most lethal cancer in the world. Intensive research is ongoing worldwide to identify new therapies for lung cancer. Several mouse ...

Ultrahigh Resolution Mouse Optical Coherence Tomography to Aid Intraocular Injection in Retinal Gene Therapy Research

Tomografia ottica di coerenza di risoluzione ultraelevata Mouse per aiutare l'iniezione intraoculare nella ricerca retinica terapia genica

HR-SD-OCT is utilized to monitor the progression of photoreceptor degeneration in live mouse models, assess the delivery of therapeutic agents into the ...

In Vivo Imaging of Cx3cr1gfp/gfp Reporter Mice with Spectral-domain Optical Coherence Tomography and Scanning Laser Ophthalmoscopy

In Vivo Imaging of Cx3cr1gfp/gfp Reporter Mice with Spectral-domain Optical Coherence Tomography and Scanning Laser Ophthalmoscopy

In Vivo Imaging dei topi Reporter Cx3cr1gfp/gfp con tomografia a coerenza ottica Spectral-domain e scansione Laser oftalmoscopia

Spectral domain optical coherence tomography (SD-OCT) and scanning laser ophthalmoscopy (SLO) are extensively used in experimental ophthalmology. In the ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Misurazione di contrattilità isometrica dell'arteria mesenterica Mouse con filo Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...